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食品微生物安全检测技术 被引量:20
1
作者 曾庆梅 张冬冬 +4 位作者 杨毅 胡斌 徐迪 韩抒 潘宗琴 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期632-637,共6页
为了应对快速、准确的食品微生物安全检测方法的需求,本文介绍了许多食品安全检测的新方法与新技术,包括快速生化检测方法、免疫学技术、代谢学技术、传感器技术、流式细胞术、PCR技术、基因探针技术、生物芯片,并概述这些检测技术对食... 为了应对快速、准确的食品微生物安全检测方法的需求,本文介绍了许多食品安全检测的新方法与新技术,包括快速生化检测方法、免疫学技术、代谢学技术、传感器技术、流式细胞术、PCR技术、基因探针技术、生物芯片,并概述这些检测技术对食品微生物安全的重要作用及影响。 展开更多
关键词 微生物检测 传感器 流式细胞术 PCR 基因探针 生物芯片
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分子生物学方法在食品微生物检测中的应用 被引量:15
2
作者 刘雨潇 刘士敏 +2 位作者 王民 于瑞敏 胡冰冰 《生物技术通讯》 CAS 2009年第3期451-454,共4页
近年来,食品安全受到广泛关注。及时、准确地检测出食品中的病原微生物是食品安全检测的重要内容,食品病原微生物的分子生物学检测技术因其特异性和灵敏性而备受瞩目。我们主要介绍了基因探针检测法、PCR检测法和基因芯片检测法的原理... 近年来,食品安全受到广泛关注。及时、准确地检测出食品中的病原微生物是食品安全检测的重要内容,食品病原微生物的分子生物学检测技术因其特异性和灵敏性而备受瞩目。我们主要介绍了基因探针检测法、PCR检测法和基因芯片检测法的原理、开发及其在食品微生物检测中的应用。 展开更多
关键词 食品微生物检测 基因探针 PCR技术 基因芯片
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胜利油田外排水中铁细菌主要类群的检测及群落结构分析 被引量:7
3
作者 赵桂芳 吴晓磊 +2 位作者 曾景海 李佳 钱易 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期828-832,共5页
根据油田外排水中常见铁细菌的16SrRNA特异性保守序列,设计和合成了4种荧光探针,利用荧光原位杂交方法,分别利用它们对胜利油田孤岛采油厂、胜利采油厂1号和2号综合处理站外排水中存在的铁细菌的种类和数量进行检测,分析了各外排水... 根据油田外排水中常见铁细菌的16SrRNA特异性保守序列,设计和合成了4种荧光探针,利用荧光原位杂交方法,分别利用它们对胜利油田孤岛采油厂、胜利采油厂1号和2号综合处理站外排水中存在的铁细菌的种类和数量进行检测,分析了各外排水中铁细菌的群落结构.结果表明,利用基因探针能快速对胜利油田外排水中的铁细菌进行检测:在孤岛采油厂、胜利采油厂1号和2号综合处理站的外排水中,利用4种探针的组合探针检测到的铁细菌细胞数量分别占样品中微生物总细胞数量的11.0%、12.8%和9.0%,其中Leptothrix和Sphaerotilus,以及Leptospirillum ferriphilum为胜利油田外排水中的3种优势铁细菌,分别占水样中总微生物细胞数的2.94%±0.52%~3.39%±0.52%和2.24%±0.16%-2.63%±0.49%;而Leptospirillum ferrooxidans和Acidithiobacillus spp.的种群则较小.3个污水处理站中铁细菌群落结构差异较大,而多样性相差不大.利用4种探针的各种组合对外排水中铁细菌的检测表明,单探针能够很好地分析外排水中铁细菌的群落结构,而组合探针能快速、较准确地检测外排水中铁细菌的数量,比传统的绝迹稀释法具有快速、准确、直观等优点. 展开更多
关键词 荧光原位杂交(FISH) 铁细菌 基因探针 群落结构 绝迹稀释法
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纳米金标记法在HIV检测中的应用 被引量:5
4
作者 张平 习东 +1 位作者 宁琴 罗小平 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1552-1555,共4页
目的制备金纳米颗粒人类获得性免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)基因探针,研究其在检测HIV中的应用。方法采用枸橼酸还原金氯酸法制备Au纳米颗粒。Au纳米颗粒通过Au-S共价键与烷烃硫醇修饰的寡核苷酸结合制备检测探针。... 目的制备金纳米颗粒人类获得性免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)基因探针,研究其在检测HIV中的应用。方法采用枸橼酸还原金氯酸法制备Au纳米颗粒。Au纳米颗粒通过Au-S共价键与烷烃硫醇修饰的寡核苷酸结合制备检测探针。检测探针通过与靶序列在液相中杂交,形成Au纳米颗粒聚集体,采用电镜观察结果。结果制备的Au纳米颗粒粒径为(12±5)nm,分散良好,在520nm有最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,最大吸收峰改变为524nm。液相杂交后采用电镜观察可检测低至1fmol/L的合成靶序列。结论Au纳米颗粒HIV cDNA基因探针,通过液相杂交技术检测HIV cDNA,可以缩短检测窗口期,做到早期诊断和预防。 展开更多
关键词 金纳米颗粒 基因探针 人类获得性免疫缺陷病毒 早期诊断
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基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测 被引量:6
5
作者 陶增思 黎诚耀 +4 位作者 卢强 王振英 张西臣 汪建国 李德昌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第6期580-584,共5页
采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫(Thelohaneluskitauei)孢子,按常规法提取其基因组DNA。取DNAEcoRI消化产物,采用低熔点琼脂糖回收法制备大(3.0~15.0kb)、小(0.5~3.0kb)片... 采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫(Thelohaneluskitauei)孢子,按常规法提取其基因组DNA。取DNAEcoRI消化产物,采用低熔点琼脂糖回收法制备大(3.0~15.0kb)、小(0.5~3.0kb)片段,将其克隆于pBluescriptksEcoRI位点,经α-互补现象、酶切鉴定和虫体DNA生物素标记探针筛选,构建了含23个克隆的基因文库,克隆片段介于0.9~6.8kb之间;经阳性克隆标记筛选及特性分析,制备了长度为0.9kb(19号质粒克隆片段)的探针,该探针具有较强的敏感性和特异性。对该探针两端DNA序列进行分析,设计出1对引物。上游引物序列为:5′TTTCGAACCCGCACAACAAG3′,下游引物序列为:5′TGAGTGGATAG-TATCGCTGC3′。 展开更多
关键词 吉陶单极虫 基因文库构建 基因探针 PCR
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Au纳米颗粒HBV DNA基因探针的制备及其在目视化检测HBV DNA中的应用 被引量:4
6
作者 习东 宁琴 +3 位作者 卢强华 姚凯伦 刘祖黎 罗小平 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期30-34,40,共6页
制备金(gold,Au)纳米颗粒乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxynucleic acid,HBV DNA)基因探针,研究其在目视化检测HBV DNA中的应用。Au纳米颗粒通过金-硫(Au-S)共价键结合烷氢硫醇修饰的寡核苷酸,制备检测探针。用荧光标... 制备金(gold,Au)纳米颗粒乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxynucleic acid,HBV DNA)基因探针,研究其在目视化检测HBV DNA中的应用。Au纳米颗粒通过金-硫(Au-S)共价键结合烷氢硫醇修饰的寡核苷酸,制备检测探针。用荧光标记法检测Au纳米颗粒表面寡核苷酸的覆盖率和与其互补的寡核苷酸的杂交效率。检测探针与固定在尼龙膜上的捕捉探针构成双探针,用斑点杂交法检测HBV DNA,加入银离子(Ag+)-对苯二酚液染色观察结果。制备的Au纳米颗粒粒径为(12±5)nm,分散良好,在520nm有最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒表面寡核苷酸的最大覆盖率为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在尼龙膜上用斑点杂交法可检出低至10fmol的合成靶DNA,可目视化检出乙肝患者血清中HBV DNA的PCR产物。Au纳米颗粒HBV DNA基因探针可用于目视化检测HBV DNA,此方法具有敏感性高、特异性好、简单、价廉的特点,可望在许多领域,尤其是在多基因检测芯片上有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 金纳米颗粒 基因探针 乙肝病毒 目视化
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产肠毒素大肠杆菌腹泻病的系列研究(Ⅱ)临床特点 被引量:6
7
作者 俞守义 陈义忠 +3 位作者 陈清 聂军 吴敏 王斌会 《第一军医大学学报》 CSCD 1994年第2期133-135,共3页
用产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的4种主要毒力基因(LT、STp、STh、CFA/I)制成同位素标记的探针作为诊断手段,在广州市远郊农村对ETEC腹泻病做了系列研究。该病年发病率12.17%,年龄1个月~75岁。不足5... 用产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的4种主要毒力基因(LT、STp、STh、CFA/I)制成同位素标记的探针作为诊断手段,在广州市远郊农村对ETEC腹泻病做了系列研究。该病年发病率12.17%,年龄1个月~75岁。不足5岁的发病率为80.28%,其中不足2岁的高达18.97%;5岁以上的为2.18%,差异非常显著(P<0.01).男孩显著高于女孩(P<0.01).发病高峰在7月(1.47%)和11月(1.76%)。临床症状以腹泻(100%)、呕吐(32.5%)、食欲差(28.9%)为主,95%的不足2岁患者伴有上感症状,31.3%有38℃以下低热,个别达39℃以上者常伴有合并感染,但成人少见,75%患者为水样便或稀便,14.5%为粘液便,3.6%为脓血便;有脓血便者常合并志贺氏菌、空肠弯曲菌或侵袭性大肠杆菌(EIEC)感染。82%的患者每天大便3~5次,>10次者常有合并感染。菌型以ETEC-STp为主,依次为LT、ST/LT和CFA/I。病程一般为3~4天。对常用抗菌药物敏感,但对红霉素、四环素、青霉素G有高度抗性,且多重抗性十分普遍。 展开更多
关键词 ETEC 腹泻 基因 探针 大肠杆菌
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海捕中国对虾杆状病毒的检测 被引量:3
8
作者 常青山 包振民 +3 位作者 潘洁 王伟继 郭福生 龚振华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期263-266,共4页
:以海捕中国对虾为材料 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术和核酸探针技术 ,对从中国对虾杆状病毒核酸随机文库中筛选的 4个片段 (大小分别为 80 0 ,1 1 0 0 ,1 5 0 0 ,2 5 0 0bp)用地高辛标记作为探针 ,进行斑点杂交 ,检测对虾杆状病毒。结... :以海捕中国对虾为材料 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术和核酸探针技术 ,对从中国对虾杆状病毒核酸随机文库中筛选的 4个片段 (大小分别为 80 0 ,1 1 0 0 ,1 5 0 0 ,2 5 0 0bp)用地高辛标记作为探针 ,进行斑点杂交 ,检测对虾杆状病毒。结果表明海捕中国对虾的鳃、中肠、肝胰腺、卵巢等组织检测为阳性 ,肌肉组织为阴性。 展开更多
关键词 中国对虾 杆状病毒 检测 核酸探针 PCR 垂直传播
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基因芯片技术检测丁型肝炎病毒的研究 被引量:5
9
作者 孙朝晖 郑文岭 +2 位作者 张宝 石嵘 马文丽 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期44-46,49,共4页
目的制备检测丁型肝炎病毒(HDV) 基因芯片。方法针对HDV基因保守区域设计多对PCR引物。用芯片点样仪将PCR产物点到玻片上制成基因芯片。样品标记采用限制性显示技术,样品标记后进行杂交。结果运用PCR技术得到多个HDV特异性基因片段,序... 目的制备检测丁型肝炎病毒(HDV) 基因芯片。方法针对HDV基因保守区域设计多对PCR引物。用芯片点样仪将PCR产物点到玻片上制成基因芯片。样品标记采用限制性显示技术,样品标记后进行杂交。结果运用PCR技术得到多个HDV特异性基因片段,序列分析表明,所扩增的片段均属于HDV特异基因。杂交结果显示,样品和HDV诊断基因芯片杂交的敏感性和特异性均佳。结论用基因芯片检测HDV具有敏感、高效、检测结果可靠的优点,有着较大的应用前景。 展开更多
关键词 基因芯片技术 检测 丁型肝炎病毒 敏感性 特异性
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基因探针和PCR方法在菌痢流行病学研究中的应用 被引量:3
10
作者 夏桂枝 叶礼燕 +2 位作者 王红 白石山 俞守义 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第12期1062-1064,1067,共4页
目的 探讨基因探针和PCR方法在F2a志贺氏菌痢暴发的流行病学研究中的意义。方法 对 4 3株自患者粪便和食物中分离到的F2a志贺氏菌进行 16srRNA、ipaH基因Southern杂交 ,随机PCR和set1/set2毒力基因PCR分析。 结果 随机PCR、ipaH基因S... 目的 探讨基因探针和PCR方法在F2a志贺氏菌痢暴发的流行病学研究中的意义。方法 对 4 3株自患者粪便和食物中分离到的F2a志贺氏菌进行 16srRNA、ipaH基因Southern杂交 ,随机PCR和set1/set2毒力基因PCR分析。 结果 随机PCR、ipaH基因Southern杂交将 4 3株F2a志贺氏菌分为两个不同的基因型 ,set1/set2毒力基因PCR分为三个不同的基因型 ,16srRNA基因Southern杂交均为同一基因型。结论 基因分型方法能更准确、深入地揭示菌痢暴发过程中各分离株之间的流行病学联系。其中set1/set2毒力基因PCR方法具有较高的分辨率 ,在F2a志贺氏菌的分子流行病学研究中具有重要的作用。 展开更多
关键词 志贺氏菌 基因探针 随机PCR 志贺氏肠毒素
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鼠疫菌fra基因探针的研究 被引量:5
11
作者 俞东征 刘志奇 +2 位作者 王芳 艾则孜 史献明 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第1期21-23,16,共4页
利用PCR的方法,由鼠疫菌的DNA中扩增获得了单一的,长249bp的基因片段。这一反应的特异性良好,可以作为鼠疫菌的一种鉴定标志。将这一片段以地高辛标记制成探针,与国外已经试用过的,来自9.5kb质粒的900bp探针相比较,表明该探针的... 利用PCR的方法,由鼠疫菌的DNA中扩增获得了单一的,长249bp的基因片段。这一反应的特异性良好,可以作为鼠疫菌的一种鉴定标志。将这一片段以地高辛标记制成探针,与国外已经试用过的,来自9.5kb质粒的900bp探针相比较,表明该探针的特异性优良,可用于鼠疫的监测与对鼠疫菌分子生物学的进一步研究。 展开更多
关键词 鼠疫 耶尔森氏菌 PCR 探针检测
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K562细胞株表达基因探针制作的探讨 被引量:3
12
作者 祝骥 马文丽 +1 位作者 姚汝华 郑文岭 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期59-62,共4页
目的 研究基因芯片探针的制备方法 ,为K5 6 2细胞基因表达谱芯片的制作及其在基因表达研究中应用打下基础。 方法 以人红白血病K5 6 2细胞株为材料 ,应用一种分离显示基因的新方法即限制性显示 (RD PCR)技术 ,分离DNA片段 ,作为基因... 目的 研究基因芯片探针的制备方法 ,为K5 6 2细胞基因表达谱芯片的制作及其在基因表达研究中应用打下基础。 方法 以人红白血病K5 6 2细胞株为材料 ,应用一种分离显示基因的新方法即限制性显示 (RD PCR)技术 ,分离DNA片段 ,作为基因芯片探针。 结果 分离到近千个大小在 2 0 0~ 5 0 0bp的基因片段 ,认为该方法可以克服DD PCR中出现的假阳性较多的缺点 ,简单易操作 ,且利用该方法分离的基因探针 ,制备DNA微集芯片 ,同全长cDNA探针制作芯片相比 ,其探针长度小且相对均一 ,杂交动力学易于控制。 结论 限制性显示技术为基因芯片探针的制备提供了一个全新的思路 。 展开更多
关键词 基因芯片 基因探针 限制性显示
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鸡大肠杆菌traT基因的扩增及TraT-DIG探针制备 被引量:3
13
作者 赖平安 王金洛 +3 位作者 徐建国 余秀军 黄荣生 吴纪民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期235-240,共6页
以致病性E .coli的质粒为模板 ,用人工合成引物扩增出致病性相关的traT基因核心部分 ;将菌株的致病性与traT基因的扩增结果进行比较 ,强致病力菌株均扩增出traT基因 ,无致病力菌株未扩增出traT基因 ,绝大多数中等致病力菌株亦扩增出tra... 以致病性E .coli的质粒为模板 ,用人工合成引物扩增出致病性相关的traT基因核心部分 ;将菌株的致病性与traT基因的扩增结果进行比较 ,强致病力菌株均扩增出traT基因 ,无致病力菌株未扩增出traT基因 ,绝大多数中等致病力菌株亦扩增出traT基因。扩增获得的traT基因经纯化后标记地高辛 (Digoxin ,DIG)研制出traT DIG基因探针 ,该探针与鸡沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌不发生交叉反应 ;以原位杂交检测不同血清型菌株的致病力 :强致病力菌株全部阳性 ,无致病力菌株全部阴性 ,89 7%的中等致病力菌株为阳性。对 6 0 0株分离自病死鸡实质脏器的大肠杆菌的检测 ,结果为 :84 % (50 4 / 6 0 0 )的菌株杂交阳性 ,16 % (96 / 6 0 0 )的菌株杂交阴性 ,提示从病死鸡实质脏器分离的菌株 ,少部分为无致病力菌株。 展开更多
关键词 大肠杆菌 traT基因 基因探针 致病力
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基于金纳米棒基因探针对多元基因的识别与检测 被引量:3
14
作者 孙桂敏 刘媚 +1 位作者 杨培慧 蔡继业 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第13期1007-1012,共6页
通过晶种生长法制备长径比分别为4:1和8:1的金纳米棒,分别在其表面修饰上抑癌基因p53和pTEN2种不同序列的模型基因片段,构建金纳米棒基因探针,这两种基因探针分别于800和1100nm处有2个近红外吸收峰.基于探针基因识别靶基因时,金纳米棒... 通过晶种生长法制备长径比分别为4:1和8:1的金纳米棒,分别在其表面修饰上抑癌基因p53和pTEN2种不同序列的模型基因片段,构建金纳米棒基因探针,这两种基因探针分别于800和1100nm处有2个近红外吸收峰.基于探针基因识别靶基因时,金纳米棒的纵向等离子共振吸收峰吸光度的变化,对2种靶基因片段混合体系建立特异性识别及检测方法.结果表明,在pH为7.0的PBS缓冲溶液中,NaCl浓度为0.2mol/L时,在靶基因片段的浓度为3.0~9.0nmol/L范围内,金纳米棒的纵向等离子共振吸收峰的变化与靶基因的浓度成线性关系,检出限分别为1.6和1.2nmol/L.实现了在同一混合体系中同时对两种靶基因片段的特异性识别及检测. 展开更多
关键词 金纳米棒 表面等离子共振吸收 基因探针
原文传递
基于基因探针扫描技术高通量检测乳制品中赭曲霉毒素A产生菌 被引量:3
15
作者 孔文平 李裕 +3 位作者 郭锦材 李灿 朱湘成 陈同强 《乳业科学与技术》 2022年第1期20-25,共6页
为快速、准确地检测出乳制品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)产生菌,以便评估乳制品中OTA污染的潜在风险,根据已阐明的OTA生物合成途径,选择与OTA产生有关的卤化酶基因区域设计兼并引物,建立针对OTA产生菌的聚合酶链式反应(polymerase ... 为快速、准确地检测出乳制品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)产生菌,以便评估乳制品中OTA污染的潜在风险,根据已阐明的OTA生物合成途径,选择与OTA产生有关的卤化酶基因区域设计兼并引物,建立针对OTA产生菌的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。对1株产OTA(赭曲霉菌(Aspergillus ochraceus))和5株不产OTA的真菌(冠突散囊菌(Aspergillus cristatus)、黄曲霉菌(Aspergillus flavus)、串珠镰孢菌(Fusarium moniliforme)、土壤伊莎酵母(Issatchenkia terricola)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae))DNA进行PCR检测验证。结果表明:产OTA的真菌DNA能扩增出相应的条带,而不产OTA的真菌DNA则无法扩增出相应的条带,本方法在污染的乳制品中也具有较高的准确性和灵敏度。 展开更多
关键词 基因探针 高通量 产毒真菌 赭曲霉毒素A 乳制品 风险评估
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应用PCR快速制备细小病毒B19诊断芯片探针(英文) 被引量:3
16
作者 吕梁 马文丽 +3 位作者 王洪敏 马晓冬 孙朝晖 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第11期1121-1124,共4页
目的制备细小病毒诊断芯片探针。方法利用Primer Premier 5.0针对细小病毒B19基因保守区域设计PCR引物,将PCR产物克隆pMD-18 T载体。结果序列分析显示,PCR产物均为细小病毒B19特异保守基因。结论利用PCR扩增产物制备诊断芯片探针是一种... 目的制备细小病毒诊断芯片探针。方法利用Primer Premier 5.0针对细小病毒B19基因保守区域设计PCR引物,将PCR产物克隆pMD-18 T载体。结果序列分析显示,PCR产物均为细小病毒B19特异保守基因。结论利用PCR扩增产物制备诊断芯片探针是一种简便有效的方法。 展开更多
关键词 PCR 制备 细小病毒B19 诊断芯片 探针
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IMMUNOGLOBULIN GENE REARRANGEMENT IN LYMPHOID TUMORS
17
作者 朱平 刘乐宇 +2 位作者 殷慧君 宗建超 刘福森 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1992年第17期1461-1465,共5页
Ⅰ. INTRODUCTIONThere are immunoglobulins (Ig) and T cell receptors (TCR) on the surfaces of lymphocytes, which are able to transfer external messages. All the Ig and TCR genes originated in immunoglobulin gene superf... Ⅰ. INTRODUCTIONThere are immunoglobulins (Ig) and T cell receptors (TCR) on the surfaces of lymphocytes, which are able to transfer external messages. All the Ig and TCR genes originated in immunoglobulin gene superfamily, and some functive genes have been translated 展开更多
关键词 IG and TCR gene REARRANGEMENT minimal desidual tumor cells gene probe PCR.
原文传递
用于液相检测的双参数压电DNA传感器研究 被引量:1
18
作者 高志贤 晁福寰 +3 位作者 王红勇 房彦军 潘海峰 朱惠忠 《传感器技术》 CSCD 北大核心 2003年第10期78-80,共3页
采用自组装技术,利用亲和素-生物素系统将25-mer的生物素标记的DNA探针固定于石英谐振器金电极上,与双参数压电传感器相结合,研制成了用于液相检测的压电DNA传感器。该传感器稳定性较好,3h频移在5Hz以内;液体的体积在一定范围内对双参... 采用自组装技术,利用亲和素-生物素系统将25-mer的生物素标记的DNA探针固定于石英谐振器金电极上,与双参数压电传感器相结合,研制成了用于液相检测的压电DNA传感器。该传感器稳定性较好,3h频移在5Hz以内;液体的体积在一定范围内对双参数传感器未见明显影响;用双参数方法制作的传感器特异性等性能较好,为实现检测的自动化和生物的动力学测定打下了基础。 展开更多
关键词 压电DNA传感器 分子自组装膜 液相检测 基因探针 自组装技术 双参数传感器
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PCR技术制备ETEC耐热性肠毒素Ⅰ基因探针及其初步应用 被引量:1
19
作者 刘晓明 冯书章 +1 位作者 刘子 马从林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1992年第3期21-23,共3页
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热性肠毒素I(STI)重组质粒pSLM004酶切TaqI片段作为模板,经(PCR)技术扩增STI基因,标以α-^(32)p-dATP作STI基因探针。菌落原位杂交结果表明该探针特异性高、敏感性强。通过对180株婴幼儿腹泻病料和52株仔猪... 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热性肠毒素I(STI)重组质粒pSLM004酶切TaqI片段作为模板,经(PCR)技术扩增STI基因,标以α-^(32)p-dATP作STI基因探针。菌落原位杂交结果表明该探针特异性高、敏感性强。通过对180株婴幼儿腹泻病料和52株仔猪腹泻物分离的大肠杆菌(E.coli),以及28株已知血清型的E.Coli标准菌株菌落原位杂交检测,结果分别有11、2和2株为杂交阳性反应,阳性率分别为6%(11/180),4%(2/52),和7%(2/28);而对84株从犊牛腹泻物分离的E.coli中,未检出杂交阳性株。乳鼠生物学试验比较研究表明,15株探针检测阳性菌株中13株乳鼠试验也为阳性反应,两者符合率为87%(13/15)。 展开更多
关键词 PCR ETEC 基因探针 STI
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免疫鸡羽毛根中火鸡疱疹病毒的分离与鉴定 被引量:2
20
作者 张训海 陈溥言 蔡宝祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期321-324,共4页
用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗经腹腔免疫1日龄非免疫鸡,于第3周采集羽毛根,分别采取直接法和间接法(即经过滤获取脱细胞的游离物)接种次代鸡胚成纤维细胞(CEF),以进行病毒的分离。结果显示,在免疫后第3... 用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗经腹腔免疫1日龄非免疫鸡,于第3周采集羽毛根,分别采取直接法和间接法(即经过滤获取脱细胞的游离物)接种次代鸡胚成纤维细胞(CEF),以进行病毒的分离。结果显示,在免疫后第3、4、5、6周,2种方法都分离到病毒,第7周仅直接法分离到病毒,而第8周2种方法都没有分离到。根据分离到病毒的细胞病变(CPE)特征,结合地高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)核酸探针检测结果,表明HVT免疫鸡羽毛根中含有可脱离细胞的、具有感染性的疫苗株HVT粒子,且其可检出时间具有阶段性。 展开更多
关键词 火鸡 疱疹病毒 细胞病变 核酸探针 分离 鉴定
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