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丹酚酸B对脑缺血再灌注大鼠神经细胞损伤和神经发生的影响 被引量:31
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作者 钟静 唐民科 +2 位作者 张妍 徐秋萍 张均田 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期716-721,共6页
本文旨在观察丹酚酸B对脑缺血再灌注大鼠神经发生和神经细胞损伤的影响,探讨丹酚酸B促进机体功能恢复的作用环节。研究采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,治疗给药,用BrdU法观察海马齿状回颗粒下层(sub-granular zone,SGZ)和侧脑室下层(su... 本文旨在观察丹酚酸B对脑缺血再灌注大鼠神经发生和神经细胞损伤的影响,探讨丹酚酸B促进机体功能恢复的作用环节。研究采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,治疗给药,用BrdU法观察海马齿状回颗粒下层(sub-granular zone,SGZ)和侧脑室下层(sub-ventricular zone,SVZ)神经发生的变化;尼氏体染色观察神经细胞损伤;平衡杆法观察肢体功能恢复。结果显示,缺血后再灌注7d,模型组SGZ和SVZ的BrdU细胞明显多于假手术组(P<0.05),丹酚酸B(10mg.kg-1)显著增加SGZ和SVZ的BrdU细胞数目(P<0.01vs模型组);缺血再灌注14d,模型动物缺血侧海马CA1区和皮层神经细胞明显减少,丹酚酸B(10mg.kg-1)明显改善神经细胞损伤(P<0.01vs模型组);同时,丹酚酸B(10mg.kg-1)明显促进缺血动物肢体功能恢复。以上结果表明,丹酚酸B能够增加脑缺血大鼠SVZ和SGZ的BrdU细胞数目,改善缺血区神经细胞损伤,促进肢体功能恢复,提示促进神经发生是丹酚酸B改善脑功能的重要环节。 展开更多
关键词 丹酚酸B 脑缺血 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 海马
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乌灵胶囊增加慢性不可预见性温和应激大鼠海马连接蛋白43的表达改善神经再生(英文) 被引量:17
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作者 李德强 李旭娟 +1 位作者 段金凤 蔡巍 《中西医结合学报》 CAS 2010年第7期662-669,共8页
目的:探讨乌灵胶囊对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress , CMS)抑郁模型大鼠海马齿状回脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor , BDNF)、神经再生,以及连接蛋白43(connexin 43 ,Cx43)表达的影... 目的:探讨乌灵胶囊对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress , CMS)抑郁模型大鼠海马齿状回脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor , BDNF)、神经再生,以及连接蛋白43(connexin 43 ,Cx43)表达的影响。方法:45只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入对照组(n=15)、模型组(n=15)和乌灵胶囊组(n=15)。模型组和乌灵胶囊组大鼠接受连续3周的CMS,造模期间,乌灵胶囊按100 mg/(kg.d)加入乌灵胶囊组大鼠的膳食中,连续治疗21 d。采用糖水偏爱实验评价大鼠的抑郁程度。抑郁行为测试结束后,取双侧海马组织,用免疫组织化学法检测BDNF与5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine ,BrdU)的表达;用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法检测海马中Cx43 mRNA与蛋白表达。结果:慢性应激大鼠齿状回BDNF阳性表达、新生细胞数及Cx43 mRNA和蛋白表达水平均较正常大鼠明显下降。乌灵胶囊治疗后,CMS大鼠抑郁行为得到改善,异常的海马神经再生恢复,Cx43 mRNA和蛋白表达变得正常,但BDNF表达无明显改变。结论:乌灵胶囊可增加CMS模型大鼠海马神经再生及改善抑郁症状,其机制可能与增加Cx43表达有关,与BDNF无关。 展开更多
关键词 慢性不可预见性温和应激 脑源性神经营养因子 5-溴脱氧尿苷 连接蛋白 大鼠
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神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤 被引量:17
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作者 曲艺 孙正巍 +1 位作者 杨东波 蒋传路 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第10期1876-1883,共8页
背景:近年来,神经干细胞移植已成为治疗神经退行性疾病和中枢神经系统损伤的研究热点。目的:探讨神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的研究进展。方法:以"neural stem cells,stem cell transplan... 背景:近年来,神经干细胞移植已成为治疗神经退行性疾病和中枢神经系统损伤的研究热点。目的:探讨神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的研究进展。方法:以"neural stem cells,stem cell transplantation,ischemic brain injury"为检索词,检索Pubmed数据库1990至2012年相关文献;以"神经干细胞,干细胞移植,缺血性脑损伤"为检索词,检索CNKI数据库2005至2012年相关文献。分析神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的内容,排除重复研究。结果与结论:①体外分离培养的神经干细胞有胚胎来源、脐血来源和成体来源,主要采用机械分离法和胰酶消化法进行分离。②目前体外培养的神经干细胞分离鉴定的标记物有巢蛋白、波形蛋白1、5-溴脱氧尿嘧啶核苷、神经元特异性烯醇化酶等。③神经干细胞的分化调节是通过正负双重作用实现的,负性调节是通过对称性的分裂来增加神经干细胞数量,包括Notch信号途径和一些生长因子等。正性调节诱导神经干细胞分化,包括参与细胞合成的骨形态发生蛋白信号途径等。④神经干细胞移植的时间窗选择在实验动物脑缺血两三周后,时间过早和过晚均不适合细胞的存活。神经干细胞通过脑立体定位仪直接进行脑内移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤,移植后可见细胞在局灶性脑缺血大鼠脑室内和梗死中心均可长期存活,并可广泛迁移,移植神经干细胞后观察到其运动行为学评分有明显提高。缺血性脑卒中的神经干细胞移植治疗还存在一些问题需要解决,未来的临床应用前景广阔,是缺血性脑卒中患者的新希望。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞综述 神经干细胞 干细胞移植 缺血性脑损伤 细胞培养 机械分离法 胰酶消化法 巢蛋白 波形蛋白1 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 神经元特异性烯醇化酶 脑内移植 立体定向移植
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CDK抑制剂olomoucine对星形胶质细胞增殖活化的影响 被引量:9
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作者 朱舟 王伟 +3 位作者 谢敏杰 余勇飞 陈晨 杜鹏 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期159-163,共5页
目的 观察体外培养的星形胶质细胞(astrocyte, AS) 对物理损伤的反应, 探讨细胞周期调控对AS活化及增殖的影响。方法 建立体外培养大鼠纯化的AS机械损伤模型, 利用免疫细胞化学方法观察损伤区的细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、5- 溴脱氧尿... 目的 观察体外培养的星形胶质细胞(astrocyte, AS) 对物理损伤的反应, 探讨细胞周期调控对AS活化及增殖的影响。方法 建立体外培养大鼠纯化的AS机械损伤模型, 利用免疫细胞化学方法观察损伤区的细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、5- 溴脱氧尿苷(BrdU) 的动态变化; 以及周期素依赖的蛋白激酶(CDK) 选择性抑制剂olo moucine干预后PCNA、BrdU表达的变化。结果 物理损伤后24 h, 损伤边缘区AS明显活化, 细胞数目增加、胞体肥大, 且交织成网状; PCNA表达增强, BrdU阳性细胞比率增加, 大量AS进入增殖期。特异性细胞周期抑制剂olo moucine干预后, AS的PCNA表达增强被抑制, 胞体肥大程度减轻, BrdU阳性细胞比率减少。结论 损伤刺激可促使胶质细胞细胞周期(cell cycle) 启动、反应性增殖活化; olomoucine可以通过抑制CDK调控反应性AS的肥大、增殖。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 细胞周期 OLOMOUCINE 增殖细胞核抗原 5-溴脱氧球苷
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成年大鼠弥漫性脑损伤后海马齿状回神经元再生动态变化的实验研究 被引量:7
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作者 王卫东 程毓华 +3 位作者 王津存 程祖珏 江文 杨柏林 《中国临床康复》 CSCD 2002年第19期2864-2865,F002,共3页
目的观察弥漫性脑损伤后大鼠海马齿状回神经前体细胞的增殖规律。方法使用BrdU标记分裂细胞、免疫组织化学方法和激光共聚焦显微镜观察弥漫性脑损伤后大鼠海马齿状回神经元再生水平的变化规律。结果成年大鼠弥漫性脑损伤后4~12d时间段... 目的观察弥漫性脑损伤后大鼠海马齿状回神经前体细胞的增殖规律。方法使用BrdU标记分裂细胞、免疫组织化学方法和激光共聚焦显微镜观察弥漫性脑损伤后大鼠海马齿状回神经元再生水平的变化规律。结果成年大鼠弥漫性脑损伤后4~12d时间段内,齿状回BrdU免疫阳性细胞数量表现出明显的统计学差异(P<0.01),其中第6天时达到峰值。这些BrdU阳性细胞大部分分化为神经元。结论弥漫性脑损伤可诱导成年脑海马齿状回细胞再生水平在一定时间内上调。 展开更多
关键词 海马 齿状回神经元 弥漫性脑损伤 5-溴脱氧尿核苷 神经再生
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骨髓基质细胞体外分化移植治疗大鼠脊髓损伤的初步研究 被引量:7
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作者 刘肃 李化光 +1 位作者 刘华 王岩峰 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1418-1420,共3页
[目的]探讨大鼠骨髓基质细胞体外分化为神经干细胞后移植治疗大鼠脊髓损伤的可行性。[方法]骨髓基质细胞经培养及定向分化为神经干细胞,后者由5-溴脱氧尿嘧啶核苷法标记,制备大鼠脊髓损伤模型,伤后第9 d移植神经干细胞,实验分组:细胞移... [目的]探讨大鼠骨髓基质细胞体外分化为神经干细胞后移植治疗大鼠脊髓损伤的可行性。[方法]骨髓基质细胞经培养及定向分化为神经干细胞,后者由5-溴脱氧尿嘧啶核苷法标记,制备大鼠脊髓损伤模型,伤后第9 d移植神经干细胞,实验分组:细胞移植组、PBS填充组、正常对照组。应用组化法观察移植细胞是否存活,取材前24 h显露坐骨神经,行辣根过氧化物酶逆行示踪法观察脊髓损伤处的修复重建。[结果]骨髓基质细胞在定向分化为神经干细胞后标记并移植于脊髓损伤区,标记的阳性细胞可在受体脊髓内检测到,辣根示踪技术显示细胞移植组较PBS填充组阳性细胞明显增多,差别有统计学意义。[结论]大鼠骨髓基质细胞在体外分化为神经干细胞后移植于脊髓损伤区,移植细胞可以存活,并参与脊髓损伤处神经传导通路的结构重建。 展开更多
关键词 脊髓损伤 骨髓基质细胞 5-溴脱氧尿嘧啶 辣根过氧化物酶
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电刺激小脑顶核对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的脑保护作用 被引量:5
7
作者 贾天明 甘斌 刘玉峰 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期949-951,共3页
目的探讨电刺激小脑顶核对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的脑保护作用及其机制。方法新生7日龄SD大鼠90只,随机分成假手术组、模型组、电刺激组,每组各30只。每组再分为A、B、C3组,每组各10只。采用结扎左侧颈总动脉并吸入氮氧混合气... 目的探讨电刺激小脑顶核对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的脑保护作用及其机制。方法新生7日龄SD大鼠90只,随机分成假手术组、模型组、电刺激组,每组各30只。每组再分为A、B、C3组,每组各10只。采用结扎左侧颈总动脉并吸入氮氧混合气体2h制作新生大鼠HIBD动物模型。电刺激组手术后第2天即开始电刺激治疗,电刺激20min/次,2次/d,其中A、B组电刺激7d,C组28d。假手术组、模型组不予电刺激治疗,相应时段仅予抓捉固定。所有A组处死前8h腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),B组不予药物。电刺激治疗7d后,A、B组均经40g/L多聚甲醛心脏灌注后断头取脑组织,分别做连续冠状切片,免疫组织化学方法测定脑组织切片神经干细胞标志物BrdU和巢蛋白的表达。C组电刺激28d后行迷宫实验,检测电刺激对HIBD大鼠智能的影响。各组均同时进行脑组织切片HE染色。应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果模型组BrdU和巢蛋白阳性细胞计数均低于假手术组(Pa<0.05);假手术组BrdU和巢蛋白阳性细胞计数均低于电刺激组(Pa<0.05)。HE染色见假手术组神经细胞形态正常,胞质丰富,细胞排列整齐;模型组可见大量明显的坏死灶,神经细胞数量减少;电刺激组神经细胞变性坏死较少,多数细胞形态相对正常。迷宫实验显示模型组第1、2天达标所需的反应次数均明显多于假手术组(Pa<0.05);电刺激组第1、2天达标所需反应次数也均明显多于假手术组(Pa<0.05);但其明显少于模型组大鼠第1、2天达到标准所需的反应次数(Pa<0.05)。结论电刺激小脑顶核可以通过促进脑组织神经干细胞的增殖与分化对HIBD大鼠发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 电刺激 小脑顶核 神经干细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 巢蛋白 缺氧缺血性脑损伤
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有氧训练对阿尔茨海默病模型大鼠海马齿状回神经发生的影响 被引量:6
8
作者 史兆春 吴婷 +2 位作者 乔莉 董海蓉 李敏 《中国临床神经科学》 2011年第3期255-259,275,共6页
目的:观察有氧训练对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠齿状回(DG)神经发生的影响。方法:SD大鼠48只,随机分为假手术组(侧脑室注射生理盐水),有氧训练组(侧脑室注射Aβ25-35+4周有氧训练)和实验组(侧脑室注射Aβ25... 目的:观察有氧训练对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠齿状回(DG)神经发生的影响。方法:SD大鼠48只,随机分为假手术组(侧脑室注射生理盐水),有氧训练组(侧脑室注射Aβ25-35+4周有氧训练)和实验组(侧脑室注射Aβ25-35)。3组大鼠行Morris水迷宫行为学检测,免疫组织化学方法检测海马DGBrdU阳性细胞数,以确定有氧训练对细胞存活的影响;微管相关蛋白免疫组化染色观察新生神经元的突起生长。结果:①与假手术组比,实验组逃避潜伏期显著延长(P<0.05);有氧训练组与实验组比,逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);有氧训练组逃避潜伏期与假手术组比,差异无统计学意义。②与假手术组比,实验组DGBrdU阳性细胞数显著减少(P<0.05)。③与假手术组比,实验组DG新生神经元突起的数量明显减少(P<0.05)。④与实验组比,有氧训练可改善DGBrdU阳性细胞的显著减少(P<0.05)、保护神经元突起的生长(P<0.05)。结论:Aβ25-35能诱导AD大鼠模型的建立,损害新生神经元突起生长和新生神经元的存活;有氧训练可改善Aβ25-35损害的大鼠新生神经元突起生长和新生神经元的存活。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 神经发生 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 微管相关蛋白
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三七三醇皂苷对脑缺血大鼠脑室下区细胞增殖及星形胶质细胞的影响 被引量:6
9
作者 陈俊萍 马祁生 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2010年第43期4061-4063,共3页
目的:研究三七三醇皂苷(PTS)对局灶性脑缺血再灌注后脑室下区(SVZ)细胞增殖及星形胶质细胞的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术、生理盐水(NS)和PTS组,每组设再灌注3、7、14、21d亚组,每个时段各5只。采用改良的线栓法制备大脑... 目的:研究三七三醇皂苷(PTS)对局灶性脑缺血再灌注后脑室下区(SVZ)细胞增殖及星形胶质细胞的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术、生理盐水(NS)和PTS组,每组设再灌注3、7、14、21d亚组,每个时段各5只。采用改良的线栓法制备大脑右侧中动脉阻塞2h的大鼠短暂局灶性脑缺血模型,观察5-溴脱氧尿嘧啶和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在SVZ的表达情况。结果:再灌注后7d,PTS组与NS组SVZ细胞增殖水平达到峰值,至再灌注21d细胞增殖水平已明显回落,但仍高于正常水平;再灌注后7、14d,PTS组SVZ细胞增殖水平显著高于NS组。再灌注后3d,PTS组与NS组SVZ细胞GFAP表达达到峰值,至再灌注14d已恢复正常水平;再灌注后3、7d,PTS组SVZ的GFAP阳性细胞数显著高于NS组。结论:PTS可促进缺血再灌注后SVZ细胞的增殖水平,并上调GFAP的表达。 展开更多
关键词 三七三醇皂苷 增殖 缺血再灌注 5-溴脱氧尿嘧啶 胶质纤维酸性蛋白
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Short-term environmental enrichment exposure induces proliferation and maturation of doublecortin-positive cells in the prefrontal cortex 被引量:4
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作者 Chunling Fan Mengqi Zhang +6 位作者 Lei Shang Ngobe Akume Cynthia Zhi Li Zhenyu Yang Dan Chen Jufang Huang Kun Xiong 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第3期318-328,共11页
Previous studies have demonstrated that doublecortin-positive immature neurons exist pre- dominantly in the superficial layer of the cerebral cortex of adult mammals such as guinea pigs, and these neurons exhibit very... Previous studies have demonstrated that doublecortin-positive immature neurons exist pre- dominantly in the superficial layer of the cerebral cortex of adult mammals such as guinea pigs, and these neurons exhibit very weak properties of self-proliferation during adulthood under physiological conditions. To verify whether environmental enrichment has an impact on the proliferation and maturation of these immature neurons in the prefrontal cortex of adult guinea pigs, healthy adult guinea pigs were subjected to short-term environmental enrichment. Animals were allowed to play with various cognitive and physical stimulating objects over a period of 2 weeks, twice per day, for 60 minutes each. Immunofluorescence staining results indicated that the number of doublecortin-positive cells in layer II of the prefrontal cortex was significantly increased after short-term environmental enrichment exposure. In addition, these doublecortin-positive cells co-expressed 5-bromo-2-deoxyuridine (a marker of cell prolifera- tion), c-Fos (a marker of cell viability) and NeuN (a marker of mature neurons). Experimental findings showed that short-term environmental enrichment can induce proliferation, activation and maturation of doublecortin-positive cells in layer II of the prefrontal cortex of adult guinea pigs. 展开更多
关键词 nerve regeneration NEUROGENESIS prefrontal cortex NEOCORTEX guinea pig doublecortinprotein cell proliferation neurons 5-bromodeoxyuridine NSFC grant neural regeneration
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肌筋膜经线选穴法针刺治疗对脑性瘫痪模型大鼠神经细胞再生及运动功能恢复的影响 被引量:5
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作者 徐冬晨 杨江 +2 位作者 喻斌 李达玲 韩新民 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2014年第3期206-210,共5页
目的探讨基于肌筋膜经线的选穴法针刺治疗对脑瘫模型大鼠神经细胞再生及运动功能恢复的影响。方法健康21日龄雄性Sprague-Dawley大鼠20只,分成对照组、针刺1组、针刺2组和假手术组,对照组、针刺1组和针刺2组采用左侧颈总动脉结扎结合低... 目的探讨基于肌筋膜经线的选穴法针刺治疗对脑瘫模型大鼠神经细胞再生及运动功能恢复的影响。方法健康21日龄雄性Sprague-Dawley大鼠20只,分成对照组、针刺1组、针刺2组和假手术组,对照组、针刺1组和针刺2组采用左侧颈总动脉结扎结合低氧环境制作脑瘫模型。针刺1组接受传统针刺疗法,针刺2组接受基于肌筋膜经线的选穴法针刺治疗。各组于针刺开始后第3、7、14天行BBB评分、斜板试验;第14天用5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记检测左脑运动皮层和纹状体的细胞增殖情况。结果第7天和第14天针刺2组的BBB评分恢复明显优于针刺1组和对照组(P<0.01),第3、7、14天针刺2组斜板支撑能力均较对照组升高(P≤0.05);第14天针刺2组运动皮层BrdU含量较针刺1组升高(P<0.05)。结论基于肌筋膜经线的选穴法针刺治疗能有效促进脑瘫模型神经细胞再生和运动功能的改善,且优于传统针刺疗法。 展开更多
关键词 脑性瘫痪 肌筋膜经线 针刺 穴位 5-溴脱氧尿核苷 运动功能 大鼠
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胰岛素样生长因子-1对幼年大鼠癫痫持续状态的神经保护作用的研究 被引量:4
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作者 李文斌 龚亮 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第22期28-33,共6页
目的观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对幼年大鼠癫痫持续状态(SE)的保护作用及其相关作用机制的初步探讨。方法选择出生21 d的幼年SD大鼠,采用戊四唑(PTZ)制作SE模型,于海马区立体定位注射IGF-1,分为生理盐水对照组(NS)、癫痫模型组(PTZ... 目的观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对幼年大鼠癫痫持续状态(SE)的保护作用及其相关作用机制的初步探讨。方法选择出生21 d的幼年SD大鼠,采用戊四唑(PTZ)制作SE模型,于海马区立体定位注射IGF-1,分为生理盐水对照组(NS)、癫痫模型组(PTZ组)、癫痫模型IGF-1处理组(PTZ+IGF-1组);于造模后第2天,用ELISA检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量,RT-PCR(real-time PCR)检测海马中的IGF-1表达情况;Western blot检测海马中p-ERK和p-Akt表达情况;于造模后第5天,HE染色观察海马的病理变化,以及免疫荧光染色标记增殖细胞数(Brd U)和神经干细胞数(Nestin)。结果 SE后第2天,PTZ组血清中NSE含量最高,极显著高于NS组和PTZ+IGF-1组(P<0.01);PTZ组海马IGF-1基因表达极显著高于NS组(P<0.01);PTZ组海马p-ERK和p-Akt的蛋白的表达量明显高于NS组(P<0.05),同时PTZ+IGF-1组p-ERK和p-Akt的蛋白的表达量明显高于PTZ组(P<0.01);SE后PTZ组海马相比其他两组出现了明显的炎性细胞浸润,细胞结构紊乱等变化;SE后PTZ组海马Brd U阳性细胞数及Nestin阳性细胞数都明显高于NS组(P<0.05),同时PTZ+IGF-1组Brd U阳性细胞数及Nestin阳性细胞数都极明显高于PTZ组(P<0.01)。结论 IGF-1对幼年大鼠SE后具有明显的神经保护作用,并可能通过MEK/ERK和PI3K/Akt两条通路发挥作用。 展开更多
关键词 癫痫持续状态 胰岛素样生长因子-1 神经元特异性烯醇化酶 5-溴脱氧尿嘧啶核苷
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乳鼠窦房结细胞的分离纯化与形态学研究 被引量:4
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作者 蒋伟 法宪恩 李晓召 《医学信息(内.外科版)》 2009年第12期1075-1076,1082,共3页
目的探讨乳鼠窦房结细胞的分离纯化方法,并观察其形态学特征。方法取新生SD大鼠的窦房结组织,胰酶消化后采用速差贴壁法及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)纯化处理进行原代培养。对培养细胞进行形态学观察,用电生理技术记录细胞的动作电位... 目的探讨乳鼠窦房结细胞的分离纯化方法,并观察其形态学特征。方法取新生SD大鼠的窦房结组织,胰酶消化后采用速差贴壁法及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)纯化处理进行原代培养。对培养细胞进行形态学观察,用电生理技术记录细胞的动作电位。结果在培养的窦房结细胞中观察到三种不同形态的细胞,即梭形细胞、三角形细胞与不规则形细胞。其中梭形细胞所占比例最高,且形态结构与电生理特点符合窦房结起搏细胞的特点。三角形细胞与心房肌细胞特征相似。结论采用酶消化法结合速差贴壁及5-BrdU处理,可以显著提高窦房结梭形细胞的比例,是可靠的窦房结细胞的分离纯化方法。 展开更多
关键词 窦房结细胞 速差贴壁 5-溴脱氧尿嘧啶核苷
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高脂大鼠内皮祖细胞生物学特性的实验研究 被引量:4
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作者 孔朝红 刘煜敏 +1 位作者 朱江 道文欣 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2010年第4期253-256,260,共5页
目的研究高脂大鼠内皮祖细胞(EPC)的生物学特性,并探讨其在体外最佳5-(?)(Brdu)标记方案。方法制备高脂模型大鼠,体外分离培养EPC,观察健康对照组和高脂组大鼠EPG生长及增殖状况。将EPC传代培养后,检测不同浓度BrdU和不同孵育时间对其B... 目的研究高脂大鼠内皮祖细胞(EPC)的生物学特性,并探讨其在体外最佳5-(?)(Brdu)标记方案。方法制备高脂模型大鼠,体外分离培养EPC,观察健康对照组和高脂组大鼠EPG生长及增殖状况。将EPC传代培养后,检测不同浓度BrdU和不同孵育时间对其BrdU标记率的影响。结果与健康大鼠来源的EPC相比,高脂大鼠EPC形态较小,培养相同时间时CD34表达率较低,而CD45、CD133表达率较高;细胞吞噬及增殖分化能力较差。BrdU为15μmol/L、孵育时间为60 h时其标记率达较高水平,可满足研究需要。结论在高脂状态下大鼠EPC的生物学功能受损,其BrdU的最佳标记方案为15μmol/L,孵育时间为60h。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 高脂血症 生物学特性 尿嘧啶核苷
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依普利酮对环孢素A急性肾损伤小管上皮细胞坏死及再生的作用 被引量:3
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作者 许庆友 贾晓明 +7 位作者 丁英钧 王筝 王香婷 穆胜宇 史亚男 王红 下泽达雄 藤田敏郎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期906-909,共4页
目的观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮保护环孢素A肾病小管上皮细胞的作用。方法经口灌服环孢素A(100 mg.kg-1.d-1),诱导小鼠急性肾脏损伤,给予依普利酮100 mg.kg-1.d-1治疗,d 5将5-溴脱氧尿嘧啶核苷(40mg.kg-1.d-1)经微型渗透泵皮下注... 目的观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮保护环孢素A肾病小管上皮细胞的作用。方法经口灌服环孢素A(100 mg.kg-1.d-1),诱导小鼠急性肾脏损伤,给予依普利酮100 mg.kg-1.d-1治疗,d 5将5-溴脱氧尿嘧啶核苷(40mg.kg-1.d-1)经微型渗透泵皮下注入,10 d后摘取肾脏,HE、PAS检测肾脏病理改变,免疫组化检测5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞标记再生细胞。结果肾脏病理显示环孢素A组小管上皮细胞坏死、小球包氏囊增厚、间质纤维成分沉积,凋亡细胞增多,免疫组化显示再生细胞数量减少,依普利酮治疗组上皮细胞坏死减轻,间质纤维沉积减少,再生细胞明显增多。结论依普利酮可以通过对醛固酮受体的阻断减轻环孢素A诱导的急性肾脏损伤。 展开更多
关键词 依普利酮 环孢素A肾毒性 盐皮质激素受体阻断剂 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 细胞坏死 再生
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5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记实验性牙移动大鼠血管内皮祖细胞的研究 被引量:3
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作者 刘超 苗雷英 +1 位作者 孙新华 刘金钟 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期321-325,共5页
目的探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记大鼠外周血血管内皮祖细胞(EPCs)的最佳标记时间与剂量。方法建立实验性牙移动大鼠模型,密度梯度离心分离大鼠外周血EPCs并体外培养;免疫细胞化学、荧光化学鉴定细胞表面抗原;终浓度分别为5、10、1... 目的探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记大鼠外周血血管内皮祖细胞(EPCs)的最佳标记时间与剂量。方法建立实验性牙移动大鼠模型,密度梯度离心分离大鼠外周血EPCs并体外培养;免疫细胞化学、荧光化学鉴定细胞表面抗原;终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU标记EPCs,并于标记后12、24、48、72、96h检测各组BrdU的标记率,筛选BrdU的最佳标记计量和时间。结果所培养细胞CD34、CD133呈阳性表达,且DiI-ac-LDL、FITC-UEA-1呈双荧光阳性;终浓度为10μmol/L的BrdU标记细胞72h后标记率达(66.8±2.9)%,与5μmol/L组相比差异有统计学意义(P<0.05),与15μmol/L组相比无统计学意义(P>0.05)。各浓度BrdU对细胞均无毒性影响。结论成功分离、培养了实验性牙移动大鼠外周血EPCs;终浓度为10μmol/L的BrdU标记EPCs72h后可获得较高标记率。本实验可为研究EPCs的趋化、分化机制奠定基础。 展开更多
关键词 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 血管内皮祖细胞 外周血
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亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑病损伤后神经细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 张阵 陈信 +2 位作者 武玉猛 王文辉 彭万胜 《齐齐哈尔医学院学报》 2020年第11期1326-1329,共4页
目的探究亚低温治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIBD)损伤后神经细胞增殖和凋亡的影响。方法将7日龄大鼠45只随机分为对照组、HIBD组和亚低温干预组,每组各15只。对照组为假手术组,即分离左颈总动脉但不结扎,HIBD组分离左颈总动脉并予以... 目的探究亚低温治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIBD)损伤后神经细胞增殖和凋亡的影响。方法将7日龄大鼠45只随机分为对照组、HIBD组和亚低温干预组,每组各15只。对照组为假手术组,即分离左颈总动脉但不结扎,HIBD组分离左颈总动脉并予以结扎,亚低温干预组在左颈总动脉结扎基础上联合亚低温治疗。其中对照组及HIBD组保持肛温36℃~37℃,亚低温组保持肛温32℃~33℃。三组大鼠自10日龄开始均连续腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)用于标记新生细胞。采用免疫组化法检测脑组织海马齿状回颗粒下层BrdU和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达情况,采用苏木素-伊红(HE)染色法计数三组大鼠海马齿状回单位面积神经细胞数并加以比较。结果亚低温干预组BrdU阳性细胞表达明显高于HIBD组,但仍低于对照组(假手术组),差异有统计学意义(P<0.05),亚低温干预组活化Caspase-3表达明显低于HIBD组,但高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。亚低温组海马齿状回单位面积神经细胞数明显低于对照组(P<0.05),但明显高于HIBD组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组大鼠实验开始前体重比较无统计学意义(P>0.05),取脑组织前对照组体重明显重于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05),但亚低温组与HIBD组无明显差异(P>0.05)。结论亚低温对大鼠HIBD的海马区神经细胞的增生起促进作用,并减轻其凋亡。 展开更多
关键词 亚低温 海马齿状回 缺氧缺血性脑病 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
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鸡胚视顶发育过程中神经元增殖、迁移和分层形成的规律 被引量:1
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作者 杨慈清 杜蕊 +2 位作者 张学乾 林俊堂 赵善廷 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期177-180,共4页
目的:采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记鸡胚发育过程中视顶新生神经元,阐明鸡胚发育过程中视顶盖神经元增殖、迁移规律。方法:采用鸡胚开窗带壳培养的方式,在培养过程中,分别在胚胎发育的第E4天至E18.5d滴加1mg/ml浓度的BrdU... 目的:采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记鸡胚发育过程中视顶新生神经元,阐明鸡胚发育过程中视顶盖神经元增殖、迁移规律。方法:采用鸡胚开窗带壳培养的方式,在培养过程中,分别在胚胎发育的第E4天至E18.5d滴加1mg/ml浓度的BrdU各10肛l,每组5个胚胎,滴加BrdU后密封开口,继续培养,当培养到胚胎发育的E18.5d时,取材、甲醛固定、震荡切片,采用硫堇染色,观察视顶盖层的结构,免疫组织化学显示BrdU标记的新生细胞;显微拍照,分析不同时期表面灰质纤维层增殖细胞的数量、总面积、灰度平均值、平均光密度和平均积分光密度等参数,综合分析各阶段新生神经元的差异。结果:鸡胚视顶结构通过硫堇染色可以明显分成6层,在胚胎发育的E4d-8d是细胞大量增殖阶段,新生细胞数明显高于其他阶段;新生细胞在胚胎发育的E12d后明显减少。结论:鸡胚发育过程中,视顶从胚胎发育的E4d开始到E12d时,6层结构已经基本形成,新生神经元E12d后明显减少,其视顶盖6层结构的形成规律是从内向外。 展开更多
关键词 鸡胚 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 视顶盖 增殖 神经元迁移
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5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记在喉黏膜干细胞的研究 被引量:1
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作者 于锋 张群慧 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2012年第2期90-93,共4页
目的以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,5-BrdU)为标记对小鼠喉黏膜可能存在干细胞进行初步研究。方法选取出生3 d的昆明小鼠36只,随机分为A、B和C组,每组12只。A组小鼠皮下注射100μg/g的5-BrdU,B组小鼠皮下注射50μg/g的5-Brd... 目的以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,5-BrdU)为标记对小鼠喉黏膜可能存在干细胞进行初步研究。方法选取出生3 d的昆明小鼠36只,随机分为A、B和C组,每组12只。A组小鼠皮下注射100μg/g的5-BrdU,B组小鼠皮下注射50μg/g的5-BrdU,C组小鼠皮下注射生理盐水。第8周后分别处死各组小鼠,并取小鼠喉黏膜进行免疫组化检测,计算其标记滞留细胞的阳性率。结果 8周后,注射了5-BrdU的A组与B组小鼠喉黏膜鳞状上皮有标记滞留细胞表达但两组间表达无统计学意义(t=0.06,P=0.949)。C组小鼠喉黏膜鳞状上皮无标记滞留细胞表达。结论 A、B两组小鼠喉黏膜存在标记滞留细胞,此标记滞留细胞具有喉黏膜成体干细胞的一些特点,可能是成体干细胞的来源。 展开更多
关键词 标记滞留细胞 干细胞 染色与标记 5-溴脱氧尿嘧啶核苷
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缺血启动脑白质损伤新生大鼠室管膜下区和白质的胶质源性内在修复功能 被引量:1
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作者 李文娟 毛凤霞 +1 位作者 陈惠金 钱龙华 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期254-260,共7页
目的探讨缺血启动脑白质损伤新生大鼠室管膜下区(SVZ)和白质途径对损伤白质的内源性自我修复功能。方法建立5日龄脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠模型,随机分为PVL组和Sham组,光镜和电镜下评估脑白质病理和髓鞘形成,TUNEL法观察脑白质细... 目的探讨缺血启动脑白质损伤新生大鼠室管膜下区(SVZ)和白质途径对损伤白质的内源性自我修复功能。方法建立5日龄脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠模型,随机分为PVL组和Sham组,光镜和电镜下评估脑白质病理和髓鞘形成,TUNEL法观察脑白质细胞凋亡,5-溴脱氧尿核苷(Brdu)示踪以及免疫荧光共标记技术观察SVZ和白质胶质源性祖细胞的激活、增殖、迁移和分化情况。结果建模后第7和21天,PVL组大鼠脑室周围白质的凋亡细胞数较Sham组增加,差异均有统计学意义(P<0.05);PVL组的脑白质均呈现轻度或重度病变;PVL组脑白质内髓鞘形成数目以及髓鞘厚度亦低于Sham组,差异均有统计学意义(P均<0.01)。PVL组在各时段的NG2+祖细胞和BrdU+(源自SVZ)以及GPR17+(源自白质)的O4+少突胶质细胞(OL)前体均较Sham组明显增多,差异均有统计学意义(P均<0.05);建模第7天,PVL组的GPR17+不成熟OL和成熟OL均未能检测到,代之为BrdU+不成熟OL和成熟OL;直至建模第21天,PVL组的不成熟OL和成熟OL一直呈低水平状态,低于Sham组(P均<0.05)。结论缺血可诱导PVL大鼠脑SVZ和白质这两条途径的胶质源性祖细胞激活和出现明显增殖,并沿OL系细胞分化和迁移至脑白质的损伤部位进行修复,但最终仅有极少量新生细胞能分化为未成熟和成熟OL。推测有限的内源性修复作用可能与不良的脑微环境密切相关。 展开更多
关键词 脑室周围白质软化 脑室管膜下 白质 5-溴脱氧尿核苷 G-蛋白偶联受体
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