聚多巴胺修饰的载榄香烯介孔二氧化硅纳米粒的制备及其靶向抗肿瘤活性研究 被引量：13

1

作者 盛晓丹 刘臻 +4 位作者 罗砚曦 王鑫 许梦姣 阎辉 谢恬 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2745-2754,共10页

目的制备聚多巴胺(PDA)修饰的载榄香烯(ELE)介孔二氧化硅纳米粒(D/MSN-ELE),并对其进行处方工艺优化、质量评价、体外释放、体外抗肿瘤活性及促进细胞凋亡能力研究。方法通过溶液吸附法制备载榄香烯介孔二氧化硅纳米粒(MSN-ELE),聚合法... 目的制备聚多巴胺(PDA)修饰的载榄香烯(ELE)介孔二氧化硅纳米粒(D/MSN-ELE),并对其进行处方工艺优化、质量评价、体外释放、体外抗肿瘤活性及促进细胞凋亡能力研究。方法通过溶液吸附法制备载榄香烯介孔二氧化硅纳米粒(MSN-ELE),聚合法制备聚多巴胺修饰的介孔二氧化硅纳米粒(D/MSN)和D/MSN-ELE,应用透射电子显微镜表征不同纳米粒的形态,热重分析计算PDA接枝率,HPLC法评价D/MSN-ELE载药量和包封率,透析袋法考察D/MSN-ELE的体外释放特性。采用MTT染色法,分析不同纳米粒对人胚胎成纤维HELF细胞和人非小细胞肺癌A549细胞的细胞毒性。采用流式细胞仪检测D/MSN-ELE活性氧水平和线粒体膜电位水平。结果最优制备工艺为药物与载体比例6∶1,温度为50℃,时间为8 h,此工艺条件下制备的D/MSN-ELE分布均一,粒径为(288.70±3.88)nm。其平均载药量和包封率分别为(11.58±0.73)%和(59.82±0.57)%。体外释药具有pH值响应性,累积释药量随pH值减小而增大。ELE、MSN-ELE和D/MSN-ELE对A549细胞的半数抑制浓度分别为91.29、27.56、6.02μg/m L。活性氧及线粒体膜电位检测结果进一步表明D/MSN-ELE能促进肿瘤细胞凋亡。结论优选工艺下的D/MSN-ELE具有较高的药物载药量、pH值响应性药物释放和大幅增强的抗肿瘤活性及促进细胞凋亡能力,为基于MSN的ELE药物靶向递送提供了进一步的实验基础。 展开更多

关键词 介孔二氧化硅 榄香烯 纳米粒 pH响应敏感 肿瘤靶向递送 抗肿瘤活性 质量评价 体外释放 细胞凋亡 溶液吸附法 聚合法 热重分析 接枝率 HPLC 人胚胎成纤维HELF细胞 人非小细胞肺癌A549细胞 线粒体膜电位

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半枝莲提取物对人肺癌A549细胞的凋亡作用及其对凋亡相关基因表达的影响 被引量：12

2

作者 张梅 韩松洋 +2 位作者 葛圆圆 杨丹 于英君 《陕西中医》 2016年第6期756-758,共3页

目的:了解半枝莲提取物对人肺癌A549细胞的凋亡作用及其对凋亡相关基因表达的影响,探讨半枝莲提取物的抗肺癌作用及其分子生物学作用机制。方法:采用70%乙醇水溶液制备半枝莲提取物;实验组的半枝莲提取物浓度为3mg/L、6mg/L、12mg/L,对... 目的:了解半枝莲提取物对人肺癌A549细胞的凋亡作用及其对凋亡相关基因表达的影响,探讨半枝莲提取物的抗肺癌作用及其分子生物学作用机制。方法:采用70%乙醇水溶液制备半枝莲提取物;实验组的半枝莲提取物浓度为3mg/L、6mg/L、12mg/L,对照组不加药物。采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制率;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用RT-PCR法测定细胞凋亡相关基因Survivin、Caspase-3和内对照β-actin的表达水平。结果:3mg/L、6mg/L、12mg/L浓度实验组的OD值均低于对照组;实验组的抑制率分别为(23.53±5.84)%、(39.71±6.77)%和(66.18±8.45)%。对照组3mg/L、6mg/L、12mg/L浓度实验组的细胞凋亡率分别是(3.76±0.82)%、(16.61±3.19)%、(21.34±4.52)%、(35.19±5.80)%;3mg/L、6mg/L、12mg/L浓度实验组的细胞凋亡率均高于对照组。3mg/L、6mg/L、12mg/L浓度实验组的Survivin/β-actin均低于对照组;3mg/L、6mg/L、12mg/L浓度实验组的Caspase-3/β-actin均高于对照组。结论:半枝莲提取物可通过诱导细胞凋亡作用抑制人肺癌A549细胞的生长,其分子机制为下调Survivin的表达水平和上调Caspase-3的表达水平。 展开更多

关键词 半枝莲 @人肺癌A549细胞 细胞凋亡

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亚硒酸钠通过Keap1/Nrf2/ARE信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡 被引量：11

3

作者 田崇梅 夏道宗 +3 位作者 邢梦雨 郭璐 张晓熙 赵鑫钰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期181-186,共6页

目的探究亚硒酸钠诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法 MTT法检测不同浓度亚硒酸钠对人肺腺癌A549细胞的抑制增殖率;倒置荧光显微镜观察细胞经亚硒酸钠处理后的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;激光共聚焦观察... 目的探究亚硒酸钠诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法 MTT法检测不同浓度亚硒酸钠对人肺腺癌A549细胞的抑制增殖率;倒置荧光显微镜观察细胞经亚硒酸钠处理后的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;激光共聚焦观察活性氧荧光强度;多功能酶标仪测定氧化应激参数含量;Western blot检测Keap1/Nrf2/ARE信号通路蛋白的表达,以及Nrf2在细胞质和细胞核中的蛋白表达情况。结果亚硒酸钠剂量依赖性地抑制人肺腺癌A549细胞增殖,亚硒酸钠作用于人肺腺癌A549细胞24 h后,通过Hoechst 33342固定和流式细胞术分析,细胞凋亡率明显增加;亚硒酸钠可使活性氧和丙二醛水平明显升高,还原型谷胱甘肽和超氧化物歧化酶含量明显下降;同时亚硒酸钠能够下调Keap1、Nrf2和HO-1蛋白的表达,并且抑制Nrf2发生核位移。结论亚硒酸钠通过抑制人肺腺癌A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,调节细胞内的氧化应激反应,调控Keap1/Nrf2/ARE抗氧化信号通路,从而促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 亚硒酸钠 人肺腺癌A549细胞 细胞增殖 凋亡 氧化应激 Keap1/Nrf2/ARE信号通路

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苏木醇提物对人肺癌A549细胞作用影响的研究 被引量：9

4

作者 彭新 顾立刚 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期547-549,共3页

目的:观察苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒作用和诱导凋亡作用。方法:制备苏木醇提物按不同浓度分别同人肺癌A549细胞共同培养,MTT法检测对细胞增殖作用的影响,光学显微镜、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析、细胞周期分析观察不同浓度... 目的:观察苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒作用和诱导凋亡作用。方法:制备苏木醇提物按不同浓度分别同人肺癌A549细胞共同培养,MTT法检测对细胞增殖作用的影响,光学显微镜、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析、细胞周期分析观察不同浓度苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒和凋亡作用。结果:苏木醇提物对人肺癌A549细胞有抑制作用,并呈浓度依赖性;苏木醇提物在诱导细胞发生凋亡外还存在其他形式的细胞死亡方式并对细胞各期均有影响。 展开更多

关键词 苏木醇取物 人肺癌A549细胞 凋亡

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醌茜素对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及初步机制研究 被引量：10

5

作者 孟令旗 刘畅 +4 位作者 孙虎男 罗英花 臧延青 韩英浩 金成浩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1625-1626,共2页

醌茜素是一种具有高效性、高选择性和细胞能透性的药物.虽然醌茜素能够有效抑制前列腺癌细胞的增殖,但醌茜素对肺癌细胞的作用机制尚不清楚.本文研究了醌茜素对人肺癌A549细胞周期及细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制.

关键词 醌茜素 人肺癌A549细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 信号通路

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黄芪多糖联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖抑制作用及其机制研究 被引量：9

6

作者 李蓉 章运生 谭小武 《现代医药卫生》 2015年第4期481-484,共4页

目的观察黄芪多糖与顺铂对人肺癌A549细胞增殖、细胞周期、诱导凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法采用四甲基偶氮唑盐法检测黄芪多糖、顺铂及两药联合对细胞增殖的影响;用流式细胞仪分析对细胞周期及凋亡率的影响;用反转录... 目的观察黄芪多糖与顺铂对人肺癌A549细胞增殖、细胞周期、诱导凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法采用四甲基偶氮唑盐法检测黄芪多糖、顺铂及两药联合对细胞增殖的影响;用流式细胞仪分析对细胞周期及凋亡率的影响;用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法检测对人肺癌A549细胞B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)基因表达水平的影响。结果黄芪多糖、顺铂及两药联合对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用呈时间-浓度依赖关系;与阴性对照组比较,黄芪多糖作用后可出现G1期细胞阻滞,顺铂作用后出现S期细胞阻滞,两药联合出现G1、S期细胞阻滞,差异均有统计学意义(P<0.01)。两药联合较阴性对照组及单用黄芪多糖、顺铂明显上调Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白的表达,下调Bcl-2 mRNA及蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论黄芪多糖可协同顺铂增强对人肺癌A549细胞的促凋亡作用,其作用机制与上调Bax、Caspase-3的表达、下调Bcl-2的表达有关。 展开更多

关键词 黄芪多糖 顺铂 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 人肺癌A549细胞 Bcl相关X蛋白 B细胞淋巴瘤-白血病2

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知母皂苷B-Ⅱ抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制研究 被引量：8

7

作者 陆文铨 邱彦 +1 位作者 庞涛 陈万生 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第10期1346-1349,共4页

目的:研究知母皂苷B-Ⅱ(TB-Ⅱ)抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制。方法:使用0(空白对照)、1、10、100μg/ml的TB-Ⅱ处理A549细胞48 h后,分别提取细胞总RNA及总蛋白,采用实时定量荧光-聚合酶链反应和Western blot法分别检测细胞内白... 目的:研究知母皂苷B-Ⅱ(TB-Ⅱ)抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制。方法:使用0(空白对照)、1、10、100μg/ml的TB-Ⅱ处理A549细胞48 h后,分别提取细胞总RNA及总蛋白,采用实时定量荧光-聚合酶链反应和Western blot法分别检测细胞内白细胞介素18(IL-18)m RNA及蛋白表达;通过转染沉默A549细胞内IL-18基因,比较未转染组、阴性对照组和转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达,然后用10μg/ml的TB-Ⅱ处理转染后的细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,划线法观察细胞迁移能力变化。结果:与空白对照比较,TB-Ⅱ处理后A549细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均增加(P<0.05或P<0.01),且与浓度呈正相关。与未转染组比较,转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均降低(P<0.01);与TB-Ⅱ处理的未转染细胞比较,TB-Ⅱ处理72 h后的转染细胞增殖活性和迁移能力均增强(P<0.01)。结论:TB-Ⅱ可通过上调IL-18基因的表达来抑制A549细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 知母皂苷B-Ⅱ 人肺癌A549细胞 增殖活性 白细胞介素18 迁移

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绿茶茶多糖的抗氧化活性及对人肺癌细胞的抑制作用 被引量：7

8

作者 彭毅 张静 +1 位作者 王祯 喻钧 《解剖科学进展》 2019年第6期651-654,共4页

目的探讨绿茶茶多糖的抗氧化活性及对人肺癌细胞A549的作用。方法采用热水浸提-乙醇沉淀法提取茶多糖,纯化后进行抗氧化活性检测,并采用MTT法检测不同浓度(0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL)茶多糖对A549细胞增殖影... 目的探讨绿茶茶多糖的抗氧化活性及对人肺癌细胞A549的作用。方法采用热水浸提-乙醇沉淀法提取茶多糖,纯化后进行抗氧化活性检测,并采用MTT法检测不同浓度(0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL)茶多糖对A549细胞增殖影响,采用流式细胞仪检测不同浓度茶多糖对A549细胞凋亡的影响,Western blot方法检测不同浓度茶多糖对Caspase-3、Bax及p53等蛋白表达影响。结果不同浓度绿茶茶多糖对DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基及ABTS自由基均有一定清除作用,且清除作用呈剂量效应(P<0.05);不同浓度绿茶茶多糖均能抑制A549细胞增殖、促进凋亡,同时上调A549细胞中Caspase-3、Bax及p53蛋白表达,并呈剂量效应(P<0.05)。结论绿茶茶多糖抑制A549细胞增殖、促进凋亡与上调Caspase-3、Bax及p53蛋白表达相关。 展开更多

关键词 绿茶茶多糖 抗氧化活性 人肺癌细胞A549细胞 增殖 凋亡

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基于高内涵细胞成像系统研究黄芩苷对人肺癌A549细胞上皮间质转化模型的影响 被引量：6

9

作者 徐梦真 许艳 +3 位作者 李媛 陈海红 王栋 朱庆均 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1648-1656,共9页

目的基于高内涵细胞成像系统(HCS)探讨黄芩苷(Baicalin)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养人肺癌A549细胞,用TGF-β1诱导A549细胞发生上皮间质转化,设立空白对照组(TGF-β1 0 ng
... 目的基于高内涵细胞成像系统(HCS)探讨黄芩苷(Baicalin)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养人肺癌A549细胞,用TGF-β1诱导A549细胞发生上皮间质转化,设立空白对照组(TGF-β1 0 ng·mL^(-1))、TGF-β1模型组(TGF-β1 5 ng·mL^(-1))和黄芩苷干预组(TGF-β1 5 ng·mL^(-1)+黄芩苷5、10、20μmol·L^(-1))。采用MTT法检测黄芩苷对A549细胞活性的影响;以TGF-β1诱导人肺癌A549细胞发生上皮间质转化,并加入不同浓度黄芩苷干预,采用HCS分析细胞肌动蛋白应激纤维(F-actin)纹理强度、细胞面积、细胞圆度和细胞长度等形态学变化,以及细胞黏附能力和运动迁移能力变化;RT-qPCR法检测上皮间质转化相关标志基因Collagen I、FN1、Vimentin和E-cadherin的相对表达量。结果黄芩苷干预A549细胞48 h后半数抑制浓度(IC50)为22.59μmol·L^(-1)。HCS分析结果显示,与空白对照组比较,TGF-β1模型组细胞形态呈间质细胞样(纺锤形)变化,F-actin纹理强度增强(P<0.01),细胞长度和细胞面积增大(P<0.01),细胞圆度减小(P<0.01),黏附率降低(P<0.01),迁移率和迁移速度升高(P<0.01);与TGF-β1模型组比较,黄芩苷干预组细胞形态呈上皮细胞样(不规则多边形)变化,F-actin纹理强度减弱(P<0.05,P<0.01),细胞长度和细胞面积减小(P<0.01),细胞圆度增大(P<0.01),黏附率升高(P<0.01),迁移率和迁移速度降低(P<0.05,P<0.01)。RT-qPCR结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1模型组CollagenⅠ、FN1和Vimentin的mRNA相对表达量升高(P<0.01),E-cadherin的mRNA相对表达量降低(P<0.01);与TGF-β1模型组比较,黄芩苷干预组Collagen I、FN1和Vimentin的mRNA相对表达量降低(P<0.05,P<0.01),E-cadherin的mRNA相对表达量升高(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩苷能够有效阻止TGF-β1诱导的人肺癌A549细胞上皮间质转化进程,提示HCS是一种多参数系统分析细胞上皮间质转化的有效工具。 展开更多

关键词 黄芩苷 高内涵细胞成像系统(HCS) 人肺癌A549细胞 上皮间质转化(EMT)模型 特发性肺纤维化 形态学 细胞迁移

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柴胡桂枝汤对泛耐药鲍曼不动杆菌侵袭的人肺癌A549细胞的保护作用 被引量：5

10

作者 马致洁 于小红 +6 位作者 章从恩 马晓晶 王铁山 李慧 林龙飞 赵奎君 黄璐琦 《中国医院用药评价与分析》 2020年第11期1281-1284,1289,共5页

目的:探讨柴胡桂枝汤对泛耐药鲍曼不动杆菌(pan-drug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-AB)侵袭的人肺癌A549细胞的保护作用及可能机制。方法:建立PDR-AB侵袭人肺癌A549细胞模型,采用柴胡桂枝汤进行干预,通过检测细胞存活率、PDR... 目的:探讨柴胡桂枝汤对泛耐药鲍曼不动杆菌(pan-drug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-AB)侵袭的人肺癌A549细胞的保护作用及可能机制。方法:建立PDR-AB侵袭人肺癌A549细胞模型,采用柴胡桂枝汤进行干预,通过检测细胞存活率、PDR-AB的黏附率和侵袭率,细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的浓度以及PDR-AB生物被膜的形成能力等指标,考察柴胡桂枝汤对PDR-AB侵袭的人肺癌A549细胞的保护作用。结果:与模型组相比,柴胡桂枝汤组对PDR-AB侵袭的人肺癌A549细胞有保护作用,可显著提高人肺癌A549细胞存活率(30、15及7.5 mg/ml,P <0.05);显著抑制PDR-AB对A549细胞的黏附作用(柴胡桂枝汤浓度为7.5 mg/ml时,P <0.05;柴胡桂枝汤浓度为30、15 mg/ml时,P <0.01);显著抑制PDR-AB对A549细胞的侵袭作用(柴胡桂枝汤浓度为30 mg/ml时,P <0.05);显著抑制PDR-AB生物被膜的形成(柴胡桂枝汤浓度为15 mg/ml时,P <0.05;柴胡桂枝汤浓度为30 mg/ml时,P <0.01);显著降低TNF-α和IL-6的释放水平(柴胡桂枝汤浓度为30、15 mg/ml时,P <0.01),上述差异均有统计学意义。结论:柴胡桂枝汤对PDR-AB侵袭的人肺癌A549细胞具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 柴胡桂枝汤 PDR-AB 人肺癌A549细胞

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miR-25-3p调控CPEB4基因对人肺癌A549细胞侵袭和迁移的影响 被引量：5

11

作者 张慧慧 贾凡佰 王涛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第10期1033-1037,共5页

目的探讨miR-25-3p和CPEB4基因在人肺癌A549细胞中的表达,阐明miR-25-3p对CPEB4基因的靶向作用及其对A549细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫荧光化学技术检测CPEB4在A549细胞中的表达;运用生物信息学方法对miR-25-3p和CPEB4基因的靶... 目的探讨miR-25-3p和CPEB4基因在人肺癌A549细胞中的表达,阐明miR-25-3p对CPEB4基因的靶向作用及其对A549细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫荧光化学技术检测CPEB4在A549细胞中的表达;运用生物信息学方法对miR-25-3p和CPEB4基因的靶向配对关系进行预测;脂质体2000转染miR-25-3p模拟物以及干扰CPEB4基因的siRNA后,采用Real-time PCR检测miR-25-3p和CPEB4基因mRNA在癌细胞中的表达;Western blot法检测CPEB4蛋白在癌细胞中的表达;Transwell小室试验检测癌细胞体外的侵袭性;细胞划痕试验检测癌细胞的迁移情况。结果 A549细胞胞质内CPEB4蛋白高表达,呈绿色荧光;miR-25-3p和CPEB4基因二者靶向配对良好;过表达miR-25-3p能降低A549细胞中CPEB4基因mRNA和蛋白的表达,抑制A549细胞的侵袭和迁移。结论 miR-25-3p通过下调人肺癌A549细胞中CPEB4基因的表达,进而抑制癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多

关键词 微小RNA 胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4 人肺癌A549细胞 细胞侵袭 细胞迁移

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鸦胆子苷B与肠道菌群相互作用及对人肺癌A549细胞的抑制作用

12

作者 石凌钰 王文敏 +4 位作者 冯育林 杨世林 万阳 陈道峰 温泉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期160-166,共7页

目的:分析鸦胆子苷B和肠道菌群相互作用,以及其代谢产物对人肺癌A549细胞的抑制活性,探讨鸦胆子苷B对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的价值。方法:采用肠道菌群体外温孵培养法,将鸦胆子苷B与人肠道菌群体外共孵育,通过超高效液相色谱-四极杆-... 目的:分析鸦胆子苷B和肠道菌群相互作用,以及其代谢产物对人肺癌A549细胞的抑制活性,探讨鸦胆子苷B对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的价值。方法:采用肠道菌群体外温孵培养法,将鸦胆子苷B与人肠道菌群体外共孵育,通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)分析代谢转化产物。采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8法)检测原型物鸦胆子苷B及其代谢产物对人肺癌A549细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC_(50))。取健康雄性大鼠5只,经灌胃给药鸦胆子苷B药液(2 mg·kg^(-1)),连续7 d,分别采集大鼠给药前和给药后的粪便,基于16S rRNA高通量测序分析鸦胆子苷B给药前后肠道菌群变化。结果:鸦胆子苷B可被人肠道菌群经脱糖基水解代谢为鸦胆子苦醇,原型物和转化产物对A549细胞的IC50分别为1755.50、19.57μmol·L^(-1),代谢产物对A549细胞增殖的抑制活性显著优于鸦胆子苷B。肠道菌群分析结果显示,与给药前比较,给药后大鼠肠道菌群α多样性和β多样性未发生明显变化。物种丰度方面,门水平上,鸦胆子苷B降低了放线菌门、变形菌门的物种相对丰度,增加了厚壁菌门、髌骨菌门、蓝细菌门的物种相对丰度;属水平上,鸦胆子苷B降低了葡萄球菌属、气球菌属、嗜冷菌属的物种相对丰度,增加了罗姆布茨菌属、乳杆菌属、狭义梭菌属1、Norank-f-norank-o-Clostridia-UCG-014、苏黎世杆菌属、异杆菌属、糖杆菌念珠菌属的物种相对丰度。功能预测结果显示,与给药前比较,给药后大鼠肠道功能均未发生显著变化。结论:鸦胆子苷B可在肠道菌群作用下脱糖基,转化为苷元鸦胆子苦醇,抗肿瘤活性显著提高。服用鸦胆子苷B不会使肠道菌群结构和功能发生显著变化,造成肠道微生态平衡失调,且给药鸦胆子苷B后出现对NSCLC患者有益的肠道菌群变化。 展开更多

关键词 鸦胆子 鸦胆子苷B 鸦胆子苦醇 肠道菌群 代谢转化 人肺癌A549细胞 非小细胞肺癌(NSCLC) 16S rRNA高通量测序

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注射用胸腺法新对人肺癌A549细胞凋亡的影响 被引量：4

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作者 杨兆辉 段瑞祥 +2 位作者 杨晶 熊妲妮 郎建敏 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第7期906-909,共4页

目的:研究注射用胸腺法新对人肺癌A549细胞凋亡的影响。方法:以0(空白对照)、25、50、100、200、400 mg/L注射用胸腺法新作用于肺癌A549细胞24、48、72 h后,用MTT法检测并计算细胞增殖抑制率。以0(空白对照)、50、100 mg/L注射用胸腺法... 目的:研究注射用胸腺法新对人肺癌A549细胞凋亡的影响。方法:以0(空白对照)、25、50、100、200、400 mg/L注射用胸腺法新作用于肺癌A549细胞24、48、72 h后,用MTT法检测并计算细胞增殖抑制率。以0(空白对照)、50、100 mg/L注射用胸腺法新作用于肺癌A549细胞48 h后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,用Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达和蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平。结果:与空白对照比较,注射用胸腺法新作用后A549细胞的增殖抑制率增加,与浓度和作用时间呈正相关(P<0.05);50、100 mg/L的注射用胸腺法新作用48 h后A549细胞的凋亡率增加(P<0.05);100 mg/L的注射用胸腺法新作用48 h后A549细胞中Caspase-3表达增强、Bcl-2/Bax和Akt磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:注射用胸腺法新可通过激活Caspase-3、下调Bcl-2/Bax比例、抑制Akt信号通路来抑制A549细胞增殖,并促进其凋亡。 展开更多

关键词 注射用胸腺法新 人肺癌A549细胞 增殖 凋亡 AKT信号通路

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LY294002抑制肺癌细胞自噬、增殖、侵袭和迁徙的体外研究 被引量：2

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作者 伍宏山 刘志礼 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2017年第5期11-15,共5页

目的探讨体外LY294002是否通过PI3K/AKT信号通路抑制肺癌细胞自噬、增殖、侵袭和迁徙。方法采用0、10、15、20、25、30μmol·L-1 LY294002(LY294002处理组)作用于人肺癌细胞A549,以PBS替代药物作为对照组。采用CCK8实验检测LY29400... 目的探讨体外LY294002是否通过PI3K/AKT信号通路抑制肺癌细胞自噬、增殖、侵袭和迁徙。方法采用0、10、15、20、25、30μmol·L-1 LY294002(LY294002处理组)作用于人肺癌细胞A549,以PBS替代药物作为对照组。采用CCK8实验检测LY294002处理后A549细胞增殖情况;采用Western blot检测2组A549细胞Beclin-1、LC3B(Ⅱ、Ⅰ)、PI3K、p-AKT及AKT蛋白表达水平;采用Wound healing和Transwell invasion实验检测2组A549细胞迁徙、侵袭情况。结果 LY294002能有效抑制A549细胞的增殖,且在24h呈剂量依赖性,24h IC50为19.348μmol·L-1。LY294002处理组细胞中Beclin-1、PI3K、p-AKT蛋白表达水平及LC3B(Ⅱ/Ⅰ)比率、细胞迁徙和侵袭力均显著低于对照组(P<0.05)。结论 LY294002通过抑制PI3K/AKT信号通路降低人A549细胞的自噬活性、增殖、迁徙和侵袭。 展开更多

关键词 LY294002 肺癌细胞A549 PI3K/AKT信号通路 细胞自噬 迁徙 侵袭

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高压氧增强人肺癌A549/Gem耐药细胞对吉西他滨的敏感性及其作用机制 被引量：2

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作者 秦艳艳 李飞 何梅 《中华航海医学与高气压医学杂志》 CAS CSCD 2022年第4期474-477,491,共5页

目的:探讨高压氧(HBO)对人肺癌A549吉西他滨(Gem)耐药细胞的逆转作用及其作用机制。方法:采用体外低浓度梯度递增法构建Gem耐药A549细胞株(A549/Gem)模型。根据实验设计将A549/Gem耐药细胞株分为耐药对照组、高压氧组(HBO组)、Gem组及HB... 目的:探讨高压氧(HBO)对人肺癌A549吉西他滨(Gem)耐药细胞的逆转作用及其作用机制。方法:采用体外低浓度梯度递增法构建Gem耐药A549细胞株(A549/Gem)模型。根据实验设计将A549/Gem耐药细胞株分为耐药对照组、高压氧组(HBO组)、Gem组及HBO联合Gem组(HBO+Gem组),处理方式分别为:不做处理,0.2 MPa HBO处理3 h,10.0μmol/L Gem处理24 h,0.2 MPa HBO处理3 h后用10.0μmol/L Gem处理24 h。CCK-8法检测A549/Gem耐药细胞的增殖能力,流式细胞术检测A549/Gem耐药细胞的凋亡水平,Western blotting实验检测A549/Gem耐药细胞凋亡蛋白、耐药蛋白及通道蛋白色素框同源蛋白6(CBX6)表达量的变化。结果:与其他3组比较,HBO+Gem组A549/Gem耐药细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.01)。HBO+Gem组A549/Gem耐药细胞凋亡率(32.4%)明显高于对照组(1.08%)、HBO组(5.42%)和Gem组(9.28%),差异均有统计学意义(P<0.01)。与其他3组相比,HBO+Gem组凋亡蛋白Bcl-2表达量明显降低,Bad、caspase-3表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);HBO+Gem组耐药P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);HBO+Gem处理明显上调A549/Gem耐药细胞CBX6的表达(P<0.01)。结论:HBO联合Gem能够显著降低A549/Gem耐药细胞对Gem的耐药性,其主要作用机制是通过调控A549/Gem耐药细胞通道蛋白、耐药蛋白和凋亡相关蛋白的表达,促进A549/Gem耐药细胞凋亡而实现的。 展开更多

关键词 高压氧 吉西他滨 人肺癌A549细胞 耐药性

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转染IL-27基因对人肺癌A549细胞增殖及STAT3表达的影响 被引量：1

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作者 黄蓉飞 黄娜 +4 位作者 樊元春 王晓燕 余咸静 张君莉 熊怡凡 《现代医学》 2019年第10期1191-1197,共7页

目的:探讨转染白细胞介素27(IL-27)基因对人肺癌A549细胞增殖及信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达的影响。方法:培养A549细胞并分为A549细胞组(未转染细胞)、A549-His B细胞组(转染pcDNA3.1-His B空质粒的A549细胞)、A549-IL27细胞组... 目的:探讨转染白细胞介素27(IL-27)基因对人肺癌A549细胞增殖及信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达的影响。方法:培养A549细胞并分为A549细胞组(未转染细胞)、A549-His B细胞组(转染pcDNA3.1-His B空质粒的A549细胞)、A549-IL27细胞组(转染pcDNA3.1-His B-IL-27质粒的A549细胞)。RT-PCR和ELISA法检测IL-27转染结果,CCK-8法检测转染IL-27基因对A549细胞增殖的影响,流式细胞仪检测转染IL-27基因对A549细胞周期及凋亡的影响,蛋白质印迹法和qRT-PCR检测A549细胞中STAT3蛋白和mRNA表达情况。结果:在A549-IL27细胞中扩增到IL-27p28基因和IL-27EB13基因条带,而A549细胞和A549-His B细胞中未扩增到;转染后细胞培养4 h,在A549-IL27细胞培养液中可检测到IL-27表达,而A549细胞和A549-His B细胞培养液中检测不到;转染后细胞培养24、36、48、60 h时,A549-IL27细胞增殖明显低于A549细胞和A549-His B细胞(P<0.05);与A549细胞和A549-His B细胞相比,A549-IL27细胞G0/G1期比例明显增多,G2/M期比例明显减少,细胞凋亡率明显升高(P<0.05);A549-IL27细胞中STAT3蛋白和mRNA表达水平均低于A549细胞和A549-His B细胞(P<0.05);A549-IL27细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达降低,细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达升高,与A549细胞和A549-His B细胞比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:转染IL-27基因能抑制人肺癌A549细胞增殖,促进细胞凋亡,可能与抑制STAT3表达,阻断其信号传导有关。 展开更多

关键词 人肺癌A549细胞 转染 白细胞介素27 增殖 信号转导与转录激活因子3

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亚砷酸As(Ⅲ)诱导人肺癌A549细胞氧化应激反应的实验研究 被引量：1

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作者 赵俊伟 华辰凤 +2 位作者 尚平平 谢复炜 李翔 《癌变．畸变．突变》 CAS 2021年第1期28-31,共4页

目的:探讨亚砷酸As(Ⅲ)对人肺癌A549细胞氧化应激的诱导作用。方法:将处于对数生长期的A549细胞暴露于不同浓度的亚砷酸As(Ⅲ)溶液(以砷浓度计分别为0、2.5、5、10和20μg/mL)中培养24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率;用2.5和5μg/mL的亚... 目的:探讨亚砷酸As(Ⅲ)对人肺癌A549细胞氧化应激的诱导作用。方法:将处于对数生长期的A549细胞暴露于不同浓度的亚砷酸As(Ⅲ)溶液(以砷浓度计分别为0、2.5、5、10和20μg/mL)中培养24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率;用2.5和5μg/mL的亚砷酸As(Ⅲ)溶液染毒A549细胞24 h,并设对照组(含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基),采用ELISA法检测细胞培养液中的超氧化物歧化酶(SOD)浓度,荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)的表达水平。结果:随着亚砷酸As(Ⅲ)溶液染毒浓度的升高,A549细胞的存活率呈逐渐降低的趋势(r=0.99,P<0.05)。2.5和5μg/mL亚砷酸As(Ⅲ)溶液染毒24 h后,细胞培养液中SOD的浓度分别为(0.72±0.05)、(1.10±0.16)ng/mL,均高于对照组的(0.56±0.03)ng/mL(P<0.05);细胞内ROS的相对荧光强度分别为(169.31±6.13)%和(242.60±2.35)%,均高于对照组的(100±2.80)%(P<0.05)。结论:A549细胞暴露于亚砷酸As(Ⅲ)溶液可致细胞存活率降低,细胞培养液中SOD和细胞内ROS浓度均升高;氧化应激可能是亚砷酸As(Ⅲ)致A549细胞毒性的机制之一。 展开更多

关键词 亚砷酸 氧化应激 人肺癌A549细胞 超氧化物歧化酶 活性氧

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碳酸酐酶1沉默对肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

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作者 张康 何斌军 +1 位作者 胡汶斌 韩晓亮 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第1期55-60,共6页

目的:探讨沉默碳酸酐酶1(CA1)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用脂质体转染法将CA1特异性siRNA(si-CA1组)及阴性对照(si-NC组)转染肺癌A549细胞,同时以转染空脂质体的A549细胞为空白对照组(Blank组)。采用实时... 目的:探讨沉默碳酸酐酶1(CA1)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用脂质体转染法将CA1特异性siRNA(si-CA1组)及阴性对照(si-NC组)转染肺癌A549细胞,同时以转染空脂质体的A549细胞为空白对照组(Blank组)。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测CA1 mRNA和蛋白表达水平,细胞计数试剂盒法(CCK-8)、流式细胞术、Transwell实验分别检测A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力。结果:qPCR和Western blot检测结果显示,转入CA1 siRNA的A549细胞中CA1 mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05);CCK-8实验结果显示,沉默CA1后si-CA1组A549细胞在24、48和72 h时光密度(OD)值明显低于si-NC组(P<0.05);流式细胞术结果发现,si-CA1组A549细胞凋亡率明显高于si-NC组(P<0.05);Transwell实验结果显示,si-CA1组侵袭和迁移细胞数均明显少于si-NC组(P<0.05)。与Blank组相比,si-NC组以上各指标差异均不显著(P>0.05)。结论:沉默CA1能够抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 碳酸酐酶1 人肺癌A549细胞 增殖 凋亡 侵袭 迁移

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体外肿瘤微血管生成模型的建立 被引量：1

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作者 赵静 苗俊英 +1 位作者 张尚立 石梅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期17-21,共5页

以体外微血管培养模型为基础,用鼠尾胶原包埋大鼠动脉环,并将包埋的动脉环转移到种有人肺癌A549细胞单层的培养皿中,用MCDB131无血清培养液对动脉环和肿瘤细胞进行共培养,从而建立肿瘤微血管体外生成模型。大鼠动脉环于培养后第3天从血... 以体外微血管培养模型为基础,用鼠尾胶原包埋大鼠动脉环,并将包埋的动脉环转移到种有人肺癌A549细胞单层的培养皿中,用MCDB131无血清培养液对动脉环和肿瘤细胞进行共培养,从而建立肿瘤微血管体外生成模型。大鼠动脉环于培养后第3天从血管壁长出微血管芽,第6至10天长成微血管丛,两周后新生微血管开始萎缩;没有肿瘤细胞刺激的条件下,大鼠动脉环新生微血管数量明显减少。结果表明人肺癌A549细胞能够促进血管生成,体外大鼠动脉环肿瘤微血管培养模型操作简单、灵敏度高,适合研究肿瘤血管新生及其机制。 展开更多

关键词 主动脉环 人肺癌A549细胞 促血管生长

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滨蒿总黄酮体外抗流感病毒作用及其对TLR3/NF-κB信号通路的影响 被引量：6

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作者 马雪萍 姚华 +3 位作者 王雪 王林林 司丽君 黄华 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期89-94,共6页

目的:观察滨蒿总黄酮体外抗流感病毒作用及对TLR3/NF-κB信号通路的影响。方法:Cytopathic effect (CPE)法观察滨蒿黄总酮0. 125 mg/ml、0. 25 mg/ml体外抗流感病毒的作用;TRIzol法提取总RNA,用RT-qPCR法测定TLR3/NF-κB信号通路靶点和... 目的:观察滨蒿总黄酮体外抗流感病毒作用及对TLR3/NF-κB信号通路的影响。方法:Cytopathic effect (CPE)法观察滨蒿黄总酮0. 125 mg/ml、0. 25 mg/ml体外抗流感病毒的作用;TRIzol法提取总RNA,用RT-qPCR法测定TLR3/NF-κB信号通路靶点和炎症因子的mRNA水平。结果:滨蒿总黄酮在体外对流感病毒甲型、乙型均有明显的抑制作用,随着浓度的增加,抗病毒作用增强,呈量效关系,TI(药物治疗指数)值约为15;进一步实验发现与病毒对照相比,滨蒿总黄酮0. 25 mg/ml可明显下调TLR3/NF-κB信号通路靶点TLR3、NF-κB、IRF3、IRF7 mRNA表达水平,对流感病毒诱导表达的炎症因子IL-6、MCP-1、i NOS、Cox2有明显的干预作用(P <0. 05或P <0. 01)。结论:滨蒿总黄酮通过抑制TLR3/NF-κB信号通路发挥免疫调节作用,从而达到抗流感的效应。 展开更多

关键词 滨蒿总黄酮 流感H1N1 人肺癌A549细胞 TLR3 NF-ΚB

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