3个肾上腺脑白质营养不良家系的基因突变分析 被引量：14

1

作者 黄梁浒 曾健 +3 位作者 杨渤生 黄惠娟 吴玉水 兰风华 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期193-197,共5页

目的　对 3个肾上腺脑白质营养不良 ( adrenoleukodystrophy,AL D) ( MIM# 30 0 10 0 )家系进行基因突变分析。方法　从 3个 AL D患儿及其主要家系成员的外周血白细胞 ,提取总 RNA和基因组 DNA。应用逆转录聚合酶链反应技术 ,对 3个家系... 目的　对 3个肾上腺脑白质营养不良 ( adrenoleukodystrophy,AL D) ( MIM# 30 0 10 0 )家系进行基因突变分析。方法　从 3个 AL D患儿及其主要家系成员的外周血白细胞 ,提取总 RNA和基因组 DNA。应用逆转录聚合酶链反应技术 ,对 3个家系的 ABCD1基因编码区 ,分 4个片段进行 PCR扩增并对 PCR产物直接测序。同时应用 PCR-限制性酶切或扩增阻滞突变系统分析相应的基因组 DNA,进一步确证ABCD1基因的突变位点。结果　 3名患儿的 ABCD1基因上均存在错义突变 ,其中患儿 1的 ABCD1基因第 5 34位密码子发生 CCC→ CGC改变 ,使脯氨酸被精氨酸取代 ( P5 34R) ;患儿 2的 ABCD1基因第 2 6 6位密码子发生 GGG→AGG改变 ,使甘氨酸被精氨酸取代 ( G2 6 6 R) ;患儿 3母亲的 ABCD1上一个等位基因第 6 17位密码子发生 CGC→ GGC改变 ,使精氨酸被甘氨酸取代 ( R6 17G) ,另一个等位基因未发生突变。结论　在中国人 AL D患者中发现 1个新的 ABCD1基因突变 ( P5 34R) ,并首次在中国人 AL D患者中检测到G2 6 6 R、R6 展开更多

关键词 肾上腺脑白质营养不良 ABCDl基因 基因突变 扩增阻滞突变系统 逆转录聚合酶链反应

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Graves眼病Th_1/Th_2相关细胞因子群谱的特征 被引量：11

2

作者 汪新宇 李全忠 +2 位作者 文世林 王桂兰 田志刚 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期150-152,共3页

目的　探讨Graves眼病 (Graves’ophthalmopathy ,GO)发生的免疫机制 ,明确GO的Th1/Th2 相关细胞因子群谱的特征。方法　用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测IFN γ、TNF α、IL 2、IL 4、IL 6、IL 10等 6种细胞因子的mRNA转录。结果　... 目的　探讨Graves眼病 (Graves’ophthalmopathy ,GO)发生的免疫机制 ,明确GO的Th1/Th2 相关细胞因子群谱的特征。方法　用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测IFN γ、TNF α、IL 2、IL 4、IL 6、IL 10等 6种细胞因子的mRNA转录。结果　与正常对照组相比 ,Graves病恶性突眼组与非突眼组细胞因子的基因转录检出率明显增高 (P <0 .0 1) ;Graves病非突眼组Th2 类细胞因子IL 4和IL 6的基因转录检出率明显高于Th1类细胞因子IFN γ ,TNF α和IL 2的基因转录检出率 (P <0 .0 1) ;而恶性突眼组Th1和Th2 之间细胞因子的基因转录检出率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　Graves病恶性突眼者细胞因子的基因转录模式呈典型的Th0 ,细胞免疫和体液免疫共同参与了突眼的发生 ,而非突眼者细胞因子表达向Th2 方向漂移 ,以体液免疫应答为主。 展开更多

关键词 GRAVES眼病 RT-PCR TH1/TH2相关细胞因子

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用RT-PCR方法动态分析博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF-β_1的基因表达 被引量：8

3

作者 郑悦 康健 侯显明 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期94-95,100,共3页

目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在肺纤维化中的作用。方法 :采用博莱霉素 (BLM)致肺纤维化大鼠模型 ,分离纯化肺泡巨噬细胞 (alveolarmacrophage ,AM) ,用RT PCR及图像分析方法 ,对不同时期AM以及肺组织释放的TGF β1进行动态观... 目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在肺纤维化中的作用。方法 :采用博莱霉素 (BLM)致肺纤维化大鼠模型 ,分离纯化肺泡巨噬细胞 (alveolarmacrophage ,AM) ,用RT PCR及图像分析方法 ,对不同时期AM以及肺组织释放的TGF β1进行动态观察。结果 :BLM组AM和肺组织中TGF β1mRNA第 3天即明显增加 (P <0 .0 5和P>0 .0 5 ) ,第 7天达到高峰 (P<0 .0 1) ,第 142 8天逐渐下降 ,但仍高于对照组 (P>0 .0 5 )。结论 :TGF β1mRNA在正常大鼠及肺纤维化大鼠中均有表达 ,后者表达明显高于前者 ;肺纤维化大鼠肺内TGF β1mRNA可能主要来源于AM。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 逆转录聚合酶链反应 肺纤维化 博莱霉素基因表达

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人胚胎甲状腺褪黑素受体mRNA的检测 被引量：7

4

作者 孙中安 刘志民 黄超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1062-1064,共3页

目的 :检测胚胎甲状腺中是否表达褪黑素受体。 方法 :取人胚胎甲状腺 ,抽提总 RNA并用 RT- PCR方法检测其 m R-NA,阳性产物用自动测序仪测序。 结果 :人胚胎甲状腺总 RNA以 MT1及 MT2两种引物进行的 RT- PCR产物电泳呈现阳性条带 ,测序... 目的 :检测胚胎甲状腺中是否表达褪黑素受体。 方法 :取人胚胎甲状腺 ,抽提总 RNA并用 RT- PCR方法检测其 m R-NA,阳性产物用自动测序仪测序。 结果 :人胚胎甲状腺总 RNA以 MT1及 MT2两种引物进行的 RT- PCR产物电泳呈现阳性条带 ,测序结果显示扩增产物与人类褪黑素受体 c DNA相吻合。结论 :人胚胎甲状腺组织中存在有褪黑素 MT1,MT2两种受体的 m RNA,表明该组织中有褪黑素 MT1。 展开更多

关键词 受体 褪黑素 逆转录聚合酶链反应 甲状腺 MRNA

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IL-6下调血管内皮细胞组织因子抑制物表达 被引量：6

5

作者 唐小龙 江振友 +3 位作者 蔡淑玉 董军 肖瑞 卢燕茹 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期147-150,共4页

目的:观察IL-6对脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达组织因子途径抑制物(TFPI)的影响.方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.同时应用CCK-8测定不同浓度的IL-6(0.125～2.0 ng/ml,实验组)刺激后细胞活性变化... 目的:观察IL-6对脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达组织因子途径抑制物(TFPI)的影响.方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.同时应用CCK-8测定不同浓度的IL-6(0.125～2.0 ng/ml,实验组)刺激后细胞活性变化,对照组给予培养液;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFPI mRNA水平.结果:与对照组相比,IL-6(0.125～0.5 ng/ml)对细胞活性没有显著影响(P>0.05);IL-6增加到1 ng/ml后,作用12 h后细胞活力开始下降.IL-6(0.5 ng/ml)作用6～24 h显著下调细胞TFPI mRNA表达(P<0.05),6 h时抑制效果最强(TFPI mRNA/GAPDH mRNA均值仅为0.191),以后抑制效应渐减弱,48 h达到正常水平(TFPI mRNA/GAPDH mRNA均值为0.399).结论:提示IL-6(0.5 ng/ml)对HUVECs的活性不造成直接的影响,同时IL-6(0.5 ng/ml)在6～24 h内可抑制HUVECs的TFPI mRNA表达而诱发凝血系统失衡,这可能与急性炎性反应时相的血液凝固和血栓形成有关. 展开更多

关键词 白细胞介素6 组织因子抑制物 脐静脉 内皮细胞 逆转录聚合酶链反应

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大鼠重度烫伤后早期心肌组织内缺氧诱导因子-1α表达的变化 被引量：5

6

作者 党永明 黄跃生 陈丽峰 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2003年第5期263-266,共4页

目的　观察烫伤大鼠伤后早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA和蛋白的表达变化 ,探讨其意义。　方法　制作 4 0 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,设正常对照组及伤后不同时相组。取心脏解剖左、右心室 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT P... 目的　观察烫伤大鼠伤后早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA和蛋白的表达变化 ,探讨其意义。　方法　制作 4 0 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,设正常对照组及伤后不同时相组。取心脏解剖左、右心室 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达 ,采用蛋白免疫印迹法测定其蛋白水平的变化。　结果　正常大鼠左、右心室肌HIF 1αmRNA、蛋白表达结果有所不同。大鼠烫伤后 ,心肌组织内HIF 1αmRNA水平、蛋白表达量明显升高 (P <0.0 1)。结论　正常状态下 ,大鼠左心室肌对缺血缺氧耐受能力较右心室肌强。严重烫伤可以诱导大鼠心肌细胞HIF 1α表达增加 。 展开更多

关键词 大鼠 重度烫伤 早期 心肌组织 缺氧诱导因子-1Α MRNA表达 蛋白表达

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子前期患者胎盘组织中Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义 被引量：4

7

作者 孙敬霞 王洪玲 +2 位作者 卢实 黄群欢 王泽华 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期689-691,共3页

目的研究子前期(PE)患者胎盘组织中Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达及其与胎盘中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)表达的关系,探讨PE胎盘中Toll样受体变化的意义。方法2005年1月至2006年12月在哈尔滨医科大学第一... 目的研究子前期(PE)患者胎盘组织中Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达及其与胎盘中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)表达的关系,探讨PE胎盘中Toll样受体变化的意义。方法2005年1月至2006年12月在哈尔滨医科大学第一临床医学院采用免疫组化和RT-PCR法检测PE患者和正常晚期妊娠妇女胎盘组织中TLR2和TLR4的定位及表达,同时用脂多糖(LPS)体外刺激胎盘组织中的TLR4,检测其上清液中TNF-α、IL-6的变化。其中PE患者44例(PE组),同期正常晚期妊娠妇女22例(对照组)。结果PE组和对照组胎盘组织中均有TLR2和TLR4的表达,其中PE组TLR4表达明显比对照组增强,组间差异有显著性意义(P<0.05);LPS体外刺激PE组胎盘组织,导致TNF-α、IL-6分泌量增加,刺激后2hPE组TNF-α、IL-6分泌量与对照组比较差异无显著意义(P>0.05),刺激后6hPE组TNF-α、IL-6的分泌量升高明显,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论PE患者胎盘中TLR4表达增加与TNF-α、IL-6改变密切相关,是造成局部细胞因子微环境异常的主要因素,其增加可能是PE发病机制中的关键环节之一。 展开更多

关键词 子痫前期 逆转录酶聚合酶链式反应 胎盘组织 TOLL样受体

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亚硒酸钠对HL-60细胞增殖、凋亡影响及作用机制探讨 被引量：7

8

作者 贾永清 滕熔 胡慧仙 《交通医学》 2011年第2期121-125,共5页

目的:以人急性髓细胞性白血病细胞系HL-60为模型,探讨亚硒酸钠对HL-60细胞增殖及凋亡的影响。方法:以不同浓度的亚硒酸钠作用于HL-60细胞后,分别采用台盼蓝拒染法计数活细胞,MTT法检测细胞增殖抑制;通过光镜及双染流式细胞检测分析细胞... 目的:以人急性髓细胞性白血病细胞系HL-60为模型,探讨亚硒酸钠对HL-60细胞增殖及凋亡的影响。方法:以不同浓度的亚硒酸钠作用于HL-60细胞后,分别采用台盼蓝拒染法计数活细胞,MTT法检测细胞增殖抑制;通过光镜及双染流式细胞检测分析细胞凋亡;检测线粒体膜电位变化。分光光度法检测caspase-3的活性变化,RT-PCR检测Bcl-2的mRNA的表达。结果:(1)用台盼蓝染色和MTT方法证实亚硒酸钠(>5μmol/L)能抑制HL-60细胞的生长及存活。(2)HL-60细胞经亚硒酸钠处理后,形态学上出现凋亡细胞特征性改变,双染流式细胞检测证实,亚硒酸钠能有效诱导HL-60细胞凋亡。(3)亚硒酸钠处理HL-60细胞后,流式细胞仪检测线粒体膜电位下降,分光光度法显示caspase-3活性升高,凋亡基因Bcl-2的mRNA的表达明显降低。结论:亚硒酸钠能有效抑制HL-60细胞的增殖及存活,且能够诱导其凋亡,抑制率及凋亡率与药物剂量呈相关。线粒体介导的凋亡途径是亚硒酸钠诱导HL-60细胞凋亡的可能机制。 展开更多

关键词 急性髓细胞性白血病 亚硒酸钠 HL-60细胞 凋亡 线粒体膜电位 caspase-3 Bcl-2 流式细胞仪检测 逆转录聚合酶链反应

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广东省含麻疹成分疫苗接种后发热出疹病例的血清学和病毒学检测 被引量：6

9

作者 刘冷 郑焕英 +3 位作者 王慧玲 郭雪 李晖 许文波 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2017年第3期257-261,共5页

目的分析接种含麻疹成分疫苗(Measles containing vaccine,MCV)后发热出疹病例(Rash and fever illness,RFI)的麻疹血清学和病毒学检测特征。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测接种MCV后RFI的血清麻疹IgM抗体;用逆转录-聚合酶链反应(... 目的分析接种含麻疹成分疫苗(Measles containing vaccine,MCV)后发热出疹病例(Rash and fever illness,RFI)的麻疹血清学和病毒学检测特征。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测接种MCV后RFI的血清麻疹IgM抗体;用逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)对麻疹病毒RNA样本进行检测,扩增麻疹病毒核蛋白(Nucleoprotein,N)基因羧基末端450个核苷酸片段;对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析。结果 2010-2013年广东省共收检723例RFI的病原学标本,其中18例为接种MCV后RFI。在18例RFI中17例采集了血清标本,麻疹IgM抗体均阳性;18例病例的病原学样本经过序列测定分析,均属于A基因型,与中国S191疫苗株的核苷酸同源性为99.7%-100%。结论 MCV接种后RFI主要为麻疹疫苗相关病例;需加强RTPCR和核酸测序方法对病例的快速检测。 展开更多

关键词 含麻疹成分疫苗 发热出疹病例 酶联免疫吸附试验 逆转录-聚合酶链反应

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cystatin B基因在人食管癌中的表达 被引量：4

10

作者 郭长青 王明荣 +3 位作者 李继昌 陈宝生 徐昕 吴旻 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期343-345,共3页

目的　研究cystatinB基因在人食管癌中的表达状况。方法　采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测 41对食管癌组织及配对食管癌旁黏膜和食管癌细胞系EC970 6和肺癌细胞系GLC82中cystatinB基因的表达。 结果　cystatinB基因在 82 .9% (3... 目的　研究cystatinB基因在人食管癌中的表达状况。方法　采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测 41对食管癌组织及配对食管癌旁黏膜和食管癌细胞系EC970 6和肺癌细胞系GLC82中cystatinB基因的表达。 结果　cystatinB基因在 82 .9% (34/ 41例 )食管癌组织中的表达水平 ,低于配对的食管癌旁黏膜 ,且与食管癌淋巴结转移显著相关 (P <0 .0 5 )。在食管癌细胞系EC970 6有微弱表达 ,在肺癌细胞系GLC82未检测到表达。结论　cystatinB基因在人食管癌中表达显著下调且与淋巴结转移相关。 展开更多

关键词 cystatinB基因 食管肿瘤 基因表达 逆转录聚合酶链反应 肿瘤转移 食管癌

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趋化因子MIP-1α在干燥综合征患者唇腺组织中的表达 被引量：3

11

作者 王芳 王振刚 唐福林 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期728-731,共4页

目的　通过研究趋化因子———巨噬细胞炎症蛋白 1α(macrophageinflammatoryprotein 1alpha ,MIP 1α)在干燥综合征 (SS)患者唇腺组织中表达的情况及其分别与唇腺淋巴细胞浸润灶数、血清γ球蛋白水平的相关性 ,探讨MIP 1α在SS发病机... 目的　通过研究趋化因子———巨噬细胞炎症蛋白 1α(macrophageinflammatoryprotein 1alpha ,MIP 1α)在干燥综合征 (SS)患者唇腺组织中表达的情况及其分别与唇腺淋巴细胞浸润灶数、血清γ球蛋白水平的相关性 ,探讨MIP 1α在SS发病机制中的作用及其临床意义。方法　采用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法检测 2 8例原发性干燥综合征 (pSS)、13例继发性干燥综合征 (sSS)和 12例对照组 (颌面部外伤和唇腺囊肿 )患者唇腺组织中MIP 1α的mRNA表达水平及其分别与唇腺淋巴细胞浸润灶数、血清γ球蛋白水平的相关性。结果　pSS组、sSS组和对照组MIP 1αmRNA的表达量分别为 0 .4 9± 0 .11、0 .4 6± 0 .12、0 .19± 0 .0 8;pSS组和sSS组MIP 1α的mRNA表达水平均较对照组明显升高 (P <0 .0 5 ) ,SS患者唇腺的MIP 1α的mRNA表达量与唇腺浸润淋巴细胞灶数 4mm2 呈正相关 (r=0 .38,P =0 .0 14 )、与血清γ球蛋白 %亦呈正相关 (r=0 .37,P =0 .0 17)。结论　MIP 1α参与了SS的发病机制 ,很可能在介导淋巴细胞从血液循环系统向唇腺组织移行的过程中起重要作用 ,并且其表达程度与SS的病情活动相关。 展开更多

关键词 趋化因子 MIP-1Α 干燥综合征 唇腺组织 表达

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西尼罗热病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量：3

12

作者 姜焱 张常印 陈国强 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第5期25-27,共3页

参考Genebank发表的西尼罗热病毒(WestNilevirus,WNV)E糖蛋白基因序列,自行设计合成一对引物,对WNV进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,呈现一条约400bp的条带,将其克隆入pMD18-T-Vector载体中,并进行序列测定,与已发表的WNV基因比较... 参考Genebank发表的西尼罗热病毒(WestNilevirus,WNV)E糖蛋白基因序列,自行设计合成一对引物,对WNV进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,呈现一条约400bp的条带,将其克隆入pMD18-T-Vector载体中,并进行序列测定,与已发表的WNV基因比较发现,核苷酸的同源性为99.7%,证实为WNV的E基因,通过对样品多次检测,都能扩增出一条约400bp的条带,表明该方法比较稳定。 展开更多

关键词 PCR检测方法 RT 病毒 Vector virus PCR扩增 基因序列 设计合成 电泳分析 序列测定 方法比较 糖蛋白 琼脂糖 同源性 核苷酸 E基因 条带

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IL-17在多发性硬化患者外周血中的表达 被引量：2

13

作者 高云春 刘想林 《实用预防医学》 CAS 2011年第4期726-727,共2页

目的探讨IL-17在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)发病机制中的作用。方法采集23例MS患者及21例健康志愿者外周静脉血,RT-PCR检测单个核细胞中IL-17 mRNA的水平,ELISA检测外周血浆中IL-17的分泌水平。结果在MS组和健康对照组,IL-17 m... 目的探讨IL-17在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)发病机制中的作用。方法采集23例MS患者及21例健康志愿者外周静脉血,RT-PCR检测单个核细胞中IL-17 mRNA的水平,ELISA检测外周血浆中IL-17的分泌水平。结果在MS组和健康对照组,IL-17 mRNA的表达水平与血浆中IL-17的水平一致(P>0.05);治疗前,MS患者外周血IL-17的表达水平显著高于健康对照组(P<0.01);经治疗后,MS患者外周血IL-17表达明显降低(P<0.01),但仍高于健康对照组(P<0.01)。结论 IL-17可能参与了MS的发病,其表达水平与病情密切相关。 展开更多

关键词 多发性硬化 IL-17 逆转录聚合酶链反应 酶联免疫吸附法测定

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食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达 被引量：1

14

作者 郭长青 王明荣 +6 位作者 李继昌 徐峰 陈宝生 徐昕 蔡岩 韩亚玲 吴旻 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期235-238,共4页

目的:研究食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达及相关性。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁正常黏膜cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达。结果:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段各在82.9％(34... 目的:研究食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达及相关性。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁正常黏膜cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达。结果:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段各在82.9％(34/41)、41.5％(17/41)食管癌组织中的表达水平低于配对的食管癌旁正常黏膜,cystatin B基因的表达下调情况显著高于D10-86 cDNA片段(P<0.05),但2者的表达无相关性(JD>0.05)。结论:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段在食管癌中表达下调,可能源于不同的机制。2者可能分别是由不同的机制而导致在食管癌组织中表达下调。 展开更多

关键词 CYSTATIN B基因 D10—86 CDNA片段 食管肿瘤 基因表达 逆转录聚合酶链反应

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孕早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的诊断方法学研究 被引量：1

15

作者 王志新 闻良珍 《热带医学杂志》 CAS 2002年第2期135-138,共4页

目的　探讨诊断孕早期HCMV宫内活动性感染的实验方法及其价值。方法　留取 68例有异常妊娠史的早孕妇女绒毛组织 ,分为两份 ,一份提取总RNA ,采用RT PCR检测其中的HCMVmRNA ,一部分制成冰冻切片 ,分别采用原位杂交技术 (ISH)检测HCMVmRN... 目的　探讨诊断孕早期HCMV宫内活动性感染的实验方法及其价值。方法　留取 68例有异常妊娠史的早孕妇女绒毛组织 ,分为两份 ,一份提取总RNA ,采用RT PCR检测其中的HCMVmRNA ,一部分制成冰冻切片 ,分别采用原位杂交技术 (ISH)检测HCMVmRNA ,免疫组织化学法检测HCMV早期抗原。结果　采用RT PCR检测到的孕早期绒毛组织HCMVmRNA阳性率为 39 7% ;ISH阳性率为 2 3 5 % ;免疫组化检测HCMV早期抗原阳性率2 2 1 %。RT PCR检出率明显高于ISH(P <0 0 5) ,而ISH与免疫组化的阳性率无显著性差异 (P >0 0 5)。结论　测定绒毛组织中的HCMVmRNA、早期抗原是HCMV宫内活动性感染的客观指标。RT PCR的敏感性最高 ,但ISH与免疫组化可同时作定位、定量观察 ,可操作性强 。 展开更多

关键词 孕早期 巨细胞病毒宫内活动性感染 诊断方法学 人巨细胞病毒 原位杂交 免疫组织化学 早期抗原 妊娠并发症

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武汉地区庚型肝炎病毒感染的血清流行病学调查

16

作者 田德英 宋佩辉 +6 位作者 夏宁邵 虞涤霞 张振纲 杨道锋 黄元成 魏镜龙 雷红波 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第4期347-349,共3页

为了解武汉地区庚型肝炎病毒 （ＨＧＶ） 感染状况， 采用酶联免疫试验 （ＥＬＩＳＡ） 和逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ） 检测１４２６例， １６ 种不同人群血清中抗－ＨＧＶ、ＨＧＶ－ＲＮＡ。结果显示ＨＧＶ的感染率为９．８％... 为了解武汉地区庚型肝炎病毒 （ＨＧＶ） 感染状况， 采用酶联免疫试验 （ＥＬＩＳＡ） 和逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ） 检测１４２６例， １６ 种不同人群血清中抗－ＨＧＶ、ＨＧＶ－ＲＮＡ。结果显示ＨＧＶ的感染率为９．８％ （１４０／１４２６），１６种人群中ＨＧＶ感染率的高低依次为病毒性肝炎（１５．９５％ ）、卖淫吸毒者（１４．４３％ ）、血液透析患者（１３．１１％ ）、血液病（１１．７％ ）、静脉吸毒者（９．１％ ）， 提示各类型肝病人群均有ＨＧＶ感染的重要途径， ＨＧＶ也可经性途径传播， 血液病。 展开更多

关键词 庚型肝炎病毒 流行病学 ELISA RT-PCR

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血管内皮生长因子同源体mRNA在原发性肺癌中的表达

17

作者 杨荣利 陈东义 +1 位作者 贺光 刘宏旭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期459-461,共3页

目的 :探讨血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor,VEGF)在原发性肺癌发生、发展、侵袭和转移等生物学行为中的作用。方法 :应用反转录聚合酶链式反应技术对 34例原发性肺癌患者的癌组织及 2 1例患者的正常肺组织的 VEG... 目的 :探讨血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor,VEGF)在原发性肺癌发生、发展、侵袭和转移等生物学行为中的作用。方法 :应用反转录聚合酶链式反应技术对 34例原发性肺癌患者的癌组织及 2 1例患者的正常肺组织的 VEGF m RNA进行检测 ,统计分析 VEGF m RNA的表达与肺癌的淋巴结转移、TNM分期等的关系。结果 :VEGF- 189m RNA在肺癌组织中的表达 (6 1.8% )显著高于正常肺组织 (4 .8% ,P <0 .0 1)。VEGF- 189m RNA在有淋巴结转移组的表达 (88.2 % )显著高于无淋巴结转移组 (35 .3% ) (P <0 .0 1)。VEGF- 189m RNA的表达在 TNM 期与 期及 期与 期之间有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF的结合型同源体VEGF- 189m RNA与原发性肺癌的发生、侵袭和转移等密切相关。 展开更多

关键词 肺癌 血管内皮生长因子 反转录聚合酶链式反应

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坐骨神经缺损后神经组织再生早期信号调控研究 被引量：1

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作者 王勇军 汤欣 +5 位作者 于彬 顾芸 李石营 姚登兵 丁斐 顾晓松 《交通医学》 2010年第6期589-591,595,F0004,共5页

目的:采用基因芯片技术结合信号传递调控网络(Signal-Flow)分析技术,探讨坐骨神经缺损近端神经组织早期分子信号调控机理。方法:SD大鼠坐骨神经缺损0h、0.5h、1h、3h、6h和9h后,取0.5cm近端神经组织进行mRNA芯片检测,进行差异基因的筛... 目的:采用基因芯片技术结合信号传递调控网络(Signal-Flow)分析技术,探讨坐骨神经缺损近端神经组织早期分子信号调控机理。方法:SD大鼠坐骨神经缺损0h、0.5h、1h、3h、6h和9h后,取0.5cm近端神经组织进行mRNA芯片检测,进行差异基因的筛选和信号传递调控网络分析,并采用qRT-PCR对相关基因行表达趋势验证。结果:共筛选差异显著性基因2850个,抗凋亡相关因子和紧密连接蛋白等构成信号传递调控网络的核心部分。Birc2、Birc3和Tnfrsf1a早期上调抑制凋亡相关基因,紧密连接蛋白cldn14促进与其家族成员的结合。结论:抗凋亡因子和紧密连接蛋白可能是坐骨神经缺损后神经组织再生的内在早期调控分子,推测与神经组织损伤后内在的再生能力调控机制相关。 展开更多

关键词 神经缺损 抗凋亡 紧密连接蛋白 信号传递调控网络 施万细胞 逆转录聚合酶链反应 坐骨神经 SD大鼠

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中山市2014年麻疹病毒分子生物学特征分析

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作者 谢颖 高赛珍 +2 位作者 师舞阳 欧慧 王翠玲 《社区医学杂志》 2020年第12期840-843,共4页

目的麻疹病毒学监测数据表明,H1基因型是中国本土优势基因型。本研究分析广东省中山市2014年麻疹病毒分子生物学流行特征,为麻疹消除策略修订或制定提供数据依据。方法采集广东省中山市2014-01-01-2014-12-31全年疑似患者的急性期咽拭子... 目的麻疹病毒学监测数据表明,H1基因型是中国本土优势基因型。本研究分析广东省中山市2014年麻疹病毒分子生物学流行特征,为麻疹消除策略修订或制定提供数据依据。方法采集广东省中山市2014-01-01-2014-12-31全年疑似患者的急性期咽拭子,通过RT-PCR和基因测序分析N基因碳末端450个核苷酸片段;应用BLASTn对序列进行相似性检索,分析麻疹病毒基因特征,并与WHO推荐的参考株进行对比;采用MEGA对麻疹核蛋白核苷酸构建NJ种系进化树。结果广东省中山市麻疹监测网络实验室收检疑似麻疹咽拭子306份,核酸阳性213份,阳性率69.61%。对213份咽拭子核酸阳性样品进行病毒分离,共分离出98株麻疹病毒,病毒分离率46.01%。除zhongshan2014-5为D8基因型外,其他均是H1基因型。zhongshan2014-5与越南病毒株(Viet Nam:Ho Chi Minh CityAB928200)序列同源性100%,属于D8型。结论 H1基因型是中山市2014年流行麻疹病毒的绝对优势基因型,中山市首次发现输入性D8型麻疹病毒感染病例。 展开更多

关键词 麻疹病毒 序列同源性 D8基因型 逆转录-聚合酶链反应 中山市

原文传递

呼吸道病毒定植与哮喘病严重度的关系

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作者 张卫东 张萧竹 +2 位作者 Sonia Baig 邱迪文 WC Tan 《中国抗感染化疗杂志》 2005年第4期242-244,共3页

目的比较致死样哮喘(NFA)缓解期患者与健康人中常见的呼吸道病毒的分布差异。方法研究对象包括NFA缓解期患者12例,轻症哮喘患者21例及无哮喘病史的健康人52名。诱导痰用于RNA及DNA的提取,PCR及RT-PCR方法用于7种常见的呼吸道病毒,微小病... 目的比较致死样哮喘(NFA)缓解期患者与健康人中常见的呼吸道病毒的分布差异。方法研究对象包括NFA缓解期患者12例,轻症哮喘患者21例及无哮喘病史的健康人52名。诱导痰用于RNA及DNA的提取,PCR及RT-PCR方法用于7种常见的呼吸道病毒,微小病毒(HRV),流感病毒A、B,副流感病毒1、3,呼吸道合胞病毒及腺病毒的检测。结果NFA缓解期患者的病毒检出率为42%(5/12),而轻症患者为24%(5/21),健康人为10%(5/52)。NFA患者的病毒检出率显著高于健康人。微小病毒、流感病毒A、B可存在于NFA缓解期患者的下呼吸道内。而健康人呼吸道内以微小病毒为主。哮喘患者气道内存在2种以上病毒定植的情况。结论呼吸道病毒可定植于哮喘患者及健康人的气道内而不诱发呼吸道症状,呼吸道病毒定植可能与哮喘的严重度有关。 展开更多

关键词 呼吸道病毒 逆转录-聚合酶链反应

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