期刊文献+
共找到62篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
牙鲆微卫星标记的筛选及群体多态性分析 被引量:22
1
作者 陈微 张全启 +3 位作者 于海洋 胡景杰 齐洁 包振民 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期682-687,共6页
以牙鲆(Paralichthys olivaceus Temminck et Schegel)为材料,基因组DNA经Sau3A Ⅰ进行部分酶切后,选取400~1 200bp大小的片段连接到经BamHⅠ酶切的pUC19质粒中,连接产物转化大肠杆菌DH5α,构建牙鲆酶切片段基因组文库.采用菌落杂交的... 以牙鲆(Paralichthys olivaceus Temminck et Schegel)为材料,基因组DNA经Sau3A Ⅰ进行部分酶切后,选取400~1 200bp大小的片段连接到经BamHⅠ酶切的pUC19质粒中,连接产物转化大肠杆菌DH5α,构建牙鲆酶切片段基因组文库.采用菌落杂交的方法,以(AC)10、(AG)10为探针从文库中筛选阳性克隆16个,共得到20个微卫星序列,其中完全型13个,不完全型5个,复合型2个.对其中18个进行引物设计,有11对引物扩增出目的片段,其中8对引物在群体中具有扩增多态性.在威海野生牙鲆30个个体中,各座位上得到的等位基因数为4~19个,观测杂合度(Ho)为0.413 8~0.965 5.其中有3对引物扩增的等位基因数超过17个,表现出高度多态性.本研究旨为进一步的牙鲆遗传多样性分析、家系分析及遗传图谱的构建等提供基础依据. 展开更多
关键词 牙鲆 菌落杂交 微卫星 多态性
下载PDF
富集文库—菌落原位杂交法筛选栉孔扇贝的微卫星标记 被引量:14
2
作者 战爱斌 胡景杰 +5 位作者 胡晓丽 王明玲 彭薇 李艳 李纪勤 包振民 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期353-361,共9页
应用微卫星富集文库——菌落原位杂交法,筛选得到了40个栉孔扇贝的微卫星标记。用固定了(AG)15和(AC)15探针的尼龙膜(HybondN^+)捕捉含有微卫星DNA的片段,经洗脱、PCR扩增和TA克隆,构建栉孔扇贝的微卫星富集文库。利用ECL试... 应用微卫星富集文库——菌落原位杂交法,筛选得到了40个栉孔扇贝的微卫星标记。用固定了(AG)15和(AC)15探针的尼龙膜(HybondN^+)捕捉含有微卫星DNA的片段,经洗脱、PCR扩增和TA克隆,构建栉孔扇贝的微卫星富集文库。利用ECL试剂盒(Amersham公司)标记的(AG)15和(AC)15探针进行菌落原位杂交筛选微卫星富集文库,阳性克隆经测序获得微卫星DNA。富集文库中1200个重组克隆经过菌落原位杂交后,532个(44.3%)为阳性克隆。任意挑选100个克隆测序,结果显示所有的克隆都至少含有一个微卫星位点。利用软件设计了65对特异性PCR引物,40对能扩增出清晰的带谱;利用48个栉孔扇贝个体评价微卫星位点,分析表明37个位点具有多态性。不同的位点获得的等位基因数目为2~14个不等,37个多态性位点共获得258个等位基因,平均每个位点获得7.0个等位基因。观测杂合度(H0)、期望杂合度(HP)及多态性信息含量值(P配)的范围分别为0.1000-1.0000、0.1197-0.9831和0.1172-0.9782。结果表明,富集文库一菌落原位杂交法适合大规模筛选目标物种的微卫星标记。 展开更多
关键词 栉孔扇贝 富集文库 菌落原位杂交 微卫星标记 多态性
下载PDF
三疣梭子蟹微卫星富集文库的构建与群体遗传分析 被引量:6
3
作者 李晓萍 刘萍 宋协法 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期194-201,共8页
采用富集文库–菌落原位杂交法分离了30个三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的微卫星标记。三疣梭子蟹基因组DNA经HaeⅢ酶切连接后,用固定了(AC)15和(AG)15探针的尼龙膜(Hybond N+)捕捉含有微卫星的片段,转化至大肠杆菌DH... 采用富集文库–菌落原位杂交法分离了30个三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的微卫星标记。三疣梭子蟹基因组DNA经HaeⅢ酶切连接后,用固定了(AC)15和(AG)15探针的尼龙膜(Hybond N+)捕捉含有微卫星的片段,转化至大肠杆菌DH5α中,构建三疣梭子蟹微卫星富集文库。菌落原位杂交后,任意选取150个克隆进行测序,阳性克隆率为85.48%。利用软件设计了105对微卫星引物,筛选到稳定扩增标记56对,采用30个三疣梭子蟹个体进行多样性评价,30个位点均表现出多态性。观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)及多态性信息含量(PIC)的范围分别为0.222 2-1.000 0、0.436 7-0.909 9和0.350-0.892。本研究筛选的微卫星位点将为下一步三疣梭子蟹遗传多样性分析、家系分析、遗传图谱构建和QTL定位等研究提供基础依据。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 富集文库 菌落原位杂交 微卫星标记 遗传多样性
下载PDF
从具沉默抗性基因的链霉菌中筛选新的抗菌物质 被引量:3
4
作者 吕淑君 陈能 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第A00期62-67,共6页
本文设计了一种新抗生素筛选方法。用抗生素抗性基因探针的菌落杂交方法,从大量野生型链霉菌中筛选可能含有抗生素抗性沉默基因的若干天然无抗菌活性的链霉菌作为诱变对象,再通过紫外线诱变,原生质体再生、融合等手段来处理这些链霉... 本文设计了一种新抗生素筛选方法。用抗生素抗性基因探针的菌落杂交方法,从大量野生型链霉菌中筛选可能含有抗生素抗性沉默基因的若干天然无抗菌活性的链霉菌作为诱变对象,再通过紫外线诱变,原生质体再生、融合等手段来处理这些链霉菌,使其产生了抗菌活性。其中孢囊链霉菌SP-9299的代谢产物对多株耐甲氧西林的葡萄球菌敏感。本文报道了筛选方法、筛选结果和SP-9299代谢物的抗耐药菌活性。 展开更多
关键词 筛选 沉默基因 抗菌活性 链霉菌
下载PDF
生物素标记ST基因探针检测产肠毒素性大肠杆菌的研究 被引量:6
5
作者 周志江 刘纯杰 +1 位作者 林万明 李银太 《兽医大学学报》 CSCD 1991年第2期97-101,共5页
采用二步法缺口翻译反应,用Bio-11-dUTP标记编码大肠杆菌耐热肠毒素的DNA片段作为杂交探针,通过菌落杂交试验,在严格去蛋白和RNA的条件下,表明生物素标记的DNA探针对产肠毒素性大肠杆菌的检测具有高度特异性.用链亲和素和生物素-碱性磷... 采用二步法缺口翻译反应,用Bio-11-dUTP标记编码大肠杆菌耐热肠毒素的DNA片段作为杂交探针,通过菌落杂交试验,在严格去蛋白和RNA的条件下,表明生物素标记的DNA探针对产肠毒素性大肠杆菌的检测具有高度特异性.用链亲和素和生物素-碱性磷酸酶系统,通过点杂交试验可以检测出1.25pg的靶序列DNA. 展开更多
关键词 生物素标记 ST基因 探针 大肠杆菌
原文传递
疏水网格滤膜技术检测食源性致病菌的研究进展 被引量:6
6
作者 苏晨曦 潘迎捷 +2 位作者 赵勇 Vivian C.H.Wu 孙晓红 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期76-81,共6页
疏水网格滤膜技术利用膜的疏水性黏附细菌细胞,通过膜的过滤作用截留细菌细胞,然后将膜进行选择性培养,达到检测鉴定待测菌的目的。主要概述了疏水网格滤膜技术的原理和特点,以及该技术与分子生物学技术、免疫学技术偶联在食源性致病菌... 疏水网格滤膜技术利用膜的疏水性黏附细菌细胞,通过膜的过滤作用截留细菌细胞,然后将膜进行选择性培养,达到检测鉴定待测菌的目的。主要概述了疏水网格滤膜技术的原理和特点,以及该技术与分子生物学技术、免疫学技术偶联在食源性致病菌检测中的应用。 展开更多
关键词 疏水网格滤膜 微生物学检测 酶标抗体 DNA探针 菌落杂交
下载PDF
用生物素标记DNA探针检测和计数食品中产ST大肠杆菌 被引量:4
7
作者 周志江 刘纯杰 《兽医大学学报》 CSCD 1991年第4期314-317,共4页
将人工污染产ST大肠杆菌的鲜猪肉、鸡蛋和牛乳稀释液接种到铺在LB琼脂表面的硝酸纤维素膜上,经37℃6~10h培养和严格的去蛋白和RNA处理后,用生物素标记的编码大肠杆菌耐热肠毒素的DNA片段作为基因探针,检测了污染食品中的产ST大肠杆菌.... 将人工污染产ST大肠杆菌的鲜猪肉、鸡蛋和牛乳稀释液接种到铺在LB琼脂表面的硝酸纤维素膜上,经37℃6~10h培养和严格的去蛋白和RNA处理后,用生物素标记的编码大肠杆菌耐热肠毒素的DNA片段作为基因探针,检测了污染食品中的产ST大肠杆菌.本法具有高度特异性,其敏感性为100个细菌/g. 展开更多
关键词 食品 检测 DNA探针 ST 大肠杆菌
原文传递
合成特异性寡核苷酸探针检测KP阳性副溶血弧菌 被引量:3
8
作者 王保龙 黄尊波 《中华医学检验杂志》 CSCD 1994年第5期272-273,共2页
合成了20bp的寡核苷酸探针,应用克隆杂交技术对30株包括各种神奈川现象(KP)反应和不同血清型的副溶血弧菌作了杂交试验,特异性试验,发现在合适的反应条件下,该探针能够有效地将(KP)阳性副溶血弧菌同KP弱阳性或阴性... 合成了20bp的寡核苷酸探针,应用克隆杂交技术对30株包括各种神奈川现象(KP)反应和不同血清型的副溶血弧菌作了杂交试验,特异性试验,发现在合适的反应条件下,该探针能够有效地将(KP)阳性副溶血弧菌同KP弱阳性或阴性副溶血弧菌相鉴别。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 克隆 杂交 探针
原文传递
东乡野生稻NBS-LRR类抗性基因同源序列的分离与鉴定 被引量:2
9
作者 王正华 杲修杰 曹孟良 《国防科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期56-60,共5页
基于植物的抗性基因具有保守序列,根据已克隆基因的保守序列设计探针,利用菌落杂交的方法,对东乡野生稻大片段基因组文库进行筛选,得到两个候选克隆。序列比对发现其中含有NB-ARC的保守序列,可用于后续转基因鉴定。
关键词 NBS-LRR 抗性基因 菌落杂交 基因组文库
下载PDF
富集文库-菌落原位杂交法筛选仿刺参微卫星标记 被引量:3
10
作者 卢超 包振民 +3 位作者 彭薇 鄢婧婧 吕雅萌 胡景杰 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期137-141,共5页
应用微卫星富集文库—菌落原位杂交的方法,筛选得到了33个仿刺参的微卫星标记。富集文库中900个重组克隆经过菌落原位杂交后,415个(46.1%)为阳性克隆。随机挑取100个阳性克隆进行测序,结果显示这些克隆都含有微卫星位点。设计了57对特异... 应用微卫星富集文库—菌落原位杂交的方法,筛选得到了33个仿刺参的微卫星标记。富集文库中900个重组克隆经过菌落原位杂交后,415个(46.1%)为阳性克隆。随机挑取100个阳性克隆进行测序,结果显示这些克隆都含有微卫星位点。设计了57对特异性PCR引物,33对能扩增出清晰的条带。利用48个野生仿刺参个体对33个微卫星位点进行评价,结果显示位点都具有多态性。33个多态位点共获得222个等位基因,平均每个位点获得6.7个等位基因。观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)的范围分别为0.050 0~1.000 0和0.203 2~0.915 9。结果表明,富集文库—菌落原位杂交法筛选微卫星标记比较高效,获得的微卫星标记可以用于仿刺参的分子遗传学研究。 展开更多
关键词 仿刺参 富集文库 菌落原位杂交 微卫星标记 多态性
下载PDF
副鸡嗜血杆菌基因文库的构建与筛选 被引量:3
11
作者 王雪敏 梁玉荣 +3 位作者 吕学泽 张培君 龚玉梅 王宏俊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期368-372,共5页
为了筛选副鸡嗜血杆菌的体内表达基因,提取了副鸡嗜血杆菌的全基因组,构建了副鸡嗜血杆菌基因组的pET系统表达文库。运用PCR及核酸内切酶(SalⅠ+NdeⅠ)鉴定基因文库,并以病原菌吸附后的康复血清作为探针,采用菌落原位杂交的方法对基因... 为了筛选副鸡嗜血杆菌的体内表达基因,提取了副鸡嗜血杆菌的全基因组,构建了副鸡嗜血杆菌基因组的pET系统表达文库。运用PCR及核酸内切酶(SalⅠ+NdeⅠ)鉴定基因文库,并以病原菌吸附后的康复血清作为探针,采用菌落原位杂交的方法对基因文库进行筛选。结果显示,重组质粒中有0.5~2kb的片段插入,99%的基因包含在基因文库中;重复筛选后得到的阳性克隆再经过PCR与SalⅠ+NdeⅠ酶切鉴定后定向测序,并对测序结果在NCBI上进行分析后发现筛选获得的基因中,有1个表达为转运谷氨酰还原酶、1个表达为转录终止因子,1个表达为荚膜合成域2,还有2个表达为保守假想蛋白。结果表明,本研究应用体内诱导抗原技术(IVIAT)筛选到了一些副鸡嗜血杆菌体内诱导表达基因,并对基因的功能做了初步探讨,在找寻副鸡嗜血杆菌在体内生存以及致病关键基因的道路上前进了一步,为传染性鼻炎的预防和治疗积累了有价值的资料。 展开更多
关键词 副鸡嗜血杆菌 基因文库构建 基因文库筛选 菌落原位杂交
原文传递
Streptomyces griseochromogenes菌株milbemycin生物合成基因簇的筛选 被引量:2
12
作者 阎浩林 IKEDA Haruo MURA Satoshi 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2001年第5期345-349,共5页
经BamHI酶切的柯氏质粒pku4 0 3与MboⅠ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomycesgriseochromogenes染色体DNA片段相连接 ,体外包装后 ,转化大肠杆菌E .coliJM1 0 8,挑取转化子1 1 5 2个 ,构建Streptomycesgriseochromogenes的基因文... 经BamHI酶切的柯氏质粒pku4 0 3与MboⅠ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomycesgriseochromogenes染色体DNA片段相连接 ,体外包装后 ,转化大肠杆菌E .coliJM1 0 8,挑取转化子1 1 5 2个 ,构建Streptomycesgriseochromogenes的基因文库。分别以avermectin聚酮体合成酶 (PKS)的酰基转移酶基因 (AT)、酮基合成酶基因 (KS)及参与avermectin生物合成的内酯化酶基因(aveE)、C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)为探针 ,利用菌落原位杂交、核酸杂交和以烯酰基还原酶基因(ER)引物的PCR扩增等手段 ,从文库中筛选出 2 4个阳性克隆。根据克隆DNA之间的重叠关系 ,将阳性克隆分为 7组 ,这 展开更多
关键词 柯氏质粒pku403 包装蛋白 转化 基因文库 聚酮体合成酶 菌落原位杂交 核酸杂交 PCR 链霉菌
下载PDF
PCR Targeting of Antibiotic Resistant Bacteria in Public Drinking Water of Lahore Metropolitan,Pakistan 被引量:1
13
作者 ZAHOOR QADIR SAMRA MARIAM NASEEM +2 位作者 SUMARIA JAVED KHAN NADIA DAR MUHAMMAD AMIN ATHAR 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2009年第6期458-463,共6页
Objective To investigate the prevalence of kanamycin (kan) and ampicillin (amp) resistant bacteria in public drinking water. Methods Bacteria containing kan and amp resistant genes were amplified by PCR and furthe... Objective To investigate the prevalence of kanamycin (kan) and ampicillin (amp) resistant bacteria in public drinking water. Methods Bacteria containing kan and amp resistant genes were amplified by PCR and further characterized by colony hybridization and transformation studies. The genus of kan and amp resistant bacteria was determined with standard methods. Results Among the 625 drinking water samples, 400 contained kan and amp resistant bacteria and the percentage was 42.5% and 57.5%, respectively, which was further confirmed by the amplification of a 810 bp kan resistant gene and a 850 bp amp resistant gene. Of the 170 kan resistant bacteria, 90 were Gram negative and 80 were Gram positive. Of the 230 amp resistant bacteria, 160 were Gram negative while 70 were Gram positive. Salmonella, Shigella, Staphylococcus, Streptococcus, and E.coli were detected as 13%, 11%, 17%, 30%, and 29%, respectively. Bacterial strain DH5α transformed with plasmids isolated from kan and amp resistant bacteria confirmed that the antibiotic resistant genes were mediated by plasmids. Conclusion Drinking water is contaminated with kan and amp resistant bacteria due to poor sanitary conditions. 展开更多
关键词 KANAMYCIN AMPICILLIN PCR PLASMID colony hybridization
下载PDF
东方拟无枝酸菌中ECO-0501生物合成基因簇的筛选及其相关调控基因的初步分析 被引量:2
14
作者 申洋 黄鹤 +3 位作者 朱丽 杨晟 戈梅 陈代杰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期327-331,共5页
ECO-0501是从东方拟无枝酸菌代谢物中分离到的一种新型线性多烯类化合物,其不但具有良好的抗菌活性,且体内毒性较低,目前处于临床前的开发。本文通过对东方拟无枝酸菌的菌落原位杂交,筛选到4个粘粒克隆NL5B,NL9-3-1,NL3-1C,NL3-3A,可以... ECO-0501是从东方拟无枝酸菌代谢物中分离到的一种新型线性多烯类化合物,其不但具有良好的抗菌活性,且体内毒性较低,目前处于临床前的开发。本文通过对东方拟无枝酸菌的菌落原位杂交,筛选到4个粘粒克隆NL5B,NL9-3-1,NL3-1C,NL3-3A,可以覆盖整个ECO-0501生物合成簇,并对其中的基因ORF4进行了生物信息学分析,推测其为ECO-0501合成途径中的正调控基因。并通过该基因的过表达,成功地将ECO-0501的产量提高了6倍,为下一步ECO-0501的开发及其调控机制的研究打下基础。 展开更多
关键词 ECO-0501 东方拟无枝酸菌 菌落原位杂交 调控蛋白
下载PDF
PCR技术制备ETEC耐热性肠毒素Ⅰ基因探针及其初步应用 被引量:1
15
作者 刘晓明 冯书章 +1 位作者 刘子 马从林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1992年第3期21-23,共3页
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热性肠毒素I(STI)重组质粒pSLM004酶切TaqI片段作为模板,经(PCR)技术扩增STI基因,标以α-^(32)p-dATP作STI基因探针。菌落原位杂交结果表明该探针特异性高、敏感性强。通过对180株婴幼儿腹泻病料和52株仔猪... 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热性肠毒素I(STI)重组质粒pSLM004酶切TaqI片段作为模板,经(PCR)技术扩增STI基因,标以α-^(32)p-dATP作STI基因探针。菌落原位杂交结果表明该探针特异性高、敏感性强。通过对180株婴幼儿腹泻病料和52株仔猪腹泻物分离的大肠杆菌(E.coli),以及28株已知血清型的E.Coli标准菌株菌落原位杂交检测,结果分别有11、2和2株为杂交阳性反应,阳性率分别为6%(11/180),4%(2/52),和7%(2/28);而对84株从犊牛腹泻物分离的E.coli中,未检出杂交阳性株。乳鼠生物学试验比较研究表明,15株探针检测阳性菌株中13株乳鼠试验也为阳性反应,两者符合率为87%(13/15)。 展开更多
关键词 PCR ETEC 基因探针 STI
下载PDF
混合培养对副溶血性弧菌致病株和非致病株生长的影响 被引量:1
16
作者 徐马俊坤 冯博 +3 位作者 张昭寰 孙晓红 潘迎捷 赵勇 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期776-783,共8页
以9∶1和1∶1的比例对致病性副溶血性弧菌(ATCC 33847:tdh+/trh-/tlh+;ATCC 17802:tdh-/trh+/tlh+)和非致病性副溶血性弧菌(G2:tdh-/trh-/tlh+;G8:tdh-/trh-/tlh+)在TSB培养基和熟虾中分别进行了混合和37℃10 h的混合培养,通过菌落原位... 以9∶1和1∶1的比例对致病性副溶血性弧菌(ATCC 33847:tdh+/trh-/tlh+;ATCC 17802:tdh-/trh+/tlh+)和非致病性副溶血性弧菌(G2:tdh-/trh-/tlh+;G8:tdh-/trh-/tlh+)在TSB培养基和熟虾中分别进行了混合和37℃10 h的混合培养,通过菌落原位杂交技术和PCR技术检测致病性菌株在混合培养前后的比例。结果显示,在TSB和熟虾中,致病菌比例均出现了下降。在熟虾样品中致病菌株下降的比例更高,其中ATCC17802和G8在熟虾样品中以9∶1比例混合并混合培养10 h后,致病菌比例从90%降为0。表明混合培养对致病性副溶血性弧菌菌株生长产生不利的影响,是造成水产样品中副溶血性弧菌感染频发却很难分离到致病性菌株的原因之一。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 致病性 原位杂交 菌落杂交
原文传递
致病性副溶血性弧菌菌落杂交检测体系的优化 被引量:1
17
作者 徐马俊坤 冯博 +3 位作者 张昭寰 孙晓红 潘迎捷 赵勇 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期23-28,共6页
对常见食源性致病菌副溶血性弧菌的杂交条件进行了优化。基于副溶血性弧菌的tdh,trh,toxR基因选用了3种探针序列,从菌落杂交样品的预处理方法、杂交时间和显色检测等方面对基于副溶血性弧菌毒力基因的原位杂交实验进行了条件优化。结果... 对常见食源性致病菌副溶血性弧菌的杂交条件进行了优化。基于副溶血性弧菌的tdh,trh,toxR基因选用了3种探针序列,从菌落杂交样品的预处理方法、杂交时间和显色检测等方面对基于副溶血性弧菌毒力基因的原位杂交实验进行了条件优化。结果表明,采用80℃热固定2 h,37℃预杂交10 min后杂交8 h以及封闭1 h的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。优化的菌落杂交技术检测副溶血性弧菌与传统检测方法相比,具有高效、准确、可区分致病性菌株的优点,为水产品中副溶血性弧菌致病菌株和非致病菌株的同步检测和筛选提供参考。 展开更多
关键词 致病株 副溶血性弧菌 原位杂交 菌落杂交
下载PDF
用地高辛配基标记DNA探针进行菌落原位杂交
18
作者 蒋三亮 张思仲 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第3期245-247,共3页
用地高辛配基标记DNA探针,结合酶联免疫反应检测显示信号。建立了一种简便,快速的菌落原位杂交新方法。结果证明该方法敏感、稳定,完全可取代同位素用于细菌分析和克隆筛选。
关键词 地高辛配基 DNA探针 菌落原位杂交
下载PDF
用生物素标记DNA探针进行菌落原位杂交 被引量:1
19
作者 蒋三亮 张思仲 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期168-170,共3页
将生物素标记的DNA探针用于菌落原位杂交,结合链霉菌抗生物素蛋白和生物素碱性磷酸酶系统检测显示信号。结果证明该法快速方便,杂交信号清晰,高度特异,完全可以取代同位素用于细菌分析和克隆筛选。
关键词 菌落原位杂交 生物素标记 DNA探针
下载PDF
应用克隆杂交和聚合酶链反应技术检测TDH基因 被引量:1
20
作者 王保龙 董辉军 《中华疾病控制杂志》 CAS 1999年第1期16-18,共3页
目的建立快速、敏感、特异和精确的方法检测致病性副溶血弧菌(VP)。方法在耐热 溶血毒素(TDH)结构基因序列的基础上,自行设计探针和引物,应用克隆杂交方法检测30株不同 来源的VP,同时对10株不同KP反应的VP DN... 目的建立快速、敏感、特异和精确的方法检测致病性副溶血弧菌(VP)。方法在耐热 溶血毒素(TDH)结构基因序列的基础上,自行设计探针和引物,应用克隆杂交方法检测30株不同 来源的VP,同时对10株不同KP反应的VP DNA行PCR-TDH检测。结果30例实验菌株,26 例KP阳性株克隆杂交出现阳性信号,其余4例杂交阴性(2例KP弱阳性、2例KP阴性)。用PCR 检测的10株VP中,6例KP阳性株TDH基因均阳性,但有1株KP弱阳性和1株KP阴性株也呈 TDH基因阳性。PCR阳性结果均用Southern blot法证实。结论应用克隆杂交技术检测TDH基 因在合适的条件下能有效地鉴别致病性与非致病性VP。 PCR检测TDH基因为研究VP的致病机 理奠定基础,在临床上可作为一种检测致病性VP的快速敏感的初筛试验。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 克隆杂交 聚合酶链反应
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部