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CKIP-1基因过表达慢病毒载体的构建及其在人前列腺增生细胞系BPH-1细胞中的表达 被引量：2
1
作者 王礼鑫 褚明亮 +2 位作者 尹丹 曹颖 官志忠 《甘肃医药》 2017年第7期534-536,共3页
目的:构建酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(CKIP-1)基因慢病毒过表达载体,检测其在人前列腺增生细胞系BPH-1中的表达。方法:用In-Fusion技术将CKIP-1基因亚克隆到真核细胞表达载体(p Lenti CMV Puro Empty)。限制性内切酶对载体进行酶切并回... 目的:构建酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(CKIP-1)基因慢病毒过表达载体,检测其在人前列腺增生细胞系BPH-1中的表达。方法:用In-Fusion技术将CKIP-1基因亚克隆到真核细胞表达载体(p Lenti CMV Puro Empty)。限制性内切酶对载体进行酶切并回收线性载体片段,PCR扩增CKIP-1基因,In-Fusion技术进行融合得到p Lenti CMV-CKIP-1。将构建成功的过表达质粒和慢病毒的两种辅助包装质粒PMD2G、PAPSX2共转染239T细胞,Western blot检测BPH-1细胞中CKIP-1蛋白的表达。结果:测序结果和Western blot检测均证明CKIP-1过表达慢病毒质粒构建成功,且在BPH-1细胞系中成功过表达。结论:成功构建了过表达CKIP-1基因的慢病毒质粒,且筛选到过表达CKIP-1的BPH-1稳转细胞系,为后续的实验奠定基础。 展开更多
关键词 酪蛋白激酶2 人前列腺增生细胞 In-Fusion技术 慢病毒载体
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全人源抗前列腺癌ScFv抗体的筛选及生物学特性研究 被引量：1
2
作者 郑桂喜 王传新 +4 位作者 张欣 李伟 杜鲁涛 李娟 刘慧 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第11期34-38,共5页
目的从已成功建立的前列腺癌噬菌体抗体库中筛选抗人前列腺癌单链抗体(ScFv),并分析其生物学特性。方法以良性前列腺增生(BPH)细胞与噬菌体抗体库共孵育,去除抗体库中能够与BPH细胞结合的噬菌体抗体,再以前列腺癌细胞系DU145与去除非特... 目的从已成功建立的前列腺癌噬菌体抗体库中筛选抗人前列腺癌单链抗体(ScFv),并分析其生物学特性。方法以良性前列腺增生(BPH)细胞与噬菌体抗体库共孵育,去除抗体库中能够与BPH细胞结合的噬菌体抗体,再以前列腺癌细胞系DU145与去除非特异性结合后的噬菌体抗体库共孵育,通过"吸附-洗脱-扩增"对前列腺癌的噬菌体抗体库进行3轮的富集。采用流式细胞术筛选出对人前列腺癌细胞系DU145高亲合力的阳性克隆。阳性噬菌体克隆经亚克隆并转染大肠杆菌TG1,表达出可溶性ScFv抗体。采用流式细胞术、免疫荧光法分析其生物学特性。结果以前列腺癌细胞系DU145为抗原,筛选出19个噬菌体抗体,经测定C11与DU145细胞亲合力最高,亚克隆至原核表达载体表达纯化为C11 ScFv抗体。流式细胞术和免疫荧光法检测结果均显示,C11ScFv抗体与前列腺癌细胞DU145和PC3结合,与BPH细胞不结合。结论通过噬菌体展示技术筛选到前列腺癌细胞系高亲合力的可溶性ScFv抗体,为进一步研究抗体的靶向性治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体展示技术 前列腺肿瘤 ScFv抗体 BPH细胞 DU145细胞 PC3细胞
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补骨脂素和保列治治疗良性前列腺增生的对比研究 被引量：4
3
作者 李秀玉 姚良权 聂陆安 《国际医药卫生导报》 2005年第12期73-74,共2页
目的观察补骨脂素和保列治治疗良性前列腺增生的疗效观察,探讨良性前列腺增生的中药有效治疗药物。方法将30只SD大鼠随机均分为三组,去势7天后皮下注射丙酸睾酮5mg/kg,同时实验组灌胃给予补骨脂素40mg/kg,保列治0.1mg/kg·d,对照组... 目的观察补骨脂素和保列治治疗良性前列腺增生的疗效观察,探讨良性前列腺增生的中药有效治疗药物。方法将30只SD大鼠随机均分为三组,去势7天后皮下注射丙酸睾酮5mg/kg,同时实验组灌胃给予补骨脂素40mg/kg,保列治0.1mg/kg·d,对照组给予等量蒸馏水,30天后处死,称取前列腺湿重、计算前列腺湿重,光镜观察前列腺组织病理学改变。结果补骨脂素组和保列治组大鼠前列腺湿重均显著低于对照组(P<0.05),光镜观察前列腺组织萎缩,管径增大,补骨脂素组和保列治组大鼠前列腺湿重无显著性差异(P<0.05)。结论补骨脂素能显著抑制模型大鼠的良性前列腺增生,其机制可能是通过降低前列腺细胞增殖而实现的。 展开更多
关键词 补骨脂素 保列治 良性前列腺增生
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前列腺癌与良性前列腺增生细胞株差异核基质蛋白的鉴定 被引量：3
4
作者 孙铁成 辛玲 +6 位作者 宋黎明 周越 宁丽峰 韩丽媛 郭颖 于和鸣 王慧萍 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第7期583-589,共7页
目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对... 目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对差异表达的蛋白质点行MALDI-TOF-MS/MS质谱分析,数据库搜索并鉴定。结果:成功获得了分辨率高、重复性好的不同细胞株NMPs双向凝胶电泳图谱;初步鉴定出包含酶、调节蛋白、RNA结合蛋白及各种因子在内的12个差异表达的蛋白质,在癌细胞株中3个NMPs表达上调,9个下调。结论:人前列腺癌细胞与良性前列腺增生细胞之间NMPs表达存在明显差异;初步筛选出12个差异NMPs,其表达水平及功能与疾病的联系需进一步研究。 展开更多
关键词 前列腺癌雄激素依赖性LNCaP细胞株 前列腺癌雄激素非依赖性PC-3细胞株 良性前列腺增生 BPH-1细胞株 核基质蛋白
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克癃胶囊对大鼠前列腺增生及组织Ki-67、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子mRNA表达的影响 被引量：3
5
作者 颜苗 樊新荣 +1 位作者 何清湖 龚慧 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期436-441,共6页
目的探讨克癃胶囊对肾虚血瘀证大鼠前列腺增生的影响及其对前列腺增生相关蛋白、相关细胞因子的影响。方法建立前列腺增生肾虚血瘀证大鼠模型,观察空白对照组(A组),模型组(B组),非那雄胺组(C组),低、中、高剂量克癃给药组(D、E、F组)大... 目的探讨克癃胶囊对肾虚血瘀证大鼠前列腺增生的影响及其对前列腺增生相关蛋白、相关细胞因子的影响。方法建立前列腺增生肾虚血瘀证大鼠模型,观察空白对照组(A组),模型组(B组),非那雄胺组(C组),低、中、高剂量克癃给药组(D、E、F组)大鼠前列腺和前列腺相关因子的变化。结果①C～F组大鼠前列腺湿重、前列腺指数均显著低于B组(P<0.05)。②与B组比较,C、E、F组前列腺组织中Ki-67的积分光密度明显降低(P<0.01),D组无显著性差异(P>0.05)。③与B组比较,C、D、E、F组前列腺组织中碱性成纤维细胞生长因子的积分光密度明显降低(P<0.01);但D、E、F组前列腺组织中碱性成纤维细胞生长因子的积分光密度均高于C组(P<0.05)。④与B组比较,C、D、E、F组前列腺组织中血管内皮生长因子mRNA的表达降低(P<0.05);但D、E、F组前列腺组织中血管内皮生长因子mRNA的表达均较C组为高(P<0.05)。结论克癃胶囊可显著抑制大鼠前列腺增生,且呈剂量依赖性。可能与抑制前列腺增生相关蛋白及相关细胞因子的增高及表达密切相关,从而起到抑制前列腺增生的作用。 展开更多
关键词 克癃胶囊 前列腺增生 肾虚血瘀证 前列腺增生相关细胞因子
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