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逆境相关转录因子DREB2A转化紫花苜蓿的研究 被引量:7
1
作者 刘艳芝 韦正乙 +3 位作者 邢少辰 谭化 王中伟 董英山 《吉林农业科学》 CSCD 2007年第6期27-29,49,共4页
以逆境性相关转录因子DREB2A为目的基因、除草剂抗性的bar基因为标记,构建了植物表达载体pCD2A,并通过农杆菌介导法以无菌苗子叶为外植体转化公农1号苜蓿。经过共培养、抑菌和筛选培养,在含有2 mg/L Basta的培养基获得71株抗性再生植株... 以逆境性相关转录因子DREB2A为目的基因、除草剂抗性的bar基因为标记,构建了植物表达载体pCD2A,并通过农杆菌介导法以无菌苗子叶为外植体转化公农1号苜蓿。经过共培养、抑菌和筛选培养,在含有2 mg/L Basta的培养基获得71株抗性再生植株。用1 mg/L的Basta对抗性植株叶片进行进一步筛选,并经PCR检测,获得11株阳性植株,表明DREB2A已整合到植株的基因组中。 展开更多
关键词 苜蓿 转录因子 dreb2A 农杆菌介导转化法
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割手密2个DREB2基因的克隆与比较分析 被引量:7
2
作者 姚艳丽 胡小文 +2 位作者 徐磊 邢淑莲 刘洋 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2924-2929,共6页
干旱应答元件结合蛋白(dehydration responsive element binding protein,DREB),在植物应对干旱、盐碱和低温胁迫的反应中起非常重要的调控作用。利用已知的甘蔗栽培种DREB2转录因子序列,设计引物,按照同源克隆的方法,获得了2个割手密DR... 干旱应答元件结合蛋白(dehydration responsive element binding protein,DREB),在植物应对干旱、盐碱和低温胁迫的反应中起非常重要的调控作用。利用已知的甘蔗栽培种DREB2转录因子序列,设计引物,按照同源克隆的方法,获得了2个割手密DREB2基因组DNA序列,分别命名为Ss DREB2-a和Ss DREB2-f(Gen Bank登录号分别为:KU963272和KU963277)。序列分析结果表明,Ss DREB2-a基因序列全长为1 578 bp,Ss DREB2-f基因序列全长为1 729 bp,2个基因均包含1个内含子和2个外显子。Ss DREB2-a和Ss DREB2-f基因的c DNA序列全长分别为824 bp和971 bp,均编码262个氨基酸。序列比对分析显示,2个基因的序列相似性为96.6%,编码的蛋白相似性为98.9%,存在3个氨基酸变异位点。系统进化分析结果显示,割手密DREB2转录因子与高粱、牛鞭草、斑茅、玉米等植物的DREB2转录因子的同源关系最近。基因的获得为下一步了解DREB2基因表达与割手密抵御非生物胁迫能力之间的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 割手密 dreb2 基因克隆 比较分析
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北方旱地红小豆DREB2A基因克隆及表达分析 被引量:6
3
作者 陈红 化烨 +3 位作者 王正旭 王百姓 马生发 盖琼辉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期3825-3831,共7页
脱水响应元件结合蛋白(DREB)转录因子在植物干旱和热胁迫应激调控中具有重要功能。为提高红小豆在北方干旱缺水条件下的产量,本研究以拟南芥DREB2A基因序列为依据,从红小豆基因组数据库中鉴定出了1个DREB2A的同源基因(Vigna angularis,... 脱水响应元件结合蛋白(DREB)转录因子在植物干旱和热胁迫应激调控中具有重要功能。为提高红小豆在北方干旱缺水条件下的产量,本研究以拟南芥DREB2A基因序列为依据,从红小豆基因组数据库中鉴定出了1个DREB2A的同源基因(Vigna angularis,登录号为XP_017429189.1)。经基因表达分析,结果表明:此基因为拟南芥DREB2A的直系同源基因,编码的蛋白不具有信号肽的作用,二级结构主要以无规则卷曲为主,而且含有多种逆境性转录因子。通过物种间系统进化树分析发现,该基因与红小豆DREB2A亲缘关系近的植物是沙冬青。荧光定量PCR技术分析结果表明,在红小豆非生物胁迫的调控中红小豆DREB2A也起到重要作用。本研究为阐释红小豆抗逆分子机制提供理论基础。 展开更多
关键词 红小豆(Vigna umbellata) dreb2A 生物信息学分析
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DREB2s转录因子基因的表达调控机制研究进展 被引量:6
4
作者 张志飞 杨知建 +1 位作者 周倩 赵志丽 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期297-303,共7页
DREB2s是植物特有的转录因子,隶属于AP2/EREBP转录因子家族,对干旱、高盐或低温、高温等非生物胁迫应答基因的表达有重要的调控作用。不同植物来源的DREB2在基因结构上有细微差异,对非生物胁迫的响应亦有不同表现。本文阐述了DREB2s的... DREB2s是植物特有的转录因子,隶属于AP2/EREBP转录因子家族,对干旱、高盐或低温、高温等非生物胁迫应答基因的表达有重要的调控作用。不同植物来源的DREB2在基因结构上有细微差异,对非生物胁迫的响应亦有不同表现。本文阐述了DREB2s的蛋白质结构特征及其对多种非生物胁迫的应答反应,并深入分析了DREB2s转录水平和转录后加工水平的表达调控分子机制的最新研究进展,为理解DREB2s基因功能、分子调控机制及作物抗逆基因工程提供理论依据。 展开更多
关键词 dreb2 非生物胁迫 转录因子 转录调控
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拟南芥抗逆基因DREB2A转化大豆的研究 被引量:5
5
作者 于志晶 蔡勤安 +2 位作者 刘艳芝 齐广勋 马瑞 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期606-608,共3页
为提高大豆的耐旱耐盐碱性,将拟南芥转录因子DREB2A序列优化后,构建了植物表达载体pCAMBIA3300-DREB2A,利用农杆菌介导法将DREB2A基因导入大豆品种Willimas 82和Bert中,转化率分别为0.8%和3.2%。对抗性转基因植株进行PCR检测,2个品种分... 为提高大豆的耐旱耐盐碱性,将拟南芥转录因子DREB2A序列优化后,构建了植物表达载体pCAMBIA3300-DREB2A,利用农杆菌介导法将DREB2A基因导入大豆品种Willimas 82和Bert中,转化率分别为0.8%和3.2%。对抗性转基因植株进行PCR检测,2个品种分别获得阳性植株28和63株,表明DREB2A已整合到大豆基因组中。 展开更多
关键词 大豆 dreb2A 耐盐耐旱 农杆菌介导遗传转化
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拟南芥DREB2A基因的克隆及植物荧光表达载体的构建 被引量:4
6
作者 段红英 丁笑生 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第3期20-22,共3页
以拟南芥幼苗总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增到DREB2A基因,并将其克隆到植物表达载体pCAM-BIA1304中CaMV 35 S启动子与poly(A)终止子之间。酶切鉴定及测序列结果都表明,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1304-DREB2A。另外,获得了携带DRE... 以拟南芥幼苗总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增到DREB2A基因,并将其克隆到植物表达载体pCAM-BIA1304中CaMV 35 S启动子与poly(A)终止子之间。酶切鉴定及测序列结果都表明,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1304-DREB2A。另外,获得了携带DREB2A基因的根瘤农杆菌菌株,为以后转基因植物工作奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 dreb2A RT-PCR 植物表达载体 根瘤农杆菌
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转录因子DREB2A植物表达载体构建及烟草转基因研究 被引量:4
7
作者 曾会明 马挺军 王华芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第2期72-77,共6页
构建转录因子DREB2A基因表达载体,通过叶盘法进行烟草的转基因表达研究。经过抗生素卡那霉素抗性筛选-PCR鉴定-Southern杂交检测,表明目的基因已经整合到烟草基因组DNA中。转基因植株出现生长迟滞现象。
关键词 dreb2A 转基因 生长迟滞
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14个赖草属植物DREB2基因的克隆与SNP分析 被引量:4
8
作者 高刚 邓家彬 +3 位作者 苟学梅 王茜 张艳 杨瑞武 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期47-51,共5页
植物的DREB2转录因子具有抗旱、抗盐碱的功能。对小麦族赖草属的14个物种的DREB2基因进行了克隆、测序和比对分析。结果表明:(1)14个赖草属植物的DREB2基因序列和氨基酸序列相对保守,总相似度分别为98.05%和97.78%;(2)Leymus mollis的DR... 植物的DREB2转录因子具有抗旱、抗盐碱的功能。对小麦族赖草属的14个物种的DREB2基因进行了克隆、测序和比对分析。结果表明:(1)14个赖草属植物的DREB2基因序列和氨基酸序列相对保守,总相似度分别为98.05%和97.78%;(2)Leymus mollis的DREB2基因在编码区有3 bp CTT的缺失;(3)14条DREB2基因序列共发现79个SNP,SNP发生频率为1SNP/10.6 bp;(4)进化树分析显示DREB2基因能把14个赖草属物种很好的分开。 展开更多
关键词 赖草属 dreb2 单核苷酸多态性(SNP) 序列分析
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农杆菌介导法将DREB2A基因转入玉米 被引量:3
9
作者 王奕 任贤 +3 位作者 于志晶 蔡勤安 林秀峰 马瑞 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期48-52,共5页
通过农杆菌介导法将耐盐基因DREB2A转入玉米自交系H99以及杂交种H99×A188中,同时研究了农杆菌浓度、侵染时间和AS浓度等因素对转化效率的影响。研究表明:农杆菌菌液浓度在OD值为0.5-0.6时农杆菌感染能力最强,适宜的侵染时间为20m... 通过农杆菌介导法将耐盐基因DREB2A转入玉米自交系H99以及杂交种H99×A188中,同时研究了农杆菌浓度、侵染时间和AS浓度等因素对转化效率的影响。研究表明:农杆菌菌液浓度在OD值为0.5-0.6时农杆菌感染能力最强,适宜的侵染时间为20min;共培养基中乙酰丁香酮(AS)的适宜浓度为150μmol/L。通过该优化体系获得的转基因植株110株,经PCR分析鉴定,其中5株表现阳性,初步证明外源基因已经整合到玉米基因组中。 展开更多
关键词 玉米 农杆菌介导转化 dreb2A 耐盐性
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NFXL1 functions as a transcriptional activator required for thermotolerance at reproductive stage in Arabidopsis
10
作者 Qiao‐Yun Zhu Lin‐Lin Zhang Jian‐Xiang Liu 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2024年第1期54-65,共12页
Plants are highly susceptible to abiotic stresses,particularly heat stress during the reproductive stage.However,the specific molecular mechanisms underlying this sensitivity remain largely unknown.In the current stud... Plants are highly susceptible to abiotic stresses,particularly heat stress during the reproductive stage.However,the specific molecular mechanisms underlying this sensitivity remain largely unknown.In the current study,we demonstrate that the Nuclear Transcription Factor,X-box Binding Protein 1-Like 1(NFXL1),directly regulates the expression of DEHYDRATION-RESPONSIVE ELEMENT-BINDING PROTEIN 2A(DREB2A),which is crucial for reproductive thermotolerance in Arabidopsis.NFXL1 is upregulated by heat stress,and its mutation leads to a reduction in silique length(seed number)under heat stress conditions.RNA-Seq analysis reveals that NFXL1 has a global impact on the expression of heat stress responsive genes,including DREB2A,Heat Shock Factor A3(HSFA3)and Heat Shock Protein 17.6(HSP17.6)in flower buds.Interestingly,NFXL1 is enriched in the promoter region of DREB2A,but not of either HSFA3 or HSP17.6.Further experiments using electrophoretic mobility shift assay have confirmed that NFXL1 directly binds to the DNA fragment derived from the DREB2A promoter.Moreover,effector-reporter assays have shown that NFXL1 activates the DREB2A promoter.The DREB2A mutants are also heat stress sensitive at the reproductive stage,and DEREB2A is epistatic to NFXL1 in regulating thermotolerance in flower buds.It is known that HSFA3,a direct target of DREB2A,regulates the expression of heat shock proteins genes under heat stress conditions.Thus,our findings establish NFXL1 as a critical upstream regulator of DREB2A in the transcriptional cassette responsible for heat stress responses required for reproductive thermotolerance in Arabidopsis. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS dreb2A heat stress NFXL1 REPRODUCTIVE THERMOTOLERANCE
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磷酸肌醇磷脂酶C在DREB2表达调控中的作用 被引量:2
11
作者 李帅 单洪瑜 +2 位作者 董晓雨 郭长虹 郭东林 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期110-115,共6页
环境胁迫对植物的生长不利。转录因子DREB2对干旱、高温、低温等非生物胁迫应答基因的表达具有重要的调控作用。磷酸肌醇磷脂酶C对DREB2基因有双向调节机制。深入了解DREB2和磷酸肌醇磷脂酶C的研究进展及其在生物工程上的应用,以及磷酸... 环境胁迫对植物的生长不利。转录因子DREB2对干旱、高温、低温等非生物胁迫应答基因的表达具有重要的调控作用。磷酸肌醇磷脂酶C对DREB2基因有双向调节机制。深入了解DREB2和磷酸肌醇磷脂酶C的研究进展及其在生物工程上的应用,以及磷酸肌醇磷脂酶C对DREB2基因的表达调控机理,可以为磷酸肌醇磷脂酶C和DREB2基因在提高植物胁迫耐受性中的利用提供基础。 展开更多
关键词 dreb2 磷酸肌醇磷脂酶C 胁迫耐受
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紫大麦草中DREB类转录因子基因Hvi917DREB2的克隆、原核表达及序列分析 被引量:1
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作者 肖雄 王睿辉 +2 位作者 刘桂茹 温树敏 谷俊涛 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期41-46,共6页
DREB类转录因子是一类与植物逆境胁迫响应相关的重要蛋白,本研究利用同源克隆方法和RACE技术从紫大麦草(Hordeum violaceum)中分离到1个DREB类转录因子基因,命名为Hvi917 DREB2。序列分析表明Hvi917 DREB2基因含有1个792bp的开放阅读框... DREB类转录因子是一类与植物逆境胁迫响应相关的重要蛋白,本研究利用同源克隆方法和RACE技术从紫大麦草(Hordeum violaceum)中分离到1个DREB类转录因子基因,命名为Hvi917 DREB2。序列分析表明Hvi917 DREB2基因含有1个792bp的开放阅读框,编码264个氨基酸残基,含有1个保守的AP2结构域,属于AP2大家族。该基因编码的氨基酸序列与Genebank中短芒大麦草AP2蛋白HbDREB2、DREB1(登录号分别为:AAU29412.1和AER42620.1)具有99%的氨基酸序列一致性。将该基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量为34.5kD的蛋白。 展开更多
关键词 紫大麦草 dreb2 基因克隆 转录因子 原核表达
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胡杨DREB2A和WRKY19基因启动子逆境响应元件及其功能分析 被引量:1
13
作者 王叶利 唐文思 王华芳 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期428-436,共9页
胡杨(Populus euphratica Oliv.)是唯一适应沙漠环境的高大乔木树种,抗逆性极强。其抗逆机制对植物抗性育种极为重要,国内外极为关注。本研究以生物信息学和转GUS基因烟草瞬时表达等手段解析胡杨PeDREB2A和PeWRKY19基因启动子序列顺式... 胡杨(Populus euphratica Oliv.)是唯一适应沙漠环境的高大乔木树种,抗逆性极强。其抗逆机制对植物抗性育种极为重要,国内外极为关注。本研究以生物信息学和转GUS基因烟草瞬时表达等手段解析胡杨PeDREB2A和PeWRKY19基因启动子序列顺式作用元件。结果表明,两个启动子均有干旱、NaCl、4℃、ABA响应顺式作用元件,CANNTG (N=A/T/C/G)、GRWAAW (R=G/A, W=A/T)、ACGT和CACATG等,增强GUS基因表达。PeDREB2A基因启动子序列1 886 bp,分别含干旱、盐、低温、ABA响应顺式作用元件等9个、11个、9个和5个;-888~-1 271 bp为盐负调控区,-1 271~-1 738 bp为干旱正调控区和ABA负调控区,-1 738~-1 878 bp为盐正调控区和干旱负调控区。PeWRKY19基因启动子序列为1 734 bp,分别含干旱、盐、低温和ABA响应顺式作用元件16个、5个、11个和4个;-176~-417 bp为盐负调控和ABA负调控区,-417~-696 bp为干旱负调控区和低温正调控区,-696~-849 bp为盐正调控区。本研究为阐释胡杨抗逆分子机制提供基础。 展开更多
关键词 胡杨(Populus euphratica) 启动子 顺式作用元件 dreb2A WRKY19
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组成型激活基因DREB2A载体的构建及其对烟草的遗传转化 被引量:1
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作者 赵清 王罡 +1 位作者 季静 金超 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期42-48,共7页
为探索DREB2ACA基因(constitutive activate DREB2A,组成型激活DREB2A基因)在植物抗盐反应中的功能及其在植物抗逆基因工程中的运用,用SOE-PCR(overlapping extension-PCR,折叠延伸PCR)方法克隆了DREB2ACA,并将其置于盐诱导的rd29A启动... 为探索DREB2ACA基因(constitutive activate DREB2A,组成型激活DREB2A基因)在植物抗盐反应中的功能及其在植物抗逆基因工程中的运用,用SOE-PCR(overlapping extension-PCR,折叠延伸PCR)方法克隆了DREB2ACA,并将其置于盐诱导的rd29A启动子控制下,构建了植物表达载体,并通过农杆菌介导的方法将目的基因转入烟草。Southern blot证明了目的基因成功整合到烟草基因组中。RT-PCR表明,目的基因受盐胁迫诱导表达。在盐处理条件下,转基因烟草比对照具有更好的生长状态,含有较高的光和色素,具有较高的光合速率及较低的MDA含量。说明DREB2ACA的表达提高了植物抗逆能力,该基因在抗盐领域具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 dreb2A 转基因 烟草 抗盐
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不同水稻种质中渗透胁迫抗性基因DREB2A的遗传多样性分析 被引量:1
15
作者 谭景发 贺文闯 +6 位作者 董西龙 党腾飞 谢怿 席锟 孙勇胜 胡亚林 靳德明 《中国农学通报》 2020年第35期1-13,共13页
本研究旨在分析转录因子DREB2A基因在不同水稻种质中的遗传多样性,以期为水稻耐渗透胁迫遗传改良提供分子工具。利用单倍型分析、系统进化树、遗传距离和密码子偏好性分析,对85份不同类型水稻种质中DREB2A基因的功能性核苷酸序列变异及... 本研究旨在分析转录因子DREB2A基因在不同水稻种质中的遗传多样性,以期为水稻耐渗透胁迫遗传改良提供分子工具。利用单倍型分析、系统进化树、遗传距离和密码子偏好性分析,对85份不同类型水稻种质中DREB2A基因的功能性核苷酸序列变异及遗传多样性进行了研究。共鉴定出55个核苷酸变异位点,其中12个位于编码区,43个位于非编码区;鉴定出12个DREB2A等位基因型,其中来自非洲栽培稻(Oryza glaberrima)的3个等位基因型表现大片段变异;根据DREB2A基因的序列变异鉴定出39个单倍型,其中33个为新单倍型;将所有单倍型分为三组(Group Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ),其中非洲栽培稻(Oryza glaberrima)中的10个单倍型单独分为一组(Group Ⅲ);系统进化树、遗传距离和密码子偏好性分析均表明Group Ⅲ与其他两组具有较大差异。对85份不同类型水稻种质中DREB2A基因的序列分析表明,非洲栽培稻(Oryza glaberrima)中的DREB2A等位基因在序列变异、系统进化关系和密码子偏好性方面均明显不同于其他种质材料中的等位基因。 展开更多
关键词 水稻 渗透胁迫 转录因子 dreb2A 遗传多样性 密码子偏好性
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转录因子DREB1A和DREB2A调控机制的比较分析 被引量:1
16
作者 刘晓颖 张竞秋 +2 位作者 高连静 陈丽媛 王振英 《生物学通报》 2008年第1期21-22,共2页
DREB转录因子即干旱应答元件结合蛋白质,它能特异结合启动子中含有DRE/CRT顺式元件,激活许多逆境诱导基因的表达,增强植物对逆境的忍耐力。从DREB1A和DREB2A转录因子结构、功能、调控表达的基因以及蛋白稳定性等方面进行比较分析,为植... DREB转录因子即干旱应答元件结合蛋白质,它能特异结合启动子中含有DRE/CRT顺式元件,激活许多逆境诱导基因的表达,增强植物对逆境的忍耐力。从DREB1A和DREB2A转录因子结构、功能、调控表达的基因以及蛋白稳定性等方面进行比较分析,为植物抗逆转录因子研究及应用提供依据。 展开更多
关键词 DRE顺式作用元件 逆境诱导基因dreb1A dreb2A
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Drought Tolerance Enhancement with Co-Overexpression of DREB2A and APX in Indica Rice (<i>Oryza sativa</i>L.)
17
作者 Jagtap Sandhya Talakayala Ashwini +2 位作者 Ravula Manisha Mahankali Vinodha Ankanagari Srinivas 《American Journal of Plant Sciences》 2021年第2期234-258,共25页
Rice<b> </b><span style="font-family:Verdana;">is a major cereal crop providing food and energy to more than half of world’s population and drought is a challenging abiotic stress limiting... Rice<b> </b><span style="font-family:Verdana;">is a major cereal crop providing food and energy to more than half of world’s population and drought is a challenging abiotic stress limiting rice production</span><span style="font-family:Verdana;">.</span><span style="font-family:Verdana;"> Engineering drought tolerance trait is a major bottle neck because of multigenic control and complex nature. Two promising candidate genes utilized in engineering drought tolerance include DREB2A transcription factor (a master regulator of downstream stress inducible genes) and APX (an important ROS scavenging enzyme). Overexpression of DREB genes ha</span><span style="font-family:Verdana;">s</span><span style="font-family:Verdana;"> shown encouraging results but with </span><span style="font-family:Verdana;">a </span><span style="font-family:Verdana;">negative impact on plant morphology and production. Moreover, co-expression of DREB2A and APX genes</span><span style="font-family:Verdana;">’</span><span style="font-family:Verdana;"> influence on drought stress has not been studied. Hence, in the present study</span><span style="font-family:Verdana;">,</span><span style="font-family:;" "=""><span style="font-family:Verdana;"> overexpression of single genes DREB2A or APX and co-expression of these genes were studied for enhancement of drought tolerance in indica rice. Both genes under control of CaMV 35S promoter were transferred by </span><i><span style="font-family:Verdana;">Agrobacterium</span></i><span style="font-family:Verdana;"> transformation into rice variety BPT5204 popular for slender grains in South India. Confirmation of T-DNA integration into rice genome was done with PCR analysis of transgenes. Homozygous transgenic lines of DREB2A, </span><span><span style="font-family:Verdana;">APX and DREB2A-APX generated in T</span><sub><span style="font-family:Verdana;">3</span></sub><span style="font-family:Verdana;"> generation were evaluated for</span></span><span style="font-family:Verdana;"> drought tolerance during s 展开更多
关键词 APX dreb2A Reactive Oxygen Species Transgenic Rice Drought Tolerance
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短芒大麦DREB2基因的克隆及其转基因烟草的鉴定
18
作者 王呈玉 张明哲 +1 位作者 万甡 李彦舫 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期643-646,共4页
以短芒大麦为材料,应用RT-PCR技术扩增获得792 bp的DREB2基因,构建了重组植物表达载体pBI-DREB2。通过农杆菌转化法将其导入烟草,并利用PCR、PCR-Southern和RT-PCR技术对获得的20株卡那霉素阳性转基因烟草进行分子鉴定。结果表明:短芒大... 以短芒大麦为材料,应用RT-PCR技术扩增获得792 bp的DREB2基因,构建了重组植物表达载体pBI-DREB2。通过农杆菌转化法将其导入烟草,并利用PCR、PCR-Southern和RT-PCR技术对获得的20株卡那霉素阳性转基因烟草进行分子鉴定。结果表明:短芒大麦DREB2基因已整合到烟草基因组中,并能在转录水平上表达。 展开更多
关键词 短芒大麦 dreb2 基因克隆 转基因
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敲除AMP1基因可提高干旱响应基因的表达量从而增强拟南芥的抗旱能力
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作者 夏金婵 田丽丽 +1 位作者 刘维仲 何奕昆 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期727-733,共7页
干旱严重影响植物的生长发育及农作物产量,因此研究植物的干旱反应机制显得至关重要.我们发现在拟南芥中一个推测的谷氨酸羧肽酶,AMP1,其缺失突变体amp1的抗旱能力大大增强.基因芯片分析表明,amp1突变体抗旱能力的提高与许多干旱响应基... 干旱严重影响植物的生长发育及农作物产量,因此研究植物的干旱反应机制显得至关重要.我们发现在拟南芥中一个推测的谷氨酸羧肽酶,AMP1,其缺失突变体amp1的抗旱能力大大增强.基因芯片分析表明,amp1突变体抗旱能力的提高与许多干旱响应基因的高表达息息相关,例如,在amp1突变体中2个干旱诱导表达的转录因子基因,DREB2A和DREB1A的表达量升高;AT1G61340(LEA蛋白)的表达量也升高了很多,它在干旱条件下具有解毒和缓解细胞伤害的作用.而且,在amp1突变体中DREB2A转录因子的2个下游基因RD29A和COR47受干旱诱导的表达量和时间都比野生型中高和早.在突变体中一些参与蛋白代谢、糖代谢和脂代谢的基因上调,一些保护和解毒相关基因表达量也升高,这些都可以给突变体在抗旱反应过程提供一定的保护作用.因此,我们认为AMP1基因在干旱胁迫反应中对干旱响应基因的表达起到一个负调控作用.实验中我们还发现,amp1突变体具有较低的水势与非常发达的根系,这也可能在抗旱反应中起到了一定作用. 展开更多
关键词 AMP1 干旱 dreb2A RD29A COR47
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DREB2A基因对苜蓿遗传转化的研究 被引量:25
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作者 盛慧 朱延明 +2 位作者 李杰 柏锡 才华 《草业科学》 CAS CSCD 2007年第3期40-45,共6页
以黑龙江紫花苜蓿Medicago sativa主栽品种:肇东苜蓿、敖汉苜蓿、公农1号和公农2号为受体材料,系统地探讨了除菌剂种类和浓度以及卡那霉素筛选浓度等,建立了高效的苜蓿再生体系和遗传转化体系;分别构建了由诱导型启动子rd29A和组成型启... 以黑龙江紫花苜蓿Medicago sativa主栽品种:肇东苜蓿、敖汉苜蓿、公农1号和公农2号为受体材料,系统地探讨了除菌剂种类和浓度以及卡那霉素筛选浓度等,建立了高效的苜蓿再生体系和遗传转化体系;分别构建了由诱导型启动子rd29A和组成型启动子E12调控的DREB2A基因的2个植物表达载体pB2A29A和pB2AE12;采用农杆菌介导法进行遗传转化,获得大量转基因抗性植株并进行了分子生物学(PCR和Southern blot)检测。结果表明,DREB2A基因已整合到苜蓿基因组中。 展开更多
关键词 苜蓿 遗传转化 dreb2A基因 农杆菌介导 转基因植株
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