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鹅和番鸭细小病毒全基因克隆与序列分析 被引量：39
1
作者 张云 耿宏伟 +5 位作者 郭东春 胡奇林 相文华 刘明 杨涛 林巍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期415-419,共5页
本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因;其中鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因(NS)全长为1884bp,编码627个氨基酸;结构基因(VP)全长为2199bp,编码732个氨基酸;序列分析表明:鹅和番鸭细小病毒NS之间的核苷酸和氨基酸同源性分别... 本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因;其中鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因(NS)全长为1884bp,编码627个氨基酸;结构基因(VP)全长为2199bp,编码732个氨基酸;序列分析表明:鹅和番鸭细小病毒NS之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为80.9%～82.9%和89.5%～91.2%,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为93.7%～99.8%和96.8%～99.7%,番鸭细小病毒之间的同源性为98.8%～99.8%和98.6%～99.5%;在核苷酸和氨基酸水平上,鹅和番鸭细小病毒VP1之间的同源性分别为79.7%～88.7%和85.5%～93.3%,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为88.8%～99.6%和91.5%～99.2%,番鸭细小病毒之间的同源性为98.1%～99.6%和97.1%～98.8%;番鸭和鹅细小病毒NS和vp1基因的系统进化树分析表明:番鸭和鹅呼细小病毒来自共同的祖先,但随着宿主的不同而演化为不同的分支。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 番鸭细小病毒 NS基因 VP1基因 序列分析
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番鸭细小病毒与鹅细小病毒PCR鉴别诊断方法的建立 被引量：33
2
作者 刘家森 姜骞 +3 位作者 司昌德 甘一迪 韩凌霞 曲连东 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期469-472,共4页
根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞... 根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)的病毒培养物及其核酸进行扩增。结果,引物MDPVF1/R1仅特异性扩增出MDPV的900 bp核酸片段,引物GPVF1/R1仅特异性扩增出GPV的465 bp核酸片段。表明,建立的PCR方法可用于GPV和MDPV的鉴别诊断。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 鹅细小病毒 聚合酶链式反应 鉴别诊断
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番鸭细小病毒与鹅细小病毒的PCR鉴别诊断 被引量：17
3
作者 娄华 杨德威 +3 位作者 贺东升 白挨泉 秦智锋 刘福安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第6期459-461,共3页
通过比较基因bank中番鸭细小病毒 (MDPV)和鹅细小病毒 (GPV)的全基因序列 ,针对两种病毒非结构蛋白基因序列的相同区段 ,分别设计了两对PCR引物LHMP1/LHMP2和LHGP1/LHGP2 ,用这两对引物分别对MDPV和GPV进行检测 ,其结果引物LHMP1/LHMP2... 通过比较基因bank中番鸭细小病毒 (MDPV)和鹅细小病毒 (GPV)的全基因序列 ,针对两种病毒非结构蛋白基因序列的相同区段 ,分别设计了两对PCR引物LHMP1/LHMP2和LHGP1/LHGP2 ,用这两对引物分别对MDPV和GPV进行检测 ,其结果引物LHMP1/LHMP2只特异性地扩增MDPV ,而引物LHGP1/LHGP2也只特异性地扩增GPV ,并且两对引物均扩增出约 72 0bp的长度序列。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 鹅细小病毒 鉴别诊断
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番鸭小鹅瘟病毒的分离与鉴定 被引量：30
4
作者 程晓霞 陈少莺 +5 位作者 朱小丽 陈仕龙 林锋强 王劭 程由铨 林天龙 《福建农业学报》 CAS 2008年第4期355-358,共4页
从临床表现腹泻、肠粘膜脱落形成栓塞为特征的发病雏番鸭肝、脾中分离到2株病毒(命名为GPV-PT株和GPV-F株),分离株在间接免疫荧光抗体试验(IFA)和琼脂扩散沉淀(AGP)试验中只与GPV单抗反应,与MPV、NDV、IBDV单抗和DHV阳性血清均不发生反... 从临床表现腹泻、肠粘膜脱落形成栓塞为特征的发病雏番鸭肝、脾中分离到2株病毒(命名为GPV-PT株和GPV-F株),分离株在间接免疫荧光抗体试验(IFA)和琼脂扩散沉淀(AGP)试验中只与GPV单抗反应,与MPV、NDV、IBDV单抗和DHV阳性血清均不发生反应;电镜观察见到实心和空心两种粒子,无囊膜,圆形,呈立体对称,直径20～24 nm;分离株无血凝活性;对紫外线和胰蛋白酶均不敏感;对番鸭胚的ELD50为lg6.5;雏番鸭人工感染病毒后出现与自然病例相似的症状,并回收到病毒。上述结果表明分离的2株病毒均为番鸭小鹅瘟病毒。 展开更多
关键词 雏番鸭 小鹅瘟病毒 分离 鉴定
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鹅细小病毒HG5/82株的分离鉴定及生物学特性的研究 被引量：23
5
作者 李桂霞 刘胜旺 +2 位作者 孔宪刚 谷守林 冉多良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期196-201,共6页
本研究通过对1982年黑龙江某鹅场发生的鹅细小病毒病疑似病例的肝病变组织病毒分离,进行回顾性研究。将肝脏加PBS研磨后,-70℃/37℃反复冻融三次,除菌过滤后接种12日龄鹅胚。发现病毒对鹅胚的致死时间为5～6d,胚体体表有轻微出血点。鹅... 本研究通过对1982年黑龙江某鹅场发生的鹅细小病毒病疑似病例的肝病变组织病毒分离,进行回顾性研究。将肝脏加PBS研磨后,-70℃/37℃反复冻融三次,除菌过滤后接种12日龄鹅胚。发现病毒对鹅胚的致死时间为5～6d,胚体体表有轻微出血点。鹅胚尿囊液经磷钨酸染色,可见具有典型特征的细小病毒粒子。将该病毒尿囊液在12日龄鹅胚中连续传16代,随着传代次数的增加,胚体多集中在3～4d死亡。病毒传至第三代时死亡胚体头、颈、背部出现较为严重的出血点,体表有水肿。第五代病毒尿囊液(命名为HG5/82)对12日龄鹅胚的ELD50为10-5.92/0.1mL。将20只12日龄雏鹅分为三个试验组和一个阴性对照组,各组分别接种鹅胚尿囊液104.92ELD50、103.92ELD50、102.92ELD50及生理盐水,发现雏鹅接种HG5/82后4d出现轻微腹泻,随后恢复正常。用套式PCR检测雏鹅肛拭子病毒的体外排放情况。发现三个试验组在接种病毒后1～20d用套式PCR均可检测到病毒。对照组及试验组接种后20～56d没有检测到病毒。将套式PCR产物进行序列测定并于参考毒株进行比较,表明该序列具有GPV相应区域的共同分子特征,与GPV参考毒株B的相应序列同源性达93.6%。本研究结果表明,该分离毒株为典型的鹅细小病毒(GooseParvovirus,GPV),对雏鹅的致病力较弱。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 分离 鉴定 生物学特性 小鹅瘟
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番鸭细小病毒和鹅细小病毒生化及基因组特性的比较 被引量：26
6
作者 程由铨 胡奇林 +2 位作者 陈少莺 李怡英 林天龙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期429-433,共5页
番鸭细小病毒莆田株 ( MPV-P)和鹅细小病毒莆田株 ( GPV-P)分别感染的番鸭胚尿囊液经氯仿处理、PEG沉淀和 Sepharose 4 B柱纯化。纯化样品在电镜下观察 ,均见到实心和空心 2种病毒粒子。病毒粒子呈圆形 ,立体对称 ,无囊膜 ,直径为 2 0～... 番鸭细小病毒莆田株 ( MPV-P)和鹅细小病毒莆田株 ( GPV-P)分别感染的番鸭胚尿囊液经氯仿处理、PEG沉淀和 Sepharose 4 B柱纯化。纯化样品在电镜下观察 ,均见到实心和空心 2种病毒粒子。病毒粒子呈圆形 ,立体对称 ,无囊膜 ,直径为 2 0～ 2 4 nm。经 SDS-PAGE分析 ,MPV和 GPV均呈现 3条结构蛋白带。 MPV结构蛋白的相对分子质量约为 VP1890 0 0、VP2 780 0 0和 VP3 6 1 0 0 0 ,其中 VP3 为主要结构蛋白。GPV的相对分子质量与 MPV有微小差别。 MPV和 GPV核酸均为单链 DNA,长度约为 5 1 0 0 0 bp。分别以 MPV核酸和GPV核酸为模板 ,加到无引物的 DNA聚合酶 大片段合成体系中 ,合成产物经 1 %琼脂糖凝胶电泳 ,均可见长度约为 5 6 0 0 bp的双链 DNA带 ,证明 MPV和 GPV核酸的 3′末端具有发夹结构。对这 2种病毒核酸及经 Klenow合成的双链核酸进行限制性内切酶分析 ,两者的酶切结果明显不同 ,表明 MPV和 GPV核酸在一级结构上存在明显差异。以上结果证明 ,MPV和 GPV不但在致病性上有显著差异 。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 鹅细小病毒 生物化学特性 基因特性 比较
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鹅细小病毒分离株HG5/82的分子特征分析 被引量：20
7
作者 孔宪刚 李桂霞 +1 位作者 刘胜旺 冉多良 《中国病毒学》 CAS CSCD 2005年第1期28-32,共5页
本研究应用PCR技术扩增得到GPV中国分离株HG5/82的非结构基因与结构基因,片段大小分别约为1.9kb、2.2kb的片段。将该片段分别进行克隆及序列测定,并与 GPV 国内外部分已发表的毒株及番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)的对应... 本研究应用PCR技术扩增得到GPV中国分离株HG5/82的非结构基因与结构基因,片段大小分别约为1.9kb、2.2kb的片段。将该片段分别进行克隆及序列测定,并与 GPV 国内外部分已发表的毒株及番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)的对应序列比较。结果表明:HG5/82 株非结构蛋白(Non structure, NS)基因长为1884bp,编码627个氨基酸。HG5/82株结构蛋白基因长为2199bp,编码732个氨基酸。序列分析结果表明,我国地方分离株与国内外鹅细小病毒相比,ns基因、vp基因均表现出较高的同源性,并且具有共同的分子特征。为进一步研究GPV的基因功能、遗传变化规律及病毒分子致病机理提供了一定的分子基础。结构基因 VP3 间变异较小,这是目前GPV只有一个血清型的分子基础,为基因工程苗的研制提供了可行性。HG5/82 与番鸭细小病毒相应序列比较发现,与细小病毒其它成员相比两者具有较近的亲源关系,但这种同源性明显低于鹅细小病毒之间的同源性。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 NS基因 VP基因 分子特征
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用地高辛标记核酸探针检测鹅细小病毒的研究 被引量：14
8
作者 布日额 王君伟 +2 位作者 吴金花 孙红梅 Ulrich Neumann 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期102-105,共4页
从带有鹅细小病毒(GPV)NS1基因的重组质粒pMD18T NS1用限制性内切酶EcoRI和BamHI双酶切回收1880bp大小片段,并制备出地高辛标记的GPV核酸探针。其标记效率达到0 01pg/μl。特异性检测结果表明,该探针能与GPV不同毒株核酸发生特异性杂交... 从带有鹅细小病毒(GPV)NS1基因的重组质粒pMD18T NS1用限制性内切酶EcoRI和BamHI双酶切回收1880bp大小片段,并制备出地高辛标记的GPV核酸探针。其标记效率达到0 01pg/μl。特异性检测结果表明,该探针能与GPV不同毒株核酸发生特异性杂交,而与对照的DPV、GPPV等病毒的核酸杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对GPV的最低检出量为0 0224pg。该探针对不同方法处理的GPV感染病料进行检测,均出现杂交阳性。表明所研制的标记探针用于GPV的检测是可行的。 展开更多
关键词 地高辛标记 核酸探针 检测技术 鹅细小病毒 GPV检测
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鸭短喙-侏儒综合征病原的初步鉴定 被引量：26
9
作者 李传峰 李琦 +2 位作者 陈宗艳 唐井玉 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第6期1-6,共6页
2014年下半年以来,在我国华东地区商品肉鸭养殖地区暴发了一种以生长迟缓、鸭喙变短、舌头外露下垂、跛行、瘫痪、拉稀以及翅腿易折断为主要临床特征的传染性疾病,暂命名为鸭短喙-侏儒综合征。剖检时可见发病鸭胰腺、肺脏和胸腺等组织... 2014年下半年以来,在我国华东地区商品肉鸭养殖地区暴发了一种以生长迟缓、鸭喙变短、舌头外露下垂、跛行、瘫痪、拉稀以及翅腿易折断为主要临床特征的传染性疾病,暂命名为鸭短喙-侏儒综合征。剖检时可见发病鸭胰腺、肺脏和胸腺等组织出血。组织病理学变化主要表现为心脏、胰腺、肾脏、肺脏和肝脏等组织细胞变性、坏死以及充血、出血。RT-PCR/PCR检测结果显示,在患鸭组织中存在类似鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的特异性核酸,未见其他水禽病毒核酸。系统进化树分析显示本病病原与经典GPV密切相关。免疫组化进一步检测发现,患鸭组织中存在GPV特异性的抗原。鉴于本病与经典水禽细小病毒病的临床表征、剖检及组织病理学变化的差异性,我们初步确定鸭短喙-侏儒综合征病原为一种与GPV密切相关的新型鸭细小病毒(Novel duck parvovirus,NDPV)。 展开更多
关键词 鸭短喙侏儒综合征 鹅细小病毒 免疫组化 PCR
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鹅细小病毒强毒PCR检测方法的建立 被引量：11
10
作者 黄诚 程安春 +9 位作者 汪铭书 刘菲 韩新峰 王刚 周伟光 文明 贾仁勇 郭宇飞 陈孝跃 周毅 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第9期54-60,共7页
参照GenBank中登录的鹅细小病毒 (GPV)B株的全基因序列 ,针对GPV的VP3保守基因设计了 1对引物 ,建立了GPV的PCR检测方法。采用该方法检测GPV能够扩增出预期大小约 4 41bp的特异性片段 ,而对鸭瘟病毒 (DPV)、鹅源致病性大肠埃希氏菌 (E .... 参照GenBank中登录的鹅细小病毒 (GPV)B株的全基因序列 ,针对GPV的VP3保守基因设计了 1对引物 ,建立了GPV的PCR检测方法。采用该方法检测GPV能够扩增出预期大小约 4 41bp的特异性片段 ,而对鸭瘟病毒 (DPV)、鹅源致病性大肠埃希氏菌 (E .coli)O8和O1、雏鹅新型病毒性肠炎病毒 (NGVEV)呈阴性反应。该法检测GPV核酸的灵敏度可达 0 .4 7pg ;对GPV强毒皮下注射感染雏鹅各器官的检测结果表明 ,感染后 8h即可从心、肝病料中检出病毒DNA ,感染后 2 4h可从延髓、胸腺、胰腺、十二指肠、空肠、盲肠、腔上囊、心、肝、脾、肺、肾、血液、小脑、直肠、肌肉、粪便中检出GPVDNA ,感染 4 8h后可从骨髓中检出病毒DNA ,感染 312h后仍能从十二指肠、空肠、盲肠、心、肝、肾、粪便中检出病毒DNA。病毒分离阳性的可疑病料PCR检测为阳性 ,对临床送检病料的检测结果表明 ,PCR的敏感性显著高于病毒分离。 展开更多
关键词 PCR 检测方法 鹅细小病毒
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二重PCR检测鸭瘟病毒和鹅细小病毒的初步研究 被引量：10
11
作者 赵妍 王君伟 +2 位作者 邢明伟 马波 汤海宽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期710-713,共4页
根据鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)DNA聚合酶基因和鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)NS基因序列分别设计2对引物,应用这2对引物对混合样品中鸭瘟病毒和鹅细小病毒进行了二重PCR扩增。PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明2条特异性带为5... 根据鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)DNA聚合酶基因和鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)NS基因序列分别设计2对引物,应用这2对引物对混合样品中鸭瘟病毒和鹅细小病毒进行了二重PCR扩增。PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明2条特异性带为563bp(DPV)和1146bp(GPV),与实验设计相符,且与常规单一PCR结果一致。二重PCR反应检测出的DPV含量相当于20个PFU;检测出的GPV含量相当于0.1个ELD50,对禽痘病毒和减蛋综合征病毒的核酸未能扩增出任何条带,特异性良好。该二重PCR能够在一次扩增反应中检测两种病毒,为两种鹅病的病原检测和诊断提供了一种简便、经济、快速的手段。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 鹅细小病毒 二重PCR
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应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究 被引量：16
12
作者 布日额 李宝臣 +2 位作者 马波 王君伟 Ulrich Neumann 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期199-203,共5页
利用鹅细小病毒（GPV）VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg／mL，其中间接-ELISA 100μL／孔、Dot-ELISA 5μL／点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅Ig... 利用鹅细小病毒（GPV）VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg／mL，其中间接-ELISA 100μL／孔、Dot-ELISA 5μL／点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1：200，检测血清的最适稀释度是1：400，阳性判定标准为OD492≥0．20，且P／N≥2．0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清，其抗体滴度在1：400～1：51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 VP3基因重组原核表达产物 间接-ELISA Dot—ELISA
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小鹅瘟病毒分离与初步鉴定 被引量：18
13
作者 胡桂学 高光 +1 位作者 邹啸环 肖峰 《经济动物学报》 CAS 2002年第2期41-43,共3页
取死于具有小鹅瘟典型症状的 7日龄吉林白鹅脾脏 ,制成乳剂 ,接种于未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产种蛋的 12日龄鹅胚尿囊腔。结果当盲传至第 3代 ,鹅胚死亡 ,电镜负染尿囊液观察到细小病毒样粒子。雏鹅接种试验结果表明 ,试验组雏鹅... 取死于具有小鹅瘟典型症状的 7日龄吉林白鹅脾脏 ,制成乳剂 ,接种于未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产种蛋的 12日龄鹅胚尿囊腔。结果当盲传至第 3代 ,鹅胚死亡 ,电镜负染尿囊液观察到细小病毒样粒子。雏鹅接种试验结果表明 ,试验组雏鹅表现出小鹅瘟临床症状和剖检特征。由此证明 。 展开更多
关键词 小鹅瘟 细小病毒 分离 鉴定
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鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定 被引量：14
14
作者 于天飞 仇铮 +3 位作者 马波 袁率珍 李俚 王君伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期757-763,共7页
鹅细小病毒是小鹅瘟的病原体,其基因组含有2个主要开放阅读框（ORF）,分别编码非结构蛋白（NS）和结构蛋白（VP）。为了对这2种蛋白进行抗原表位作图,设计了34个覆盖非结构蛋白NS和结构蛋白VP的50-60个氨基酸残基的重叠短肽,并进行了融... 鹅细小病毒是小鹅瘟的病原体,其基因组含有2个主要开放阅读框（ORF）,分别编码非结构蛋白（NS）和结构蛋白（VP）。为了对这2种蛋白进行抗原表位作图,设计了34个覆盖非结构蛋白NS和结构蛋白VP的50-60个氨基酸残基的重叠短肽,并进行了融合表达。用攻毒10周龄鹅血清对这34个融合蛋白进行蛋白质印迹分析,结果鉴定出NS蛋白线性抗原表位位于C末端的453-627氨基酸区域;VP蛋白线性抗原表位位于35—198、423—491、531—595、616—669和678—732氨基酸区域。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 非结构蛋白 结构蛋白 线性抗原表位
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新型鹅细小病毒研究进展 被引量：15
15
作者 王辉 王秀云 +2 位作者 焦绪娜 尹延敏 逄宾宾 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期115-118,共4页
新型鹅细小病毒主要引起发病鸭临床表现为短喙、舌外伸、生长发育受阻的疾病,根据该病临床特征又称为“鸭短喙侏儒综合症”。本文综合了目前最新的新型鹅细小病毒研究,并与经典鹅细小病毒在流行病学、临床症状、生物学特性、检测方法方... 新型鹅细小病毒主要引起发病鸭临床表现为短喙、舌外伸、生长发育受阻的疾病,根据该病临床特征又称为“鸭短喙侏儒综合症”。本文综合了目前最新的新型鹅细小病毒研究,并与经典鹅细小病毒在流行病学、临床症状、生物学特性、检测方法方面进行对比,突出了新型鹅细小病毒在发病宿主、临床和剖检症状、核苷酸序列方面发生的改变,以期为新型鹅细小病毒病的诊断、检测、及流行病学调查提供依据。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 新型鹅细小病毒 鸭短喙侏儒综合症
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番鸭细小病毒琼扩抗原研制及初步应用 被引量：12
16
作者 何海蓉 季明 +1 位作者 朱国强 王永坤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第1期59-60,共2页
应用番鸭细小病毒鹅胚适应毒M91毒株接种易感鹅胚,收获鹅胚尿囊液毒经浓缩后制成琼扩抗原。
关键词 番鸭细小病毒 鹅细小病毒 琼扩试验
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鹅细小病毒弱毒株选育的研究 被引量：13
17
作者 陈少莺 胡奇林 +2 位作者 程晓霞 李怡英 程由铨 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期286-288,共3页
应用番鸭胚成纤维细胞 (MDEFC)培育出适应MDEFC增殖并产生细胞病变的鹅细小病毒弱毒疫苗株 ,同时测定了该弱毒株的部分生物学特性。结果显示 :该弱毒株已失去对 1日龄雏番鸭的致病性 ,在雏番鸭体内连续肓传 5代 ,未见毒力反强现象 ;该... 应用番鸭胚成纤维细胞 (MDEFC)培育出适应MDEFC增殖并产生细胞病变的鹅细小病毒弱毒疫苗株 ,同时测定了该弱毒株的部分生物学特性。结果显示 :该弱毒株已失去对 1日龄雏番鸭的致病性 ,在雏番鸭体内连续肓传 5代 ,未见毒力反强现象 ;该弱毒株对MDEFC的TCID50 稳定在 10 -5～ 10 -6/0 .1ml;1日龄雏番鸭免疫接种后 7天攻毒可获 10 0 %保护 ,表明该弱毒株安全。 展开更多
关键词 雏番鸭 鹅细小病毒 弱毒株 选育
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鹅细小病毒不同毒株VP3基因的序列分析比较 被引量：12
18
作者 李宝臣 齐岩 +1 位作者 马波 王君伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期430-433,共4页
分别将GPV 4个分离株通过PCR技术 ,从病毒基因组DNA中扩增出病毒衣壳蛋白VP3完整基因片段 ,并与PMD18_T质粒载体连接 ,转化到感受态大肠秆菌TG1中 ,提取重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定后 ,对插入片段进行序列测定及分析。结果表明 :VP3基... 分别将GPV 4个分离株通过PCR技术 ,从病毒基因组DNA中扩增出病毒衣壳蛋白VP3完整基因片段 ,并与PMD18_T质粒载体连接 ,转化到感受态大肠秆菌TG1中 ,提取重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定后 ,对插入片段进行序列测定及分析。结果表明 :VP3基因全长 16 0 5bp ,编码 5 34个氨基酸。不同毒株主要结构蛋白VP3基因同源性较高(95 .6 4 %～ 99.81% )。但强弱毒株间也存在一定差异。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 VP3基因 克隆 序列分析
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一株鹅细小病毒全基因特征分析 被引量：16
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作者 万春和 朱海侠 +5 位作者 黄瑜 彭春香 程龙飞 施少华 傅光华 陈红梅 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第4期19-24,共6页
根据GenBank登录的鹅细小病毒基因序列和基因组结构特征，采用PCR技术扩增获得一株鹅细小病毒株（Goose parvovirus，GoPV）全基因序列，为中国大陆地区首次报道。GoPV株病毒全基因大小为5106nt，其基因组5’端和3’端均含有相同的末端... 根据GenBank登录的鹅细小病毒基因序列和基因组结构特征，采用PCR技术扩增获得一株鹅细小病毒株（Goose parvovirus，GoPV）全基因序列，为中国大陆地区首次报道。GoPV株病毒全基因大小为5106nt，其基因组5’端和3’端均含有相同的末端倒置重复序列（inverted terminal repeats, ITR），ITR全长为444nt。GoPV基因组主要由左右两侧两个开放阅读框组成，左侧编码非结构蛋白（non-structureprotein，NS）NSl和NS2，右侧编码3种结构蛋白（viral structural protein，VP）VP1、VP2和VP3。NS基因全长为1884nt（537-2420nt），其中NS2全长1356nt（1065～2420nt）；VP基因全长2199nt（2439-4637nt），其中Ⅵ叼全长1764nt（2874-4637nt），VP3全长1605nt（3033-4637nt），在其右侧的ITR前有一个Poly（A）的尾。GoPV株病毒全基因和欧洲疫苗株（EU583392（VG32／1，Europe））核苷酸同源性最高，高达98．6％。本研究为进一步研究GPV分类地位以及进化关系提供依据，也为研究GPV强毒株和疫苗株之间生物学特性以及GPV治病机理和开发基因工程疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 全基因 分子特征
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应用核酸斑点杂交法检测鹅细小病毒(GPV) 被引量：5
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作者 余兵 王永坤 朱国强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期453-454,共2页
利用鹅细小病毒 (GPV)核酸探针 ,设计并建立了核酸斑点杂交法 ,用以检测 GPV核酸。该方法特异性与敏感性均较好 ,其敏感度可达 3pg。应用该方法对 4例病变典型的小鹅瘟患鹅组织器官进行检测 ,结果表明 ,患鹅脏器中 ,小肠、心、肝、胰、... 利用鹅细小病毒 (GPV)核酸探针 ,设计并建立了核酸斑点杂交法 ,用以检测 GPV核酸。该方法特异性与敏感性均较好 ,其敏感度可达 3pg。应用该方法对 4例病变典型的小鹅瘟患鹅组织器官进行检测 ,结果表明 ,患鹅脏器中 ,小肠、心、肝、胰、脾组织含毒量较高 ,其中小肠组织含毒量最高 ,而脑组织中含毒量较低。应用琼脂扩散试验验证了核酸斑点杂交法的检测结果。 展开更多
关键词 应用 核酸斑点杂交法 鹅 细小病毒 探针 琼脂扩散试验
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