艳山姜挥发油抑制JNK1/2/3磷酸化对ox-LDL诱导的HAECs损伤的影响 被引量：17

1

作者 文波 令狐克刚 +5 位作者 徐旖旎 张彦燕 罗红 陶玲 陈妍 沈祥春 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期112-115,共4页

目的:研究艳山姜挥发油对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用,并分析可能的作用机制。方法:实验分为空白组(无血清内皮细胞培养基),模型组(200 mg·L-1ox-LDL),艳山姜挥发油高剂量组(200mg·L-... 目的:研究艳山姜挥发油对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用,并分析可能的作用机制。方法:实验分为空白组(无血清内皮细胞培养基),模型组(200 mg·L-1ox-LDL),艳山姜挥发油高剂量组(200mg·L-1ox-LDL+100μg·L-1艳山姜挥发油)和低剂量组(200 mg·L-1ox-LDL+10μg·L-1艳山姜挥发油)共4组。艳山姜挥发油预保护1 h,继续加入ox-LDL共同作用24 h,采用噻唑盐(MTT)法分析细胞存活率,苏木精-伊红(HE)染色法进行形态学观察;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)外漏量,Western blot分析c-Jun氨基末端激酶(JNK)1/2/3,p-JNK1/2/3蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应分析JNK1/2/3 mRNA表达水平。结果:艳山姜挥发油能显著提高HAECs的存活率,改善细胞的病理损伤,减少LDH外漏量,抑制JNK1/2/3蛋白磷酸化,但对JNK1/2/3蛋白和mRNA水平无显著影响。结论:艳山姜挥发油改善ox-LDL诱导的HAECs损伤,其作用机制与抑制JNK1/2/3蛋白磷酸化相关。 展开更多

关键词 艳山姜 挥发油 氧化低密度脂蛋白 人主动脉内皮细胞 C-JUN氨基末端激酶

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基于microRNA探讨半夏白术天麻汤内皮保护机制 被引量：12

2

作者 姜月华 张鹏 +2 位作者 李兆钰 姜凌宇 杨传华 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1995-1999,共5页

目的:通过小RNA测序及siRNA基因敲减/过表达技术,探索半夏白术天麻汤内皮保护的作用靶点。方法:体外培养人主动脉内皮细胞(HAEC),50μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导细胞损伤,1h后加入2mg/mL半夏白术天麻汤继续培养24h,未处理的HAE... 目的:通过小RNA测序及siRNA基因敲减/过表达技术,探索半夏白术天麻汤内皮保护的作用靶点。方法:体外培养人主动脉内皮细胞(HAEC),50μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导细胞损伤,1h后加入2mg/mL半夏白术天麻汤继续培养24h,未处理的HAEC细胞作为正常对照组。小RNA测序筛选差异microRNA(miRNA),并基于siRNA敲减/过表达miRNA-217-5p(即miR-217),同步给予半夏白术天麻汤干预,观察miRNA-217的表达及其对细胞增殖的影响。结果:经小RNA测序,ox-LDL诱导后90个miRNA差异表达,半夏白术天麻汤干预后,共筛选出157个差异miRNA(93个上调,64个下调)(FC>2.0,P<0.05),其中60个共有差异miRNA,提示半夏白术天麻汤逆转了ox-LDL诱导的66.67%的miRNA改变,共有基因中差异最显著的是miRNA-217。miRNA-217敲减/过表达后,细胞增殖水平发生相应的变化;半夏白术天麻汤的干预效果在miRNA-217敲减后下降,而miRNA-217过表达可增强半夏白术天麻汤的药效。结论:miRNA-217是半夏白术天麻汤的重要靶点,半夏白术天麻汤通过上调miRNA-217,促进内皮细胞增殖,发挥内皮保护作用。 展开更多

关键词 半夏白术天麻汤 氧化型低密度脂蛋白 人主动脉内皮细胞 MICRORNA microRNA-217-5p

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黄芪甲苷改善过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激损伤的研究 被引量：11

3

作者 陈宇琼 孙东岳 +3 位作者 吴恒芳 卞智萍 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期949-954,共6页

目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_... 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_2O_2损伤组细胞经H_2O_2(400μmol/L)持续损伤36 h,AS-Ⅳ治疗组细胞经H_2O_2损伤12 h后加入含50μg/m L AS-Ⅳ的培养基继续干预处理24 h。观察AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤及线粒体功能损伤的修复作用。结果:H_2O_2损伤后HAECs丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶活性及线粒体活性氧(ROS)水平显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及线粒体膜电位显著降低;H_2O_2损伤的HAECs经AS-IV治疗后,HAECs的MDA含量、NADPH氧化酶活性及线粒体ROS含量明显降低,SOD和Mn-SOD活性及线粒体膜电位显著增高。结论:AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤具有保护作用,提高线粒体的抗氧化功能是其可能的机制之一。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 线粒体 过氧化氢

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基于NOS信号的艳山姜挥发油对ox-LDL诱导HAECs损伤的保护作用 被引量：8

4

作者 徐旖旎 杨红 +4 位作者 李晨 令狐克刚 文波 沈祥春 张彦燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期143-147,共5页

目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用。方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L^(-1)oxLDL),EOFAZ高质量浓... 目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用。方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L^(-1)oxLDL),EOFAZ高质量浓度组(200 mg·L^(-1)ox-LDL+100μg·L^(-1)EOFAZ),EOFAZ低质量浓度组(200 mg·L^(-1)ox-LDL+10μg·L^(-1)EOFAZ),阿司匹林组(Asp,200 mg·L^(-1)ox-LDL+2.5×10^(-4)mol·L^(-1)Asp),卡维地洛组(Car,200 mg·L^(-1)ox-LDL+1×10-6mol·L^(-1)Car),阿托伐他汀钙组(Atorv,200 mg·L^(-1)ox-LDL+1×10-6mol·L^(-1)Atorv);一氧化氮合酶(NOS)信号研究分为5组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L^(-1)ox-LDL),EOFAZ组(200 mg·L^(-1)ox-LDL+100μg·L^(-1)EOFAZ),NOS抑制剂组(200 mg·L^(-1)ox-LDL+100μmol·L^(-1)L-NAME或300μmol·L^(-1)L-NMMA),EOFAZ加NOS抑制剂组(200 mg·L^(-1)ox-LDL+100μg·L^(-1)EOFAZ+100μmol·L^(-1)L-NAME或300μmol·L^(-1)L-NMMA)。噻唑蓝(MTT)法分析细胞存活率,酶标仪法及Griess试剂法分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量。化学法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测iNOS及eNOS mRNA表达水平。结果:与模型组比较,EOFAZ明显提高ox-LDL诱导损伤的HAECs的细胞存活率,抑制LDH外漏及iNOS活力(P<0.05,P<0.01),促进NO及eNOS的产生(P<0.05,P<0.01)。Real-time PCR分析表明,EOFAZ以及相关抑制剂显著下调iNOS mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),上调eNOS mRNA表达水平(P<0.05)。结论:EOFAZ对ox-LDL诱导损伤的HAECs具有保护作用,其作用机制与调控eNOS和iNOS的表达水平有关。 展开更多

关键词 艳山姜挥发油 氧化低密度脂蛋白 人主动脉内皮细胞 一氧化氮合酶 一氧化氮

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18β-甘草次酸通过PGK1糖酵解途径抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡研究 被引量：1

5

作者 韩维维 王博 +2 位作者 钟晴 张蓉 徐驰 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期478-484,共7页

基于磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase 1,PGK1)介导糖酵解途径研究18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetinic acid,GA)抑制氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的血管内皮细胞凋亡的分子机制。采用oxLDL(10... 基于磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase 1,PGK1)介导糖酵解途径研究18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetinic acid,GA)抑制氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的血管内皮细胞凋亡的分子机制。采用oxLDL(100 mg/L)损伤建立体外人主动脉内皮细胞损伤模型,并给予不同浓度的GA(10、20和40μmol/L)及PGK1激动剂进行干预,Western blot法检测糖酵解关键酶PGK1、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、己糖激酶(hexokinase 2,HK2)和丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)表达水平以及凋亡相关Bax、Bcl2、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平,比色法检测细胞内乳酸和葡萄糖含量。结果表明,与对照组相比,oxLDL组内皮细胞葡萄糖消耗减少、乳酸分泌量增加,PGK1、GLUT1、HK2、PKM2、Bax、cleaved Caspase-3及cleaved Caspase-9蛋白表达水平增加(P<0.05);与oxLDL组相比,GA治疗组(10、20和40μmol/L)内皮细胞葡萄糖消耗增加、乳酸分泌量减少,PGK1、GLUT1、HK2、PKM2、Bax、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.05);加入PGK1激动剂后可以逆转GA对oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡的作用。以上结果表明,GA通过抑制PGK1介导的糖酵解途径进而抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡。 展开更多

关键词 18Β-甘草次酸 PGK1 人主动脉内皮细胞 BAX BCL2

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通心络对高糖高脂诱导人主动脉内皮细胞损伤的保护作用

6

作者 位庚 石梦莹 +2 位作者 郑文丽 赵玉莎 刘赞朝 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期85-88,共4页

目的探讨高糖高脂对人主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及通心络的干预作用。方法经随机方式,将HAECs分为以下5组:通心络高、中、低浓度组,高糖高脂组和空白对照组。检测各组细胞生存活性、细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量、三磷酸腺苷(ATP)... 目的探讨高糖高脂对人主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及通心络的干预作用。方法经随机方式,将HAECs分为以下5组:通心络高、中、低浓度组,高糖高脂组和空白对照组。检测各组细胞生存活性、细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量、三磷酸腺苷(ATP)含量、线粒体膜电位(MMP)、细胞内活性氧簇(ROS)水平和细胞色素(Cyt)-C蛋白表达。结果与空白对照组比较,高糖高脂组MMP、ATP水平与细胞生存活性明显下降,细胞中ROS含量、细胞上清液LDH漏出量与Cyt-C蛋白表达皆明显上升(P<0.05,P<0.01);与高糖高脂组相比,通心络干预后细胞生存活性、ATP含量和MMP明显升高,细胞上清液LDH漏出量、细胞内ROS水平和Cyt-C蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论对于高糖高脂损伤的HAECs,通心络具有保护作用,相关保护机制可能和保护线粒体功能相关。 展开更多

关键词 人主动脉内皮细胞 高糖高脂 线粒体功能 活性氧簇 通心络

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3种中药成分对氧化型低密度脂蛋白诱导人主动脉内皮细胞损伤的影响

7

作者 楼彩霞 王弋 +2 位作者 代路路 龙淑娴 黄小琼 《中国药业》 CAS 2024年第4期39-42,共4页

目的探讨3种中药成分(姜黄素、连翘苷、白藜芦醇)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的影响。方法实验设空白对照组(等体积基础培养液),溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜(DMSO)的基础培养液],Ox-LDL组(20μg/m... 目的探讨3种中药成分(姜黄素、连翘苷、白藜芦醇)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的影响。方法实验设空白对照组(等体积基础培养液),溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜(DMSO)的基础培养液],Ox-LDL组(20μg/mL Ox-LDL),姜黄素①②③④组(20μg/mL Ox-LDL+2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素),连翘苷①②③④组(20μg/mL Ox-LDL+10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷),白藜芦醇①②③组(20μg/mL Ox-LDL+20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇),采用四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平。结果与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷④组细胞增殖率均显著降低(P<0.01或P<0.05);姜黄素③组、连翘苷②③④组、白藜芦醇各剂量组细胞LC3 mRNA表达水平均显著升高,COX-2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论姜黄素、连翘苷和白藜芦醇可抑制Ox-LDL诱导下HAEC的增殖,可激发受损细胞自噬,抑制炎性因子COX-2表达。 展开更多

关键词 姜黄素 连翘苷 白藜芦醇 氧化型低密度脂蛋白 人主动脉内皮细胞 细胞自噬 炎性反应

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心水通胶囊水提物对缺氧损伤性人主动脉内皮细胞LDH、MDA和SOD的影响 被引量：6

8

作者 萧璐 谭春江 吴岩斌 《中医药学报》 CAS 2013年第6期47-50,共4页

目的：研究心水通胶囊水提物的细胞毒理学作用。方法：水煎煮法提取心水通胶囊中水溶性成分，不同浓度干预缺氧诱导的人主动脉内皮细胞，并与相同浓度梯度呋塞米组对照。采用MTF比色法、酶学方法以及病理形态学等方法，分别检测细胞活... 目的：研究心水通胶囊水提物的细胞毒理学作用。方法：水煎煮法提取心水通胶囊中水溶性成分，不同浓度干预缺氧诱导的人主动脉内皮细胞，并与相同浓度梯度呋塞米组对照。采用MTF比色法、酶学方法以及病理形态学等方法，分别检测细胞活性、培养液中LDH、MDA和SOD含量以及细胞病理形态变化。结果：在0．5-1．5mg／mL浓度之间，心水通胶囊组比缺氧模型组细胞存活率增明显增高（P〈0．05）。在该浓度区间，细胞培养液中LDH和MDA活力降低，而SOD的活力增强，且该作用呈药物浓度依赖性；心水通胶囊组细胞形态正常，贴壁生长良好，未见明显细胞毒性作用。呋塞米组LDH和MDA活力随浓度而增高，而SOD活力和细胞活率降低，细胞毒性也增加。结论：心水通胶囊对缺氧诱导的细胞损伤具有一定保护作用，细胞毒性小。 展开更多

关键词 心水通胶囊 缺氧性损伤 人主动脉内皮细胞 细胞毒理学

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高良姜素通过下调lncRNA H19的表达抑制ox-LDL诱导的人源 正常主动脉内皮细胞血管生成活性

9

作者 罗瑞 田龙海 杨永曜 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期52-59,共8页

目的探索高良姜素对ox-LDL诱导的人源正常主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及其机制。方法使用不同浓度(0、10、20、40、80μmol/L)的高良姜素孵育HAECs24h后,通过MTT检测细胞活性。以5mg/mLox-LDL诱导的HAECs为模型,使用20、40μmol/L高良... 目的探索高良姜素对ox-LDL诱导的人源正常主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及其机制。方法使用不同浓度(0、10、20、40、80μmol/L)的高良姜素孵育HAECs24h后,通过MTT检测细胞活性。以5mg/mLox-LDL诱导的HAECs为模型,使用20、40μmol/L高良姜素孵育24h。为观察高良姜素的作用机制,在HAECs中过表达lncRNAH19,使用40μmol/L高良姜素孵育24 h。通过qRT-PCR检测lncRNAH19的水平,划痕实验和血管形成实验用于观察迁移和管形成能力,使用流式细胞术检测ROS水平。通过Western blot检测VEGFA、MMP-2、MMP-9的蛋白水平。结果低浓度(0、10、20、40μmol/L)的高良姜素对细胞无明显毒性(P>0.05),而80μmol/L高良姜素会抑制HAECs细胞的活性(P<0.01)。ox-LDL诱导的HAECs中lncRNAH19的表达水平增加,高良姜素能降低ox-LDL诱导的HAECs的lncRNAH19的表达水平、迁移能力和血管形成能力,ROS水平以及VEGFA、MMP-2、MMP-9的蛋白水平(P<0.01)。但是,高良姜素的这些生物学作用均能被过表达lncRNAH19逆转(P<0.01)。结论高良姜素可能通过抑制lncRNAH19的表达以降低ox-LDL诱导的HAECs的迁移、氧化应激和血管形成能力来发挥治疗动脉粥样硬化的潜力。 展开更多

关键词 血管生成 人源正常主动脉内皮细胞 高良姜素 lncRNAH19

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PM2.5诱导NLRP3炎症小体活化对人主动脉内皮细胞的影响

10

作者 南凯 张俊芳 +4 位作者 梁爽 张辉 李海涛 王芳 姚春霞 《河北医药》 CAS 2024年第15期2266-2270,共5页

目的 探讨PM2.5诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的分子机制。方法 收集大气PM2.5染毒HAECs 24 h,采用MTT法检测细胞存活率,酶联免疫吸附实验检测(ELISA)白介素-1β(IL-1β)和IL-18的含量,硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)含量,比色法检测... 目的 探讨PM2.5诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的分子机制。方法 收集大气PM2.5染毒HAECs 24 h,采用MTT法检测细胞存活率,酶联免疫吸附实验检测(ELISA)白介素-1β(IL-1β)和IL-18的含量,硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)含量,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,Western blot和Q-PCR法检测NLRP3、caspase-1、IL-1β、Bax和Bcl-2的表达,流式细胞术和DAPI染色检测细胞凋亡,活性氧(ROS)和线粒体ROS(mtROS)试剂盒检测ROS和mtROS水平,使用NLRP3 siRNA及ROS和mtROS特异性抑制剂(NAC和Mito-TEMPO)后,观察上述结果的变化。结果 PM2.5可引起HAECs细胞分泌IL-1β和IL-18增加,释放MDA和LDH增多,促进细胞凋亡,并呈现剂量依赖关系;PM2.5可诱导HAECs细胞caspase-1和IL-1β表达增加,还可使HAECs细胞的ROS和mtROS水平显著升高;使用NLRP3 siRNA以及ROS和mtROS的抑制剂可明显抑制上述效应。结论 PM2.5通过诱导HAECs细胞氧化应激而活化NLRP3炎症小体,进一步引起细胞炎性反应和凋亡。 展开更多

关键词 PM2.5 NLRP3炎症小体 人主动脉内皮细胞 氧化应激 细胞凋亡

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小檗碱活化AMPK-eNOS减轻油酸所致人主动脉内皮细胞损伤 被引量：6

11

作者 周慧 刘敬 +8 位作者 侯文锋 王尧清 张文彦 许波 马成俊 李忌 孟庆国 孙喜灵 王振华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期213-219,共7页

目的:考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法:以体外培养人主动脉内皮细胞系(human aorta endothelial cells,HAEC)为受试对象;分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine mo... 目的:考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法:以体外培养人主动脉内皮细胞系(human aorta endothelial cells,HAEC)为受试对象;分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)激活剂(AICAR)或抑制剂(Compound C)处理HAEC;采用油红O染色法观察细胞内脂滴合成;采用比色法检测细胞内甘油三酯、总胆固醇含量,硝酸还原酶法检测NO的水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐探针检测细胞内总活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western Blotting检测细胞总AMPK、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及其磷酸化(p-AMPK、p-eNOS)水平。结果:油酸可浓度依赖性地抑制细胞增殖,小檗碱组各项指标较正常对照组无显著性差异,油酸联合小檗碱组的细胞活性较油酸组明显好转(P<0.01)。与正常对照组比较,油酸组的脂质浸润程度明显,油酸在不同浓度下使内皮细胞的脂质含量呈剂量依赖性增加,加入小檗碱可明显减少这种脂质堆积。油酸组的NO水平较正常对照组明显减少,小檗碱能显著抑制油酸所致的内皮NO水平的减少,并且减少由于油酸所致的ROS水平的升高;油酸抑制了AMPK的活化,使p-AMPK和p-eNOS的蛋白水平明显降低(P<0.01);小檗碱可明显逆转油酸所致AMPK和eNOS磷酸化水平下降,Compound C可拮抗其作用。结论:小檗碱可减轻油酸所致血管内皮细胞损伤,或与其活化AMPK/eNOS信号相关。 展开更多

关键词 小檗碱 油酸 单磷酸腺苷活化蛋白激酶 内皮型一氧化氮合酶 人主动脉内皮细胞

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胰高糖素样肽-1改善晚期糖基化终末产物诱导人主动脉内皮细胞铁死亡的机制研究 被引量：1

12

作者 胡珂昕 唐珑佳 +6 位作者 章辉 叶潇 沃恩康 项婷婷 何泳愉 马淑敏 武晓泓 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期409-415,共7页

目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGE)诱导人主动脉内皮细胞(HAEC)铁死亡的作用及可能机制。方法将HAEC分为6组:对照组、AGE组、AGE+铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、AGE+GLP-1(7~37)组、AGE+GLP-1(9~36)组、AGE+GLP... 目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGE)诱导人主动脉内皮细胞(HAEC)铁死亡的作用及可能机制。方法将HAEC分为6组:对照组、AGE组、AGE+铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、AGE+GLP-1(7~37)组、AGE+GLP-1(9~36)组、AGE+GLP-1(28~36)组。每组设置3个平行组。培养48 h后,试剂盒检测细胞活力及丙二醛(MDA)含量,实时荧光定量聚合酶链反应检测铁死亡相关基因[前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]mRNA表达水平,Western blotting法检测细胞GPX4、ACSL4、苏氨酸蛋白激酶(LKB1)、磷酸化LKB1(p-LKB1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p‐AMPK)蛋白水平。组间比较采用单因素方差分析和t检验。结果与对照组相比,AGE组细胞线粒体出现形态异常,且显著抑制细胞活力(P<0.05),AGE+Fer-1组细胞活力明显回升(P<0.05)。AGE组铁死亡正向调控基因PTGS2 mRNA水平上调(P<0.05),ACSL4 mRNA水平表达升高(P<0.05),而负向调控基因GPX4 mRNA水平表达下调(P<0.05),且上述基因表达在AGE+Fer-1组均被逆转(P<0.05)。与AGE组相比较,GLP-1及其小分子片段组HAEC细胞活力均明显升高(P<0.05),细胞内MDA含量减少,脂质过氧化程度减轻(均P<0.05)。铁死亡负调控蛋白GPX4表达上调(P<0.05),铁死亡正调控蛋白ACSL4表达下调(均P<0.05),p‐LKB1和p‐AMPK蛋白显著增加(均P<0.05)。结论GLP-1可以减少AGE诱导的HAEC铁死亡,其机制可能与激活LKB1/AMPK信号通路有关。 展开更多

关键词 糖基化终产物 高级 胰高糖素样肽-1 人主动脉内皮细胞 铁死亡

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姜黄素减轻氧化型低密度脂蛋白诱导的人主动脉内皮细胞损伤 被引量：5

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作者 胡勇 苏晓红 +3 位作者 朱火兰 张凌霄 刘飞 刘仲伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1359-1364,共6页

目的:观察姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的作用及分子机制。方法:以不同浓度姜黄素预处理体外培养的HAECs,再以ox-LDL对细胞进行干预。MTT法和Ed U法评估细胞增殖能力;ELISA法对培养液中白细胞... 目的:观察姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的作用及分子机制。方法:以不同浓度姜黄素预处理体外培养的HAECs,再以ox-LDL对细胞进行干预。MTT法和Ed U法评估细胞增殖能力;ELISA法对培养液中白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGFβ1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)以及分泌型晚期糖基化终产物受体(sRAGE)浓度进行检测;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)评估过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的结合活性;Western blot法检测HAECs中磷酸化PPARγ、血红素氧合酶-1(HO-1)、HMGB1、IL-6、TGFβ1和RAGE的表达水平。结果:ox-LDL处理的HAECs细胞活力和增殖能力下降,细胞内PPARγ/HO-1信号被抑制,其下游HMGB1/RAGE炎症通路被激活,细胞分泌的IL-6、TGFβ1、HMGB1以及sRAGE浓度显著增加。不同浓度姜黄素预处理可激活ox-LDL诱导的HAECs内PPARγ/HO-1信号通路,从而抑制下游HMGB1/RAGE炎症通路,降低IL-6、TGFβ1、HMGB1以及sRAGE炎症因子水平。结论:ox-LDL能够通过抑制PPARγ/HO-1而激活HMGB1/RAGE炎症通路造成HAECs损伤。姜黄素则能够通过活化PPARγ/HO-1通路抑制炎症反应,减轻ox-LDL对HAECs的损伤。 展开更多

关键词 姜黄素 人主动脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ

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内质网应激蛋白CHOP-10在缺血缺氧诱导人主动脉内皮细胞损伤中的作用 被引量：5

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作者 滕林 杨伟 +6 位作者 周飞 姜玉蓉 彭家琴 曹春雨 李松 丁家望 杨俊 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期245-250,共6页

目的探讨人主动脉内皮细胞(HAEC)在缺血缺氧刺激下内质网应激(ERS)标志蛋白C/EBP同源蛋白10(CHOP-10)的表达变化及意义,并观察阿托伐他汀对上述过程的影响。方法将传代培养的HAEC分为正常对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧+CHOP-10基因沉默... 目的探讨人主动脉内皮细胞(HAEC)在缺血缺氧刺激下内质网应激(ERS)标志蛋白C/EBP同源蛋白10(CHOP-10)的表达变化及意义,并观察阿托伐他汀对上述过程的影响。方法将传代培养的HAEC分为正常对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组以及缺血缺氧+阿托伐他汀组(0.l mol/L、1.0 mol/L、10.0mol/L),缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组采用CHOP-10 shRNA下调CHOP-10的基因表达;24 h后采用RT-PCR法检测细胞中CHOP-10的基因表达,Western blot法检测CHOP-10、Caspase-3和Caspase-8的蛋白水平;采用ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;采用CCK8法测定细胞增殖活力。结果与正常对照组相比,HAEC在缺血缺氧损伤时CHOP-10表达明显升高(P<0.01),细胞分泌炎性因子IL-6及TNF-α增加(P<0.01),凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达增加(P<0.01),细胞增殖活力明显下降(P<0.01)。阿托伐他汀能呈浓度依赖性地抑制HAEC CHOP-10表达,而缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组或缺血缺氧+阿托伐他汀组,炎性介质IL-6、TNF-α的分泌也相应减少,细胞凋亡下降,增殖活力明显增加(P<0.01)。结论缺血缺氧损伤可引起血管内皮细胞发生ERS及炎症反应,导致细胞增殖活力下降,凋亡增加,CHOP-10基因沉默或应用阿托伐他汀干预可减轻缺血缺氧时ERS及炎症反应而对血管内皮细胞产生保护作用。 展开更多

关键词 C/EBP同源蛋白10 人主动脉内皮细胞 内质网应激 动脉粥样硬化

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高糖高脂对人主动脉内皮细胞的影响及津力达联合通心络的干预作用

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作者 位庚 石梦莹 +2 位作者 孟令华 高伟聪 高会茹 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期2947-2951,共5页

目的观察高糖高脂诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的机制及津力达联合通心络的保护作用。方法采用高糖高脂诱导HAECs损伤,建立细胞损伤模型,将HAECs随机分为:空白(Normol)组、模型(Model)组、津力达(JLD)组、通心络(TXL)组、津力达联... 目的观察高糖高脂诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的机制及津力达联合通心络的保护作用。方法采用高糖高脂诱导HAECs损伤,建立细胞损伤模型,将HAECs随机分为:空白(Normol)组、模型(Model)组、津力达(JLD)组、通心络(TXL)组、津力达联合通心络(JLD+TXL)组。检测各组细胞生存活性、细胞上清液内皮素(ET)-1、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、细胞内活性氧簇(ROS)荧光强度、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达。结果与Normal组相比,Model组细胞生存活性、细胞上清液中SOD活性、细胞eNOS蛋白表达显著下调,上清液ET-1、MDA含量明显上升,ROS荧光强度显著增强(P<0.01);与Model组相比,3个干预组细胞上清液ET-1含量显著下降,细胞eNOS蛋白表达明显上调(P<0.01),TXL和JLD+TXL组细胞生存活性、细胞上清液SOD活性显著上升,细胞ROS荧光强度和上清液MDA含量显著下降(P<0.05,P<0.01);与JLD组相比,TXL组和JLD+TXL组细胞上清液ET-1含量显著下降,细胞eNOS蛋白表达明显上调,细胞上清液SOD活性显著上升(P<0.01),JLD+TXL组细胞生存活性显著上升,细胞上清液MDA含量显著下降,细胞ROS荧光强度显著下降(P<0.01);与TXL组相比,JLD+TXL组细胞上清液ET-1含量显著下降,SOD活性显著上升,细胞eNOS蛋白表达明显上调(P<0.01)。结论高糖高脂可诱导HAECs功能损伤,津力达联合通心络能起到保护作用,其保护机制可能与减轻细胞氧化应激反应有关。 展开更多

关键词 高糖高脂 氧化应激 人主动脉内皮细胞 津力达 通心络

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熊果酸减轻高糖高脂诱导的人主动脉内皮细胞损伤 被引量：4

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作者 刘晓玲 宋振蓉 +3 位作者 付媛 陈敏 师锐赞 张轩萍 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第5期522-531,共10页

目的:探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAEC)高糖高脂损伤的影响及机制。方法:MTT法选取合适的高糖和棕榈酸钠(sodium palmitate,SPA)损伤浓度以及UA预孵浓度。采用试剂盒检测NO、ROS的... 目的:探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAEC)高糖高脂损伤的影响及机制。方法:MTT法选取合适的高糖和棕榈酸钠(sodium palmitate,SPA)损伤浓度以及UA预孵浓度。采用试剂盒检测NO、ROS的含量,乳酸脱氢酶(LDH)的释放率以及抗氧化酶包括总超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。Western blot法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)、半胱天冬酶-1(caspase-1)以及GSDMD的蛋白表达情况。Hoechst33342联合PI荧光染色检测细胞膜的完整状态以探讨焦亡发生情况。观察UA对HAEC的保护作用。结果:预孵UA(1μmol/L和5μmol/L)可以减轻高糖高脂(30 mmol/L GLU+0.1 mmol/L SPA)造成的HAEC损伤,提升HAEC活力,减轻氧化应激损伤,增加NO的释放和eNOS的蛋白表达,减少黏附分子的蛋白表达,减少细胞焦亡。结论:UA可能通过减轻高糖高脂诱导的HAEC氧化应激反应,抑制细胞焦亡的发生,减轻内皮细胞损伤。 展开更多

关键词 熊果酸 人主动脉内皮细胞 高糖高脂 氧化应激 焦亡

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miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响 被引量：4

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作者 莫倩 李丹 凌文华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1187-1191,共5页

目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:... 目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:转染48 h后,miR-18a mimics组miR-18a表达为对照组的608倍(P<0.05);miR-18a inhibitor组miR-18a表达降低至对照组的31%(P<0.05)。与对照组相比,miR-18a mimics转染后迁移至Transwell小室下层的内皮细胞数目和毛细血管管腔形成数目分别减少60%和52%(P<0.01);而miR-18a inhibitor转染后分别增加100%(P<0.05)和84%(P<0.01),细胞黏附能力增加43%(P<0.05)。结论:miR-18a的表达水平与人主动脉内皮细胞的血管生成能力相关,可能成为血管性疾病治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 miR-18a 人主动脉内皮细胞 血管生成

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阿司匹林对人主动脉血管内皮细胞炎性损伤的保护作用 被引量：4

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作者 石廷雨 嵇云鹏 +6 位作者 徐旖旎 罗红 林丹 潘迪 陈妍 张彦燕 沈祥春 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期1835-1838,共4页

目的:研究阿司匹林(aspirin,Asp)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)损伤的保护作用,并进一步阐明其对一氧化氮合酶(NOS)及血管内皮生长因子(VEGF)及其相关受体信号的调控。... 目的:研究阿司匹林(aspirin,Asp)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)损伤的保护作用,并进一步阐明其对一氧化氮合酶(NOS)及血管内皮生长因子(VEGF)及其相关受体信号的调控。方法:LPS建立HAECs损伤模型。苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态;MTT法、划痕实验分析HAECs损伤修复能力;ELISA测定一氧化氮(NO)含量;Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、VEGF和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)蛋白表达。结果 :给药12 h后Asp明显改善LPS(5 mg·L^(-1))导致的细胞损伤、提高修复能力(P<0.05),并上调NO分泌量及VEGF、VEGFR-2的蛋白表达(P<0.01);升高eNOS蛋白的表达(P<0.01)。而给药24 h后阿司匹林显著下调LPS导致的NO分泌量及iNOS、VEGF、VEGFR-2的蛋白表达升高,同时升高eNOS蛋白的表达(P<0.01)。结论:阿司匹林对LPS诱导的血管内皮细胞炎性损伤的保护作用与调节NOS/NO和VEGF及其受体的动态平衡密切相关。 展开更多

关键词 阿司匹林 脂多糖 人主动脉内皮细胞 炎症 一氧化氮合酶 血管内皮生长因子

原文传递

左卡尼汀通过内质网应激ATF6通路抑制高糖诱导的HAECs凋亡 被引量：4

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作者 高宏民 李尚俭 +2 位作者 朱火兰 杨瑜 刘仲伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1449-1454,共6页

目的:探讨左卡尼汀对高糖诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)凋亡的影响及相关分子机制。方法:以高糖培养基培养HAECs并诱导其发生凋亡,同时以不同浓度(50、100和200μmol/L)的左卡尼汀对HAECs进行处理。以MTT法对细胞活力进行检测;Hoechst ... 目的:探讨左卡尼汀对高糖诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)凋亡的影响及相关分子机制。方法:以高糖培养基培养HAECs并诱导其发生凋亡,同时以不同浓度(50、100和200μmol/L)的左卡尼汀对HAECs进行处理。以MTT法对细胞活力进行检测;Hoechst 33258染色及流式细胞术评估细胞凋亡情况;比色法对HAECs的caspase-3活性进行检测;Western blot法对细胞内质网应激信号通路蛋白及磷酸化水平进行分析。结果:高糖培养诱导HAECs产生凋亡并显著抑制细胞活力。高糖培养的HAECs中产生内质网应激,其蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、肌醇需酶1(IRE1)及活化转录因子6(ATF6)信号通路均被显著激活,能够通过下游caspase-4/3级联瀑布反应诱导细胞凋亡。然而,左卡尼汀能够显著减少高糖诱导的HAECs细胞凋亡,使细胞存活率升高,且呈现出浓度依赖性。左卡尼汀可显著降低高糖培养HAECs诱发的内质网应激,通过下调位点1蛋白酶(S1P)及位点2蛋白酶(S2P)表达降低其对ATF6剪切形成的促凋亡因子ATF6 p50的水平;而左卡尼汀并未对PERK及IRE1信号通路活性表现出抑制作用。结论:左卡尼汀能够抑制高糖对HAECs凋亡的诱导作用,其作用机制可能为抑制内质网应激相关的ATF6信号通路。 展开更多

关键词 左卡尼汀 内质网应激 活化转录因子6 细胞凋亡 人主动脉内皮细胞

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微小RNA-142-3p靶向Rictor诱导动脉粥样硬化相关的内皮细胞凋亡 被引量：3

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作者 肖丽 刘萍 秦冰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1928-1937,共10页

目的:探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程中人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影响及作用机制。方法:HAECs经氧化型低密度脂蛋白(oxi⁃dized low-density lipoprotein,o... 目的:探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程中人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影响及作用机制。方法:HAECs经氧化型低密度脂蛋白(oxi⁃dized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用后,采用RT-qPCR检测miR-142-3p的表达水平。Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(flow cytometry,FCM)和caspase-3活性检测试剂盒检测细胞凋亡。使用TargetScan等生物信息学软件预测miR-142-3p的潜在靶基因,双萤光素酶报告基因实验验证miR-142-3p与Rictor mRNA 3′-UTR直接靶向结合。结果:在ox-LDL诱导HAECs凋亡过程中miR-142-3p表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。过表达miR-142-3p促进HAECs凋亡,相反,抑制miR-142-3p的表达水平可以部分程度缓解ox-LDL介导的内皮细胞(endothelial cells,ECs)凋亡。进一步研究发现,Rictor为miR-142-3p的下游靶基因,沉默Rictor基因抑制了miR-142-3p抑制物(miR-142-3p inhibitor)的抗凋亡作用。Akt/eNOS信号通路参与了miR-142-3p对ECs凋亡的调控。结论:抑制miR-142-3p表达可促进靶基因Rictor表达并激活Akt/eNOS信号通路从而发挥抗凋亡的内皮保护作用。 展开更多

关键词 微小RNA-142-3p 人主动脉内皮细胞 细胞凋亡 RICTOR 动脉粥样硬化

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