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RHAG血型抗原研究进展 被引量:17
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作者 王鹤 李树中 +1 位作者 李中华 李凌波 《临床血液学杂志(输血与检验)》 CAS 2019年第3期479-482,共4页
RHAG血型抗原是系统抗原,国际输血协会(ISBT)的命名RHAG,系统编号030,已确认该系统有4个抗原。RHAG抗原过去被称为RH50,是一个与RHD/CE相关的抗原(RHD/CE被称为RH30)。本文就RHAG抗原的最新研究进展,做一简略介绍。
关键词 RHAG血型抗原 CD241 抗原表位 膜骨架构成 引导RHD/CE多肽穿膜 胺转运蛋白
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非洲猪瘟血清学诊断靶点的研究进展 被引量:15
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作者 杨文兵 邹亚文 +4 位作者 蒋一凡 余婉婷 杨毅 邬静 王乃东 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1208-1217,共10页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪高致死性传染病。ASFV编码蛋白p30、p54和p72等具有较高的免疫原性,且部分氨基酸序列较为保守,常被作为血清学诊断靶点,用于评价ASF不... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪高致死性传染病。ASFV编码蛋白p30、p54和p72等具有较高的免疫原性,且部分氨基酸序列较为保守,常被作为血清学诊断靶点,用于评价ASF不同阶段或发病程度的抗体水平变化,ASF血清学诊断靶点相关深入研究有助于其感染检测、致病机制和机体免疫系统反应等探究。本文系统阐述用于ASF血清学诊断的主要候选蛋白及其靶点的检测应用进展,并分析候选靶点的抗原表位(区域)及其抗体结合的特点,探讨其作为ASF血清学诊断新靶点的应用潜力。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) 诊断靶点 结构蛋白 抗原表位
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抗A5型口蹄疫病毒重组多肽疫苗的研究 被引量:4
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作者 刘明秋 张骏 +2 位作者 陈维灶 严维耀 郑兆鑫 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1037-1041,共5页
根据A型口蹄疫病毒(FMDV)的VP1基因序列及国际上公认的抗病毒中和表位,并结合对口蹄疫病毒的研究成果,设计了A型FMDV的重组多肽疫苗.分别选择VP1上21~40位和137~160位氨基酸对应的基因序列为表位基因,组成137~160-21~40-137~160的... 根据A型口蹄疫病毒(FMDV)的VP1基因序列及国际上公认的抗病毒中和表位,并结合对口蹄疫病毒的研究成果,设计了A型FMDV的重组多肽疫苗.分别选择VP1上21~40位和137~160位氨基酸对应的基因序列为表位基因,组成137~160-21~40-137~160的串连结构,并以大肠杆菌β-半乳糖苷酶为大分子载体,构建重组质粒pLM99,在大肠杆菌中表达得到高含量的融和蛋白.体外免疫原性检测表明,所表达的融和蛋白与标准A型阳性血清有特异性抗原/抗体反应,即说明该融和蛋白具有免疫反应性.免疫豚鼠的实验结果表明,融合蛋白能在豚鼠体内诱导中和抗体,并使70%的豚鼠能抵抗病毒的攻击. 展开更多
关键词 A型口蹄疫病毒 抗原表位 多肽疫苗
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大豆主要过敏原Gly m Bd 30K抗原决定簇表征预测研究 被引量:6
4
作者 单晓红 孙秀兰 +3 位作者 管露 张银志 尤继明 李红梅 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期771-774,共4页
本文应用生物信息学技术,通过使用三种软件SOPMA、Swiss-model和DNAStar来预测大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位,结果发现80-85、103-106、217-220、355-360这四段氨基酸残基序列是可能的抗原表位,为后续的蛋白表位实验提供了依据... 本文应用生物信息学技术,通过使用三种软件SOPMA、Swiss-model和DNAStar来预测大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位,结果发现80-85、103-106、217-220、355-360这四段氨基酸残基序列是可能的抗原表位,为后续的蛋白表位实验提供了依据,大大提高了工作效率。 展开更多
关键词 大豆 GLY M BD 30K 抗原表位 生物信息学
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口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β6亚基配体结合域单克隆抗体识别的抗原表位分析 被引量:6
5
作者 赵建勇 伏小平 +3 位作者 独军政 高闪电 冯艳丽 常惠芸 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第4期1583-1585,共3页
[目的]分析测定口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β6亚基配体结合域单克隆抗体(mAb)的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数。[方法]利用叠加ELISA法、间接ELISA法、硫氰酸盐洗脱法测定C2D8、B7B6、B8C9、C4C7、E7C7 5株mAb的抗原识别位点、饱... [目的]分析测定口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β6亚基配体结合域单克隆抗体(mAb)的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数。[方法]利用叠加ELISA法、间接ELISA法、硫氰酸盐洗脱法测定C2D8、B7B6、B8C9、C4C7、E7C7 5株mAb的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数。[结果]5株mAb间具有相似或不同的抗原识别位点,其中C4C7与E7C7、C4C7与B8C9、E7C7与B8C9等mAb间的识别位点相似,而C4C7与B7B6、E7C7与C2D8等mAb间的识别位点不同。5株mAb C2D8、E7C7、B8C9、C4C7、B7B6的饱和值分别为1∶200、1∶400、1∶800、1∶800、1∶800,亲和力为B8C9>C4C7>B7B6≥E7C7>C2D8。[结论]分析测定了5株mAb的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数,从而为利用mAb深入研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染过程中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 整联蛋白 受体 单克隆抗体 抗原表位
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猪细小病毒4型单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
6
作者 柴书军 杨苏珍 +5 位作者 刘运超 冯华 魏蔷 王方雨 金前跃 张改平 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第8期77-84,共8页
为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛... 为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性克隆,最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株;然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测,鉴定分析其抗原表位。结果显示:4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位,分别为387RRQDN^(391)和578QRKE^(581),而2E7 mAb识别的表位为构象表位;通过对Cap蛋白3D结构定位分析,387RRQDN^(391)和578QRKE^(581)抗原表位位于蛋白表面,且在PPV4亚型中高度保守,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪博卡病毒(PBoV)基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。 展开更多
关键词 猪细小病毒4型 单克隆抗体 抗原表位
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猪繁殖与呼吸综合征病毒国内分离毒株GP3、GP5和N蛋白抗原性分析 被引量:4
7
作者 蔡雪辉 刘永刚 +3 位作者 李艳华 王洪峰 柴文君 刘文周 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期321-325,共5页
本研究利用抗美洲型病毒株的GP3、GP5和N蛋白的11株单克隆抗体,对国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原表位进行鉴别,并同国外参考毒株VR_2332、NVSL(美洲型,B型)、Lelystad(欧洲型,A型)及商品化疫苗毒的抗原多样性进行了比较与分析。... 本研究利用抗美洲型病毒株的GP3、GP5和N蛋白的11株单克隆抗体,对国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原表位进行鉴别,并同国外参考毒株VR_2332、NVSL(美洲型,B型)、Lelystad(欧洲型,A型)及商品化疫苗毒的抗原多样性进行了比较与分析。通过对免疫过氧化物酶单层试验改进,建立了免疫荧光单层试验(IFMA),并采用该方法对国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原特性进行了鉴定,研究结果发现国内分离毒株和北美洲型VR_2332株的抗原性比较相近,而与欧洲型LV株的GP3、GP5的抗原性差异较大。根据N蛋白的单克隆抗体(ISU15A_E)与国内分离毒株的反应谱,按照美国L.Yang等[3]分类方法,本试验中的国内分离毒株均属于I组。 展开更多
关键词 PRRSV 结构蛋白 抗原表位
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一株罕见G4P[6]-I5-A8基因型人轮状病毒全基因组序列分析
8
作者 车如意 周杰英 +9 位作者 范佳欣 唐晓苹 董梦洁 熊光萍 孙晓曼 王宏 章青 庞立丽 孔翔羽 李丹地 《国际病毒学杂志》 北大核心 2024年第1期17-21,共5页
目的研究一株G4P[6]基因型A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)CZ079的全基因组特征及进化规律.方法利用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)对CZ079的VP7、VP4、VP6、NSP1节段分别进行RT-... 目的研究一株G4P[6]基因型A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)CZ079的全基因组特征及进化规律.方法利用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)对CZ079的VP7、VP4、VP6、NSP1节段分别进行RT-PCR扩增,通过在线RVA自动分型工具对其分型,采用DNAstar5.1和Mega 11.0软件对各节段进行同源性及遗传进化分析.结果CZ079毒株基因型为G4-P[6]-I5-R 1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1.VP6为I5型,NSP1为A8型.CZ079与LLR^(TM)、RotaTeq^(TM)和Rotarix^(TM)三种疫苗株在VP7的抗原表位中7-1b区域均存在氨基酸差异;VP4蛋白裂解后的VP8*抗原表位中8-1、8-2、8-3、8-4、5-1区域存在较大差异.结论2022年RVA毒株CZ079为罕见的G4P[6]-I5-A8型,推测该基因型RVA是由越南等东南亚地区传入中国,与中国RVA发生重配产生的新型重配毒株. 展开更多
关键词 A组轮状病毒 基因型 重配株 全基因组 抗原表位
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猪瘟病毒单克隆抗体的研究及应用进展
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作者 吴玥 王明伟 +3 位作者 夏应菊 李芳韬 徐璐 刘业兵 《中国兽药杂志》 2024年第10期60-67,共8页
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,在疫病鉴别诊断和预防中发挥着重要作用。1986年Wensvoort等首次获得猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的单克隆抗体,此后国内外制备了许多针对CSF... 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,在疫病鉴别诊断和预防中发挥着重要作用。1986年Wensvoort等首次获得猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的单克隆抗体,此后国内外制备了许多针对CSFV的单抗,用于免疫学研究及临床检测应用。对国内外制备的抗CSFV E2、Erns和NS3蛋白的单克隆抗体及其在CSFV抗原性分析、抗原表位研究及猪瘟诊断和鉴别中的应用等方面的最新进展进行了综述,以期为CSFV相关研究提供参考。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 单克隆抗体 抗原表位 诊断
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斯氏副柔线虫CAMK/TSSK蛋白激酶基因的克隆及其蛋白质结构与抗原表位预测分析 被引量:3
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作者 王文龙 赵学亮 +5 位作者 孙柯 冯陈晨 白丽艳 王姝懿 王梦雅 刘春霞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期644-651,共8页
为分析并预测斯氏副柔线虫免疫相关基因CTPK编码蛋白结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,通过提取斯氏副柔线虫组织RNA,反转录合成cDNA,设计特异性引物以扩增CTPK基因的CDS区,并利用生物信息学软件对CTPK进行蛋白质结构分析和抗... 为分析并预测斯氏副柔线虫免疫相关基因CTPK编码蛋白结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,通过提取斯氏副柔线虫组织RNA,反转录合成cDNA,设计特异性引物以扩增CTPK基因的CDS区,并利用生物信息学软件对CTPK进行蛋白质结构分析和抗原表位预测。生物信息学分析表明,CTPK基因cDNA序列全长共519bp,具有完整的开放阅读框(519bp),编码173个氨基酸,相对分子质量和等电点大小分别为20.264ku和9.53。结构分析发现,蛋白质无跨膜区,无规则卷曲构成二级结构的主要组分,亲水性氨基酸比例超过60%;抗原表位预测表明,CTPK蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,既含有较多潜在的B细胞抗原表位又存在较多的T细胞抗原表位。推测CTPK有望用作斯氏副柔线虫的免疫诊断抗原和疫苗候选抗原,本研究为骆驼斯氏副柔线虫生前诊断方法iELISA的建立和DNA疫苗的研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 斯氏副柔线虫 CTPK基因 抗原表位 蛋白质结构预测 生物信息学分析 丝/苏氨酸蛋白激酶
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新型冠状病毒3CL水解酶的结构特征及其抗原表位分析 被引量:3
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作者 王道 彭亮 《生命科学研究》 CAS CSCD 2020年第5期345-353,366,共10页
新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)含有的3CLpro(3C-like protease)是由306个氨基酸构成的亲水性蛋白酶。3CLpro序列在冠状病毒中高度保守,对SARS-CoV-2的正常功能至关重要。为了深入了解3CL... 新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)含有的3CLpro(3C-like protease)是由306个氨基酸构成的亲水性蛋白酶。3CLpro序列在冠状病毒中高度保守,对SARS-CoV-2的正常功能至关重要。为了深入了解3CL水解酶的结构特征及其抗原表位,本研究利用多种生物信息学软件分析了该酶的理化性质、亲/疏水性、跨膜区、糖基化位点、磷酸化位点、SUMO化位点、二级结构和结构域、配体结合位点及B/T细胞的优势抗原表位,结果发现3CLpro不存在跨膜区,并推测含有糖基化位点2个、磷酸化位点27个、SUMO化位点3个;3CLpro的二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,结构域包含一个endopeptidase/C30保守序列;3CLpro存在5个可能的配体结合位点和多个潜在的B/T细胞表位。此外,DrugBank数据库还预测到8个潜在的小分子药物。综上所述,本研究为新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的药物和疫苗研制提供了理论基础。 展开更多
关键词 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 3CL水解酶 抗原表位 生物信息学
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人肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型B细胞线性表位的生物信息学预测 被引量:1
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作者 高柳莺 祝苗 +1 位作者 戎浩 董长征 《宁波大学学报(理工版)》 CAS 2019年第2期54-60,共7页
发展了人肠道病毒B细胞线性表位(简称线性表位)的生物信息学预测算法,系统性地预测和比较了人肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxsackievirusA16,CVA16)的线性表位.结果显示:EV71和CVA16结构蛋白(Viral Protein, VP... 发展了人肠道病毒B细胞线性表位(简称线性表位)的生物信息学预测算法,系统性地预测和比较了人肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxsackievirusA16,CVA16)的线性表位.结果显示:EV71和CVA16结构蛋白(Viral Protein, VP)上都有16个线性表位,2种肠道病毒的线性表位的位置高度一致,但氨基酸序列保守性较低,大多数表位都存在至少3个氨基酸残基的差异,提示2种病毒的线性表位具有血清型特异性,这很可能是两者不能交叉反应的原因.线性表位主要分布在β链之间的环上和C-末端,分别有13个(81.3%)和2个(12.5%)表位.与文献报道相比较,16个线性表位中,分别有6个(37.5%) EV71和12个(75%) CVA16的表位已被实验验证.特别是实验研究重点关注的VP1,6个预测表位中,分别有4个(66.7%) EV71的预测表位和5个(83.3%)CVA16的预测表位已被实验所验证.说明算法具有较高的预测可靠度.线性表位的实验研究主要集中在VP1,预测结果提示VP2和VP3也能形成表位,应该加以重视.生物信息学算法通过预测和筛选潜在的线性表位,能够大大降低实验负荷,为包括EV71和CVA16在内的人肠道病毒的研究提供有力支持.对肠道病毒线性表位的预测,有助于更好地监测和预警手足口病疫情,辅助疫苗的研发和准备. 展开更多
关键词 肠道病毒71 柯萨奇病毒A16 B 细胞线性表位 抗原表位 生物信息学 手足口病
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大豆主要过敏原β-伴大豆球蛋白β亚基的抗原表位分析及分段克隆 被引量:2
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作者 皮江一 席俊 +1 位作者 贺梦雪 李爽 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期90-93,共4页
利用生物信息学软件SWISS-MODEL对大豆主要过敏原β-伴大豆球蛋白β亚基建立出三级结构模型,并根据Disco Tope 2.0服务器预测出该模型的构象表位相关区段,采用分段克隆方式扩增目的基因的3个片段区域,利用PCR技术扩增目的基因全长及3个... 利用生物信息学软件SWISS-MODEL对大豆主要过敏原β-伴大豆球蛋白β亚基建立出三级结构模型,并根据Disco Tope 2.0服务器预测出该模型的构象表位相关区段,采用分段克隆方式扩增目的基因的3个片段区域,利用PCR技术扩增目的基因全长及3个互相重叠的片段(A、B、C)将其连接至p MD18-T载体,并转化到大肠杆菌感受态JM109。经蓝白斑筛选,以及对重组质粒进行PCR和双酶切验证,测序结果与设计的基因序列一致,成功得到了目的基因片段的阳性克隆子,为β-伴大豆球蛋白β亚基分段表达及抗原区域位置的筛选与鉴定提供参考。 展开更多
关键词 Β-伴大豆球蛋白 Β亚基 生物信息学 抗原位点 克隆
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狂犬病毒磷蛋白的生物信息学分析及其真核表达 被引量:2
14
作者 张金阳 李贞景 +2 位作者 宋玉竹 韩芹芹 夏雪山 《昆明理工大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第6期82-88,共7页
为了探讨运用蛋白全长和多肽抗原制备抗狂犬病毒磷蛋白抗体的可能性,本研究运用生物信息学专业软件对二级结构、表面可及性、亲水性和抗原指数进行综合分析,并预测出狂犬病毒磷蛋白的抗原表位.分析结果表明,抗原表位主要位于狂犬病毒磷... 为了探讨运用蛋白全长和多肽抗原制备抗狂犬病毒磷蛋白抗体的可能性,本研究运用生物信息学专业软件对二级结构、表面可及性、亲水性和抗原指数进行综合分析,并预测出狂犬病毒磷蛋白的抗原表位.分析结果表明,抗原表位主要位于狂犬病毒磷蛋白的区段14-37、39-66、70-91、106-114、134-158、161-173、187-201、207-221、229-234、236-244、249-258、278-297及以上区段附近.同时,本研究构建了狂犬病毒磷蛋白基因的真核表达载体,转染细胞进行真核表达后,能够被抗狂犬病毒阳性血清所识别,说明磷蛋白上存在大量有效的抗原表位.多个参数对狂犬病毒磷蛋白的抗原表位的预测,为进一步开展狂犬病毒磷蛋白的单克隆抗体制备、结构特征以及表位鉴定工作奠定理论基础. 展开更多
关键词 狂犬病毒 磷蛋白 抗原表位 真核表达
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J亚群禽白血病病毒gp85单抗1E3株抗原识别表位的初步分析 被引量:2
15
作者 莫虹斐 余多 +2 位作者 孙淼 陈福勇 曹红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第12期3-7,共5页
J亚型禽白血病是由J亚群禽白血病病毒引起的一种以成髓细胞增生、免疫抑制、生长发育受阻为特点的传染性肿瘤疾病,于1988年首次发现,其病毒囊膜表面蛋白gp85决定了病毒亚群特异性。本试验将原核表达质粒pET-28a-J gp85中的gp85基因分段... J亚型禽白血病是由J亚群禽白血病病毒引起的一种以成髓细胞增生、免疫抑制、生长发育受阻为特点的传染性肿瘤疾病,于1988年首次发现,其病毒囊膜表面蛋白gp85决定了病毒亚群特异性。本试验将原核表达质粒pET-28a-J gp85中的gp85基因分段亚克隆至重组表达质粒pGEX-6p-1上并在大肠杆菌中成功地表达,用ALV-J S1gp85单克隆抗体1E3株对分段表达的gp85蛋白进行初步的免疫印迹分析。结果表明:ALV-J S1gp85单抗1E3株所识别的抗原表位位于蛋白N端的第69至112个氨基酸之间。这将为ALV-J gp85抗原决定簇所在位点及其免疫学功能的研究奠定基础。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 gp85蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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弓形虫致密颗粒蛋白GRA12的生物信息学分析 被引量:2
16
作者 王英贺 曹利利 +5 位作者 郭衍冰 董航 宫鹏涛 苑淑贤 姚新华 魏峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第4期74-78,共5页
为分析并预测弓形虫致密颗粒蛋白GRA12基因编码蛋白的结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,本研究从Gen Bank数据库获取GRA12基因序列,通过在线蛋白分析专家系统(Expasy)并结合GENERUNR、DNAStar、DNAMAN等生物信息学分析软件对GR... 为分析并预测弓形虫致密颗粒蛋白GRA12基因编码蛋白的结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,本研究从Gen Bank数据库获取GRA12基因序列,通过在线蛋白分析专家系统(Expasy)并结合GENERUNR、DNAStar、DNAMAN等生物信息学分析软件对GRA12序列的编码区进行分析、对该基因编码蛋白质的理化性质、信号肽、跨膜结构域、二级结构、亲/疏水性、抗原表位等信息预测。结果表明:该基因全长1 311 bp,编码436个氨基酸,蛋白性质稳定,理论分子质量约为47.8 ku,无信号肽,有6个跨膜区,14个丝氨酸磷酸化位点、7个苏氨酸磷酸化位点、3个酪氨酸磷酸化位点、18个O-糖基化位点、3个乙酰化蛋白附着位点、1个酪氨酸硫酸化位点、1个潜在的N-糖基化位点、1个棕榈酰化位点,15个潜在的抗原表位。研究结果分析说明GRA12有潜力成为弓形虫疫苗候选抗原。 展开更多
关键词 弓形虫 GRA12 生物信息学 蛋白质结构 抗原表位
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特异性SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析
17
作者 张娟 余晓林 +4 位作者 陈维贤 陶鹏 唐霓 黄爱龙 郑建 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第4期459-462,共4页
目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的N蛋白(分别记为N1... 目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的N蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白)分别免疫Balb/c小鼠制备McAb,通过检测其亚类、效价及相对亲和力鉴定McAb的生物学特性,以Western blot鉴定单克隆抗体特异性,并对McAb结合表位进行初步分析。结果:筛选出7株抗SARS-CoVN1蛋白及2株抗SARS-CovN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,腹水效价105以上;亲和常数达108以上。Western blot证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoVN蛋白发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示2株N1 McAb识别相同的抗原表位,其余均识别不同的抗原表位。结论:通过分段表达纯化的SARS-CoV N蛋白而制备的特异性针对SARS-CoV N蛋白不同区域抗原表位的单克隆抗体中,N1单抗识别N蛋白N端(1 ̄549bp),N2单抗识别N蛋白C端(496 ̄1269bp),可初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。 展开更多
关键词 SARS-COV 核衣壳蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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猪口蹄疫病毒DNA疫苗与常规灭活苗的比较 被引量:1
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作者 黄桂菊 罗满林 刘镇明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期117-119,共3页
以含有FMDV VPI基因和VPI基因主要抗原位点141—160及200—213位的氨基酸的真核表达质粒pcDNA-VPI和pcDNA-F与常规O型FMD灭活疫苗分别免疫6—8周龄的BALB/c小鼠和豚鼠,同时设生理盐水为阴性对照,以肌肉注射,间隔2周3次免疫的方式进... 以含有FMDV VPI基因和VPI基因主要抗原位点141—160及200—213位的氨基酸的真核表达质粒pcDNA-VPI和pcDNA-F与常规O型FMD灭活疫苗分别免疫6—8周龄的BALB/c小鼠和豚鼠,同时设生理盐水为阴性对照,以肌肉注射,间隔2周3次免疫的方式进行.通过脾脏T淋巴细胞增殖(MTT)、T淋巴细胞亚群、中和抗体、抗病毒能力的检测和病理组织学观察等方面比较DNA疫苗与常规灭活苗的免疫效果.结果发现pcDNA-VPI和pcDNA-F能够诱导细胞免疫和体液免疫反应,pcDNA-F可使小鼠和豚鼠产生一定程度的抗FMDV感染的保护性免疫,但与常规灭活苗比较还存在差异. 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 VPI基因 抗原位点 质粒
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马立克病病毒疫苗株CVI988的38kd磷蛋白基因双氨基酸突变株 被引量:2
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作者 崔治中 秦爱建 LeeL.F. 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 2000年第3期231-235,共5页
利用单克隆抗体H1 9及间接免疫荧光抗体反应 (IFA) ,从经马立克病病毒 (MDV)强毒株Md1 1的38kd磷蛋白 (pp38)基因克隆质粒DNA转染的MDV疫苗毒CVI988株感染的鸡胚成纤维细胞中 ,筛选到一个点突变株CVI/rpp38(AA)。DNA序列测定结果表明 ,... 利用单克隆抗体H1 9及间接免疫荧光抗体反应 (IFA) ,从经马立克病病毒 (MDV)强毒株Md1 1的38kd磷蛋白 (pp38)基因克隆质粒DNA转染的MDV疫苗毒CVI988株感染的鸡胚成纤维细胞中 ,筛选到一个点突变株CVI/rpp38(AA)。DNA序列测定结果表明 ,该点突变株pp38基因ORF的第 32 0位和 32 6位碱基均已从亲本CVI988株的“G”突变为“A” ,导致第 1 0 7和 1 0 9位氨基酸分别从精氨酸和甘氨酸转变为谷氨酰胺和谷氨酸。这个双氨基酸点突变株在IFA和免疫沉淀反应中与pp38特异性单抗H1 9都呈现阳性反应 ,但与另一个 pp38特异性单抗T6 5都完全不反应 ,表现出与亲本病毒完全相反的结果。本研究发现了MDV的pp38上二个特异性不同的抗原表位 ,并以确凿的证据证明了第 1 0 7及 1 0 展开更多
关键词 点突变 特异性 抗原表位 CV 单抗 病毒疫苗 氨基酸 马立克病 MDV 亲本
全文增补中
四川脑膜炎病例猪链球菌2型溶血素抗原表位富集区的原核表达 被引量:2
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作者 王海丽 徐公义 +2 位作者 葛长城 王长军 唐家琪 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期477-479,484,共4页
对2005年四川资阳脑膜炎病例猪链球菌2型分离株ZYH33溶血素编码蛋白中包含多个抗原表位的第230-593氨基酸残基区域的基因片段进行扩增并克隆。基因片段经酶切处理后插入表达载体pQE-30的BamHⅠ和SalⅠ位点之间,构建融合表达质粒,转化宿... 对2005年四川资阳脑膜炎病例猪链球菌2型分离株ZYH33溶血素编码蛋白中包含多个抗原表位的第230-593氨基酸残基区域的基因片段进行扩增并克隆。基因片段经酶切处理后插入表达载体pQE-30的BamHⅠ和SalⅠ位点之间,构建融合表达质粒,转化宿主菌TG1经IPTG诱导后融合基因得到了表达,用猪链球菌2型菌体抗血清对表达的融合蛋白进行免疫印迹试验,分析融合蛋白的免疫反应性。试验结果提示该溶血素蛋白第230-593氨基酸残基区域可作为猪链球菌的诊断抗原,为基因工程疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶血素 抗原表位 表达
原文传递
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