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Argonaute蛋白家族在RNAi中的作用 被引量:6
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作者 邹扬 汤华 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期55-57,共3页
RNA干扰是一种双链RNA诱导的基因沉默现象。Argonaute蛋白组成了一个高度保守的家族,该蛋白家族包括许多成员,它们组成了RNA诱导的沉默复合体的核心元件,是RNA干扰所必须的。Argo-naute蛋白选择性地与miRNA和siRNA结合,并与Dicer酶相互... RNA干扰是一种双链RNA诱导的基因沉默现象。Argonaute蛋白组成了一个高度保守的家族,该蛋白家族包括许多成员,它们组成了RNA诱导的沉默复合体的核心元件,是RNA干扰所必须的。Argo-naute蛋白选择性地与miRNA和siRNA结合,并与Dicer酶相互作用,其PIWI盒子与Dicer的RNaseⅢ结构域直接相互作用,PIWI与Dicer之间的相互作用可能会促进miRNA/siRNA的释放。Argonaute蛋白很可能是RNA干扰中核酸内切酶活性的执行者。 展开更多
关键词 RNA干扰 argonaute蛋白 PIWI结构域
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piR-3127964经PIWIL-3/载唾液酸蛋白途径调控滋养细胞侵袭力的机制
2
作者 康翼 袁雨 +2 位作者 林俐 谭彬 漆洪波 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期305-314,共10页
目的研究子痫前期与非病理妊娠胎盘组织之间差异表达的piR-3127964调控滋养细胞侵袭力的分子机制。方法收集2020年11月至2021年8月于重庆医科大学附属第一医院产科就诊的非病理性早产(对照组,n=12)与子痫前期孕妇(子痫前期组,n=10)经剖... 目的研究子痫前期与非病理妊娠胎盘组织之间差异表达的piR-3127964调控滋养细胞侵袭力的分子机制。方法收集2020年11月至2021年8月于重庆医科大学附属第一医院产科就诊的非病理性早产(对照组,n=12)与子痫前期孕妇(子痫前期组,n=10)经剖宫产分娩的胎盘以及早孕期人工流产者的绒毛组织(早孕期人工流产组,n=10)。提取对照组和子痫前期组胎盘组织的总RNA进行测序,利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测piR-3127964在各类组织中的相对表达量。利用蛋白质印迹法检测3组中PIWIL-1、PIWIL-2和PIWIL-3的表达量。外源性调节HTR-8/SVneo细胞内piR-3127964的水平,通过qRT-PCR检测下游候选靶分子,即鸟嘌呤核苷酸结合蛋白样3-样蛋白(guanine nucleotide-binding protein-like 3-like,GNL3L)和载唾液酸蛋白(sialophorin,SPN)mRNA的相对表达量,利用qRT-PCR检测GNL3L和SPN mRNA在对照组和子痫前期组胎盘组织中的相对表达量。进一步通过双荧光素酶报告基因试验验证上述两者与piR-3127964的相互作用。通过荧光原位杂交和免疫荧光结合的方式明确piR-3127964和SPN在早孕期人工流产组绒毛组织中的定位。通过Transwell细胞侵袭实验探究piR-3127964对HTR-8/SVneo细胞侵袭能力的影响和潜在机制。采用独立样本t检验及单因素方差分析及LSD事后检验对数据进行统计学分析。结果(1)差异表达的piR-3127964预测的下游靶基因的富集通路与细胞运动相关;piR-3127964在早孕期人工流产组绒毛、对照组和子痫前期组胎盘组织中差异有统计学意义(分别为2.950±0.853、1.036±0.303与0.254±0.155,F=27.35,P<0.05);且piR-3127964定位于早孕期人工流产组绒毛的绒毛外滋养细胞(extravillous cytotrophoblasts,EVTs)中。(2)子痫前期组胎盘组织中PIWIL-3蛋白表达量明显低于对照组胎盘组织和早孕期人工流产组绒毛组织(0.810±0.400与3. 展开更多
关键词 子痫前期 RNA 小分子干扰 argonaute蛋白质类 Leukosialin RNA结合蛋白质类
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Argonaute蛋白与心血管疾病关系的研究进展
3
作者 赵欣 陈修寰 杨波 《医学综述》 CAS 2023年第4期625-629,共5页
Argonaute(AGO)蛋白是一种高度保守的蛋白,可与小分子RNA构成RNA诱导沉默复合物(RISC),而RISC可靶向与小分子RNAs互补的靶信使RNA,并通过RNA降解、翻译抑制或染色质修饰等途径调控基因表达,从而参与生理病理过程。既往关于AGO蛋白的研... Argonaute(AGO)蛋白是一种高度保守的蛋白,可与小分子RNA构成RNA诱导沉默复合物(RISC),而RISC可靶向与小分子RNAs互补的靶信使RNA,并通过RNA降解、翻译抑制或染色质修饰等途径调控基因表达,从而参与生理病理过程。既往关于AGO蛋白的研究主要集中于其在肿瘤疾病发生发展中的作用,近年则着重于AGO蛋白的组织分布特点、复合体结合能力和靶向沉默基因的能力在糖尿病心肌病、心力衰竭、心房颤动等心血管疾病(CVD)发生发展中的作用。AGO蛋白在CVD中的作用机制已成为目前研究的热点,深入探究其具体的分子调节机制有望为CVD的诊疗提供新靶点。 展开更多
关键词 心血管疾病 argonaute蛋白 RNA诱导沉默复合物
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PIWI蛋白与结肠癌预后的相关性 被引量:1
4
作者 沈晓莹 刘燕霞 +3 位作者 陈慧 朱诗樟 钟晓怡 郜恒骏 《胃肠病学》 2013年第9期530-535,共6页
背景:PIWI蛋白为人类Argonaute蛋白家族的重要成员,与多种恶性肿瘤的发生、发展和预后相关。本课题组前期研究证实PIWIL1、PIWIL3、PIWIL4与结肠癌的发生、发展显著相关。目的:在前期研究的基础上进一步探讨PIWI蛋白与结肠癌预后的相关... 背景:PIWI蛋白为人类Argonaute蛋白家族的重要成员,与多种恶性肿瘤的发生、发展和预后相关。本课题组前期研究证实PIWIL1、PIWIL3、PIWIL4与结肠癌的发生、发展显著相关。目的:在前期研究的基础上进一步探讨PIWI蛋白与结肠癌预后的相关性。方法:选择183例附有随访信息的结肠癌病例,按癌组织与癌旁组织配对制成组织芯片,以免疫组化方法检测PIWIL1、PIWIL2、PIWIL3、PIWIL4表达。采用Spearman秩相关系数分析PIWI蛋白表达与结肠癌临床病理指标间的相关性;Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验以及Cox比例风险模型分析PIWI蛋白表达与结肠癌预后间的相关性。结果:PIWIL1-4在结肠癌组织胞质中的表达均显著高于癌旁组织(P=0.000),且与肿瘤T分期呈正相关(P<0.01)。生存分析显示癌组织PIWIL1低表达者总生存期显著长于高表达者(P=0.036),但PIWIL1并非结肠癌预后的独立相关因素。结论:PIWI蛋白参与了结肠癌的发生、发展过程,PIWIL1有望作为结肠癌预后的重要分子标记物。 展开更多
关键词 argonaute蛋白质类 PIWIL1 结肠肿瘤 预后 组织芯片 免疫组织化学 存活率分析
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siRNA诱导基因沉默复合物(RISC)的研究 被引量:2
5
作者 崔世权 侯敢 黄迪南 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期2799-2803,共5页
自RNA干扰现象发现以来,科研人员对RNA干扰的作用机制进行了深入的研究,可简单描述为dsRNA被Dicer酶切割成小分子siRNA,siRNA由RLC呈递,Hsp90/Hsp70协助装载入Ago蛋白,形成pre-RISC。装载后的siRNA解链,正义链被降解,pre-RISC活化为成熟... 自RNA干扰现象发现以来,科研人员对RNA干扰的作用机制进行了深入的研究,可简单描述为dsRNA被Dicer酶切割成小分子siRNA,siRNA由RLC呈递,Hsp90/Hsp70协助装载入Ago蛋白,形成pre-RISC。装载后的siRNA解链,正义链被降解,pre-RISC活化为成熟的RISC,由反义链引导其靶向降解目的RNA。本综述对近年来RISC的组装,活化过程及其重要组分的结构功能的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 RNA诱导基因沉默复合物 SIRNA RNA干扰 Ago蛋白
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Argonaute蛋白在植物逆境胁迫响应中的功能
6
作者 蒲伟军 谭冰兰 朱莉 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期17-26,共10页
Argonaute(AGO)蛋白是生物体中普遍存在的一类相对分子质量较大(约105)、成员数量众多的蛋白,该家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等结构域组成。AGOs通过与不同的sRNA形成复合体参与植物生长发育、形态建成、细胞增... Argonaute(AGO)蛋白是生物体中普遍存在的一类相对分子质量较大(约105)、成员数量众多的蛋白,该家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等结构域组成。AGOs通过与不同的sRNA形成复合体参与植物生长发育、形态建成、细胞增殖凋亡、病毒防御、逆境响应等多种生物过程。综述了植物AGO家族的结构特点、分类、作用模式及其生物学功能,尤其在逆境胁迫响应中的功能,分析了存在的问题,并对发展趋势进行展望,旨在为今后深入研究植物AGO功能提供理论参考。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 SRNA 胁迫响应 生物学功能
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RNA诱导沉默复合体中的生物大分子及其装配 被引量:13
7
作者 宋雪梅 燕飞 杜立新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期761-766,共6页
在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作... 在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作用方式,以及阐明整个RNAi过程的作用机制。研究表明,RISC中的Dicer具有RNaseIII结构域,在RNAi的起始阶段负责催化siRNA的产生,在RISC装配过程中起稳定RISC中间体结构和功能的作用;Argonaute蛋白是RISC中的核心蛋白,有PAZ和PIWI两个主要的结构域,前者为siRNA的传递提供结合位点,后者是RISC中的酶切割活性中心;siRNA是RISC完成特异性切割作用的向导,在成熟的RISC中虽然只包含siRNA的一条链,但siRNA在RISC形成过程中的双链结构是保证RNAi效应的决定因素。尽管RISC中还存在其他一些功能未知的蛋白质,但在RISC组分结构及功能研究方面取得的进展为建立一个可能的RISC装配模型提供了理论基础。 展开更多
关键词 RNA诱导沉默复合体 装配 DICER argonaute蛋白 R2D2
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兔抗人PIWIL4蛋白多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:6
8
作者 王迎昕 郜恒骏 +1 位作者 陈锡美 孟逊 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期83-85,89,共4页
目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL4多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL4多克隆... 目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL4多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL4多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行PIWIL4的免疫组化研究。结果通过构建PIWIL4多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,我们制备了兔抗人PIWIL4蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人PIWIL4抗体可特异性识别PIWIL4多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在BU部分正常组织和肿瘤组织中呈阳性染色。结论本项研究成功制备兔抗人PIWIL4多克隆抗体,为进一步研究PIWIL4在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 多克隆抗体 组织芯片
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微小RNA调控靶基因作用机制的研究进展 被引量:4
9
作者 高宁 李龙江 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第1期35-37,共3页
微小RNA是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA。研究发现微小RNA的功能涉及多种生物学过程,与肿瘤的发生、发展和多种疾病密切相关。本文就微小RNA形成过程及对靶基因调控机制的研究进展作一综述。
关键词 微小RNA RNA诱导沉默复合体 argonaute蛋白 基因调控 P小体
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RNAi及沉默通路调控研究进展 被引量:4
10
作者 邓清华 刘国文 +8 位作者 付世新 刘磊 王晓旭 朱晓岩 王建国 白鸽 王振全 李小兵 王哲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第1期92-95,共4页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动物疾病中也有很大潜力。作者主要综述了RNAi的过程、小RNA的生物发生学及沉默通路的保护和调控。 展开更多
关键词 小RNA 小干扰RNA RISC argonaute蛋白
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Modeling and analysis of Schistosoma Argonaute protein molecular spatial conformation 被引量:4
11
作者 Jianhua Zhang Zhigang Shang +1 位作者 Xiaohui Zhang Yuntao Zhang 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2011年第4期275-278,共4页
Objective:To analyze the amino acid sequence composition,secondary structure,the spatial conformation of its domain and other characteristics of Argonaute protein.Methods:Bioinformatics tools and the internet server w... Objective:To analyze the amino acid sequence composition,secondary structure,the spatial conformation of its domain and other characteristics of Argonaute protein.Methods:Bioinformatics tools and the internet server were used.Firstly,the amino acid sequence composition features of the Argonaute protein were analyzed,and the phylogenetic tree was constructed.Secondly,Argonaute protein's distribution of secondary structure and its physicochemical properties were predicted.Lastly,the protein functional expression form of the domain group was established through the Phyre-based analysis on the spatial conformation of Argonaute protein domains.Results:593 amino acids were encoded by Argonaute protein,the phylogenetic tree was constructed,and Argonaute protein's distribution of secondary structure and its physicochemical properties were obtained through analysis.In addition,the functional expression form which comprised the N-terminal PAZ domain and C-terminal Piwi domain for the Argonaute protein was obtained with Phyre.Conclusions:The information relationship between the structure and function of the Argonaute protein can be initially established with bioinformatics tools and the internet server,and this provides the theoretical basis for further clarifying the function of Schistosoma Argonaute protein. 展开更多
关键词 argonaute protein Distribution of SECONDARY structure Phyre Domain SCHISTOSOMA SPATIAL CONFORMATION AMINO acid sequence
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PIWI和肿瘤 被引量:2
12
作者 程子昊 尤永平 傅震 《医学研究生学报》 CAS 2008年第6期635-637,642,共4页
PIWI家族成员包含保守的PAZ和PIWI区域,在干细胞自我更新、精子发生、RNA干扰和翻译调控中扮演重要角色。最近研究发现,一些PIWI在肿瘤中呈特异性表达,并与肿瘤的发生、发展相关。PIWI将有可能成为肿瘤诊断和预后判断的一个新的重要指... PIWI家族成员包含保守的PAZ和PIWI区域,在干细胞自我更新、精子发生、RNA干扰和翻译调控中扮演重要角色。最近研究发现,一些PIWI在肿瘤中呈特异性表达,并与肿瘤的发生、发展相关。PIWI将有可能成为肿瘤诊断和预后判断的一个新的重要指标。研究PIWI表达调控机制,可探讨PIWI在肿瘤基因治疗方面的可行性。 展开更多
关键词 PIWI argonaute蛋白 肿瘤 基因治疗
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盐地碱蓬AGO蛋白基因家族的分离及表达分析 被引量:1
13
作者 王闻 范士亮 +4 位作者 李晋 高伟 金玉休 郑明刚 郑立 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期306-314,共9页
AGO蛋白(Argonature protein)作为RNA诱导沉默复合物的核心元件,在植物的非生物胁迫过程中发挥着重要作用。以前期获得的盐地碱蓬转录组数据为基础,开展了针对盐地碱蓬(Suaeda salsa)AGO蛋白的生物信息学及盐胁迫下的表达规律研究。采用... AGO蛋白(Argonature protein)作为RNA诱导沉默复合物的核心元件,在植物的非生物胁迫过程中发挥着重要作用。以前期获得的盐地碱蓬转录组数据为基础,开展了针对盐地碱蓬(Suaeda salsa)AGO蛋白的生物信息学及盐胁迫下的表达规律研究。采用RACE技术克隆2个AGO基因家族成员(SsAGO1、SsAGO16)的cDNA全长序列,并对其蛋白结构、进化关系、表达模式等进行分析。结果表明:盐地碱蓬2类AGO蛋白家族成员基因长度分别为3 212 bp和3 766 bp,编码的蛋白均是一个无跨膜结构域、无信号肽的亲水性蛋白,α-螺旋散布于每个蛋白质的整体结构中;SsAGO1和SsAGO16都含有一个未知的结构域DUF1785,除此之外,SsAGO1还含有PAZ和PIWI两个特征结构域,而SsAGO16仅含有PIWI结构域,SsAGO1和SsAGO16亲缘关系较远,且具有不同的时空表达模式。首次从盐地碱蓬鉴定了AGO蛋白基因并进行了盐胁迫下的表达规律分析,为研究AGO蛋白家族在盐生植物耐盐生理过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 argonaute蛋白 功能预测 表达模式
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Argonaute蛋白结构及其在植物中的研究进展 被引量:1
14
作者 谷少伟 《湖北农业科学》 2020年第8期11-16,共6页
在真核细胞中,许多小的非编码RNA与Argonaute蛋白结合形成RNA诱导沉默复合体,并通过识别互补的靶标RNA来调控基因表达,此过程叫RNA干扰。在植物的RNA干扰途径中,Argonaute-sRNA复合物可以通过多种不同的机制发挥作用,进而参与病原体防... 在真核细胞中,许多小的非编码RNA与Argonaute蛋白结合形成RNA诱导沉默复合体,并通过识别互补的靶标RNA来调控基因表达,此过程叫RNA干扰。在植物的RNA干扰途径中,Argonaute-sRNA复合物可以通过多种不同的机制发挥作用,进而参与病原体防御、植物发育调控等关键的生物过程。综述了Argonaute蛋白的分类和结构特征、在植物体中参与RNA干扰的机制及生物学功能等研究进展。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 结构 RNA干扰 功能
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病毒基因沉默抑制因子与AGO蛋白结合抑制RNA沉默的研究进展 被引量:1
15
作者 申永梅 杨纪君 +2 位作者 霍晓辉 田东方 曹雪松 《天津农业科学》 CAS 2012年第1期23-27,共5页
总结了RNA沉默及病毒RNA沉默抑制因子(VSRs)的研究进展,以及病毒基因沉默抑制因子利用甘氨酸/色氨酸(GW)模型作为ARGONAUTE(AGO)钩和寄主发生RNA沉默的重要作用部位相互结合从而抑制基因沉默的研究机制。通过研究发现,在酵母、动植物细... 总结了RNA沉默及病毒RNA沉默抑制因子(VSRs)的研究进展,以及病毒基因沉默抑制因子利用甘氨酸/色氨酸(GW)模型作为ARGONAUTE(AGO)钩和寄主发生RNA沉默的重要作用部位相互结合从而抑制基因沉默的研究机制。通过研究发现,在酵母、动植物细胞中,一些包含GW模型的蛋白质被认为是RNA沉默效应复合物中AGOs的重要协助者。结果说明,GW模型是一种能用于调节RNA沉默途径活性的万能的、有效的工具,用GW模型竞争性结合AGOs并抑制寄主基因沉默可能是一种被许多病原菌用于抵抗寄主RNA沉默的方法。 展开更多
关键词 RNA沉默 VSRs AGO蛋白 GW模型
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基因沉默在农业生产中的应用及其相关因子的研究进展
16
作者 佟玲 侯杰 +2 位作者 崔国新 许志茹 李玉花 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期648-654,共7页
本文主要介绍了基因沉默在农业生产上的广泛应用,并对一些与基因沉默相关的因子如miRNA、阿格蛋白(Argo-naute protein)和PolIV进行了阐述。
关键词 基因沉默 MIRNA 阿格蛋白 PolIV
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RNAi作用机制及应用研究进展 被引量:10
17
作者 冯小艳 张树珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1-8,共8页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由小非编码RNA(small non-coding RNA,snc RNA)诱发的基因沉默现象,广泛存在于真核生物中。RNAi现象自发现以来,很快成为生物学研究的热点,并取得了一定成果。就RNAi的作用机制、作用过程的关键因子及... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由小非编码RNA(small non-coding RNA,snc RNA)诱发的基因沉默现象,广泛存在于真核生物中。RNAi现象自发现以来,很快成为生物学研究的热点,并取得了一定成果。就RNAi的作用机制、作用过程的关键因子及其应用的研究进展进行综述,以期为RNAi的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 RNAI 作用机制 DICER argonaute蛋白家族 RDRP
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异源表达海苏特氏菌Argonaute蛋白基因提高酿酒酵母脂肪酸含量研究
18
作者 张晓伟 郭敏瑞 +1 位作者 郭慧静 陈国刚 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期37-43,共7页
Argonaute蛋白作为一类高度保守的蛋白,是小RNA调控代谢机制的重要参与者,是RNA干扰所必须的,然而此蛋白在酿酒酵母中却未被发现。为初步探究海苏特氏菌Argonaute蛋白基因对脂肪酸含量的影响,以海苏特氏菌全基因组为模板,克隆并表达了... Argonaute蛋白作为一类高度保守的蛋白,是小RNA调控代谢机制的重要参与者,是RNA干扰所必须的,然而此蛋白在酿酒酵母中却未被发现。为初步探究海苏特氏菌Argonaute蛋白基因对脂肪酸含量的影响,以海苏特氏菌全基因组为模板,克隆并表达了海苏特氏菌Argonaute蛋白基因的CDS区。生物信息学分析发现该基因具有基因沉默调节因子SIR2结构域。将海苏特氏菌Argonaute蛋白基因连接至载体p ZMG中获得重组载体p ZMG-Jm-Argonaute并转化至酿酒酵母BY4742中,GC-MS检测显示,重组菌株总脂肪酸含量相对于野生菌株显著提高了6. 4%,其中不饱和脂肪酸C161含量显著提高了8. 3%,结果表明Jm-Argonaute蛋白基因能够提高酿酒酵母BY4742不饱和脂肪酸C161的含量,从而为深入研究该基因在菌体内对脂肪酸代谢的调节机制提供参考。 展开更多
关键词 海苏特氏菌 argonaute蛋白基因 脂肪酸 酿酒酵母
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人Argonaute2蛋白多克隆抗体制备及初步应用 被引量:1
19
作者 李海芳 浦永 +2 位作者 汤石明 强冉 汤华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期241-244,249,共5页
目的:制备人Argonaute2(Ago2)的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法:用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域(命名为k-Ago2),构建k-Ago2的表达质粒,转化大肠杆菌并诱导表达。融... 目的:制备人Argonaute2(Ago2)的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法:用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域(命名为k-Ago2),构建k-Ago2的表达质粒,转化大肠杆菌并诱导表达。融合蛋白经切胶回收纯化后免疫大白兔制备抗体。以ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性及检测Ago2在细胞系中的表达差异,免疫荧光染色观察Ago2的细胞定位。结果:成功构建表达质粒,继而k-Ago2得以表达与纯化,免疫大白兔后得到Ago2多克隆抗体。ELISA检测抗体效价为1∶19 000,Western blot确定抗体具有高度特异性,并成功地用该抗体检测到Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。结论:Ago2多克隆抗体的成功制备,对RNAi机制的深入研究及其进一步的临床应用均具有重要价值。 展开更多
关键词 argonaute2蛋白 多克隆抗体 RNA干扰 RNA诱导沉默复合体
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花生Argonaute基因家族全基因组鉴定与表达模式分析 被引量:2
20
作者 陆晓东 李春娟 +6 位作者 张浩 孙全喜 闫彩霞 赵小波 王娟 苑翠玲 单世华 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期767-777,共11页
AGO蛋白(Argonaute protein)是RNA诱导沉默复合体的关键组分,在植物生长发育中发挥重要作用。花生基因组测序的完成为全基因组水平上分析AGO抗病基因提供了条件。利用AGO蛋白的保守域在花生基因组数据库与NCBI中进行同源比对,鉴定得到花... AGO蛋白(Argonaute protein)是RNA诱导沉默复合体的关键组分,在植物生长发育中发挥重要作用。花生基因组测序的完成为全基因组水平上分析AGO抗病基因提供了条件。利用AGO蛋白的保守域在花生基因组数据库与NCBI中进行同源比对,鉴定得到花生AGO基因家族所有成员。我们基于生物信息学对AGO蛋白家族的进化关系、理化性质、染色体定位、基因结构、结构域、不同组织中和胁迫下的表达模式等进行分析。结果表明:试验共鉴定得到51个花生AGO基因,包括12个A.duranensis基因,12个A.ipaensis基因以及27个栽培种花生AGO基因。染色体定位分析结果显示这些基因不均匀地分布在花生染色体上,且A.duranensis与A.ipaensis基因组上有10对成员存在较为明显的同源关系。表达模式分析表明AdAGO2、AiAGO4、AdAGO3、AiAGO7、AdAGO8、AiAGO8基因在花生22个组织中整体表达量偏高;而花生茎尖(Shoot Tip)与雄蕊(Stamens)中AGO基因家族呈现较高表达量。本研究结果为揭示AGO蛋白功能和发掘花生的抗逆育种靶向基因资源提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 AGO蛋白 花生 表达模式分析
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