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氯原酸体外抗病毒作用研究 被引量：75
1
作者 胡克杰 孙考祥 +1 位作者 王璟璐 谢丽萍 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2001年第6期430-432,共3页
目的　研究中药金银花主要有效成分氯原酸的体外抗病毒作用。方法　应用体外细胞培养及抗病毒中和实验观察氯原酸对常见呼吸道病毒的抑制作用。结果　氯原酸浓度分别为 0 .0 5mg/ml、0 .1mg/ml、0 .4mg/ml、0 .8mg/ml时 ,可分别体外抑... 目的　研究中药金银花主要有效成分氯原酸的体外抗病毒作用。方法　应用体外细胞培养及抗病毒中和实验观察氯原酸对常见呼吸道病毒的抑制作用。结果　氯原酸浓度分别为 0 .0 5mg/ml、0 .1mg/ml、0 .4mg/ml、0 .8mg/ml时 ,可分别体外抑制合胞病毒、柯萨奇B3、腺病毒 7型、腺病毒 3型和柯萨奇B5型。 展开更多
关键词 氯原酸 hep-2细胞 抗病毒作用 呼吸道病毒感染 中医药治疗 金银花 实验
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金银花中氯原酸在体外抗病毒作用的实验研究 被引量：49
2
作者 胡克杰 王跃红 王栋 《中医药信息》 2010年第3期27-28,共2页
目的:研究中药金银花主要有效成分氯原酸的体外抗病毒作用。方法:应用体外细胞培养及抗病毒中和试验观察氯原酸对常见呼吸道病毒的抑制作用。结果:氯原酸浓度为0.05mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1时... 目的:研究中药金银花主要有效成分氯原酸的体外抗病毒作用。方法:应用体外细胞培养及抗病毒中和试验观察氯原酸对常见呼吸道病毒的抑制作用。结果:氯原酸浓度为0.05mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1时,可分别体外抑制合胞病毒、柯萨奇B3、腺病毒7型、腺病毒3型和柯萨奇B5型。结论:氯原酸对常见呼吸道病毒有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 金银花 hep-2细胞 体外抑病毒
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重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞增殖和HIF-1α、VEGF表达的影响 被引量：24
3
作者 邓碧凡 廖敏 +4 位作者 邱荣敏 高波 张云桂 马燕 龙剑文 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第11期1613-1617,共5页
目的研究重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞增殖及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅰ对细胞增殖的影响,实时定量PCR(RT-PCR)法检测低氧条件下重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞HIF-1αmRNA、... 目的研究重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞增殖及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅰ对细胞增殖的影响,实时定量PCR(RT-PCR)法检测低氧条件下重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞HIF-1αmRNA、VEGF mRNA表达的影响。采用Western blot法检测低氧条件下,重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞VEGF、HIF-1α、信号传导与转录激活因子3(STAT-3),磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT-3)蛋白表达的影响。结果重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用;其中,1.5、3、6μg/ml浓度组重楼皂苷Ⅰ可下调低氧Hep-2细胞HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。同时,重楼皂苷Ⅰ抑制了STAT-3、p-STAT-3的表达。结论重楼皂苷Ⅰ能抑制低氧条件下喉癌Hep-2细胞增殖和HIF-1α、VEGF的表达,可能与其下调STAT-3表达及抑制STAT-3的磷酸化有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅰ hep-2细胞 细胞增殖 HIF-1Α VEGF
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无花果叶抗单纯疱疹病毒的实验研究 被引量：22
4
作者 王桂亭 王皞 +3 位作者 宋艳艳 贾存显 王志玉 许洪芝 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期754-756,共3页
目的 :为了研究并开发无花果叶的抗病毒性质 ,对无花果叶提取物抗单纯疱疹病毒 (HSV)的药效进行了实验研究。方法 :利用水提取无花果叶中的有效成分 ,然后在Hep 2、BHK2 1 和原代兔肾 (PRK)三种细胞上研究其抗病毒作用。结果 :无花果... 目的 :为了研究并开发无花果叶的抗病毒性质 ,对无花果叶提取物抗单纯疱疹病毒 (HSV)的药效进行了实验研究。方法 :利用水提取无花果叶中的有效成分 ,然后在Hep 2、BHK2 1 和原代兔肾 (PRK)三种细胞上研究其抗病毒作用。结果 :无花果叶水提取物在Hep 2、BHK2 1 和PRK细胞上均有明显的抗HSV 1作用 ,对HSV 1的最小有效浓度 (MTC)为 0 5mg/ml,而且毒性低 ,最大无毒浓度 (TDO)为 1 5mg/ml,治疗指数 (TI)为 30 0。并有直接杀灭HSV 1的作用。结论 :无花果叶具有抗HSV 1的作用 ,在医药食品领域的应用具有广阔的前景。 展开更多
关键词 无花果叶 HSV-1 单纯疱疹病毒 PRK 实验研究 hep-2 细胞 无毒 医药 开发
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穿心莲提取物体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究 被引量：11
5
作者 钟琼 杨占秋 +2 位作者 赵玲敏 王薇 肖红 《湖北中医学院学报》 2005年第2期23-25,共3页
目的:了解穿心莲提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抑制作用。方法:通过光镜观察不同药物浓度下RSV对Hep2的致病作用(CPE),四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测穿心莲提取物对RSV的抑制和对RSV感染Hep2细胞的保护作用。结果:穿心莲提取物对RS... 目的:了解穿心莲提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抑制作用。方法:通过光镜观察不同药物浓度下RSV对Hep2的致病作用(CPE),四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测穿心莲提取物对RSV的抑制和对RSV感染Hep2细胞的保护作用。结果:穿心莲提取物对RSV无直接灭活作用,亦不能阻止RSV的吸附,各药物浓度均出现典型的CPE;穿心莲提取物有抑制RSV生物合成的作用,其半数抑制浓度(IC50)是1.52μg/ml,治疗指数为36,且随着药物浓度的增加,CPE特征明显逐渐减弱,病毒滴度逐渐降低,而病毒抑制率则明显增高。结论:穿心莲提取物在体外可能是通过抑制生物合成来发挥抗RSV作用。 展开更多
关键词 穿心莲提取物 病毒作用 呼吸道合胞病毒 四甲基偶氮唑盐 体外抑制作用 药物浓度 半数抑制浓度 生物合成 hep-2 RSV感染 致病作用 光镜观察 保护作用 比色检测 灭活作用 治疗指数 病毒滴度 CPE 抑制率
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鳞癌细胞株放射敏感性与端粒酶活性及端粒长度变化的关系 被引量：10
6
作者 骆志国 周福祥 +4 位作者 周云峰 谢丛华 代静 潘东风 刘诗权 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期232-235,共4页
目的探索放射抗拒鳞癌细胞株放射敏感性的改变与端粒酶活性、端粒长度变化的关系。方法以人喉鳞癌细胞株Hep2为实验对象,用γ射线反复照射获得具有放射抗拒性细胞株Hep2R,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数及端粒酶抑制剂... 目的探索放射抗拒鳞癌细胞株放射敏感性的改变与端粒酶活性、端粒长度变化的关系。方法以人喉鳞癌细胞株Hep2为实验对象,用γ射线反复照射获得具有放射抗拒性细胞株Hep2R,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数及端粒酶抑制剂AZT(azidothymidine,叠氮胸苷)作用后的变化,用TRAP-ELISA法测定端粒酶活性(OD值),Southernblotting法分析端粒平均长度(TRF),比较端粒酶活性、端粒平均长度的变化。结果辐射诱导出一个具有放射抗拒性的Hep-2R细胞株,并已稳定传代培养30代以上且放射抗拒性能稳定,测得其SF2=0.6798、D0=3.24,Hep-2R细胞的端粒酶活性较Hep-2细胞升高(0.982±0.005vs0.604±0.015),端粒长度延长了2倍(11.12kbvs3.76kb),AZT作用后Hep2R细胞株SF2=0.4892、D0=2.51,端粒酶活性下降为0.708±0.011、端粒长度缩短为10.18kb。Hep2细胞对应的参数SF2=0.4148、D0=2.06,AZT作用后Hep2细胞SF2=0.3843、D0=1.81,端粒酶活性下降为0.364±0.003、端粒长度缩短为2.76kb。结论辐射诱导细胞获放射抗拒性后其端粒酶活性升高、端粒平均长度增长,端粒酶抑制剂能通过降低端粒酶活性、缩短端粒长度而对其有增敏效应。 展开更多
关键词 端粒酶活性 放射敏感性 癌细胞株 长度变化 TRAP-ELISA法 hep-2细胞 blotting 端粒酶抑制剂 放射生物学参数 放射抗拒 端粒长度 细胞存活曲线 辐射诱导 实验对象 叠氮胸苷 传代培养 增敏效应 AZT γ射线 OD值 平均 缩短
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miR-135a通过下调SOX2抑制喉癌Hep-2细胞的恶性生物学行为和增强对奥沙利铂的敏感性 被引量：8
7
作者 刘扬帆 屈中玉 +2 位作者 王文亷 孙星 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期955-961,共7页
目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-... 目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-2细胞中miR-135a的表达水平。miR-135 inhibitor转染喉癌Hep-2细胞后,采用CCK-8检测Hep-2细胞活性,集落形成实验检测Hep-2细胞集落形成能力,Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭及迁移能力,WB实验检测Hep-2细胞中SOX2蛋白的表达水平。0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L的奥沙利铂处理已转染miR-135 inhibitor的Hep-2细胞,CCK-8实验检测Hep-2细胞的增殖活性,Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率。采用miR-135a inhibitor质粒、对照pcDNA空载体(SOX2-Con)质粒、pcDNA-SOX2(SOX2-OE)质粒共转染Hep-2细胞,构建miR-135a inhibitor+SOX2-Con组和miR-135a inhibitor+SOX2-OE组,检测此2组细胞的增殖活性、集落形成能力、侵袭及迁移能力。结果:与癌旁组织比较,喉癌组织中miR-135a表达水平显著升高(P<0.01);与正常NHP细胞比较,miR-135a在Hep-2细胞中表达水平明显上调(P<0.01);转染miR-135a inhibitor导致Hep-2细胞中miR-135a表达水平明显降低(P<0.01)。敲降miR-135a明显降低Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移、侵袭和SOX2表达(均P<0.01);明显增强细胞对奥沙利铂敏感性(P<0.01);与miR-135a inhibitor+SOX2-Con组比较,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移与侵袭能力均明显增加(均P<0.01);同时,用不同浓度的奥沙利铂处理此2组细胞,相对于miR-135a inhibitor+SOX2-Con组,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞存活率显著升高(P<0.01)。结论:敲降miR-135a可能通过下调转录因子SOX2的表达抑制Hep-2细胞的恶性生物学行为,并增强其对奥沙利铂的敏感性。 展开更多
关键词 喉癌 hep-2细胞 miR-135a SOX2 奥沙利铂
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MTA2对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：7
8
作者 陈磊 郑树艳 黄永望 《中国实验诊断学》 2015年第6期883-885,共3页
目的研究转移相关基因2(Metastasis-associated gene 2,MTA2)对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用化学合成的针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)下调该基因的表达,采用Real timePCR(RT-PCR)和Western blot检测转染效... 目的研究转移相关基因2(Metastasis-associated gene 2,MTA2)对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用化学合成的针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)下调该基因的表达,采用Real timePCR(RT-PCR)和Western blot检测转染效果,通过MTT、细胞划痕实验和Transwell法分别检测MTA2对Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果将siRNA-MTA2转染入Hep-2后,Hep-2细胞中MTA2mRNA和蛋白表达水平都明显降低,细胞增殖能力显著降低,细胞的迁移和侵袭能力显著降低。结论在喉癌细胞系Hep-2中MTA2与恶性增殖和侵袭性相关,有望成为喉癌早期诊断、分子治疗的靶点。 展开更多
关键词 喉癌 RNA 小分子干扰 转移相关基因2 hep-2细胞
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姜黄素诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响 被引量：6
9
作者 孙立群 陈鸥 +1 位作者 赵明 韩岚 《中国实验诊断学》 2006年第1期45-46,共2页
目的探讨姜黄素对Hep-2(人喉癌细胞株)细胞诱导分化机制,为喉癌治疗提供理论依据。方法应用MTT(塞唑兰)比色法和流式细胞仪检测Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和凋亡率,并通过电子显微镜观察经姜黄素诱导分化后的亚细胞结... 目的探讨姜黄素对Hep-2(人喉癌细胞株)细胞诱导分化机制,为喉癌治疗提供理论依据。方法应用MTT(塞唑兰)比色法和流式细胞仪检测Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和凋亡率,并通过电子显微镜观察经姜黄素诱导分化后的亚细胞结构改变。结果姜黄素对Hep-2细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性,流式细胞仪分析,G1期细胞增多,S期细胞减少,C2/M期细胞相对增多,亚细胞结构、细胞空化,染色质趋边凝集。结论姜黄素能够抑制Hep-2细胞增殖,阻止G1期细胞向S期的进程,促进Hep-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 姜黄素 hep-2细胞 细胞周期 凋亡
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PDCD4基因在过氧化氢诱导喉癌细胞凋亡中的作用 被引量：6
10
作者 李林 陈晓锐 +3 位作者 宋莎莎 逯素梅 张国栋 李建峰 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期72-76,共5页
目的探讨过氧化氢诱导喉癌细胞Hep-2凋亡过程中PDCD4基因表达的变化。方法以体外培养的喉癌细胞Hep-2为实验材料,不同浓度的过氧化氢作用于Hep-2细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,采用吖啶橙染色、Ho33342/PI荧光双染进行形态学观... 目的探讨过氧化氢诱导喉癌细胞Hep-2凋亡过程中PDCD4基因表达的变化。方法以体外培养的喉癌细胞Hep-2为实验材料,不同浓度的过氧化氢作用于Hep-2细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,采用吖啶橙染色、Ho33342/PI荧光双染进行形态学观察,RT-PCR及Western blot检测PDCD4 mRNA水平及蛋白表达的变化,评价在过氧化氢诱导喉癌细胞Hep-2凋亡过程中PDCD4基因的作用。结果过氧化氢(200μmol/L)作用Hep-2细胞24h,能够显著抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡,同时引起pdcd4 mRNA水平显著上调,PDCD4蛋白表达显著增加。结论本研究首次报道PDCD4基因可能在氧化胁迫诱导喉癌细胞凋亡中起关键作用。 展开更多
关键词 PDCD4 hep-2 细胞凋亡 氧化应激 喉癌
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人呼吸道合胞病毒感染不同细胞基因的差异表达分析 被引量：1
11
作者 万常青 程宁宁 +5 位作者 苏彦斌 李辰霄 付远辉 何金生 高博 杜琳 《微生物学免疫学进展》 CAS 2023年第5期11-16,共6页
目的 采用生物信息学方法,筛选人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)感染人喉表皮样癌细胞(human larynx epidermoid carcinoma cells,HEp-2)与人肺(支气管)上皮细胞(human normal lung epithelial cell,BEAS-2B)... 目的 采用生物信息学方法,筛选人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)感染人喉表皮样癌细胞(human larynx epidermoid carcinoma cells,HEp-2)与人肺(支气管)上皮细胞(human normal lung epithelial cell,BEAS-2B)后均具有表达差异的基因,为了解宿主与RSV之间的相互作用提供线索。方法 从基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中下载RSV感染HEp-2与BEAS-2B细胞的转录组数据,运用R软件进行转录组数据差异表达分析,筛选差异表达基因。利用DAVID数据库对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析,采用STRING数据库网站构建蛋白共作网络(Protein-Protein Interaction Network Analysis,PPI),并运用Cytoscape软件中的CytoHubba插件寻找差异表达基因中的关键基因。最后,采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)对RSV感染HEp-2与BEAS-2B细胞后均差异表达的基因进行验证。结果 筛选出135个RSV感染HEp-2与BEAS-2B细胞后均差异表达的基因,其中有132个上调基因,3个下调基因。这些基因主要富集在炎症反应和肿瘤坏死因子信号通路。CytoHubba评分确定2个关键基因CTGF和IL-11,qRT-PCR结果显示,2种细胞被RSV感染后,CTGF与IL-11基因表达水平均显著增强。结论 本研究通过对基因转录组数据的分析以及实验验证,发现CTGF和IL-11基因在RSV感染的HEp-2与BEAS-2B细胞中均表达显著增强,与转录组数据差异表达分析结果一致,提示2个基因参与了RSV感染过程,CTGF和IL-11是影响RSV复制的宿主基因,该发现有助于找到防治RSV的新靶点,为RSV防治策略提供新思路。 展开更多
关键词 人呼吸道合胞病毒 hep-2细胞 BEAS-2B细胞 差异表达基因 生物信息学 转录组学 实时定量PCR
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槲皮素对人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2的作用 被引量：4
12
作者 刘荣耀 王家东 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期169-171,共3页
目的:探讨槲皮素对体外培养的人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2生长的影响及作用机制,研究槲皮素治疗喉癌的可行性。方法:采用MTT法?倒置相差显微镜及流式细胞仪观察槲皮素对人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2的作用情况。结果:槲皮素呈时间和浓度依... 目的:探讨槲皮素对体外培养的人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2生长的影响及作用机制,研究槲皮素治疗喉癌的可行性。方法:采用MTT法?倒置相差显微镜及流式细胞仪观察槲皮素对人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2的作用情况。结果:槲皮素呈时间和浓度依赖性抑制Hep-2细胞的增殖,使Hep-2细胞贴壁能力减弱,形态变小变圆,悬浮细胞和颗粒增加,引起Hep-2凋亡,细胞周期阻滞于S期。结论:槲皮素能够抑制喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2的生长和增殖,其抑制作用与细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 喉肿瘤 癌 鳞状细胞 槲皮素 hep-2
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携EGFP的STAT3载体构建、表达及其对HEP-2细胞的增殖抑制作用 被引量：3
13
作者 郭慧 杜波 +1 位作者 李晓明 路秀英 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第3期18-20,共3页
目的构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用。方法合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamH... 目的构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用。方法合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染HEP-2细胞。流式细胞仪、RT-PCR、免疫印迹、MTT法检测HEP-2细胞中STAT3的表达及该细胞的增殖情况。结果成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染HEP-2后可显著抑制细胞STAT3 mRNA及蛋白的表达,细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。结论用pGPU6/EGFP/Neo载体,针对不同靶位点构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制喉癌细胞增殖及其STAT3的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 转录激活因子3 喉肿瘤 hep-2细胞
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我国EAEC分离株对HEp-2细胞的粘附特征及集聚性粘附相关基因分析 被引量：5
14
作者 刘学通 陈强 +3 位作者 孙晖 赵爱兰 徐建国 熊衍文 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第12期893-896,共4页
目的了解我国EAEC分离株的HEp-2细胞粘附特征、毒力基因和集聚性粘附基因情况,探讨建立PCR检测方法的可能性。方法选择31株分离自腹泻患者粪便的大肠埃希菌,采用HEp-2细胞粘附试验,获得菌株的粘附表型;采用PCR方法检测毒力基因(astA、a... 目的了解我国EAEC分离株的HEp-2细胞粘附特征、毒力基因和集聚性粘附基因情况,探讨建立PCR检测方法的可能性。方法选择31株分离自腹泻患者粪便的大肠埃希菌,采用HEp-2细胞粘附试验,获得菌株的粘附表型;采用PCR方法检测毒力基因(astA、aggR、pic)及集聚性粘附相关基因(aggA、aafA、agg3A、hdaA)。结果不同菌株在HEp-2细胞粘附试验中表现为不同的粘附表型,所含有的毒力基因及粘附相关基因不同。aggR基因阳性的13株菌中,7株表现为集聚性粘附(AA)表型,其中5株具有集聚性粘附相关基因。此外存在aggR基因阴性但对HEp-2细胞表现为集聚性粘附的非典型EAEC以及具有集聚性粘附相关基因hdaA却表现为对HEp-2细胞不粘附的菌株。结论 EAEC是一类高度异质性大肠埃希菌,HEp-2细胞粘附试验仍然是检测EAEC的"金标准";aggR基因是一种较好的PCR诊断靶基因,在aggR基因的基础上组合其他基因,建立EAEC检测的多重PCR方法具有重要的实际意义。 展开更多
关键词 肠集聚性大肠埃希菌 粘附表型 粘附基因 hep-2细胞
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组蛋白去乙酰化酶6表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞增殖细胞周期和迁移能力的影响 被引量：4
15
作者 袁林林 王峰 +2 位作者 李晟磊 娄卫华 王留兴 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期430-435,共6页
目的检测组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）在喉鳞癌组织中的表达水平，分析其表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、细胞周期分布和细胞迁移的影响，并探讨其可能的分子机制。方法采用免疫组织化学法检测55例喉鳞癌组织和20例癌旁正常喉黏膜组织中... 目的检测组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）在喉鳞癌组织中的表达水平，分析其表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、细胞周期分布和细胞迁移的影响，并探讨其可能的分子机制。方法采用免疫组织化学法检测55例喉鳞癌组织和20例癌旁正常喉黏膜组织中HDAC6蛋白的表达。将HDAC6siRNA和对照siRNA转染喉鳞癌Hep．2细胞，采用Westernblot法鉴定干扰效果。采用细胞计数盒8（CCK8）法、流式细胞术以及Boyden趋化小室法研究HDAC6表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、细胞周期分布和细胞迁移能力的影响。采用Westernblot法检测HDAC6表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞中与细胞增殖、细胞周期和细胞迁移密切相关的蛋白表达水平。结果HDAC6蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率为78．2％，明显高于癌旁正常喉黏膜组织（15．0％，P〈0．001）。HDAC6蛋白的表达与喉鳞癌患者的性别、年龄以及肿瘤分型无关（均P〉0．05），但与喉鳞癌的分化程度、TNM分期以及淋巴结转移有关（均P〈0．05）。HDAC6siRNA能有效下调喉鳞癌Hep-2细胞中HDAC6蛋白的表达，其表达下调能明显抑制Hep．2细胞的增殖，将细胞阻滞在G0／G1期，并降低细胞的迁移能力。HDAC6蛋白表达下调能明显降低Hep-2细胞中细胞周期素D1（cyclinD1）、细胞周期素E（cyclinE）、cdk2和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达，但使p21和E-钙黏蛋白（E—cadherin）的表达升高。结论HDAC6可能在喉鳞癌的发生发展中发挥重要作用，其表达下调介导的喉鳞癌细胞增殖抑制、细胞周期静止和细胞迁移能力的降低，可能与cyclinD1、cyclinE、cdk2和MMP-9蛋白表达的下调以及p21和E—cadherin蛋白表达的上调有关。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶6 喉肿瘤 hep.2细胞 RNA干扰 细胞增殖 细胞周期 细胞运动
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miRNA let-7a调控HMGA2表达抑制喉癌细胞增殖并促进其凋亡的作用机制 被引量：4
16
作者 马丽娟 尹娟 +1 位作者 周恩 肖旭平 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第13期1993-1997,共5页
目的:探讨在喉癌细胞株Hep-2中上调miRNA let-7a的表达对高迁移率族蛋白(high mobility group A,HMGA2)的作用机制以及对喉癌细胞增殖的影响。方法:合成miRNA let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法转染入Hep-2内;分别用流... 目的:探讨在喉癌细胞株Hep-2中上调miRNA let-7a的表达对高迁移率族蛋白(high mobility group A,HMGA2)的作用机制以及对喉癌细胞增殖的影响。方法:合成miRNA let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法转染入Hep-2内;分别用流式细胞术和MTT法检测let-7a高表达对细胞凋亡和增殖的影响;实时荧光PCR(Real-time q PCR)和Western blot检测上调let-7a后对HMGA2表达的影响。结果:本实验将let-7a mimics成功转染入Hep-2内,流式细胞术及MTT法检测显示Hep-2内let-7a的表达上调会抑制喉癌细胞的增殖,促进喉癌细胞的凋亡。RT-q PCR检测显示:let-7a mRNA在空白组和阴性对照组(NC组)的表达水平明显低于实验组(P<0.05);HMGA2 mRNA在空白组、NC组的表达水平明显高于实验组(P<0.01)。Western blot检测细胞中HMGA2蛋白的表达显示:实验组HMGA2蛋白的表达量明显低于空白组和NC组(P<0.01)。上述实验中空白组与NC组之间比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:let-7a能够显著下调HMGA2基因和蛋白的表达,抑制喉癌细胞的增殖,促进其凋亡,为喉癌基因靶向治疗提供坚实的理论基础。 展开更多
关键词 喉癌 hep-2细胞 MIRNA let-7a HMGA2
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靶向血管内皮生长因子的siRNA表达框架对喉癌细胞株Hep-2细胞生长的抑制作用 被引量：4
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作者 陈雄 孔维佳 +3 位作者 董继华 张丹 张甦琳 韩月臣 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期759-763,共5页
目的研究培养Hep-2细胞中,靶向血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的小干扰RNA表达框架(smallinterferenceRNAexpressioncassettes,SECs)对肿瘤细胞生长的影响,检测VEGF基因表达的情况,筛选最佳干扰序列,探讨RNAi... 目的研究培养Hep-2细胞中,靶向血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的小干扰RNA表达框架(smallinterferenceRNAexpressioncassettes,SECs)对肿瘤细胞生长的影响,检测VEGF基因表达的情况,筛选最佳干扰序列,探讨RNAi技术在肿瘤基因治疗中的应用前景。方法根据siRNA靶序列设计原则,设计出VEGF4个位点的干扰序列,然后进行合成,即为siRNA表达框架的下游引物。由于干扰试剂盒中采用RNA介导的U6聚合酶Ⅲ启动子和改良的终止序列,从而在靶细胞内可以高水平及精确地表达siRNA。我们将4个位点的PCR产物分别转染指数生长期的Hep-2细胞,48h开始观察和检测所产生的RNA干扰的效果。结果形态学检测:转染后的1366位点的细胞可见皱缩、变圆并开始脱落,而其他三个位点的细胞形态学上未见明显的改变;逆转录-聚合酶链反应产物进行琼脂糖凝胶电泳,与对照组相比,1366位点细胞VEGFmRNA明显被抑制,吸光度为0·05,而其他三个位点的抑制效果不显著,吸光度分别是0·25、0·30和0·18。Westernblot分析表明:与其他三个位点相比,1366位点的VEGF蛋白表达明显减弱;流式细胞仪检测表明:1366位点转染细胞的凋亡率为43%,而其他三个位点转染细胞的凋亡率改变不明显,分别为8·9%、6·5%和11·2%;本实验重复性强,同样的实验重复三次结果一致。结论研究表明靶向VEGF的1366位点的siRNA表达框架能高效抑制喉癌细胞株Hep-2细胞的生长。 展开更多
关键词 喉肿瘤 癌 鳞状细胞 内皮生长因子 基因 抑制 肿瘤 肿瘤细胞 培养的 SIRNA表达 hep-2细胞 血管内皮生长因子 肿瘤细胞生长 喉癌细胞株
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肾上腺髓质素对于喉癌细胞的增殖作用 被引量：3
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作者 王成元 肖水芳 李学佩 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2005年第6期351-353,共3页
目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对于喉癌细胞系Hep-2的促进增殖作用。方法采用氚胸腺嘧啶(H3-thymidine,H3-TDR)掺入方法观察不同药物作用下ADM对于喉癌细胞系Hep-2增殖的影响。结果在ADM浓度为1×10-10、1×10-9、1... 目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对于喉癌细胞系Hep-2的促进增殖作用。方法采用氚胸腺嘧啶(H3-thymidine,H3-TDR)掺入方法观察不同药物作用下ADM对于喉癌细胞系Hep-2增殖的影响。结果在ADM浓度为1×10-10、1×10-9、1×10-8mol/L时均可以显著促进Hep-2细胞增殖(t=-2654.8、P<0.01,t=-1732.3、P<0.01和t=-836.5、P<0.01),三组浓度的ADM促进Hep-2增殖作用差别有显著性(F=18.5,P<0.01),且有剂量依赖性(r=0.9996,P<0.01)。加入ADM受体阻断剂ADM(22-52)Hep-2细胞的H3-TDR掺入量与单纯ADM孵育组掺入量差别有显著(t=2721.5,P>0.05)。Hep-2细胞经ADM孵育后分别加入丝裂素活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen-acti-vatedproteinkinase/extracellularsignal-regulatedkinase,MAPK/MEK)阻断剂PD098059、蛋白激酶A(proteinkinaseA,PKA)阻断剂H-89、H3-TDR掺入量与单纯ADM刺激组掺入量差别有显著意义(t=2723.8,P<0.01、t=2095.2,P<0.01〉;但加入P38MAPK通路阻断剂SB202190后,H3-TDR掺入量与单纯ADM刺激组差别无显著性。(t=121.83,P>0.05)。结论肾上腺髓质素对于喉癌细胞Hep-2的增殖有促进作用,阻断ADM受体后Hep-2细胞生长受抑制,ADM促进Hep-2细胞生长信号可以通过MEK、PKA通路起作用,未发现p38MAPK参与该作用。 展开更多
关键词 肾上腺髓质素 增殖作用 喉癌细胞系hep-2 hep-2细胞 P38MAPK 细胞外信号调节激酶 丝裂素活化蛋白激酶 PD098059 SB202190 protein M受体阻断剂 ADM 细胞生长 mol/L 剂量依赖性 掺入量 胸腺嘧啶 药物作用 细胞增殖 H-89
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新型拓扑异构酶抑制剂抗肿瘤活性及其机制研究 被引量：4
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作者 陈列松 虞莹 +2 位作者 王攀 王文娟 梁中琴 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期553-562,共10页
目的拓扑异构酶是近年来发现的多种肿瘤化疗的重要靶点,与肿瘤细胞的发生、增殖和发展密切相关。本研究分析两种新型拓扑酶抑制剂的体外抗肿瘤活性,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测两种受试物对人肿瘤细胞增殖的抑制作用;质粒p... 目的拓扑异构酶是近年来发现的多种肿瘤化疗的重要靶点,与肿瘤细胞的发生、增殖和发展密切相关。本研究分析两种新型拓扑酶抑制剂的体外抗肿瘤活性,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测两种受试物对人肿瘤细胞增殖的抑制作用;质粒pBR322解旋反应检测抑制剂对TopoⅠ催化活性的影响,蛋白质印迹法检测细胞中TopoⅠ和TopoⅡ的蛋白表达变化;Hoechst 33258荧光染色、AO荧光染色、彗星实验和流式细胞术等方法观察两种受试物对HEp-2细胞凋亡和细胞周期的影响。结果 MTT法的结果显示,受试物1和2对9种人肿瘤细胞株均有显著的抗肿瘤活性(P<0.05),并呈现浓度依赖性;受试物1和2可抑制TopoⅠ介导的质粒DNA超螺旋的解旋,并且两种受试物都可下调细胞中TopoⅠ、Ⅱ的蛋白表达,P<0.05;Hoechst 33258荧光染色表明受试物可诱导HEp-2细胞凋亡,AO染色也得到相同的结果;彗星实验检测出两种受试物可导致DNA损伤;流式细胞仪检测的结果表明,处理组的细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),并且,受试物1使HEp-2细胞周期在S期和G2/M期发生阻滞(P<0.01),而受试物2使其阻滞在G1期(72h),P<0.05;蛋白质印迹法结果显示促凋亡蛋白Bid、Bax和JNK表达增加(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.01),细胞周期蛋白Cyclin B1和Cyclin D1表达减少(P<0.05)。结论受试物1和2可以抑制HEp-2细胞的生长,这可能与以下机制有关:通过抑制TopoⅠ的催化活性并下调细胞中TopoⅠ和TopoⅡ的表达;调控凋亡相关基因的表达,诱导其凋亡;造成肿瘤细胞周期紊乱,促进凋亡。 展开更多
关键词 拓扑酶抑制剂 人肝癌hep-2细胞 细胞凋亡 细胞周期
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不同残差网络模型的HEp-2细胞荧光图像分类比较
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作者 许晗 《襄阳职业技术学院学报》 2023年第6期100-104,共5页
对人的喉癌上皮细胞(HEp-2)进行准确的荧光细胞图像分类,对识别、诊断以及后续治疗起着关键的作用,同时用HEp-2细胞鉴定抗核抗体(ANA)也是判别自身免疫病的常用方法之一。以计算机视觉为基础的HEp-2细胞分类和抗核抗体分析,有助于降低... 对人的喉癌上皮细胞(HEp-2)进行准确的荧光细胞图像分类,对识别、诊断以及后续治疗起着关键的作用,同时用HEp-2细胞鉴定抗核抗体(ANA)也是判别自身免疫病的常用方法之一。以计算机视觉为基础的HEp-2细胞分类和抗核抗体分析,有助于降低专家的工作量,加强疾病检测技术的准确性和快速性。文章提出了基于深层次残差网络的HEp-2细胞分类研究,并利用不同残差模型进行实验和比较。实验表明,该方法可有效地对HEp-2细胞进行分类。 展开更多
关键词 hep-2细胞 深层次残差网络 细胞图像分类
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