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人参多糖介导Wnt/β-catenin信号转导诱导人鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡 被引量:17
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作者 范家铭 刘泽洪 +3 位作者 李静 王亚平 杨绿源 黄江菊 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期3332-3337,共6页
目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,... 目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1分别作用48 h后,流式细胞术检测其对CNE-2细胞凋亡的诱导作用;Hoechst-33258染色和电镜观察细胞的形态改变。Real-time PCR检测细胞β-catenin mRNA的表达。采用免疫荧光染色检测细胞中β-catenin,TCF4蛋白定位及表达量的变化。Western blot检测细胞中β-catenin,Bcl-2,Bax蛋白的变化。结果:CCK8法测得人参多糖能明显抑制CNE-2细胞的增殖,其抑制作用呈剂量、时间依赖性,GPS处理细胞48 h的IC50为0.39 g·L-1;质量浓度分别为0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1的GPS作用人鼻咽癌CNE-2细胞48 h后细胞凋亡率分别为(5.69±0.29)%,(10.3±0.63)%,(15.4±0.74)%,(35.7±1.86)%,与对照组(2.08±0.11)%比较均有显著性差异(P<0.05);Hoechst-33258染色结果显示细胞凋亡特征。电镜下可见0.4 g·L-1GPS诱导48 h后可使CNE-2细胞出现凋亡小体。Real-time PCR显示β-catenin mRNA表达明显降低。激光共聚焦结果显示人参多糖作用48 h后β-catenin和TCF4在胞核中表达明显减少,β-catenin表达区域由胞核向胞膜转移。Western blot结果显示经浓度梯度增加的人参多糖作用CNE-2细胞48 h后,β-catenin和抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱;而促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论:人参多糖可明显抑制CNE-2细胞增殖促进细胞凋亡。Wnt/β-catenin信号通路的受阻可能是GPS诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的一个重要机制。 展开更多
关键词 人参多糖 cne-2细胞 细胞增殖 凋亡 WNT Β-CATENIN
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芹菜素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的增强作用 被引量:13
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作者 李明勇 黄培春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期88-92,共5页
目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-... 目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制CNE-2Z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对CNE-2Z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。 展开更多
关键词 芹菜素 顺铂 鼻咽癌 中效原理 增殖 凋亡 cne-2Z细胞
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PI3K/Akt/FoxO3a信号通路对人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:10
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作者 邱权 叶琳 +2 位作者 皮静婷 陈黎黎 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1264-1267,共4页
目的探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路。方法通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测Fo... 目的探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路。方法通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测FoxO3a在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,实时荧光定量PCR检测FoxO3a的mRNA表达水平,MTT法检测鼻咽癌细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测鼻咽癌细胞的凋亡率。结果通过使用PI3K特异性抑制剂LY294002,FoxO3a在实验组人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞中的蛋白和mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05),且在CNE-1(P=0.004)、CNE-2(P=0.001)细胞核内的表达量高于对照组,FoxO3a的上调可抑制人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的增殖(P<0.05),促进其凋亡(P<0.01)。结论通过抑制PI3K/Akt信号通路的活性可上调人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞FoxO3a基因的表达,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与其对FoxO3a的调控有关。 展开更多
关键词 FOXO3A PI3K AKT通路 人鼻咽癌 cne-1 cne-2 细胞增殖 细胞凋亡
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普鲁卡因对人鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖的影响 被引量:9
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作者 周慧 徐明锋 +1 位作者 罗国庆 张月飞 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期1118-1121,共4页
目的:探讨普鲁卡因(procaine)对人鼻咽癌(NPC)细胞CNE-2Z的影响。方法:体外培养的NPC细胞CNE-2Z分别加入不同浓度的普鲁卡因,并作用不同的时间。应用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-Dimethyl-thiaoly)-2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide,MTT... 目的:探讨普鲁卡因(procaine)对人鼻咽癌(NPC)细胞CNE-2Z的影响。方法:体外培养的NPC细胞CNE-2Z分别加入不同浓度的普鲁卡因,并作用不同的时间。应用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-Dimethyl-thiaoly)-2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide,MTT]法和流式细胞仪检测观察普鲁卡因对NPC细胞CNE-2Z的影响,同时用RT-PCR分析p16和RASSF1A mRNA的表达情况。结果:普鲁卡因能显著抑制CNE-2Z细胞增殖,该作用呈剂量-效应和时间依赖关系。普鲁卡因使细胞周期阻滞于G1期,并能上调CNE-2Z细胞RASSF1A mRNA的表达,但对p16 mRNA表达无明显影响。结论:普鲁卡因对CNE-2Z细胞有增殖抑制作用,它能上调CNE-2Z细胞RASSF1A mRNA的表达,推测这可能是普鲁卡因抑制CNE-2Z细胞增殖的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 普鲁卡因 鼻咽肿瘤 cne-2Z细胞 细胞增殖 基因 p16 基因 RASSF1A
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雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡作用 被引量:11
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作者 王秀 张竞竞 +4 位作者 张配 孙小锦 刘哲 张鑫宇 刘浩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1147-1150,共4页
目的探讨雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用及机制。方法 MTT测定雷公藤甲素对CNE-2Z细胞的抑制作用;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色测定雷公藤甲素对鼻咽癌细胞凋亡的影响;Western blot测定葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated p... 目的探讨雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用及机制。方法 MTT测定雷公藤甲素对CNE-2Z细胞的抑制作用;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色测定雷公藤甲素对鼻咽癌细胞凋亡的影响;Western blot测定葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP-78)、Akt的表达及Akt的磷酸化水平;ROS荧光探针-二氢乙啶测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平。结果 MTT显示,雷公藤甲素对鼻咽癌细胞CNE-2Z的抑制作用随浓度增加及时间延长而增强;PI结果显示,雷公藤甲素能明显诱导鼻咽癌细胞的凋亡,25、50和100 nmol·L-1的雷公藤甲素作用细胞24 h,CNE-2Z细胞的凋亡率分别为14.0%、26.9%和34.4%;Western blot显示,雷公藤甲素对CNE-2Z细胞GRP-78表达无明显影响,但可减弱Akt的表达及磷酸化水平;氧化应激实验结果表明,雷公藤甲素作用4 h后,能增加鼻咽癌细胞CNE-2Z内ROS的水平。结论雷公藤甲素具有抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖的作用,且具有浓度与时间依赖性。其机制可能是雷公藤甲素通过诱导氧化应激,抑制细胞内Akt的表达及其磷酸化,调节下游的信号通路,进而促进CNE-2Z细胞的凋亡。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 鼻咽癌细胞 氧化应激 活性氧 凋亡
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鹅不食草提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长抑制作用的实验研究 被引量:10
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作者 陈红淑 李昌煜 +2 位作者 余美荣 许亚萍 丁志山 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第7期1621-1623,共3页
目的:观察鹅不食草不同提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用系统溶剂法制备鹅不食草不同提取物,MTT法观察不同浓度的各提取物对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测鹅不食草乙酸... 目的:观察鹅不食草不同提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用系统溶剂法制备鹅不食草不同提取物,MTT法观察不同浓度的各提取物对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测鹅不食草乙酸乙酯提取物对该细胞的凋亡作用。结果:鹅不食草石油醚和乙酸乙酯提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2有一定的抑制,其中乙酸乙酯提取物抑制作用最明显,呈现较好的剂量-效应曲线,其作用机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。结论:鹅不食草乙酸乙酯提取物可能是其抗鼻咽癌作用的有效部位之一。 展开更多
关键词 鹅不食草 人鼻咽癌细胞cne-2 细胞增殖 凋亡
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HMME-PDT对CNE-2细胞增殖的抑制作用 被引量:9
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作者 李燕 阴慧娟 +4 位作者 曾百乐 李晓原 胡黎平 潘实清 刘小星 《热带医学杂志》 CAS 2006年第9期F0002-F0004,共3页
目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用。方法以血卟啉单甲醚为光敏剂,532nm激光为激发光源的光动力学疗法作用于鼻咽癌CNE-2细胞。细胞用5、10、20!g/ml浓度的光敏剂孵育2h后,用0.6、1.2、2.4... 目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用。方法以血卟啉单甲醚为光敏剂,532nm激光为激发光源的光动力学疗法作用于鼻咽癌CNE-2细胞。细胞用5、10、20!g/ml浓度的光敏剂孵育2h后,用0.6、1.2、2.4、4.8、9.6J/cm2剂量的激光照射;激光功率密度为10mW/cm2。MTT法检测在HMME和激光两种变量下PDT对细胞活性的抑制作用;光镜观察PDT作用后细胞形态的变化;免疫组化法检测PCNA的表达。结果在HMME剂量为5!g/ml、10!g/ml及20!g/ml时,细胞的抑制率随着激光剂量从0.6J/cm2增加至9.6J/cm2而逐渐增加;并且和HMME及激光剂量密切相关;光镜观察结果表明PDT组与对照组相比细胞密度明显减少,细胞核浓聚、碎裂。免疫组化结果显示PDT作用后PCNA表达减少。结论HMME-PDT对CNE-2细胞的增殖有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 血卟啉单甲醚 光动力疗法 cne-2细胞
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大蒜素对CNE-2Z细胞增殖及端粒酶活性的影响 被引量:7
8
作者 李葵芳 范德生 《宁夏医学杂志》 CAS 2008年第7期584-585,I0001,共3页
目的研究大蒜素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法不同浓度的大蒜素作用于CNE-2Z细胞后,MTT法检测细胞的增殖抑制作用,TRAP-PCR-ELISA法研究细胞端粒酶活性的变化。结果大蒜素对CNE-2Z细胞的增殖具有一定程度的抑制作用,... 目的研究大蒜素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法不同浓度的大蒜素作用于CNE-2Z细胞后,MTT法检测细胞的增殖抑制作用,TRAP-PCR-ELISA法研究细胞端粒酶活性的变化。结果大蒜素对CNE-2Z细胞的增殖具有一定程度的抑制作用,并呈时间、浓度依赖性;不同浓度的大蒜素能下调CNE-2Z细胞的端粒酶活性,且同样呈时间、浓度依赖性。结论大蒜素可抑制CNE-2Z细胞的增殖及端粒酶活性,可能是其抗肿瘤的重要机制之一。 展开更多
关键词 大蒜素 增殖 端粒酶 cne-2Z细胞
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鼻咽癌细胞株CNE-2连续照射期间细胞增殖状况的研究 被引量:6
9
作者 朱小东 曲颂 +3 位作者 李力 唐步坚 黎丹绒 张玮 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第8期1281-1284,共4页
目的:了解鼻咽癌细胞(CNE-2)照射过程中的增殖情况,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的时机,为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法:对接受^(60)Co-γ射线2Gy/天,每天1次,连续照射5天期间的CNE-2细胞,每天分别采... 目的:了解鼻咽癌细胞(CNE-2)照射过程中的增殖情况,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的时机,为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法:对接受^(60)Co-γ射线2Gy/天,每天1次,连续照射5天期间的CNE-2细胞,每天分别采用四氮唑兰比色分析法(MTT法)检测CNE-2细胞存活率、细胞分裂指数法检测细胞分裂指数、流式细胞术检测照射后细胞周期分布情况。结果:MTT法、细胞分裂指数法和流式细胞术均检测出CNE-2细胞在连续照射的第3天增殖速度最快,增殖最旺盛;在第5天细胞增殖速度最缓慢,增殖活性最低。结论:鼻咽低分化鳞癌细胞连续分割照射中后期存在加速增殖现象。 展开更多
关键词 cne-2细胞 照射 加速增殖
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眼镜蛇毒神经生长因子诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡作用的研究 被引量:6
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作者 韦世秀 刘成军 +2 位作者 李牡艳 宋慧 李佳荃 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期1909-1912,共4页
目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)... 目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)NGF处理24,48,72,96h对人鼻咽癌CNE-2生长的抑制率;Hoechst33342荧光染色观察凋亡细胞的形态;琼脂糖凝胶电泳测定DNA断裂状况;流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡率。结果:不同浓度的NGF能抑制CNE-2细胞增殖,并呈浓度-时间效应关系,作用24,48,72,96h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.213,0.095,0.048,0.033g.L-1;经NGF(0.1g.L-1)处理细胞48h后,荧光染色呈现典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳可见凋亡细胞特有的DNA片段;0.05,0.1,0.2g.L-1NGF作用48h后,CNE-2细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(28.2±2.0)%、(39.9±1.9)%、(50.3±1.3)%。结论:NGF通过诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡而产生抗鼻咽癌活性。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒 神经生长因子 鼻咽癌 cne-2细胞 细胞凋亡
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miR-106b在鼻咽癌组织中表达及对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响 被引量:6
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作者 周士霞 王海莉 王豪勋 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第20期9-12,共4页
目的探讨miR-106b在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响。方法选取68例份初治鼻咽癌患者的手术切除标本和45例份鼻咽炎患者的鼻咽部活检组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-106b表达,分析miR-106b表达与鼻咽... 目的探讨miR-106b在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响。方法选取68例份初治鼻咽癌患者的手术切除标本和45例份鼻咽炎患者的鼻咽部活检组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-106b表达,分析miR-106b表达与鼻咽癌患者临床病理参数的关系。取体外培养的对数生长期人鼻咽癌细胞株CNE-2分为四组(1×106个/组)。miR-106b模拟物组、miR-106b抑制物组分别转染miR-106b模拟物及miR-106b抑制物序列,阴性对照组转染阴性对照序列,空白对照组不处理;采用实时荧光定量PCR技术检测各组miR-106b表达,MTT法检测各组细胞增殖情况(以吸光度值表示),流式细胞仪检测各组细胞周期,Transwell试验检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果鼻咽癌及鼻咽炎组织miR-106b相对表达量分别为1.57±0.15、1.14±0.12,二者比较P<0.05;miR-106b相对表达量与鼻咽癌患者淋巴结转移、侵犯颈动脉鞘和侵犯颅底有关(P均<0.05)。各组miR-106b相对表达量:miR-106b模拟物组高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,miR-106b抑制物组低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞增殖情况:miR-106b模拟物组细胞接种后24、48、72和96 h时吸光度值均高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,而miR-106b抑制物组低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞周期:miR-106b模拟物组S期细胞比例高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,而miR-106b抑制物组细胞S期比例低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞迁移和侵袭情况:miR-106b模拟物组迁移和侵袭细胞数均高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,且miR-106b抑制物组均低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05。结论 miR-106b在鼻咽癌组织中呈高表达;miR-106b过表达可促进鼻咽癌CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 鼻咽癌 微小RNA-106b cne-2细胞 细胞增殖 细胞迁移
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熊果酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡的实验研究 被引量:3
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作者 李洁 魏莲枝 向银洲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期37-40,共4页
目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制。方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相... 目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制。方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因bcl-2,bax和cox-2表达的变化;Western blot检测CNE-2Z细胞内caspase 3的表达。结果:熊果酸对CNE-2Z细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,并呈浓度依赖性;流式细胞术分析表明S期细胞数减少,细胞主要阻滞在G0/G1期;免疫组织化学检测显示在凋亡过程中bax表达上调,bcl-2、cox-2表达下调;Western blot检测CNE-2Z细胞中caspase 3表达增强。结论:熊果酸在体外对CNE-2Z细胞有诱导凋亡的作用,其作用机制可能是通过促进caspase 3的活化和bax的表达上调、bcl-2、cox-2的表达下调来实现。 展开更多
关键词 熊果酸 鼻咽癌细胞 cne-2Z 凋亡
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鼻咽癌细胞系中核迁移蛋白的表达及作用 被引量:3
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作者 陈彦球 李添应 +1 位作者 瞿申鸿 唐小江 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期708-712,共5页
背景与目的:核迁移是真核生物生长发育和细胞功能所必需的,核迁移蛋白(nucleardistributionC,NUDC)在核迁移中起着重要作用。本研究旨在检测NUDC在鼻咽癌细胞系CNE-2、HNE-2中的表达情况,初步探讨其抗体对癌细胞活性的影响。方法:在大... 背景与目的:核迁移是真核生物生长发育和细胞功能所必需的,核迁移蛋白(nucleardistributionC,NUDC)在核迁移中起着重要作用。本研究旨在检测NUDC在鼻咽癌细胞系CNE-2、HNE-2中的表达情况,初步探讨其抗体对癌细胞活性的影响。方法:在大肠杆菌中表达GST-NUDC重组蛋白并制备其多克隆抗体,间接免疫荧光染色法明确NUDC蛋白在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,Westernblot确定NUDC蛋白在鼻咽癌细胞系中表达情况,MTT法检测NUDC抗体对鼻咽癌细胞生长的影响。结果:鼻咽非癌组织及鼻咽癌细胞中均有NUDC蛋白表达,且其在鼻咽癌细胞中的表达量明显高于鼻咽非癌组织。NUDC蛋白在鼻咽癌细胞中主要位于细胞质核区附近,细胞核也可见少量表达。NUDC蛋白抗体可抑制鼻咽癌细胞生长,且存在着剂量-反应关系。结论:NUDC蛋白在鼻咽癌细胞系中高度表达,且NUDC蛋白抗体在体外可抑制鼻咽癌细胞的生长。 展开更多
关键词 核迁移蛋白 鼻咽肿瘤 cne-2细胞 HNE-2细胞 细胞培养 表达 细胞增殖
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山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响 被引量:4
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作者 陈育华 吴国才 +1 位作者 王珍 周碧云 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第5期616-619,共4页
目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处... 目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。 展开更多
关键词 山奈酚 cne-2细胞 细胞周期 CDK1 CYCLINB1 鼻咽癌
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蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞膜电位的影响 被引量:3
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作者 孔天翰 董伟华 +2 位作者 王永奎 韩雪飞 陈华艳 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第6期635-655,共21页
目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌CNE 2Z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE 2Z细胞膜电位 ,MTT法... 目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌CNE 2Z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE 2Z细胞膜电位 ,MTT法观察APBMV对CNE 2Z细胞的毒性作用。结果 :CNE 2Z细胞经APBMV处理48h后 ,细胞膜负电位 (13 0 0± 3.5 8)mV明显小于空白对照组 (2 3 0 0± 8.2 1)mV ,P <0 .0 1,细胞膜呈去极化状态 ;CNE 2Z细胞代谢MTT的能力下降 ,显示明显的毒性反应。结论 :APBMV可能具有膜毒素的作用 ,通过降低CNE 2Z细胞膜电位 。 展开更多
关键词 蝎毒抗癌多肽 鼻咽癌 细胞膜电位 cne-2Z细胞 APBMV
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高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞株放射敏感性的体外研究 被引量:4
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作者 刘娟 肖平田 +3 位作者 覃蓉 王跑球 周洪涛 熊裕娟 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2010年第5期326-329,共4页
目的体外观察高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响。方法将鼻咽癌CNE-2细胞随机分为A、B、C、D四组。A组:细胞用0.22MPa高压氧处理60min后立即进行2Gy放疗;B组:细胞只应用0.22MPa高压氧处理60min;C组:细胞只进行2Gy放疗处理;D组:... 目的体外观察高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响。方法将鼻咽癌CNE-2细胞随机分为A、B、C、D四组。A组:细胞用0.22MPa高压氧处理60min后立即进行2Gy放疗;B组:细胞只应用0.22MPa高压氧处理60min;C组:细胞只进行2Gy放疗处理;D组:细胞不作任何处理。应用MTT法检测各组细胞生长抑制率,PI染色检测各组细胞死亡率,流式细胞计数各组细胞凋亡率。结果 A、B、C3组细胞生长抑制率分别为(18.67±4.54)%,(7.47±4.88)%,(14.06±9.39)%,A组与B组和C组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D4组死亡率分别为(11.70±1.45)%,(4.00±0.56)%,(8.43±0.83)%,(1.43±0.51)%。A与B、C、D组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D4组凋亡率分别为4.37±1.12、2.19±0.35、2.70±0.38、1.65±0.20,A与B、C、D组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞有较强的放射增敏作用。 展开更多
关键词 cne-2细胞株 高压氧 鼻咽癌 放疗 放疗增敏效应
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姜黄素对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 李文全 曹忠胜 钱伟 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第35期4917-4919,4922,共4页
目的探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度(0、10、20、40、60μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest3325... 目的探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度(0、10、20、40、60μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest33258荧光染色法观察细胞凋亡情况。结果姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且随姜黄素浓度增加,CNE-2细胞抑制率呈上升趋势(P<0.05),姜黄素作用CNE-2细胞24、48、72h的半抑制浓度(IC50)分别为(23.54±0.36)、(18.31±0.42)、(8.56±0.37)μmol/L,即姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且呈现明显浓度、时间依赖性;流式细胞检测结果显示,0、10、20、40、60μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞,凋亡率随着姜黄素浓度增加而上升;荧光染色结果可见,CNE-2细胞未给予姜黄素处理,细胞呈圆形或者椭圆形,细胞核大小均匀一致,染色质分布均匀的淡蓝色荧光;10μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞胞体缩小,细胞核染色质凝聚,呈颗粒状亮蓝色荧光;20μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞出现胞体缩小,细胞核浓缩、染色质不均匀,出现凋亡小体,甚至出现核碎裂;40和60μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞凋亡小体数量增多,出现大量核碎裂。结论姜黄素对NPC细胞株CNE-2细胞增殖具有明显抑制作用,且促进CNE-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 姜黄素 鼻咽肿瘤 cne-2细胞 细胞增殖 凋亡
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RNA干扰沉默USP22基因对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响 被引量:3
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作者 廖志伟 庄雅靖 +3 位作者 余宏伟 喻芳 刘孟忠 周同冲 《中国医药导报》 CAS 2015年第30期25-28,45,F0003,共6页
目的探讨USP22基因表达沉默对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法将9只BALB/C祼鼠随机分为阴性对照组、CNE-2空载体细胞株组(Scrambled组)、USP22表达下调稳定细胞株组(sh-USP22组),每组3只裸鼠。绘制各组肿瘤生长曲线;移植瘤中USP22 m... 目的探讨USP22基因表达沉默对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法将9只BALB/C祼鼠随机分为阴性对照组、CNE-2空载体细胞株组(Scrambled组)、USP22表达下调稳定细胞株组(sh-USP22组),每组3只裸鼠。绘制各组肿瘤生长曲线;移植瘤中USP22 m RNA及蛋白的表达情况通过RT-PCR、免疫组织化学法检测。结果 sh-USP22组肿瘤重量[(0.54±0.07)g]明显小于阴性对照组[(1.58±0.24)g]和Scrambled组[(1.46±0.23)g],差异均有统计学意义(均P<0.05);RT-PCR结果表明,以阴性对照组表达量为参照(1),sh-USP22组肿瘤组织中USP22m RNA相对表达量(0.14±0.09)低于阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11),差异均有统计学意义(均P<0.05);而阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11)比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,sh-USP22组肿瘤组织中USP22阳性细胞所占比率[(12.45±1.16)%]明显低于阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%],差异均有统计学意义(均P<0.05);阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒载体sh-USP22能有效抑制USP22基因表达,并有效抑制CNE-2细胞的裸鼠成瘤能力,USP22有望成为鼻咽癌基因治疗新靶点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne-2 细胞 USP22 RNA干扰 裸鼠移植瘤
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脂质体转染反义PKCα对CNE-2Z细胞生长的影响 被引量:3
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作者 鲍波 何志巍 +1 位作者 陈南岳 黄培春 《广东医学院学报》 2001年第3期170-172,共3页
目的 :观察脂质体转染反义 PKCα对 CNE- 2 Z细胞生长的影响。方法 :用脂质体法转染反义 PKCα,以 MTT法测细胞生长。结果 :(1)脂质体浓度为 2 .0 0 0~ 8.0 0 0 mg· L- 1时 ,随着脂质体浓度增加 ,细胞生长指数逐渐降低 (P<0 .0... 目的 :观察脂质体转染反义 PKCα对 CNE- 2 Z细胞生长的影响。方法 :用脂质体法转染反义 PKCα,以 MTT法测细胞生长。结果 :(1)脂质体浓度为 2 .0 0 0~ 8.0 0 0 mg· L- 1时 ,随着脂质体浓度增加 ,细胞生长指数逐渐降低 (P<0 .0 5 ) ;但当浓度为 1.0 0 0 mg·L- 1时 ,其对细胞生长似无影响。 (2 )在 4.0 0 0~ 16 .0 0 0 mg· L- 1的范围内增加转染的反义PKCα的浓度 ,细胞生长指数逐渐降低 (P<0 .0 0 1)。结论 :小剂量脂质体转染反义 PKCα可抑制 CNE- 2 Z生长 ,反义PKCα的剂量与细胞生长抑制呈量效关系。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 转染 反义寡核苷酸 蛋白激酶C-Α 细胞生长 cne-2Z细胞
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吗啡对顺铂诱导的鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用的影响 被引量:3
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作者 操隆辉 周建华 +3 位作者 林文前 谭红鹰 曾维安 曾益新 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期371-375,共5页
【目的】以人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤为模型,探讨吗啡对顺铂抑制肿瘤生长作用的影响及其机制。【方法】建立CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型20只,随机分为4组,对照组,单纯顺铂用药组、单纯吗啡用药组和吗啡联合顺铂用药组,每组5只。吗啡5mg... 【目的】以人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤为模型,探讨吗啡对顺铂抑制肿瘤生长作用的影响及其机制。【方法】建立CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型20只,随机分为4组,对照组,单纯顺铂用药组、单纯吗啡用药组和吗啡联合顺铂用药组,每组5只。吗啡5mg/kg每天给药1次,顺铂3mg/kg每3d给药2次,均为腹腔注射。用药14d后处死动物,完整剥离肿瘤,记净瘤质量。TUNEL染色计算细胞凋亡数,免疫组化染色检测肿瘤组织Bax,Bcl-2,cleaved-caspase-3以及CD34的表达情况。【结果】单纯顺铂用药组的瘤质量明显小于其它3组(P<0.05),吗啡联合顺铂用药组的瘤质量明显小于对照组(P<0.05);TUNEL染色及cleaved-caspase-3染色显示单纯顺铂用药组的凋亡细胞数明显多于其他3组(P<0.05)。单纯顺铂用药组与其他3组相比Bax蛋白表达量增多,而Bcl-2表达量减少,单纯吗啡组的Bcl-2表达最强。CD34微血管染色显示单纯顺铂用药组的微血管密度显著少于其它3组(P<0.05),单纯吗啡用药组的微血管密度显著多于对照组(P<0.05)。【结论】吗啡通过拮抗顺铂诱导细胞凋亡及促进CNE-2细胞裸鼠移植瘤组织的血管生成,抵抗了顺铂抑制肿瘤生长的作用。 展开更多
关键词 吗啡 顺铂 凋亡 cne-2细胞
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