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CD_(25)单克隆抗体治疗皮质激素耐药的重度移植物抗宿主病 被引量：12
1
作者 路瑾 许兰平 +5 位作者 黄晓军 陈欢 张耀臣 任汉云 郭乃榄 陆道培 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期216-219,共4页
目的　观察白细胞介素 (IL) 2受体α链 (CD2 5)单克隆抗体治疗激素耐药重度移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。方法　对异基因造血干细胞移植后诊断皮质激素耐药重度GVHD体 17例患者 ( 18例次 ) ,在诊断确立后第 1、4( 3)、8、15、2 2天将C... 目的　观察白细胞介素 (IL) 2受体α链 (CD2 5)单克隆抗体治疗激素耐药重度移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。方法　对异基因造血干细胞移植后诊断皮质激素耐药重度GVHD体 17例患者 ( 18例次 ) ,在诊断确立后第 1、4( 3)、8、15、2 2天将CD2 5人源化单克隆抗体 (赛尼派 ) 5 0mg溶于 10 0ml生理盐水中静脉点滴治疗。观察治疗后GVHD缓解情况 ,副作用以及合并感染情况。结果　 ( 1) 18例次中 11例GVHD完全缓解 ,5例GVHD部分缓解 ,2例无效。 ( 2 ) 7例出现感染。 ( 3)完全缓解 11例患者中GVHD复发 4例。 ( 4)无输注相关毒副作用。结论　IL 2受体α链 (CD2 5)单克隆抗体治疗重度皮质激素耐药GVHD疗效显著。 展开更多
关键词 CD25单克隆抗体 治疗 皮质激素 重度移植物抗宿主病 耐药性
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用酶联免疫夹心法测定肝炎患者血清丙型肝炎抗原 被引量：15
2
作者 谢立 黄德庄 +2 位作者 时洪波 贺丽香 靳海英 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1159-1162,共4页
目的建立血清中丙肝病毒NS3抗原(HCAgNS3)的酶免检测方法。方法以特异性强、敏感度高、识别不同HCAgNS3抗原表位的HCAgNS3单克隆抗体和高效价的纯化抗HCV分别作为包被抗体和酶标记抗体,采用夹心ELISA法测定血清中HCAgNS3抗原。结果优化... 目的建立血清中丙肝病毒NS3抗原(HCAgNS3)的酶免检测方法。方法以特异性强、敏感度高、识别不同HCAgNS3抗原表位的HCAgNS3单克隆抗体和高效价的纯化抗HCV分别作为包被抗体和酶标记抗体,采用夹心ELISA法测定血清中HCAgNS3抗原。结果优化了酶免疫反应条件;该方法对HCAgNS3的最低检测限为1～2ng/ml;批内(n=13)及批间(n=3)变异系数(CV)分别为4.51%和5.64%;对52例抗HCV阳性血清测定HCAgNS3抗原的检出率为21.2%,对15例HCAgNS3阳性标本测定HCVRNA的检出率为60%,1350例抗HCV阴性的其他类型肝炎患者血清标本中,HCAgNS3检出率为1.7%,50例正常人血清标本的HCAgNS3抗原测定结果均为阴性。结论该方法敏感性较高,特异性、重复性和稳定性均良好,可以作为早期诊断HCV感染的有效方法。 展开更多
关键词 C型肝炎样病毒属 肝炎抗原 丙型 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定
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抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建和表达 被引量：9
3
作者 白银 王琰 +3 位作者 周丽君 黄啸 丁义 俞莉章 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期402-406,共5页
目的 :构建嵌合型抗人膀胱癌抗体的真核表达载体 ,并实现其真核表达。方法 :从杂交瘤细胞中克隆得到鼠源单抗的可变区基因 ,插入嵌合抗体IgG1真核表达载体pDHL中 ,转染CHO细胞 ,实现其真核表达 ,并对抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体的功能进行... 目的 :构建嵌合型抗人膀胱癌抗体的真核表达载体 ,并实现其真核表达。方法 :从杂交瘤细胞中克隆得到鼠源单抗的可变区基因 ,插入嵌合抗体IgG1真核表达载体pDHL中 ,转染CHO细胞 ,实现其真核表达 ,并对抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体的功能进行初步鉴定。结果 :成功构建抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体真核表达载体 ,并实现其真核表达。初步的功能鉴定表明抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体具有较好的特异性和亲合力。结论 :构建的抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体真核表达载体在真核细胞内得到表达 ,且其功能较为理想。 展开更多
关键词 人-鼠嵌合抗体 真核表达 单克隆抗体 药物载体 膀胱肿瘤 治疗 膀胱癌
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CD_(25)抗体预防移植物抗宿主病在儿童白血病半匹配骨髓移植中的应用 被引量：8
4
作者 陈惠仁 纪树荃 +4 位作者 阎洪敏 王恒湘 刘静 薛梅 朱玲 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期294-298,共5页
目的　探讨CD2 5抗体用于预防儿童白血病半匹配未去除T细胞骨髓移植重度移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。方法　 10例儿童白血病患者接受人类白细胞抗原 (HLA) 2～ 3个位点不合半匹配骨髓移植 ,移植方法除了供者用粒细胞集落刺激因子 (G C... 目的　探讨CD2 5抗体用于预防儿童白血病半匹配未去除T细胞骨髓移植重度移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。方法　 10例儿童白血病患者接受人类白细胞抗原 (HLA) 2～ 3个位点不合半匹配骨髓移植 ,移植方法除了供者用粒细胞集落刺激因子 (G CSF)及受者应用环孢素A(CSA)、氨甲蝶呤 (MTX)、抗胸腺细胞球蛋白 (ATG ,FreseniusHemocare ,Germany)和霉酚酸酯 (MMF)预防GVHD的综合措施外 ,加用抗CD2 5单克隆抗体 (舒莱 ,novartispharmaswitzerland)预防GVHD ,剂量各为 2 0mg ,在移植前 2h和移植后第 4天应用 ,观察移植后的疗效 ,移植结果与前期未用CD2 5抗体移植组作回顾性比较。结果　 10例移植后均获造血重建 ,粒细胞 >0 5× 10 9/L的中位天数是 19d ,血小板大于 2 0× 10 9/L的中位天数是 2 2d ,骨髓植活直接证据检测证实为完全供者造血。无一例发生急性Ⅱ～Ⅳ度GVHD ,未用CD2 5抗体对照组 8例中发生急性Ⅱ～Ⅳ度GVHD有 4例 ,差异有显著性(P =0 0 14 7)。可评价慢性GVHD的 8例均发生慢性GVHD ,为局限性慢性GVHD。中位随访 12个月 (范围 9～ 2 4个月 ) ,2例为移植相关死亡 ,1例移植后 14个月因复发死亡 ,实际无病生存率是70 %。结论　儿童半匹配未去除T细胞骨髓移植中应用舒莱 ,明显降低急性重症GVHD发生 。 展开更多
关键词 CD25抗体 预防 移植物抗宿主病 儿童 白血病 半匹配骨髓移植
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单克隆抗体类抗肿瘤药物的临床应用和进展 被引量：7
5
作者 杨春娥 石小鹏 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期136-139,共4页
将化疗药物、放射性物质以及生物毒素等 与单克隆抗体偶联就得到单克隆类药物。由于抗原 抗体结合的特异性,这些偶联的药物被单克隆抗体 导向表达相应抗原的细胞并发挥抗肿瘤效应。单克 隆抗体类抗肿瘤药物有效地降低了传统肿瘤药物治 ... 将化疗药物、放射性物质以及生物毒素等 与单克隆抗体偶联就得到单克隆类药物。由于抗原 抗体结合的特异性,这些偶联的药物被单克隆抗体 导向表达相应抗原的细胞并发挥抗肿瘤效应。单克 隆抗体类抗肿瘤药物有效地降低了传统肿瘤药物治 疗的不良反应,提高了治疗的精确性。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 肿瘤治疗方案 抗肿瘤药 偶联 依决洛单抗 曲司珠单抗 利妥昔单抗 托西莫单抗
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生殖道沙眼衣原体和解脲支原体与不育症的关系 被引量：7
6
作者 余平 张良文 +3 位作者 戴翰峰 查国章 孙颖 舒明星 《湖南医科大学学报》 CSCD 1998年第1期67-69,共3页
应用单克隆抗体免疫荧光法和分离培养法对７６８例不育患者（不育组）及２６６例正常生育者（对照组）进行生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲支原体（ＵＵ）检测。结果：不育组和对照组ＣＴ阳性率分别为２８．６４％和５．２％；ＵＵ阳性... 应用单克隆抗体免疫荧光法和分离培养法对７６８例不育患者（不育组）及２６６例正常生育者（对照组）进行生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲支原体（ＵＵ）检测。结果：不育组和对照组ＣＴ阳性率分别为２８．６４％和５．２％；ＵＵ阳性率分别为３６．５％和１４．２８％（Ｐ＜０．０１）。提示ＣＴ和ＵＵ的生殖道感染可能是造成不育的因素之一。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 解脲支原体 女性不育症
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抗血小板膜糖蛋白Ⅰbα/Ⅲa双特异单链抗体的构建及其功能研究 被引量：4
7
作者 戴克胜 安广宇 阮长耿 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第21期1493-1497,共5页
目的　构建、表达抗血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅰbα GPⅢa双特异单链抗体 ,为其进一步研究、应用奠定基础。方法　应用PCR技术 ,扩增出接头片段和SZ 2 1单链抗体基因 ,克隆入pUCm T载体 ,测序分析。应用基因重组技术将接头片段、SZ 2 1单链... 目的　构建、表达抗血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅰbα GPⅢa双特异单链抗体 ,为其进一步研究、应用奠定基础。方法　应用PCR技术 ,扩增出接头片段和SZ 2 1单链抗体基因 ,克隆入pUCm T载体 ,测序分析。应用基因重组技术将接头片段、SZ 2 1单链抗体基因和SZ 2单链抗体基因重组拼接 ,构建SZ 2 SZ 2 1双特异单链抗体表达载体pET2 2 2 1 L 2scFv,并测序验证。导入大肠杆菌BL2 1 (DE3)Plys,诱导表达。流式细胞术、ELISA、Western印迹检测SZ 2 SZ 2 1双特异单链抗体与血小板结合能力 ,瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导血小板聚集试验对表达产物功能进行研究。结果　表达载体pET2 2 2 1 L 2scFv构建拼接正确 ;表达产物以包涵体形式为主 ,表达量占菌体总蛋白的 1 4 % ;表达产物具有与血小板以及血小板GPⅠbα和Ⅲa结合的活性 ,可抑制瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导的血小板聚集 ,此作用呈剂量依赖性。结论　成功表达了SZ 2 SZ 2 1双特异单链抗体 ,该抗体具有与相应 2个靶抗原结合的活性 ,并可抑制瑞斯托霉素。 展开更多
关键词 单克隆抗体 血小板糖蛋白GPⅡb-Ⅲa复合物 血栓形成
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CD3AK和黄芪多糖联合治疗荷瘤动物的实验研究 被引量：4
8
作者 黄宏思 黄卫彤 +1 位作者 覃志坚 唐毓金 《右江民族医学院学报》 2002年第3期332-334,共3页
目的　探讨CD3AK和黄芪多糖 (APS)对荷瘤动物的治疗作用。方法　将黑色素瘤B1 6细胞移植到C57BL/ 6小鼠腹腔建立动物模型 ,分别用APS、CD3AK及二者联合治疗荷瘤鼠 ,检测荷瘤鼠脾NK细胞活性和脾淋巴细胞IL - 2诱生水平以及荷瘤鼠生存期... 目的　探讨CD3AK和黄芪多糖 (APS)对荷瘤动物的治疗作用。方法　将黑色素瘤B1 6细胞移植到C57BL/ 6小鼠腹腔建立动物模型 ,分别用APS、CD3AK及二者联合治疗荷瘤鼠 ,检测荷瘤鼠脾NK细胞活性和脾淋巴细胞IL - 2诱生水平以及荷瘤鼠生存期。结果　单纯APS和单纯CD3AK细胞能延长荷瘤鼠的生存期 ,分别为 1 8.64± 1 .2 1天和 2 5 .34± 3 .68天 (荷瘤鼠对照组为 1 4 .67± 2 .82天 ,P <0 .0 1 ) ;二者联合应用 ,APS能显著增强CD3AK细胞的抗肿瘤作用 ,延长荷瘤鼠的生存期 ,其生存期为 35 .65± 3 .74天 (P <0 .0 0 1 )。通过对荷瘤鼠进行细胞免疫功能观察发现 ,CD3AK细胞和APS均具有抵抗荷瘤鼠NK细胞活性、IL - 2产生能力下降的作用 ;APS对CD3AK仍有显著增强效应。结论　APS是一种实用而有效的生物反应调节剂 。 展开更多
关键词 多糖类 杀伤细胞 单克隆抗体 肿瘤 细胞免疫 免疫佐剂 小鼠
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食管癌细胞核仁抗原单克隆抗体的制备及其特性的初步鉴定 被引量：3
9
作者 刘乐和 林汉良 +5 位作者 钟叔平 刘长秀 梁惠珍 徐劲 张昌卿 沈忠英 《中山医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第2期108-112,共5页
【目的】制备抗食管癌细胞核仁抗原单克隆抗体 ,用于寻找肿瘤的标志物和癌的病理诊断。【方法】以食管癌组织核基质为抗原 ,采用足垫法免疫Balb/c小鼠 ,运用杂交瘤技术建立分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株 ,制备食管癌细胞抗原片和食管癌... 【目的】制备抗食管癌细胞核仁抗原单克隆抗体 ,用于寻找肿瘤的标志物和癌的病理诊断。【方法】以食管癌组织核基质为抗原 ,采用足垫法免疫Balb/c小鼠 ,运用杂交瘤技术建立分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株 ,制备食管癌细胞抗原片和食管癌冰冻切片 ,采用免疫组化检测并采用蛋白印迹法 (Westernblotting)分析 ,鉴定是否为特异性单克隆抗体。【结果】获得一细胞株 (1 7/E)能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株 ,1 7/E能与食管癌细胞和其他 10种癌细胞的核仁反应 ,不与正常食管上皮细胞核仁反应。Westernblotting分析表明 ,1 7/E与食管癌组织核基质 41ku处有一反应带 ,与正常食管组织核基质无反应。【结论】 1 7/E可能是对食管癌等多种肿瘤细胞核仁抗原的特异性单克隆抗体 ,为深入研究肿瘤细胞核仁抗原的生物学特性及肿瘤病理诊断提供了有效的制剂 ,并具开发的潜在价值。 展开更多
关键词 食管肿瘤 细胞核仁 单克隆抗体 抗原 制备
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高尔基体蛋白73原核表达系统的构建及单克隆抗体的制备 被引量：3
10
作者 郭静霞 魏红山 +7 位作者 宋永继 赵静 刘爱霞 刘佳 陈霖 徐军 李伯安 毛远丽 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期301-303,共3页
目的克隆、表达高尔基体蛋白73（GP73），并制备单克隆抗体。方法用逆转录聚合酶链反应法从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增GP73编码序列，将产物与pQE31载体连接，转化人大肠埃希菌BL21，诱导表达后通过His标签进行纯化，用纯化后的蛋白免... 目的克隆、表达高尔基体蛋白73（GP73），并制备单克隆抗体。方法用逆转录聚合酶链反应法从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增GP73编码序列，将产物与pQE31载体连接，转化人大肠埃希菌BL21，诱导表达后通过His标签进行纯化，用纯化后的蛋白免疫BALB／c小鼠，采用常规的细胞融合技术制备单克隆抗体，并对其进行鉴定。结果重组载体经序列分析与报道序列同源性100％，并获得了重组蛋白。筛选出5株能稳定分泌抗GP73的单克隆抗体杂交瘤细胞株，免疫球蛋白类型有2株为IgGl类。WesternBlot印迹显示这些单抗能特异结合GP73蛋白。结论成功构建了人高尔基体蛋白73原核表达体系，并获得了单克隆抗体。 展开更多
关键词 高尔基体 蛋白质73 克隆 分子 抗体 单克隆 肝肿瘤
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重组人α干扰素单克隆抗体的研制及其应用 被引量：2
11
作者 吴美英 艾艳萍 +6 位作者 任韧 梁义鑫 李洁 宋文光 杨大军 程永庆 孙俭波 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期261-263,共3页
目的　研制抗干扰素的单克隆抗体 (McAb)及其应用。方法　应用杂交瘤技术 ,获得 4 0株抗重组人α干扰素的单克隆抗体细胞株 ;用ELISA方法检测腹水滴度 ,用辛酸法纯化McAb。结果　 4 0株细胞中 2E9、4G1能稳定分泌抗重组人α1b干扰素的... 目的　研制抗干扰素的单克隆抗体 (McAb)及其应用。方法　应用杂交瘤技术 ,获得 4 0株抗重组人α干扰素的单克隆抗体细胞株 ;用ELISA方法检测腹水滴度 ,用辛酸法纯化McAb。结果　 4 0株细胞中 2E9、4G1能稳定分泌抗重组人α1b干扰素的单克隆抗体 ,2C9为抗重组新型干扰素 ,2A7、4G10分泌抗重组人α干扰素 (α1b、α2b、α2a、)和重组集成干扰素、重组新型干扰素的单克隆抗体细胞系 ;体外连续传代 6个月 ,分泌抗体能力不变 ,特异性专一。 5株单克隆抗体均为IgG。采用辛酸方法提纯抗体纯度达到 95 %以上。粗制的重组人α干扰素经 4G10单克隆抗体亲和层析柱提纯后 ,获得的干扰素纯度 95 %以上 ,平均收率 93% ,残余鼠IgG含量 <10 0ng 剂量 (5 0 μg)。 2C9单克隆抗体亲和层析柱适用于纯化新型干扰素。结论　 4G10单克隆抗体亲和层析柱可以应用于大规模重组人α干扰素生产。 展开更多
关键词 重组人α干扰素 单克隆抗体 研制 应用
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单个B细胞抗体制备技术及其在肝脏疾病中的应用 被引量：4
12
作者 吕信萍 吴静 陈京涛 《临床肝胆病杂志》 CAS 2015年第12期2104-2109,共6页
单克隆抗体是具有高度特异性的抗体,目前已广泛应用于多种疾病,尤其是在各种病毒引发的肝损伤的治疗和研究中,显示出了不可替代的作用。近年来基于单个B淋巴细胞直接制备的人源性单克隆抗体具有抗原特异性高、免疫原性低及安全高效等优... 单克隆抗体是具有高度特异性的抗体,目前已广泛应用于多种疾病,尤其是在各种病毒引发的肝损伤的治疗和研究中,显示出了不可替代的作用。近年来基于单个B淋巴细胞直接制备的人源性单克隆抗体具有抗原特异性高、免疫原性低及安全高效等优点,越来越受到瞩目。随着单克隆抗体技术和PCR技术的不断改进,单个B淋巴细胞抗体制备技术也有了很大发展。尽管由单个B淋巴细胞产生作用于肝脏的单克隆抗体的相关报道并不多见,但其在肝脏疾病的治疗和研究中展现出了广阔的应用前景。简述了单个B淋巴细胞抗体制备技术的研究进展及单个B淋巴细胞制备的抗体在肝脏疾病中的应用。 展开更多
关键词 肝疾病 抗体 单克隆 单个B淋巴细胞 综述
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大肠癌相关新基因ST13单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定 被引量：2
13
作者 邵吉民 郑树 彭佳萍 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2001年第5期304-306,共3页
目的　研制抗 ST13蛋白单克隆抗体 ,建立检测方法 ,探讨 ST13基因的生物学特性。方法　按淋巴细胞杂交瘤技术制备抗 ST13蛋白单克隆抗体 ,并以亲和层析法纯化单抗 ,将此单抗作探针用 Western- Blot和免疫组化检测标本。结果　获得 3个抗... 目的　研制抗 ST13蛋白单克隆抗体 ,建立检测方法 ,探讨 ST13基因的生物学特性。方法　按淋巴细胞杂交瘤技术制备抗 ST13蛋白单克隆抗体 ,并以亲和层析法纯化单抗 ,将此单抗作探针用 Western- Blot和免疫组化检测标本。结果　获得 3个抗 ST13蛋白单抗的杂交瘤细胞株 ,杂交瘤细胞培养上清和腹水中单抗的 EL ISA效价为 10 4～ 10 5。以 ST13单抗作 Westerb- Blot和免疫组化证实该单抗具有高度特异性 ,可用于检测组织表达的ST13蛋白。结论　制备了具有高度特异性和高效价的抗 ST13蛋白单抗 ;建立了 Western- Blot及免疫组化检测组织表达的 ST13蛋白的方法。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 ST13基因 免疫印迹法 大肠癌 单克隆抗体 免疫组织化学
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抗旋毛虫成虫单克隆抗体的制备和保护性免疫的初步研究 被引量：1
14
作者 高欣 诸欣平 +3 位作者 黄敏君 郭增柱 周蕾 姜洪杰 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期297-300,共4页
目的　获得抗旋毛虫成虫的单克隆抗体 (单抗 )并初步研究其保护性免疫作用。方法　利用杂交瘤技术 ,用旋毛虫成虫抗原免疫的Balb/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2 / 0进行细胞融合。用免疫双扩散鉴定单抗亚类 ,免疫印迹鉴定单抗的特异... 目的　获得抗旋毛虫成虫的单克隆抗体 (单抗 )并初步研究其保护性免疫作用。方法　利用杂交瘤技术 ,用旋毛虫成虫抗原免疫的Balb/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2 / 0进行细胞融合。用免疫双扩散鉴定单抗亚类 ,免疫印迹鉴定单抗的特异性。小鼠尾静脉接种单抗进行被动免疫保护实验。结果　建立了 1株稳定分泌抗旋毛虫成虫单抗的细胞株。杂交瘤细胞培养上清液效价为1∶6 4 0 0 ,诱生腹水ELISA效价达 1∶2 0 4 80 0。经鉴定单克隆抗体类型为IgM ,可以识别旋毛虫成虫、肌幼虫及新生幼虫 ,相对分子质量约为 4 0 0 0 0蛋白 ,并且不与猪蛔虫、血吸虫、包虫、囊虫抗原发生交叉反应。单抗被动免疫后的减虫率为 5 5 .6 3%。结论　获得 1株具种特异性、保护性的单克隆抗体 。 展开更多
关键词 保护性免疫 旋毛虫 成虫 抗体 单克隆 制备
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抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体基因的真核载体构建和表达 被引量：2
15
作者 常德 张建华 +1 位作者 赵雪梅 梁平 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期542-547,共6页
目的 通过基因工程抗体技术构建和表达抗β-淀粉样多肽（Aβ）人-鼠嵌合抗体,减低鼠源单克隆抗体在临床应用中引起的人体免疫排斥反应.方法从分泌抗Aβ1-42鼠单克隆抗体杂交瘤细胞株中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增鼠... 目的 通过基因工程抗体技术构建和表达抗β-淀粉样多肽（Aβ）人-鼠嵌合抗体,减低鼠源单克隆抗体在临床应用中引起的人体免疫排斥反应.方法从分泌抗Aβ1-42鼠单克隆抗体杂交瘤细胞株中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增鼠源性抗体全长基因,并通过Blast对其序列进行分析;利用重组PCR技术拼接重轻链可变区及人IgG1的恒定区基因,并对重链Fc段进行定点突变以降低排斥反应;分别构建人-鼠嵌合基因重轻链表达载体,用脂质体法将其同时导入COS-7细胞中表达,并利用ELISA和免疫组织化学（SP法）对分泌的抗体功能和性质进行初步鉴定.结果 Blast比对分析结果显示克隆的基因序列符合小鼠抗体基因序列,将可变区基因与人IgG1的恒定区基因拼接以及Fc定点突变后,成功构建了嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达;ELISA和免疫组织化学方法证实了所分泌抗体的人源性和与Aβ的结合特异性.结论成功地构建和表达了抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体,为其在阿尔茨海默病的临床诊治中应用和进一步改造奠定了基础. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 抗体 单克隆 淀粉样Β蛋白
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贝伐珠单抗联合化疗一线治疗转移性乳腺癌的Meta分析 被引量：2
16
作者 黎小妍 张二红 +1 位作者 曲彩红 张平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第13期1020-1024,共5页
目的:通过Meta分析,探讨贝伐珠单抗联合化疗一线治疗转移性乳腺癌(MBC)的有效性和安全性。方法:通过PubMed、Medline、EMBASE、Cochrane图书馆、ASCO论文集、中国期刊全文数据库、万方数据库等数据库检索国内外已发表和未发表的相关文... 目的:通过Meta分析,探讨贝伐珠单抗联合化疗一线治疗转移性乳腺癌(MBC)的有效性和安全性。方法:通过PubMed、Medline、EMBASE、Cochrane图书馆、ASCO论文集、中国期刊全文数据库、万方数据库等数据库检索国内外已发表和未发表的相关文献。由2位评价者分别按检索策略收集资料,按纳入标准入选,主要对无疾病进展生存期(PFS)、总生存期(OS)、客观缓解率(ORR)和3～4级不良反应事件的发生率进行Meta分析。结果:共纳入5个随机对照临床研究(RCT),联合使用贝伐珠单抗一线化疗组PFS(RR=1.50;95%CI:1.31～1.72,P<0.001),OS(RR=1.06;95%CI:1.02～1.11,P=0.005)和ORR(RR=1.37;95%CI:1.26～1.49,P<0.001)与单药化疗组相比差异有统计学意义,3～4级高血压(RR=7.74;95%CI:1.33～45.00,P<0.001)和蛋白尿(RR=4.59;95%CI:2.15～9.79,P<0.001)的发生率与单药化疗组相比差异有统计学意义,而出血和血栓事件的发生率差异无统计学意义。结论:联合使用贝伐珠单抗一线治疗能显著提高MBC患者PFS、OS和ORR,可能增加高血压和蛋白尿的发生率,但不显著增加出血和血栓事件的发生率。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 肿瘤转移 单抗 单克隆 META分析
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单克隆抗体与葡萄球菌肠毒素A结合物的制备及其抗肝癌作用
17
作者 杨连君 隋延仿 陈志南 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2001年第3期209-212,共4页
目的制备超抗原(SAg)葡萄球菌肠毒素A(SEA)与抗人原发性肝细胞癌(简称肝癌)单克隆抗体(McAb)HAb18F(ab')2段的结合物,探讨其介导外周血单个核细胞(PBMC)的抗人肝癌作用.方法制备McAbHAb18,并用木瓜蛋白酶消化法制备其F(ab')2段... 目的制备超抗原(SAg)葡萄球菌肠毒素A(SEA)与抗人原发性肝细胞癌(简称肝癌)单克隆抗体(McAb)HAb18F(ab')2段的结合物,探讨其介导外周血单个核细胞(PBMC)的抗人肝癌作用.方法制备McAbHAb18,并用木瓜蛋白酶消化法制备其F(ab')2段.再用化学连接剂N-琥珀酰亚氨基-3-(2-二硫吡啶)丙酸酯(SPDP)制备HAb18F(ab')2-SEA结合物.结合物经快速蛋白质液相层析系统用凝胶色谱柱纯化后,用SDS-PAGE鉴定各收集峰.免疫组化ABC法鉴定结合物的抗体活性.MTT法鉴定结合物活化PBMC的活性及其介导PBMC的杀伤肝癌细胞作用.结果制备的HAb18F(ab')2-SEA结合物具有肝癌抗体活性和活化PBMC的功能.此结合物具有明显的介导PBMC杀伤肝癌细胞的作用,并与其浓度呈正相关.结论 SPDP是一种很好的蛋白质交联剂.HAb18 F(ab')2-SEA结合物导向治疗肝癌具有一定的发展前景. 展开更多
关键词 超抗原 葡萄球菌肠毒素 单克隆抗体 肝细胞癌 免疫治疗
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抗HIV-2 gp36基因工程抗原单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：1
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作者 赵正历 王润田 +3 位作者 王平 王从印 张征峥 邓郁青 《河北医科大学学报》 CAS 2007年第6期401-403,共3页
目的制备稳定产抗人类免疫缺陷病毒-2gp36基因工程抗原单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb,单抗)的杂交瘤细胞株及相应单抗,鉴定细胞株的生物学特性和单抗的免疫学特性及理化特性;初步探索用所制单抗构建检测gp36酶联免疫吸附实验(enz... 目的制备稳定产抗人类免疫缺陷病毒-2gp36基因工程抗原单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb,单抗)的杂交瘤细胞株及相应单抗,鉴定细胞株的生物学特性和单抗的免疫学特性及理化特性;初步探索用所制单抗构建检测gp36酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的适用性。方法分别用杂交瘤技术和常规免疫制备抗gp36的单抗和多抗(polyclonal antibody,PcAb,多抗)。纯化单抗和多抗,并标记辣根过氧化物酶。分别用纯化的单个单抗-单个单抗或单个单抗-多抗建立夹心ELISA。结果获得9株稳定分泌抗gp36单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的8E5单抗和辣根过氧化物酶标记的多抗建立的夹心ELISA可以检测到低至50μg/L的gp36。结论为人类免疫缺陷病毒-2感染的检测和研究初步提供了可资应用的单抗。 展开更多
关键词 HIV-2 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定
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检测抗肾综合征出血热病毒mAb在患者体内代谢的方法建立与应用 被引量：1
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作者 杨文涛 徐志凯 王海涛 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第16期1525-1527,共3页
目的 :研究抗HFRS病毒鼠源性mAb治疗HFRS患者后其体内血药浓度的变化以及抗鼠抗体的产生情况 .方法 :建立检测人血清中鼠IgG及抗鼠抗体的ELISA方法 ,并以此检测二期及三期临床试验的HFRS患者血清 1 6 5份 .结果 :建立的两种方法均特异性... 目的 :研究抗HFRS病毒鼠源性mAb治疗HFRS患者后其体内血药浓度的变化以及抗鼠抗体的产生情况 .方法 :建立检测人血清中鼠IgG及抗鼠抗体的ELISA方法 ,并以此检测二期及三期临床试验的HFRS患者血清 1 6 5份 .结果 :建立的两种方法均特异性强 ,敏感度高 ,稳定性好 .观察到血清中鼠IgG血药浓度在用药后 1～ 3d最高 ,平均为(1 .0 4± 0 .84 )mg/L ;随后迅速下降 ,6～ 1 0d组平均浓度为(0 .2 1± 0 .2 1 )mg/L ;用药 1 2d以后绝大多数已测不到 .而抗鼠抗体主要产生在用药 1 2d以后 ,阳性率为 78.0 % ,平均效价为 1∶5 5 7;用药后 6～ 1 0d组的阳性率为 2 8.6 % ,平均效价为1 3∶5 5 .结论 :抗HFRS病毒mAb(鼠IgG)在HFRS患者体内代谢较为迅速 ,而 1 2d后产生的抗鼠抗体不是影响其代谢的主要因素 . 展开更多
关键词 肾综合征性出血热 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定
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复发/难治性多发性骨髓瘤的新药治疗进展 被引量：1
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作者 陈姣 陈海飞 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2020年第6期531-537,共7页
目前,多发性骨髓瘤(MM)仍无法治愈,其难治与复发是临床面临的主要问题。除造血干细胞移植(HSCT)、嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法外,多种基于不同作用机制的新型药物及其联合应用方案不断涌现,为复发/难治性MM(RRMM)的治疗提供了新... 目前,多发性骨髓瘤(MM)仍无法治愈,其难治与复发是临床面临的主要问题。除造血干细胞移植(HSCT)、嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法外,多种基于不同作用机制的新型药物及其联合应用方案不断涌现,为复发/难治性MM(RRMM)的治疗提供了新的选择。为了进一步探索RRMM的药物治疗方案,笔者拟针对近年来国内临床应用较少或者正在进行临床研究的RRMM治疗新药进行综述。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 蛋白酶体抑制剂 免疫因子 抗体药物偶联物 Janus激酶抑制剂 抗体 单克隆 复发/难治性多发性骨髓瘤
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