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黄嘌呤氧化酶酶学性质及共价交联固定化 被引量:4
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作者 张玉然 辛瑜 +2 位作者 杨海麟 张玲 王武 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-21,共6页
研究了节杆菌Arthrobacter M3黄嘌呤氧化酶酶学性质,并利用修饰的琼脂糖介质及大孔阴离子交换树脂固定化黄嘌呤氧化酶,提高酶热稳定性。研究发现,该酶为异质二聚体,相对分子量为135 000;最适反应温度为37℃,最适反应pH为7.5。固定化结... 研究了节杆菌Arthrobacter M3黄嘌呤氧化酶酶学性质,并利用修饰的琼脂糖介质及大孔阴离子交换树脂固定化黄嘌呤氧化酶,提高酶热稳定性。研究发现,该酶为异质二聚体,相对分子量为135 000;最适反应温度为37℃,最适反应pH为7.5。固定化结果表明,以修饰的琼脂糖介质共价交联固定化的酶热稳定性均优于大孔阴离子交换树脂类,其中以谷氨酸为连接臂的琼脂糖介质(Sepharose-Glu)固定化效果最佳。在50℃下保温3 h,相比于游离酶酶活仅剩余8.0%,Sepharose-Glu介质固定化的酶仍保留48.3%的酶活,半衰期提高了1.6倍,酸碱耐受性亦优于游离酶。 展开更多
关键词 黄嘌呤氧化酶 A rthrobacter M3 酶学性质 稳定性 固定化
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高效异养硝化细菌的分离筛选及多样性分析 被引量:4
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作者 胡甜 江林峰 +3 位作者 陈青云 余知和 毛涛 李利 《湖北农业科学》 2015年第5期1181-1185,共5页
采用生长曲线指导的富集培养法,从生活污水排放渠中分离筛选出高效异养硝化细菌,并对其多样性进行了分析。结果显示,从分离得到的27株异养硝化细菌中筛选出6株高效菌株Ni1-2、Ni1-8、Ni2-5、Ni2-7、Ni3-1和Ni3-4,其48 h氨氮去除率分别为... 采用生长曲线指导的富集培养法,从生活污水排放渠中分离筛选出高效异养硝化细菌,并对其多样性进行了分析。结果显示,从分离得到的27株异养硝化细菌中筛选出6株高效菌株Ni1-2、Ni1-8、Ni2-5、Ni2-7、Ni3-1和Ni3-4,其48 h氨氮去除率分别为88.9%、76.6%、87.7%、93.1%、99.2%和91.4%;结合菌落形态、革兰氏染色反应、扫描电镜观察和16S r DNA序列分析,发现菌株的种类较为丰富,初步确定Ni1-2和Ni1-8为节杆菌属(Arthrobacter),Ni2-5和Ni3-1为产碱杆菌属(Alcaligenes),Ni2-7为无色杆菌属(Achromobacter),Ni3-4为芽孢杆菌属(Bacillus)。该结果可为高效异养硝化菌的分离筛选及其多样性分析提供参考。 展开更多
关键词 异养硝化 节杆菌属(Arthrobacter) 产碱杆菌属(Alcaligenes) 无色杆菌属(Achromobacter) 芽孢 杆菌属(Bacillus)
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谷氨酰胺高产菌株在不同NH_4^+浓度下的基因差异表达 被引量:3
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作者 丁邦琴 李铁军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期41-45,共5页
GH15菌株在高NH_4^+浓度下能够积累过量的谷氨酰胺,并且随着NH_4^+浓度的增加,谷氨酰胺的产量逐渐增加,但谷氨酸的产量却逐渐降低,这表明该菌株在不同NH_4^+浓度下其高胞内的氮代谢及调控行为有很大的改变。利用抑制消减杂交技术分别构... GH15菌株在高NH_4^+浓度下能够积累过量的谷氨酰胺,并且随着NH_4^+浓度的增加,谷氨酰胺的产量逐渐增加,但谷氨酸的产量却逐渐降低,这表明该菌株在不同NH_4^+浓度下其高胞内的氮代谢及调控行为有很大的改变。利用抑制消减杂交技术分别构建了NH_4^+菌株在高NH_4^+浓度下和低NH_4^+浓度下的基因表达抑制消减文库。通过对文库的测序得到了35个差异表达的基因。这些差异基因主要是细胞生长相关基因、能量代谢基因以及氨基酸合成代谢相关的基因,我们认为正是这些基因差异导致该菌株在高NH_4^+下高产谷氨酰胺。 展开更多
关键词 菌球形节杆菌(A rthrobacter globiformis) 谷氨酰胺 抑制消减杂交 差异表达基因
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硅酸盐细菌的分离及溶磷、解钾和脱硅活性研究 被引量:2
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作者 张传建 袁文功 +3 位作者 魏云林 张琦 林连兵 季秀玲 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期100-104,共5页
利用硅酸盐细菌分离培养基从云南省文山州砚山红舍克铝土矿区分离出一株硅酸盐细菌YSHSK13,通过形态、生理生化特征及16S rRNA基因测序分析,将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)的菌株;对其溶磷、解钾和脱硅活性的研究分析表明,... 利用硅酸盐细菌分离培养基从云南省文山州砚山红舍克铝土矿区分离出一株硅酸盐细菌YSHSK13,通过形态、生理生化特征及16S rRNA基因测序分析,将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)的菌株;对其溶磷、解钾和脱硅活性的研究分析表明,在溶磷、解钾和脱硅培养基中培养10 d和20 d后,可溶性硅、钾和磷的含量分别比典型标准硅酸盐细菌菌株增加3.16、1.77、1.04倍和4.48、2.24、2.08倍,结果表明该菌株具有较强的溶磷、解钾和脱硅活性。 展开更多
关键词 硅酸盐细菌 节杆菌属 脱硅 溶磷 解钾
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降烟碱细菌-烟草节杆菌K9的分离及鉴定 被引量:21
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作者 夏振远 雷丽萍 +1 位作者 吴玉萍 郭荣君 《中国烟草科学》 CSCD 2006年第2期1-4,共4页
采用烟碱为唯一碳源的选择性培养基,对烟草、植烟土壤及烟草污水中的细菌进行选择性分离,共分离得到97株能够分解利用烟碱的细菌,其中菌株K9分解能力最强。经生理生化分析以及16SrDNA序列同源性分析,鉴定为烟草节杆菌(Arthrobacternicot... 采用烟碱为唯一碳源的选择性培养基,对烟草、植烟土壤及烟草污水中的细菌进行选择性分离,共分离得到97株能够分解利用烟碱的细菌,其中菌株K9分解能力最强。经生理生化分析以及16SrDNA序列同源性分析,鉴定为烟草节杆菌(Arthrobacternicotianae)。为微生物降烟碱的研究及应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 烟碱 生物降解 16S rDNA鉴定 烟草节杆菌
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节杆菌AD26的分离鉴定及其与假单胞菌ADP对阿特拉津的联合降解 被引量:10
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作者 朱希坤 李清艳 蔡宝立 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期627-632,共6页
用富集培养法,从农药厂的工业废水中分离到高效降解除草剂阿特拉津的AD26菌株,通过16SrRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为节杆菌(Arthrobacter sp.)。降解基因的PCR分析表明,AD26含有阿特拉津降解基因trzN和atzBC,它能以阿特拉津为唯一氮... 用富集培养法,从农药厂的工业废水中分离到高效降解除草剂阿特拉津的AD26菌株,通过16SrRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为节杆菌(Arthrobacter sp.)。降解基因的PCR分析表明,AD26含有阿特拉津降解基因trzN和atzBC,它能以阿特拉津为唯一氮源、蔗糖或柠檬酸钠为碳源生长,将阿特拉津降解成氰尿酸,降解速度快但降解不完全。假单胞菌(Pseudomonas sp.)ADP是Wackett实验室分离的阿特拉津降解菌株,含有阿特拉津降解基因atzABCDEF,能以阿特拉津为唯一氮源、柠檬酸钠为碳源(不能以蔗糖为碳源)生长,将阿特拉津降解成NH3和CO2,降解完全但降解速度慢。在阿特拉津浓度为200mg·L-1的无机盐培养基中进行的AD26和ADP混合培养表明,它们对阿特拉津的降解发生了互补和增强作用,两个菌株能在以阿特拉津为唯一氮源、蔗糖为碳源的培养基中生长,而且生长和降解速率都好于单个菌株,培养72h后阿特拉津去除率达到99.9%,其中76.7%的阿特拉津被降解成NH3和CO2。这表明由节杆菌AD26和假单胞菌ADP组成的混合菌株在阿特拉津废水处理和污染土壤的生物修复中有很好的应用潜力。 展开更多
关键词 节杆菌AD26 假单胞菌ADP 阿特拉津 联合降解
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祁连山冻土区天然气水合物DK-2钻孔微生物群落 被引量:6
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作者 韩路 武淑娇 +2 位作者 李建华 吕杰 祝有海 《地质通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1874-1882,共9页
对青海省祁连山永久冻土区天然气水合物DK-2钻孔的11件样品进行分析,通过微生物群落分析来探寻水合物层样品与非水合物层样品的差别。在11件样品中均发现了细菌16S rDNA,未检测到海洋天然气水合物地区常见的古菌16S rDNA、mcrA(Ⅰ,Ⅱ)、... 对青海省祁连山永久冻土区天然气水合物DK-2钻孔的11件样品进行分析,通过微生物群落分析来探寻水合物层样品与非水合物层样品的差别。在11件样品中均发现了细菌16S rDNA,未检测到海洋天然气水合物地区常见的古菌16S rDNA、mcrA(Ⅰ,Ⅱ)、pmoA、mmoX和mxaF。分析得到的细菌16S rDNA分属5个门,包括变形杆菌门、放线菌门、拟杆菌门、厚壁菌门和异常球菌-栖热菌门,随着样品深度的增加,细菌多样性有降低的趋势。对非水合物层样品DK2-19和水合物层样品DK2-25进行细菌系统发育树分析,发现这2个样品群落结构相差较大。水合物层样品与非水合物层样品细菌群落对比后发现,水合物层样品中γ-变形杆菌的比例低于非水合物层样品中γ-变形杆菌的比例,而Arthrobacter属多发现于非水合物层的样品中。 展开更多
关键词 祁连山冻土区 天然气水合物 微生物群落 γ-变形杆菌 Arthrobacter
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球形节杆菌尿酸酶的表达、纯化及其活性 被引量:3
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作者 陈丹 韩晶 +7 位作者 史洪娜 刘娟 沈林 霍烛 王维龙 孙志丹 李鼎锋 刘勇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期351-355,360,共6页
目的在大肠埃希菌中表达球形节杆菌尿酸酶(uricase,Uri),并进行纯化和检测其活性。方法根据大肠埃希菌遗传密码子偏爱性,结合原核翻译起始序列的局部二级结构自由能最小化原则,优化设计编码Uri蛋白的核苷酸序列,经PCR扩增球形节杆菌uri... 目的在大肠埃希菌中表达球形节杆菌尿酸酶(uricase,Uri),并进行纯化和检测其活性。方法根据大肠埃希菌遗传密码子偏爱性,结合原核翻译起始序列的局部二级结构自由能最小化原则,优化设计编码Uri蛋白的核苷酸序列,经PCR扩增球形节杆菌uri基因,克隆至载体pET43.1a,构建重组表达质粒pET43.1a-uri,转化感受态大肠埃希菌BL21-odonPlus(DE3)-RIPL,IPTG诱导表达。表达产物经硫酸铵粗纯及DEAE琼脂糖凝胶层析纯化后,经SDS-PAGE分析纯度;参考Uri产品说明书测定蛋白酶活性,并确定其最佳检测温度及pH值。结果重组表达质粒pET43.1a-uri经酶切及测序鉴定构建正确;重组蛋白相对分子质量约33 000,以可溶性形式存在,表达量约占菌体总蛋白的40%;纯化后纯度可达90%以上;酶活性达13.2 U/mg,酶活性检测最佳反应温度为40℃,最佳反应pH值为9.0。结论成功于大肠埃希菌中表达了uri基因,并获得高纯度的Uri蛋白,其酶学性质与天然的球形节杆菌尿酸酶基本一致,为其大规模稳定生产及尿酸酶法检测试剂的配制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 球形节杆菌 尿酸酶 原核表达 纯化 生物学活性
原文传递
节杆菌P-1和红球菌J-5处理含PVA废水研究 被引量:1
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作者 陈朝琼 廖银章 +1 位作者 李旭东 杨俊仕 《水处理技术》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期47-49,67,共4页
本文用节杆菌P-1和红球菌J-5处理含聚乙烯醇(PVA)的废水,分别考察了PVA浓度、HRT(水力停留时间)、温度等对PVA去除效果的影响。结果表明,节杆菌P-1对低浓度PVA废水的处理效果分别比红球菌J-5、活性污泥高10%、40%,出水可达到排放标准;P-... 本文用节杆菌P-1和红球菌J-5处理含聚乙烯醇(PVA)的废水,分别考察了PVA浓度、HRT(水力停留时间)、温度等对PVA去除效果的影响。结果表明,节杆菌P-1对低浓度PVA废水的处理效果分别比红球菌J-5、活性污泥高10%、40%,出水可达到排放标准;P-1和J-5的最适HRT分别为12、18h,最适温度均为25~30℃。同时还考察了连续流小试试验效果和高浓度PVA废水的处理工艺,结果显示,节杆菌P-1运行稳定性好,出水能够稳定达标排放;高浓度废水经J-5菌处理12h后用P-1菌处理12h,出水能达标排放。 展开更多
关键词 节杆菌P-1 红球菌J-5 PVA废水
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