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荧光定量PCR技术及其应用 被引量：89
1
作者 韩俊英 曾瑞萍 《国外医学（遗传学分册）》 2000年第3期117-120,共4页
荧光定量ＰＣＲ是新研制出的一种核酸定量技术。该技术在ＰＣＲ反应系统中引入了荧光标记探针，具有高灵敏性、高特异性和高精确性的特点。目前已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变和多态性研究等多个领域。
关键词 基因 荧光定量 聚合酶链反应 fq-pcr
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柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测 被引量：59
2
作者 胡浩 殷幼平 +4 位作者 张利平 赵云 夏玉先 王中康 覃健 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期2491-2497,共7页
目的为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术。方法利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1,以此为基础建... 目的为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术。方法利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1,以此为基础建立了常规PCR和TaqMan探针法、SYBRGreenI荧光染料法两种荧光定量PCR(共3种)反应体系;确定了3种体系各自的检测灵敏度、特异性和准确性,据此对3种体系进行了比较;从2004年7月到2005年5月还利用常规PCR和TaqMan探针荧光定量PCR体系完成了对柑桔黄龙病病原菌在寄主体内的周年变化的动态监测。结果两种荧光定量PCR方法的灵敏度比常规PCR高出至少2～3个数量级,而TaqMan探针法由于使用了杂交探针,其特异性尤其可靠,另外两种定量PCR较小的产物片段使得它们具有更好的稳定性,加上荧光定量PCR方法本身受污染可能性小、操作简便等固有优势,使得前者更适合于柑桔黄龙病的检测。结论本研究建立的2种荧光定量PCR方法可以为柑桔黄龙病的病害早期诊断以及柑桔黄龙病病原菌近缘种的甄别提供准确、灵敏、快速的检验检疫技术。 展开更多
关键词 Cadidatvs Liberibacter asiaticus 黄龙病 SYBR Green Ⅰ TAQMAN 荧光定量pcr
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荧光定量PCR方法检测婴儿尿液中人类巨细胞病毒基因的含量 被引量：47
3
作者 何蓉 刘兰青 +1 位作者 吕绳敏 阮强 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期739-742,共4页
目的　探讨FQ PCR方法检测婴儿尿液中HCMV DNA含量对于临床症状性HCMV感染的诊断价值 ,同时 ,比较FQ PCR方法与定性PCR方法的敏感性。方法　应用双标探针水解的FQ PCR方法检测 89例临床怀疑有巨细胞病毒感染患儿 (病例组 )尿液中的HCMV ... 目的　探讨FQ PCR方法检测婴儿尿液中HCMV DNA含量对于临床症状性HCMV感染的诊断价值 ,同时 ,比较FQ PCR方法与定性PCR方法的敏感性。方法　应用双标探针水解的FQ PCR方法检测 89例临床怀疑有巨细胞病毒感染患儿 (病例组 )尿液中的HCMV DNA拷贝数 ,并以 82例同年龄组健康婴儿做对照 ,比较两组阳性标本中HCMV DNA含量。同时 ,在两组中随机选取 94例(其中疑诊为HCMV感染的 5 6例 ,健康儿 38例 ) ,用FQ PCR方法与普通定性PCR方法共同检测进行比较。结果　病例组阳性 5 2例 ,称为症状性感染组 ,对照组阳性 30例 ,称为无症状性感染组。症状性感染组 5 2例 ,尿液HCMV DNA拷贝数对数值 (log10 X)在 3 81 9 93,平均为 5 30 ;无症状性感染组 30例 ,尿液中HCMV DNA拷贝数对数值在 2 70 4 6 0 ,平均为 3 4 6 ,两组均值差异有显著性 (T =8 0 9,P<0 0 1) ,拷贝数大于 10 5拷贝 /mL高度预示症状性HCMV感染。FQ PCR方法阳性率为 6 0 6 4%(5 7/94) ,定性PCR方法阳性率 32 98%(31/94) ,两方法一致率 70 2 1%(χ2 =2 5 30 >6 6 3,P <0 0 1) ,FQ PCR方法优于定性PCR方法 (χ2 =2 3 32 >6 6 3,P <0 0 1)。结论　婴儿尿液中HCMV DNA拷贝数与临床症状性HCMV感染密切相关 ,FQ PCR方法检测婴儿尿液中HCMV 展开更多
关键词 聚合酶联反应 尿 巨细胞病毒属 巨细胞病毒感染 基因 fq-pcr 婴儿
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荧光探针定量PCR检测HBV-DNA 被引量：42
4
作者 赖宏芳 付晓野 +1 位作者 董玉琳 邓志军 《上海医学检验杂志》 2000年第1期18-19,共2页
本文采用荧光探针定量 (FQ- PCR)法准确定量检测 HBV - M阳性标本中的 HBV - DNA数量。结果显示 :HBe Ag(+)组 (32份 )的阳性率为 10 0 % ,HBV- DNA拷贝数范围在 10 5 ～ 10 9/ ml之间。 HBe Ab(+)组 (47份 )的阳性率为 2 3.4% ,HBV - ... 本文采用荧光探针定量 (FQ- PCR)法准确定量检测 HBV - M阳性标本中的 HBV - DNA数量。结果显示 :HBe Ag(+)组 (32份 )的阳性率为 10 0 % ,HBV- DNA拷贝数范围在 10 5 ～ 10 9/ ml之间。 HBe Ab(+)组 (47份 )的阳性率为 2 3.4% ,HBV - DNA拷贝数范围在 10 3～ 10 5 .7/ m l之间 ;HBs Ab(+)组 (37份 )的阳性率为 2 .7% ,HBV- DNA拷贝数为 10 5 / ml。以上 44例 HBV - DNA阳性拷贝数范围在 10 3～ 10 9/ ml之间。HBe Ag(+)组血清中 HBV- DNA含量 (10 7.0 9± 1 显著高于 HBe Ab(+)组 (10 4.7± 1 )和 HBs Ab(+)组 (10 5 )。结果表明 :HBV- DNA的 FQ - PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性 ,且定量准确 ,结果可靠 ,能避免 PCR后处理污染导致的假阳性 ,可反映 HBV真实感染和低复制状态。结合 HBV- DNA含量测定判断 HBV病毒复制状态 ,对临床诊断、治疗及判断预后具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 聚合酶链反应 DNA fq-pcr
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应用荧光定量PCR技术快速定量检测猪瘟病毒 被引量：24
5
作者 温国元 万超 +1 位作者 潘兹书 张楚瑜 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期746-750,共5页
采用荧光定量PCR技术对猪瘟病毒进行快速定量检测.实验证明,该方法的检测灵敏度可达10拷贝/μL,对于不同毒株以及各种组织样品检测结果均为阳性.通过该方法与RT PCR、nPCR的比较,发现该方法检测灵敏度比RT PCR高100倍,与nPCR具有相同的... 采用荧光定量PCR技术对猪瘟病毒进行快速定量检测.实验证明,该方法的检测灵敏度可达10拷贝/μL,对于不同毒株以及各种组织样品检测结果均为阳性.通过该方法与RT PCR、nPCR的比较,发现该方法检测灵敏度比RT PCR高100倍,与nPCR具有相同的灵敏度,并且该方法避免了常规PCR电泳检测所带来的高污染率.因此,该方法以其快速、灵敏、低污染率的优点,会在猪瘟的早期检测及预防、控制上起到重要作用. 展开更多
关键词 猪瘟病毒 荧光定量pcr 定量检测
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荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平 被引量：23
6
作者 李玉保 鲍恩东 +1 位作者 王志亮 赵茹茜 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期187-192,共6页
目的探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。方法根据HSP90、HSP70和GAPDHmRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,... 目的探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。方法根据HSP90、HSP70和GAPDHmRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90mRNA转录水平的改变。结果经1、2、4、6和10h的运输应激后,组织中HSP70mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激到10h时HSP70mRNA的转录水平升到最高,肝脏和心脏组织中HSP70mRNA的转录水平分别为对照组的2.5和4.1倍;HSP90mRNA的转录水平则随着运输应激时间的延长呈下降趋势。结论运输应激可以影响HSPmRNA转录水平的变化,并且对不同家族的HSPmRNA转录水平的影响不同;HSP70mRNA的转录水平有望成为猪运输应激的判定指标之一。 展开更多
关键词 猪 热休克蛋白 SYBR Green Ⅰ 荧光定量pcr 运输应激
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沙门氏菌荧光实时定量PCR检测试剂的研制及应用 被引量：27
7
作者 李光伟 邱杨 +8 位作者 肖性龙 詹少彤 兰敏 黄伟 周润华 姚小文 冯小军 林涛 梅艳群 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期496-499,共4页
荧光实时定量PCR技术是近年来广泛应用于沙门氏菌快速检测的现代方法之一,本研究建立了检测沙门氏菌快速、敏感、特异以及准确定量的FQ-PCR方法。采用沙门氏菌fimY基因序列,设计特异引物和探针,通过对Taq酶、Mg2+和引物探针浓度等反应... 荧光实时定量PCR技术是近年来广泛应用于沙门氏菌快速检测的现代方法之一,本研究建立了检测沙门氏菌快速、敏感、特异以及准确定量的FQ-PCR方法。采用沙门氏菌fimY基因序列,设计特异引物和探针,通过对Taq酶、Mg2+和引物探针浓度等反应体系和条件的优化,然后进行特异性和适用性实验。最优化结果为:Taq酶用量2.5U;Mg2+浓度为3.75×10-3mol/L;引物浓度为0.65×10-6mol/L,探针浓度为0.30×10-6mol/L;循环条件为step1:95℃2min,step2:95℃5s,60℃40s,40cycles。结果表明该FQ-PCR检测试剂具有快速、简单、灵敏度高、特异性强和适用范围广等优点,可应用于食品卫生监管、商品检验检疫以及临床诊断等领域。 展开更多
关键词 沙门氏菌 荧光实时定量-pcr 检测 研制
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大肠癌及其肝转移组织骨桥蛋白mRNA的表达 被引量：24
8
作者 丁凌 郑树 曹江 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第14期970-973,共4页
目的　检测骨桥蛋白mRNA在大肠癌及其肝转移灶中的表达差异和蛋白定位 ,并探讨其在大肠癌肝转移发生发展中的意义。方法　提取 4 4例大肠癌及癌旁正常组织及 2 0例大肠癌肝转移组织RNA ,采用实时荧光定量PCR(FQ PCR)法检测其中骨桥蛋白m... 目的　检测骨桥蛋白mRNA在大肠癌及其肝转移灶中的表达差异和蛋白定位 ,并探讨其在大肠癌肝转移发生发展中的意义。方法　提取 4 4例大肠癌及癌旁正常组织及 2 0例大肠癌肝转移组织RNA ,采用实时荧光定量PCR(FQ PCR)法检测其中骨桥蛋白mRNA的表达。用免疫组织化学法行骨桥蛋白的组织学检测。根据FQ PCR以CT 值为标准 ,所得数值与实际表达量对数值呈反比的原理 ,以骨桥蛋白CT GAPDHCT 的比值来评价不同组织骨桥蛋白的表达。结果　骨桥蛋白mRNA表达在大肠癌肝转移灶中表达最高 (1 0 7± 0 10 ) ,在原发大肠癌组织中次之 (1 15± 0 14 ) ,而在癌旁正常大肠组织中表达最低 (1 32± 0 18) ;统计分析差异有显著意义 (t=5 81,P =0 0 0 0及t=2 .12 ,P =0 .0 38)。免疫组织化学结果表明 ,骨桥蛋白定位于大肠癌细胞及肝转移灶旁正常肝细胞的细胞质。结论　骨桥蛋白mRNA在大肠癌中的表达高于正常组织 ,而在大肠癌肝转移组织中表达更高 ,骨桥蛋白定位于大肠癌细胞质。这提示骨桥蛋白与大肠癌的浸润转移有关 ,可作为大肠癌肝转移的预测指标之一。 展开更多
关键词 大肠癌 肿瘤转移 骨桥蛋白 fq-pcr
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氮素胁迫下强、弱化感水稻萜类代谢途径中关键酶基因差异表达的FQ-PCR分析 被引量：19
9
作者 王海斌 熊君 +4 位作者 方长旬 邱龙 吴文祥 何海斌 林文雄 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1329-1334,共6页
运用实时荧光定量PCR技术研究低氮条件下化感与非化感水稻异戊二烯代谢途径中关键酶基因的表达差异。结果表明,与正常氮条件下相比,低氮条件下化感和非化感水稻与萜类物质合成相关的12个关键酶基因表达发生了不同程度的变化,其中,化感水... 运用实时荧光定量PCR技术研究低氮条件下化感与非化感水稻异戊二烯代谢途径中关键酶基因的表达差异。结果表明,与正常氮条件下相比,低氮条件下化感和非化感水稻与萜类物质合成相关的12个关键酶基因表达发生了不同程度的变化,其中,化感水稻PI312777有6个基因表达下调,6个基因则上调;而非化感水稻Lemont有7个基因表达下调,5个基因表达上调。在供氮条件从高向低改变的过程中,两水稻中有11个基因的表达行为(上调或下调)相同,从分子水平上,证实了它们萜类代谢相关基因在响应供氮环境变化的行为生态上是相同或相似的。低氮引起两水稻催化生成与化感物质相关的单萜、倍半萜、二萜、三萜类物质的合成酶基因表达量均显著下降,从而认为营养胁迫引起水稻化感抑草作用增强与萜类物质代谢变化无关。还讨论了营养胁迫引起萜类物质代谢变化与内源激素合成和生长速率减缓的关系,认为水稻甲羟戊酸代谢途径支路中3-羟基-3-甲基戊二单酰CoA合酶、3-羟基-3-甲基戊二单酰CoA还原酶和甲羟戊酸激酶相关基因表达量不同程度的上调,维持了生长所必需的激素水平。 展开更多
关键词 水稻 异戊二烯途径 fq-pcr 氮素
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复方六月雪对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用 被引量：25
10
作者 张士军 林军 +2 位作者 蒋伟哲 黄春喜 黄仁彬 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期191-193,共3页
目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的抑制作用,为研究和开发新的抗HBV药物提供实验依据。方法:采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13天后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭。随机分成5组:CLYX高、中、低剂量组、模型... 目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的抑制作用,为研究和开发新的抗HBV药物提供实验依据。方法:采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13天后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭。随机分成5组:CLYX高、中、低剂量组、模型组和阳性对照组,每组10只,各组雏鸭均灌胃给药14天。于用药前(T0)、用药7天(T7)、14天(T14)及停药后3天(P3)分别采血,采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测血清DHBVDNA的含量。结果:CLYX各剂量组用药后血清DHBV DNA含量显著降低(P<0.01),停药3天后,CLYX低剂量组和阳性对照组血清DHBV DNA有反跳现象,而CLYX中、高剂量组血清DHBV DNA没有反跳现象。CLYX抑制DHBV DNA的作用有明显的量效和时效反应关系。结论:CLYX可有效地抑制DHBV DNA的复制。 展开更多
关键词 复方六月雪 鸭乙型肝炎病毒 荧光定量pcr
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乙型肝炎病毒DNA检测及其与血清标志物的关系探讨 被引量：26
11
作者 黄建宏 欧兴义 +1 位作者 梁小兵 黄琳 《实用诊断与治疗杂志》 2005年第1期4-5,共2页
目的:利用荧光定量聚合酶链反应方法定量检测血清中乙型肝炎病毒的数量及探讨其乙型肝炎病毒标志物表现模式的关系。方法:361份临床血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应及ELISA分别检测其乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎病毒标志物。结果:HBsA... 目的:利用荧光定量聚合酶链反应方法定量检测血清中乙型肝炎病毒的数量及探讨其乙型肝炎病毒标志物表现模式的关系。方法:361份临床血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应及ELISA分别检测其乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎病毒标志物。结果:HBsAg(+),HBeAg(+),HBcAb(+)患者血清乙型肝炎病毒DNA阳性率为99％,平均浓度为1.78×107拷贝／mL;HBsAg(+),HBe Ab(+),HBcAb(+)患者中血清乙型肝炎病毒-DNA阳性率为30％,平均浓度为1.56×104拷贝／mL;两者之间乙型肝炎病毒DNA浓度有显著性差异。HBsAg(+),HBcAb(+)患者血清乙型肝炎病毒DNA阳性率为21％,平均浓度为1.27×104拷贝／mL。结论:血清乙型肝炎病毒平均水平与乙型肝炎病毒标志物表现模式有关,荧光定量聚合酶链反应具有快速,特异,灵敏等优点,可检测乙型肝炎病毒的真实感染及复制情况,对乙型肝炎的诊断、治疗及预防具有较大的临床意义。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 荧光定量聚合酶链式反应 乙肝标志物
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荧光定量PCR的临床应用 被引量：21
12
作者 苏学飞 左中越 +1 位作者 蔡高涛 石庆荣 《右江民族医学院学报》 2000年第2期277-278,共2页
采用荧光定量PCR检测技术 ,对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒五个项目的定量测定 ,发现该方法具有技术操作简便、快速、结果判断客观、重复性能好、特异性更强和定量范围宽等优点。对于病原体感染的早... 采用荧光定量PCR检测技术 ,对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒五个项目的定量测定 ,发现该方法具有技术操作简便、快速、结果判断客观、重复性能好、特异性更强和定量范围宽等优点。对于病原体感染的早期确诊、治疗期间疗效评价、感染人群的普查以及感染源的监测均具有很高的实用价值 ,可取代定性的PCR而成为常规的检测技术。 展开更多
关键词 fq-pcr DNA 定量测定 临床应用
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细辛抗人乳头瘤病毒的作用研究 被引量：19
13
作者 邓远辉 冯怡 +3 位作者 孙静 周丹 杨柳 赖嘉莹 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期665-667,共3页
目的 :筛选细辛抗人乳头瘤病毒 (HPV)的有效部位。方法 :用系统溶媒 (石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、蒸馏水 )对细辛依次进行提取 ,应用荧光定量聚合酶链反应技术 (FQ PCR)对各提取物进行体外抗病毒药效学试验 ,检测离体尖锐... 目的 :筛选细辛抗人乳头瘤病毒 (HPV)的有效部位。方法 :用系统溶媒 (石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、蒸馏水 )对细辛依次进行提取 ,应用荧光定量聚合酶链反应技术 (FQ PCR)对各提取物进行体外抗病毒药效学试验 ,检测离体尖锐湿疣皮损中HPV DNA的扩增情况。结果 :HPV DNA经细辛水提物作用后 ,其PCR扩增检测为阴性 ,最低有效浓度为 0 4 g/ml,而细辛其它提取部位PCR扩增检测为阳性。结论 展开更多
关键词 细辛 人乳头瘤病毒 作用研究 HPV-DNA fq-pcr 提取部位 荧光定量聚合酶链反应技术 pcr扩增 筛选 药效学试验
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ELISA法检测抗-HCV-IgG抗体以及FQ-PCR检测血清HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值 被引量：23
14
作者 王江南 陈秀荣 李健 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第24期3797-3801,共5页
目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测抗-HCV-IgG抗体以及实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值。方法对70例肝病科及肾病科丙型肝炎病毒(HCV)待查者血清标本,同时采用ELISA法检测抗-HCV-IgG... 目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测抗-HCV-IgG抗体以及实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值。方法对70例肝病科及肾病科丙型肝炎病毒(HCV)待查者血清标本,同时采用ELISA法检测抗-HCV-IgG抗体滴度,FQ-PCR法检测HCV-RNA载量,全自动生化分析仪检测ALT、AST,分析不同检测结果组合类型的HCV-RNA载量或抗-HCV-IgG抗体滴度与ALT、AST、AST/ALT值的关系。结果在70例血清标本中,用ELISA法检测到抗-HCV-IgG(+)(S/C.O.值≥1)有49例,使用FQ-PCR法检测到HCV-RNA(+)(载量≥5.0×102IU/m L)有51例。男女之间感染率差异无统计学意义(P<0.05),但不同年龄组感染率差异有统计学意义(P<0.05)。单阳性型患者与双阳性型患者的血清ALT异常率、AST异常率或AST/ALT倒置率(AST/ALT>1)差异均无统计学意义(均P>0.05)。HCV-RNA(+)且抗-HCV-IgG(+)患者的lgHCV-RNA载量与抗-HCV-IgG抗体S/C.O.值、ALT水平均呈线性正相关(r值分别为0.586、0.521,均P<0.05),但是与AST/ALT值不呈线性相关(r=-0.076,P>0.05)。HCV-RNA(+)且抗-HCV-IgG(-)患者的lg HCV-RNA载量与ALT水平、AST/ALT值均无直线相关关系存在(r值分别为-0.333、0.611,均P>0.05)。HCV-RNA(-)且抗-HCV-Ig G(+)患者的抗-HCV-IgG抗体S/C.O.值与ALT水平、AST/ALT值也无直线相关关系存在(r值分别为0.485、0.563,均P>0.05)。结论单一使用ELISA法检测抗-HCV-IgG抗体或FQ-PCR法检测HCV-RNA,对于丙型肝炎的诊断都有一定局限性。同时应用ELISA法和FQ-PCR法进行检测时,不同结果组合类型的患者,其HCV-RNA载量或抗-HCV-IgG抗体S/C.O.值与ALT水平、AST/ALT值的相关性并不一致。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 ELISA fq-pcr ALT AST
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HCV RNA载量与肝脏组织损伤的关系 被引量：21
15
作者 丁柳 周易 +4 位作者 宋兴勃 叶远馨 陆小军 张磊 应斌武 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第3期481-483,共3页
目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)RNA复制水平与肝功能丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)之间的相互关系。方法收集1182例疑似丙肝病人血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HCV RNA,利用酶动力法测定ALT、AST,采用E... 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)RNA复制水平与肝功能丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)之间的相互关系。方法收集1182例疑似丙肝病人血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HCV RNA,利用酶动力法测定ALT、AST,采用ELISA测定抗HCV抗体。数据采用SPSS16.0统计软件处理。结果病人血清样本中,HCV RNA阳性801例(64.8%),其中抗HCV阳性766例(95.6%);HCV RNA阴性381例(32.2%),其中抗HCV阳性100例(26.2%)。HCV RNA阳性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为59.0%和60.8%;抗-HCV阴性者为31.4%和34.2%。HCV RNA阴性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为24.0%和15.0%,抗-HCV阴性者为13.9%和12.1%。HCV RNA含量与ALT、AST水平明显成正相关,r=0.62,P<0.05。结论 HCV RNA含量与肝组织损伤程度成正相关。 展开更多
关键词 丙氨酸氨基转移酶 丙型肝炎病毒(HCV)RNA 荧光定量聚合酶链反应
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HBVpreS_1-Ag、HBVpreS_2-Ag、HBV-DNA、HBVM的相关性分析及其意义 被引量：18
16
作者 乐爱平 鞠北华 胡庆宏 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2003年第6期344-346,共3页
探讨HBV感染者血清中HBVM、HBV -DNA、HBVpreS1-Ag及HBVpreS2 -Ag的相关性及其意义。采用ELISA法检测HBVM、HBVpreS1抗原和HBVpreS2 抗原 ,FQ -PCR定量检测HBV -DNA。HBeAg与HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原、HBV -DNA在HBV感染者血清中具... 探讨HBV感染者血清中HBVM、HBV -DNA、HBVpreS1-Ag及HBVpreS2 -Ag的相关性及其意义。采用ELISA法检测HBVM、HBVpreS1抗原和HBVpreS2 抗原 ,FQ -PCR定量检测HBV -DNA。HBeAg与HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原、HBV -DNA在HBV感染者血清中具有良好的平行关系 ,其阴 /阳性符合率均高于 73 1%。HBV -DNA、HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原之间均无显著性差异 (P >0 0 5 )。HBeAg、HBV -DNA、HBVpreS1抗原、HBVpreS2抗原之间高度相关。HBVpreS1抗原和HBVpreS2 抗原较HBeAg敏感。应用HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原、HBV -DNA及HBVM同时进行联合检测 ,对HBV感染的早期诊断 ,了解HBV复制、转归 ,更确切地掌握病情的发生。 展开更多
关键词 HBVpreS1—Ag HBVpreS2—Ag HBV—DNA HBVM 相关性分析 乙型肝炎
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荧光定量PCR法与ELISA法联合检测乙型肝炎的临床价值探讨 被引量：18
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作者 高娟 刘静 《中国优生与遗传杂志》 2017年第9期29-31,共3页
目的研究荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)与ELISA法检测乙肝免疫学标志物(HBV-M)的临床价值。方法本研究选取2016年1月~2017年6月在西安高新医院检测的382例乙肝患者为研究对象,全部患者均采用荧光定量PCR法和ELISA法分... 目的研究荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)与ELISA法检测乙肝免疫学标志物(HBV-M)的临床价值。方法本研究选取2016年1月~2017年6月在西安高新医院检测的382例乙肝患者为研究对象,全部患者均采用荧光定量PCR法和ELISA法分别对HBV-DNA和乙肝两对半等免疫学指标进行检测,免疫学指标的检测顺序为乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag)、乙肝病毒表面抗体(HBs Ab)、乙肝病毒e抗原(HBe Ag)、乙肝病毒e抗体(HBe Ab)、乙肝病毒核心抗体(HBc Ab)。比较不同HBV-M模式检测结果。结果模式1(大三阳组)HBV DNA阳性率最高,为94.6%,显著高于其他组,差异具有统计学意义(P<0.05)。模式1(大三阳组)的HBV DNA表达水平为(6.57±1.51)lg copies/ml,明显高于其他模式的HBV DNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论采用FQ-PCR和HBV免疫学标志物检测相结合的方法,对临床乙型肝炎患者的早期诊断、病情判断、治疗方案的选择及预后具有重要指导价值。 展开更多
关键词 荧光定量pcr HBV-DNA 乙肝免疫学标志物 酶联免疫吸附实验
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复方六月雪对HepG2.2.15细胞HBV DNA的抑制作用 被引量：16
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作者 张士军 焦杨 +2 位作者 林兴 莫国艳 黄仁彬 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期59-61,共3页
目的:观察复方六月雪体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用MTT法检测复方六月雪对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在最大无毒浓度(TC0)基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收... 目的:观察复方六月雪体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用MTT法检测复方六月雪对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在最大无毒浓度(TC0)基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量。结果:TC50为3.070mg/ml,TC0为0.945mg/ml,复方六月雪对HepG2.2.15细胞毒性较低。无毒浓度下的复方六月雪在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制细胞HBVDNA的复制。结论:CLYX在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。 展开更多
关键词 复方六月雪 抗乙型肝炎病毒 HBV DNA HEPG2.2.15细胞 荧光定量pcr
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FQ-PCR检测宫颈涂片剩余细胞内HPV16、18型感染的临床意义 被引量：14
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作者 瞿文珍 邹先进 +3 位作者 郑飞云 詹丽飞 胡燕 彭英 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期80-82,共3页
目的 :探讨实时荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测宫颈涂片剩余细胞内人乳头瘤病毒 (HPV) 16、18型感染 ,建立快速、灵敏的检测方法的临床意义。方法 :采用FQ PCR技术检测 12 4例异常宫颈细胞和组织标本HPV16、18型感染状况。结果 :细... 目的 :探讨实时荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测宫颈涂片剩余细胞内人乳头瘤病毒 (HPV) 16、18型感染 ,建立快速、灵敏的检测方法的临床意义。方法 :采用FQ PCR技术检测 12 4例异常宫颈细胞和组织标本HPV16、18型感染状况。结果 :细胞学诊断低度鳞状上皮内病变 (LSIL) 4 5例 ,其中FQ PCR检测宫颈细胞标本HPV16、18型DNA阳性14例 (阳性率 31.1% ) ;高度鳞状上皮内病变 (HSIL) 38例 ,HPV16、18型DNA阳性 2 6例 (6 8.4 % ) ;未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞 (ASCUS) 30例 ,HPV16、18型DNA阳性 10例 (33.3% ) ;鳞状细胞癌 9例 ,HPV16、18型DNA阳性 8例 (88.9% )。组织学检查诊断CINⅠ级 6 7例 ,其中FQ PCR检测活检组织标本HPV16、18型DNA阳性 2 8例 (阳性率 4 1.8% ) ;CINⅡ 14例 ,HPV16、18型DNA阳性 9例 (6 4 .3% ) ;CINⅢ级 11例 ,HPV16、18型DNA阳性 8例 (72 .7% ) ;鳞状细胞癌 2 3例 ,HPV16、18型DNA阳性 17例 (73.9% )。细胞和活检组织两种标本检出的HPV16、18型DNA阳性率差异无显著性 (χ2=1.5 4 ,P >0 .0 5 )。结论 :FQ PCR方法检测宫颈细胞标本HPV16、18型感染 ,具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点 。 展开更多
关键词 fq-pcr 宫颈细胞涂片 临床意义 人乳头瘤病毒 细胞学诊断 宫颈癌
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实时荧光定量PCR在手足口病病原体检测中的应用 被引量：16
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作者 李金明 熊德琴 +1 位作者 齐晓彤 斯志娟 《实验与检验医学》 CAS 2011年第2期129-130,共2页
目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测手足口病的病原体,并通过与病毒学培养法和ELISA法的比较,评价该法对诊断小儿手足口病感染的价值。方法临床315例手足口病疑似患者和66例手足口病密切接触者的粪便、咽拭子、疱疹液和血清... 目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测手足口病的病原体,并通过与病毒学培养法和ELISA法的比较,评价该法对诊断小儿手足口病感染的价值。方法临床315例手足口病疑似患者和66例手足口病密切接触者的粪便、咽拭子、疱疹液和血清标本,分别采用肠道病毒通用型(EV)和肠道病毒71型(EV71)以及柯萨奇病毒A组16型(CA16)的特异引物进行FQ-PCR检测,随机选30例进行病毒学培养,并结合ELISA法检测结果进行比较。结果 315例手足口病疑似组FQ-PCR法检测到EV阳性率为72.7%(229/315),ELISA法检测到EV阳性率为40%(126/315);66例手足口病密切接触组FQ-PCR法检测到EV阳性率为34.5%(23/66),ELISA法检测到EV阳性率为18.2%(12/66);FQ-PCR法与病毒学培养结果符合率为100%。结论咽拭子标本较适合于FQ-PCR检测手足口病病原体的检查,FQ-PCR是一种敏感性高、特异性好、速度快的检测手足口病病原体的方法,对手足口病病原体的及时检测和流行病学观察都具有重要作用。 展开更多
关键词 fq-pcr 手足口病 肠道病毒 EV71 CA16
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