C/EBP-α基因诱导肝细胞和肝星状细胞自噬和凋亡的差异研究 被引量：1

1

作者 陈耀丽 陶丽丽 +1 位作者 余光银 廖明明 《中国实用医刊》 2016年第22期30-32,共3页

目的：通过体外研究，探讨 CCAAT 增强子结合蛋白-α（C/ EBP-α）诱导的肝细胞和肝星状细胞（HSCs）自噬和凋亡的差异。方法构建腺病毒介导的 C/ EBP-α基因（Ad-C/ EBP-α），分别以50、100、200 MOI 感染大鼠 BRL-3A 细胞系和 HSC-T... 目的：通过体外研究，探讨 CCAAT 增强子结合蛋白-α（C/ EBP-α）诱导的肝细胞和肝星状细胞（HSCs）自噬和凋亡的差异。方法构建腺病毒介导的 C/ EBP-α基因（Ad-C/ EBP-α），分别以50、100、200 MOI 感染大鼠 BRL-3A 细胞系和 HSC-T6细胞系，采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况；应用 Western blot 方法检测自噬标志蛋白 LC3Ⅰ/ LC3Ⅱ的表达，探讨 C/ EBP-α诱导2种细胞的自噬及凋亡途径有无差异。结果流式细胞仪显示HSC-T6细胞系从50 MOI 时即出现显著凋亡，且随剂量上升，凋亡率进一步升高，上升趋势差异有统计学意义（P〈0.05）；BRL-3A 细胞系并无明显变化。Western blot 显示 HSC-T6LC3Ⅰ/ LC3Ⅱ从50 MOI 时水平明显下降，且剂量越高，下降幅度越大，下降趋势差异有统计学意义（P〈0.05）；BRL-3A 细胞系并无明显变化。结论 C/ EBP-α基因对肝星状细胞的自噬有剂量依赖的抑制作用，对其凋亡有剂量依赖的促进作用；但对肝细胞的自噬及凋亡无明显影响。 展开更多

关键词 肝细胞 肝星状细胞 ccaat增强子结合蛋白-α 凋亡 自噬

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大鼠肝再生启动阶段肝细胞CCAAT增强子结合蛋白α mRNA、微小RNA-144-3p和3种环状RNA的表达和作用 被引量：8

2

作者 臧夏炎 王子慧 +4 位作者 李亚霏 郭建林 靳伟 常翠芳 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期901-908,共8页

目的了解大鼠肝再生启动阶段CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)mRNA、微小RNA(miR)-144-3p、rno-LOC100365958_0001、rno-Usp3_0010和rno-AC241873_0010调节肝细胞处于G_(0)期还是G_(1)期的途径和方法。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切... 目的了解大鼠肝再生启动阶段CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)mRNA、微小RNA(miR)-144-3p、rno-LOC100365958_0001、rno-Usp3_0010和rno-AC241873_0010调节肝细胞处于G_(0)期还是G_(1)期的途径和方法。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(PH)模型,按Smedsrod等方法分离肝细胞,用大规模定量分析技术检测大鼠肝再生中肝细胞竞争性内源RNA(ceRNA)表达的变化,用Cytoscape 3.2软件构建ceRNA的相互作用网络,用ceRNA综合分析等方法解析它们表达的相关性和作用相关性。结果PH后0 h和6 h时,CEBPαmRNA的比值为4.88±0.78和1.12±0.27,miR-144-3p为1.30±0.11和2.97±0.81,rno-LOC100365958_0001为6.99±0.55和0.16±0.05,rnoUsp3_0010为8.48±0.67和0.13±0.01,rno-AC241873_0010为11.85±0.93和0.09±0.02。CEBPα促进的G_(0)期相关基因细胞周期蛋白依赖性激酶2相关蛋白2(CDK2AP2)为2.55±0.42和0.74±0.11,G_(0)/G_(1)开关2(G_(0)S2)为3.85±0.23和0.64±0.08,信号转导子和转录激活因子1(STAT1)为2.57±0.13和1.32±0.13,转化生长因子β受体2(TGFBR2)为2.77±0.20和0.79±0.13,抑制的G_(0)期相关基因细胞周期蛋白依赖性激酸酶抑制剂1a(CDKN1a)为0.39±0.07和0.93±0.15。CEBPα促进的G_(1)期相关基因细胞周期蛋白G2(CCNG2)为1.19±0.09和0.25±0.06,抑制的G_(1)期相关基因ETS变异转录因子6(ETV6)为0.77±0.05和2.22±0.68,血红蛋白加氧酶1(HMOX1)为1.05±0.21和4.57±0.88,MAPK14为1.01±0.15和2.01±0.32,STAT3为0.74±0.15和2.88±0.24,肿瘤坏死因子(TNF)为0.80±0.14和2.29±0.51。结论PH后0 h时,CEBPαmRNA上调,有利于CEBPα促进的G_(0)期相关基因表达和肝细胞处于G_(0)期。相反,PH后6 h时,rno-LOC100365958_0001、rno-Usp3_0010、rno-AC241873_0010和miR-144-3p的相互作用加强了后者对CEBPαmRNA的抑制,不利于CEBPα形成,有利于CEBPα抑制的G_(1)期相关基因表达和肝细胞处于G_(1)期。 展开更多

关键词 部分肝切除 肝再生 G_(0)期肝细胞 G_(1)期肝细胞 ccaat增强子结合蛋白α 竞争性内源RNA综合分析 生物高通量检测 大鼠

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HBx蛋白通过C/EBPα/SREBP-1通路调节脂代谢促进肝癌细胞增殖 被引量：6

3

作者 张欣 张玺 +1 位作者 张娟娟 乔玲 《中华肝脏病杂志》 CSCD 北大核心 2020年第12期1036-1041,共6页

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码的x蛋白(HBx)调节人肝癌细胞HepG2脂代谢和增殖的作用及其机制。方法用HBx表达质粒瞬时转染HepG2细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,油红O染色检测脂滴堆积情况,Western blot检测脂代谢相关基因CCA... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码的x蛋白(HBx)调节人肝癌细胞HepG2脂代谢和增殖的作用及其机制。方法用HBx表达质粒瞬时转染HepG2细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,油红O染色检测脂滴堆积情况,Western blot检测脂代谢相关基因CCAAT/增强子结合蛋白α (C/EBPα)、固醇调节元件结合蛋白-1 (SREBP-1)、脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰辅酶A羧化酶1 (ACC1)的蛋白水平;MTT、油红O染色和Western blot检测C/EBPα在过表达和低表达的情况下对HBx调节HepG2细胞脂代谢和增殖的影响。组间数据比较采用方差分析。结果 HBx明显促进人肝癌细胞HepG2增殖,并呈剂量和时间依赖关系(F = 32.82,P < 0.001;F = 58.21,P < 0.001);HBx明显促进HepG2细胞的脂质堆积(F = 22.65,P < 0.001),且使脂质代谢的重要调节因子C/EBPα和SREBP-1、脂肪酸合成的限速酶FASN和ACC1的蛋白水平显著升高。C/EBPα过表达进一步加强了HBx对HepG2细胞增殖、脂滴堆积和脂生成相关基因表达的促进作用;相反,C/EBPα低表达削弱了HBx对细胞增殖、脂滴堆积和脂生成相关基因表达的促进作用。结论 HBx可能通过C/EBPα/SREBP-1信号通路,影响人肝癌细胞HepG2的脂质生成,促进其增殖。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒X蛋白 肝细胞癌 ccaat/增强子结合蛋白α 固醇调节元件结合蛋白-1 脂质生成

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转录因子CCAAT增强子结合蛋白α的研究进展 被引量：6

4

作者 应霁 王伟铭 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期262-267,共6页

CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)是CCAAT增强子结合蛋白家族的一员。该家族属于碱性区亮氨酸拉链(b ZIP)蛋白家族,在细胞增殖分化、细胞周期调控、免疫应答、炎症反应、能量代谢、肿瘤发生及凋亡等过程中发挥作用。文章就C/EBPα的结构... CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)是CCAAT增强子结合蛋白家族的一员。该家族属于碱性区亮氨酸拉链(b ZIP)蛋白家族,在细胞增殖分化、细胞周期调控、免疫应答、炎症反应、能量代谢、肿瘤发生及凋亡等过程中发挥作用。文章就C/EBPα的结构、表达调控、生物学功能作一综述。 展开更多

关键词 ccaat增强子结合蛋白α 结构 表达调控 生物学功能

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SUMO化修饰C/EBPα在高氧暴露所致支气管肺发育不良早产大鼠中的动态表达及作用 被引量：5

5

作者 朱玥 卢红艳 +4 位作者 郝晓波 常明 王秋霞 万峰云 万雪晴 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期403-409,共7页

目的探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在支气管肺发育不良(BPD)早产大鼠中的表达及其作用。方法将18只早产大鼠随机分为空气组和高氧组(n=9),建立高氧暴露早产大鼠BPD模型。分别在4 d、7 d及14 d,每组各... 目的探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在支气管肺发育不良(BPD)早产大鼠中的表达及其作用。方法将18只早产大鼠随机分为空气组和高氧组(n=9),建立高氧暴露早产大鼠BPD模型。分别在4 d、7 d及14 d,每组各取3只大鼠采集肺组织,糖原染色观察肺组织分化情况;免疫组化检测Ki67表达;Western blot检测SUMO1及C/EBPα蛋白表达;免疫共沉淀检测SUMO化C/EBPα表达。结果与同时间点空气组相比,高氧组大鼠肺组织糖原染色强度4 d时减弱,7 d及14 d时明显增强;随高氧暴露时间延长,高氧组大鼠肺组织中Ki67表达逐渐升高,且均高于同时间点空气组;与空气组相比,高氧组C/EBPα蛋白4 d时表达增加,7 d及14 d时表达降低(P<0.05);高氧组SUMO1及SUMO化C/EBPα蛋白表达呈逐渐上升趋势,均明显高于同时间点空气组(P<0.05)。高氧组SUMO化C/EBPα表达与糖原染色强度及核增殖抗原Ki67均呈正相关(r=0.529、0.671,P<0.05)。结论高氧暴露所致早产大鼠BPD模型中,肺泡上皮细胞过度增殖与分化障碍可能与SUMO化C/EBPα表达增加相关。 展开更多

关键词 支气管肺发育不良 ccaat增强子结合蛋白α 小泛素相关修饰物 大鼠

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Notch1/Hes1信号调控C/EBPα表达对AECII细胞增殖与分化的影响 被引量：5

6

作者 万峰云 卢红艳 +2 位作者 万雪晴 朱玥 郝晓波 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期495-499,共5页

目的:探讨Notch1/Hes1信号通路能否通过调控CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达从而影响肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的增殖与分化功能。方法:体外培养人AECⅡ,将细胞随机分为对照组、激活剂组(加入Notch通路激活剂Jagged1蛋白500μg/L... 目的:探讨Notch1/Hes1信号通路能否通过调控CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达从而影响肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的增殖与分化功能。方法:体外培养人AECⅡ,将细胞随机分为对照组、激活剂组(加入Notch通路激活剂Jagged1蛋白500μg/L)和抑制剂组(加入Notch通路抑制剂DAPT 10μmol/L),于干预后24 h收获各组细胞。采用RT-qPCR和Western blot法分别检测Notch1、Hes1及C/EBPα的mRNA与蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞活力;细胞计数检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及分化。结果:与对照组相比,激活剂组Notch1、Hes1和C/EBPα的mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),促进AECⅡ从S期进入G_2/M期,增殖增加而分化减少(P<0.05);抑制剂组Notch1、Hes1和C/EBPαmRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),AECⅡ被阻滞于G_0/G_1期,增殖减少而分化增加(P<0.05)。结论:Notch1/Hes1信号可调控C/EBPα表达并能影响AECⅡ增殖与分化。 展开更多

关键词 Notch1/Hes1信号通路 ccaat/增强子结合蛋白α 肺泡Ⅱ型上皮细胞 细胞增殖 细胞分化

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益髓生血颗粒对辐射损伤小鼠骨髓细胞C/EBPα、GM-CSF、GM-CSFRα、MAFB mRNA表达的影响 被引量：4

7

作者 岳竹君 王文娟 +4 位作者 贾富霞 王佳佳 马赟 王丽娜 张群秀 《中国医药导报》 CAS 2017年第25期17-22,共6页

目的观察益髓生血颗粒对辐射损伤小鼠骨髓细胞CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、粒-单系祖细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒-单系祖细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα)、转录因子MAFB mRNA表达的影响,探讨该药调控骨髓造血的作用机制。方... 目的观察益髓生血颗粒对辐射损伤小鼠骨髓细胞CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、粒-单系祖细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒-单系祖细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα)、转录因子MAFB mRNA表达的影响,探讨该药调控骨髓造血的作用机制。方法采用随机数字表法将78只雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、粒系祖细胞集落刺激因子(G-CSF)组及益髓生血颗粒高、中、低剂量组。益髓生血颗粒高、中、低剂量组先预防给药2 d,分别按12、6、3 g/(kg·d)灌胃。采用^(60)Co-γ射线全身一次性照射造模。造模第2天,G-CSF组按30μg/(kg·d)皮下注射G-CSF注射液,益髓生血颗粒高、中、低剂量组给药方法同预防给药,其余组均给予等量蒸馏水,连续14 d。进行小鼠骨髓细胞计数;采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测骨髓细胞C/EBPα、GM-CSF、GM-CSFRα、MAFB mRNA表达。结果益髓生血颗粒能明显提高辐射损伤小鼠骨髓细胞计数(均P<0.05),上调骨髓细胞GM-CSF、GM-CSFRα、MAFB m RNA表达(均P<0.05),以低剂量组效果最佳。结论益髓生血颗粒可促进骨髓造血,其机制与上调骨髓细胞GM-CSF、GM-CSFRα、MAFB mRNA表达有关。 展开更多

关键词 益髓生血颗粒 辐射损伤 ccaat增强子结合蛋白仪 粒-单系祖细胞集落刺激因子 粒-单系祖细胞集 落刺激因子受体α MAFB 基因表达

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胰岛素受体底物1基因沉默对3T3-L1细胞CCAAT增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响 被引量：3

8

作者 郑锐丹 廖丽红 +4 位作者 王成斌 高金枝 应艳琴 宁琴 罗小平 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期482-485,共4页

目的研究胰岛素受体底物1(IRS-1)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰... 目的研究胰岛素受体底物1(IRS-1)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰岛素受体底物(IRSs)是否作为C/EBPα、PPARγ的上游调节信号在前脂肪细胞分化中起到重要的调节作用。方法合成4条IRS-1 shRNA,Western blotting筛选出沉默效率最高的1条。3T3-L1前脂肪细胞分为IRS-1沉默组和对照组。IRS-1沉默组细胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞,沉默细胞中的IRS-1分子;对照组采用无意义IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞。转染24 h后诱导其分化成熟,分化72 h后检测促进前脂肪细胞分化的关键分子C/EBPα、PPARγ的表达。继续诱导分化至第7天,油红O染色观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的比例,检测其分化能力的改变。结果与对照组相比,IRS-1沉默组在诱导分化72 h后,Real-time PCR结果显示3T3-L1前脂肪细胞中C/EBPαmRNA、PPARγmRNA表达明显下降(Pa<0.05),Western blotting结果显示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同样显著下降(Pa<0.05);细胞继续分化至第7天,油红O染色显示,IRS-1沉默组前脂肪细胞分化成熟的比例与对照组比较显著降低。结论胰岛素可能通过IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的表达促进前脂肪组织的分化。 展开更多

关键词 胰岛素受体底物1 RNA干扰 ccaat增强子结合蛋白α 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 3T3-L1前脂肪细胞

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CCAAT增强子结合蛋白α与急性髓细胞白血病的发生 被引量：3

9

作者 史庭 叶琇锦 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期552-557,共6页

CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在髓系造血过程中起着重要的调控作用,其基因表达失调是急性髓细胞白血病(AML)发生的重要机制。C/EBPα基因表达失控的结局是p30过表达和p42不完全丧失,两者均促使AML的发生。因此,恢复C/EBPα表达比例,... CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在髓系造血过程中起着重要的调控作用,其基因表达失调是急性髓细胞白血病(AML)发生的重要机制。C/EBPα基因表达失控的结局是p30过表达和p42不完全丧失,两者均促使AML的发生。因此,恢复C/EBPα表达比例,过表达p42或阻断p30致癌通路是治疗此类原因所致AML的重要途径。本文回顾了近年来关于C/EBPα表达失调及其两种蛋白体在AML发病机制中的研究进展。 展开更多

关键词 ccaat增强子结合蛋白α 白血病 髓样 急性 基因表达 突变 综述

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C/EBP α在妊娠期糖尿病大鼠胎肺成熟过程中的作用 被引量：1

10

作者 李金艳 杨根岭 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2018年第3期165-169,共5页

目的:探讨CCAAT/增强结合蛋白α(C/EBP α)在妊娠期糖尿病(GDM)大鼠胎肺成熟过程中的作用。方法:将SD孕鼠随机分为妊娠期糖尿病组(GDM组)和对照组。GDM组给予链脲佐菌素行腹腔注射建立GDM模型,每隔一天检测孕鼠的血糖及体重。于孕21天... 目的:探讨CCAAT/增强结合蛋白α(C/EBP α)在妊娠期糖尿病(GDM)大鼠胎肺成熟过程中的作用。方法:将SD孕鼠随机分为妊娠期糖尿病组(GDM组)和对照组。GDM组给予链脲佐菌素行腹腔注射建立GDM模型,每隔一天检测孕鼠的血糖及体重。于孕21天剖宫产取出胎鼠,记录胎鼠体重、数量及胎仔血糖。HE染色观察胎鼠肺组织病理改变,油红O染色检测胎鼠肺组织中脂质的变化情况,透射电镜观察胎鼠肺组织超微结构改变,免疫组化法检测胎鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)和C/EBP α表达情况,RT-PCR法检测SP-A和C/EBP α mRNA表达。Western blot法检测SP-A和C/EBP α蛋白表达。结果:GDM组孕鼠和胎鼠血糖均显著高于对照组,孕鼠体重、胎鼠体重及胎仔量均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.000)。GDM组胎鼠肺泡数和肺泡面积均显著低于对照组,肺泡间隔大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.000)。GDM组胎鼠肺组织中AECⅡ内的板层小体数明显减少,大量糖原颗粒聚集,细胞表面的微绒毛明显减少。油红O染色见胎鼠肺组织中脂滴数明显减少。SP-A和C/EBP α的mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:GDM胎肺组织中C/EBP α表达降低,抑制了SP-A和脂质生成,阻碍了细胞内糖原转化成脂质。胎肺组织中C/EBP α表达降低可能是GDM胎鼠肺发育延迟的发病机制之一。 展开更多

关键词 ccaat/增强结合蛋白α 妊娠期糖尿病 胎肺成熟

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促进骨质疏松骨髓间充质干细胞向成骨分化药物筛选体系的建立 被引量：1

11

作者 汤贤春 卢虹辰 +1 位作者 胡聪聪 李姣 《江苏医药》 CAS 2019年第3期217-221,F0002,共6页

目的针对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)启动子,建立能在糖皮质激素下促进间充质干细胞成骨分化的药物筛选体系。方法采用PCR法从小鼠基因组中扩增C/EBPα启动子(-1381 bp/+45 bp)序列,连接pGL3-basic载体构建出pGL3-C/EBPα。利用脂... 目的针对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)启动子,建立能在糖皮质激素下促进间充质干细胞成骨分化的药物筛选体系。方法采用PCR法从小鼠基因组中扩增C/EBPα启动子(-1381 bp/+45 bp)序列,连接pGL3-basic载体构建出pGL3-C/EBPα。利用脂质体将pGL3-C/EBPα与内参载体pRL-SV40共转染293T细胞建立筛药体系。利用地塞米松及氯化锂(LiCl)初步验证了筛药体系的有效性,并测试不同剂量淫羊藿苷、补骨脂素及丹参酮ⅡA在地塞米松作用下对C/EBPα启动子的抑制效应。通过ALP活性及茜素红染色检测这3种药物是否能挽救地塞米松抑制的成骨分化。结果成功构建了基于C/EBPα启动子的药物筛选体系。初步检测发现通过测定荧光素酶活性能反映出地塞米松及LiCl对C/EBPα启动子的调控。淫羊藿苷呈浓度依赖性地抑制地塞米松对C/EBPα启动子的激活(P<0.01或P<0.05),丹参酮ⅡA在中、高剂量时才表现出抑制效应(P<0.05),而补骨脂素未能抑制C/EBPα启动子的激活(P>0.05)。成骨分化实验发现,中、高剂量淫羊藿苷能有效挽救地塞米松抑制的成骨分化(P<0.01),中、高剂量丹参酮ⅡA展示出部分缓解效应(P<0.01),而补骨脂素在地塞米松作用下未能促进成骨细胞分化(P>0.05)。结论经体外实验成功建立了一种激素型骨质疏松症药物筛选体系。 展开更多

关键词 激素型骨质疏松症 糖皮质激素 ccaat增强子结合蛋白α 成骨细胞分化

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CCAAT/增强子结合蛋白α抑制人肝癌细胞内的肝刺激因子表达 被引量：1

12

作者 吴媛 董凌月 安威 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期634-639,共6页

目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)对人肝癌细胞内肝刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)表达的影响及其在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)抑制HSS表达过程中的作用。方法... 目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)对人肝癌细胞内肝刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)表达的影响及其在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)抑制HSS表达过程中的作用。方法采用凝胶迁移电泳实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)研究C/EBPα与HSS启动子的体外相互作用,real-time PCR和Western blotting的方法测定hHSS mRNA和蛋白质表达情况。结果 EMSA实验证实C/EBPα可以与hHSS启动子-343/-330区域内的C/EBPα结合位点结合,对hHSS表达具有负性调节作用,C/EBPαsiRNA转染入HepG2细胞后,hHSS mRNA和蛋白质表达均升高。但C/EBPα表达下降并不影响EGF对hHSS表达,而EGF不改变C/EBPα的活性和表达。结论 C/EBPα可通过C/EBP位点抑制hHSS的表达,但不参与EGF对hHSS的转录调节过程。 展开更多

关键词 肝刺激因子 表皮生长因子 ccaat/增强子结合蛋白α

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转化生长因子β1对肾小管上皮细胞C/EBPα及相关核转录因子表达的影响

13

作者 杜云蕾 刘剑 +3 位作者 应霁 戴芹 徐丽梨 王伟铭 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1243-1247,共5页

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),利用T... 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),利用TGF-β1分别在不同质量浓度(5和10 ng/m L)和不同时间点(0、4、12、24 h)刺激HK-2细胞,收集细胞总RNA和蛋白(核蛋白和总蛋白)以及细胞上清液。应用realtime PCR法和Western blotting检测C/EBPα和核转录因子PPARγ以及上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白α-SMA、E-cadherin的表达变化;ELISA方法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平。结果 TGF-β1(5 ng/m L)刺激HK-2细胞24 h后C/EBPα蛋白与PPARγ变化一致,差异均无统计学意义(P>0.05);E-cadherin表达减少。TGF-β1(10 ng/m L)分别刺激0、4、12、24 h后,核蛋白中C/EBPα在12 h时表达明显降低,PPARγ在4 h表达升高。以TGF-β1 10 ng/m L刺激HK-2细胞12 h后,C/EBPα、PPARγ、E-cadherin mRNA分别降低70%、50%和90%(P<0.05)。以10 ng/m L TGF-β1刺激HK-2细胞后,MCP-1在12、24 h时分别升高6倍和10.67倍。结论 C/EBPα参与TGFβ1诱导的肾间质纤维化过程,并且与间质纤维化过程中的炎症反应和EMT过程相关;且在此过程中,与PPARγ相互作用,促进或抑制肾间质纤维化。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 ccaat增强子结合蛋白α 单核细胞趋化蛋白1 过氧化物酶增殖物激活受体Γ

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上调C/EBPα对PAR1激活的HSC-T6细胞的影响

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作者 刘迎春 顾小红 +1 位作者 张云东 段绪伟 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第36期4424-4426,共3页

目的探讨上调CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)对蛋白酶活化受体1(PAR1)激活的肝星状细胞(HSC)活化、增殖和分泌胶原蛋白的影响。方法瞬时转染法转染经PAR1激活的HSC-T6,根据转染质粒的加PAR1活性肽的情况将细胞分为正常组(未做任何处理)... 目的探讨上调CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)对蛋白酶活化受体1(PAR1)激活的肝星状细胞(HSC)活化、增殖和分泌胶原蛋白的影响。方法瞬时转染法转染经PAR1激活的HSC-T6,根据转染质粒的加PAR1活性肽的情况将细胞分为正常组(未做任何处理)、SFLLR组、SFLLR+C/EBPα质粒组、SFLLR+空载体组。蛋白质印迹法(Western-blot)检测转染后24、48hHSC内α平滑肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型前胶原的表达,MTT检测细胞增殖度。结果 SFLLR+C/EBPα质粒组细胞内α-SMA及Ⅰ型前胶原蛋白的表达较其余各组明显减少,细胞增殖度也明显下降,均以转染后48h明显改变(P<0.01)。结论上调C/EBPα的表达在一定程度上可抑制PAR1对HSC-T6的活化、增殖和胶原蛋白的合成。 展开更多

关键词 ccaat增强子结合蛋白α 受体 RAP-1 肝星状细胞

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结肠癌病灶内C/EBPα、FOXC2表达量的研究及其下游靶基因的初步分析

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作者 蔡冰 宫惠琳 《海南医学院学报》 CAS 2017年第21期2990-2993,共4页

目的:研究结肠癌病灶内C/EBPα、FOXC2的表达量并探究其下游靶基因。方法:选择2014年3月~2017年2月期间在陕西省渭南市中心医院手术切除的结肠癌标本,另取距肿瘤病灶边缘5cm以上的癌旁组织标本作为对照。抽提临床标本中的RNA并测定C/EB... 目的:研究结肠癌病灶内C/EBPα、FOXC2的表达量并探究其下游靶基因。方法:选择2014年3月~2017年2月期间在陕西省渭南市中心医院手术切除的结肠癌标本,另取距肿瘤病灶边缘5cm以上的癌旁组织标本作为对照。抽提临床标本中的RNA并测定C/EBPα、FOXC2以及内质网应激分子、上皮间质转化分子的mRNA表达量。结果:结肠癌标本中C/EBPα、Bax、Bak、GRP78、PERK、ATF6的mRNA表达量显著低于癌旁标本,FOXC2、FAK、SphK1、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达量显著高于癌旁标本;C/EBPα高表达的结肠癌标本中Bax、Bak、GRP78、PERK、ATF6的mRNA表达量显著高于C/EBPα低表达的结肠癌标本;FOXC2高表达的结肠癌标本中FAK、SphK1、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达量显著高于FOXC2低表达的结肠癌标本。结论:结肠癌病灶内低表达的C/EBPα和高表达的FOXC2分别能够抑制内质网应激所介导的细胞凋亡、促进上皮间质转化所介导的细胞侵袭。 展开更多

关键词 结肠癌 ccaat/增强子结合蛋白-α 叉头框蛋白C2 内质网应激 上皮间质转化

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大鼠肝再生终止阶段肝细胞CCAAT增强子结合蛋白α mRNA、微小RNA-144-3p和3种环状RNA的表达和作用

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作者 臧夏炎 王子慧 +4 位作者 高寒 郭建林 靳伟 常翠芳 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期909-912,共4页

目的了解大鼠肝再生终止阶段CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)mRNA、miR-144-3p、rnoLOC100365958_0001、rno-Usp3_0010和rno-AC241873_0010调节肝细胞进入G_(1)期的途径和方法。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(PH)模型,按Smedsro... 目的了解大鼠肝再生终止阶段CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)mRNA、miR-144-3p、rnoLOC100365958_0001、rno-Usp3_0010和rno-AC241873_0010调节肝细胞进入G_(1)期的途径和方法。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(PH)模型,按Smedsrod等方法分离肝细胞,用大规模定量分析技术检测大鼠肝再生中肝细胞竞争性内源RNA(ceRNA)表达的变化,用Cytoscape 3.2软件构建ceRNA的相互作用网络,用ceRNA综合分析等方法解析它们表达的相关性和作用相关性。结果PH后6 h和72 h时,CEBPαmRNA的比值为1.12±0.27和2.52±0.15,miR-144-3p为2.97±0.81和0.99±0.36,rno-LOC100365958_0001为0.16±0.05和6.78±0.62,rnoUsp3_0010为0.13±0.01和7.61±0.69,rno-AC241873_0010为0.09±0.02和7.53±0.69。CEBPα促进的G_(1)期相关基因细胞周期蛋白G2(CCNG2)为0.25±0.06和1.10±0.22,抑制的G_(1)期相关基因ETS变异转录因子6(ETV6)为2.22±0.68和0.99±0.27,MAPK14为2.01±0.32和0.85±0.11,信号转导子和转录激活因子3(STAT3)为2.88±0.24和1.08±0.07,肿瘤坏死因子(TNF)为2.29±0.51和0.86±0.51。CEBPα促进的G_(0)期相关基因G_(0)/G_(2)期开关2(G_(0)S2)为0.64±0.08和4.71±0.91,磷脂酶A2-IVA(PLA2G4A)为0.42±0.13和2.83±0.62。结论PH后6 h时,rno-LOC100365958_0001、rno-Usp3_0010、rno-AC241873_0010和miR-144-3p的相互作用加强了后者对CEBPαmRNA的抑制,不利于CEBPα形成,有利于CEBPα抑制的G_(1)期相关基因表达和肝细胞处于G_(1)期。相反,PH后72 h时,CEBPαmRNA上调,有利于CEBPα促进G_(0)期相关基因表达和肝细胞处于G_(0)期。 展开更多

关键词 部分肝切除 肝再生 G_(0)期肝细胞 G_(1)期肝细胞 ccaat增强子结合蛋白α 生物高通量检测 竞争性内源RNA综合分析 大鼠

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C/EBPα基因与PARs在肝星状细胞激活中的作用及关系

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作者 刘迎春 顾小红 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第36期3656-3660,共5页

蛋白酶活化受体家族(protease activated receptors,PARs)可通过MAPK/ERK信号通路激活细胞内部分转录因子,从而参与肝纤维化的形成,是肝纤维化自动放大循环过程中主要炎症和纤维化受体.肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的活化是... 蛋白酶活化受体家族(protease activated receptors,PARs)可通过MAPK/ERK信号通路激活细胞内部分转录因子,从而参与肝纤维化的形成,是肝纤维化自动放大循环过程中主要炎症和纤维化受体.肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的活化是肝纤维化的关键,HSC活化的显著变化是细胞内维生素A和脂滴的减少和消失,而转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在维持脂肪细胞分化中起着重要作用,因此其对肝纤维化形成过程中肝星状细胞的活化具有负性调控作用,上调其表达可以抑制肝星状细胞增殖和活化,并诱导肝星状细胞的凋亡.深入研究PARs与C/EBPα的关系,将有助于对肝纤维化发生机制的理解,从而为抗肝纤维化治疗提供新的理论依据. 展开更多

关键词 ccaat增强子结合蛋白α 蛋白酶活化受体家族 肝纤维化 肝星状细胞

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CCAAT/增强子结合蛋白α基因突变急性髓系白血病患者临床特征及预后 被引量：1

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作者 王露 苏龙 +4 位作者 谭业辉 胡瑞萍 崔久嵬 高素君 李薇 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2015年第5期274-277,286,共5页

目的 分析CCAAT/增强子结合蛋白α（CEBPA）基因突变急性髓系白血病（AML）患者临床特征及预后.方法 回顾分析208例初诊AML患者CEBPA基因突变发生率、临床特征、治疗效果及预后.结果 208患者中,CEBPA突变患者37例（17.8％）,其中29例为... 目的 分析CCAAT/增强子结合蛋白α（CEBPA）基因突变急性髓系白血病（AML）患者临床特征及预后.方法 回顾分析208例初诊AML患者CEBPA基因突变发生率、临床特征、治疗效果及预后.结果 208患者中,CEBPA突变患者37例（17.8％）,其中29例为双突变,8例为单突变.1 17例正常核型患者中CEBPA突变28例（23.9％）.CEBPA双突变患者具有以下临床特征：初诊时年龄小,大部分（82.8％,24/29）患者为M1型与M2型,初诊时表现为外周血白细胞数高、血红蛋白水平高、血小板数低,白血病细胞高表达CD7、CD34及HLA-DR.CEBPA双突变患者总生存率优于无突变者（2年总生存率：100％比75.1％,P=0.045）.结论 CEBPA双突变为AML预后良好标志之一. 展开更多

关键词 白血病 髓样 急性 CEBPA突变 免疫表型 预后

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穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠PPARγ,C/EBPα及脂肪分泌因子表达的影响 被引量：6

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作者 张珊 尹立祥 +3 位作者 王爱迪 宋新龙 张乐 刘宝山 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期126-134,共9页

目的:观察穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠的治疗作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ),CCATT增强子结合蛋白α(CCAAT-enhancer binding proteinα,C/EBPα),脂联素(Adipone... 目的:观察穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠的治疗作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ),CCATT增强子结合蛋白α(CCAAT-enhancer binding proteinα,C/EBPα),脂联素(Adiponectin),瘦素(Leptin)的影响,探究其在骨髓间充质干细胞脂肪化过程中发挥效应的可能机制。方法:BALB/c小鼠随机分为正常组及模型组,模型组小鼠经60Coy照射联合尾静脉输注DBA/2小鼠淋巴细胞混悬液法造模。模型评估成功后,将成模小鼠随机分为6组,分别为模型组,穿龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组(37. 44,74. 88,149. 76 mg·kg-1·d-1),环孢素组(23. 5 mg·kg-1·d-1),雷公藤多苷组(9. 36 mg·kg-1·d-1),相应药物灌胃14 d。干预完成后,检测各组小鼠外周血象并制作骨髓细胞涂片评价骨髓增生情况。采用贴壁法分离培养各组小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)并进行成脂诱导;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠BMMSCs中PPARγ,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠外周血白细胞(white blood cell,WBC),血红蛋白(hemoglobin,HGB),血小板(blood platelet,PLT)明显降低(P <0. 05);与模型组比较,各治疗组小鼠血象均有不同程度回升,以穿龙薯蓣中剂量组最优(P <0. 05)。与正常组比较,模型组小鼠BMMSCs中PPARγ,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA和蛋白表达明显升高(P <0. 05);与模型组比较,各治疗组小鼠上述指标均被不同程度抑制,其中穿龙薯蓣皂苷中剂量组和环孢素组PPARγ,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA和蛋白表达明显下调,优于雷公藤多苷组(P <0. 05)。结论:穿龙薯蓣皂苷能够促进再障小鼠外周血象恢复,改善骨髓造血。穿龙薯蓣皂苷可抑制AA小鼠BMMSCs PPARγ,C/EBPα的表达,减少脂肪细胞分泌的Adiponectin,Leptin,进而有效地抑制BMMSCs向脂� 展开更多

关键词 再生障碍性贫血 穿龙薯蓣皂苷 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARr) CCATT增强子结合蛋白α(C/EBPα) 瘦素 脂联素

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稳定表达转录因子增强子结合蛋白α基因的白血病细胞株的构建及鉴定 被引量：1

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作者 邵会媛 栾材富 +4 位作者 刘杰 张守信 马新衡 张贵丽 孙成铭 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期636-638,641,共4页

目的构建稳定表达转录因子增强子结合蛋白α(CCAAT-enhancer-binding proteinα,C/EBPα)基因的白血病髓性细胞系。方法利用DNA重组技术将C/EBPα基因插入到慢病毒表达载体PLVX-EGFP-3FLAG-Puro中,构建重组慢病毒质粒PLVX-C/EBPα-3FLAG... 目的构建稳定表达转录因子增强子结合蛋白α(CCAAT-enhancer-binding proteinα,C/EBPα)基因的白血病髓性细胞系。方法利用DNA重组技术将C/EBPα基因插入到慢病毒表达载体PLVX-EGFP-3FLAG-Puro中,构建重组慢病毒质粒PLVX-C/EBPα-3FLAG-Puro,与慢病毒包装辅助质粒plp1、plp2、plp/VSVG(1∶1∶1)共转染293细胞,包装出慢病毒,实时荧光定量PCR法检测病毒滴度;收集病毒,分别以10、20 MOI感染K562细胞,G418筛选阳性克隆,利用有限稀释法筛选稳定转染的单克隆细胞株,并采用Western blot法检测C/EBPα蛋白的表达。结果重组慢病毒质粒PLVX-C/EBPα-3FLAG-Puro经菌落PCR及测序鉴定证明构建正确;包装后的慢病毒pSB957的病毒滴度为5×106 TU/ml;pSB957-K562细胞中C/EBPα蛋白的表达水平较高,且20和10 MOI pSB957感染的K562细胞中,C/EBPα蛋白的表达水平无明显差异。结论成功构建了pSB957-K562白血病细胞株,为进一步研究C/EBPα在白血病发生发展中的作用提供了良好的细胞模型。 展开更多

关键词 转录因子增强子结合蛋白α 慢病毒 基因表达

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