目的:探讨一贯煎(YGJ)保护肝细胞免受过氧化氢(H2O2)损伤的机制是否与上调自噬相关。方法:将细胞随机分为正常对照(Con)组、H2O2组及YGJ+H2O2组。细胞培养24h后,YGJ+H2O2组加入1μg/m L YGJ预处理24h,预处理16h后,H2O2组、YGJ+H2O2组再...目的:探讨一贯煎(YGJ)保护肝细胞免受过氧化氢(H2O2)损伤的机制是否与上调自噬相关。方法:将细胞随机分为正常对照(Con)组、H2O2组及YGJ+H2O2组。细胞培养24h后,YGJ+H2O2组加入1μg/m L YGJ预处理24h,预处理16h后,H2O2组、YGJ+H2O2组再加入500μmol/L H2O2刺激8h。CCK8检测细胞活力,免疫印迹法检测羰基化蛋白表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)染色检测细胞衰老,Annexin V/PI标记,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测LC3、Beclin-1、LAMP2A、HSC70、PKM2、GAPDH表达水平。结果:H2O2诱导后,肝细胞活力显著下降(P<0.05),增殖细胞数减少(P<0.05),衰老、凋亡细胞数增加(P<0.05),肝细胞中羰基化蛋白、PKM2、GAPDH表达显著升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、LAMP2A、HSC70蛋白表达显著降低(P<0.05)。YGJ预处理后,细胞活力明显升高(P<0.05),细胞增殖数明显增加(P<0.05),衰老、凋亡细胞数显著减少(P<0.05)。羰基化蛋白、PKM2、GAPDH表达显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、LAMP2A、HSC70蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:1μg/m L YGJ可降低H2O2诱导的肝细胞氧化损伤,其机制与上调自噬相关。展开更多
文摘目的:探讨一贯煎(YGJ)保护肝细胞免受过氧化氢(H2O2)损伤的机制是否与上调自噬相关。方法:将细胞随机分为正常对照(Con)组、H2O2组及YGJ+H2O2组。细胞培养24h后,YGJ+H2O2组加入1μg/m L YGJ预处理24h,预处理16h后,H2O2组、YGJ+H2O2组再加入500μmol/L H2O2刺激8h。CCK8检测细胞活力,免疫印迹法检测羰基化蛋白表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)染色检测细胞衰老,Annexin V/PI标记,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测LC3、Beclin-1、LAMP2A、HSC70、PKM2、GAPDH表达水平。结果:H2O2诱导后,肝细胞活力显著下降(P<0.05),增殖细胞数减少(P<0.05),衰老、凋亡细胞数增加(P<0.05),肝细胞中羰基化蛋白、PKM2、GAPDH表达显著升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、LAMP2A、HSC70蛋白表达显著降低(P<0.05)。YGJ预处理后,细胞活力明显升高(P<0.05),细胞增殖数明显增加(P<0.05),衰老、凋亡细胞数显著减少(P<0.05)。羰基化蛋白、PKM2、GAPDH表达显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、LAMP2A、HSC70蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:1μg/m L YGJ可降低H2O2诱导的肝细胞氧化损伤,其机制与上调自噬相关。
