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ATP和乙酰胆碱诱发豚鼠耳蜗外毛细胞内CICR的激光共聚焦研究 被引量：1
1
作者 黄莉 杨军 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期316-321,共6页
目的:运用激光共聚焦研究ATP和乙酰胆碱(ACh)对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响以及诱发Ca2+介导的Ca2+释放(CICR)的可能机制。方法:用酶孵育机械分离法,分离豚鼠耳蜗外毛细胞(OHC),钙敏荧光探针Fluo-3染色后,用激光... 目的:运用激光共聚焦研究ATP和乙酰胆碱(ACh)对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响以及诱发Ca2+介导的Ca2+释放(CICR)的可能机制。方法:用酶孵育机械分离法,分离豚鼠耳蜗外毛细胞(OHC),钙敏荧光探针Fluo-3染色后,用激光扫描共聚焦显微镜分别记录在细胞外液有钙或无钙条件下,加入ATP、ACh、斯里兰卡肉桂碱(Ryanodine)+ATP(或ACh)和毒胡萝卜素(Thapsigargin)+ATP(或ACh)后的OHC的[Ca2+]i的变化。结果:在含钙的细胞外液中,ATP、Ryanodine+ATP、Thapsigargin+ATP、ACh、Ryanodine+ACh和Thapsigargin+ACh均可引起[Ca2+]i升高,引起明显的波峰,荧光强度相对峰值分别为1.60±0.01(ATP)、1.644±0.005(Ryanodine+ATP)、1.491±0.005(Thapsigargin+ATP)、1.43±0.01(ACh)、1.58±0.02(Ryanodine+ACh)、1.398±0.003(Thapsigargin+ACh);而在不含钙的细胞外液中,ATP和Ryanodine+ATP仍可引起[Ca2+]i出现幅度较小的波峰,分别为1.341±0.006和1.386±0.008,而ACh、Ryan-odine+ACh、Thapsigargin+ACh和Thapsigargin+ATP未引起明显[Ca2+]i波峰出现,其中ACh不能引起[Ca2+]i的升高,Ryanodine+ACh、Thapsigargin+ACh和Thapsigargin+ATP分别引起[Ca2+]i缓慢升高。结论:在细胞外液有Ca2+的条件下,ATP和ACh引起OHC的[Ca2+]i升高,除了通过离子通道引起胞外Ca2+内流,还有IP3敏感钙库的释放和诱发CICR。在无Ca2+的条件下,ATP仍能诱发CICR,其机制可能是ATP促进IP3敏感钙库释放Ca2+,Ca2+又诱发了CICR,而ACh的反应是Ca2+依赖性的,在细胞外液无Ca2+的条件下,ACh不能引起IP3敏感钙库的释放和诱发CICR。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 乙酰胆碱 ^^ca^2+ ^^介导的ca^2+释放 外毛细胞 钙 耳蜗
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槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响 被引量：2
2
作者 路红 沈亚峰 +4 位作者 曹密 胡淑婷 宋晓伟 汤莹 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 2012年第3期235-242,共8页
目的:研究槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、心力衰竭组、槐定碱5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg剂量组。4周后酶解法分离各组大鼠心室肌细胞,采用膜片... 目的:研究槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、心力衰竭组、槐定碱5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg剂量组。4周后酶解法分离各组大鼠心室肌细胞,采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时记录系统记录心肌细胞的L-型钙电流(ICa.L)及胞浆内的钙瞬变。结果:心力衰竭组大鼠心肌细胞的ICa.L、钙火花发生率及钙瞬变峰值明显低于假手术组;槐定碱中剂量和高剂量组大鼠心肌细胞的ICa.L、钙火花发生率及钙瞬变峰值明显高于心力衰竭组;槐定碱低剂量组与心力衰竭组相比差异不显著。结论:一定浓度的槐定碱对改善心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放功能具有重要的作用。 展开更多
关键词 槐定碱 心肌细胞 心力衰竭 钙诱导钙释放 L-型钙电流 激光扫描共聚焦显微镜
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钙诱导钙释放机制与慢性心力衰竭的关系
3
作者 刘关省 沈亚峰 +3 位作者 胡淑婷 王永亮 汤莹 杨勇骥 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期168-171,共4页
目的：探讨钙诱导的钙释放（CICR）过程与慢性心力衰竭之间的关系.方法：采用冠状动脉左前降支结扎手术制作大鼠慢性心衰模型,酶解法分离成年大鼠心室肌细胞,然后使用NiCl2（5mmol/L）和毒胡萝卜素（TG, 100nmol/L）分别阻断钠钙交换体... 目的：探讨钙诱导的钙释放（CICR）过程与慢性心力衰竭之间的关系.方法：采用冠状动脉左前降支结扎手术制作大鼠慢性心衰模型,酶解法分离成年大鼠心室肌细胞,然后使用NiCl2（5mmol/L）和毒胡萝卜素（TG, 100nmol/L）分别阻断钠钙交换体和钙泵,采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统记录心肌细胞的L-型钙电流（ICa.L）以及CICR过程中的钙瞬变.结果：心衰大鼠心肌细胞的ICa.L低于正常大鼠心肌细胞的ICa.L;心衰组心肌细胞内CICR过程中的钙火花发生率低于正常对照组.结论：心肌细胞CICR功能的异常与心力衰竭的发生机制有着十分密切的关系,可能为导致心力衰竭发生的重要原因之一. 展开更多
关键词 钙诱导钙释放 心力衰竭 L-型钙通道 兴奋-收缩偶联 钙瞬变
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D型钠尿肽对豚鼠胃窦环形肌细胞钙敏感钾电流的影响及其作用机制
4
作者 张曙影 李萍 +3 位作者 闻庆平 曲成龙 蔡正旭 郭慧淑 《大连医科大学学报》 CAS 2010年第1期1-5,共5页
[目的]记录D型钠尿肽(DNP)对豚鼠胃窦环形肌钙敏感钾电流[IK(Ca)]的影响以探讨DNP抑制胃动力的离子通道机制。[方法]用全细胞式膜片钳技术观察DNP对豚鼠胃窦环形肌细胞IK(Ca)和瞬间外向钾电流(STOCs)的影响。[结果]DNP明显增加豚鼠胃窦... [目的]记录D型钠尿肽(DNP)对豚鼠胃窦环形肌钙敏感钾电流[IK(Ca)]的影响以探讨DNP抑制胃动力的离子通道机制。[方法]用全细胞式膜片钳技术观察DNP对豚鼠胃窦环形肌细胞IK(Ca)和瞬间外向钾电流(STOCs)的影响。[结果]DNP明显增加豚鼠胃窦环形肌IK(Ca)和STOCs,并显示剂量依赖关系。0.1、1、10和100nmol/L的DNP能增加IK(Ca)的幅度,分别为(16.7±1.12)%、(26.5±2.3)%、(46.2±3.3)%和(58.3±3.7)%。细胞外液用无钙液或Rynodine受体的阻断剂均不能阻断此效应,但IP3受体的阻断剂肝素或鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583能抑制这种效应。另外,cGMP敏感的磷酸酯酶抑制剂Zaparinast可明显增强DNP对STOCs的增加作用。[结论]DNP通过增加cGMP的产生和激活IP3受体使豚鼠胃窦环形肌细胞上IK(Ca)增加,细胞超极化,从而实现对胃窦环形肌的舒张作用。 展开更多
关键词 D型钠尿肽 钙敏感钾电流 钙依赖的钙释放 三磷酸肌醇受体 斯里兰卡肉桂咸受体
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心肌细胞膜与肌质网膜的结构功能耦联及其病理重塑机制 被引量：2
5
作者 吴昊迪 王世强 +1 位作者 孟旭 张海波 《生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第11期1088-1094,共7页
心脏的收缩功能依赖心肌细胞膜(包括横管)与肌质网的结构耦联以及其中L型钙通道与肌质网钙释放通道之间的钙致钙释放过程。在一些病理条件下,细胞膜与肌质网的耦联结构发生重塑,钙致钙释放机制受损,心肌细胞收缩力下降。其中,junctophil... 心脏的收缩功能依赖心肌细胞膜(包括横管)与肌质网的结构耦联以及其中L型钙通道与肌质网钙释放通道之间的钙致钙释放过程。在一些病理条件下,细胞膜与肌质网的耦联结构发生重塑,钙致钙释放机制受损,心肌细胞收缩力下降。其中,junctophilin-2等蛋白分子表达量减少是心力衰竭疾病中心肌细胞收缩能力下降的关键因素。 展开更多
关键词 横管 肌质网 兴奋收缩耦联 钙致钙释放 心衰 junctophilin-2
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慢性心衰大鼠心肌细胞内异常钙诱导钙释放的研究
6
作者 胡淑婷 白洁 刘红梅 《宁夏医学杂志》 CAS 2013年第12期1131-1133,I0003,共4页
目的研究慢性心衰大鼠心肌细胞内异常的钙诱导钙释放。方法将实验动物分为手术组和假手术组,运用全细胞膜片钳、激光扫描共聚焦显微镜、蛋白印迹(Western-blot)等方法研究胞浆内钙诱导钙瞬变及钙调控相关蛋白L-型钙通道(LTCC)表达的变... 目的研究慢性心衰大鼠心肌细胞内异常的钙诱导钙释放。方法将实验动物分为手术组和假手术组,运用全细胞膜片钳、激光扫描共聚焦显微镜、蛋白印迹(Western-blot)等方法研究胞浆内钙诱导钙瞬变及钙调控相关蛋白L-型钙通道(LTCC)表达的变化。结果慢性心衰大鼠心肌细胞肌浆网内的钙瞬变(ΔF/F0=12.72±1.13)显著低于对照组大鼠心肌细胞肌浆网内的钙瞬变(ΔF/F0=28.87±2.02,P<0.01);慢性心衰大鼠心肌细胞内LTCC的表达较对照组下调。结论 LTCC表达下调所致心肌兴奋-收缩耦联的异常是导致心衰的原因之一。 展开更多
关键词 心力衰竭 肌浆网 L-型钙通道 钙诱导钙释放 兴奋-收缩耦联
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