磷酸甘油酸变位酶1在肿瘤发生及发展中的作用 被引量：2

1

作者 梁倩 沈瑛 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期463-466,共4页

磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglycerate mutase 1,PGAM1)作为糖酵解通路的重要酶之一,在多种肿瘤组织中高表达,并且与肿瘤患者预后呈负相关。PGAM1催化糖酵解通路中3-磷酸甘油酸(3-phosphoglycerate,3-PG)转化生成2-磷酸甘油酸(2-phosphog... 磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglycerate mutase 1,PGAM1)作为糖酵解通路的重要酶之一,在多种肿瘤组织中高表达,并且与肿瘤患者预后呈负相关。PGAM1催化糖酵解通路中3-磷酸甘油酸(3-phosphoglycerate,3-PG)转化生成2-磷酸甘油酸(2-phosphoglycerate,2-PG),促进葡萄糖代谢和能量生成。PGAM1通过调节3-PG与2-PG的转化平衡来影响其他代谢通路,参与细胞内生物大分子合成和维持氧化还原稳态,促进肿瘤细胞增殖及转移。PGAM1作为潜在的抗肿瘤靶标,其抑制剂的研发也成为抗肿瘤药物研究热点之一。该文对PGAM1结构、调控、在肿瘤发生及发展中的作用以及PGAM1抑制剂的最新研究进展作一综述。 展开更多

关键词 有氧糖酵解 磷酸甘油酸变位酶1 3-磷酸甘油酸 2-磷酸甘油酸

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高硒干扰肝细胞内糖与一碳单位代谢的体外研究 被引量：1

2

作者 张雪 王建荣 +4 位作者 王琴 韩枫 向雪松 刘轶群 黄振武 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期115-118,共4页

目的 探究高硒环境对人正常肝细胞内硒蛋白以及糖代谢和一碳单位代谢相关酶表达的影响。方法 用10个剂量浓度(0、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5和10μmol/L)的硒代蛋氨酸(SeMet)对人正常肝细胞干预48 h后,采用免疫印迹法检... 目的 探究高硒环境对人正常肝细胞内硒蛋白以及糖代谢和一碳单位代谢相关酶表达的影响。方法 用10个剂量浓度(0、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5和10μmol/L)的硒代蛋氨酸(SeMet)对人正常肝细胞干预48 h后,采用免疫印迹法检测细胞内硒蛋白P1(SELENOP1)、谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)、糖酵解旁路关键酶3-磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)以及一碳代谢通路关键酶丝氨酸羟甲基转移酶1(serine hydroxymethyltransferase 1,SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)和蛋氨酸合成酶(methionine synthase, MS)的表达。结果 SeMet在0~10μmol/L范围内,硒蛋白(GPX1和SELENOP1)的表达先升高后降低,GPX1和SELENOP1的拐点分别在0.5和0.1μmol/L;丝氨酸从头合成通路关键酶(PHGDH)和叶酸循环代谢酶(SHMT1、MTHFR和MS)表达与硒蛋白类似,同样先升高后降低,但拐点有差异,分别为0.1μmol/L(PHGDH和SHMT1)和0.01μmol/L(MTHFR和MS)。结论 高硒环境下,细胞内因硒蛋白过表达而导致丝氨酸供应不足,被迫启用糖酵解旁路——丝氨酸从头合成通路合成内源性的丝氨酸,从而引起糖代谢异常。 展开更多

关键词 硒代蛋氨酸 丝氨酸 谷胱甘肽过氧化物酶 硒蛋白P 3-磷酸甘油酸脱氢酶 叶酸循环关键酶

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华支睾吸虫3-磷酸甘油酸激酶基因的扩增、克隆及表达 被引量：3

3

作者 吴德 余新炳 +3 位作者 徐劲 吴忠道 陈守义 何东苟 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期306-308,共3页

目的　构建编码华支睾吸虫 3 磷酸甘油酸激酶基因的原核表达载体 ,并分析其在大肠埃希菌中的表达。　方法　用Trizol法从华支睾吸虫 3 成虫体内提取总RNA ,并将其反转录成cDNA。根据华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶的已知基因 ,利用DNAclub... 目的　构建编码华支睾吸虫 3 磷酸甘油酸激酶基因的原核表达载体 ,并分析其在大肠埃希菌中的表达。　方法　用Trizol法从华支睾吸虫 3 成虫体内提取总RNA ,并将其反转录成cDNA。根据华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶的已知基因 ,利用DNAclub和PCRdesign软件设计合成一对特异引物 ,从合成的cDNA中 ,用PCR技术扩增出目的片段。将目的片段和原核表达载体同时双酶切后连接 ,重组体转入JM10 9大肠埃希菌 ,用双酶切、PCR和测序筛选阳性克隆。挑选 1个阳性菌落 ,用异丙基 β D 硫代半乳糖苷诱导表达 ,表达产物进行十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)鉴定。　结果　用逆转录 聚合酶链反应技术扩增出 1条 12 48bp大小的片段 ,PCR产物测序鉴定正确 ;转化后得到 10个克隆 ,双酶切、PCR扩增鉴定 ,其中 6个为阳性克隆 ;表达产物用SDS PAGE鉴定 ,在相对分子质量 70 0 0 0处有 1条与理论预测的融合蛋白大小相一致的特异条带。　结论　成功构建重组原核表达载体pGEX 4T 1 PGK 。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 原核表达载体 扩增 大肠埃希菌 酶基因 鉴定 油酸 激酶 阳性克隆 酶切

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3-磷酸甘油酸脱氢酶促进丝氨酸合成在肿瘤进展中的机制 被引量：3

4

作者 崔畅婉 孙峥嵘 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第5期885-888,共4页

丝氨酸生物合成途径活性的上调是许多癌症明显的共同特征。该途径的第一种限速酶3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)在黑色素瘤、乳腺癌和肾癌等癌组织中高表达,对肿瘤细胞增殖、转移、侵袭有着重要作用。糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸在PHGDH作用... 丝氨酸生物合成途径活性的上调是许多癌症明显的共同特征。该途径的第一种限速酶3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)在黑色素瘤、乳腺癌和肾癌等癌组织中高表达,对肿瘤细胞增殖、转移、侵袭有着重要作用。糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸在PHGDH作用下,氧化为磷酸羟基丙酮酸并最终合成丝氨酸。丝氨酸转化为甘氨酸,然后在核苷酸、s-腺苷甲硫氨酸(SAM)和还原型谷胱甘肽(GSH)的合成中起着重要的作用。PHGDH有望成为肿瘤治疗的新靶点。 展开更多

关键词 3-磷酸甘油酸脱氢酶 肿瘤 糖酵解

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3-磷酸甘油酸脱氢酶及其抗体对自身免疫性肝炎的诊断意义 被引量：3

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作者 向代军 闫惠平 +5 位作者 夏晴 卢锋 冯霞 赵艳 刘妍 杨建轩 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期378-382,共5页

目的克隆D-3-磷酸甘油酸脱氢酶（Phgdh）的cDNA，构建重组表达质粒，纯化重组蛋白，初步探讨Phgdh抗体在自身免疫性肝炎诊断中的意义。方法血清蛋白质组学方法鉴定差异蛋白，构建重组表达载体，在大肠杆菌中表达，融合蛋白经NiNTA树脂... 目的克隆D-3-磷酸甘油酸脱氢酶（Phgdh）的cDNA，构建重组表达质粒，纯化重组蛋白，初步探讨Phgdh抗体在自身免疫性肝炎诊断中的意义。方法血清蛋白质组学方法鉴定差异蛋白，构建重组表达载体，在大肠杆菌中表达，融合蛋白经NiNTA树脂柱亲和层析纯化，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blot法进行免疫鉴定；应用表达蛋白建立间接酶联免疫吸附法，检测60名健康体检者、65例自身免疫性肝炎（AIH）、122例原发性胆汁性肝硬化、56例慢性乙型肝炎、117例慢性丙型肝炎患者血清中抗Phgdh抗体。组间率的比较用χ^2检验。结果经重组质粒测序和酶切鉴定结果证实，Phgdh目的基因已正确插入原核表达载体中，基因序列正确，符合表达框架。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表达产物在相对分子质量约6．0×10^4附近有一明显的蛋白表达带，Westernblot分析结果显示重组蛋白具有Phgdh抗原反应性。酶联免疫吸附法检测血清标本结果显示，AIH、原发性胆汁性肝硬化、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及正常人抗Phgdh抗体阳性检出率分别为66．15％、21．42％、12．50％、6．83％和3．30％。AIH组Phgdh自身抗体阳性率与疾病对照组及正常对照组比较，差异均具有统计学意义（P〈0．01）。结论本研究成功克隆了Phgdh的cDNA，并将其在大肠杆菌中成功表达。该抗体主要在AIH患者中检出，此抗体的检测有助于提高AIH的临床诊断水平。 展开更多

关键词 肝炎 自身免疫性 D-3-磷酸甘油酸脱氢酶 蛋白质组 自身抗体 自身抗原

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敲低3-磷酸甘油酸脱氢酶靶向能量代谢逆转骨肉瘤恶性生物学的行为

6

作者 周红 康权 +3 位作者 谢圣男 陈洁 石雨鹭 罗庆 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期488-497,共10页

目的探讨敲低3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)靶向能量代谢对人骨肉瘤143B细胞恶性生物学行为及成骨分化的影响。方法Real-time PCR及Western blotting检测PHGDH在成骨细胞hFOB1.19和不同恶性程度骨肉瘤细胞TE85、MG63、143B中的表达。采用... 目的探讨敲低3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)靶向能量代谢对人骨肉瘤143B细胞恶性生物学行为及成骨分化的影响。方法Real-time PCR及Western blotting检测PHGDH在成骨细胞hFOB1.19和不同恶性程度骨肉瘤细胞TE85、MG63、143B中的表达。采用脂质体转染法将短发夹RNA(shRNA)-PHGDH重组质粒转染至143B细胞中,Real-time PCR和Western blotting检测PHGDH的表达变化;结晶紫染色法、细胞计数法、CCK-8实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞平行迁移能力,Transwell实验检测细胞垂直迁移及侵袭能力;Annexin V-FITC/PI双染法、DAPI染色法检测细胞凋亡;碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红S染色检测成骨分化作用,Western blotting检测成骨分化指标Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OC)的表达情况;Real-time PCR检测能量代谢相关基因葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、6-磷酸果糖激酶1(PFK1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)的表达,乳酸检测试剂盒测定乳酸分泌量,三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒检测ATP产生量。结果PHGDH在143B细胞中的表达明显高于在hFOB1.19、MG63和TE85细胞中(P<0.01);转染shRNA-PHGDH重组质粒使143B细胞中的PHGDH表达量降低(P<0.01)、增殖能力降低(P<0.01)、细胞迁移及侵袭能力减低(P<0.01)、凋亡率增高(P<0.01)、ALP染色阳性率增加(P<0.01)、茜素红染色阳性率增加(P<0.05)、Runx2(P<0.05)和OC的表达增高(P<0.01)、能量代谢相关基因(GLUT1、PFK1、PKM2、LDHA)的表达下调(P<0.01)、乳酸减少(P<0.01)、ATP增多(P<0.05)。结论敲低PHGDH可通过能量代谢抑制人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡,并促进其成骨分化。 展开更多

关键词 3-磷酸甘油酸脱氢酶 能量代谢 骨肉瘤 成骨分化 实时定量聚合酶链反应 人

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3-磷酸甘油酸脱氢酶在宫颈鳞状细胞癌中高表达

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作者 金英花 季宪锋 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第8期1370-1373,共4页

目的:检测宫颈鳞状细胞癌组织和细胞中3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)的表达水平,探讨其在肿瘤发生发展中的作用。方法:使用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学法检测宫颈鳞状细胞癌和正常宫颈组织中PHGDH m... 目的:检测宫颈鳞状细胞癌组织和细胞中3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)的表达水平,探讨其在肿瘤发生发展中的作用。方法:使用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学法检测宫颈鳞状细胞癌和正常宫颈组织中PHGDH mRNA转录水平和蛋白翻译水平;利用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测HeLa、Siha和Hacat细胞系中PHGDH mRNA转录水平和蛋白翻译水平。结果:与正常宫颈组织比较,宫颈鳞状细胞癌组织中PHGDH mRNA转录水平升高,PHGDH蛋白表达水平升高,其差异具有统计学意义(P<0.05);HeLa和Siha细胞系中PHGDH mRNA转录水平较Hacat细胞系高,PHGDH蛋白表达水平也较Hacat细胞系高,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈鳞状细胞癌组织和细胞系中PHGDH高表达,提示PHGDH可能与促进宫颈鳞状细胞癌病变进展有关。 展开更多

关键词 宫颈鳞状细胞癌 3-磷酸甘油酸脱氢酶 丝氨酸

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3-磷酸甘油酸脱氢酶与肿瘤关系的研究进展

8

作者 崔畅婉 孙峥嵘 《医学综述》 CAS 2021年第17期3414-3418,共5页

肿瘤细胞代谢与正常细胞不同,为了获得其快速增殖能力所需的物质和能量,肿瘤细胞能量代谢从有氧氧化转化为有氧酵解。3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)作为一种参与丝氨酸从头合成的关键酶,在肿瘤细胞增殖、转移过程中发挥重要作用,沉默PHGDH... 肿瘤细胞代谢与正常细胞不同,为了获得其快速增殖能力所需的物质和能量,肿瘤细胞能量代谢从有氧氧化转化为有氧酵解。3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)作为一种参与丝氨酸从头合成的关键酶,在肿瘤细胞增殖、转移过程中发挥重要作用,沉默PHGDH基因可导致肿瘤细胞增殖减少,凋亡增加,耐药性减弱。PHGDH参与乳腺癌、肺癌、黑色素瘤等肿瘤的发生发展过程,其高表达与患者生存率下降、远端转移以及肿瘤耐药等相关。未来,PHGDH有望成为肿瘤治疗的新靶点。 展开更多

关键词 肿瘤 3-磷酸甘油酸脱氢酶 细胞增殖

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MiR-149通过PHGDH对慢性髓系白血病细胞葡萄糖代谢的影响

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作者 尹石红 徐修才 《临床输血与检验》 CAS 2021年第3期294-300,共7页

目的探讨miR-149-5p,3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-Phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)与慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)伊马替尼(Imatinib,IM)耐药和糖酵解活性的相关性。方法检测CML细胞K562、伊马替尼耐药的CML细胞株K... 目的探讨miR-149-5p,3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-Phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)与慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)伊马替尼(Imatinib,IM)耐药和糖酵解活性的相关性。方法检测CML细胞K562、伊马替尼耐药的CML细胞株K562G中miR-149-5p、PHGDH的表达情况及葡萄糖摄取量。运用慢病毒转染技术在K562G细胞中获得过表达miR-149-5p的149G和对照组149N细胞。检测149G、149N细胞中miR-149-5p、PHGDH的表达情况及葡萄糖摄取量。基于液相-串联质谱联用(LC-MS/MS)技术进行靶向代谢组学分析。结果IM耐药的CML细胞株K562G中miR-149的表达水平明显低于IM敏感的CML细胞株K562(*P<0.05),而PHGDH的表达在K562G细胞中明显升高(*P<0.05)。与149N细胞相比,149G细胞中miR-149的表达水平明显升高(*P<0.05),而PHGDH的表达显著降低(*P<0.05)。同时,K562G细胞中葡萄糖摄取量较K562细胞明显升高(*P<0.05)。与149N细胞相比,149G细胞中葡萄糖摄取量明显降低(*P<0.05)。代谢组学分析,K562与K562G相比有9种代谢物水平有明显差异(*P<0.05)。结论miR-149-5p表达与CML细胞糖代谢重编程相关,过表达miR-149-5p可抑制下游靶基因PHGDH的表达。miR-149-5p靶向PHGDH通路可以抑制CML细胞的糖酵解活性。 展开更多

关键词 miR-149-5p 3-磷酸甘油酸脱氢酶 慢性髓细胞白血病 伊马替尼 液相-串联质谱联用

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C3植物绿色器官PEP羧化酶活性的比较研究 被引量：23

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作者 郝迺斌 谭克辉 +4 位作者 那松青 贾志旺 戈巧英 张玉竹 杜维广 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1991年第9期692-697,共6页

本文研究了小麦（Triticum aestivum L.）和大豆（Glycine max L.）的不同光合器官中的PEP羧化酶及其相关的酶类。在这些器官中均含有PEP羧化酶,其中以大豆的荚壳和种皮及小麦的内稃中PEP羧化酶活性最高。不同绿色器官在光下或暗中均能... 本文研究了小麦（Triticum aestivum L.）和大豆（Glycine max L.）的不同光合器官中的PEP羧化酶及其相关的酶类。在这些器官中均含有PEP羧化酶,其中以大豆的荚壳和种皮及小麦的内稃中PEP羧化酶活性最高。不同绿色器官在光下或暗中均能固定CO2,但是在黑暗条件下,小麦的内稃和大豆的荚壳及种皮所固定的CO2远高于叶片。此外,参与暗固定的NAD-苹果酸酶和NAD-苹果酸脱氢酶的活性,在这些器官中也最高,说明这些器官中PEP羧化酶的CO2 β-羧化作用主要在于固定呼吸作用所释放的CO2,只有少量的CO2是通过C4光合途径被固定。 展开更多

关键词 PEP羧化酶 小麦 大豆 C3植物

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酵母tRNA结合蛋白(43kD蛋白)羧端cDNA的克隆及其序列测定 被引量：1

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作者 刘全胜 刘建华 +1 位作者 金由辛 王德宝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期361-366,共6页

为了研究酵母分子量为 4 3kD的tRNA结合蛋白的基因来源 ,通过溴化氰部分化学裂解此蛋白 ,产生的 18kD肽段经过蛋白质氨端序列测定 ,测得 18kD肽段氨端部分序列为AFTFKK .针对序列AFTFKK设计简并引物 ,利用简并PCR方法和cDNA的 3′末端... 为了研究酵母分子量为 4 3kD的tRNA结合蛋白的基因来源 ,通过溴化氰部分化学裂解此蛋白 ,产生的 18kD肽段经过蛋白质氨端序列测定 ,测得 18kD肽段氨端部分序列为AFTFKK .针对序列AFTFKK设计简并引物 ,利用简并PCR方法和cDNA的 3′末端的快速扩增方法 (3′RACE) ,成功克隆 4 3kD蛋白mRNA的 3′端序列 .DNA序列测定结果表明 ,该序列位于 3 磷酸甘油酸激酶 (PGK1)基因 10 0 3位— 170 0位 ,长度为 6 98bp ,编码 3 磷酸甘油酸激酶羧基端的 180氨基酸残基以及 3′端非翻译区 .结果证实 ,4 展开更多

关键词 酵母 tRNA结合蛋白 43kD蛋白 羟端cDNA 克隆 序列测定

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