目的探讨三氧化二砷对人恶性黑素瘤A375细胞株细胞周期、增殖、凋亡及新癌基因PPO(proliferation and phosphorylation oncogene)表达的影响。方法培养人恶性黑色素瘤A375细胞株,采用MTT法检测三氧化二砷在不同浓度和不同时间下对A375...目的探讨三氧化二砷对人恶性黑素瘤A375细胞株细胞周期、增殖、凋亡及新癌基因PPO(proliferation and phosphorylation oncogene)表达的影响。方法培养人恶性黑色素瘤A375细胞株,采用MTT法检测三氧化二砷在不同浓度和不同时间下对A375细胞增殖的影响,流式细胞术分析三氧化二砷对细胞周期及凋亡的影响,倒置相差显微镜观察药物处理后对人A375细胞的细胞分化及形态的影响,免疫细胞化学(SP)法检测三氧化二砷对PPO蛋白表达的影响。结果 MTT法证实三氧化二砷在1～10μmol/L浓度范围内对A375细胞有明显的增殖抑制作用,呈现明显的剂量和时间依赖效应关系。流式细胞术检测发现,随着药物浓度的增加,G0/G1的细胞逐渐减少(P<0.01),S期的比例显著增加,出现S期阻滞。倒置显微镜观察发现细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。免疫细胞化学法检测PPO蛋白主要表达于A375细胞胞浆内,染色呈棕黄色。三氧化二砷作用48 h后,随着药物浓度的增加,PPO的染色程度逐渐减弱,差异具有显著性(P<0.01)。结论三氧化二砷能够显著抑制A375细胞株增殖,并诱导凋亡发生,且与三氧化二砷的浓度和作用时间成正相关,其作用机制可能是通过下调新癌基因PPO的表达发挥作用。展开更多
目的研究补骨脂素对A375细胞黑素合成的影响以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的作用。方法将补骨脂素作用于A375细胞,采用MTT法检测细胞活性;Na OH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;RT-PCR法测定TYR、酪氨酸酶相...目的研究补骨脂素对A375细胞黑素合成的影响以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的作用。方法将补骨脂素作用于A375细胞,采用MTT法检测细胞活性;Na OH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;RT-PCR法测定TYR、酪氨酸酶相关蛋白-1和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-1、TRP-2)以及ERK1、ERK2、JNK2这3个MAPK信号通路关键蛋白激酶的m RNA表达。结果补骨脂素在安全剂量下可显著抑制A375细胞黑素合成及TYR活性,1滋mol·L-1补骨脂素能明显下调A375细胞TYR、TRP-1、TRP-2以及ERK1、ERK2、JNK2 m RNA表达。结论推测补骨脂素通过抑制ERK1、ERK2、JNK2的表达来抑制TYR活性和/或下调TYR、TRP-1及TRP-2 m RNA表达,抑制A375细胞的黑素合成。展开更多
文摘目的研究补骨脂素对A375细胞黑素合成的影响以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的作用。方法将补骨脂素作用于A375细胞,采用MTT法检测细胞活性;Na OH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;RT-PCR法测定TYR、酪氨酸酶相关蛋白-1和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-1、TRP-2)以及ERK1、ERK2、JNK2这3个MAPK信号通路关键蛋白激酶的m RNA表达。结果补骨脂素在安全剂量下可显著抑制A375细胞黑素合成及TYR活性,1滋mol·L-1补骨脂素能明显下调A375细胞TYR、TRP-1、TRP-2以及ERK1、ERK2、JNK2 m RNA表达。结论推测补骨脂素通过抑制ERK1、ERK2、JNK2的表达来抑制TYR活性和/或下调TYR、TRP-1及TRP-2 m RNA表达,抑制A375细胞的黑素合成。
