卡哈尔体——功能复杂的核内细胞器 被引量：3

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作者 岳志霞 张晨光 丁卫 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1525-1532,共8页

卡哈尔体(Cajal body,CB)的发现可以溯源至100多年前,而直到近10年的研究取得突破性进展,才逐渐揭示了其复杂的分子组成及生理功能。作为当前备受关注的核内小体之一,CB是细胞核质中处于动态变化的细胞器,广泛存在于高等真核生物的细胞... 卡哈尔体(Cajal body,CB)的发现可以溯源至100多年前,而直到近10年的研究取得突破性进展,才逐渐揭示了其复杂的分子组成及生理功能。作为当前备受关注的核内小体之一,CB是细胞核质中处于动态变化的细胞器,广泛存在于高等真核生物的细胞核内,在电镜下表现为球形小体样结构,其中p80 Coilin蛋白是CB最为明确的特异性标志物。CB的分子构成十分复杂,主要包括参与mRNA剪接所需、称为snRNP的核酸与蛋白质复合体的各种组分,以及snoRNAs、scaRNAs和其他相关蛋白质。此外,一些基因活化中不可或缺的转录因子、mRNA修饰的必需蛋白因子以及与细胞增殖和细胞周期功能相关的功能分子等,也被发现存在于CB之中或周边。其中,snRNAs、snoRNAs与scaRNAs等低分子量RNAs在CB中完成自身的成熟并且参与RNP的组装。染色体端粒长度的维持以及组蛋白基因簇的表观遗传修饰依赖于CB的形成与功能发挥。由此可见,CB与细胞周期、细胞增殖、应激和老化等一系列重要的细胞生物学过程存在密切的联系,同时其功能和表现的异常往往也提示与肿瘤的发生相关。该文在归纳CB相关研究最新进展的同时,着重讨论CB的结构与功能及其与疾病的潜在联系。 展开更多

关键词 卡哈尔体 核内小体 COILIN SNRNP 端粒酶

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水稻条纹病毒p2与本氏烟柯浩体蛋白互作 被引量：1

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作者 李阳 谢理 +1 位作者 祝建烜 郑璐平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1476-1483,共8页

水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)编码的p2蛋白能与纤维蛋白互作并协助病毒系统运动。纤维蛋白定位在核仁和柯浩体上,作为柯浩体指示蛋白的coilin也参与病毒侵染过程。本文通过亚细胞共定位和双荧光互补实验证明p2与本氏烟柯浩体蛋... 水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)编码的p2蛋白能与纤维蛋白互作并协助病毒系统运动。纤维蛋白定位在核仁和柯浩体上,作为柯浩体指示蛋白的coilin也参与病毒侵染过程。本文通过亚细胞共定位和双荧光互补实验证明p2与本氏烟柯浩体蛋白Nbcoilin互作;病毒诱导基因沉默技术瞬时沉默基因Nbcoilin后不影响植株的生长发育和水稻条纹病毒的侵染。所获结果表明,Nbcoilin虽然能与p2互作,但不影响水稻条纹病毒的侵染。 展开更多

关键词 水稻条纹病毒 柯浩体 双荧光互补 病毒诱导的基因沉默

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水稻条纹病毒编码的NS2蛋白的亚细胞定位分析 被引量：1

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作者 郑璐平 林辰 +1 位作者 吴祖建 谢联辉 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第6期574-578,共5页

通过RT-PCR克隆获得水稻条纹病毒(RSV)编码的蛋白NS2和拟南芥柯浩体蛋白Atcoilin的cDNA,将两者分别与表达载体pEarley102(带青色荧光蛋白,CFP)和pEarley101(带黄色荧光蛋白,YFP)同源重组.将构建好的重组载体分别转化到农杆菌EHA105中,... 通过RT-PCR克隆获得水稻条纹病毒(RSV)编码的蛋白NS2和拟南芥柯浩体蛋白Atcoilin的cDNA,将两者分别与表达载体pEarley102(带青色荧光蛋白,CFP)和pEarley101(带黄色荧光蛋白,YFP)同源重组.将构建好的重组载体分别转化到农杆菌EHA105中,通过农杆菌接种法将两者共同注射到本氏烟叶片表皮细胞中进行表达.在共聚焦显微镜下观察,NS2-CFP与Atcoilin-YFP能重叠在一起,表明RSV NS2定位于柯浩体. 展开更多

关键词 水稻条纹病毒 NS2 柯浩体 细胞定位

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一个可指示核仁定位和柯浩体定位信号Marker的构建 被引量：1

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作者 郑璐平 毛倩卓 +3 位作者 林辰 谢荔岩 吴祖建 谢联辉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1002-1007,共6页

通过RT-PCR获得本氏烟纤维蛋白Fibrillarin2的cDNA,并将其重组到表达载体pEarley101(黄色荧光蛋白,YFP)和pEarley102(青色荧光蛋白,CFP)上。在本氏烟叶片表皮细胞中瞬时表达融合蛋白,激光共聚焦显微镜下观察,发现蛋白定位在细胞核仁和... 通过RT-PCR获得本氏烟纤维蛋白Fibrillarin2的cDNA,并将其重组到表达载体pEarley101(黄色荧光蛋白,YFP)和pEarley102(青色荧光蛋白,CFP)上。在本氏烟叶片表皮细胞中瞬时表达融合蛋白,激光共聚焦显微镜下观察,发现蛋白定位在细胞核仁和柯浩体上,可以作为这两种细胞器的指示Marker,并通过Western blot检测融合蛋白的表达。该Marker对明确蛋白特别是病毒编码的蛋白在细胞核中的定位以及功能推测具有重要意义。 展开更多

关键词 细胞定位 纤维蛋白 核仁 柯浩体

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本氏烟柯浩体蛋白基因全长克隆及其功能预测

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作者 郭小囡 李阳 +1 位作者 谢理 郑璐平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期420-425,共6页

柯浩体蛋白coilin是细胞器柯浩体的重要指示蛋白,参与病毒侵染。本文根据拟南芥柯浩体蛋白(Atcoilin)在本氏烟基因组数据库中的比对结果,确定其对应的靶基因并设计引物,首次获得本氏烟柯浩体蛋白(Nbcoilin)基因全长序列3017 bp,编码区为... 柯浩体蛋白coilin是细胞器柯浩体的重要指示蛋白,参与病毒侵染。本文根据拟南芥柯浩体蛋白(Atcoilin)在本氏烟基因组数据库中的比对结果,确定其对应的靶基因并设计引物,首次获得本氏烟柯浩体蛋白(Nbcoilin)基因全长序列3017 bp,编码区为2409 bp,编码803个氨基酸;具有柯浩体蛋白3个典型功能域以及一个类似动物柯浩体蛋白特有的精氨酸/甘氨酸富集区("RGG"box);系统发育树显示该蛋白归属植物coilin分支,亚细胞定位显示该蛋白定位在柯浩体上,确定该蛋白是coilin的同源蛋白。研究结果为探究Nbcoilin的功能及其与病毒互作奠定了基础。 展开更多

关键词 柯浩体 COILIN 功能域预测 亚细胞定位

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WRAP53β的分子功能及其在疾病中的作用

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作者 陈洁莹 孙洋 +2 位作者 杨潮 李江林 叶茂 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第3期257-261,共5页

WRAP53β蛋白是WD40重复蛋白家族的重要成员,能控制端粒酶、DNA修复蛋白和剪接因子在细胞内转运,参与卡哈尔体形成、端粒稳定和端粒延伸。目前研究表明WRAP53β功能异常与早衰、肿瘤、神经退行性疾病等密切相关,可能成为疾病治疗的一个... WRAP53β蛋白是WD40重复蛋白家族的重要成员,能控制端粒酶、DNA修复蛋白和剪接因子在细胞内转运,参与卡哈尔体形成、端粒稳定和端粒延伸。目前研究表明WRAP53β功能异常与早衰、肿瘤、神经退行性疾病等密切相关,可能成为疾病治疗的一个新靶点。现就WRAP53β在细胞内多方面的分子功能及其与疾病关系的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 WRAP53β 卡哈尔体 DNA双链断裂 端粒酶 肿瘤

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WRAP53 β调控DNA损伤修复进展

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作者 姚羽菲 崔博淼 +1 位作者 肖丽英 李燕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第6期613-620,共8页

WRAP53β是一种具有WD40结构域的蛋白质,在维护卡哈尔体稳定、RNA剪接、端粒延伸等方面起着至关重要的作用.WRAP53β功能紊乱与先天性角化不良、肿瘤、进行性脊髓性肌萎缩、过早老化等疾病有关.近两年研究发现WRAP53β是DNA双链断裂修复... WRAP53β是一种具有WD40结构域的蛋白质,在维护卡哈尔体稳定、RNA剪接、端粒延伸等方面起着至关重要的作用.WRAP53β功能紊乱与先天性角化不良、肿瘤、进行性脊髓性肌萎缩、过早老化等疾病有关.近两年研究发现WRAP53β是DNA双链断裂修复(DSBs)的一个重要支架蛋白,它以一种依赖于ATM、H2AX、MDC1的方式被募集至损伤位点并磷酸化,其WD40结构域可募集泛素E3连接酶RNF8,将DSBs位点附近的组蛋白H2AX泛素化,促进下游修复因子的聚集,引起DNA损伤后的修复作用.为此,我们重点综述了现阶段WRAP53β在DNA损伤修复方面的具体作用及机制. 展开更多

关键词 WRAP53 β DNA损伤修复 卡哈尔体 端粒酶

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TCAB1在宫颈鳞癌中的表达及其与患者术后临床病理特征及复发转移的关系

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作者 戢楠楠 邓文艺 +3 位作者 刘瑞 罗孟亚男 赵娜 曾越灿 《中国性科学》 2023年第5期100-104,共5页

目的探讨端粒酶卡哈尔体蛋白1(TCAB1)在宫颈鳞癌患者中的表达,分析其与术后临床病理特征及复发转移的关系。方法选取2013年1月至2018年8月在海南医学院第二附属医院病理学确诊的104例宫颈鳞癌患者作为研究对象,采用免疫组化法检测TCAB1... 目的探讨端粒酶卡哈尔体蛋白1(TCAB1)在宫颈鳞癌患者中的表达,分析其与术后临床病理特征及复发转移的关系。方法选取2013年1月至2018年8月在海南医学院第二附属医院病理学确诊的104例宫颈鳞癌患者作为研究对象,采用免疫组化法检测TCAB1蛋白表达情况。结果与TCAB1蛋白阴性组比较,TCAB1蛋白阳性组Ki-67表达水平更高,差异具有统计学意义(P<0.05)。TCAB1蛋白阳性患者的中位无进展生存(PFS)时间为36个月,5年PFS为78.7%;TCAB1蛋白阴性患者的中位PFS时间为52个月,5年PFS为97.1%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论TCAB1蛋白可能促进宫颈鳞癌增殖,是宫颈鳞状细胞癌复发转移的不良预测因子,可望成为减少宫颈鳞癌复发转移的治疗靶点。 展开更多

关键词 端粒酶卡哈尔体蛋白1 宫颈鳞状细胞癌 无进展生存

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端粒酶卡扎尔体蛋白1和PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及临床意义

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作者 杨海林 李炯 +5 位作者 吴慧 肖琪 何丽 李斓 周洪亮 王琦 《癌症进展》 2023年第12期1315-1318,共4页

目的 探讨端粒酶卡扎尔体蛋白1(TCAB1)和PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1(PINX1)在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及临床意义。方法 选取45例乳腺浸润性导管癌患者和45例乳腺纤维腺瘤患者,收集乳腺浸润性导管癌组织和乳腺纤维腺瘤组织,... 目的 探讨端粒酶卡扎尔体蛋白1(TCAB1)和PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1(PINX1)在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及临床意义。方法 选取45例乳腺浸润性导管癌患者和45例乳腺纤维腺瘤患者,收集乳腺浸润性导管癌组织和乳腺纤维腺瘤组织,采用免疫组化染色法检测TCAB1和PINX1的表达情况。比较乳腺浸润性导管癌组织与乳腺纤维腺瘤组织中TCAB1和PINX1的表达情况,比较不同临床特征乳腺浸润性导管癌患者乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1和PINX1的表达情况,采用Spearman相关分析法分析乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1与PINX1表达的相关性。结果 乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1高表达率明显高于乳腺纤维腺瘤组织,PINX1高表达率明显低于乳腺纤维腺瘤组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。无淋巴结转移、组织学分级为Ⅱ级的乳腺浸润性导管癌患者乳腺浸润性导管癌组织中PINX1高表达率分别明显高于淋巴结转移、组织学分级为Ⅲ级的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1与PINX1的表达呈负相关(r=-0.328,P=0.028)。结论 乳腺浸润性导管癌患者中TCAB1高表达率较高,PINX1高表达率较低,二者的表达呈负相关,且PINX1表达与淋巴结转移情况和组织学分级密切相关。 展开更多

关键词 乳腺癌 端粒酶卡扎尔体蛋白1 PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1

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喉鳞癌EBV感染危险因素及其对TCAB1、c-myc基因表达的影响

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作者 刘勇 晁方 +2 位作者 秦刚 牟丽莉 厉波 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期757-761,共5页

目的分析喉鳞癌爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感染的危险因素,并评估其对端粒酶卡扎尔体蛋白1(TCAB1)、c-myc基因表达的影响。方法回顾性分析2016年1月-2021年8月日照市中心医院收治的92例行手术治疗的喉鳞癌患者临床资料,根据患者癌组织及癌... 目的分析喉鳞癌爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感染的危险因素,并评估其对端粒酶卡扎尔体蛋白1(TCAB1)、c-myc基因表达的影响。方法回顾性分析2016年1月-2021年8月日照市中心医院收治的92例行手术治疗的喉鳞癌患者临床资料,根据患者癌组织及癌旁组织EBV感染情况,分为EBV阳性组55例和EBV阴性组37例,比较两组临床特征差异,分析影响喉鳞癌患者EBV感染的危险因素;并比较EBV阳性组与EBV阴性组癌组织TCAB1及c-myc基因表达水平及外周血EBV-DNA水平,评估喉鳞癌患者外周血EBV-DNA水平与TCAB1及c-myc基因表达水平的相关性。结果两组性别、年龄、肿瘤部位、临床分期、分化程度及吸烟史比较,无统计学差异,但EBV阳性组淋巴结转移率高于EBV阴性组(P<0.05),Logistic回归分析显示,淋巴结转移是影响喉鳞癌患者EBV感染的危险因素(P<0.05)。EBV阳性组癌组织TCAB1及c-myc mRNA相对表达量、外周血EBV-DNA水平均高于EBV阴性组(P<0.05),Pearson相关性分析显示,喉鳞癌患者外周血EBV-DNA水平与癌组织TCAB1及c-myc mRNA相对表达量呈正相关(P<0.05)。结论EBV感染可能参与喉鳞癌的发生发展,其作用机制可能与上调TCAB1、c-myc的表达有关。 展开更多

关键词 喉鳞癌 爱泼斯坦-巴尔病毒 感染 危险因素 端粒酶卡扎尔体蛋白1 C-MYC 端粒酶

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WD40编码的P53 RNA反义转录子基因和蛋白及其功能 被引量：2

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作者 陆文昕 葛奕辰 +1 位作者 肖丽英 李燕 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期244-248,共5页

WD40编码的P53 RNA反义转录子(WRAP53)基因有1α、1β和1γ三个起始外显子,1α与P53的第一外显子反向互补,其表达产物能稳定P53 RNA水平,从而促进P53蛋白表达,最终参与调控肿瘤的生物学行为;1β转录翻译生成的WRAP53蛋白,涉及细胞程序... WD40编码的P53 RNA反义转录子(WRAP53)基因有1α、1β和1γ三个起始外显子,1α与P53的第一外显子反向互补,其表达产物能稳定P53 RNA水平,从而促进P53蛋白表达,最终参与调控肿瘤的生物学行为;1β转录翻译生成的WRAP53蛋白,涉及细胞程序性死亡、周期调控以及蛋白酶降解和RNA代谢等多个重要生化过程。WRAP53蛋白主要通过与端粒酶复合体等多种组分结合参与端粒酶卡侯体(CB)的形成、端粒酶全酶的组装定位、端粒酶的运输,指导运动神经元生存蛋白定位至CB等。WRAP53基因在肿瘤细胞系和临床肿瘤样本中普遍高表达,且表达越高,肿瘤的预后越差。沉默WRAP53基因,可明显抑制肿瘤细胞的生长和成瘤能力。先天性角化不良综合征与端粒长度的缩短有关,WRAP53基因表达降低最终会导致端粒的缩短。 展开更多

关键词 WD40编码的P53 RNA反义转录子 端粒酶卡侯体蛋白 端粒 蛋白质

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端粒酶卡侯体蛋白1干扰慢病毒对口腔鳞状细胞癌细胞裸鼠致瘤作用的研究 被引量：2

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作者 王琨 葛奕辰 +5 位作者 崔博淼 苟雅萍 孙崇奎 龙敏 肖丽英 李燕 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期32-36,共5页

目的 探测端粒酶卡侯体蛋白1(TCAB1)基因沉默对裸鼠移植瘤生长及肿瘤细胞生物学行为的影响。方法 采用定量荧光原位杂交(Q-FISH)方法测定RNA干扰慢病毒sh TCAB1和sh阴性对照(NC)处理后经稳定筛选26代人口腔鳞状细胞癌(OSCC)的Cal27细... 目的 探测端粒酶卡侯体蛋白1(TCAB1)基因沉默对裸鼠移植瘤生长及肿瘤细胞生物学行为的影响。方法 采用定量荧光原位杂交(Q-FISH)方法测定RNA干扰慢病毒sh TCAB1和sh阴性对照(NC)处理后经稳定筛选26代人口腔鳞状细胞癌(OSCC)的Cal27细胞系染色体末端端粒的信号强度。然后将RNA干扰的Cal27细胞接种于裸鼠颈部皮下左、右两侧,定期监测肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,称取瘤体重量。采用免疫组织化学检测移植瘤组织中TCAB1、B细胞淋巴瘤蛋白-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3、血管内皮生长因子(VEGF)和细胞周期蛋白D1的表达。结果 Q-FISH结果显示,sh TCAB1处理后的Cal27细胞较sh NC处理后及野生型Cal27细胞的端粒平均长度明显缩短。sh TCAB1处理组OSCC移植瘤生长速度明显较sh NC对照组减慢。移植瘤平均重量为0.06 g,对照组为0.26 g,抑瘤率达76.9%。免疫组织化学结果显示,sh TCAB1组移植瘤中TCAB1表达明显降低,同时,Bcl-2、VEGF和细胞周期蛋白D1的表达降低,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达升高。结论 sh TCAB1慢病毒能够明显抑制裸鼠人OSCC移植瘤的生长,其抗肿瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡、延长肿瘤细胞分裂周期及抑制血管生成有关。 展开更多

关键词 端粒酶卡侯体蛋白1 口腔鳞状细胞癌 基因沉默 凋亡 血管生成

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shRNA慢病毒对人口腔鳞状细胞癌细胞端粒酶卡侯体蛋白1基因的沉默效应 被引量：2

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作者 胡玲 孙崇奎 +2 位作者 苟雅萍 李燕 肖丽英 《国际口腔医学杂志》 CAS 2013年第6期720-723,共4页

目的探讨shRNA慢病毒对人口腔鳞状细胞癌Cal27细胞系端粒酶新蛋白,即端粒酶卡侯体蛋白1(TCAB1)基因的沉默效应,以期探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据TCAB1基因,构建慢病毒shTCAB1-A～D,测定病毒滴度;用重组慢病毒体外感染Cal27细胞,... 目的探讨shRNA慢病毒对人口腔鳞状细胞癌Cal27细胞系端粒酶新蛋白,即端粒酶卡侯体蛋白1(TCAB1)基因的沉默效应,以期探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据TCAB1基因,构建慢病毒shTCAB1-A～D,测定病毒滴度;用重组慢病毒体外感染Cal27细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达推断感染效率;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TCAB1 mRNA水平;Western blot检测TCAB1蛋白质的表达水平;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞体外增殖能力;Transwell小室法检测细胞体外侵袭能力改变。结果经PCR与测序鉴定证实成功构建靶向TCAB1的慢病毒RNAi载体,病毒滴度为1.5×108～3×108U·mL-1。荧光显微镜观察显示,绝大部分细胞表达绿色荧光。与空白细胞对照组相比,4种不同的shTCAB1-A～D慢病毒感染组TCAB1 mRNA表达下调48.7%～62.0%;蛋白抑制率达45.6%～77.5%,shTCAB1-C组最明显。shTCAB1-C慢病毒能明显抑制Cal27细胞增殖能力,也能降低其侵袭能力,穿过人工基底膜的平均细胞数明显低于空白对照组及非特异性对照组,侵袭抑制率高达67.5%(P<0.05)。结论成功构建并包装了端粒酶新蛋白TCAB1靶向的RNAi慢病毒,该病毒可高效感染人口腔鳞状细胞癌细胞,产生特异性的基因沉默效应。 展开更多

关键词 端粒酶卡侯体蛋白1 RNA干扰 基因沉默

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