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不同受精方法对南阳牛卵母细胞体外受精的影响
1
作者 胡文举 王新庄 +5 位作者 张英汉 王居强 王涛 李金辉 丁向彬 郑培栋 《中国牛业科学》 2006年第2期15-17,共3页
本研究探讨了用直接离心法、上浮法和perco ll密度梯度离心法等3种方法处理精子对南阳牛体外受精效果的影响。结果表明3种方法处理的精子卵裂率差异不显著(84.2%vs84.5%vs83.6%),但是桑囊胚率perco ll密度梯度离心法和上浮法显著高于直... 本研究探讨了用直接离心法、上浮法和perco ll密度梯度离心法等3种方法处理精子对南阳牛体外受精效果的影响。结果表明3种方法处理的精子卵裂率差异不显著(84.2%vs84.5%vs83.6%),但是桑囊胚率perco ll密度梯度离心法和上浮法显著高于直接离心法(17.1%、16.9%vs13.8%)。同时比较了微滴法和微细管法对体外受精效果的影响,表明两种方法受精后的卵裂率差异不显著(84.1%vs81.1%),桑囊胚率微细管法显著高于微滴法(17.8%vs13.4%)。 展开更多
关键词 南阳牛 卵母细胞 体外成熟 体外受精 卵裂率
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培养介质、卵丘细胞和卵泡直径对猪卵母细胞体外成熟的影响 被引量：34
2
作者 王海 曾申明 +2 位作者 朱士恩 吴中红 张忠诚 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2002年第5期15-17,共3页
A类卵母细胞在mTCM 199、NCSU2 3和NCSU37体系中培养 4 4～ 5 2小时后 ,成熟率分别为 76 .1%、78.1%和 6 5 .2 %。前两者差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,但显著高于后者 (P <0 .0 5 )。卵母细胞在添加eCG和hCG的NCSU2 3体系中的成熟率 ... A类卵母细胞在mTCM 199、NCSU2 3和NCSU37体系中培养 4 4～ 5 2小时后 ,成熟率分别为 76 .1%、78.1%和 6 5 .2 %。前两者差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,但显著高于后者 (P <0 .0 5 )。卵母细胞在添加eCG和hCG的NCSU2 3体系中的成熟率 (75 .6 % )明显高于添加FSH的LH和成熟率 (6 5 .2 % ) (P <0 .0 5 )。A、B、C三类卵母细胞在NCSU2 3的成熟率分别为 73.3%、6 0 .4 %和 11.0 % ,三者间差异显著 (P <0 .0 5 )。大 (ф >6mm)、中 (ф =3～ 6mm)和小 (ф <3mm)三种卵泡中的卵母细胞在NCSU2 3中培养后 ,成熟率分别为 5 6 .2 % ,78.1%和 5 1.9% ,中等卵泡中卵母胞的体外成熟率显著高于其他两组 (P <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 介质 卵丘细胞 卵泡 直径 猪 卵母细胞 体外成熟
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人未成熟卵母细胞体外培养成熟、受精及胚胎移植 被引量：36
3
作者 刘嘉茵 钱云 +2 位作者 冒韵东 丁卫 杨乃明 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期230-232,i002,共4页
目的　应用卵母细胞体外成熟 (IVM)技术帮助卵泡成熟障碍的不孕症患者获得妊娠及分娩。方法　接受未成熟卵IVM技术治疗者 30例 35个周期 ,其中多囊卵巢综合征 14例 ,有卵巢过度刺激综合征病史 6例 ,体外受精和胚胎移植 (IVF ET)周期中... 目的　应用卵母细胞体外成熟 (IVM)技术帮助卵泡成熟障碍的不孕症患者获得妊娠及分娩。方法　接受未成熟卵IVM技术治疗者 30例 35个周期 ,其中多囊卵巢综合征 14例 ,有卵巢过度刺激综合征病史 6例 ,体外受精和胚胎移植 (IVF ET)周期中卵巢反应不良患者 10例。设计卵巢刺激方案 ,采用含人成熟卵泡液的IVM培养液 ,建立未成熟卵母细胞的体外培养方法。结果　 35个周期共取得未成熟卵母细胞 2 0 3个 ,平均每个周期 5 8个。培养后有 15 6个卵母细胞排出第一极体 ,IVM率 76 8% (15 6 2 0 3) ;在卵胞浆单精子显微注射 (ICSI) 12～ 18h后观察原核 ,正常受精率为 76 9%(12 0 15 6 ) ;共有移植周期 33个 ,获 8例临床妊娠 ,妊娠率 2 4 % (8 33) ;有 5例共 7个婴儿出生。结论　IVM对一些卵泡发育和成熟障碍 ,特别是顽固性多囊卵巢综合征患者 ,是一种有效的辅助生育措施。人成熟卵泡液含有理想的自然促卵母细胞成熟的成分。 展开更多
关键词 人未成熟卵母细胞 体外培养 受精 胚胎移植 卵泡成熟障碍
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山羊卵泡卵母细胞体外成熟的研究 被引量：29
4
作者 张涌 刘泽隆 李裕强 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第1期14-18,共5页
研究了ＦＣＳ，１７β－Ｅ２，ＦＳＨ，ＬＨ对山羊卵泡卵母细胞成熟的作用，及培养时间对卵母细胞核和细胞质成熟的影响。结果表明，添加体积分数为１０％～１５％的ＦＣＳ，１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２，２０～５０ｍｇ·... 研究了ＦＣＳ，１７β－Ｅ２，ＦＳＨ，ＬＨ对山羊卵泡卵母细胞成熟的作用，及培养时间对卵母细胞核和细胞质成熟的影响。结果表明，添加体积分数为１０％～１５％的ＦＣＳ，１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２，２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ和１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ有利于提高卵母细胞核成熟，并放出第一极体。而成熟培养２０，２４ｈ的卵母细胞成熟率显著高于培养１６ｈ（Ｐ＜０．０５），核成熟后培养３～４ｈ有利于卵母细胞质成熟，对其后的受精、卵裂及胚胎的进一步发育有重大影响。且ＴＣＭ１９９＋质量分数为１０％～１５％的ＦＣＳ＋１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２＋１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ＋２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ是卵母细胞成熟的理想培养系统。 展开更多
关键词 山羊 体外成熟 卵母细胞
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生长因子对卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育的影响 被引量：20
5
作者 李兵兵 卢克焕 《广西农业大学学报》 CSCD 1994年第1期11-15,共5页
为了探讨生长因子（ＥＧＦ，ＰＤＧＦ）对牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响，本研究进行了两个实验。实验１：在卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ）中，将卵母细胞平均随机的放入表皮生长因子浓度为０，２．５，２５，５０μｇ／Ｌ... 为了探讨生长因子（ＥＧＦ，ＰＤＧＦ）对牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响，本研究进行了两个实验。实验１：在卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ）中，将卵母细胞平均随机的放入表皮生长因子浓度为０，２．５，２５，５０μｇ／Ｌ的成熟培养液和对照组中。实验２：在早期胚胎体外培养（ＩＶＣ）过程中，将受精卵平均随机分配入５个不同培养液的处理组：（１）ＴＣＭ－１９９＋１０％阉公牛血清（ＳＳ）；（２）ＴＣＭ－１９９＋ＥＧＦ＋ＰＤＧＦ；（３）ＴＣＭ－１９９＋ＥＧＦ；（４）ＴＣＭ－１９９＋ＰＤＧＦ；（５）ＴＣＭ－１９９＋无生长因子、其中ＥＧＦ：５０μｇ／Ｌ，ＰＤＧＦ：０．１μｇ／Ｌ。２，３，４，５组有０．１％ＰＶＡ和０．３％ＢＳＡ，并与颗粒细胞单层协同培养。卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）、体外受精（ＩＶＦ）和早期胚胎体外培养（ＩＶＣ）的方法与Ｌｕ等（１９８７）报道的相同。结果表明：浓度为５０μｇ／Ｌ的处理组分裂率与对照组无差异（８９．０％，９２．４％，Ｐ＞０．０５），而浓度为０，２．５，２５μｇ／Ｌ的处理组分裂率均显著低于对照组（７８．６％，８２．３％，８４．３％，Ｐ＜０．０５），在囊胚率和第７ｄ一级胚胎率上各组均无差异。ＥＧＦ在体? 展开更多
关键词 体外成熟 牛 卵母细胞 生长因子
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小鼠腔前卵泡卵母细胞的体外培养、体外成熟和体外受精研究 被引量：32
6
作者 李朝军 王斌 +2 位作者 范必勤 刘智慧 阮金度 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1997年第2期265-272,共8页
小鼠腔前卵泡在体外生长过程中，于培养液中添加血清，以及ＦＳＨ和胰岛素均对小鼠腔前卵泡的体外生长、体外成熟、体外受精起促进作用，其中以胰岛素的效果最为显著，腔前卵泡的体外成熟率和体外受精率可达６９．４％和８０．６％，但... 小鼠腔前卵泡在体外生长过程中，于培养液中添加血清，以及ＦＳＨ和胰岛素均对小鼠腔前卵泡的体外生长、体外成熟、体外受精起促进作用，其中以胰岛素的效果最为显著，腔前卵泡的体外成熟率和体外受精率可达６９．４％和８０．６％，但是体外受精后的体外发育率低于添加ＦＳＨ的试验组，表明ＦＳＨ有益于卵母细胞生长过程中细胞质的成熟。单层培养的卵巢颗粒细胞对腔前卵泡的体外生长也具有促进作用。将体外受精后发育至２—细胞的胚胎移植入受体鼠，胚胎可以正常着床发育。同时，卵母细胞的核仁和线粒体在培养过程中也发生相应的变化。 展开更多
关键词 腔前卵泡 体外成熟 体外受精 胚胎移植
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猪卵巢卵母细胞的收集和体外成熟培养 被引量：23
7
作者 陈晓宇 刘东 +5 位作者 李青旺 张德福 李震 于瑞嵩 刘惠莉 周宗清 《上海农业学报》 CSCD 2003年第2期75-78,共4页
对猪卵母细胞的采集和体外成熟培养 (IVM)以及培养液进行了研究。结果表明 ,在卵母细胞的采集过程中 ,机械破碎法平均每个卵巢所获得的A、B级细胞数 (分别为 7.0 0、2 0 .5 0 )显著多于抽吸法 (分别为1.48、2 .73 ) (P <0 .0 5 )。... 对猪卵母细胞的采集和体外成熟培养 (IVM)以及培养液进行了研究。结果表明 ,在卵母细胞的采集过程中 ,机械破碎法平均每个卵巢所获得的A、B级细胞数 (分别为 7.0 0、2 0 .5 0 )显著多于抽吸法 (分别为1.48、2 .73 ) (P <0 .0 5 )。但抽吸法中平均每个卵巢所用的时间 ( 1.0 5min)却显著少于机械破碎法 ( 15 .6min)(P <0 .0 5 )。NCSU 2 3与TCM 199两种培养液对卵母细胞体外成熟率无显著差异 ( P >0 .0 5 )。添加 10 μg/LrpGH比 2 0 μg/LrpGH更有利于卵母细胞的成熟 (分别为 71.5 %、45 .5 % ) ,两者差异显著 ( P <0 .0 5 ) 展开更多
关键词 猪 卵巢 卵母细胞 采集方法 体外成熟 细胞培养
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山羊卵巢卵母细胞的体外成熟 被引量：16
8
作者 刘灵 张涌 钱菊汾 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 1992年第S1期107-110,共4页
将234枚卵丘细胞层完整致密的卵母细胞分别培养于含有10％FCS的TCM_(199)+hCG(20μg/mL)、TCM_(199)+hCG+17β—E_2(1μg/mL)和Ham＇s F_(12)+hCG+17β—E_2三种培养基中,培养24—26h,其成熟率分别为55.6％(15/27)、79.4％(104/131)和7... 将234枚卵丘细胞层完整致密的卵母细胞分别培养于含有10％FCS的TCM_(199)+hCG(20μg/mL)、TCM_(199)+hCG+17β—E_2(1μg/mL)和Ham＇s F_(12)+hCG+17β—E_2三种培养基中,培养24—26h,其成熟率分别为55.6％(15/27)、79.4％(104/131)和76.3％(58/76)。结果表明:TCM_(199)和Ham＇s F_(12)都是山羊卵母细胞体外成熟的合适培养基;雌激素的存在对其成熟是有益的(P<0.05)。 展开更多
关键词 卵巢卵母细胞 体外成熟 山羊
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牛卵泡卵体外成熟及其受精能力的研究 被引量：8
9
作者 刘建民 刘健 +2 位作者 朱裕鼎 蒋世娥 张力 《兽医大学学报》 CSCD 1989年第4期356-362,共7页
本试验主要研究了牛卵泡卵体外成熟、体外受精及其受精过程的发生。从屠宰场收集800枚牛卵泡卵进行体外成熟培养,并用体外获能的精子体外受精。在用m-TCM199培养21、22、24、26、28h后,达到中期Ⅱ的卵母细胞比例分别为33.89％、74.16％... 本试验主要研究了牛卵泡卵体外成熟、体外受精及其受精过程的发生。从屠宰场收集800枚牛卵泡卵进行体外成熟培养,并用体外获能的精子体外受精。在用m-TCM199培养21、22、24、26、28h后,达到中期Ⅱ的卵母细胞比例分别为33.89％、74.16％、77.78％、86.67％、85.71％;25h后,如果继续培养,成熟的卵母细胞比例不再显著增加。卵母细胞的自身形态显著地影响其成熟效果,A、B、C级卵培养24h后分别有94.60％、55.43％、31.25％的卵母细胞达到中期Ⅱ。卵泡卵在体外滞留8h后,其成熟率(47.11％)明显地低于45min(77.92％)或4h(74.60％)。肝素和钙离子载体A 23187都能诱发牛精子获能,二者在受精效报上差异不显著(P>0.05),并且都有多精入卵现象发生。授精后6h精子进入卵内,精子入卵后2～3h头部膨大,6h后出现早期原核,最早发生卵裂是在授精后30h。 展开更多
关键词 牛 卵泡卵 体外受精 受精力
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牛卵泡卵母细胞体外成熟的研究 被引量：13
10
作者 刘泽隆 张涌 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第2期17-20,共4页
研究了ＦＣＳ，１７β－Ｅ２，ＦＳＨ，ＬＨ对牛卵泡卵母细胞成熟的作用及培养时间对卵母细胞核和细胞质成熟的影响。结果表明，添加体积分数为１０％～１５％的ＦＣＳ，１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２，２０～５０ｍｇ·Ｌ－... 研究了ＦＣＳ，１７β－Ｅ２，ＦＳＨ，ＬＨ对牛卵泡卵母细胞成熟的作用及培养时间对卵母细胞核和细胞质成熟的影响。结果表明，添加体积分数为１０％～１５％的ＦＣＳ，１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２，２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ和１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ有利于提高卵母细胞核成熟，放出第一极体。而成熟培养２０，２４ｈ的卵母细胞成熟率显著高于培养１６ｈ（Ｐ＜０．０５），核成熟后培养３～４ｈ有利于卵母细胞质成熟，对其后的受精、卵裂及胚胎的进一步发育有重大影响。且ＴＣＭ１９９＋质量分数１０％～１５％的ＦＣＳ＋１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２＋１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ＋２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ是卵母细胞成熟的理想培养系统。 展开更多
关键词 牛 卵母细胞 体外成熟 体外授精
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HA对牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎体外发育影响的研究 被引量：12
11
作者 赵红卫 陈学进 +4 位作者 李青旺 胡建宏 江中良 王立强 韩增胜 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第6期9-12,共4页
　在TCM-199中添加一些确定的辅助成分,探讨在无血清培养基中添加不同浓度HA对牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育的影响。结果表明,在卵母细胞成熟培养液(TCM-199-m)中添加4.0mg/mL的HA时,卵母细胞的成熟率和卵裂率与对照组(BSA)无... 　在TCM-199中添加一些确定的辅助成分,探讨在无血清培养基中添加不同浓度HA对牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育的影响。结果表明,在卵母细胞成熟培养液(TCM-199-m)中添加4.0mg/mL的HA时,卵母细胞的成熟率和卵裂率与对照组(BSA)无显著差异(P>0.05),分别为85.14%,83.57%和89.47%,85.24%,但显著高于其他各浓度组(P<0.05),表明HA在卵母细胞无血清成熟培养中可代替BSA。在受精卵体外培养液(TCM-199-c)中添加HA时,囊胚发育率与对照组(BSA)差异不显著(P>0.05),分别为27.64%和26.51%,但显著高于TCM-199-c组(P<0.05),表明HA对牛胚胎体外发育具有明显的促进作用,在无血清培养中可以代替BSA。当在TCM-199-c+HA中添加少量的BSA时,囊胚发育率(31.19%)显著高于其他各组(P<0.05),表明HA欲完全代替BSA还有不完善之处,有待进一步研究。 展开更多
关键词 牛 卵母细胞 体外成熟 早期胚胎 体外发育 HA 囊胚发育率 透明质酸 无血清培养
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猪卵巢卵母细胞的体外成熟和体外受精 被引量：10
12
作者 邓满齐 谢成侠 牛树理 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期1-7,共7页
将从屠宰母猪卵巢采得的卵母细胞-卵丘细胞复合体(Oocyte-cumulus Cell Complex.OCC)在含PMSG的M199培养40～44小时,卵丘细胞大部分扩散(86.4％)。48.1％(142/295)的卵母细胞排出第一极体(PBI)。将体外成熟的卵母细胞与体外获能精子授精... 将从屠宰母猪卵巢采得的卵母细胞-卵丘细胞复合体(Oocyte-cumulus Cell Complex.OCC)在含PMSG的M199培养40～44小时,卵丘细胞大部分扩散(86.4％)。48.1％(142/295)的卵母细胞排出第一极体(PBI)。将体外成熟的卵母细胞与体外获能精子授精后30～70小时,80.5％(103/128)的卵母细胞受精并可在体外发育到2～8细胞甚至桑椹胚。本文还对裸卵母细胞的体外成熟和体外受精进行了研究,对体外受精卵的早期发育作了观察。实验结果表明:PMSG对诱导卵丘细胞扩散及卵母细胞的全面成熟有重要作用,在OCC中的卵母细胞成熟率高于裸卵母细胞体外授精后8～10小时将受精卵放入改良KRB液培养可使卵裂比例明显提高。 展开更多
关键词 母猪 卵巢 卵母细胞 体外受精 猪
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不同超数排卵方法所获羔山羊卵母细胞体外成熟率及体外受精率的比较 被引量：10
13
作者 刘东军 张锁链 +4 位作者 王建国 何牧仁 阎文龙 张润武 旭日干 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 1996年第5期422-427,共6页
本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响，并将体外受精胚胎进行了移植，以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对２～４月龄羔山羊用ＦＳＨ、ＦＳＨ＋ＬＨ（静脉注射）和ＦＳＨ＋Ｌ... 本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响，并将体外受精胚胎进行了移植，以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对２～４月龄羔山羊用ＦＳＨ、ＦＳＨ＋ＬＨ（静脉注射）和ＦＳＨ＋ＬＨ（肌肉注射）三种方法进行超排处理，平均分别回收１６．０、２０．３和１５．０枚卵母细胞。将这些卵母细胞进行２０～２４ｈ的成熟培养后，其成熟率分别为４５．５％，４４．４％和７６．５％。成熟卵母细胞经体外受精，体外发育培养后其２～４细胞胚胎的发生率分别为５．６％ａ、６．７％和３１．７％ｂ（ｂ，ｖｓ，ａ，Ｐ＜０．０５）。将９枚２～４细胞期胚胎移植给６只受体母羊，结果有２只妊娠并产羔２只。 展开更多
关键词 超数排卵 体外成熟 体外受精 胚胎移植 山羊
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牛卵巢卵母细胞体外成熟的研究 被引量：13
14
作者 郭宪 陈学进 +3 位作者 叶荣 崔泰保 姚军 阎萍 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期503-507,共5页
研究了卵巢采卵方法以及卵巢保存温度和时间、性周期阶段、激素和培养基对牛卵母细胞体外成熟的影响.结果表明:从屠宰场获取的卵巢,先切剖或抽吸卵泡再切割卵巢,可显著提高可用卵母细胞数.卵巢保存时间在2 h以内最好,最长不超过6 h.30～... 研究了卵巢采卵方法以及卵巢保存温度和时间、性周期阶段、激素和培养基对牛卵母细胞体外成熟的影响.结果表明:从屠宰场获取的卵巢,先切剖或抽吸卵泡再切割卵巢,可显著提高可用卵母细胞数.卵巢保存时间在2 h以内最好,最长不超过6 h.30～39 ℃的生理盐水保存卵巢,卵母细胞的成熟率(63.9 %)和卵裂率(34.4 %)均显著高于2～8 ℃(16.7 %、0 %)和20～29 ℃(54.1 %、31.7 %)保存的.采集卵母细胞时卵巢所处性周期阶段(卵泡期、黄体期)对卵母细胞体外成熟的影响不大(成熟率分别为69.2 %、64.3 %).M199是牛卵母细胞体外成熟理想的培养基,M199 + 50 IU/mL LH+ 100 IU/mL FSH + 1μg/mL 17β-E2和M199 + 50 IU/mL GnRH+1 μg/mL 17β-E2都是牛卵母细胞体外成熟理想的培养系统(成熟率分别为69.4 %、67.5 %,卵裂率分别为35.4 %、42.7 %). 展开更多
关键词 牛 卵巢卵母细胞 体外成熟 体外受精
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不同成熟时间对牛卵母细胞发育及去核效率的影响 被引量：9
15
作者 施巧婷 黄俊成 +4 位作者 杨梅 张家新 王力虎 李辉 郭志勤 《草食家畜》 2001年第2期1-3,共3页
本文研究了不同成熟时间对牛卵母细胞的体外成熟、体外受精及后期的体外培养的影响和不同成熟时间的极体出现率。结果表明 ,牛卵母细胞在成熟 16h时极体出现率达 69.3%、分裂率为 54.7%、囊胚率仅为 6.2 5% ;而成熟 2 4h时极体出现率达 ... 本文研究了不同成熟时间对牛卵母细胞的体外成熟、体外受精及后期的体外培养的影响和不同成熟时间的极体出现率。结果表明 ,牛卵母细胞在成熟 16h时极体出现率达 69.3%、分裂率为 54.7%、囊胚率仅为 6.2 5% ;而成熟 2 4h时极体出现率达 76.9%、分裂率为 70 .0 %、囊胚率为2 7.7% ,差异均显著 (P <0 .0 5)。成熟 16h的卵母细胞刚刚排出第一极体 ,细胞核与极体非常近 ,此时去核率较高 ;而成熟 2 展开更多
关键词 牛 卵母细胞 体外成熟 第一极体 细胞发育 去核效率 成熟时间
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人类不成熟卵母细胞体外成熟影响的因素初探 被引量：10
16
作者 谢常青 林戈 +2 位作者 杨苏安 阳翎 卢光琇 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期156-160,共5页
为研究在自然月经周期中获得的人类不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体体外成熟培养条件 ,作者从手术切除的卵巢组织获取不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体 ,分别置于 90 % Ham' F-1 0 + 1 0 %灭活人血清 + FSH+ h CG(... 为研究在自然月经周期中获得的人类不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体体外成熟培养条件 ,作者从手术切除的卵巢组织获取不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体 ,分别置于 90 % Ham' F-1 0 + 1 0 %灭活人血清 + FSH+ h CG(模拟卵泡液 )与 5 0 %Ham' F-1 0 + 5 0 %人类成熟卵泡液中培养 48h。结果显示 ,卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体在两种体外成熟培养基中培养 48h后 ,成熟率分别为 41 .8%和 2 1 .1 % ,两者之间存在统计学差异 (P<0 .0 5 )。作者还比较了在前一种培养基中卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体和裸卵的体外成熟率 ,分别为 41 .8%和 7.6% ,两者间存在统计学差异 (P<0 .0 0 5 )。将获取的不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体按供者年龄分成 2 5～ 3 5岁组和 3 6～46岁组 ,比较此两组卵母细胞在前一种培养基中成熟率 ,分别为 5 7.1 %和 2 5 .0 % ,两者间在统计学上有显著性差异 (P<0 .0 1 )。结果提示 :不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体可在模拟卵泡液中培养成熟 ,优于 5 0 % Ham' F-1 0 + 5 0 %人类成熟卵泡液 ;卵丘细胞包裹对于卵母细胞体外成熟有重要作用 ;供卵者年龄可影响卵母细胞的体外成熟率。 展开更多
关键词 卵母细胞 放射冠 卵丘细胞复合体 体外成熟
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表皮生长因子和促性腺激素对人类卵母细胞体外成熟的影响 被引量：12
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作者 李媛 陈子江 +4 位作者 赵力新 李梅 马水英 王丽 胡京美 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期257-259,262,共4页
目的 :研究表皮生长因子 (EGF)和不同浓度促性腺激素 (Gn)对未成熟卵母细胞体外成熟的影响。　方法 :将EGF添加至卵母细胞培养液中 ,观察EGF Gn联合应用与单独使用Gn对卵母细胞体外成熟的影响 ;分别改变绒毛膜促性腺激素 (hCG)和卵泡刺... 目的 :研究表皮生长因子 (EGF)和不同浓度促性腺激素 (Gn)对未成熟卵母细胞体外成熟的影响。　方法 :将EGF添加至卵母细胞培养液中 ,观察EGF Gn联合应用与单独使用Gn对卵母细胞体外成熟的影响 ;分别改变绒毛膜促性腺激素 (hCG)和卵泡刺激素 (FSH)的浓度 ,观察不同浓度的hCG、FSH对卵母细胞体外成熟的影响。结果 :添加EGF可显著提高卵母细胞的体外成熟率 (P <0 .0 5 ) ;提高hCG和FSH的浓度对卵母细胞的培养、受精及卵裂无影响。　结论 :EGF可促进卵母细胞体外成熟 ,明显提高卵母细胞体外成熟率 ;提高Gn浓度对卵母细胞的培养无进一步的促进作用。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 表皮生长因子 促性腺激素
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EGF、EGFR在牦牛卵母细胞中的表达及对胚胎发育能力的作用 被引量：13
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作者 潘阳阳 李秦 +4 位作者 崔燕 樊江峰 杨琨 何俊峰 余四九 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2439-2448,共10页
【目的】探明表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及其受体(EGFR)在牦牛卵母细胞成熟过程中的表达动态,并且研究EGF对牦牛卵母细胞成熟的影响及可能的分子作用机制。【方法】采集牦牛卵巢,捡取质量较好的牦牛卵丘-卵母细胞复合体... 【目的】探明表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及其受体(EGFR)在牦牛卵母细胞成熟过程中的表达动态,并且研究EGF对牦牛卵母细胞成熟的影响及可能的分子作用机制。【方法】采集牦牛卵巢,捡取质量较好的牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs),进行体外成熟培养;分别处理未成熟和成熟的牦牛COCs,采用Real-time PCR和间接免疫荧光方法检测COCs成熟过程中EGF及EGFR在基因和蛋白水平的表达动态;牦牛COCs成熟培养时在基础培养基中分别添加0、50、100和200 ng·m L-1 EGF及最佳作用浓度的EGFR抑制因子Gefitinib,比较作用前后卵母细胞成熟率、受精后卵裂率及囊胚率;Real-time PCR方法分析不同浓度EGF和Gefitinib作用后成熟COCs中凋亡相关基因Bax和Baxi的相对表达量。【结果】EGF,EGFR基因在成熟COCs的表达显著高于未成熟COCs,成熟COCs中EGF基因的相对表达量为未成熟COCs的2.17±0.36倍,EGFR基因在成熟COCs的表达量为未成熟COCs 6.82±0.21倍,且在未成熟和成熟COCs中EGFR基因表达量均显著高于EGF。免疫荧光检测显示未成熟COCs和成熟COCs均表达EGF和EGFR蛋白,EGF和EGFR蛋白的标记荧光主要集中在卵丘细胞,卵母细胞表达较弱。100 ng·m L-1 EGF可以显著提高COCs成熟率(73.45±2.09)%及其受精后的卵裂率(59.46±1.41)%和囊胚率(26.23±1.08)%;对照组中(0 EGF)COCs成熟率为(54.16±3.25)%,卵裂率为(48.33±1.93)%,囊胚率为(15.34±0.43)%;EGF浓度为50 ng·m L-1时成熟率、卵裂率及囊胚率分别为(61.79±1.04)%、(51.76±0.61)%和(18.62±1.13)%;200 ng·m L-1成熟率、卵裂率及囊胚率分别为(71.26±4.18)%、(57.13±2.06)%和(23.96±0.53)%;而加入EGFR抑制因子Gefitinib显著的降低了COCs的成熟率及其受精后的卵裂率及囊胚率,分别为(43.63±1.46)%、(41.79±2.81)%和(12.65±0.67)%。COCs成熟过程中EGF的作用可以显著抑制促凋亡基因Bax的表达,在50 ng·m L-1、100 ng·m L-1、200 展开更多
关键词 牦牛 卵母细胞 体外成熟 表皮生长因子(EGF) 凋亡
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山羊卵泡卵母细胞的采集及体外成熟效果研究 被引量：13
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作者 林峰 史明艳 +3 位作者 陈玉霞 盛建华 高腾云 方丽云 《中国农学通报》 CSCD 2007年第11期12-15,共4页
为了获取高质量的卵泡卵母细胞,提高山羊体外胚胎生产的效率,采用切剖法与抽吸法采集卵泡卵母细胞,并对获得的可用卵母细胞进行了体外成熟培养。结果表明,切剖法能够获得较多的可用卵母细胞,可以明显增加用于体外成熟的卵母细胞数;卵母... 为了获取高质量的卵泡卵母细胞,提高山羊体外胚胎生产的效率,采用切剖法与抽吸法采集卵泡卵母细胞,并对获得的可用卵母细胞进行了体外成熟培养。结果表明,切剖法能够获得较多的可用卵母细胞,可以明显增加用于体外成熟的卵母细胞数;卵母细胞的体外成熟率与卵泡直径密切相关,大卵泡与中卵泡的卵母细胞成熟率明显高于(P<0.05)小卵泡;山羊卵泡卵母细胞的体外成熟培养液中FCS的添加比例以10%～15%为益。在一定范围内,提高FCS的浓度,并不能提高卵母细胞的成熟率。 展开更多
关键词 山羊 卵泡卵母细胞 采集 体外成熟
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卵丘细胞对辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟与孤雌发育的影响 被引量：12
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作者 田长永 杨景晁 +1 位作者 马泽芳 宋连喜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期543-548,共6页
为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸... 为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸卵(DOs),然后以4种方式培养,即COCs单独培养、DOs与COCs共培养(DOs(COCs))、DOs与卵丘颗粒细胞共培养(DOs(CCs)),以及DOs单独培养。试验2,根据包裹卵母细胞的卵丘细胞的完整性分为3组,有3层卵丘细胞紧密包围的卵母细胞复合体COCs3,有1-3层卵丘细胞包围的卵母细胞COCs1-3,无卵丘细胞包围的裸露卵母细胞NOs,3组各自单独培养。结果表明:COCs组的成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率最高,分别为83.25%、41.75%和29.25%,卵丘细胞的存在有利于卵母细胞体外成熟和随后的发育,COCs3组成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率分别为83.25%、42.50%和29.75%,显著高于COCs1-3和NOs组,卵丘细胞的完整性也影响着卵母细胞的体外发育,自然裸卵已失去体外发育能力。 展开更多
关键词 卵丘细胞 卵母细胞 体外成熟 孤雌发育 辽宁绒山羊
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