无机砷介导As3MT上调对16HBE细胞增殖、凋亡及AP-1表达的影响

1

作者 古云 成会荣 +3 位作者 陈倩 于甜乐 张启航 文卫华 《职业与健康》 CAS 2024年第5期613-619,624,共8页

目的了解无机砷(inorganic arsenic,i As)介导砷(+3氧化态)甲基转移酶[arsenic(+3 oxidation state)methyltransferase,As3MT]上调对16HBE细胞增殖、凋亡及激活蛋白-1(Activation of protein-1,AP-1)表达的影响,从而深入了解无机砷在细... 目的了解无机砷(inorganic arsenic,i As)介导砷(+3氧化态)甲基转移酶[arsenic(+3 oxidation state)methyltransferase,As3MT]上调对16HBE细胞增殖、凋亡及激活蛋白-1(Activation of protein-1,AP-1)表达的影响,从而深入了解无机砷在细胞生物学中的作用机制。方法将16HBE细胞经体外培养后随机分成两大组:以不同浓度(0、2、4、6μmol/L)亚砷酸钠(sodium arsenite,NaAsO_(2))为一组和相同浓度(0、6、6、6μmol/L)一甲基砷酸(monomethylarsonic acid,MMA)、二甲基砷酸(dimethylarsinic acid,DMA)、NaAsO_(2)为一组染毒人支气管上皮样细胞(16HBE)48 h。Western Blot检测As3MT蛋白在细胞中的表达。通过小干扰RNA(small disturbance RNA,siRNAs)转染沉默As3MT可对染毒后细胞产生一系列生物学效应。CCK-8试剂盒来检测细胞活力,JC-1试剂盒检测早期细胞凋亡和HO/PI双染试剂盒检测晚期细胞凋亡和坏死。采取双萤光素酶报告基因检测转录因子AP-1的转录活性。Western Blot检测c-Jun(p-c-Jun)和c-Fos(p-c-Fos)的蛋白表达水平。结果实验发现,无机砷处理能够显著上调16HBE细胞中As3MT的表达水平,并对细胞的增殖和凋亡产生影响。与对照组相比,染毒后的16HBE细胞中As3MT表达随着NaAsO_(2)浓度的增加而增加,呈剂量-效应关系。相同浓度下,诱导As3MT表达的能力NaAsO_(2)>DMA>MMA。细胞转染技术提示,成功沉默As3MT。沉默As3MT后,CCK-8法显示细胞活力下降(NCmean=1.00,S1mean=0.94,S2mean=0.71),siAs3MTb1组细胞活力明显低于siCtrl组(P<0.05);siAs3MTb2组细胞活力明显低于siCtrl组(P<0.05)。JC-1检测提示细胞凋亡增加(NCmean=1.80,S1mean=1.40,S2mean=1.18),siAs3MTb 1组550 nm/485 nm比值明显低于siCtrl组(P<0.05);siAs3MTb2组550 nm/485 nm比值明显低于siCtrl组(P<0.05)。HO/PI双染提示细胞凋亡和坏死增加,siAs3MT组较siCtrl组细胞染色更为明显。双萤光素酶报告基因分析的结果AP-1活性上升(NCmean=48.83,S1mean=132.67,S2mean=163.83),siAs3MTb 1组AP- 展开更多

关键词 砷 砷(+3氧化态)甲基转移酶 激活蛋白-1 人支气管上皮样细胞 细胞凋亡 细胞增殖

原文传递

表皮生长因子受体在苯并（a）芘致肺肿瘤中的表达变化 被引量：5

2

作者 古盼 刘海龙 +5 位作者 邓燕霞 高玮 刘建军 黄新凤 李习艺 黄海燕 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期257-261,共5页

目的 探讨表皮生长因子受体（EGFR）在苯并（a）芘（BaP）致肺肿瘤中的表达变化.方法 利用课题组前期构建的BaP诱导的人支气管上皮细胞恶性转化模型（BTC）作为研究对象,采用细胞免疫荧光和Western blot法分析比较恶性转化细胞（BTC细... 目的 探讨表皮生长因子受体（EGFR）在苯并（a）芘（BaP）致肺肿瘤中的表达变化.方法 利用课题组前期构建的BaP诱导的人支气管上皮细胞恶性转化模型（BTC）作为研究对象,采用细胞免疫荧光和Western blot法分析比较恶性转化细胞（BTC细胞）和同期未转化对照组细胞（16HBE细胞）中的EGFR蛋白表达变化.将健康雌性SPF级SD大鼠36只,将其以单纯随机法分为2组,每组18只.染毒组以肺穿刺法注射10 mg/ml玉米油-BaP,每只浓度0.2 ml,构建SD雌性大鼠肺肿瘤模型,收集肺脏组织,利用组织免疫荧光和Western blot法分析肺脏组织中EGFR蛋白的表达变化.采用t检验对EGFR蛋白相对灰度值进行分析.结果 细胞免疫荧光结果显示,与正常16HBE细胞比较,BTC细胞中EGFR蛋白的荧光强度较高;进一步利用Western blot检测EGFR的蛋白表达发现,对照组相对灰度值为1.04±0.13,BTC细胞的相对灰度值为2.32±0.12,BTC细胞的EGFR蛋白的表达水平较高,差异有统计学意义（t=12.39,P〈0.001）.SD大鼠肺肿瘤模型检测发现,染毒组大鼠肺组织存在弥漫性的肺泡间隔增厚、肺泡壁破坏以及肺泡融合等,肺组织内可见较大肿块,病理学分析为未分化细胞癌,提示肺肿瘤模型建立成功.免疫荧光结果显示,与对照组相比,BaP诱导的动物肺癌模型的肺组织中EGFR的荧光强度明显增强;Western blot分析结果证实,对照组和染毒组EGFR蛋白的相对灰度值分别为0.21±0.03、1.30±0.07,染毒组动物肺肿瘤组织中EGFR蛋白的表达水平高于对照组,差异有统计学意义（t=12.84,P〈0.001）.结论 在BaP致癌模型中,EGFR蛋白表达上调,EGFR在BaP致癌中可能发挥重要作用. 展开更多

关键词 苯并芘 肺肿瘤 表皮生长因子受体蛋白 16hbe细胞

原文传递

基于网络药理学和体外实验验证大蒜含硫化合物蒜氨酸抑制慢性气道炎症的作用机制研究

3

作者 王秋雨 李新霞 +2 位作者 兰怡 毛新民 马红梅 《中南药学》 CAS 2023年第5期1170-1176,共7页

目的通过网络药理学、分子对接模拟和体外细胞实验探讨蒜氨酸治疗慢性气道炎症的相关作用机制。方法运用数据库整理分析蒜氨酸与疾病共同靶点,进行KEGG通路富集分析,构建可视化药物-靶点-通路-疾病网络图。利用分子对接技术模拟获得相... 目的通过网络药理学、分子对接模拟和体外细胞实验探讨蒜氨酸治疗慢性气道炎症的相关作用机制。方法运用数据库整理分析蒜氨酸与疾病共同靶点,进行KEGG通路富集分析,构建可视化药物-靶点-通路-疾病网络图。利用分子对接技术模拟获得相关通路蛋白与蒜氨酸结合能。通过MTT实验检测蒜氨酸对16HBE细胞活性的影响,并利用流式细胞术观察蒜氨酸对细胞氧化应激的保护作用,采用ELISA法检测蒜氨酸对细胞上清液中IL-6、TNF-α表达的影响、Western blot法检测各组中IL-6、TGF-β1、PPARα蛋白表达水平。结果蒜氨酸与疾病关键潜在靶点有EGFR、MMP9、AKT1、MAPK1、PPARα等,KEGG通路富集分析得到主要信号通路有MAPK信号通路和PPAR信号通路等,分子对接实验中蒜氨酸与MMP9、AKT1、STAT、PPARα结合能稳定,小于-20.92 kJ·mol^(-1)。体外细胞实验结果表明蒜氨酸对细胞无明显毒性作用,结果显示蒜氨酸可以明显降低炎症状态下细胞内过多的活性氧水平,上调PPARα表达,并显著下调炎症因子IL-6、TNF-α与TGF-β1的表达。结论蒜氨酸能改善因香烟烟雾与脂多糖刺激下16HBE细胞的氧化应激和炎症反应,可能通过调控PPARα信号通路改善细胞炎症损伤状态,从而恢复细胞内正常的抗氧化、炎症反应。 展开更多

关键词 16hbe细胞 网络药理学 分子对接 活性氧 炎症因子 蒜氨酸

下载PDF 职称材料

氯化镉诱发人支气管上皮细胞系恶性转化 被引量：2

4

作者 王敏 魏莲 雷毅雄 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2005年第6期2-4,共3页

目的研究氯化镉诱发SV40 LargeT抗原永生化的人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化作用。方法体外用不同浓度氯化镉多次处理16HBE细胞,软琼脂集落形成和裸鼠成瘤试验鉴定转化细胞的恶性度。结果细胞培养至35代,发现氯化镉可诱导16HBE恶性... 目的研究氯化镉诱发SV40 LargeT抗原永生化的人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化作用。方法体外用不同浓度氯化镉多次处理16HBE细胞,软琼脂集落形成和裸鼠成瘤试验鉴定转化细胞的恶性度。结果细胞培养至35代,发现氯化镉可诱导16HBE恶性转化。转化细胞排列紊乱、重叠生长,在软琼脂中的集落形成率显著高于对照组(P<0.01),并呈时间—剂量依赖关系;转化细胞在裸鼠体内成瘤,组织学证实为低分化鳞状细胞癌。结论氯化镉有较强的诱导16HBE恶性转化能力;该转化模型为镉致癌机制的分子水平提供了理想的研究系统。 展开更多

关键词 氯化镉 16hbe 恶性转化

下载PDF 职称材料

马尾松针提取物对镉毒16HBE细胞保护作用 被引量：2

5

作者 袁琛 练玉银 +3 位作者 姜志杰 任亮 周珊珊 雷毅雄 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1516-1519,共4页

目的研究马尾松松针提取液对氯化镉(CdCl2)致16HBE细胞毒性的保护作用。方法用萃取法提取马尾松松针乙醇提取物(PMNE),分别用1、100和500μg/mL的PMNE(低、中、高浓度组)预处理16HBE细胞6 h,随后用25μmol/L CdCl2毒染至48 h,同时设阴... 目的研究马尾松松针提取液对氯化镉(CdCl2)致16HBE细胞毒性的保护作用。方法用萃取法提取马尾松松针乙醇提取物(PMNE),分别用1、100和500μg/mL的PMNE(低、中、高浓度组)预处理16HBE细胞6 h,随后用25μmol/L CdCl2毒染至48 h,同时设阴性对照组(正常培养16HBE细胞)及空白对照组(无细胞组),用CCK8法检测细胞相对生存率,硫代巴比妥酸(TBA)法检测各组细胞内丙二醛(MDA)含量,qPCR法检测各组细胞凋亡相关基因Bcl-2及Bax相对表达量。结果与阴性对照组相比,CdCl2单独作用组细胞相对生存率下降(P <0.05),细胞内MDA表达量升高(P <0.05);低、中、高浓度PMNE预处理组细胞与CdCl2单独处理组相比,细胞相对生存率均升高(P <0.05),MDA含量均降低(P <0.05),且浓度越高细胞相对生存率越高(P <0.05),MDA含量越低(P <0.05)。与CdCl2单独作用组相比,低、中、高浓度PMNE预处理组抑凋亡基因Bcl-2相对表达量均上调(P <0.05),促凋亡基因Bax相对表达量均下调(P <0.05),且浓度越高Bcl-2相对表达量越高(P <0.05)。结论 PMNE对CdCl2所致的细胞毒性有一定程度的保护作用。 展开更多

关键词 马尾松 松针提取液 16hbe细胞 氯化镉(CdCl2)

原文传递

siRNA沉默LBH基因促进人支气管上皮细胞周期进展 被引量：1

6

作者 刘启才 王颖峰 +5 位作者 杨春祥 李晓艳 彭燕 彭杰 李冰 李立 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期357-360,共4页

目的:利用合成的小分子干扰RNA(siRNA)转染人支气管上皮细胞16HBE,观察LBH(limb-budand heart)基因表达下调对16HBE细胞周期及相关基因表达的影响。方法:脂质体2000转染靶向LBH基因的siRNA到16HBE细胞,荧光定量RT-PCR检测siRNA转染后LB... 目的:利用合成的小分子干扰RNA(siRNA)转染人支气管上皮细胞16HBE,观察LBH(limb-budand heart)基因表达下调对16HBE细胞周期及相关基因表达的影响。方法:脂质体2000转染靶向LBH基因的siRNA到16HBE细胞,荧光定量RT-PCR检测siRNA转染后LBH基因表达,流式细胞术检测LBH基因沉默后16HBE细胞周期的改变,荧光定量RT-PCR及Western blotting检测LBH基因沉默后细胞周期素E1和E2表达水平。结果:50 nmol/L siRNA转染16HBE细胞48 h后,LBH基因的表达水平只有对照组的14%;siRNA转染16HBE细胞48 h,其G1期细胞百分率比对照组减少9.28%,而S期细胞百分比增加14.08%;16HBE细胞在50nmol/L siRNA的转染后,细胞周期素E2的表达水平为对照组的2倍,而细胞周期素E1的表达没有发生明显改变。结论:靶向于LBH基因的siRNA能有效沉默16HBE细胞中LBH基因的表达,LBH基因的表达下调促进了16HBE细胞周期G1/S期的进展;细胞周期素E2的表达上调参与了LBH沉默导致的细胞周期G1/S期的进展。 展开更多

关键词 RNA干扰 基因 LBH 16hbe细胞 细胞周期

下载PDF 职称材料

PARG基因沉默在六价铬诱导细胞周期改变中的作用 被引量：2

7

作者 黄海燕 蔡剑锋 +7 位作者 刘建军 夏菠 杨淋清 吴德生 黄新凤 杨细飞 洪文旭 庄志雄 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期200-204,共5页

目的深入了解PARG的功能及探讨PARG基因沉默在调节六价铬诱导细胞周期改变的作用。方法使用前期构建的PARG基因缺陷细胞(sh PARG细胞)和正常16HBE细胞作为研究对象,进行0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L的六价铬[Cr(Ⅵ)]溶液染毒处理2... 目的深入了解PARG的功能及探讨PARG基因沉默在调节六价铬诱导细胞周期改变的作用。方法使用前期构建的PARG基因缺陷细胞(sh PARG细胞)和正常16HBE细胞作为研究对象,进行0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L的六价铬[Cr(Ⅵ)]溶液染毒处理24 h,利用免疫荧光法检测PAR的表达、流式细胞仪观察细胞周期、RTPCR分析ATM和P53基因mRNA水平的表达。结果 Cr(Ⅵ)染毒处理后,正常16HBE细胞的S期明显延长,0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L剂量组S期细胞比例分别为18.3%、21.6%、26.0%、30.9%、38.8%和43.2%,G2期明显缩短;sh PARG细胞的S期延长,但比例增幅远小于正常16HBE细胞,0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L剂量组S期细胞比例分别为17.0%、19.0%、20.1%、21.2%、24.5%和31.3%。正常16HBE细胞内P53基因表达随Cr(Ⅵ)作用剂量的增加而逐渐升高,PARG缺陷细胞内P53基因表达改变不明显(与对照组相比,P>0.05);Cr(Ⅵ)染毒处理后,两种细胞内ATM基因的表达均增加,但正常16HBE细胞内增加更明显,如:5.0μmol/L的Cr(Ⅵ)作用时,正常16HBE细胞内ATM基因的表达升高可达6.67倍(与对照组相比,P<0.01),而sh PARG细胞内ATM基因表达仅升高2.27倍(与对照组相比,P<0.01)。结论 PARG基因沉默可对抗Cr(Ⅵ)诱导的细胞周期时相改变。 展开更多

关键词 六价铬Cr(Ⅵ) 16hbe细胞 聚-ADP-核糖水解酶(PARG) 聚-ADP-核糖(PAR) 细胞周期

原文传递

大气PM_(2.5)对人支气管上皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

8

作者 吴德生 余璐华 +3 位作者 杨淋清 左然 李萍 袁建辉 《中国热带医学》 CAS 2019年第1期70-73,共4页

目的探讨PM2.5暴露后,人支气管上皮细胞(16HBE)的增殖和凋亡的变化,研究PM2.5对16HBE细胞的影响。方法将16HBE细胞暴露于0、50、100、200、400、600、800、1 000μg/mL PM2.5悬浮液,24 h后加入CCK-8,3～4 h后用酶标仪在450 nm处测量OD值... 目的探讨PM2.5暴露后,人支气管上皮细胞(16HBE)的增殖和凋亡的变化,研究PM2.5对16HBE细胞的影响。方法将16HBE细胞暴露于0、50、100、200、400、600、800、1 000μg/mL PM2.5悬浮液,24 h后加入CCK-8,3～4 h后用酶标仪在450 nm处测量OD值,并计算细胞存活率。将16HBE细胞暴露于0、50、100、200、400、800μg/mL PM2.5悬浮液,24 h后加入hoechst33342染色25 min、PI染色30 min,显微镜下观察调亡的细胞并计数,计算细胞凋亡率。结果 PM2.5暴露24 h后,50、100、200、400、600、800、1 000μg/mL组细胞存活率显著下降,分别为(89.41±5.53)%、(75.71±5.99)%、(82.99±15.09)%、(61.74±9.88)%、(57.23±3.28)%、(46.00±4.23)%、(42.63%±7.79)%,有剂量效应关系,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P均<0.01)。PM2.5对16HBE细胞的24 h半数致死浓度(LC50)为(762.03±180.25)μg/mL。PM2.5暴露24 h后,在镜下计数各剂量组调亡细胞,细胞凋亡数量随着剂量升高而增高,0、50、100、200、400、800μg/mL组细胞调亡率分别为(10.50±2.64)%、(17.90±4.63)%、(21.30±2.26)%、(32.10±4.18)%、(36.90±3.25)%、(50.30±5.81)%,有剂量效应关系,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P均<0.01)。结论 PM2.5对16HBE细胞有毒性作用,可导致16HBE细胞增殖受到抑制,凋亡增加。 展开更多

关键词 PM2.5 人支气管上皮细胞 细胞增殖 细胞凋亡

原文传递

二羟环氧苯并芘诱导16HBE细胞转化最佳实验方案

9

作者 蒋义国 陈家堃 陈学敏 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期137-139,178,共4页

目的　采用客观又简单的软琼脂细胞集落形成率的指标来探索二羟环氧苯并芘诱导 16 HBE细胞转化的理想实验方案 ,构建恶性转化的细胞模型。方法　根据细胞存活率试验及克隆形成率试验确定诱导的剂量 ,以不同剂量二羟环氧苯并芘 1次或多... 目的　采用客观又简单的软琼脂细胞集落形成率的指标来探索二羟环氧苯并芘诱导 16 HBE细胞转化的理想实验方案 ,构建恶性转化的细胞模型。方法　根据细胞存活率试验及克隆形成率试验确定诱导的剂量 ,以不同剂量二羟环氧苯并芘 1次或多次处理细胞 ,观察培养的不同阶段转化灶出现情况 ,用软琼脂培养鉴定其锚着依存性生长的恶性特征 ,比较各组转化细胞的集落形成率。结果　以 0 .1、0 .5、1.0、2 .0 μmol/ L的剂量 ,对细胞多次间断染毒 ,传代 15次 ,是二羟环氧苯并芘诱导 16 HBE细胞恶性转化的理想方案 ,其集落形成率分别为 2 .0‰、5 .5‰、7.0‰、10 .5‰ ,剂量 -反应关系呈现良好的直线相关 ,r=0 .9741,P<0 .0 5。结论　二羟环氧苯并芘能诱导人支气管上皮细胞 16 HBE转化 。 展开更多

关键词 二羟环氧苯并芘 恶性转化 支气管上皮细胞 16hbe 细胞转化 诱导 环境污染物 化学污染物

下载PDF 职称材料

石英粉尘激活TLR4信号通路诱导气道炎症反应的机制研究 被引量：1

10

作者 陈祥娃 霍婷婷 +2 位作者 董发勤 刘靳波 邓建军 《岩石矿物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期211-217,共7页

为了探索大气颗粒物中石英粉尘诱导气道炎症反应的分子机制,采用XRD对石英粉尘进行了物相分析,并以支气管上皮细胞作为染毒对象,将石英粉尘作用于细胞24 h后,CCK-8检测细胞存活率,ELISA检测培养上清液中的白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介... 为了探索大气颗粒物中石英粉尘诱导气道炎症反应的分子机制,采用XRD对石英粉尘进行了物相分析,并以支气管上皮细胞作为染毒对象,将石英粉尘作用于细胞24 h后,CCK-8检测细胞存活率,ELISA检测培养上清液中的白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的浓度,Western Blot检测TLR4的表达,使用Toll样受体4特异性抑制剂TAK 242预处理后检测IL-6、IL-8、TLR4水平。实验结果显示,石英粉尘的主要物相是石英,并含部分方解石;随着石英粉尘染毒浓度的增加,细胞相对存活率下降;与对照组相比,100μg/mL组上清液中IL-6与IL-8浓度显著增加(P<0.01);50、75和100μg/mL组的高水平IL-6和IL-8可被TAK 242拮抗,使用TAK 242预处理后,100μg/mL组IL-6、IL-8浓度显著降低(P<0.01);TLR4的表达量随石英粉尘浓度增加而升高,且TAK 242的干预可以有效阻止TLR4通路的活化。研究结果表明,石英粉尘可以刺激支气管上皮细胞分泌高浓度的炎症因子,其机制可能是TLR4信号通路的活化。 展开更多

关键词 石英粉尘 人支气管上皮(16hbe)细胞 炎症反应 Toll样受体4(TLR4) TAK 242

下载PDF 职称材料

N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍对人支气管上皮16HBE细胞周期进程的影响 被引量：1

11

作者 宋彦超 赵鹏 +4 位作者 傅娟玲 李振宁 米岚 姚碧云 周宗灿 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期165-168,共4页

目的探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对人支气管上皮16HBE细胞周期进程的影响及相关分子机制。方法 16HBE细胞经MNNG处理后,噻唑蓝(MTT)法检测MNNG对16HBE细胞增殖的影响,PI染色检测细胞凋亡,Hoechst 33342和PI双染检测细胞坏... 目的探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对人支气管上皮16HBE细胞周期进程的影响及相关分子机制。方法 16HBE细胞经MNNG处理后,噻唑蓝(MTT)法检测MNNG对16HBE细胞增殖的影响,PI染色检测细胞凋亡,Hoechst 33342和PI双染检测细胞坏死,流式细胞术检测细胞周期分布,在周期变化明显的时点应用蛋白免疫印记检测周期相关蛋白含量变化。结果 MNNG能够剂量依赖性的抑制细胞增殖和诱导凋亡,亚致死剂量的MNNG使细胞引起明显的S期和G2/M期阻滞,同时细胞周期相关蛋白p-Cdk2(Thr160)和Cdc25A含量下降明显。结论 MNNG通过降低细胞p-Cdk2(Thr160)和Cdc25A的含量诱导16HBE细胞发生S期和G2/M期阻滞。 展开更多

关键词 MNNG 细胞周期 CDC25A Cdk2 16hbe细胞

原文传递

中药添加剂降低烟气悬凝物诱导16HBE细胞损伤的实验研究 被引量：1

12

作者 魏民巍 郑赛晶 +3 位作者 孟庆乃 金永明 周昆 胡利民 《河南中医》 2012年第12期1613-1616,共4页

目的:观察中药添加剂降低烟气悬凝物诱导16HBE细胞损伤的作用。方法:使用人类支气管上皮细胞系16HBE细胞,建立细胞烟气悬凝物染毒模型,检测染毒后细胞活力,氧化应激水平,TNF-α、IL-8分泌情况。结果:烟气悬凝物染毒后,细胞活力下降,氧... 目的:观察中药添加剂降低烟气悬凝物诱导16HBE细胞损伤的作用。方法:使用人类支气管上皮细胞系16HBE细胞,建立细胞烟气悬凝物染毒模型,检测染毒后细胞活力,氧化应激水平,TNF-α、IL-8分泌情况。结果:烟气悬凝物染毒后,细胞活力下降,氧化应激水平升高,TNF-α、IL-8分泌增加。含中药添加剂组烟气悬凝物染毒后细胞活力高于普通烟组,LDH释放及氧化应激水平降低,TNF-α、IL-8分泌减少。结论:烟气悬凝物染毒16HBE细胞可致细胞活力下降及氧化应激水平升高,细胞因子分泌增加,中药添加剂可缓解以上情况。 展开更多

关键词 中药添加剂 16hbe细胞 烟气悬凝物 TNF-Α IL-8

下载PDF 职称材料

中波紫外线致16HBE细胞损伤及其机制 被引量：1

13

作者 吕超 丁振华 周美娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期57-60,共4页

目的探讨中波紫外线(UVB)照射对人支气管上皮细胞(16HBE)的生物学效应及其机制。方法细胞分为不同照射剂量同一观察时间组(剂量分别为0、10、30、50、70、100 J/m2,观察时间为照后12 h)和同一剂量不同观察时间组(剂量为50 J/m2,观察时... 目的探讨中波紫外线(UVB)照射对人支气管上皮细胞(16HBE)的生物学效应及其机制。方法细胞分为不同照射剂量同一观察时间组(剂量分别为0、10、30、50、70、100 J/m2,观察时间为照后12 h)和同一剂量不同观察时间组(剂量为50 J/m2,观察时间为照后2、4、8、12、24 h)以观察UVB对16HBE细胞的存活率的影响;琼脂糖凝胶电泳观察细胞接受50 J/m2照射后其DNA的断裂情况、流式细胞术检查细胞周期、Western blot检查NF-kB的表达情况。结果 UVB照射后,可使16HBE细胞的存活率下降;DNA出现明显的"梯状条带";细胞发生S期阻滞以及NF-kB蛋白的表达增强。结论 UVB照射能引起16HBE细胞生长抑制和凋亡;其作用机制可能与NF-kB蛋白的表达增强有关。 展开更多

关键词 UVB 16hbe细胞 细胞存活率 NF-KB 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

东风桔不同萃取部位对CSE诱导的16HBE细胞存活率的影响及其抗炎机制 被引量：1

14

作者 宋雪慧 孙京京 +4 位作者 陈艳芬 沈志滨 余邦伟 崔红花 尹永芹 《广东药科大学学报》 CAS 2018年第4期442-446,479,共6页

目的研究东风桔不同极性萃取部位对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)存活率的影响以及炎症相关因子的表达,探讨其作用机制。方法通过CSE刺激16HBE细胞,使其产生炎性反应,并通过MTT法检测细胞活力、TNF-α等炎症因子的... 目的研究东风桔不同极性萃取部位对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)存活率的影响以及炎症相关因子的表达,探讨其作用机制。方法通过CSE刺激16HBE细胞,使其产生炎性反应,并通过MTT法检测细胞活力、TNF-α等炎症因子的变化,研究东风桔不同极性萃取部位对CSE刺激的16HBE细胞产生的作用。结果三氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇部位对CSE刺激的16HBE细胞产生了保护作用,细胞存活率较模型组有显著增高,同时抑制了炎症因子的释放,其中乙酸乙酯部位高剂量组、正丁醇部位高、中剂量组效果与模型组比较差异有统计学意义。结论乙酸乙酯部位和正丁醇部位可提高CSE刺激的16HBE细胞的存活率,可通过抑制炎症因子的激发达到抗炎作用。 展开更多

关键词 东风桔 16hbe COPD CSE 细胞存活率

下载PDF 职称材料

高迁移率族蛋白1协同屋尘螨对人气道上皮细胞通透性及连接蛋白损伤的影响 被引量：1

15

作者 黄武锋 余常辉 +2 位作者 赵海金 邹飞 蔡绍曦 《热带医学杂志》 CAS 2021年第8期949-952,1005,944,共6页

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)协同屋尘螨(HDM)对人气道上皮细胞系16HBE通透性及连接蛋白表达和分布的影响。方法将细胞分为正常对照组(加入无刺激物培养基)、HDM(100 U/mL)刺激组、HMGB1(400 ng/mL)刺激组和HDM(100 U/mL)+HMGB1(400 ... 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)协同屋尘螨(HDM)对人气道上皮细胞系16HBE通透性及连接蛋白表达和分布的影响。方法将细胞分为正常对照组(加入无刺激物培养基)、HDM(100 U/mL)刺激组、HMGB1(400 ng/mL)刺激组和HDM(100 U/mL)+HMGB1(400 ng/mL)联合刺激组。处理细胞24 h,并通过MTT比色法测定16HBE细胞存活和生长。通过测定紧密连接相关的单层细胞的跨膜电阻值(TER)及FITC-右旋糖苷通透性,观察处理因素对16HBE细胞通透性的影响;蛋白质印迹法(Western bolt)测定E-cadherin,β-catenin,claudin-1和occludin4种连接蛋白水平的表达;共聚焦显微镜观察连接蛋白的分布。结果与正常对照组比较,HDM可引起TER一过性下降,降低occludin和claudin-1蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);与HDM刺激组比较,联合刺激组显著增加16HBE细胞通透性,减少16HBE细胞TER值,增加FITC-右旋糖苷通透性,差异有统计学意义(P<0.05)。与HDM和HMGB1刺激组比较,联合刺激组降低连接蛋白occludin和claudin-1蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05),促进粘附连接蛋白E-cadherin及β-catenin再分布。结论HMGB1协同HDM增加人气道上皮细胞16HBE通透性及连接蛋白表达异常,为HMGB1可能参与了哮喘上皮屏障功能异常提供新的证据。 展开更多

关键词 HMGB1 屋尘螨 16hbe细胞 通透性

原文传递

ASPM基因在氯化镉致16HBE细胞氧化损伤中的作用

16

作者 周珊珊 张昉 +5 位作者 任亮 段鹏 陈卓航 张双 雷毅雄 杨萍 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期194-198,共5页

目的研究ASPM基因在氯化镉(CdCl2)致人支气管上皮细胞(16HBE)氧化损伤中的作用。方法分别用0、10、20和30μmol/L CdCl2处理16HBE细胞24 h,以及用30μmol/L CdCl2处理16HBE细胞12、24和48 h。利用qRT-PCR法检测16HBE细胞ASPM基因表达变... 目的研究ASPM基因在氯化镉(CdCl2)致人支气管上皮细胞(16HBE)氧化损伤中的作用。方法分别用0、10、20和30μmol/L CdCl2处理16HBE细胞24 h,以及用30μmol/L CdCl2处理16HBE细胞12、24和48 h。利用qRT-PCR法检测16HBE细胞ASPM基因表达变化情况;采用慢病毒稳定表达技术构建ASPM缺陷细胞株;采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测各组细胞内丙二醛(MDA)含量,用水溶性四唑盐法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与空白对照组(未用CdCl2处理的16HBE细胞)相比,16HBE细胞随着CdCl2染毒剂量与时间的增加,SOD活性出现降低,MDA出现增加的趋势;与空白对照组(未用CdCl2处理的16HBE细胞)相比,实验组ASPM mRNA相对表达量与CdCl2呈现出时间-剂量关系(P<0.05);ASPM基因低表达细胞株构建的基因沉默率为96.9%(P<0.05);与相同CdCl2剂量点和时间点处理的16HBE细胞相比,ASPM缺陷细胞的SOD含量低于16HBE细胞,而MDA含量高于16HBE细胞(P<0.05)。结论 ASPM基因缺陷细胞加剧CdCl2所致氧化损伤,提示ASPM基因在CdCl2致16HBE细胞氧化损伤过程中发挥拮抗作用。 展开更多

关键词 16hbe细胞 超氧化物歧化酶 丙二醛 氯化镉 ASPM基因

原文传递

扶正解毒含药血清对硫酸镍诱导人支气管上皮细胞转化的抑制作用

17

作者 吕晓云 滕玉莲 +2 位作者 朱玉真 赵健雄 梁耀军 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期84-88,共5页

目的观察中药复方扶正解毒含药血清(FJD)对硫酸镍(NiSO4)诱导培养人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化的抑制作用。方法NiSO4多次处理16HBE细胞,利用刀豆凝集素A(ConA)凝集实验和软琼脂集落形成实验进行转化细胞的恶性鉴定;同时添加不同剂... 目的观察中药复方扶正解毒含药血清(FJD)对硫酸镍(NiSO4)诱导培养人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化的抑制作用。方法NiSO4多次处理16HBE细胞,利用刀豆凝集素A(ConA)凝集实验和软琼脂集落形成实验进行转化细胞的恶性鉴定;同时添加不同剂量的FJD,观察其抗转化效应。结果NiSO4(400μmol/L)染毒8次(20代)时,细胞生长速度加快,排列紊乱,失去接触抑制,出现复层生长,可被ConA凝集,并可在软琼脂上生长。3种剂量FJD与NiSO4共处理组细胞转化率分别为0.82%、0.47%和0.19%,明显低于单用NiSO4组(4.13%),且呈剂量-效应关系(r=-0.884,P<0.01),细胞ConA凝集反应阴性,不能在软琼脂上生长。结论体外实验显示,FJD具有抑制NiSO4诱导16HBE细胞恶性转化的作用。 展开更多

关键词 扶正解毒含药血清 硫酸镍 细胞转化 16hbe细胞

原文传递

苯并[a]芘恶性转化16HBE细胞元素组分析及铜与顺铂或长春瑞滨联用对细胞增殖的作用

18

作者 王裕 闫赖赖 +5 位作者 付娟玲 郝明媚 陈雯 姚碧云 常兵 赵鹏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期1-10,共10页

目的研究苯并[a]芘(BaP)致细胞恶性转化中元素组的变化,探讨铜与顺铂或长春瑞滨联用对细胞增殖的影响。方法以16HBE细胞和BaP恶性转化细胞T-16HBE-C1细胞为研究对象,采用电感耦合等离子质谱分析44种元素在2种细胞中的含量,采用偏最小二... 目的研究苯并[a]芘(BaP)致细胞恶性转化中元素组的变化,探讨铜与顺铂或长春瑞滨联用对细胞增殖的影响。方法以16HBE细胞和BaP恶性转化细胞T-16HBE-C1细胞为研究对象,采用电感耦合等离子质谱分析44种元素在2种细胞中的含量,采用偏最小二乘回归分析元素含量对2种细胞的区分能力,采用MTT法检测铜(0,237,340,487,1000和1432μmol·L^(-1))、顺铂(0,4.4,6.1,8.6,12.0和16.8μmol·L^(-1))和长春瑞滨(0,3.8,9.8,25.0,40.0和64.0μmol·L^(-1))对2种细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)比例制备铜与顺铂混合物和铜与长春瑞滨混合物,采用MTT法检测其对细胞存活率的影响,并采用等效线图法分析铜与顺铂或长春瑞滨的联合作用。采用MTT法检测铜(0,50,100,200,400和800μmol·L^(-1))与IC_(50)的顺铂或长春瑞滨联用对T-16HBE-C1细胞存活率的影响。结果在2种细胞中共检出29种元素,其中铜、锌、银、硒和铷含量在T-16HBE-C1细胞中较16HBE细胞降低(P<0.01,P<0.05),钼、砷、锂、锗、锶、镍、镧、汞、铁和铯含量升高(P<0.01,P<0.05)。元素含量可用于区分16HBE和T-16HBE-C1细胞。铜可抑制16HBE和T-16HBE-C1细胞增殖,IC_(50)分别为(613±16)μmol·L^(-1)和(776±15)μmol·L^(-1)(P<0.01)。铜与顺铂混合物(1∶69.5)和铜与长春瑞滨混合物(1∶33.4)抑制T-16HBE-C1细胞增殖,且铜与顺铂和长春瑞滨具有相加作用。与单独IC_(50)浓度的顺铂(11.2μmol·L^(-1))或长春瑞滨(23.2μmol·L^(-1))相比,当铜>400μmol·L^(-1),其与IC_(50)浓度的顺铂或长春瑞滨联合作用可抑制T-16HBE-C1细胞增殖。结论16HBE细胞经BaP恶性转化后元素含量和相关关系发生改变。铜可抑制T-16HBE-C1细胞增殖,且在高浓度时与顺铂和长春瑞滨具有相加的联合作用。 展开更多

关键词 元素组 铜 顺铂 长春瑞滨 苯并[A]芘 细胞增殖 T-16hbe-C1细胞

下载PDF 职称材料

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响 被引量：2

19

作者 李好 张莹 +8 位作者 王丽春 姜莉 范胜涛 杨二霞 董承红 蒋国润 张小龙 廉亚茹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期255-260,264,共7页

目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3... 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3. 1(+),构建重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1。分别转染人支气管上皮细胞16HBE,于转染后24、48和72 h收集样本,进行细胞内天然免疫相关信号分子表达的检测和刺激T细胞增殖的检测。结果经双酶切及测序鉴定,重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1构建正确。与阴性对照组比较,EV71-VP1组IFNγ、OX40L、RANKL、TNF-α和IL-2的水平上调,而CA16-VP1组的上调幅度较小。EV71-VP1及CA16-VP1组16HBE细胞的胞内外提取物均可明显刺激分泌IFNγ的T细胞增殖(P <0. 05)。结论 EV71和CA16 VP1蛋白在人上皮细胞16HBE中表达后,可差异性诱导细胞中天然免疫信号分子表达及相似的非特异性刺激T细胞增殖能力。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型 人支气管上皮细胞16hbe 天然免疫 获得性免疫

原文传递

镉对16HBE细胞凋亡及Bal-2、Bax基因表达影响 被引量：2

20

作者 刘海柏 周志衡 雷毅雄 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期366-368,共3页

目的探讨镉恶性转化人支气管上皮细胞(16HBE细胞)过程中细胞凋亡状况以及Bal-2和Bax表达变化。方法采用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测16HBE细胞、氯化镉恶性转化16HBE细胞不同阶段(第5、15、35代细胞及成瘤细胞)的细胞凋亡和Bal-2... 目的探讨镉恶性转化人支气管上皮细胞(16HBE细胞)过程中细胞凋亡状况以及Bal-2和Bax表达变化。方法采用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测16HBE细胞、氯化镉恶性转化16HBE细胞不同阶段(第5、15、35代细胞及成瘤细胞)的细胞凋亡和Bal-2和Bax基因mRNA表达情况。结果 16HBE细胞和恶性转化细胞系第5、15、35代细胞及成瘤细胞的凋亡率分别为0.65%、1.14%、1.87%、3.78%和4.93%;细胞的Bal-2和Bax的mRNA表达量分别为(9.067±0.155)、(8.183±0.206)、(5.971±0.015)、(4.533±0.030)、(4.863±0.066)和(5.973±0.026)、(6.012±0.112)、(6.659±0.028)、(7.032±0.045)、(7.519±0.022),随着转化代数增加,Bal-2 mRNA表达量逐渐降低,Bax的mRNA表达量逐渐上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镉恶性转化16HBE细胞过程中能引起细胞凋亡,抑止Bal-2基因的表达和上调Bax基因表达。 展开更多

关键词 镉 人支气管上皮细胞(16hbe细胞) 细胞凋亡 Bal-2基因 BAX基因

原文传递