bMSC对肾小管上皮细胞的保护作用及其作用机制 被引量：2

1

作者 仙淑丽 刘英莉 +1 位作者 方均燕 张薇 《中华全科医学》 2013年第11期1666-1668,F0003,共4页

目的探讨骨髓间充质干细胞(bMSC)移植对大鼠UUO模型肾小管上皮细胞超微结构的改善作用及其可能的作用机制。方法体外分离培养雄性Wistar大鼠bMSC,体外Brdu标记,将Brdu-bMSC注入同种大鼠体内。45只受体大鼠随机分为3组:假手术对照组(SH组... 目的探讨骨髓间充质干细胞(bMSC)移植对大鼠UUO模型肾小管上皮细胞超微结构的改善作用及其可能的作用机制。方法体外分离培养雄性Wistar大鼠bMSC,体外Brdu标记,将Brdu-bMSC注入同种大鼠体内。45只受体大鼠随机分为3组:假手术对照组(SH组,n=15)、Brdu-bMSC+UUO组(BM组,n=15)、生理盐水+UUO组(NS组,n=15)。分别在3 d、7 d和14 d处死大鼠,取下肾脏组织,电镜观察肾小管上皮细胞微结构变化。采用免疫组织化学方法检测Brdu阳性bMSC。结果电镜下,随着结扎时间延长肾小管上皮细胞微结构破坏逐渐加重,术后3 d、7 d BMSC组肾小管上皮细胞超微结构明显改善;未在大鼠肾脏组织中发现Brdu阳性细胞。结论 bMSC移植可短期内改善肾小管上皮细胞超微结构,对肾小管间质病变起到保护作用,其作用机制可能是通过旁分泌作用。 展开更多

关键词 5-Brdu 骨髓间充质干细胞 单侧输尿管结扎 超微结构

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钛网加强组织工程骨修复下颌骨缺损的实验研究

2

作者 席庆 刘洪臣 步荣发 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2007年第2期127-129,共3页

目的:观察钛网加强的珊瑚/成骨细胞复合体修复下颌骨缺损的情况。方法:在羊下颌骨上造成3．5cm×1．5cm大小的骨缺损,缺损中植入钛网/珊瑚/成骨细胞,并设单纯珊瑚颗粒植入作为对照组。术后4个月取材,观察骨缺损的修复情况。结果:X... 目的:观察钛网加强的珊瑚/成骨细胞复合体修复下颌骨缺损的情况。方法:在羊下颌骨上造成3．5cm×1．5cm大小的骨缺损,缺损中植入钛网/珊瑚/成骨细胞,并设单纯珊瑚颗粒植入作为对照组。术后4个月取材,观察骨缺损的修复情况。结果:X线观察示实验组骨密度增加,大体观察见下颌骨下缘连续性恢复。4个月时,羊下颌骨缺损完全修复,组织学检查见支架中有大量新骨形成,并与钛网相融合。对照组X线检查示透光增加,组织学检查见吸收明显。结论:利用钛网加强的方法可以有效修复下颌骨矩形骨缺损。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 骨组织工程 钛网 下颌骨缺损

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骨髓间充质干细胞干预对高氧肺损伤新生大鼠核转录因子-κB和血小板内皮细胞黏附分子-1表达的影响 被引量：3

3

作者 杨旻 苏浩彬 张红珊 《中国新生儿科杂志》 CAS 2013年第2期122-126,共5页

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)干预治疗新生大鼠高氧肺损伤的作用机制。方法体外分离培养4～6周龄SD大鼠BMSCs。利用携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒液对BMSCs进行转染,3日龄SD新生大鼠高氧暴露7天制备高氧肺损伤模型。建模后干... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)干预治疗新生大鼠高氧肺损伤的作用机制。方法体外分离培养4～6周龄SD大鼠BMSCs。利用携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒液对BMSCs进行转染,3日龄SD新生大鼠高氧暴露7天制备高氧肺损伤模型。建模后干预组经尾静脉注射BMSCs1×105个(0.1ml);对照组经尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)0.1ml。注射后3、7、14天,病理学方法检测大鼠肺组织放射状肺泡计数(RAC),免疫组化法检测核转录因子(NF-κB)、血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)的表达。结果高氧干预组在BMSCs干预7、14天RAC值明显高于高氧对照组[(9.4±0.5)比(7.4±0.4),(12.6±0.5)比(9.6±0.4),P<0.05],干预3、7、14天NF-κB水平明显低于高氧对照组[(10.0±0.5)比(14.5±0.4),(6.0±0.4)比(7.8±0.2),(5.8±0.6)比(7.2±0.2),P<0.05],而PECAM-1水平明显高于高氧对照组[(11.3±0.4)比(10.1±0.3),(12.3±0.8)比(10.0±0.3),(17.2±0.3)比(10.2±0.4),P<0.05];高氧干预组在干预14天NF-κB、PECAM-1水平接近于空气干预组[(5.8±0.6)比(5.6±0.4),(17.2±0.3)比(17.5±0.3),P>0.05]。结论慢病毒转染后BMSCs表达绿色荧光蛋白,适合体内示踪。BMSCs经尾静脉注射可减轻新生大鼠高氧肺损伤,其机制可能与BMSCs抑制NF-κB活化、增加PECAM-1表达有关。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 高氧肺损伤 核转录因子ΚB 血小板内皮细胞粘附分子-1

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Follistatin表达抑制促进BMP-2诱导人类骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究 被引量：2

4

作者 耿家金 程加峰 +2 位作者 赵平 杨名 张永强 《国际骨科学杂志》 2015年第3期224-230,共7页

目的探讨Follistatin表达抑制对人类骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞活性及骨形态发生蛋白(BMP)-2诱导人类BMSC成骨分化的影响。方法采用Follistatin特异性siRNA转染人类BMSC,检测线粒体脱氢酶活性、细胞DNA含量及蛋白含量。采用定量逆转录... 目的探讨Follistatin表达抑制对人类骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞活性及骨形态发生蛋白(BMP)-2诱导人类BMSC成骨分化的影响。方法采用Follistatin特异性siRNA转染人类BMSC,检测线粒体脱氢酶活性、细胞DNA含量及蛋白含量。采用定量逆转录-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测成骨相关基因表达,采用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色检测Follistatin对BMP-2诱导人类BMSC成骨分化的影响。结果转染后3、7 d,人类BMSC代谢、DNA含量显著升高;转染后14 d,总蛋白含量增加。Follistatin表达抑制后成骨相关基因如ALP、OCN、OSX、OC、OPN、RUNX2等表达升高,且ALP活性及钙沉积量显著增加。结论抑制Follistatin表达可促进人类BMSC细胞活性和BMP-2诱导人类BMSC成骨分化能力,Follistatin可抑制人类BMSC成骨分化。 展开更多

关键词 FOLLISTATIN 人类骨髓间充质干细胞 细胞活性 成骨分化

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铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

5

作者 刘伟 朱修良 李清海 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期179-184,共6页

旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GF... 旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性。DNA测序结果表明,p Lenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功。包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功。Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带。细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长。成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响。 展开更多

关键词 Fth1 磁共振报告基因 慢病毒载体 大鼠骨髓间充质干细胞

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大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞 被引量：12

6

作者 王海萍 张雷 李秀华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期70-74,共5页

目的采用骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导为心肌样细胞,为干细胞移植治疗心衰提供一种新的细胞材料。方法取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,分别用终浓度为5、10、15、20μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化... 目的采用骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导为心肌样细胞,为干细胞移植治疗心衰提供一种新的细胞材料。方法取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,分别用终浓度为5、10、15、20μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测结蛋白(desmin),α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)、心肌特异性肌钙蛋白(C-TnT)的表达,透射电镜鉴定。在诱导后7d、21d和28d,3个时间点以半定量RT-PCR方法检测细胞心肌早期转录因子GATA4和心肌特异性肌凝蛋白重链αMHC的表达。结果MSCs体外经5-aza诱导后分化的细胞desmin、α-sarcomericactin、C-TnT均表达阳性,5μmol/L组阳性表达较高,透射电镜下可见到平行排列的肌丝。RT-PCR结果显示,GATA4于诱导后7d弱表达,21d表达增强,28d表达减弱。αMHC在诱导后7d不表达,2ld弱表达,28d表达明显。结论骨髓间充质干细胞能够在体外被诱导分化为心肌样细胞,是自体心肌细胞一种良好的供体来源。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌细胞 激光扫描共焦显微镜 大鼠

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转染人血管内皮生长因子165基因的骨髓间充质干细胞移植改善兔心肌梗死后心功能 被引量：5

7

作者 盛小刚 宋卉 +2 位作者 冯建章 陈秋雄 吴书林 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2006年第8期669-672,共4页

目的探讨将骨髓间充质干细胞移植和血管内皮生长因子基因治疗相结合治疗兔心肌梗死的疗效及其机制。方法将48只新西兰大白兔随机分为心肌梗死组、骨髓间充质干细胞移植组、血管内皮生长因子组和骨髓间充质干细胞+血管内皮生长因子组。... 目的探讨将骨髓间充质干细胞移植和血管内皮生长因子基因治疗相结合治疗兔心肌梗死的疗效及其机制。方法将48只新西兰大白兔随机分为心肌梗死组、骨髓间充质干细胞移植组、血管内皮生长因子组和骨髓间充质干细胞+血管内皮生长因子组。建立兔心肌梗死模型,在心肌梗死后2周取107个骨髓间充质干细胞移植至梗死区。移植后4周测定心功能,梗死区骨髓间充质干细胞进行鉴定及计数,进行Ⅷ因子免疫组织化学染色。结果血流动力学比较发现,骨髓间充质干细胞+血管内皮生长因子组各项参数明显优于骨髓间充质干细胞组;心肌梗死区BrdU阳性细胞数骨髓间充质干细胞+血管内皮生长因子组明显多于骨髓间充质干细胞组(61.24±8.51个/视野比44.21±7.68个/视野,P<0.01);梗死区血管的数量骨髓间充质干细胞+血管内皮生长因子组(48.75±7.96个/视野)明显多于骨髓间充质干细胞组(33.08±6.12个/视野,P<0.01)、血管内皮生长因子组(29.98±8.04个/视野,P<0.01)和心肌梗死组(18.32±3.88个/视野,P<0.01)。结论转染血管内皮生长因子基因的骨髓间充质干细胞移植可改善兔心肌梗死后的心功能,其疗效明显优于单纯骨髓间充质干细胞移植及血管内皮生长因子基因治疗,可能是通过增加骨髓间充质干细胞的存活及改善梗死区的血供而起作用的。 展开更多

关键词 内科学 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子 心功能 基因治疗 兔

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维拉帕米在电磁场刺激骨髓间充质干细胞增殖与分化过程中的作用 被引量：5

8

作者 刘伟军 吴华 +3 位作者 葛保健 赵文春 任凯 钱红 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期83-85,共3页

目的研究在50Hz、0.8mT的电磁场条件下,维拉帕米(verapamil)对骨髓间充质干细胞增殖与分化的作用,以推断Ca2+在此过程中的作用及其内流变化情况。方法体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,取第4代细胞,应用工频电磁场及维拉帕米干预,用四甲... 目的研究在50Hz、0.8mT的电磁场条件下,维拉帕米(verapamil)对骨髓间充质干细胞增殖与分化的作用,以推断Ca2+在此过程中的作用及其内流变化情况。方法体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,取第4代细胞,应用工频电磁场及维拉帕米干预,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测其增殖活性,按照碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒说明书步骤检测ALP活性,并用改良Gomori钙钴法染色定性观察。结果50Hz、0.8mT的电磁场对骨髓间充质干细胞具有明显的促增殖(P<0.01)、抑分化(P<0.01)作用,但在加入维拉帕米后,这种增殖效应消失而抑分化效应减弱(P<0.01)。结论在50Hz、0.8mT的电磁场作用下,骨髓间充质干细胞Ca2+内流发生变化,且该变化在骨髓间充质干细胞向成骨方向分化过程中起部分抑制作用,而在促其增殖的过程中起主要作用。 展开更多

关键词 电磁场 维拉帕米 碱性磷酸酶 骨髓间充质干细胞

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基质细胞衍生因子-1/骨形成发生蛋白-2壳聚糖缓释微体促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量：5

9

作者 金捷 周少怀 +3 位作者 卞峰 方红育 范明宇 郑剑 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1424-1427,共4页

目的 制备基质细胞衍生因子-1（SDF-1）/骨形成发生蛋白-2（BMP-2）壳聚糖缓释体,联合体外分离培养的兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）,探讨其作为组织工程支架材料修复骨缺损的可行性。方法 体外分离培养兔BMSCs,观察不同代次细胞的生长情... 目的 制备基质细胞衍生因子-1（SDF-1）/骨形成发生蛋白-2（BMP-2）壳聚糖缓释体,联合体外分离培养的兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）,探讨其作为组织工程支架材料修复骨缺损的可行性。方法 体外分离培养兔BMSCs,观察不同代次细胞的生长情况,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测绘制生长曲线,用流式细胞术检测其干细胞表面标志CD44、CD90的表达,体外诱导成软骨分化,甲苯胺蓝染色鉴定,Transwell法检测SDF-1对兔BMSCs的趋化作用,用冷冻干燥及乳化交联法制备SDF-1/BMP-2壳聚糖缓释体,扫描电镜观察缓释体性状,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测其细胞因子缓释作用,接种兔BMSCs,检测缓释体对兔BMSCs增殖及成骨分化的影响,比较成骨相关指标碱性磷酸酶（ALP）、骨桥蛋白（OPN）、I型胶原等蛋白的分泌差异。结果 密度梯度离心法联合差速贴壁法可获得高纯度、增殖能力强并具有分化潜能的兔BMSCs,第3代兔BMSCs CD44表达率为（86.3±6.5）%,CD90表达率为（73.50±4.85）%,SDF-1可趋化兔BMSCs向壳聚糖缓释体迁移,并促进其黏附生长,SDF-1/BMP-2复合壳聚糖支架构成缓释体可促进兔BMSCs成骨及其相关蛋白分泌增加。结论 SDF-1/BMP-2壳聚糖缓释体可作为理想的组织工程骨修复材料。 展开更多

关键词 兔 骨髓间充质干细胞 基质细胞衍生因子-1 骨形成发生蛋白-2 壳聚糖 成骨

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5-氮杂胞嘧啶核苷诱导小鼠骨髓间充质干细胞凋亡 被引量：3

10

作者 武俊芳 吴艳芳 +4 位作者 李晓鹏 张芬熙 林俊堂 高利洁 崔柳苏 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期1337-1339,共3页

目的研究5-氮杂胞嘧啶核苷（5-AZA）对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）凋亡的影响。方法从小鼠股骨和胫骨骨髓中分离BMSCs；利用免疫荧光染色检测间充质干细胞特异性标记分子CD44和CD90在BMSCs上的表达；应用0、10和20μmol／L的5-AZA体... 目的研究5-氮杂胞嘧啶核苷（5-AZA）对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）凋亡的影响。方法从小鼠股骨和胫骨骨髓中分离BMSCs；利用免疫荧光染色检测间充质干细胞特异性标记分子CD44和CD90在BMSCs上的表达；应用0、10和20μmol／L的5-AZA体外诱导培养BMSCs48h，应用4′，6-二眯基-2-苯基吲哚（DAPI）染色和荧光标记的半胱天冬酶抑制剂（FLICA）凋亡试剂盒检测5-AZA处理后细胞的凋亡率；应用Westernblot检测凋亡相关蛋白AnnexinV和Caspase-3在处理后的细胞表达水平。结果实验中，BMSCs阳性表达间充质干细胞特异性标记蛋白CD44和CD90。DAPI染色和Caspase-3染色均显示10和20μmol／L5-AZA可增加BMSC的凋亡率；对照组、10μmol／L组5-AZA和20μmol／L5-AZA组DAPI染色阳性凋亡率分别为（21．086±2．601）％、（34．467±3．724）％和（46．512±3．864）％，Caspase-3染色阳性凋亡率分别为（5．354±0．735）％、（15．4624-2．385）％和（28．190±4．190）％，组间比较差异均有统计学意义（P均＜0．01）。Westernblot检测显示AnnexinV和Caspase-3在5-AZA处理后表达均显著增高；对照组、10μmok／L组5-AZA和20μmol／L5-AZA组AnnexinV相对表达水平分别为（26．612±2．184）％、（42．873±4．313）％和（50．056±4．457）％，Caspase-3的相对表达水平分别为（19．231±2．683）％、（38．618±5．385）％和（91．235±7．116）％，组间比较差异均有统计学意义（P均＜0．01）。结论常规剂量的5-AZA可诱导BMSCs凋亡。 展开更多

关键词 5-氮杂胞嘧啶核苷 骨髓间充质干细胞 细胞凋亡 CASPASE-3表达

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利用骨髓间充质干细胞膜片原位构建“三明治”样组织工程牙周膜的实验研究 被引量：2

11

作者 徐海春 王伟 徐晓东 《中国医疗美容》 2016年第7期78-81,共4页

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片与胶原膜构建的"三明治"样结构植入体内后牙周膜的再生情况。方法制备BMSCs细胞膜片,与胶原膜构建夹层结构复合于牙根表面,植入原位生长,分别于4w和12w取材,利用X片、HE和天狼星红染色观... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片与胶原膜构建的"三明治"样结构植入体内后牙周膜的再生情况。方法制备BMSCs细胞膜片,与胶原膜构建夹层结构复合于牙根表面,植入原位生长,分别于4w和12w取材,利用X片、HE和天狼星红染色观察牙周膜的再生情况。结果相比单纯胶原膜组和空白对照组,实验组在牙根与牙槽骨间形成了清晰的软组织间隙,且有类Sharpey’s纤维存在,即形成了功能性牙周膜。结论细胞膜片-胶原膜-细胞膜片的"三明治"样夹层结构可以较好地促进牙周膜再生。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 细胞膜片 牙周膜再生

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体外培养组织工程用人骨髓间充质干细胞的试验性研究 被引量：1

12

作者 王进 丁义 +1 位作者 肖锋 陈鸿义 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1761-1766,共6页

目的本研究对人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)进行基本生物学特性研究,并探讨以微载体培养技术进行大量增殖的可能性。方法对成人骨髓血用Percoll淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,以获取hB-MMSCs。原代和传代培养后描绘细胞增长曲线。以流... 目的本研究对人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)进行基本生物学特性研究,并探讨以微载体培养技术进行大量增殖的可能性。方法对成人骨髓血用Percoll淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,以获取hB-MMSCs。原代和传代培养后描绘细胞增长曲线。以流式细胞术对所获取的hBMMSCs进行细胞表型鉴定。以Cytodex3微载体对hBMMSCs进行动态培养,并与无微载体培养的细胞进行数量对比。结果以Percoll淋巴细胞分离液可成功地对人骨髓血进行间充质干细胞的分离,原代和传代培养后细胞生长良好。以流式细胞术对hBMMSCs进行表型鉴定,其中CD29、CD44、CD73、CD105和CD147呈阳性表达,阳性率高于96%;CD71、CD90的阳性率为86.74%和71.01%;而CD14、CD34、CD38、CD45和HLA-DR呈阴性表达,且大多低于2%。以Cytodex3微载体进行动态培养时,hBMMSCs能够在微载体上迅速贴附、铺展并生长。在相同的时间点,当hBMMSCs在微载体表面长满时,细胞数目均显著多于无微载体的培养方法(P<0.001),其细胞密度和培养速度至少是普通培养法的4.5～9.6倍。Cytodex3上细胞数目的大量增长大约在第8天后进入平台期。结论应用Percoll淋巴细胞分离液能便捷地将hBMMSCs从人骨髓血中分离提取出来,对细胞活性影响小,并可以流式细胞术快速有效地鉴定其表面标记物。已获取的hBMMSCs的纯度较高,而且表型也较均一。与普通培养相比较,Cytodex3微载体培养体系可以在相同时间内获取大量的hBMMSCs,便于进一步开展在心血管外科领域的组织工程学应用。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 流式细胞术 微载体 组织工程

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左卡尼汀提高大鼠心肌梗死后移植骨髓间充质干细胞的存活和作用 被引量：2

13

作者 李培蕾 林明 许昌声 《中国心血管病研究》 CAS 2010年第3期222-225,共4页

目的探讨左卡尼汀（LC）是否能提高心肌梗死后移植骨髓间充质干细胞（MSCs）的存活率，从而提高其疗效。方法60只大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、LC组、MSCs组和左卡尼汀联合骨髓间充质干细胞（LC＋MSCs）组。4周后检测心功能、MSC... 目的探讨左卡尼汀（LC）是否能提高心肌梗死后移植骨髓间充质干细胞（MSCs）的存活率，从而提高其疗效。方法60只大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、LC组、MSCs组和左卡尼汀联合骨髓间充质干细胞（LC＋MSCs）组。4周后检测心功能、MSCs存活情况和梗死区心肌纤维化水平。结果4周后，与MSCs组比较，LC＋MSCs组MSCs的存活、左室心功能、心肌纤维化均改善（P〈0．05）。结论LC联合MSCs使用可提高MSCs的存活率，更好地改善心肌梗死后的心功能和心肌纤维化。 展开更多

关键词 心肌梗死 左卡尼汀 骨髓间充质干细胞 细胞移植

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婴幼儿骨髓间充质干细胞体外培养及基本生物学特性的实验研究

14

作者 邢万红 徐志伟 +2 位作者 陆兆辉 董新寨 席虎玉 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期144-148,共5页

目的建立一种体外分离和培养婴幼儿骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,并探讨其基本生物学特性。方法麻醉、无菌条件下行胸骨穿刺抽取先天性心脏病婴幼儿骨髓3mL^5mL,经密度梯度离心获得单个核细胞(Per... 目的建立一种体外分离和培养婴幼儿骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,并探讨其基本生物学特性。方法麻醉、无菌条件下行胸骨穿刺抽取先天性心脏病婴幼儿骨髓3mL^5mL,经密度梯度离心获得单个核细胞(Percoll分离液,γ为1.073),接种入含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液,测定其生长曲线,流式细胞仪检测婴幼儿BMSCs表面标记,并观察其形态、贴壁率、集落形成能力和超微结构的变化。结果培养的婴幼儿BMSCs 3h^4h后开始贴壁,贴壁率为65%~80%;2d^3d可见集落形成;10d左右汇合90%以上。BMSCs随着传代次数增加集落形成率逐渐降低。培养期间细胞形态均一,基本上为梭形成纤维细胞样形态。婴幼儿BMSCs表面标记CD29、CD44、CD71、CD90表达阳性,CD3、CD14、CD34、CD45、HLA-DR不表达。透射电镜观察,婴幼儿BMSCs具有BMSCs典型的超微结构。结论成功地建立了一种体外分离培养先天性心脏病婴幼儿BMSCs的方法,获得的细胞形态均一,生长稳定,增殖较快,能为体外构建组织工程化先天性心脏病修复材料提供重要的种子细胞的来源。 展开更多

关键词 婴幼儿 骨髓间充质干细胞 细胞培养 增殖

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大鼠骨髓干细胞种植于豚鼠脱细胞动脉移植后局部IgG和补体C3沉积研究

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作者 王更富 周冬冬 +6 位作者 张新中 曹淑娥 刘伟 崔玉 韩培立 张杰 付庆林 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1631-1634,共4页

目的探讨大鼠骨髓干细胞种植于豚鼠脱细胞血管支架方法构建组织工程血管的免疫原性。方法选取健康纯系雄性SD大鼠80只，体质量200～250g，随机分为4组，皮下包埋不同移植物：骨髓干细胞种植组（A组，种植大鼠骨髓干细胞的脱细胞豚鼠血管... 目的探讨大鼠骨髓干细胞种植于豚鼠脱细胞血管支架方法构建组织工程血管的免疫原性。方法选取健康纯系雄性SD大鼠80只，体质量200～250g，随机分为4组，皮下包埋不同移植物：骨髓干细胞种植组（A组，种植大鼠骨髓干细胞的脱细胞豚鼠血管，n=20）、单纯脱细胞组（B组，单纯脱细胞的豚鼠血管，n=20）、新鲜异种血管组（C组，新鲜豚鼠血管，n=20）、假手术组（D组，不包埋任何标本，n=20）。术后第3、7、15、30、60天每组处死4只大鼠，获取大鼠血清并取出移植物。苏木素-伊红（HE）染色观察豚鼠血管脱细胞处理效果及移植物表面炎性反应强度，免疫组织化学方法检测移植物表面抗豚鼠血管IgG和补体C3沉积。结果（1）HE染色显示每组移植物中均可见明显炎性细胞浸润，A组及B组的炎症浸润程度明显低于C组。（2）免疫组织化学法检测：各组移植物表面有明显的抗豚鼠血管IgG沉积。术后3d各组平均吸光度（IA）值差异无统计学意义（A组0．1506±0．0394，B组0．1632±0．0340，C组0．1668±0．0510，P〉0．05）。术后7、15、30、60dC组平均似值（0．2157±0．0452、0．2563±0．0442、0．2752±0．0579、0．2545±0．0466）高于A组（0．1633±0．0388、0．1787±0．0532、0．1692±0．0406、0．1633±0．0282）、B组（0．1555±0．0348、0．1740±0．0364、0．1698±0．0330、0．1621±0．0349，P〈0．05）。术后各时间点A组较B组均差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）免疫组织化学法检测显示移植物表面有明显的大鼠补体c3沉积。术后3、7、15d各组平均M值差异无统计学意义（A组0．1304±0．0313、0．1552±0．0425；B组0．1316±0．0254、0．1535±0．0396：C组0．1671±0．0422、0．1766±0．0493，P〉0．05）。术后30、60dC组平均M值（0．2401±0．0706、0．2674±0．0788、0．2044±0．0494）高于A组（0．1612±0．0358、0．1597±0� 展开更多

关键词 骨髓干细胞 组织工程血管 免疫原性 IGG

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活血健脾补肾法对MSC移植在结肠炎大鼠肠道增殖分化的影响

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作者 张永锋 杨晋 +3 位作者 吴正治 张莉 胡银清 杨敏 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第4期876-878,共3页

目的:探讨中医活血健脾补肾法对骨髓间充质干细胞(MSC)移植在结肠炎大鼠肠道增殖分化的影响。方法:雌性SD大鼠以5%2、4、6,三硝基苯磺酸(TNBs)诱导形成结肠炎模型,造模后随机分为模型对照组、MSC移植组、活血组、健脾组、补肾组,第2天... 目的:探讨中医活血健脾补肾法对骨髓间充质干细胞(MSC)移植在结肠炎大鼠肠道增殖分化的影响。方法:雌性SD大鼠以5%2、4、6,三硝基苯磺酸(TNBs)诱导形成结肠炎模型,造模后随机分为模型对照组、MSC移植组、活血组、健脾组、补肾组,第2天将体外分离培养的雄性SD大鼠MSC经尾静脉注射到各组雌性大鼠体内。疗程结束后,取大鼠结肠组织,免疫组化法检测其肠道干细胞标记物Musashi-1、端粒酶逆转录酶(TERT)的表达。结果:免疫组化检测到MSC移植组及中药治疗各组大鼠结肠黏膜组织Musashi-1及TERT均有阳性表达,其中活血组与MSC移植组比较差异有显著性意义。结论:活血法代表方药桃红四物汤较明显促进MSC在结肠炎大鼠肠道增殖分化。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 骨髓间充质干细胞 移植 中医药疗法

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ADAM17-shRNA转染的骨髓间充质干细胞对裸鼠乳腺癌移植瘤生长的影响 被引量：6

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作者 贾文婷 蔡准 +3 位作者 张雪鹏 张笑博 孙影 张云鹏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1088-1092,共5页

目的:探讨转染解聚素-金属蛋白酶17-shRNA(a disintegrin and metalloprotease 17-shRNA,ADAM17-shRNA)的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenehymal stem cells,BMMSC)对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的抑制效果。方法:全骨髓贴壁法分离... 目的:探讨转染解聚素-金属蛋白酶17-shRNA(a disintegrin and metalloprotease 17-shRNA,ADAM17-shRNA)的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenehymal stem cells,BMMSC)对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的抑制效果。方法:全骨髓贴壁法分离并培养3周雄性SD大鼠的BMMSC,利用慢病毒介导的ADAM17-shRNA转染BMMSC。30只裸鼠建立MCF-7乳腺癌移植瘤模型,种植肿瘤细胞14 d后建模成功。按照数字表法随机分成对照组(注射等量PBS)、BMMSC组(注射1×10~6/ml BMMSC)和转染组(注射1×10~6/ml转染ADAM17-shRNA的BMMSC),每组10只。在种植细胞第15天开始经尾静脉注射BMMSC进行抑瘤实验(0.1 ml/只,每3 d给药1次,共计5次),观察裸小鼠移植瘤的生长情况;抑瘤实验16 d后处死裸鼠。利用Real-time PCR法检测移植瘤组织ADAM17 mRNA表达,Western blotting法检测移植瘤组织ADAM17蛋白表达。结果:抑瘤实验16 d时,对照组、BMMSC组移植瘤体积明显高于转染组[(787.15±25.95)、(767.02±28.98)vs(361.89±19.75)mm^3,均P<0.01];BMMSC组、转染组抑瘤率明显高于对照组(2.57%、53.89%vs 0.00%,均P<0.05)。对照组、BMMSC组ADAM17 mRNA的表达水平明显高于转染组(1.00±0.01、0.97±0.08 vs 0.30±0.09,均P<0.05);对照组、BMMSC组ADAM17蛋白表达水平明显高于转染组(0.70±0.09、0.68±0.02 vs 0.45±0.05,均P<0.05)。结论:ADAM17-shRNA通过BMMSC介导可将ADAM17靶向归巢至裸鼠乳腺癌移植瘤并发挥抑瘤作用。 展开更多

关键词 解聚素-金属蛋白酶17-sh RNA 乳腺癌 MCF-7细胞 骨髓间充质干细胞

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骨髓间充质干细胞与聚(对苯二甲酸丁二醇酯-CO-聚乙二醇-CO-低聚乳酸)三元共聚酯的生物相容性的初步研究

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作者 邓君 孙翔 崔苏萍 《江西医药》 CAS 2016年第4期315-318,共4页

目的探讨骨髓间充质干细胞与聚(对苯二甲酸丁二醇酯-CO-聚乙二醇-CO-低聚乳酸)三元共聚酯的生物相容性。方法取清洁级雄性健康BSL-C57小鼠作为实验对象,通过分离培养获得小鼠BMSCs,并进行流式细胞仪鉴定表面标志物。BMSCs培养至3代后,将... 目的探讨骨髓间充质干细胞与聚(对苯二甲酸丁二醇酯-CO-聚乙二醇-CO-低聚乳酸)三元共聚酯的生物相容性。方法取清洁级雄性健康BSL-C57小鼠作为实验对象,通过分离培养获得小鼠BMSCs,并进行流式细胞仪鉴定表面标志物。BMSCs培养至3代后,将BMSCs与PBTEOLA三元共聚酯制成的生物材料薄膜共培养,96h后固定进行电镜扫描,并用DAPI荧光染料染色处理,在荧光显微镜下观察并进行细胞计数。结果 BMSCs流式细胞术鉴定:CD34、CD45阴性,CD90弱阳性,CD73阳性。扫描电镜下,PBTEOLA三元共聚酯材料与BMSCs共培养形成的细胞支架,其表面细胞数量多,细胞状态正常。荧光显微镜下,对其细胞支架表面的细胞进行计数,显示表面细胞有逐渐增多的趋势。结论 PBTEOLA三元共聚酯材料与BMSCs共培养制成的细胞支架表面有细胞存活及增殖,由于PBTEOLA三元共聚酯材料本身具有良好的生物组织相容性及可降解等性质,所以该新型高分子材料可以作为干细胞治疗多种疾病的支架材料之一。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 干细胞治疗 细胞支架 聚(对苯二甲酸丁二醇酯-CO-聚乙二醇-CO-低聚乳酸)

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