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小麦质核互作型雄性不育系及其保持系花药差异蛋白质组学分析 被引量:28
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作者 陈蕊红 叶景秀 +5 位作者 张改生 王俊生 牛娜 马守才 赵继新 朱建楚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期431-440,共10页
为了能从蛋白质水平揭示小麦细胞质雄性不育的分子遗传机制,采用IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳技术,对小麦质核互作型雄性不育系(S)-1376A及其保持系(A)-1376B在花药发育的单核期、二核期蛋白质进行了差异蛋白质组学研究,经考马斯亮蓝染色,... 为了能从蛋白质水平揭示小麦细胞质雄性不育的分子遗传机制,采用IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳技术,对小麦质核互作型雄性不育系(S)-1376A及其保持系(A)-1376B在花药发育的单核期、二核期蛋白质进行了差异蛋白质组学研究,经考马斯亮蓝染色,得到了重复性较好的双向电泳图谱.PDQuest软件在分子质量9.0~100.0ku、等电点4~7线性范围内,可识别约610个蛋白质点,对28个差异表达的蛋白质点采用基质辅助激光解吸分离飞行时间质谱进行肽指纹图谱分析,并利用Mascot软件在NCBInr数据库搜索,鉴定出12个差异表达蛋白,其中5个差异表达蛋白可能与雄性不育有关,分别是泛素结合酶E2、甘氨酸富集蛋白、抗坏血酸过氧化物酶、假定半胱氨酸蛋白酶抑制剂及1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小链克隆512,它们参与了物质能量代谢、细胞程序化死亡及花发育调控等过程,推测不育系(S)-1376A雄性不育性可能与这些生理生化代谢有关.研究结果为揭示雄性不育机理提供了理论依据. 展开更多
关键词 小麦 质核互作型雄性不育 差异蛋白质组学 双向凝胶电泳 基质辅助激光解吸飞行时间质谱
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抗生素对泡桐丛枝病植原体和发病相关蛋白质的影响 被引量:22
2
作者 范国强 张胜 +2 位作者 翟晓巧 刘飞 董占强 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期138-142,共5页
The effects of different concentrations of 5-fluorouracil, rifampicin and tetracycline on the phytoplasmas in the Paulownia tomentosa×Paulownia fortunei seedling and the pathogenic protein related to the witches... The effects of different concentrations of 5-fluorouracil, rifampicin and tetracycline on the phytoplasmas in the Paulownia tomentosa×Paulownia fortunei seedling and the pathogenic protein related to the witches’ broom symptom were studied with PCR based on 16S rRNA gene of the phytoplasmas and 2-dimensional electrophoresis of proteins. The results indicated that the plantlets in vitro culture treated with 0.5~300 mg·L -1 5-fluorouracil had little effect on the symptom remission, but those plantlets treated with 100 and 150 mg·L -1 rifampicin for 30 d showed obvious effect on the symptom remission respectively, and the phytoplasmas in the plantlets treated with 150 mg·L -1 rifampicin could not be detected with PCR of 16S rDNA of the phytoplasmas. Moreover, the protein (pI6.8,m 24 ku) which appeared in both the healthy seedling and diseases ones treated with 150 mg·L -1 rifampicin disappeared in the infected seedling and the those without the symptom after treating with rifampicin and tetracycline, and in which existed with phytoplasma through PCR detection. 展开更多
关键词 泡桐 丛枝病 蛋白质 双向电泳 PCR
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杀雄剂SQ-1诱导小麦雄性不育花粉粒差异蛋白质组学研究 被引量:18
3
作者 叶景秀 张改生 +6 位作者 王书平 陈蕊红 王俊生 牛娜 马守才 李红霞 朱建楚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期949-957,共9页
采用固相pH梯度/SDS-PAGE双向凝胶电泳对经杀雄剂SQ-1处理和未处理的小麦(Triticum aestivum)成熟期花粉总蛋白质进行了分离,银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.通过PDQuest 2DE图像软件的分析,在等电点4~7之间可识别35... 采用固相pH梯度/SDS-PAGE双向凝胶电泳对经杀雄剂SQ-1处理和未处理的小麦(Triticum aestivum)成熟期花粉总蛋白质进行了分离,银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.通过PDQuest 2DE图像软件的分析,在等电点4~7之间可识别350个以上较为清晰的蛋白质点,其中差异表达明显的蛋白质点数为21个.将11个差异点采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行了肽质量指纹图谱分析,采用Mascot软件在Swiss-prot数据库查询,鉴定出了7个蛋白质,它们分别是液泡转化酶、动力蛋白轻链TCTEX-1、锰超氧化物歧化酶、果糖-1,6-二磷酸醛缩酶、抗坏血酸过氧化物酶、凝集素蛋白激酶和一种未知功能的蛋白.对已知蛋白的功能进行分析,推测杀雄剂SQ-1诱导小麦雄性不育可能与能量代谢失衡、淀粉合成受抑制、活性氧积累、细胞凋亡以及花器官发育调节基因作用失控等有关. 展开更多
关键词 小麦 杀雄剂SQ-1 花粉粒 差异蛋白质组学 双向电泳 基质辅助激光解吸飞行时间质谱
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胡杨异形叶蛋白质表达的电泳分析 被引量:13
4
作者 岳宁 郑彩霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第32期18058-18061,共4页
[目的]研究胡杨异形叶发育的细胞与分子调控机制,揭示胡杨的生态适应性。[方法]利用SDS-PAGE及2-DE技术提取及分离同一株胡杨成年树异形叶片的蛋白质,建立适合胡杨叶片蛋白质分离的电泳技术。[结果]发现异形叶蛋白质的表达存在明显差异... [目的]研究胡杨异形叶发育的细胞与分子调控机制,揭示胡杨的生态适应性。[方法]利用SDS-PAGE及2-DE技术提取及分离同一株胡杨成年树异形叶片的蛋白质,建立适合胡杨叶片蛋白质分离的电泳技术。[结果]发现异形叶蛋白质的表达存在明显差异。由SDS-PAGE图谱可以看出,分子量为57.2,13.2,30.2,23.9,35.9及33.3 kD处的蛋白谱带差异明显。双向电泳图谱表明,胡杨叶蛋白多为分布在pH值5.0~6.5,20~40 kD之间的酸性低分子量蛋白质;共发现73个差异点,其中在锯齿卵圆形叶片中表达丰度上调的为51个点,下调的为22个点。[结论]推测在长期的进化过程中,胡杨叶片基因的调控表达发生改变而长出不同形状的叶片,以更好地适应环境。 展开更多
关键词 胡杨 异形叶 SDS聚-丙烯酰胺凝胶电泳 双向电泳
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肺组织灌注前后双向电泳的比较 被引量:12
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作者 李圣青 赵峰 +7 位作者 戚好文 张晓君 赵馨 潘刚 吴哲 王宇 阙海萍 刘少君 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期203-206,共4页
目的寻找更加有效的双向电泳方法以展示肺组织蛋白。方法取6只Wistar大鼠随机分为对照组和灌注组,用丙酮/三氯醋酸法提取肺组织蛋白并进行双向电泳分离,将2-D胶银染后用ImageScanner扫描仪扫描,采用ImageMaster 2-D Elite 3.10软件进行... 目的寻找更加有效的双向电泳方法以展示肺组织蛋白。方法取6只Wistar大鼠随机分为对照组和灌注组,用丙酮/三氯醋酸法提取肺组织蛋白并进行双向电泳分离,将2-D胶银染后用ImageScanner扫描仪扫描,采用ImageMaster 2-D Elite 3.10软件进行图象分析。结果对照组2-D胶的蛋白点计数为1 095±5,灌注组蛋白点计数为1 569±10。在分子质量30-70 ku范围内,灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01),在其他分子质量范围内二者蛋白点计数无显著性差异。在pH值5-8、9-10范围内,灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01),在其他pH值范围内二者蛋白点计数无显著性差异。结论生理盐水灌注法可显著减少肺组织中的血液蛋白成分,使得肺组织蛋白可以更好的在2-D胶上展示。 展开更多
关键词 双向电泳 肺组织 灌注
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鼻咽癌高癌家系不同体质证型鼻咽癌患者鼻咽病灶组织蛋白双向凝胶电泳分析 被引量:8
6
作者 陈舒华 田道法 +8 位作者 张继平 何迎春 陈细华 文凤妮 兰炎根 周少雄 陈闽琪 黄泽棋 江浩 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2010年第1期4-7,共4页
目的建立鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质证型及湿热体质证型高分辨率双向凝胶电泳特征图谱,探讨其证本质相关性蛋白质组学特征。方法设鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组、湿热体质组、其他体质证型组,散发性鼻咽癌患者组,鼻咽癌... 目的建立鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质证型及湿热体质证型高分辨率双向凝胶电泳特征图谱,探讨其证本质相关性蛋白质组学特征。方法设鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组、湿热体质组、其他体质证型组,散发性鼻咽癌患者组,鼻咽癌高癌家系健康成员对照组,共计5组。分别获取鼻咽组织标本,提取总蛋白质,固相pH梯度双向凝胶电泳分离,经考马斯亮蓝显色后,Image Master 2D Elite4.01图像分析软件进行电泳结果分析。结果各组标本均获得分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为860±20,854±25,842±30,867±20及857±15。比较分析,发现鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组与湿热体质组,差异蛋白质点10个。结论鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者不同体质证型蛋白质谱发生了明显变化,提示同病异证存在不同的本质内涵,为进一步研究鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者中医体质证型的本质内涵提供了实验依据。 展开更多
关键词 鼻咽癌 高癌家系 体质证型 双向凝胶电泳 蛋白质组学
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双向电泳过程中的常见问题及解决方法 被引量:7
7
作者 舒海燕 曹刚强 +2 位作者 凌华 袁保梅 田保明 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第3期1223-1224,共2页
[目的]研究蛋白质组双向电泳中出现的问题及解决方法。[方法]培养野生型K12菌株Escherichia coli MG1655,分离其蛋白质样品并进行SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]双向电泳中存在蛋白质点没有出现或很少,纵纹与横纹现象严重等问题。... [目的]研究蛋白质组双向电泳中出现的问题及解决方法。[方法]培养野生型K12菌株Escherichia coli MG1655,分离其蛋白质样品并进行SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]双向电泳中存在蛋白质点没有出现或很少,纵纹与横纹现象严重等问题。[结论]该研究为以后开展双向电泳试验打下了基础。 展开更多
关键词 双向电泳 影响因素 解决方法 蛋白质组
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应用血清蛋白质组分析筛选人胃癌相关抗原 被引量:6
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作者 曾希 廖爱军 +3 位作者 唐海林 易岚 解娜 苏琦 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1080-1084,共5页
背景与目的:寻找胃癌特异性或相对特异性标志物是胃癌研究亟待解决的课题。本研究利用血清蛋白质组分析方法,建立人胃癌组织蛋白质双向凝胶电泳图谱以及分别与胃癌患者血清和非癌人群血清的免疫印迹图谱,初步筛选人胃癌相关抗原。方法:... 背景与目的:寻找胃癌特异性或相对特异性标志物是胃癌研究亟待解决的课题。本研究利用血清蛋白质组分析方法,建立人胃癌组织蛋白质双向凝胶电泳图谱以及分别与胃癌患者血清和非癌人群血清的免疫印迹图谱,初步筛选人胃癌相关抗原。方法:运用2-DE分离人胃癌组织的总蛋白质;一个样品跑3块凝胶,1块考马斯亮染显色作为平行胶,另2块分别以胃癌患者自身血清和非癌人群血清作一抗进行免疫印迹分析,获得免疫印迹图谱;对图谱进行比较分析,识别差异反应的蛋白质点,根据差异反应蛋白质点位置在平行胶上找出匹配的蛋白质点;对差异反应的蛋白质点应用MALDI-TOF-MS进行质谱分析鉴定,获得相应的肽质指纹图谱,通过数据库搜索鉴定出差异反应的蛋白质。结果:人胃癌组织2-DE分离后分别与胃癌患者自身血清和非癌人群血清进行免疫印迹,获得分辨率较高的反应图谱;图像分析找出差异反应的蛋白质点14个,质谱鉴定获得hnRNPK、hnRNP H1、hnRNP H2、CK18、Fkbp52与Hsp90复合物、DBP、SBP1、eEF-1、ACTB、CKB、PSMC3、DDAH-1、NADH脱氢酶硫-铁蛋白1等13个蛋白质。结论:获得分辨率较高的人胃癌组织蛋白质组与胃癌患者自身血清及非癌人群血清反应的免疫印迹反应图谱,初步筛选了13个人胃癌相关抗原。为进一步筛选可应用于临床早期诊断、治疗、预后评估及疾病检测的人胃癌分子标志物奠定了基础。 展开更多
关键词 胃肿瘤 双向凝胶电泳 蛋白质组 血清 肿瘤相关抗原
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胃溃疡复发模型大鼠胃组织蛋白质组的动态变化及健胃愈疡颗粒干预作用 被引量:4
9
作者 申定珠 李家邦 +7 位作者 蒋荣鑫 凌江红 叶川 叶仁群 马国添 张宗棨 黄国栋 郭全 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2007年第1期11-13,17,共4页
[目的]通过胃溃疡(GU)复发大鼠胃组织蛋白质差异显示及健胃愈疡颗粒(JWYY)干预,寻找JWYY抗GU复发的相关蛋白。[方法]采用乙酸及白细胞介素1β(IL-1β)复制GU复发动物模型,分别于造模后第8、16、92天,对大鼠GU复发过程进行动态观察,并同... [目的]通过胃溃疡(GU)复发大鼠胃组织蛋白质差异显示及健胃愈疡颗粒(JWYY)干预,寻找JWYY抗GU复发的相关蛋白。[方法]采用乙酸及白细胞介素1β(IL-1β)复制GU复发动物模型,分别于造模后第8、16、92天,对大鼠GU复发过程进行动态观察,并同时给予JWYY干预,收集各时间点大鼠胃组织,提取胃组织总蛋白质,分别进行双向凝胶电泳(2-DE)分离I、mage Scanner扫描、PDQuest行差异蛋白质分析、凝胶考染,显示差异蛋白质。[结果]模型复发组大鼠出现生命活动整体反应(如体重、活动度等)下降;在各组考染凝胶图谱上,可辨识的蛋白质斑点达900-1 300个;与模型复发组相比,JWYY干预后,其蛋白质表达在不同时间点均有差异。[结论]JWYY抗GU复发的作用机制是多方面的,其干预作用与多种蛋白质相关。 展开更多
关键词 胃溃疡 健胃愈疡颗粒 蛋白质组 双向凝胶电泳
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脑梗死肝阳化风证患者外周血淋巴细胞凝胶图谱分析 被引量:2
10
作者 曾年菊 梁清华 +6 位作者 陈疆 区健刚 萧梅芳 张雨星 梁湘辉 鄢东红 关勇军 《实用预防医学》 CAS 2007年第6期1652-1655,共4页
目的建立脑梗死肝阳化风证高分辨率的二维凝胶电泳图谱,从蛋白质组学角度探讨脑梗死中医肝阳化风证的本质内涵。方法设脑梗死肝阳化风证组、健康人对照组、脑梗死阴虚生风证对照组3组,取外周静脉血分离淋巴细胞提取蛋白质,经双向凝胶电... 目的建立脑梗死肝阳化风证高分辨率的二维凝胶电泳图谱,从蛋白质组学角度探讨脑梗死中医肝阳化风证的本质内涵。方法设脑梗死肝阳化风证组、健康人对照组、脑梗死阴虚生风证对照组3组,取外周静脉血分离淋巴细胞提取蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,PDQuestV7.3.1软件比较分析3组图谱并识别差异表达蛋白质点。结果建立了脑梗死肝阳化风证、健康人组、脑梗死阴虚生风证患者外周静脉血淋巴细胞2-DE图谱,分别获得蛋白质点459个,552个,644个;通过分析比较,发现了脑梗死肝阳化风证与阴虚生风证的相同蛋白质点8个,差异蛋白质点23个。结论提示相类证有共同的物质基础,同病异证有不同的本质内涵,为进一步研究中医肝阳化风证本质内涵奠定了科学基础。 展开更多
关键词 肝阳化风证 脑梗死 二维电泳 蛋白质组学
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蛋白质组学在结核分枝杆菌研究中的应用 被引量:2
11
作者 王一鸣 陶晶 +1 位作者 郭晓奎 姚玉峰 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期245-249,共5页
蛋白质组学是在基因组学基础上发展起来的新兴学科,其基本技术包括样品制备、蛋白质分离和蛋白质鉴定分析,其中的核心技术是双向凝胶电泳技术(2-Dimensional Electrophoresis,2-DE)和质谱技术(Mass Spectrometry,MS)。近年来,蛋白质组... 蛋白质组学是在基因组学基础上发展起来的新兴学科,其基本技术包括样品制备、蛋白质分离和蛋白质鉴定分析,其中的核心技术是双向凝胶电泳技术(2-Dimensional Electrophoresis,2-DE)和质谱技术(Mass Spectrometry,MS)。近年来,蛋白质组学技术已应用于结核分枝杆菌的研究领域。应用蛋白质组学技术分离、鉴定、检测结核分枝杆菌致病株的全菌蛋白及分泌蛋白,分析其蛋白组成,可深入解析结核分枝杆菌的致病机理和耐药机制。通过对结核分枝杆菌致病株抗原的分析,为研制预防结核病的新型疫苗拓展了空间。通过对结核分枝杆菌临床分离株的蛋白组成分析还发现了一些有意义的结核病早期诊断标志物。蛋白质组学技术还应用于寻找新的药物靶标,在研制和筛选新的抗结核药物等方面展示了一些有价值的研究成果,为更好地开展结核病的预防、早期诊断及治疗打下了基础。 展开更多
关键词 蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱技术 结核分枝杆菌
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放线菌蛋白质组学研究进展 被引量:3
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作者 张瑶 徐平 +1 位作者 李文均 陶勇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1044-1058,共15页
蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,蛋白质组学旨在阐明生物体全部或部分蛋白质在生命活动中的作用和功能。随着组学理论基础和技术方法的逐渐成熟,蛋白质组学的研究被提高到了前所未有的高度。放线菌与人类的生产和生... 蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,蛋白质组学旨在阐明生物体全部或部分蛋白质在生命活动中的作用和功能。随着组学理论基础和技术方法的逐渐成熟,蛋白质组学的研究被提高到了前所未有的高度。放线菌与人类的生产和生活关系极为紧密,是产生抗生素和酶制剂的主要来源。近130多年的放线菌系统学研究和2001年模式菌株的全基因组测序,为功能基因组研究奠定了基础。与先前的基因组学和转录组学相比,放线菌蛋白质组学能更直接、更准确地解释生命现象,得到了快速发展,并受到研究者的高度关注。近年来放线菌蛋白质组学的研究主要包括复杂形态分化和发育过程、非凡的环境适应能力、与植物共生固氮、代谢机理及特殊功能、病原放线菌致病性和筛查天然产物等几个方向,为进一步促进放线菌蛋白质组学发展奠定了基础。 展开更多
关键词 放线菌 蛋白质组学 双向电泳 质谱 机理
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大鼠急性肺栓塞血清差异表达蛋白的研究 被引量:3
13
作者 李圣青 简文 +2 位作者 遆新宇 刘阿茹 欧阳海峰 《心脏杂志》 CAS 2007年第2期154-157,共4页
目的研究急性肺栓塞(APE)大鼠血清和正常大鼠血清的差异蛋白表达变化。方法采用血栓颈静脉注入法制备大鼠APE模型,采用双向电泳技术找出差异蛋白,用MALDI-TOF技术和生物信息学技术鉴定差异蛋白,并对部分差异表达蛋白采用Western-blot技... 目的研究急性肺栓塞(APE)大鼠血清和正常大鼠血清的差异蛋白表达变化。方法采用血栓颈静脉注入法制备大鼠APE模型,采用双向电泳技术找出差异蛋白,用MALDI-TOF技术和生物信息学技术鉴定差异蛋白,并对部分差异表达蛋白采用Western-blot技术作进一步验证。结果大鼠血清蛋白的2-DE胶银染可分离出1 400多个点,考染可达到1 200个点以上。经图像分析得到的24个差异表达蛋白中有12个蛋白得到鉴定。对部分差异蛋白采用Western-blot方法在蛋白水平的验证结果与2-DE结果基本相符。结论采用比较蛋白质组学的方法可以发现APE大鼠血清中的差异表达蛋白,这些差异表达蛋白分子将为我们寻找新的APE血清学标志物提供重要的线索和依据。 展开更多
关键词 肺栓塞 蛋白质组学 双向电泳 生物信息学 血清学
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Two-dimensional electrophoresis analysis of proteomics based on image feature and mathematical morphology 被引量:1
14
作者 SHEN Peng1,FAN Xiaohui2,ZENG Zhen2 & CHENG Yiyu2 1.The First Affiliated Hospital,College of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310003,China 2.Pharmaceutical Informatics Institute,Zhejiang University,Hangzhou 310027,China 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2005年第4期361-367,共7页
In this paper,a novel method to automatically detect protein spots on a two-dimensional (2-D) electrophoresis gel image is proposed to implement proteomics analysis of complex analyte.On the basis of the identifying s... In this paper,a novel method to automatically detect protein spots on a two-dimensional (2-D) electrophoresis gel image is proposed to implement proteomics analysis of complex analyte.On the basis of the identifying spots results based on color variation and spot size features,morphological feature is introduced as a new criterion to distinguish protein spots from non-protein spots.Image-sharpening,edge-detecting and morphological feature extraction methods were consequently combined to detect protein spots on a 2-D electrophoresis gel image subject to strong disturbance.The proposed method was applied to detect the protein spots of proteomic gel images from E.coli cell,human kidney tissue and human serum.The results demonstrated that this method is more accurate and reliable than previous methods such as PDQuest 7.2 and ImageMaster 5.0 software for detecting protein spots on gel images with strong interferences. 展开更多
关键词 proteomics 2-dimensional electrophoresis protein SPOT recognition analytical CHEMISTRY for life MORPHOLOGICAL feature image recognition.
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海马注射淀粉样蛋白β大鼠与正常大鼠脑蛋白质组双向电泳图谱比较 被引量:1
15
作者 杨国锋 王鲁宁 +1 位作者 赵馨 聂永慧 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第5期553-555,共3页
目的比较海马注射淀粉样蛋白β(Aβ)大鼠与正常大鼠脑蛋白质组双向电泳(2-DE)图谱差异,从蛋白质水平初步探索阿尔茨海默病(AD)发病机制。方法以固相pH梯度等电聚焦为第1向,SDS-PAGE垂直电泳为第2向进行2-DE。以图像分析软件ImageMaster ... 目的比较海马注射淀粉样蛋白β(Aβ)大鼠与正常大鼠脑蛋白质组双向电泳(2-DE)图谱差异,从蛋白质水平初步探索阿尔茨海默病(AD)发病机制。方法以固相pH梯度等电聚焦为第1向,SDS-PAGE垂直电泳为第2向进行2-DE。以图像分析软件ImageMaster 2D-Elite分析电泳图谱。结果海马注射Aβ大鼠与正常大鼠脑组织2-DE图谱分别检出496和491个蛋白点。对2张电泳图进行匹配后,发现有11个蛋白点仅在海马注射Aβ大鼠脑蛋白2-DE图谱中表达,而有6个蛋白点只在正常对照大鼠检测到。部分蛋白在2组大鼠脑组织中含量发生了明显变化。结论初步建立了AD动物模型比较蛋白质组学的技术方法;差异点的发现为深入理解AD发病机制及研发新药提供了有益的线索。 展开更多
关键词 海马注射淀粉样蛋白β 大鼠 脑蛋白质组 双向电泳图谱 比较 阿尔茨海默病
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双向电泳-免疫印迹技术分离白血病细胞核基质蛋白的初步研究
16
作者 刘峰 陈元玉 李冠武 《汕头大学医学院学报》 2004年第3期151-153,共3页
目的 :探讨急性髓系细胞白血病核基质蛋白 (NMPs)的变化。方法 :高盐抽提法制备白血病细胞NMPs ,免疫动物制备多克隆抗体 ,以此作为免疫学探针对正常WBC和白血病细胞NMPs进行双向电泳 ( 2DE)_免疫印迹 (Westernblot)检测。结果 :在急性... 目的 :探讨急性髓系细胞白血病核基质蛋白 (NMPs)的变化。方法 :高盐抽提法制备白血病细胞NMPs ,免疫动物制备多克隆抗体 ,以此作为免疫学探针对正常WBC和白血病细胞NMPs进行双向电泳 ( 2DE)_免疫印迹 (Westernblot)检测。结果 :在急性髓系细胞白血病细胞和正常WBCNMPs之间 ,有 3个蛋白质表现出质和量上的差异。结论 展开更多
关键词 白血病细胞 正常 核基质蛋白 WBC 髓系 急性 免疫印迹技术 双向电泳 初步研究 多克隆抗体
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甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白质组学参考图谱的建立 被引量:1
17
作者 王斌 朱力 +4 位作者 李娜 梁昊宇 王恒樑 陈薇 曾明 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期652-657,共6页
目的建立甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白的蛋白质组学参考图谱。方法甲型副伤寒沙门菌CMCC 50973培养至对数生长末期,收集菌体并破碎提取细菌的外膜蛋白,然后利用双向电泳(2-DE)将蛋白分离。分离后取蛋白点做MALDI-TOF-MS鉴定,根据质谱得到... 目的建立甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白的蛋白质组学参考图谱。方法甲型副伤寒沙门菌CMCC 50973培养至对数生长末期,收集菌体并破碎提取细菌的外膜蛋白,然后利用双向电泳(2-DE)将蛋白分离。分离后取蛋白点做MALDI-TOF-MS鉴定,根据质谱得到的肽指纹图谱在Mascot数据库中查询出匹配的蛋白。结果在2-DE考马斯亮蓝染色凝胶上取77个蛋白点,鉴定成功了54个点,对应29种蛋白。29种蛋白中定位于外膜为13种,定位未知的有11种,胞质中有5种。结论成功建立了甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白的蛋白质组学参考图谱,为进一步筛选疫苗抗原打下了基础。 展开更多
关键词 沙门菌 甲型副伤寒 细菌外膜蛋白质类 双向电泳 蛋白质组学
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基于双向电泳技术的丙酮丁醇梭菌ATCC824不同产物阶段膜蛋白质组比较 被引量:1
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作者 白雪 尉捷 +1 位作者 张亚兰 王雪涵 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第35期22-26,共5页
建立丙酮丁醇梭菌在产酸阶段和产有机溶剂阶段的膜蛋白质组;并进行比较分析。研究采用差速离心法提取了该菌在产酸阶段和产有机溶剂阶段的膜蛋白,进行双向电泳分离后,对差异蛋白进行质谱分析。不同生长阶段膜蛋白质组存在明显差异,经质... 建立丙酮丁醇梭菌在产酸阶段和产有机溶剂阶段的膜蛋白质组;并进行比较分析。研究采用差速离心法提取了该菌在产酸阶段和产有机溶剂阶段的膜蛋白,进行双向电泳分离后,对差异蛋白进行质谱分析。不同生长阶段膜蛋白质组存在明显差异,经质谱鉴定发现9个差异蛋白质,其中3个在产酸阶段高表达,6个在产有机溶剂阶段高表达。生物信息学分析表明,大部分蛋白含有明确的膜定位信息。产酸阶段高表达蛋白多与细胞信号转导有关,而产有机溶剂阶段高表达蛋白功能分布相对复杂。丙酮丁醇梭菌在不同产物阶段的差异膜蛋白被成功鉴定,它们可能在不同产物阶段的转换和细胞信号转导等过程中起到重要调控作用。 展开更多
关键词 丙酮丁醇梭菌 双向电泳 膜蛋白质组学
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HPLC-Chip/Ms纳流液质联用鉴定神经源性休克死亡心肌组织差异蛋白
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作者 朱素敏 李剑波 +3 位作者 唐任宽 刘云志 黄伟 宋安林 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期91-92,共2页
目的:采用比较蛋白质组学方法分析正常与神经源性休克死亡蛋白表达差异。方法:外力打击兔颈动脉窦建立神经源性休克死亡模型,提取死亡组与对照组左心室肌蛋白进行二维电泳和凝胶图像分析,对差异蛋白质用HPLC-Chip/Ms纳流液质联用技术... 目的:采用比较蛋白质组学方法分析正常与神经源性休克死亡蛋白表达差异。方法:外力打击兔颈动脉窦建立神经源性休克死亡模型,提取死亡组与对照组左心室肌蛋白进行二维电泳和凝胶图像分析,对差异蛋白质用HPLC-Chip/Ms纳流液质联用技术进行序列分析,经Spectrum Mill搜索UniProtKB/SWISS-PORT后鉴定蛋白质。结果:筛选出3个神经源性休克死亡组表达上调的蛋白质:封闭蛋白1、过氧化物酶增殖物激活受体δ、角蛋白15,1个表达下调的蛋白质甲基转移酶4。结论:神经源性休克发生了心肌蛋白表达改变,鉴定出的4种蛋白是潜在的神经源性休克生物标记物,可成为神经源性休克死亡诊断的客观依据。 展开更多
关键词 神经源性休克 双向电泳 液相色谱-芯片/质谱
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Proteins Associated with the Termination of Ocular Dominance Column Plasticity in Long Evans Rats 被引量:1
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作者 Junping Yao Zhengqin Yin Shijun Wang 《眼科学报》 2007年第3期143-152,共10页
Purpose:To investigate the mechanism of the termination of ocular dominance column plasticity by electrophysiologic analysis and 2-dimensional electrophoresis-mass spectrography(2-DE/MS).Methods:The changes in ocular ... Purpose:To investigate the mechanism of the termination of ocular dominance column plasticity by electrophysiologic analysis and 2-dimensional electrophoresis-mass spectrography(2-DE/MS).Methods:The changes in ocular dominance columns following monocular deprivation were electrophysiologically detected in 22-day-old,100-day-old and chondroitinase-perfused 100-day-old rats.Total protein of grey matter of the primary visual cortex was extracted and studied by 2-DE/MS from the three groups of rats.Results:Monocular deprivation may lead to shifts in ocular dominance columns in 22-day-old and chondroitinase-perfused 100-day-old rats,but not in 100-day-old rats.Four protein spots present in grey matter of the primary visual cortex in 100-day-old,but not in that of 22-day-old and chondroitinase-perfused rats,and mass spectrography identified two of these proteins.Conclusions:The electrophysiologic results show that ocular dominance column plasticity presents in 22-day-old rats,ends up in 100-day-old rats and restored in chondroitinase-perfused 100-day-old rats.2-DE/MS results show that phosphatidylethanolamine binding protein and glial fibrillary acidic protein delta may be associated with the termination of ocular dominance column plasticity in the rat,but need more evidence to confirm it. 展开更多
关键词 二维电泳 蛋白质 视皮层 软骨素硫酸盐 LONG Evans鼠 可塑性 眼优势柱
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