人参皂苷Rg_3对H_2O_2诱导人肾小球系膜细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制研究 被引量：17

1

作者 吴胜斌 王应灯 《现代药物与临床》 CAS 2015年第12期1437-1442,共6页

目的探究人参皂苷Rg_3对H_2O_2诱导人肾小球系膜细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法采用H_2O_2诱导建立人肾小球系膜细胞氧化应激损伤模型。以不同浓度的人参皂苷Rg_3对人肾小球系膜细胞预处理24 h,采用CCK-8试验、乳酸脱氢... 目的探究人参皂苷Rg_3对H_2O_2诱导人肾小球系膜细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法采用H_2O_2诱导建立人肾小球系膜细胞氧化应激损伤模型。以不同浓度的人参皂苷Rg_3对人肾小球系膜细胞预处理24 h,采用CCK-8试验、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒以及丙二醛(MDA)测定试剂盒分别检测细胞凋亡数量、细胞培养液中LDH水平和MDA含量。通过流式细胞术、q RT-PCR以及Western blotting检测细胞周期、CDK4的m RNA水平和蛋白表达。结果 400μmol/L H_2O_2培养细胞4 h能够建立稳定有效的人肾小球系膜细胞氧化应激损伤模型。随着人参皂苷Rg_3浓度的增加,被H_2O_2损伤的细胞的凋亡数量、细胞外LDH活性、细胞产生的MDA的含量均明显下降。40μmol/L人参皂苷Rg_3可以把人肾小球系膜细胞的细胞周期阻滞在G1期,下调CDK4的m RNA水平和蛋白表达水平。结论人参皂苷Rg_3可以通过抑制CDK4而对人肾小球系膜细胞氧化应激损伤发挥保护作用。 展开更多

关键词 人参皂苷RG3 人肾小球系膜细胞 氧化应激 保护作用

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西红花酸调控Nrf2/HO-1通路抑制高糖诱导人肾小球系膜细胞铁死亡 被引量：4

2

作者 陆江华 刘爱军 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期8-15,共8页

目的 探讨西红花酸抑制高糖诱导人肾小球系膜细胞(HGMCs)铁死亡的作用机制。方法 (1)体外培养HGMCs,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(60 mmol·L^(-1)甘露醇)和葡萄糖实验组(30、60、90 mmol·L^(-1)),干预培养48 h后,采用CC... 目的 探讨西红花酸抑制高糖诱导人肾小球系膜细胞(HGMCs)铁死亡的作用机制。方法 (1)体外培养HGMCs,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(60 mmol·L^(-1)甘露醇)和葡萄糖实验组(30、60、90 mmol·L^(-1)),干预培养48 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,采用RT-qPCR法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)mRNA表达,以确定高糖诱导HGMCs的造模条件。(2)体外培养HGMCs,分为空白对照组和西红花酸给药组(5、25、125μmol·L^(-1)),干预培养24 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率。(3)体外培养HGMCs,将细胞分为空白对照组、模型组(60 mmol·L^(-1)葡萄糖)、西红花酸组(60 mmol·L^(-1)葡萄糖+5、25、125μmol·L^(-1)西红花酸)及阳性对照组[60 mmol·L^(-1)葡萄糖+1μmol·L^(-1)铁死亡抑制剂(Ferrostatin-1,Fer-1)]。干预培养48 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western Blot法检测细胞GPX4、血红素加氧酶-1(HO-1)、转铁蛋白受体(TFRC)蛋白表达;采用免疫荧光法与Western Blot法检测HGMCs细胞核中核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达。结果 (1)与空白对照组比较,阴性对照组的细胞存活率及GPX4mRNA表达水平无明显差异(P>0.05);30、60、90 mmol·L^(-1)葡萄糖实验组的细胞存活率及GPX4 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),且以60 mmol·L^(-1)浓度组作用最为明显。(2)与空白对照组比较,5μmol·L^(-1)西红花酸组的HGMCs细胞存活率无明显影响(P>0.05),25、125μmol·L^(-1)西红花酸组的HGMCs细胞存活率显著升高(P<0.01),该浓度西红花酸对HGMCs无明显细胞毒性。(3)与空白对照组比较,模型组的HGMCs细胞存活率显著降低(P<0.01);细胞内ROS水平显著上升(P<0.01);GPX4蛋白表达水平明显下降(P<0.05);细胞核内Nrf2蛋白表达显著下调(P<0.001)。与模型组比较,25、125μmol·L^(-1)西红花酸组的HGMCs细胞存活率明显升高(P<0.05);细胞内ROS水平均显著下降(P<0.01),并呈浓度依赖性;� 展开更多

关键词 西红花酸 高糖诱导 人肾小球系膜细胞 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 Nrf2/HO-1通路

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肠道菌群代谢产物氧化三甲胺对肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞NF-κB/MAPK信号通路的影响

3

作者 宋月娟 杨波 +1 位作者 冯强生 哈小琴 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第8期932-937,共6页

目的探讨肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO)对人肾小球系膜细胞HMC和肾小管上皮细胞HK-2核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响,... 目的探讨肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO)对人肾小球系膜细胞HMC和肾小管上皮细胞HK-2核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响,为通过肠道菌群治疗和预防肾损伤提供理论依据。方法用TMAO处理HMC和HK-2细胞,并设未处理或TMAO处理0 h对照组,Real-time PCR法检测炎性反应因子MCP-1、IL-6、TNF-α和IL-1β基因mRNA的转录水平,Western blot法检测NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白的表达。并用NF-κB抑制剂BAY11-7082处理HMC和HK-2细胞,验证TMAO的促炎作用。结果与对照组相比,HMC和HK-2细胞TMAO处理组炎性反应因子MCP-1、IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA转录水平均明显上升(t=33.349,P=0.001),TMAO对两种细胞有明显的促炎作用;TMAO可激活HMC和HK-2细胞的NF-κB及MAPK信号通路,引起炎性反应,造成对肾脏的损伤。结论TMAO含量的增高可激活HMC和HK-2细胞NF-κB/MAPK信号通路,刺激两种细胞释放炎性反应因子,从而导致肾损伤的发生和发展。 展开更多

关键词 氧化三甲胺 肾损伤 信号通路 人肾小球系膜细胞 人肾小管上皮细胞

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黄芪甲苷对高糖环境下人肾小球系膜细胞损伤保护作用及其机制研究 被引量：6

4

作者 黄存东 徐源 +1 位作者 李竹青 李卫平 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第7期972-978,共7页

目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对高糖(HG)环境下人肾小球系膜细胞(HMCs)增殖和氧化应激损伤保护作用及其可能机制。方法采用MTT方法检测高糖作用不同时间点时及不同浓度AS-Ⅳ干预后HMCs增殖情况;采用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blot方... 目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对高糖(HG)环境下人肾小球系膜细胞(HMCs)增殖和氧化应激损伤保护作用及其可能机制。方法采用MTT方法检测高糖作用不同时间点时及不同浓度AS-Ⅳ干预后HMCs增殖情况;采用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blot方法分别检测不同浓度AS-Ⅳ干预高糖环境下HMCs 48 h后核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及其蛋白表达;采用过氧化氢(H_2O_2)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)试剂盒分别检测不同浓度AS-Ⅳ干预高糖环境下HMCs 48 h后细胞上清液中H_2O_2、T-SOD、GSH-Px、MDA含量变化。结果 MTT法结果显示,与正常(NG)组比较,高糖环境下HMCs呈过度增殖趋势(P<0.05),不同浓度AS-Ⅳ干预48 h后,与HG组比较,各用药组明显地抑制了高糖环境下HMCs过度增殖且呈剂量依赖性(P<0.01);qPCR及Western blot法结果显示,与HG组比较,各用药组明显地增加了Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达(P<0.01),减少了iN OS与ICAM-1 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。各试剂盒测试结果显示,与HG组比较,各用药组明显地降低了HMCs上清液中H_2O_2、MDA的含量(P<0.05),增加了HMCs上清液中T-SOD、GSH-Px的含量(P<0.01)。结论 AS-Ⅳ能够明显地抑制HG环境下HMCs过度增殖。对HG环境下HMCs损伤保护作用的部分机制可能是通过激活Nrf2通路并上调Nrf2、HO-1 mRNA及其蛋白其表达,下调iN OS、ICAM-1 mRNA及其蛋白表达,增加HMCs上清液中T-SOD、GSH-Px的含量,降低HMCs上清液中H_2O_2、MDA的含量。 展开更多

关键词 人肾小球系膜细胞 Nrf2 HO-1 INOS ICAM-1 黄芪甲苷

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丙泊酚对高糖诱导的人肾小球系膜细胞氧化应激和炎症反应的影响

5

作者 刘莉 王莹莹 井郁陌 《安徽医药》 CAS 2024年第6期1087-1091,共5页

目的探讨丙泊酚对高糖诱导的人肾小球系膜细胞损伤的影响。方法该研究于2021年3月至2022年3月进行。体外培养人肾小球系膜细胞,采用30 mol/L葡萄糖诱导建立人肾小球系膜细胞细胞损伤模型,用丙泊酚浓度10、20、40μmol/L处理细胞,细胞分... 目的探讨丙泊酚对高糖诱导的人肾小球系膜细胞损伤的影响。方法该研究于2021年3月至2022年3月进行。体外培养人肾小球系膜细胞,采用30 mol/L葡萄糖诱导建立人肾小球系膜细胞细胞损伤模型,用丙泊酚浓度10、20、40μmol/L处理细胞,细胞分为对照组、高糖组、高糖+低、中、高剂量丙泊酚组。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛、活性氧、白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)IL-1β表达;蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-10、TNF-α、IL-1β蛋白表达。结果高糖组的丙二醛[(16.7±1.7)mmol/L比(3.8±0.4)mmol/L]、活性氧[(9.6±0.9)μg/L比(3.5±0.3)μg/L]、IL-10[(65.3±6.9)ng/L比(26.9±3.2)ng/L]、TNF-α[(105.6±10.9)ng/L比(42.8±4.8)ng/L]和IL-1β[(79.7±8.2)ng/L比(31.2±3.6)ng/L]明显高于对照组;iNOS、ICAM-1、MCP-1、IL-10、TNF-α、IL-1β蛋白表达明显高于对照组;SOD、GSH-Px明显低于对照组,均P<0.05。高糖+低剂量丙泊酚组、高糖+中剂量丙泊酚组、高糖+高剂量丙泊酚组的丙二醛、活性氧、IL-10、TNF-α和IL-1β明显低于高糖组;iNOS、ICAM-1、MCP-1、IL-10、TNF-α、IL-1β蛋白表达明显低于高糖组,均P<0.05;SOD、GSH-Px明显高于高糖组,均P<0.05。结论丙泊酚能减轻高糖诱导的人肾小球系膜细胞氧化应激和炎症反应,发挥保护肾脏的作用。 展开更多

关键词 二异丙酚 高糖 人肾小球系膜细胞 氧化应激 炎症反应

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海风藤对人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号通路影响 被引量：6

6

作者 李爽 张君 张少卿 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2018年第12期33-36,共4页

目的:探讨海风藤对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/smad传导通路的影响。方法:培养人肾小球系膜细胞,分为正常组,模型组,海风藤高剂量(10mg/mL)、中剂量(1mg/mL)、低剂量(0.1mg/mL)组。经预实验筛选结果,采用10^-8 mol/L血... 目的:探讨海风藤对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/smad传导通路的影响。方法:培养人肾小球系膜细胞,分为正常组,模型组,海风藤高剂量(10mg/mL)、中剂量(1mg/mL)、低剂量(0.1mg/mL)组。经预实验筛选结果,采用10^-8 mol/L血管紧张素Ⅱ诱导模型组及海风藤各组人肾小球系膜细胞增殖,采用MTT法检测正常组、模型组及海风藤药液培养的经血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞于24、48、72h等时间点的细胞活性。收集培养48h时间点各组细胞,采用westem blot法及Real-time-PCR法分别检测smad2、3蛋白表达及TGF-β、smad7 mRNA的表达。结果:模型组与正常组比较,培养24、48、72h内,系膜细胞显著增殖;海风藤各组能够抑制其增殖;于48h时间点收集的系膜细胞中smad2、smad3含量及TGF-β mRNA的表达显著上升(P<0.05),smad7 mRNA的表达显著降低(P<0.05);海风藤高、中、低各组与模型组比较,均能逆转上述变化,但量-效依赖趋势并不显著。结论:血管紧张素Ⅱ能够有效刺激肾小球系膜细胞增殖,海风藤可能通过多靶点抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,从而抑制延缓肾小球硬化。 展开更多

关键词 海风藤 人肾小球系膜细胞 TGF-β/Smad通路 血管紧张素Ⅱ

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丹参多酚酸盐对人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号转导通路的影响 被引量：4

7

作者 李爽 张君 +1 位作者 庞爽 张少卿 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第7期1448-1451,I0002,共5页

目的：探讨丹参多酚酸盐对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号传导通路的影响。方法：培养人肾小球系膜细胞,分为正常组;模型组;丹参多酚酸盐高剂量（200μmol/L）;中剂量（20μmol/L）;低剂量（2μmol/L）组。经预实... 目的：探讨丹参多酚酸盐对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号传导通路的影响。方法：培养人肾小球系膜细胞,分为正常组;模型组;丹参多酚酸盐高剂量（200μmol/L）;中剂量（20μmol/L）;低剂量（2μmol/L）组。经预实验筛选结果,采用10-8mol/L血管紧张素Ⅱ诱导模型组及丹参多酚酸盐各组人肾小球系膜细胞增殖,采用MTT法检测各组及各时间点的细胞活性。收集培养48 h时间点各组细胞,采用Western blot法及Real-timePCR法分别检测Smad2、Smad3蛋白及TGF-β及Smad7 mRNA的表达情况。结果：模型组与正常组比较,在培养24 h,48 h,72 h内系膜细胞的增值活性增强、丹参多酚酸盐各组能够抑制其增殖,于48 h达到稳定;模型组与正常组比较,系膜细胞中Smad2、Smad3蛋白及TGF-βmRNA的表达显著上升（P〈0.05）,而Smad7mRNA的表达则明显降低（P〈0.05）;丹参多酚酸盐各组与模型组比较,均能逆转上述变化（P〈0.05）。结论：血管紧张素Ⅱ能够有效刺激肾小球系膜细胞增殖,丹参多酚酸盐可能通过多靶点抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,从而抑制延缓肾小球硬化及纤维化。 展开更多

关键词 丹参多酚酸盐 人肾小球系膜细胞 TGF-β/Smad通路 血管紧张素Ⅱ

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冬凌草甲素调节高糖诱导的人肾小球系膜细胞异常增殖、炎症和纤维化 被引量：3

8

作者 米伟 徐斐翀 +2 位作者 宋雨亭 唐晴 刘月 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期2177-2181,2187,共6页

目的:探讨冬凌草甲素对高糖诱导的人肾小球系膜细胞(HGMCs)增殖、炎症和纤维化的影响,并初步探究其作用机制。方法:高糖联合冬凌草甲素培养HGMCs,CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和ELISA检测细胞上清液炎症因子水平,... 目的:探讨冬凌草甲素对高糖诱导的人肾小球系膜细胞(HGMCs)增殖、炎症和纤维化的影响,并初步探究其作用机制。方法:高糖联合冬凌草甲素培养HGMCs,CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和ELISA检测细胞上清液炎症因子水平,免疫荧光检测活性氧(ROS)含量,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,RTPCR联合Western blot检测TGF-β、纤维粘连蛋白(FN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平,Western blot检测TLR4/MyD88和p-P65蛋白水平。结果:与健康对照组相比,模型组细胞增殖、免疫应答和纤维化水平均显著提高(P<0.05)。与模型组相比,10μg/ml和20μg/ml冬凌草甲素组细胞增殖倍数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05),TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低(P<0.05),ROS和SOD含量升高,MDA含量显著降低(P<0.05),TGF-β、FN和α-SMA水平显著降低(P<0.05),TLR4/MyD88和p-P65蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:冬凌草甲素对高糖诱导的HGMCs增殖、炎症反应、纤维化和氧化应激水平具有调节作用,其作用机制可能与下调TLR4、MyD88和p-P65水平有关。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 人肾小球系膜细胞 免疫应答 纤维化

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纳米硫化镉对人肾小球系膜细胞氧化损伤及NF-κB蛋白表达的影响 被引量：3

9

作者 王晓军 张静姝 +5 位作者 何宁 刘英华 周庆红 张大龙 商博东 李津 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期309-311,共3页

目的探讨纳米硫化镉（nano-CdS）对人肾小球系膜细胞（HMC）的氧化损伤及其机制。方法将对数生长期的HMC细胞分为对照组（0μg/ml）和nano-CdS组（5～80μg/ml）,用MTT实验观察nano-CdS对细胞存活率的影响,采用荧光探针技术检测细胞内... 目的探讨纳米硫化镉（nano-CdS）对人肾小球系膜细胞（HMC）的氧化损伤及其机制。方法将对数生长期的HMC细胞分为对照组（0μg/ml）和nano-CdS组（5～80μg/ml）,用MTT实验观察nano-CdS对细胞存活率的影响,采用荧光探针技术检测细胞内的活性氧（ROS）,采用蛋白质印迹法观察NF-κB蛋白的表达。结果与对照组比较,nano-CdS组细胞存活率降低,ROS含量升高,NF-κB的蛋白表达增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 nano-CdS可导致HMC细胞氧化损伤。 展开更多

关键词 纳米硫化镉 人肾小球系膜细胞 细胞毒性 氧化损伤 NF-ΚB蛋白

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细胞因子信号负调控因子3基因转染对高糖刺激下肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3

10

作者 王晨 魏荣 +4 位作者 张晓琴 高丽芳 尚丽芳 鄂丽 史永红 《中国药物与临床》 CAS 2014年第5期568-571,I0001,共5页

目的探讨细胞因子信号负调控因子(SOCS)3基因对高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)增殖、凋亡的影响。方法以脂质体为载体将PCR3.1 SOCS3转染至体外培养的HMCs,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学法鉴定转染前后细胞中SOCS3 m... 目的探讨细胞因子信号负调控因子(SOCS)3基因对高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)增殖、凋亡的影响。方法以脂质体为载体将PCR3.1 SOCS3转染至体外培养的HMCs,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学法鉴定转染前后细胞中SOCS3 mRNA和蛋白表达;高糖培养HMCs 12、24、48 h,采用蛋白印迹法分别检测正常对照组(CG)、高糖组(HG)、高糖+空质粒转染(HG+PV)组、高糖+SOCS3基因转染(HG+PS)组蛋白酪氨酸磷酸激酶(JAK)2、信号转导及转录活化因子(STAT)1蛋白酪氨酸磷酸化水平变化;免疫细胞化学法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)法检测转染前后细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI)。结果经鉴定,转染后HMCs中有SOCS3 mRNA和蛋白稳定表达;与CG组和HG+PV组相比,HG+PS组细胞中JAK2、STAT1蛋白酪氨酸磷酸化水平显著下降(P<0.05),PI显著减少(P<0.01),AI无明显差异。结论 SOCS3蛋白可能通过降低JAK2、STAT1酪氨酸磷酸化水平抑制HMCs增殖。 展开更多

关键词 转染 细胞增殖 细胞凋亡 高糖 信号传导 肾小球系膜细胞 SOCS3基因

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芪蓟肾康汤对AngⅡ诱导的人肾小球系膜细胞增殖及ERK1/2、p-ERK1/2的影响 被引量：3

11

作者 丁晓欢 吕静 +1 位作者 栾佳 张君 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1741-1743,共3页

目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细胞增殖,采用血清药理学方法制备芪蓟肾康汤和替米... 目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细胞增殖,采用血清药理学方法制备芪蓟肾康汤和替米沙坦含药血清。将人肾小球系膜细胞分为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组六组,培养24、48、72 h后用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;培养48、72 h后用ELISA法检测的ERK1/2、pERK1/2含量。结果:与正常组相比,AngⅡ组能显著促进系膜细胞增殖,替米沙坦组和各浓度中药含药血清组均可不同程度抑制AngⅡ引起的系膜细胞增殖。AngⅡ刺激后系膜细胞中ERK1/2蛋白表达明显降低,pERK1/2蛋白的表达明显增高,替米沙坦和不同浓度中药含药血清干预后,ERK1/2蛋白水平显著升高、pERK1/2蛋白水平显著下降,其中中药高剂量组最为显著。结论:芪蓟肾汤可能通过抑制人肾小球系膜细胞增殖和ERK通路的磷酸化,从而达到延缓肾小球硬化的目的。 展开更多

关键词 IGA肾病 人肾小球系膜细胞 细胞增殖 芪蓟肾康汤 PERK1/2

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基于Nrf2/ARE信号通路研究芪黄补肾泄浊方对糖尿病肾病HMC细胞的保护机制 被引量：2

12

作者 金丽霞 张晓东 +4 位作者 潘超 栾仲秋 宋淑娟 尹丽颖 王文凯 《海南医学院学报》 CAS 2022年第20期1533-1539,共7页

目的:探讨芪黄补肾泄浊方对高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMC)核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件信号通路表达的影响及其对氧化应激的保护作用。方法:离体培养HMC,制备正常大鼠血清,大鼠灌胃给予厄贝沙坦及芪黄补肾泄浊方,达到血... 目的:探讨芪黄补肾泄浊方对高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMC)核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件信号通路表达的影响及其对氧化应激的保护作用。方法:离体培养HMC,制备正常大鼠血清,大鼠灌胃给予厄贝沙坦及芪黄补肾泄浊方,达到血药浓度后制备含药血清,实验分为对照组、高糖组、厄贝沙坦组及芪黄补肾泄浊方组。对照组HMC给予正常大鼠血清(10%血清浓度)培养液培养,高糖组HMC予大鼠血清(10%血清浓度)的高糖培养液培养,厄贝沙坦组与芪黄补肾泄浊方组分别给予10%剂量厄贝沙坦与10%剂量芪黄补肾泄浊方含药血清高糖培养液干预培养,培养48 h后收集相关指标检测。采用Real⁃time PCR定量分析的方法检测各组HMC中核因子E2相关因子(Nrf2)、γ⁃谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ‐GCS)、超氧化物歧化酶(SOD)的mRNA表达水平。免疫细胞化学法检测各组HMC中γ⁃GCS和SOD的表达;采用Western blot的方法观察各组HMC中γ⁃GCS、SOD蛋白表达的情况。结果:各组实验细胞Nrf2、γ‐GCS、SOD mRNA、蛋白的表达,在对照组中只有少量,高糖组较对照组减少(P<0.05),厄贝沙坦与芪黄补肾泄浊方干预后增加,且以芪黄补肾泄浊方组增加更显著(P<0.05)。结论:芪黄补肾泄浊方可改善高糖培养下HMC氧化应激损伤,其作用机制可能是通过激活Nrf2及其相关下游蛋白γ⁃GCS和SOD达到的。 展开更多

关键词 芪黄补肾泄浊方 氧化应激 高糖 人肾小球系膜细胞 厄贝沙坦

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AGEs培养的人肾小球系膜细胞中二氢叶酸还原酶及O_2^-水平 被引量：3

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作者 曾信幸 李竞 +2 位作者 高凌 黄玮璐 胡莹洁 《微循环学杂志》 2012年第3期27-29,5+9,共3页

目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对人肾小球系膜细胞(HMCs)中二氢叶酸还原酶(DHFR)和超氧阴离子(O-2)水平的影响。方法:在HMCs中加入5.6mmol/L葡萄糖(正常对照组)和200mg/LAGEs(AGEs组),平行培养48h后,采用Western blotting检测两组D... 目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对人肾小球系膜细胞(HMCs)中二氢叶酸还原酶(DHFR)和超氧阴离子(O-2)水平的影响。方法:在HMCs中加入5.6mmol/L葡萄糖(正常对照组)和200mg/LAGEs(AGEs组),平行培养48h后,采用Western blotting检测两组DHFR蛋白含量,采用二氢乙啶(DHE)法检测两组O-2的水平。结果:与正常对照组比较,AGEs组DHFR蛋白表达显著下调(P<0.05),O-2水平显著上调(P<0.01)。结论:AGEs诱导HMCs产生的O-2可能通过下调DHFR蛋白水平影响四氢生物喋呤(BH4)的生物补救合成途径,导致BH4减少而加重糖尿病肾病(DN)的氧化应激。 展开更多

关键词 人肾小球系膜细胞 二氢叶酸还原酶 O2^- AGES 晚期糖基化终末产物 糖尿病肾病 抗氧化应激 培养

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藻黄合剂对高糖环境人肾小球系膜细胞分泌MMP-9及TIMP-1的影响 被引量：3

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作者 牟授菡 尹燕志 +2 位作者 鞠建伟 吕丛奎 张李梅 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1898-1900,共3页

目的:研究藻黄合剂对体外培养人肾小球系膜细胞(GMC)在高糖下分泌MMP-9、TIMP-1的影响。方法:体外培养人肾小球系膜细胞并在高糖培养基中孵育,用含有不同浓度的藻黄合剂培养液进行干预,分别观察24、48h系膜细胞MMP-9和TIMP-1的分泌。结... 目的:研究藻黄合剂对体外培养人肾小球系膜细胞(GMC)在高糖下分泌MMP-9、TIMP-1的影响。方法:体外培养人肾小球系膜细胞并在高糖培养基中孵育,用含有不同浓度的藻黄合剂培养液进行干预,分别观察24、48h系膜细胞MMP-9和TIMP-1的分泌。结果:藻黄合剂各剂量组在24、48h均显著升高髙糖下MMP-9的分泌(P<0.01);同时降低TIMP-1在48h的分泌(P<0.05,P<0.01)。结论:藻黄合剂可以升高高糖下系膜细胞MMP-9分泌,降低TIMP-1的分泌,这可能是藻黄合剂降解细胞外基质、防治糖尿病肾病的作用机制之一。 展开更多

关键词 藻黄合剂 金属基质蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制剂-1 人肾小球系膜细胞 高糖

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过表达Sirt1对高糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖与TGF-β1表达的影响 被引量：3

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作者 王星云 朱剑 +2 位作者 蒋兰兰 丁波 马建华 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期480-484,509,共6页

目的 :探讨过表达沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,Sirt1)对高糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:体外培养人肾小球系膜细胞(HMC),利用Sirt1重组慢病毒载体感染细胞获得过表... 目的 :探讨过表达沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,Sirt1)对高糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:体外培养人肾小球系膜细胞(HMC),利用Sirt1重组慢病毒载体感染细胞获得过表达Sirt1蛋白的人肾小球系膜细胞并分为4组:1NG+LV-CTL组:正常葡萄糖(5.5 mmol/L)+空白对照慢病毒感染;2HG+LV-CTL组:高糖(30 mmol/L)+空白对照慢病毒感染;3NG+LV-Sirt1组:正常葡萄糖+Sirt1慢病毒感染;4HG+LV-Sirt1组:高糖+Sirt1慢病毒感染;再设立3组未感染细胞作为对照,分别为:1NG组(正常葡萄糖);2NM组(正常糖+甘露醇组24.5 mmol/L);3 HG组(高糖处理),培养不同时间后以CCK-8法检测细胞增殖情况;实时定PCR和Western blot法检测各组细胞TGF-β1m RNA和蛋白表达水平。结果:1通过重组慢病毒感染,嘌呤霉素筛选,获取稳定过表达Sirt1蛋白的人肾小球系膜细胞系;2与NG组相比较,各时间点HG、HG+LV-CTL、HG+LV-Sirt1组CCK8的吸光值均明显升高(P均<0.01)。处理24、48 h后,HG+LVSirt1组的吸光值明显低于HG、HG+LV-CTL组。3与NG组相比较,HG、HG+LV-CTL、HG+LV-Sirt1组TGF-β1 m RNA以及蛋白水平明显上调,差异均有显著性(P均<0.01);HG+LV-Sirt1组的TGF-β1 m RNA以及蛋白水平明显低于HG、HG+LV-CTL组(P均<0.01);而NG、NM、NG+LV-CTL及NG+LV Sirt1组间相比较,无统计学差异(P>0.05)。结论 :过表达Sirt1能够抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖与TGF-β1表达,Sirt1可能成为防治糖尿病肾病的作用靶点。 展开更多

关键词 沉默信息调节因子1 高糖 人肾小球系膜细胞 转化生长因子-β1

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基于p38 MAPK信号转导通路探究从风论治法对高糖诱导人肾小球系膜细胞免疫炎症损伤的影响 被引量：2

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作者 陈宇 李丽娜 +7 位作者 苏冠旬 王世东 赵进喜 黄为钧 赵博旭 王淑艳 陈小愚 李哲 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期6141-6145,共5页

目的:基于p38MAPK信号转导通路探索从风论治法代表方药益气搜风颗粒改善高糖诱导人肾小球系膜细胞炎症反应的作用机制。方法:通过体外培养人肾小球系膜细胞株,设立正常对照组、模型组、抑制剂组、益气搜风颗粒组,分别采用低糖DMEM、高糖... 目的:基于p38MAPK信号转导通路探索从风论治法代表方药益气搜风颗粒改善高糖诱导人肾小球系膜细胞炎症反应的作用机制。方法:通过体外培养人肾小球系膜细胞株,设立正常对照组、模型组、抑制剂组、益气搜风颗粒组,分别采用低糖DMEM、高糖DMEM、高糖DMEM+SB203580、高糖DMEM+益气搜风颗粒含药血清进行培养。通过ELISA、Real-time PCR和Western blot检测各组细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、p38 MAPK、ICAM-1、MCP-1的表达水平。结果:与正常对照组比较,高糖诱导后模型组IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1含量和mRNA的表达水平显著上调(P<0.05),且p38 MAPK、ICAM-1、MCP-1蛋白和mRNA的表达水平显著上调(P<0.05);与模型组比较,抑制剂组和益气搜风颗粒组IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1含量和mRNA的表达水平显著下调(P<0.05),且p38 MAPK、ICAM-1、MCP-1蛋白和mRNA的表达水平显著上调(P<0.05)。结论:从风论治法代表方药益气搜风颗粒可减轻高糖刺激引起的肾小球系膜细胞免疫炎症反应。 展开更多

关键词 p38 MAPK信号转导通路 人肾小球系膜细胞 糖尿病肾病 从风论治 益气搜风颗粒

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芪蓟肾康汤通过调节NF-κB表达对人肾小球系膜细胞增殖影响的研究 被引量：1

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作者 丁晓欢 吕静 +1 位作者 栾佳 张君(指导) 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第12期2643-2646,共4页

目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及核转录因子(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)基因及蛋白表达的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细... 目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及核转录因子(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)基因及蛋白表达的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细胞增殖,采用血清药理学方法制备芪蓟肾康汤和替米沙坦含药血清。将人肾小球系膜细胞分为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组6组,培养48 h、72 h观察细胞增殖情况,用PCR法检测NF-κBmRNA表达量。用Western blot法检测NF-κB蛋白表达量。结果:与正常组相比,AngⅡ组能显著促进系膜细胞增殖,替米沙坦组和各浓度中药含药血清组均可不同程度抑制AngⅡ引起的系膜细胞增殖。AngⅡ刺激后系膜细胞中NF-κB蛋白表达明显升高,替米沙坦和不同浓度中药含药血清干预后,NF-κB基因及蛋白表达水平均有不同程度下降,其中中药高剂量组最为显著。结论:芪蓟肾康汤可能通过下调NF-κB基因及蛋白表达水平,抑制NF-κB信号通路的活化,从而减轻人肾小球系膜细胞增殖,最终达到延缓肾小球硬化的目的。 展开更多

关键词 IGA肾病 人肾小球系膜细胞 细胞增殖 芪蓟肾康汤 NF-ΚB

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AGEs诱导培养人肾小球系膜细胞中NOX4及O_2^-水平

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作者 黄炜璐 李竞 +2 位作者 高凌 曾信幸 胡莹洁 《微循环学杂志》 2012年第3期11-13,5+8,共3页

目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)中还原型尼克安腺嘌吟二核苷酸氧化酶4(NOX4)蛋白及超氧阴离子(O-2)水平变化。方法:将正常浓度葡萄糖(5.6mmol/L)培养的HMCs经过无血清培养液同步化24h后分为两组:正常... 目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)中还原型尼克安腺嘌吟二核苷酸氧化酶4(NOX4)蛋白及超氧阴离子(O-2)水平变化。方法:将正常浓度葡萄糖(5.6mmol/L)培养的HMCs经过无血清培养液同步化24h后分为两组:正常对照组[5.6mmol/L葡萄糖+200mg/L牛血清白蛋白(BSA)]及AGEs组(5.6mmol/L葡萄糖+200mg/LAGEs),分别干预48h后用Western blotting检测NOX4蛋白表达,用Dihydroethidium(DHE)法检测O-2的荧光水平。结果:与正常对照组比较,AGEs组NOX4蛋白表达明显上调(P<0.01),O-2水平亦明显增加(P<0.01),两者呈显著正相关。结论:AGEs能激活HMCs中NOX4,引起氧化应激,可能与糖尿病肾病(DN)的发生有关。 展开更多

关键词 人肾小球系膜细胞 AGES O2^- 诱导培养 晚期糖基化终末产物 糖尿病肾病 主要死亡原因 常见并发症

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氯沙坦延缓肾小球系膜细胞衰老及可能机制

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作者 周红丽 唐丽云 《解剖科学进展》 2017年第4期415-419,共5页

目的检测氯沙坦作用衰老系膜细胞后衰老指标及STAT蛋白表达变化,探讨氯沙坦在肾小球系膜细胞衰老过程中的作用及可能机制。方法细胞分三组:对照组、衰老组(10^(-6)molL^(-1)AngⅡ刺激细胞72h)和氯沙坦组(AngⅡ加入前1h加入10^(-5)molL^(... 目的检测氯沙坦作用衰老系膜细胞后衰老指标及STAT蛋白表达变化,探讨氯沙坦在肾小球系膜细胞衰老过程中的作用及可能机制。方法细胞分三组:对照组、衰老组(10^(-6)molL^(-1)AngⅡ刺激细胞72h)和氯沙坦组(AngⅡ加入前1h加入10^(-5)molL^(-1)氯沙坦,培养72h)。MTT法检测细胞增殖情况,细胞衰老β-半乳糖苷酶(SAβ-gal)染色法检测衰老细胞百分率,流式细胞仪检测细胞周期,倒置显微镜及透射电镜下观察细胞形态及超微结构改变。Western blot检测各组STAT1、p-STAT1、STAT3、p-STAT3蛋白的变化。结果应用氯沙坦后细胞存活率较衰老组明显增加,SAβ-gal阳性率较衰老组明显下降,氯沙坦阻滞于G0-G1期细胞较衰老组明显减少,氯沙坦使肾小球系膜细胞体积增大、多型核、双核等衰老改变的细胞明显减少,细胞核内陷及染色质边集等衰老现象有所改善。衰老细胞内STAT1、p-STAT1、STAT3、p-STAT3表达水平明显增加,应用氯沙坦治疗后STAT1、p-STAT1、STAT3、p-STAT3表达水平均下降,且p-STAT1、p-STAT3下降更明显。结论 JAK2/STAT通路的激活参与了系膜细胞衰老过程,氯沙坦延缓系膜细胞衰老可与下调STAT1、p-STAT1、STAT3及p-STAT3的表达水平相关。 展开更多

关键词 人肾小球系膜细胞 衰老 JAK2/STAT通路 血管紧张素Ⅱ 氯沙坦

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茶多酚调节STAT3/miR-126/端粒信号通路活性延缓高糖诱导的人肾小球系膜细胞衰老 被引量：10

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作者 曹东维 韩文贝 +10 位作者 何劲松 赵敏 蒋春明 张庆燕 万骋 刘晶 冯媛 金波 杨波 朱大龙 韩晓 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第23期4678-4684,共7页

探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)在体外高糖环境下延缓人肾小球系膜细胞(human glomerular mesangial cells,HGMCs)衰老的作用及可能的机制。在体外培养HGMCs,分为正常组(normal group,N,5.5 mmol·L^-1葡萄糖)、甘露醇组(mannitol ... 探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)在体外高糖环境下延缓人肾小球系膜细胞(human glomerular mesangial cells,HGMCs)衰老的作用及可能的机制。在体外培养HGMCs,分为正常组(normal group,N,5.5 mmol·L^-1葡萄糖)、甘露醇组(mannitol group,MNT,5.5 mmol·L^-1葡萄糖+24.5 mmol·L^-1甘露醇)、高糖组(high dose of D-glucose group,HG,30 mmol·L^-1葡萄糖)、低剂量TP组(low dose of TP group,L-TP,30 mmol·L^-1葡萄糖+5 mg·L^-1 TP)及高剂量TP组(high dose of TP group,H-TP,30 mmol·L^-1葡萄糖+20 mg·L^-1 TP),分别在37℃,5%CO2条件下培养,干预72 h后,首先观察TP对HGMCs形态的影响;其次,检测细胞周期、衰老相关半乳糖苷酶(senescence-associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性率、端粒长度;最后,检测p53-p21-Rb信号通路中关键信号分子p53,p21,Rb的蛋白表达水平及p-STAT3,miR-126的表达水平。结果表明,高糖能诱导HGMCs衰老,不仅表现为细胞周期阻滞于G1期、SA-β-gal染色阳性率升高、端粒长度缩短,还表现为p53,p21,Rb蛋白表达水平升高和p53-p21-Rb信号通路激活。L-TP能延缓HGMCs衰老,不仅表现为HGMCs细胞周期G1期阻滞的改善、SA-β-gal染色阳性率的下降、端粒长度的延长,还表现为p53,p21,Rb蛋白表达水平的下降,端粒-p53-p21-Rb信号通路活性的抑制。此外,高糖诱导HGMCs p-STAT3表达水平上调、miR-126表达水平下调,而L-TP可使这些变化得到改善。总之,高糖能激活端粒-p53-p21-Rb信号通路而诱导HGMCs衰老;L-TP能调节STAT3/miR-126表达水平,抑制端粒-p53-p21-Rb信号通路活性而延缓高糖诱导的HGMCs衰老。这些发现为临床上防治糖尿病肾病相关的肾脏细胞衰老提供了有效的干预措施。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 茶多酚 系膜细胞衰老 STAT3 MIR-126 端粒

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