期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到79篇文章
< 1 2 … 4 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
转美州拟鲽抗冻蛋白基因(AFP)番茄的叶片电导率测定 被引量：4
1
作者 傅桂荣 张初 +2 位作者 赵晓祥 汪清胤 黄永芬 《生物技术》 CAS CSCD 1997年第5期7-8,14,共3页
对转美州拟鲽抗冻蛋白基因（ADP）的第三代（D3）番茄及其对照，经低温处理后进行幼苗叶片组织电导率测定，发现转基因各组电导率均比对照明显降低，说明导入的AFP基因已经表达并使番茄获得抗寒性。
关键词 番茄 转基因番茄 美洲拟鲽 抗冻蛋白基因 电导率
下载PDF
外周血谷氨酰转肽酶mRNA-H亚型与AFP检测对评估原发性肝细胞肝癌病人术后预后价值的比较 被引量：5
2
作者 秦成坤 张启华 +2 位作者 韩国庆 徐健 吴泰璜 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2005年第8期541-543,共3页
目的深入探讨原发性肝细胞肝癌(HCC)病人外周血谷氨酰转肽酶(GGT)mRNA-H亚型表达与肝癌术后预后指标的关系,并与AFP比较,寻找评估肝癌预后更可靠的新指标。方法对78例HCC病人外周血应用逆转录聚合酶链反应方法检测GGTmRNA-H亚型;并运用... 目的深入探讨原发性肝细胞肝癌(HCC)病人外周血谷氨酰转肽酶(GGT)mRNA-H亚型表达与肝癌术后预后指标的关系,并与AFP比较,寻找评估肝癌预后更可靠的新指标。方法对78例HCC病人外周血应用逆转录聚合酶链反应方法检测GGTmRNA-H亚型;并运用放射免疫测定法检测AFP水平。对49例无门脉和(或)肝外转移的HCC病人进行随访研究。结果有肝内转移、门静脉癌栓及远处转移组其外周血GGTmRNA-H亚型阳性率显著高于对照组(P<0·05);在随访期内外周血GGTmRNA-H阳性组门脉及肝外转移的发生率比例明显高于阴性组(P<0·05),而AFP阳性及阴性组的转移发生率相似。结论HCC病人外周血细胞GGTmRNA-H亚型表达阳性者,术后出现转移的可能性高、预后差;GGTmRNA-H亚型与AFP相比,有望成为评估肝癌预后更可靠的新指标。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 GGT基因 afp 预后 MRNA-H亚型 原发性肝细胞肝癌 人外周血细胞 afp检测 谷氨酰转肽酶 肝癌病人
原文传递
AF0.3启动子调控的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤作用 被引量：4
3
作者 蔡晓坤 周俊立 +3 位作者 周鹤俊 张玲 吴健鸿 林菊生 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1334-1339,共6页
背景与目的:甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子调控下的目的基因能在AFP阳性肝癌组织中特异性表达;嘌呤核苷磷酸化酶(Escherichiacolipurinenucleosidephosphorylase,PNP)/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(6-methylpurine-2-deoxyribosid... 背景与目的:甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子调控下的目的基因能在AFP阳性肝癌组织中特异性表达;嘌呤核苷磷酸化酶(Escherichiacolipurinenucleosidephosphorylase,PNP)/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(6-methylpurine-2-deoxyriboside,MeP-dR)自杀基因系统具有强杀瘤效应。本研究旨在探讨AF0.3启动子调控下的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法:构建甲胎蛋白启动子AF0.3调控下PNP基因表达载体pAF0.3/PNP,导入AFP阳性肝癌细胞HepG2和阴性的肝癌细胞株SMMC7721,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的HepG2/0.3-PNP及SMMC7721/0.3-PNP细胞。RT-PCR检测二者在细胞中的表达。台盼蓝拒染法检测细胞增殖效应,MTT法和流式细胞仪检测两株细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)检测PNP基因产物活性。结果:不论有氧还是缺氧条件,HepG2/0.3-PNP对MeP-dR均较为敏感,SMMC7721/0.3-PNP则对MeP-dR完全不敏感。在任何一种条件下,HepG2/AF0.3-PNP在混合细胞中比例达25%后,就可致明显旁观者效应;而在同样条件下,SMMC7721/0.3-PNP不导致明显的旁观者效应。HPLC结果显示,pAF0.3/PNP在HepG2细胞中可以将MeP-dR转化为6-MP,但其在SMMC7721中则不具有转化活性。结论:AF0.3启动子调控下的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性HepG2细胞有较好的杀伤作用。 展开更多
关键词 AF0.3启动子 PNP/MeP-dR自杀基因系统 afp阳性 肝肿瘤 HEPG2细胞 基因治疗
下载PDF
含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP质粒诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡 被引量：5
4
作者 张焕铃 王俊霞 +4 位作者 尤红煜 刘健敏 郑龙 连伟光 刘福英 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期297-301,共5页
目的:观察含AFP基因调控序列的载体对AFP阳性肝癌细胞的靶向致凋亡作用。方法:将AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2 kb的AFP基因调控序列,构建pAFP-EGFP载体,分别转染人肝癌HepG2(AFP阳性)、人肝癌SMMC7721(AFP阴性)和人宫颈癌H... 目的:观察含AFP基因调控序列的载体对AFP阳性肝癌细胞的靶向致凋亡作用。方法:将AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2 kb的AFP基因调控序列,构建pAFP-EGFP载体,分别转染人肝癌HepG2(AFP阳性)、人肝癌SMMC7721(AFP阴性)和人宫颈癌HeLa(AFP阴性)细胞,荧光显微镜下观察EGFP荧光蛋白表达强度。引入P53基因片段,构建pAFP-P53-EGFP重组质粒,转染HepG2、SMMC7721和HeLa细胞,Western blotting检测各组细胞P53蛋白的表达,流式细胞术分析各组细胞凋亡率及细胞周期。结果:成功构建了pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP重组质粒。pAFP-EGFP转染后,AFP阳性的HepG2细胞中EGFP荧光蛋白表达显著高于AFP阴性的SMMC7721和HeLa细胞。pAFP-P53-EGFP转染后,HepG2细胞中P53蛋白的表达量明显高于SMMC7721和HeLa细胞;HepG2细胞的G1期细胞及细胞凋亡率明显高于SMMC7721和HeLa细胞[(66.7±0.25)%vs(50.5±0.18)%,(51.0±0.20)%,P<0.05;(2.65±0.08)%vs(0.42±0.03)%,(0.39±0.02)%,P<0.05],但S期细胞明显低于转染后SMMC7721和HeLa细胞[(20.1±0.22)%vs(29.8±0.18)%,(37.8±0.21)%,P<0.05]。结论:含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP载体可专一性地作用于AFP阳性肝癌细胞,引起肝癌细胞周期阻滞和凋亡。 展开更多
关键词 afp基因 肝癌细胞 表达调控 P53 细胞周期阻滞 细胞凋亡
下载PDF
蜂毒素基因重组腺病毒抗肝癌作用的实验研究 被引量：4
5
作者 凌昌全 李柏 +4 位作者 张晨 顾伟 李绍祥 黄雪强 张亚妮 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2004年第12期741-744,共4页
目的 将编码蜂毒素的基因用于肝癌治疗,为蜂毒素的临床应用提供实验依据。 方法 采用细菌内同源重组法构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白(AFP)启动子的重组腺病毒,X-gal染色检测其转染效率,MTT法测定其对肝癌细胞的抑制作用,并观察其体外转染... 目的 将编码蜂毒素的基因用于肝癌治疗,为蜂毒素的临床应用提供实验依据。 方法 采用细菌内同源重组法构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白(AFP)启动子的重组腺病毒,X-gal染色检测其转染效率,MTT法测定其对肝癌细胞的抑制作用,并观察其体外转染对肝癌细胞致瘤能力的影响及肿瘤内注射对荷肝癌裸鼠的抑瘤效果。 结果 蜂毒素基因mRNA在细胞中得到了转录;当感染复数(MOI)为10时,重组腺病毒在体外对BEL-7402人肝癌细胞的转染效率达到100％,体内转染亦有较高的效率。Ad-rAFP-Mel和Ad-rAFP对BEL7402细胞的抑制率分别为66.2％±2.7％和2.9％±2.3％(t=30.83,P<0.01)。Ad-CMV-Mel对BEL7402、SMMC7721及L02细胞的抑制率分别为58.9％±9.6％、65.9％±3.8％和31.7％±1.2％,而Ad-rAFP-Mel对BEL7402、SMMC7721及L02细胞的抑制率分别为66.2％±2.7％、16.1％±6.6％和7.5％±3.3％,与Ad-CMV-Mel组比较t=1.27、P=0.27,t=11.31、P<0.01和t=12.12、P<0.01。重组腺病毒体外转染后,肝癌细胞致瘤能力减弱,肿瘤内注射,裸鼠皮下移植瘤消退。 结论 蜂毒素基因重组腺病毒在体内外对肝癌均有特异性抑制作用,证明动物毒素基因作为抗肿瘤目的基因具有可行性。 展开更多
关键词 蜂毒素 BEL7402 肝癌细胞 重组腺病毒 afp L02细胞 抗肝癌作用 体外转染 同源重组 基因重组
原文传递
肿瘤特异性Survivin启动子与甲胎蛋白启动子的活性评价与比较 被引量：4
6
作者 况舸 黄爱龙 唐霓 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期440-442,共3页
目的研究并比较肿瘤特异性Survivin和甲胎蛋白(AFP)基因启动子在不同肝细胞癌细胞系中的转录活性,为肝癌靶向性基因治疗提供依据。方法采用聚合酶链反应法扩增获得Survivin和AFP 基因的启动子片段,并克隆入表达虫荧光素酶基因的报告质粒... 目的研究并比较肿瘤特异性Survivin和甲胎蛋白(AFP)基因启动子在不同肝细胞癌细胞系中的转录活性,为肝癌靶向性基因治疗提供依据。方法采用聚合酶链反应法扩增获得Survivin和AFP 基因的启动子片段,并克隆入表达虫荧光素酶基因的报告质粒中,通过测定荧光素酶报告基因的表达情况, 测定Survivin与AFP基因启动子的转录活性,同时采用巨细胞病毒启动子为对照,评价其转录活性水平。结果Survivin启动子在肝癌细胞中具有相当强的活性,其活性水平在高表达AFP的肝癌细胞中为AFP启动子的54～100倍,达到巨细胞病毒启动子活性的16%～21%。结论Survivin启动子在肝癌细胞系中具有较强的启动活性,可望开发成为新的肝癌靶向性基因治疗工具。 展开更多
关键词 Survivin 肿瘤特异性 甲胎蛋白启动子 活性评价 荧光素酶报告基因 巨细胞病毒启动子 靶向性基因治疗 聚合酶链反应法 基因启动子 荧光素酶基因 afp启动子 转录活性 活性水平 afp基因 启动子活性 肝癌细胞系 表达情况 治疗工具
原文传递
MDR1基因的表达与肝癌生物学行为指标的关系 被引量：4
7
作者 李海平 高波 +3 位作者 余宗涛 吕军 李文翠 张吉才 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第1期129-132,共4页
目的:通过对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中多药耐药基因(multid-rug resistance gene 1,MDR1)表达和生物学行为指标HBV、AFP、AST的检测,探讨肝癌中MDR1的表达特点及其与肝癌生物学行为的相互关系。方法:运用荧光定量PCR(flures... 目的:通过对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中多药耐药基因(multid-rug resistance gene 1,MDR1)表达和生物学行为指标HBV、AFP、AST的检测,探讨肝癌中MDR1的表达特点及其与肝癌生物学行为的相互关系。方法:运用荧光定量PCR(flurescence quantitative-PCR,FQ-PCR)技术检测MDR1基因在51例肝癌组织和10例正常肝组织中的表达,分析MDR1基因的表达与肝癌生物学特性之间的关系。结果:MDR1在肝癌中的表达为0.55±0.27,正常肝组织中的表达为0.23±0.10,(P<0.05)。表达与肿瘤Ed-mondson分级呈正相关(P<0.05)。HBV感染、AFP阳性、AST升高与MDR1基因表达明显呈正相关(r=0.463、0.473、0.299)。结论:肝癌中存在原发性耐药的现象,MDR1基因高表达在肝癌原发性耐药中可能起重要作用;HBV的检测可以作为肝癌化疗耐药的参考指标之一,血浆中AFP水平、AST变化可以作为动态监测MDR1表达的参考指标。 展开更多
关键词 多药耐药基因 肝癌 HBV感染 afp 表达
下载PDF
pEGFP-AFP-TK重组真核表达载体的构建及在PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体介导下转染肝癌细胞 被引量：4
8
作者 贾萌 彭健 +4 位作者 周健 陈伟 赵劲风 潘一峰 张阳德 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第3期473-477,共5页
目的:构建甲胎蛋白(AFP)启动子介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)重组真核表达载体,并检测其在AFP阳性肝癌细胞株的特异性表达。方法:PCR扩增AFP基因启动子、HSV-TK基因,将上述片段插入EGFP-N1载体的多克隆位点,构建pEGFP-AFP-TK重组... 目的:构建甲胎蛋白(AFP)启动子介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)重组真核表达载体,并检测其在AFP阳性肝癌细胞株的特异性表达。方法:PCR扩增AFP基因启动子、HSV-TK基因,将上述片段插入EGFP-N1载体的多克隆位点,构建pEGFP-AFP-TK重组表达载体,通过包裹PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体,经其介导,转染AFP阳性肝癌细胞株HepG2和AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721,利用增强型绿色荧光蛋白及Western blotting法检测目的基因在2种细胞系中的表达。结果与结论:肝癌特异性真核表达载体pEGFP-AFP-TK构建成功。利用增强型绿色荧光蛋白及Western blotting法可以检测到嵌合AFP启动子的pEGFP-AFP-TK重组真核表达载体能够特异性在AFP阳性的肝癌细胞株表达,而在AFP阴性的肝癌细胞株中基本不表达。 展开更多
关键词 甲胎蛋白启动子 单纯疱疹病毒胸苷激酶 自杀基因 PEG—PEI/Fe3O4纳米磁流体
下载PDF
纳米磁流体介导的重组pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性肝癌细胞HepG2的杀伤作用的体外实验 被引量：3
9
作者 罗勇 张阳德 +6 位作者 彭健 颜焕新 薛敦 吴凯 周琳 韩世伟 赵劲风 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期437-439,442,共4页
目的:探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用。方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下... 目的:探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用。方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下动态观察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2细胞中TK基因的表达情况,MTT法检测转染重组TK表达质粒后的细胞在更昔洛韦(GCV)作用下的存活率并观察旁观者效应,用流式细胞术分析HepG2细胞的凋亡。结果:纳米磁流体能将重组质粒pEG-FP-AFP-TK转入AFP阳性的HepG2细胞,其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Western blot证明转染的AFP阳性的HepG2细胞有TK基因的表达;MTT及流式细胞术分析说明TK基因发挥杀伤细胞作用。结论:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体,采用AFP增强子可使目的基因在HepG2细胞中特异性表达,并且在前药GCV的作用下,能使AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2发生凋亡及旁观者效应。 展开更多
关键词 纳米磁流体 afp TK基因 GCV
下载PDF
甲胎蛋白启动子驱动的蜂毒基因对肝癌细胞的特异性杀伤作用 被引量：3
10
作者 李柏 张晨 +4 位作者 李绍祥 黄雪强 张亚妮 万旭英 凌昌全 《浙江中医学院学报》 2003年第5期58-60,共3页
目的 :构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白 (AFP)启动子的重组腺病毒载体 ,探讨AFP启动子驱动的蜂毒素基因在体外对肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法 :采用细菌内高效同源重组法构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白 (AFP)启动子的重组腺病毒载体 ,X gal... 目的 :构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白 (AFP)启动子的重组腺病毒载体 ,探讨AFP启动子驱动的蜂毒素基因在体外对肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法 :采用细菌内高效同源重组法构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白 (AFP)启动子的重组腺病毒载体 ,X gal染色测定重组腺病毒对肝癌细胞的转染效率 ,MTT法测定蜂毒素基因转染对AFP阳性、阴性肝癌细胞及正常肝细胞增殖的影响。结果 :重组腺病毒对肝癌细胞具有较高的转染率 ,MTT法证明携AFP启动子和蜂毒素基因重组腺病毒转染后 ,AFP阳性肝癌细胞的增殖受到明显抑制 ,而对AFP阴性肝癌细胞及正常肝细胞无明显影响 ;含巨细胞病毒启动子和蜂毒素基因的重组腺病毒转染 ,则对AFP阳性及阴性肝癌细胞增殖均有抑制作用。结论 展开更多
关键词 肝癌 甲胎蛋白 启动子 蜂毒基因 特异性杀伤作用
下载PDF
缺氧诱导的肝癌靶向性基因治疗载体的构建和检测 被引量：3
11
作者 禄韶英 王燕 +2 位作者 孙学军 白纪刚 张伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第1期59-62,共4页
目的:构建缺氧诱导的AFP基因启动子(HRE-AFPp)调控的基因表达载体,并检测该调控元件的特异性和对缺氧诱导的反应性。方法:用PCR方法从人类基因组中扩增VEGF基因缺氧反应元件(HRE)和AFP基因启动子(AFPp),将上述片段与含有报告基因(强化... 目的:构建缺氧诱导的AFP基因启动子(HRE-AFPp)调控的基因表达载体,并检测该调控元件的特异性和对缺氧诱导的反应性。方法:用PCR方法从人类基因组中扩增VEGF基因缺氧反应元件(HRE)和AFP基因启动子(AFPp),将上述片段与含有报告基因(强化绿色荧光蛋白基因)载体pEGFP-1的多克隆位点连接,构建成为缺氧诱导的AFP基因启动子调控的基因表达载体(pEGFP-[HRE]AFPp)。用脂质体法将表达载体转染表达或不表达AFP的细胞系,G418筛选阳性克隆,荧光显微镜观测重组AFPp的活性,并用流式细胞术检测缺氧诱导是否对其有调控作用。结果:成功地将HRE、AFPp克隆到报告基因载体pWGFP-1的多克隆位点,酶切鉴定和DNA序列分析无误,荧光显微镜观测证实EGFP能在AFP阳性肝癌细胞特异性表达,流式细胞术检测证实,16 h缺氧诱导能增强EGFP的表达(P<0．01)。结论:缺氧诱导的AFP顺式作用元件修饰的基因治疗载体,在基因转录水平特异性调控目的基因的表达,为下一步将其作为肝癌基因治疗载体奠定了基础。 展开更多
关键词 甲胎蛋白基因 缺氧反应元件 肝细胞癌
下载PDF
人肝癌细胞MHCC-97H裸小鼠原位移植模型的建立 被引量：2
12
作者 张东昌 马勇 +1 位作者 俞媛 陈立军 《武警医学院学报》 CAS 2009年第7期580-583,共4页
【目的】建立人肝癌细胞MHCC-97H原位移植裸鼠模型并检测其中甲胎蛋白(AFP)基因的表达。【方法】原位移植造模;提取模型肝癌组织中的总RNA和总蛋白,采用RT-PCR及Western blotting两种方法分别检测AFP基因在转录水平和翻译水平的表达情... 【目的】建立人肝癌细胞MHCC-97H原位移植裸鼠模型并检测其中甲胎蛋白(AFP)基因的表达。【方法】原位移植造模;提取模型肝癌组织中的总RNA和总蛋白,采用RT-PCR及Western blotting两种方法分别检测AFP基因在转录水平和翻译水平的表达情况。【结果】模型肝癌组织在转录和翻译两个水平均检测出AFP基因的表达。【结论】该肝癌裸鼠模型建立成功,可作为肝癌研究的动物模型。 展开更多
关键词 肝癌细胞 原位移植 afp基因
下载PDF
基因重组构建AFP mRNA的real time RT-PCR标准定量模板 被引量：2
13
作者 王建国 聂常富 +5 位作者 李荣 荆晓岳 王福利 曹淑娥 张宴 何蕴韶 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第2期228-229,共2页
目的 :构建AFPmRNA的realtimeRT PCR标准定量模板。方法 :提取肝瘤细胞株BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,与PMD 1 8T载体连接构建重组质粒。结果 :重组质粒的阳性克隆效率为81 .8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插... 目的 :构建AFPmRNA的realtimeRT PCR标准定量模板。方法 :提取肝瘤细胞株BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,与PMD 1 8T载体连接构建重组质粒。结果 :重组质粒的阳性克隆效率为81 .8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插入PMD 1 8T载体内。结论 :成功构建了AFPmRNA的标准定量模板 ,可应用于该基因的realtimeRT 展开更多
关键词 肝癌 基因重组 afp MRNA REAL TIME RT-PCR
下载PDF
RNAi干扰Notch-1对人肝癌细胞BEL-7402 AFP表达及细胞增殖的影响 被引量：1
14
作者 刘虹 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期27-30,共4页
目的采用RNAi干扰细胞通讯因子Notch-1对肝癌细胞BEL-7402中AFP表达及细胞增殖的影响。方法通过siRNA抑制BEL-7402细胞中Notch-1的表达,采用qRT-PCR和Western blotting法,检测其对AFP表达的影响,采用MTI法测定细胞增殖情况。结果 siRNA... 目的采用RNAi干扰细胞通讯因子Notch-1对肝癌细胞BEL-7402中AFP表达及细胞增殖的影响。方法通过siRNA抑制BEL-7402细胞中Notch-1的表达,采用qRT-PCR和Western blotting法,检测其对AFP表达的影响,采用MTI法测定细胞增殖情况。结果 siRNA抑制Notch-1达后,AFP mRNA及其蛋白水平显著下降,RNAi干扰组与对照组比较BEL-7402细胞生长明显受抑制(P<0.01)。结论 Notch-1 siRNA可以下调肝癌细胞BEL-7402中AFP mRNA及其蛋白的表达水平,抑制BEL-7402细胞的生长,提示Notch-1基因在肝癌细胞的发生、发展中具有重要作用,Notch-1可能是AFP过量表达肝癌的治疗靶点。 展开更多
关键词 afp基因 Notch-1基因 肝癌
下载PDF
正电荷载基因纳米微泡的超声成像及靶向杀伤肝癌细胞的研究 被引量：2
15
作者 王玲 李嘉 +4 位作者 卢航青 高启 丁粉干 袁晨燕 张东生 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1667-1673,1700,共8页
目的:制备载基因纳米微泡并探讨其体内外超声成像和靶向杀伤肝癌细胞的效果。方法:采用薄膜水化-机械震荡法制备磷脂为壳膜、六氟化硫(suphurhexafluoride,SF6)气体为核心的正电荷纳米微泡,再偶联甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)启动... 目的:制备载基因纳米微泡并探讨其体内外超声成像和靶向杀伤肝癌细胞的效果。方法:采用薄膜水化-机械震荡法制备磷脂为壳膜、六氟化硫(suphurhexafluoride,SF6)气体为核心的正电荷纳米微泡,再偶联甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)启动子的单纯疱疹病毒胸苷激酶(simplex herpes virus thymidine kinase,HSV-TK)质粒DNA制备载基因纳泡。对其形态、平均粒径、zeta电位、DNA结合力、基因转染进行检测;然后对其体内外超声成像特性进行考察;最后采用CCK-8和流式细胞(FCM)分析检测载基因纳泡联合超声靶向微泡击破(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)技术对BEL-7402和SMCC-7721细胞的杀伤作用。结果:电镜显示纳泡呈圆球形壳核结构;平均水合粒径约为667 nm,带正电;琼脂糖凝胶电泳显示质量比≥5时,纳泡可有效结合质粒DNA;体内外超声显示载基因纳泡具有良好的超声对比增强特性;RT-PCR检测显示纳泡联合UTMD能使HSV-TK在AFP阳性肝癌细胞内表达。CCK-8和FCM分析显示载基因纳泡+UTMD组能显著抑制BEL-7402细胞的增殖和诱导其凋亡,与其他组相比差异具有显著性(P <0.05)。结论:具有良好超声成像功能的载基因纳泡能够高效靶向杀伤AFP阳性的肝癌细胞。 展开更多
关键词 纳米微泡 超声成像 甲胎蛋白 基因治疗 超声靶向微泡击破
下载PDF
腺病毒介导蜂毒素基因转染对HepG2细胞生长及 AFP表达的影响(英文) 被引量：1
16
作者 李绍祥 文军慧 凌昌全 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期143-147,共5页
目的 :将蜂毒素基因置于甲胎蛋白 (AFP)转录调控元件 (r AFP)驱动之下 ,构件重组腺病毒载体 ,观察蜂毒素基因转染对肝癌细胞生长及 AFP表达的影响。 方法 ::将蜂毒素基因置于 r AFP之后 ,用细菌内高效同源重组法将目的基因重组入腺病毒... 目的 :将蜂毒素基因置于甲胎蛋白 (AFP)转录调控元件 (r AFP)驱动之下 ,构件重组腺病毒载体 ,观察蜂毒素基因转染对肝癌细胞生长及 AFP表达的影响。 方法 ::将蜂毒素基因置于 r AFP之后 ,用细菌内高效同源重组法将目的基因重组入腺病毒质粒中 ,将腺病毒质粒用 Pac 酶切线性化后 ,用脂质体介导转染 2 93细胞进行腺病毒的包装。携有蜂毒素基因的腺病毒感染肝癌细胞后 ,RT- PCR实验观察蜂毒素基因是否发生转录 ;MTT法测定蜂毒素基因转染对肝癌细胞增殖的影响 ;EL ISA双抗体夹心法定量检测 AFP。 结果 :RT- PCR实验表明蜂毒素基因转染肝癌细胞后可以被转录 ;蜂毒素基因在 r AFP的控制下 ,可以特异性的抑制 AFP阳性肝癌细胞的增殖 ,并降低其 AFP的生成量。结论 :蜂毒素基因转染对肝癌细胞的生长及 AFP的表达具有抑制作用 。 展开更多
关键词 腺病毒介导 蜂毒素 基因转染 HEPG2细胞 afp 基因表达 甲胎蛋白 肝癌 癌细胞生长
下载PDF
华北落叶松冷驯化与非冷驯化mRNA差异显示初步分析 被引量：1
17
作者 周怀军 左永忠 +3 位作者 李坤霞 王润利 安连荣 李帅英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期32-34,共3页
以华北落叶松(Larixprincipis-rupprechtii)幼苗为研究材料,采用冷驯化和非冷驯化两个处理分别提取RNA,然后逆转录成cDNA,PCR扩增,6%变性丙烯酰胺测序胶电泳,银染显带。结果表明:华北落叶松冷驯化与非冷驯化基因表达有一定差异,经二次... 以华北落叶松(Larixprincipis-rupprechtii)幼苗为研究材料,采用冷驯化和非冷驯化两个处理分别提取RNA,然后逆转录成cDNA,PCR扩增,6%变性丙烯酰胺测序胶电泳,银染显带。结果表明:华北落叶松冷驯化与非冷驯化基因表达有一定差异,经二次扩增初步确定冷驯化处理的扩增产物中在500bp处有一条抗冻特异带。同时,对冷驯化不表达片段进行了分析。 展开更多
关键词 华北落叶松 MRNA差异显示 PCR扩增 抗冻蛋白基因片段
下载PDF
利用细菌表达dsRNA介导黄粉虫抗冻蛋白基因的RNA干扰 被引量：2
18
作者 石萌 刘小宁 马纪 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期113-119,共7页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是研究基因功能的一种重要工具。为了利用RNAi技术对黄粉虫抗冻蛋白(Antifreeze protein,AFP)基因的非抗冻功能进行验证,将黄粉虫抗冻蛋白基因Tmafp433的相应干扰片段构建至L4440干扰载体并转化大肠杆菌H... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是研究基因功能的一种重要工具。为了利用RNAi技术对黄粉虫抗冻蛋白(Antifreeze protein,AFP)基因的非抗冻功能进行验证,将黄粉虫抗冻蛋白基因Tmafp433的相应干扰片段构建至L4440干扰载体并转化大肠杆菌HT115(DE3)菌株,利用IPTG诱导表达特异的afp基因相应dsRNA,纯化后注射黄粉虫幼虫,通过实时荧光定量PCR检测afp基因在mRNA水平的变化。结果显示含有L4440-Tmafp重组质粒的HT115菌株可以表达干扰afp基因的dsRNA,命名为Tmafp-dsRNA。用Tmafp-dsRNA注射黄粉虫24 h后,Tmafps的表达受到显著抑制,相比对照下降了60.8%。本研究表明通过注射dsRNA可有效抑制黄粉虫afp基因的表达。 展开更多
关键词 黄粉虫 抗冻蛋白基因 RNA干扰 双链RNA L4440载体
下载PDF
外周血甲胎蛋白mRNA对肝癌诊断价值的探讨 被引量：1
19
作者 朱云松 杨大明 +4 位作者 姚登福 李玉明 钱俊波 樊锦河 葛振明 《临床内科杂志》 CAS 2008年第9期621-623,共3页
目的探讨外周血甲胎蛋白(AFP)基因在原发性肝癌(HCC)早期诊断和鉴别诊断中的临床价值。方法从肝病患者外周血中制备RNA,以巢式聚合酶链反应(RT-PCR)扩增AFP基因。测定20份肝癌、癌周和远癌组织中总RNA浓度。结果远癌和癌周组织RNA浓度... 目的探讨外周血甲胎蛋白(AFP)基因在原发性肝癌(HCC)早期诊断和鉴别诊断中的临床价值。方法从肝病患者外周血中制备RNA,以巢式聚合酶链反应(RT-PCR)扩增AFP基因。测定20份肝癌、癌周和远癌组织中总RNA浓度。结果远癌和癌周组织RNA浓度明显高于癌灶组织(P<0.05),癌组织中AFP基因检出率均为100%;肝癌患者外周血中AFP基因的检出率为53.7%,明显高于肝硬化、慢性肝炎、急性肝炎和肝外肿瘤组患者(P<0.01);在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肝癌中,AFP基因阳性率分别为33.3%、26.3%和71.8%;肝内有无转移的肝癌组间存在明显差异(P<0.05),尤其在伴有肝外远处转移的肝癌中,AFP基因全数阳性(100%);在AFP<200 ng/ml肝癌中,AFP基因阳性率为50.0%;与肝癌大小间未见统计学差异(P>0.05)。结论分析外周血中AFP基因有助于肝癌的诊断、肝癌远处转移判别及肝癌术后复发的监测。 展开更多
关键词 肝癌 afp基因 RT-巢式PCR
原文传递
原位移植人肝癌裸鼠模型AFP基因的异常甲基化检测 被引量：1
20
作者 俞媛 陈立军 +1 位作者 史娜 王玮 《武警医学院学报》 CAS 2011年第8期622-624,F0003,共4页
【目的】研究原位异种移植肝癌模型AFP基因启动子区异常甲基化状态的检出状况,探讨其在肝癌发病机制研究中的应用。【方法】采用甲基化特异性PCR(MSP)和亚硫酸氢盐测序法(BSP),以人成纤维细胞基因组甲基化状态为正常对照,对10例原位移... 【目的】研究原位异种移植肝癌模型AFP基因启动子区异常甲基化状态的检出状况,探讨其在肝癌发病机制研究中的应用。【方法】采用甲基化特异性PCR(MSP)和亚硫酸氢盐测序法(BSP),以人成纤维细胞基因组甲基化状态为正常对照,对10例原位移植人肝癌裸鼠模型肝癌组织中AFP基因启动子区甲基化状态进行分析和定位。【结果】10例模型肝癌组织中AFP基因启动子区甲基化状态均发生了不同程度的异常。【结论】原位移植人肝癌模型的肝癌组织中可以检测到AFP基因启动子区的去甲基化变化,MSP和BSP作为简便而有效的技术组合可以应用于基因甲基化状态的鉴定中。 展开更多
关键词 原位移植 afp基因 甲基化 肝癌
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 4 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部