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水果香气物质分析及合成途径研究进展 被引量:45
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作者 程焕 陈健乐 +3 位作者 周晓舟 陈荣荣 刘东红 叶兴乾 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期211-218,共8页
香气是评价水果及相关加工产品品质的重要依据之一。本文综述了近几年国内外对水果香气成分的研究进展。主要介绍了水果中香气物质的种类(酯类、醇类、醛类、酮类、内酯类、萜烯类及含硫化合物等),常见水果的特征香气成分,水果中香气物... 香气是评价水果及相关加工产品品质的重要依据之一。本文综述了近几年国内外对水果香气成分的研究进展。主要介绍了水果中香气物质的种类(酯类、醇类、醛类、酮类、内酯类、萜烯类及含硫化合物等),常见水果的特征香气成分,水果中香气物质的提取和检测技术,香气物质生物合成途径(脂肪酸代谢途径、氨基酸代谢途径和萜类化合物生物合成途径等)及相关酶的生理功能等。最后对水果香气的研究前景进行展望,为今后水果香气的深入研究提供理论基础。 展开更多
关键词 水果 香气 固相微萃取 气相色谱-嗅觉测量法 香气活性值 生物合成途径
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植物多胺代谢途径研究进展 被引量:32
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作者 刘颖 王莹 +2 位作者 龙萃 张志毅 庞晓明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期147-155,共9页
多胺是一类小分子生物活性物质,广泛存在于生物体内,与植物的生长发育、衰老及抗逆性都有着密切的联系。目前,在植物中的多胺合成途径已经基本揭示,其生理作用在分子水平上逐步得到阐明。对多胺合成突变体和各种转基因植物的研究也使得... 多胺是一类小分子生物活性物质,广泛存在于生物体内,与植物的生长发育、衰老及抗逆性都有着密切的联系。目前,在植物中的多胺合成途径已经基本揭示,其生理作用在分子水平上逐步得到阐明。对多胺合成突变体和各种转基因植物的研究也使得人们更深入地了解了多胺以及其合成代谢相关酶在植物生长发育等生理过程中的重要作用。以下概述了植物多胺代谢途径,重点综述了代谢途径中各基因的功能及遗传操作的最新进展,并对将来的研究方向尤其是相关基因在植物抗逆境(包括生物和非生物逆境)基因工程方面的应用作了讨论。 展开更多
关键词 多胺 代谢途径 生物合成途径 抗病性 亚精胺合成酶
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柑橘籽中柠檬苦素及类似物的生物活性研究进展 被引量:27
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作者 晏敏 周宇 +2 位作者 贺肖寒 梅明鑫 董全 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期290-296,共7页
柠檬苦素类化合物是一类含有呋喃环并且高度氧化的四环三萜类植物次生代谢产物,具有显著的抗癌、抗病毒、抗氧化、抗微生物、昆虫拒食、抗炎镇痛和防治动脉粥样硬化等多种生物活性。柠檬苦素类化合物主要存在于芸香科和楝科植物中,在柑... 柠檬苦素类化合物是一类含有呋喃环并且高度氧化的四环三萜类植物次生代谢产物,具有显著的抗癌、抗病毒、抗氧化、抗微生物、昆虫拒食、抗炎镇痛和防治动脉粥样硬化等多种生物活性。柠檬苦素类化合物主要存在于芸香科和楝科植物中,在柑橘籽中的含量尤为丰富。该文综述了柑橘籽中柠檬苦素类化合物的种类、结构及其生物合成途径以及近年来国内外对柠檬苦素及类似物的生物活性的研究进展,并对其在食品工业、农业、医药和畜牧业中的应用等方面进行了概述。 展开更多
关键词 柠檬苦素类化合物 柑橘籽 生物合成途径 生物活性
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石斛碱的研究进展 被引量:26
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作者 王亚芸 任建武 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 2015年第1期152-158,共7页
石斛是一种常用的名贵中药材,我国石斛药材植物来源众多。石斛有效成分的研究,对有效利用石斛资源具有重要意义。文中主要综述了石斛中有效成分石斛碱的组成结构、作用功效以及生物合成途径的研究进展。
关键词 石斛碱 合成途径 研究进展
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天然类胡萝卜素生物合成与生物技术应用 被引量:22
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作者 王伟杰 徐昌杰 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第6期839-843,共5页
类胡萝卜素是重要天然食用色素族群之一,它不仅可为食品添色,还具有较高营养保健价值。类胡萝卜素广泛存在于高等植物、藻类、少数微生物和部分动物体内,但不同生物在合成途径细节及所积累的类胡萝卜素种类方面存在较大的差异。通过优... 类胡萝卜素是重要天然食用色素族群之一,它不仅可为食品添色,还具有较高营养保健价值。类胡萝卜素广泛存在于高等植物、藻类、少数微生物和部分动物体内,但不同生物在合成途径细节及所积累的类胡萝卜素种类方面存在较大的差异。通过优化培养条件、转基因和水解酶辅助提取等生物技术手段提高了类胡萝卜素产量,降低了生产成本,从而使天然类胡萝卜素制品得到更广泛的应用。 展开更多
关键词 天然食用色素 类胡萝卜素 天然来源 生物合成 生物技术
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植物甾醇及其衍生物的生物合成途径研究进展 被引量:20
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作者 赵曼 孔珂昕 +3 位作者 薛露 张成玉 周迎 颜晓晖 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期5884-5898,共15页
植物甾醇是一类在植物中广泛存在的、具有环戊烷多氢菲骨架的甾体类化合物,是植物细胞膜的重要组成部分。植物甾醇在植物体内以游离形式和共轭形式存在,游离甾醇是植物细胞膜的重要结构成分,可维持细胞膜流动性、调节其立体结构,共轭甾... 植物甾醇是一类在植物中广泛存在的、具有环戊烷多氢菲骨架的甾体类化合物,是植物细胞膜的重要组成部分。植物甾醇在植物体内以游离形式和共轭形式存在,游离甾醇是植物细胞膜的重要结构成分,可维持细胞膜流动性、调节其立体结构,共轭甾醇则在植物的生长发育及应激反应中发挥重要作用。植物甾醇的生物合成过程非常复杂,可分为环阿屯醇的合成、4-甲基-24-亚甲基胆甾-7-烯醇的合成及菜油甾醇、β-谷甾醇、豆甾醇的合成3个阶段,涉及近30步反应,受角鲨烯合酶、甾醇侧链还原酶等多种酶的调控。总结了植物甾醇及其部分衍生物生物合成途径的研究进展,以期为利用合成生物学技术创建这类重要植物天然产物的人工生物合成体系提供参考。 展开更多
关键词 植物甾醇 生物合成途径 乙酰辅酶A 环阿屯醇 菜油甾醇 Β-谷甾醇 豆甾醇 油菜素内酯 芸苔素内酯 合成生物学
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类胡萝卜素生物合成的调控因素及其对光合作用的影响 被引量:14
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作者 周莉 刘莉 《天津农业科学》 CAS 2011年第5期5-8,共4页
综述了调控类胡萝卜素生物合成途径的主要因素,从除草剂的作用机理上揭示了类胡萝卜素对光合作用的影响,对两者的联系有了更清晰和深入的认识。
关键词 类胡萝卜素 光合作用 合成途径 调控
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阿朴菲类生物碱研究进展 被引量:14
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作者 辛爱一 柳军玺 邸多隆 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期712-724,共13页
阿朴菲类生物碱是异喹啉类生物碱中的一类,具有广泛的生理学活性,目前这类天然产物及其衍生物是发现治疗多种疾病药物的先导化合物和研究热点。通过对国内外文献调研,从自然界植物资源分布、生源合成途径、天然有机合成方法、药理活性... 阿朴菲类生物碱是异喹啉类生物碱中的一类,具有广泛的生理学活性,目前这类天然产物及其衍生物是发现治疗多种疾病药物的先导化合物和研究热点。通过对国内外文献调研,从自然界植物资源分布、生源合成途径、天然有机合成方法、药理活性等方面的研究进展进行综述,为阿朴菲类生物碱的进一步研究和深层次开发提供参考依据。 展开更多
关键词 阿朴菲类生物碱 植物资源分布 生源合成 天然有机合成 异喹啉生物碱
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内源性大麻素—生物合成、信号转导及生物降解 被引量:13
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作者 唐双奇 陆阳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1037-1041,共5页
大麻素系统由内源性大麻素、大麻素受体和内源性大麻素失活系统三部分组成,该系统失衡与多种中枢神经系统和免疫系统疾病有关。内源性大麻素水平是衡量大麻素系统活性的主要指标。内源性大麻素代谢途径的深入研究对揭示大麻素系统生理... 大麻素系统由内源性大麻素、大麻素受体和内源性大麻素失活系统三部分组成,该系统失衡与多种中枢神经系统和免疫系统疾病有关。内源性大麻素水平是衡量大麻素系统活性的主要指标。内源性大麻素代谢途径的深入研究对揭示大麻素系统生理、病理作用以及设计基于该系统的新型治疗药物至关重要。该文综述内源性大麻素的生物合成、信号转导及其降解过程。 展开更多
关键词 大麻素系统 N-花生四烯酰乙醇胺 2-花生四烯酰甘油酯 生物合成途径 信号转导 降解途径
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Transcriptomic analysis in Anemone flaccida rhizomes reveals ancillary pathway for triterpene saponins biosynthesis and differential responsiveness to phytohormones 被引量:7
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作者 MO Guo-Yan HUANG Fang +6 位作者 FANG Yin HAN Lin-Tao Kayla K.Pennerman BU Li-Jing DU Xiao-Wei Joan W.Bennett YIN Guo-Hua 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2019年第2期131-144,共14页
Anemone flaccida Fr. Schmidt is a perennial medicinal herb that contains pentacyclic triterpenoid saponins as the major bioactive constituents. In China, the rhizomes are used as treatments for a variety of ailments i... Anemone flaccida Fr. Schmidt is a perennial medicinal herb that contains pentacyclic triterpenoid saponins as the major bioactive constituents. In China, the rhizomes are used as treatments for a variety of ailments including arthritis. However, yields of the saponins are low, and little is known about the plant's genetic background or phytohormonal responsiveness. Using one-quarter of the 454 pyrosequencing information from the Roche GS FLX Titanium platform, we performed a transcriptomic analysis to identify 157 genes putatively encoding 26 enzymes involved in the synthesis of the bioactive compounds. It was revealed that there are two biosynthetic pathways of triterpene saponins in A. flaccida. One pathway depends on β-amyrin synthase and is similar to that found in other plants. The second, subsidiary("backburner") pathway is catalyzed by camelliol C synthase and yields β-amyrin as minor byproduct. Both pathways used cytochrome P450-dependent monooxygenases(CYPs) and family 1 uridine diphosphate glycosyltransferases(UGTs) to modify the triterpenoid backbone. The expression of CYPs and UGTs were quite different in roots treated with the phytohormones methyl jasmonate, salicylic acid and indole-3-acetic acid. This study provides the first large-scale transcriptional dataset for the biosynthetic pathways of triterpene saponins and their phytohormonal responsiveness in the genus Anemone. 展开更多
关键词 ANEMONE flaccida Fr.Schmidt TRITERPENOID SAPONINS biosynthetic pathways Transcriptomic analysis Phytohormonal RESPONSIVENESS
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门冬胰岛素与生物合成人胰岛素治疗妊娠期糖尿病有效性及安全性的Meta分析 被引量:8
11
作者 史金平 黄哲 +1 位作者 李静 梁昕 《中国药物与临床》 CAS 2022年第4期317-325,共9页
目的采用Meta分析方法评价门冬胰岛素与生物合成人胰岛素治疗妊娠期糖尿病的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane图书馆临床对照试验数据、Embase数据库、中国知网数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、维普期... 目的采用Meta分析方法评价门冬胰岛素与生物合成人胰岛素治疗妊娠期糖尿病的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane图书馆临床对照试验数据、Embase数据库、中国知网数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、维普期刊全文数据库(VIP)、万方数据库自建库开始至2021年7月15日关于门冬胰岛素与生物合成人胰岛素治疗妊娠期糖尿病的随机对照试验文献,由2名评价者独立评价纳入研究的方法学质量,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果检索数据库获得778篇文献,最终纳入41篇文献,包含3952例患者。Meta分析结果显示:在有效性方面,门冬胰岛素治疗组在降低空腹血糖[(MD)=-0.69,95%CI(-0.94,-0.45),P<0.01]、餐后血糖[MD=-1.02,95%CI(-1.26,-0.78),P<0.01]、糖化血红蛋白[MD=-0.86,95%CI(-1.09,-0.63),P<0.01]方面疗效优于生物合成人胰岛素,差异存在统计学意义;在安全性方面,门冬胰岛素治疗组产妇不良结局发生率[MD=0.37,95%CI(0.28,0.48),P<0.01]、胎儿不良结局发生率[MD=0.39,95%CI(0.31,0.48),P<0.01]均低于生物合成人胰岛素,差异有统计学意义。结论门冬胰岛素治疗妊娠期糖尿病时,其有效性与安全性均优于生物合成人胰岛素。 展开更多
关键词 胰岛素 生物合成途径 糖尿病 妊娠 META分析
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2-(2-苯乙基)色酮类化合物的生物活性及其生物合成研究进展 被引量:8
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作者 肖梦君 高志晖 魏建和 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期1909-1918,共10页
2-(2-苯乙基)色酮类化合物仅分布在少数植物中,具有神经保护、抗菌和抗炎等多种生物活性,是沉香的特征性成分和主要活性成分,具有广阔的药用前景和应用价值。笔者对2-(2-苯乙基)色酮类化合物的神经保护活性、抗肿瘤细胞毒活性、抗菌活... 2-(2-苯乙基)色酮类化合物仅分布在少数植物中,具有神经保护、抗菌和抗炎等多种生物活性,是沉香的特征性成分和主要活性成分,具有广阔的药用前景和应用价值。笔者对2-(2-苯乙基)色酮类化合物的神经保护活性、抗肿瘤细胞毒活性、抗菌活性和抗炎活性等生物活性、构效关系及生物合成途径的研究现状进行综述和展望,以期为筛选药用2-(2-苯乙基)色酮类化合物和对其生物合成途径的解析提供参考,并指出了目前生物合成研究中存在的问题。 展开更多
关键词 2-(2-苯乙基)色酮类化合物 生物活性 生物合成途径
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萝芙木属植物药理活性和单萜吲哚生物碱合成途径研究进展 被引量:8
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作者 陈晓英 郭晓云 +4 位作者 李翠 李莹 姚绍嫦 张占江 蓝祖栽 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期2004-2012,共9页
萝芙木属植物中的蛇根木是印度传统草药,目前萝芙木属植物成为中国常用南药,主要用于治疗高血压、精神类疾病、心血管疾病、癌症等。对国产萝芙木属植物资源种类及分布、药理活性、萝芙木单萜吲哚生物碱的合成途径等研究进展进行综述,... 萝芙木属植物中的蛇根木是印度传统草药,目前萝芙木属植物成为中国常用南药,主要用于治疗高血压、精神类疾病、心血管疾病、癌症等。对国产萝芙木属植物资源种类及分布、药理活性、萝芙木单萜吲哚生物碱的合成途径等研究进展进行综述,为萝芙木属植物的研究和临床应用提供参考。 展开更多
关键词 萝芙木属 蛇根木 单萜吲哚生物碱 生物合成途径 关键酶
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Connexin:a potential novel target for protecting the central nervous system? 被引量:6
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作者 Hong-yan Xie Yu Cui +1 位作者 Fang Deng Jia-chun Feng 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期659-666,共8页
Connexin subunits are proteins that form gap junction channels, and play an important role in communication between adjacent cells. This review article discusses the function of connexins/hemichannels/gap junctions un... Connexin subunits are proteins that form gap junction channels, and play an important role in communication between adjacent cells. This review article discusses the function of connexins/hemichannels/gap junctions under physiological conditions, and summarizes the findings re-garding the role of connexins/hemichannels/gap junctions in the physiological and pathological mechanisms underlying central nervous system diseases such as brain ischemia, traumatic brain and spinal cord injury, epilepsy, brain and spinal cord tumor, migraine, neuroautoimmune disease, Alzheimer’s disease, Parkinson’s disease, X-linked Charcot-Marie-Tooth disease, Peli-zaeus-Merzbacher-like disease, spastic paraplegia and maxillofacial dysplasia. Connexins are considered to be a potential novel target for protecting the central nervous system. 展开更多
关键词 CONNEXIN gap junction biosynthetic pathways BIODEGRADATION BRAIN central nervous system diseases
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药用植物质量标志物多糖生物合成通路及关键酶研究进展 被引量:7
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作者 李晓岗 张雪 +6 位作者 俞捷 王希付 代红洋 陈嘉伟 许均博 曹冠华 贺森 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期4752-4762,共11页
多糖是众多药用植物中重要的质量标志物,在免疫调节、抗肿瘤等方面具有显著的药理作用。多糖是一类结构复杂、种类繁多、组合多样的生物大分子,其生物合成通路主要包括蔗糖转化、尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖至其... 多糖是众多药用植物中重要的质量标志物,在免疫调节、抗肿瘤等方面具有显著的药理作用。多糖是一类结构复杂、种类繁多、组合多样的生物大分子,其生物合成通路主要包括蔗糖转化、尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖至其他NDP单糖的转化、多糖聚合3个部分。在这一合成过程中涉及的关键酶主要包括蔗糖合成酶(sucrose synthase,SUS)、果糖-6磷酸酯在蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase,SPS)、蔗糖由转化酶(invertase,INV)、己糖激酶(hexokinase,HK)、果糖激酶(fructokinase,FRK)、UDP-葡萄糖脱氢酶(UGDH)、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)、UDP-鼠李糖合成酶(UDP-rhamnose synthase,RHM)、磷酸甘露糖突变酶(phosphomannose isomerase,PMM)、GDP-甘露糖焦磷酸化酶(GDP-mannose pyrophosphorylase,GMPP)、糖基转移酶(glycosyl transferases,GTs)等。选取以多糖为主要质量标志物的药用植物为探讨对象,对其多糖生物合成通路、关键酶作用机制及单糖组成进行归纳分析,并对研究中存在的问题和可能的解决思路进行了梳理和展望。对明确药用植物质量标志物多糖生物合成通路,了解关键酶作用机制具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 药用植物 多糖 生物合成通路 蔗糖合成酶 蔗糖磷酸合成酶 转化酶 己糖激酶 果糖激酶 UDP-葡萄糖脱氢酶 UDP-葡萄糖焦磷酸化酶 UDP-葡萄糖-4 6-脱氢酶 磷酸甘露糖异构酶 GDP-甘露糖焦磷酸化酶 糖基转移酶
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高等植物维生素C合成途径主要参与基因研究进展 被引量:7
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作者 安华明 刘卫 +1 位作者 杨曼 张书轩 《山地农业生物学报》 2015年第6期9-14,19,共7页
近年来高等植物维生素C合成的四条途径或支路已基本明确,涉及的大多数基因也基本清楚。本文就该四条合成途径中涉及的主要参与基因(酶)及其研究进展进行了综述。
关键词 维生素C 生物合成途径 关键基因
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长春花密码子使用偏好性分析 被引量:6
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作者 李滢 匡雪君 +2 位作者 朱孝轩 朱英杰 孙超 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期4165-4168,共4页
以长春花为研究对象,分析其密码子使用偏好性,以期为相关基因的异源表达、基因的预测、物种的进化研究提供指导。该研究以长春花的30 437条蛋白质编码序列为数据来源,对长春花密码子组成和密码子偏性的各项参数进行了计算和统计分析。... 以长春花为研究对象,分析其密码子使用偏好性,以期为相关基因的异源表达、基因的预测、物种的进化研究提供指导。该研究以长春花的30 437条蛋白质编码序列为数据来源,对长春花密码子组成和密码子偏性的各项参数进行了计算和统计分析。计算了长春花萜类吲哚生物碱(terpenoid indole alkaloids,TIAs)生物合成途径中25个关键酶基因含有大肠杆菌或酿酒酵母稀有密码子的比例。结果显示,长春花基因的平均GC量为42.47%,密码子第3位碱基平均GC量为35.89%。长春花中共有28个密码子的同义密码子相对使用度(relative synonymous codon usage,RSCU)大于1,其中26个以A或T结尾。25个关键酶基因含有大肠杆菌稀有密码子的比例明显高于酿酒酵母稀有密码子的比例。长春花主要偏爱使用以A和T结尾的密码子;相比于酿酒酵母,其密码子使用特点与大肠杆菌的差异更大,推测酿酒酵母可能是长春花基因更合适的异源表达宿主。 展开更多
关键词 长春花 基因组 密码子偏好性 萜类吲哚生物碱 生物合成途径
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少动鞘氨醇单胞菌合成结冷胶研究进展 被引量:2
18
作者 郑丽圆 李宛莹 +3 位作者 喻林兵 夏永军 艾连中 熊智强 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期298-303,共6页
结冷胶是少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)产生的一种细菌胞外多糖,耐热、耐酸性良好,具有优越的凝胶性能,广泛应用于食品、医药和化工等领域。通过代谢调控可使结冷胶改性并提高产量,但目前关于结冷胶在生物合成和代谢调... 结冷胶是少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)产生的一种细菌胞外多糖,耐热、耐酸性良好,具有优越的凝胶性能,广泛应用于食品、医药和化工等领域。通过代谢调控可使结冷胶改性并提高产量,但目前关于结冷胶在生物合成和代谢调控方面的研究较少。该文结合近年来国内外结冷胶研究现状,总结了少动鞘氨醇单胞菌产结冷胶的生物合成途径及其代谢调控,期望为结冷胶生产菌株改造提供理论依据。 展开更多
关键词 结冷胶 少动鞘氨醇单胞菌 生物合成途径 代谢调控
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微生物发酵产阿卡波糖的研究进展 被引量:5
19
作者 彭卫福 程新 李昆太 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-5,共5页
阿卡波糖系由游动放线菌产生的C7N-氨基环醇类假性四糖物质,可与α-葡萄糖苷酶发生竞争性抑制作用而被广泛应用于Ⅱ型糖尿病的治疗,以达到降低糖尿病患者餐后高血糖的目的。本文对阿卡波糖的生物合成途径及其发酵工艺控制等方面的研究... 阿卡波糖系由游动放线菌产生的C7N-氨基环醇类假性四糖物质,可与α-葡萄糖苷酶发生竞争性抑制作用而被广泛应用于Ⅱ型糖尿病的治疗,以达到降低糖尿病患者餐后高血糖的目的。本文对阿卡波糖的生物合成途径及其发酵工艺控制等方面的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 游动放线菌 阿卡波糖 生物合成 发酵工艺
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大肠杆菌生物合成中心代谢途径的改造及其对工程菌色氨酸产量的影响 被引量:4
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作者 王静 于金龙 +3 位作者 张婷 郭长江 徐琪寿 黄英武 《中国医药生物技术》 CSCD 2008年第2期93-97,共5页
目的改造大肠杆菌色氨酸生物合成的中心代谢途径,以进一步提高色氨酸产量。方法根据ppsA和tktA基因序列分别合成引物行PCR扩增,将PCR扩增所得PLacO1-tktA-T1片段和pZA31质粒连接,经筛选鉴定正确的pZA31-tktA重组质粒和PCR扩增所得PLacO1... 目的改造大肠杆菌色氨酸生物合成的中心代谢途径,以进一步提高色氨酸产量。方法根据ppsA和tktA基因序列分别合成引物行PCR扩增,将PCR扩增所得PLacO1-tktA-T1片段和pZA31质粒连接,经筛选鉴定正确的pZA31-tktA重组质粒和PCR扩增所得PLacO1-ppsA-T1片段连接,构建pZA31-ppsA-tktA重组质粒,并进行测序鉴定。将鉴定正确的pZA31-ppsA-tktA和pZE12-aroGfbr-trpEDfbr重组质粒共转化至E.coliMG1655ΔRT-R,获得的重组菌株命名为E.coliMG1655ΔRT-R[pZA31-ppsA-tktA/pZE12-aroGfbr-trpEDfbr](工程菌);以pZE12-aroGfbr-trpEDfbr重组质粒转化至E.coliMG1655ΔRT-R得到的重组菌株E.coliMG1655ΔRT-R[pZE12-aroGfbr-trpEDfbr]作为对照菌株,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,3h后收集部分菌体行ppsA、tktA酶活性测定,其余发酵液继续培养4~5h后,监测调整培养基中葡萄糖浓度和pH值保持不变,48h后检测色氨酸产量。结果PCR扩增所得片段均与预期DNA表达片段大小一致;pZA31-ppsA-tktA重组质粒测序显示,克隆的tktA和ppsA基因序列与报告序列完全相同。工程菌ppsA和tktA酶活性(U)与对照菌株比较,分别提高了3和3.5倍(分别为0.25±0.04vs.0.08±0.02,P<0.05;0.21±0.03vs.0.06±0.02,P<0.05);色氨酸产量(g/L)与对照菌株比较,提高了1.3倍(1.10±0.05vs.0.80±0.05,P<0.05)。结论成功改造了大肠杆菌色氨酸生物合成的中心代谢途径,进一步提高了色氨酸产量,为构建高产色氨酸基因工程菌打下了基础。 展开更多
关键词 色氨酸 生物合成途径 大肠杆菌 基因表达调控 细菌
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