反义bcl-2和反义survivin对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC细胞生长的作用 被引量：15

1

作者 关健 陈杰 +1 位作者 罗玉凤 高洁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第22期1536-1540,共5页

目的　研究反义bcl 2和反义survivin(svv)对人神经母细胞瘤 (NB)细胞系SK N MC细胞生长的作用。方法　利用基因重组技术 ,采用定向克隆构建在真核细胞中能够稳定表达反义bcl 2或反义svv的逆转录病毒载体PBabepuro Asbcl 2和PBabepuro As... 目的　研究反义bcl 2和反义survivin(svv)对人神经母细胞瘤 (NB)细胞系SK N MC细胞生长的作用。方法　利用基因重组技术 ,采用定向克隆构建在真核细胞中能够稳定表达反义bcl 2或反义svv的逆转录病毒载体PBabepuro Asbcl 2和PBabepuro Assvv ,并分别经脂质体LipofectamineTM介导转染人NB细胞株SK N MC细胞 ,经嘌呤霉素 (2 .0 μg/ml)筛选得到抗性克隆 ,同时以空载体Pbabepuro转染SK N MC作为对照 ;以免疫组化和Western印迹分析反义bcl 2、反义svv对细胞内源性Bcl 2、SVV蛋白质的表达抑制作用 ,应用MTT法研究细胞 (5× 10 3 /孔 )的生长和增殖情况 ,并接种于裸鼠 (3只 /组 ) ,观察 10 7个细胞在 6周时的成瘤情况 ,以研究反义bcl 2、反义svv对SK N MC细胞生长的作用。结果　反义bcl 2转染后的细胞SK N MC/PBabepuro Asbcl 2中的Bcl 2表达明显降低 ,反义svv转染后的细胞SK N MC/PBabepuro Assvv中的SVV表达也明显降低 ;且这两种细胞均生长缓慢 ,裸鼠移植瘤体积均明显小于SK N MC原始细胞或转染空载体的细胞接种形成的移植瘤。结论　稳定表达的反义bcl 2、反义svv均能够有效抑制SK N MC细胞内源性相应蛋白质Bcl 2、SVV的表达 ,提示这两个基因在NB细胞的肿瘤形成中均具有一定的作用。 展开更多

关键词 反义BCL-2 反义survivin BCL-2基因 神经母细胞瘤 NB 基因治疗

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基因重组HBV的构建及其表达反义RNA抗-HBV作用的研究 被引量：1

2

作者 孙殿兴 刘风军 +4 位作者 胡大荣 邬光惠 胡学玲 李娟 范公忍 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期90-93,共4页

目的　探索利用乙型肝炎病毒 (HBV)作为基因治疗载体的可能性及检验其表达反义RNA抗HBV的作用。方法　在表达完整HBV颗粒的质粒上 ,经基因修饰后分别表达S或S启动子区的反义RNA ,整合于具有HBV复制的 2 .2 .15细胞 ,形成细胞克隆 ,酶联... 目的　探索利用乙型肝炎病毒 (HBV)作为基因治疗载体的可能性及检验其表达反义RNA抗HBV的作用。方法　在表达完整HBV颗粒的质粒上 ,经基因修饰后分别表达S或S启动子区的反义RNA ,整合于具有HBV复制的 2 .2 .15细胞 ,形成细胞克隆 ,酶联免疫吸附 (ELISA)法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg ,斑点杂交法检测细胞内HBV核壳中HBVDNA ,聚合酶链反应(PCR)法检测上清液中重组HBV颗粒。结果　 2 .2 .15 pMEP4组、2 .2 .15 SAS组和 2 .2 .15 PAS组对HBsAg平均抑制率分别为 (2 .74± 3.83) %、(6 6 .5 4± 4 .4 5 ) % (P <0 .0 1)和 (5 5 .18± 3.2 7) % (P <0 .0 1) ;对HBeAg平均抑制率分别为 (4 .4 6± 4 .2 5 ) %、(2 6 .36± 1.6 9) % (P <0 .0 1)和 (6 5 .5 4± 3.2 2 ) % (P <0 .0 1) ;对HBV复制的抑制率分别为 17.0 %、5 9.9%和 72 .8%。 2 .2 .15 SAS组及 2 .2 .15 PAS组培养上清液中能检测出突变型HBV颗粒。结论　经过对HBV基因组的两处改造 ,分别在细胞内表达S区及S启动子区反义RNA具有干扰HBV复制及抑制HBV抗原表达的作用 ;在 2 .2 .15细胞中野生型HBV辅助下 。 展开更多

关键词 基因重组HBV 构建 表达 反义rna 抗-HBV作用 基因疗法 乙型肝炎

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MGMT反义RNA对人脑胶质瘤耐药性逆转的研究 被引量：12

3

作者 金澎 张庆林 +4 位作者 刘福生 王忠诚 魏林 王成伟 孔建新 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期93-98,共6页

目的　利用反义技术逆转胶质瘤的耐药性。方法　模拟临床亚硝基脲类药物的用药程序 ,在体外建立由DNA修复蛋白O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (MGMT)介导的人脑胶质瘤耐药细胞系U2 51 /BCNU ,并进行细胞耐药性检测和细胞MGMTmRNA表达的分... 目的　利用反义技术逆转胶质瘤的耐药性。方法　模拟临床亚硝基脲类药物的用药程序 ,在体外建立由DNA修复蛋白O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (MGMT)介导的人脑胶质瘤耐药细胞系U2 51 /BCNU ,并进行细胞耐药性检测和细胞MGMTmRNA表达的分析 ;观察MGMT反义RNA对U2 51 /BCNU细胞MGMT表达的调节作用及对U2 51 /BCNU细胞BCNU敏感性的影响。结果　经过反复总共 5次的用药过程 ,首次在体外建立了对BCNU具有稳定抗性的U2 51 /BCNU ,其对BCNU的耐受程度约为U2 51的 1 7倍 ;RT PCR结果显示 ,U2 51 /BCNU细胞有MGMTmRNA的表达。MGMT反义RNA表达载体pLaMT5SN和pLaMTSN能够在一定程度上降低U2 51 /BCNU细胞中MGMTmRNA的表达水平 ,提高其对BCNU的敏感性。结论　MGMT反义RNA能够在一定程度上抑制MGMT的表达水平 。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 耐药性 O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶 反义rna 逆转作用

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血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平与急性呼吸窘迫综合征患儿病情及预后的关系

4

作者 杨静 刘华朋 +1 位作者 柳旎 朱萍 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第14期77-81,86,共6页

目的探究血清长链非编码RNA INK4位点反义非编码RNA(lncRNA ANRIL)、长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿病情及预后的关系。方法选取124例确诊的ARDS患儿为患病组,另选取124例同期体... 目的探究血清长链非编码RNA INK4位点反义非编码RNA(lncRNA ANRIL)、长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿病情及预后的关系。方法选取124例确诊的ARDS患儿为患病组,另选取124例同期体检健康者为对照组。ARDS患儿根据病情严重程度分为重度组(34例)、中度组(42例)和轻度组(48例);ARDS患儿根据预后情况分为预后不良组(55例)和预后良好组(69例)。采用荧光定量聚合酶链反应测定血清中lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平。采用Logistic回归分析法分析ARDS患儿发生预后不良的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平对ARDS患儿发生预后不良的预测价值。结果患病组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度组、中度组和重度组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平随病情严重程度升高(P<0.05)。预后不良组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平、氧合指数(OI)、呼吸频率、急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);OI、呼吸频率、lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1为患儿发生预后不良的影响因素(P<0.05)。血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平预测ARDS患儿发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.737,截断值分别是11.35、4.36,二者联合预测的AUC为0.876。二者联合预测的AUC优于血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平单独预测(P<0.05)。结论ARDS患儿的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平均上调,且lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1为患儿发生预后不良的影响因素,二者联合预测的价值较高。 展开更多

关键词 急性呼吸窘迫综合征 长链非编码rna INK4位点反义非编码rna 长链非编码rna浆细胞瘤变异易位基因1 儿童 病情 预后

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整体原位杂交法研究斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育过程中胸苷酸合成酶(TS)的表达 被引量：1

5

作者 牛荣丽 梁丽英 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期81-85,共5页

收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的TS反义RNA探针,采用整体原位杂交方法研究胸苷酸合成酶(TS)基因在斑马鱼胚胎发育各期的时空表达状况。结果表明,在所取样的各个阶段,TS基因均有转录,但其部位不同,中囊胚过渡前后mRNA显现的... 收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的TS反义RNA探针,采用整体原位杂交方法研究胸苷酸合成酶(TS)基因在斑马鱼胚胎发育各期的时空表达状况。结果表明,在所取样的各个阶段,TS基因均有转录,但其部位不同,中囊胚过渡前后mRNA显现的部位仅存在于受精卵的动物极,10hpf时存在于整个胚胎的外围,至24hpf后集中到头部及其躯干部。112hpf在心脏部位强表达,其余部位表达相对较弱。 展开更多

关键词 胸苷酸合成酶(TS) 斑马鱼 反义rna探针 整体原位杂交

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WD40编码的P53 RNA反义转录子基因和蛋白及其功能 被引量：2

6

作者 陆文昕 葛奕辰 +1 位作者 肖丽英 李燕 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期244-248,共5页

WD40编码的P53 RNA反义转录子(WRAP53)基因有1α、1β和1γ三个起始外显子,1α与P53的第一外显子反向互补,其表达产物能稳定P53 RNA水平,从而促进P53蛋白表达,最终参与调控肿瘤的生物学行为;1β转录翻译生成的WRAP53蛋白,涉及细胞程序... WD40编码的P53 RNA反义转录子(WRAP53)基因有1α、1β和1γ三个起始外显子,1α与P53的第一外显子反向互补,其表达产物能稳定P53 RNA水平,从而促进P53蛋白表达,最终参与调控肿瘤的生物学行为;1β转录翻译生成的WRAP53蛋白,涉及细胞程序性死亡、周期调控以及蛋白酶降解和RNA代谢等多个重要生化过程。WRAP53蛋白主要通过与端粒酶复合体等多种组分结合参与端粒酶卡侯体(CB)的形成、端粒酶全酶的组装定位、端粒酶的运输,指导运动神经元生存蛋白定位至CB等。WRAP53基因在肿瘤细胞系和临床肿瘤样本中普遍高表达,且表达越高,肿瘤的预后越差。沉默WRAP53基因,可明显抑制肿瘤细胞的生长和成瘤能力。先天性角化不良综合征与端粒长度的缩短有关,WRAP53基因表达降低最终会导致端粒的缩短。 展开更多

关键词 WD40编码的P53 rna反义转录子 端粒酶卡侯体蛋白 端粒 蛋白质

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hTR反义寡核苷酸对急性白血病原代细胞端粒酶活性及凋亡的影响 被引量：2

7

作者 肖扬 张洹 何冬梅 《广东医学》 CAS CSCD 2004年第12期1379-1381,共3页

目的　探讨端粒酶RNA(hTR)反义寡核苷酸 (ASODN)对急性白血病 (AL)原代细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法　应用与人hTR起始密码子互补的硫代ASODN处理AL原代细胞 ,用台盼蓝拒染的方法计数活细胞 ,用端粒酶重复扩增分析 (TRAP) -PCR... 目的　探讨端粒酶RNA(hTR)反义寡核苷酸 (ASODN)对急性白血病 (AL)原代细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法　应用与人hTR起始密码子互补的硫代ASODN处理AL原代细胞 ,用台盼蓝拒染的方法计数活细胞 ,用端粒酶重复扩增分析 (TRAP) -PCR -ELISA检测法观察端粒酶活性的变化 ,用Giemsa染色、Hoechst332 5 8+PI双染荧光显微镜检查及流式细胞仪检测凋亡细胞的发生。结果　经hTR -ASODN作用后 ,AL原代细胞端粒酶活性明显受到抑制 ,并与ASODN的浓度和处理时间相关 ,10 μmol/LASODN在作用 72h时端粒酶活性为( 0 0 95± 0 0 6 ) ,较细胞对照组 ( 1 15 4± 0 15 )下调明显 (P <0 0 1) ;在作用第 5天经荧光显微镜可观察到ASODN组细胞凋亡形态学变化。流式细胞仪检测到其凋亡率为 ( 31 72± 8 6 4 ) ,与细胞对照组的凋亡率 ( 6 33± 0 91)比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　hTR -ASODN可明显抑制AL原代细胞端粒酶活性并诱导其凋亡 。 展开更多

关键词 端粒酶活性 原代细胞 ASODN AL 反义寡核苷酸 急性白血病 凋亡 起始密码子 活细胞 荧光显微镜

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定量表达和整体原位杂交研究Doublesex基因在不同生殖状态蚤状溞的表达

8

作者 周伟 陈萍 +4 位作者 邱成功 周健凯 郭晓鸽 王丹丽 赵云龙 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1655-1662,共8页

为研究doublesex(dsx)基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况,提取不同生殖状态的蚤状溞RNA,采用RT-PCR和Quantitative real-time PCR检测了dsx在不同生殖状态溞体的表达差异,并通过体外转录制备DIG标记的Doublesex的RNA探针;采用... 为研究doublesex(dsx)基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况,提取不同生殖状态的蚤状溞RNA,采用RT-PCR和Quantitative real-time PCR检测了dsx在不同生殖状态溞体的表达差异,并通过体外转录制备DIG标记的Doublesex的RNA探针;采用整体原位杂交方法研究dsx基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况。结果显示,RT-PCR检测发现dsx在雌雄溞体没有性别特异性的选择性拼接,只有一种相同的转录产物。Real-time PCR显示,dsx在雄溞中表达水平最高,是孤雌溞的2.6倍,两性雌溞的4.9倍,三者之间有显著性差异,表现出性别差异性表达。整体原位杂交发现,在所取样的不同生殖状态溞体中dsx基因也均有表达,但其部位与表达量不同,且在雌雄溞体中表现出性别差异。在雄溞的第一触角和第一胸肢显现得尤为明显,且在复眼中也有表达。孤雌溞和两性雌溞对应部位表达则相对较弱。结果表明,dsx基因很有可能在调控蚤状溞生殖转换和性别分化上起到很大作用。 展开更多

关键词 蚤状溞 doublesex基因 rna探针 整体原位杂交

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斑马鱼胚胎发育过程中Mef2c的表达

9

作者 刘学飞 王跃祥 +5 位作者 蒋璆 钱林溪 高广文 董永新 钟涛 宋后燕 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期89-91,F0002,共4页

目的探讨Mef2c在斑马鱼胚胎骨骼肌和心肌中表达的时相变化。方法收集不同发育时期的AB野生型斑马鱼胚胎,采用整体原位杂交技术检测Mef2c在骨骼肌和心肌的转录情况。结果Mef2c在体节中的表达约在13hpf,而在心脏中的表达出现在13hpf以后,... 目的探讨Mef2c在斑马鱼胚胎骨骼肌和心肌中表达的时相变化。方法收集不同发育时期的AB野生型斑马鱼胚胎,采用整体原位杂交技术检测Mef2c在骨骼肌和心肌的转录情况。结果Mef2c在体节中的表达约在13hpf,而在心脏中的表达出现在13hpf以后,与体节中的表达时间基本平行。另外,Mef2c在体节和心脏中的表达一直维持到48hpf。结论明确了Mef2c在斑马鱼胚胎骨骼肌和心肌发育的表达时相变化,为研究斑马鱼早期骨骼肌和心肌发育的调控机制提供了一定的理论基础。 展开更多

关键词 Mef2c 斑马鱼 反义rna探针 整体原位杂交

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视黄酸依赖反义cyclin D1对HL-60细胞细胞周期素依赖性激酶的影响

10

作者 杨剑 糜漫天 +1 位作者 杨志祥 韦娜 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期329-332,共4页

目的　探讨视黄酸 (retinoicacid ,RA)及其诱导的反义 (anti sense,AS)cyclinD1对HL 6 0细胞的细胞周期素激酶CDK4的影响。方法　通过构建含有视黄酸反应元件 (retinoicacidresponseelement,RARE)的反义cyclinD1RNA表达载体 pCI neo/RAR... 目的　探讨视黄酸 (retinoicacid ,RA)及其诱导的反义 (anti sense,AS)cyclinD1对HL 6 0细胞的细胞周期素激酶CDK4的影响。方法　通过构建含有视黄酸反应元件 (retinoicacidresponseelement,RARE)的反义cyclinD1RNA表达载体 pCI neo/RARE3 TK/AscyclinD1,使反义cyclinD1的表达可受视黄酸诱导调控。以脂质体转染HL 6 0白血病细胞后 ,运用MTT比色法检测细胞增殖功能、NBT还原实验观测细胞分化状况 ,RT PCR以及western blot等方法观测视黄酸处理后CDK4的mRNA和蛋白表达水平的改变。结果　RA处理后 ,细胞生长显著减慢 ,分化能力明显增强 ,CDK4mRNA和蛋白表达水平均有所降低 ,其中 ,以反义cyclinD1转染细胞经RA处理后变化更为显著。结论　RA及其诱导的反义cyclinD1对HL 6 展开更多

关键词 视黄酸 细胞周期素D1 rna反义 细胞/分化 细胞周期素依赖性激酶

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端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响

11

作者 周青 张桂荣 +2 位作者 李瑞武 孙长伏 卢利 《口腔医学》 CAS 2007年第12期639-642,共4页

目的探讨端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法反义寡核苷酸(AS-ONS)作用于Tca8113细胞;采用MTT法测定AS-ONS对Tca8113细胞的毒性;倒置相差显微镜观察细胞生长状况及形态学改变;透射电镜观察细胞... 目的探讨端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法反义寡核苷酸(AS-ONS)作用于Tca8113细胞;采用MTT法测定AS-ONS对Tca8113细胞的毒性;倒置相差显微镜观察细胞生长状况及形态学改变;透射电镜观察细胞超微结构;测定Tca8113细胞端粒酶活性。结果AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,其生长抑制随剂量的增加而增强,具有浓度依赖性;AS-ONS对于Tca8113细胞端粒酶活性抑制作用具有时间依赖性。不同浓度AS-ONS作用于Tca8113细胞,其细胞毒性作用较弱;在倒置显微镜下可见AS-ONS组随药物浓度增高,细胞生长出现抑制。透射电镜观察到AS-ONS组作用的细胞细胞膜破损,细胞核内染色质凝聚,边集,并穿过核膜溢入胞质中,胞质部分溶解,线粒体空胞变性;AS-ONS对端粒酶活性抑制效果非常明显。结论反义寡核苷酸AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,并具有剂量依赖性和时间依赖性;靶向于端粒酶RNA的反义寡核苷酸可明显地抑制Tca8113细胞端粒酶活性,细胞增殖受到明显抑制。 展开更多

关键词 舌癌细胞系Tca8113 端粒酶 端粒酶rna反义寡核苷酸

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基因治疗20年 被引量：11

12

作者 毛建平 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期124-129,共6页

1990年9月14日美国NIH临床中心首次采用基因治疗成功治愈腺苷脱氨酶(ADA)基因缺陷而患重度联合免疫缺损和免疫系统功能低下疾患,至今已整整20年。其发展迅速,从单纯的重组技术导入基因DNA发展到了涵盖DNA和RNA两个干预水平,和基因上调(... 1990年9月14日美国NIH临床中心首次采用基因治疗成功治愈腺苷脱氨酶(ADA)基因缺陷而患重度联合免疫缺损和免疫系统功能低下疾患,至今已整整20年。其发展迅速,从单纯的重组技术导入基因DNA发展到了涵盖DNA和RNA两个干预水平,和基因上调(如基因增补、矫正、置换等)及下调(基因失活)的两大策略。近年来的进展使得基因治疗登入Science杂志2009年度十大科学进展。我国在基因治疗领域诞生了第一个上市药物,有10多个制剂处于临床前或临床研究阶段。基因治疗在遗传病治疗中具备巨大潜力,已经成为当代生命科学中最有前景的研究方向之一。 展开更多

关键词 基因治疗 DNA rna 转染 载体 反义技术

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健脾消癌方通过lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞株HCT116转移的机制 被引量：11

13

作者 焦蕉 唐麒 +3 位作者 蒋益兰 李东芳 刘佳琴 胡广生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期66-71,共6页

目的:观察健脾消癌方对Hox转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)/酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法:分析不同细胞株lncRNA HOTAIR的表达情况,采用... 目的:观察健脾消癌方对Hox转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)/酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法:分析不同细胞株lncRNA HOTAIR的表达情况,采用10%,15%,20%健脾消癌方含药血清作用于HCT116细胞,transwell实验检测健脾消癌方对HCT116细胞的侵袭能力影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测lncRNA HOTAIR,JAK2,STAT3 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2,磷酸化STAT3(p-STAT3),STAT3蛋白表达情况。结果:结肠癌细胞株HCT116中lncRNA HOTAIR的表达水平最高,采用此细胞作为观察对象。与空白组比较,健脾消癌方各组的侵袭细胞数均降低(P<0.05,P<0.01);健脾消癌方中剂量组JAK2 mRNA相对表达水平降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的lncRNA HOTAIR,健脾消癌方高剂量组的JAK2 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,健脾消癌方中剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的JAK2蛋白,健脾消癌方高剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:健脾消癌方可有效抑制结肠癌细胞转移,其机制可能与抑制lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路的表达相关。 展开更多

关键词 健脾消癌方 结肠癌 HCT116细胞 Hox转录本反义基因间rna 酪氨酸蛋白激酶2 信号传导及转录激活因子3

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lncRNA TTN-AS1通过miR-138-5p/EGFR轴调控胆囊癌细胞增殖、凋亡和迁移 被引量：3

14

作者 王玲华 陈艳 李叶若 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2023年第1期64-74,共11页

胆囊癌(GBC)是胆道系统常见的肿瘤,严重威胁人类的生命健康。该研究旨在探究长链非编码RNA(lncRNA)肌联蛋白反义RNA1(TTN-AS1)/微小RNA-138-5p(miR-138-5p)/表皮生长因子受体(EGFR)信号轴在GBC中的分子机制。qRT-PCR检测GBC组织和细胞系... 胆囊癌(GBC)是胆道系统常见的肿瘤,严重威胁人类的生命健康。该研究旨在探究长链非编码RNA(lncRNA)肌联蛋白反义RNA1(TTN-AS1)/微小RNA-138-5p(miR-138-5p)/表皮生长因子受体(EGFR)信号轴在GBC中的分子机制。qRT-PCR检测GBC组织和细胞系中TTN-AS1、miR-138-5p和EGFR mRNA相对表达水平,并对它们在GBC组织中的相关性进行分析。培养GBC细胞系GBC-SD,分为对照(Control)组、si-NC组、si-TTN-AS1组、si-TTN-AS1+in-miR-138-5p组和si-TTN-AS1+pc-EGFR组。qRT-PCR和Western blot检测细胞转染效率;CCK-8、EdU染色、流式细胞术以及划痕愈合实验检测细胞增殖、凋亡和迁移情况;Western blot检测细胞增殖(PCNA)、凋亡(Cleaved Caspase-3)和迁移(MMP-2、MMP-9)相关蛋白水平。利用体内异种移植肿瘤模型研究TTN-AS1对GBC肿瘤生长,Ki67、PCNA阳性表达以及miR-138-5p、EGFR mRNA表达的影响。结果显示,GBC组织和细胞系中TTN-AS1和EGFR mRNA表达均上调,miR-138-5p表达下调,且GBC组织中TTN-AS1水平与miR-138-5p水平呈负相关,与EGFR mRNA水平呈正相关;miR-138-5p水平与EGFR mRNA水平呈负相关(P<0.05)。生物信息学分析和双荧光素酶证实了miR-138-5p与TTN-AS1或EGFR 3′UTR存在相互作用,且RNA下拉实验证实了TTN-AS1与miR-138-5p结合;qRT-PCR和Westernblot证明TTN-AS1可能通过miR-138-5p调控EGFR表达(P<0.05)。敲低TTNAS1可显著抑制GBC-SD细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡(P<0.05);同时下调PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白水平,上调Cleaved Caspase-3蛋白水平(P<0.05)。抑制miR-138-5p或过表达EGFR可部分逆转TTN-AS1敲低对GBC-SD细胞恶性行为的影响。体内实验证实,敲低TTN-AS1可抑制肿瘤生长,同时上调miR-138-5p水平,下调EGFR mRNA和Ki67、PCNA阳性表达水平(P<0.05)。总之,TTN-AS1可能在GBC的发生和发展中发挥促癌作用,且其可能是通过调节miR-138-5p/EGFR信号轴实现的。 展开更多

关键词 胆囊癌 长链非编码rna肌联蛋白反义rna1 微小rna-138-5p 表皮生长因子受体 恶性行为

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多发性骨髓瘤患者血清lncRNA PITPNA-AS1、lncRNA NORAD水平及其与患者预后的关系

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作者 李红伟 司松环 +1 位作者 杨靖 刘艳杰 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2024年第3期450-455,共6页

目的:分析多发性骨髓瘤(MM)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)PITPNA反义RNA1(PITPNA-AS1)、lncRNA NORAD水平及其与患者预后的关系。方法:分别选择本院收治的96例MM患者和96例来本院健康查体的志愿者作为试验组和对照组,时间在2018年1月至... 目的:分析多发性骨髓瘤(MM)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)PITPNA反义RNA1(PITPNA-AS1)、lncRNA NORAD水平及其与患者预后的关系。方法:分别选择本院收治的96例MM患者和96例来本院健康查体的志愿者作为试验组和对照组,时间在2018年1月至2020年12月期间;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测两组血清中lncRNA PITPNA-AS1、lncRNA NORAD的相对表达量;采用Pearson相关分析分析血清lncRNA PITPNA-AS1与lncRNA NORAD水平的相关性;采用Kaplan-Meier生存分析分析血清lncRNA PITPNA-AS1、lncRNA NORAD水平与MM预后的关系;采用多元Cox回归分析MM患者预后的影响因素。结果:试验组血清lncRNA PITPNA-AS1、lncRNA NORAD水平显著高于对照组(P<0.05)。Ⅲ期MM患者血清lncRNA PITPNA-AS1、lncRNA NORAD水平显著高于Ⅰ期和Ⅱ期,Ⅱ期显著高于Ⅰ期(P<0.05)。MM患者血清lncRNA PITPNA-AS1与lncRNA NORAD水平呈正相关(r=0.636,P<0.05)。lncRNA PITPNA-AS1和lncRNA NORAD高表达患者3年总生存率均低于低表达患者(χ~2值分别为8.065、11.937,P值分别为0.005、0.001)。ISS分期较高、lncRNA PITPNA-AS1高水平、lncRNA NORAD高水平是MM患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:MM患者血清lncRNA PITPNA-AS1、lncRNA NORAD水平异常升高,且与患者预后关系密切。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 长链非编码rna PITPNA反义rna1 长链非编码rna NORAD 预后

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LncRNA GATA3-AS1通过调控miR-362-3p/FABP5轴抑制宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭 被引量：1

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作者 罗健玮 黄泓轲 胡艳丽 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第6期1009-1016,共8页

目的:探究长链非编码RNA GATA3反义RNA 1(lncRNA GATA3-AS1)调控微小RNA-362-3p(miR-362-3p)表达对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:qRT-PCR检测宫颈癌细胞中lncRNA GATA3-AS1、miR-362-3p、FABP5表达;双荧光素酶报告基因实验验证... 目的:探究长链非编码RNA GATA3反义RNA 1(lncRNA GATA3-AS1)调控微小RNA-362-3p(miR-362-3p)表达对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:qRT-PCR检测宫颈癌细胞中lncRNA GATA3-AS1、miR-362-3p、FABP5表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA GATA3-AS1和miR-362-3p的靶向关系、miR-362-3p和FABP5的靶向关系;将细胞分为pcDNA-NC组、pcDNA-GATA3-AS1组、si-NC组、si-GATA3-AS1组、si-GATA3-AS1+inhibitor-NC组、si-GATA3-AS1+miR-362-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-362-3p mimics组、miR-362-3p mimics+pcDNA-NC组、miR-362-3p mimics+pcDNA FABP5组;Western blot检测蛋白表达;EdU法检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移侵袭。结果:在宫颈癌细胞系中,GATA3-AS1、FABP5均为高表达,miR-362-3p均为低表达,选择HeLa细胞进行后续实验;双荧光素酶报告基因实验表明,lncRNA GATA3-AS1和miR-802、miR-362-3p和FABP5具有靶向关系;与pcDNA-NC组比较,pcDNA-GATA3-AS1组Hela细胞EdU阳性率、迁移侵袭及MMP-2、MMP-9表达明显上升(P<0.05);与si-NC组比较,si-GATA3-AS1组HeLa细胞EdU阳性率、迁移侵袭及MMP-2、MMP-9表达明显下降(P<0.05);抑制miR-362-3p表达或过表达FABP5均可以明显逆转沉默GATA3-AS1或过表达miR-362-3p对于HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论:沉默GATA3-AS1可以靶向上调miR-362-3p表达,抑制FABP5表达,抑制宫颈癌HeLa细胞增殖迁移及侵袭。 展开更多

关键词 长链非编码rna GATA3反义rna 1 微小rna-362-3p 宫颈癌 增殖 转移

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血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p水平与精神分裂症患者精神症状及认知功能的相关性

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作者 黄伟杰 李一兰 +2 位作者 王西林 卢林生 肖攀攀 《疑难病杂志》 CAS 2024年第2期175-180,共6页

目的探讨血清长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)、微小RNA-197-3p(miR-197-3p)水平与精神分裂症(SCZ)患者精神症状及认知功能的相关性。方法选取2021年4月—2023年3月广州医科大学附属脑科医院精神科诊治SCZ患者118... 目的探讨血清长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)、微小RNA-197-3p(miR-197-3p)水平与精神分裂症(SCZ)患者精神症状及认知功能的相关性。方法选取2021年4月—2023年3月广州医科大学附属脑科医院精神科诊治SCZ患者118例为研究对象(SCZ组),并选取同期健康体检者110例作为健康对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p水平,对参与者进行阳性与阴性症状量表(PANSS)评分和认知功能评价;Pearson、Spearman相关系数分析血清lncRNA HOTAIR与miR-197-3p水平及二者与精神症状、认知功能的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p水平对SCZ的评估价值。结果与健康对照组比较,SCZ组血清lncRNA HOTAIR表达水平升高,miR-197-3p水平降低(t/P=9.859/<0.001、19.191/<0.001)。生物信息学预测,lncRNA HOTAIR与miR-197-3p存在结合位点。Pearson相关性分析结果显示,SCZ患者血清中lncRNA HOTAIR表达与miR-197-3p表达呈负相关(r=-0.543,P<0.001)。与健康对照组比较,SCZ组阳性症状、阴性症状、一般病理症状及总分均显著升高(t/P=31.623/<0.001、28.219/<0.001、48.918/<0.001、39.574/<0.001),TMT、BACS、WMS-III-SS、BVMT、HVLT、CPT以及SCWT中单次测验、颜色测验评分显著降低(t/P=6.520/<0.001、7.666/<0.001、4.114/<0.001、8.191/<0.001、5.902/<0.001、4.985/<0.001、13.060/<0.001、8.938/<0.001)。SCZ患者lncRNA HOTAIR水平与阴性症状、总分呈正相关(r/P=0.498/<0.001、0.507/<0.001),与TMT、CPT呈负相关(r/P=-0.476/<0.001、-0.485/<0.001);miR-197-3p与阴性症状、总分呈负相关(r/P=-0.408/<0.001、-0.453/0.009),与TMT、CPT呈正相关(r/P=0.449/0.001、0.517/<0.001)。血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p及二者联合预测SCZ发生的AUC分别为0.819、0.885、0.927,二者联合预测AUC显著高于各自单独预测(Z/P=4.580/<0.001、2.953/0.003)。结论SCZ患者体内血清lncRNA HOTAIR上调,miR-197-3p下调,与精神症状� 展开更多

关键词 精神分裂症 精神症状 认知功能 长链非编码rna-HOX转录本反义基因间rna 微小rna-197-3p

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敲减lncRNA BAIAP2-AS1对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制

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作者 李贺扬 龙银波 +2 位作者 金治宾 刘容 倪晓光 《山东医药》 CAS 2024年第4期44-49,共6页

目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检... 目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检测各细胞中微小RNA-491-5p(miR-491-5p)、BAIAP2-AS1、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)mRNA表达,选择lncRNA BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA相对表达量变化较显著的胶质瘤细胞进行后续实验。取上述胶质瘤细胞,随机分为空白对照组、BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1 shRNA+NC inhibitor组,BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA、NC shRNA,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1shRNA+NC inhibitor组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA与miR-491-5p inhibitor、BAIAP2-AS1 shRNA与NC inhibitor,空白对照组不予转染。转染48 h,收集细胞,采用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率,采用RT-qPCR法检测BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA表达。采用StarBase在线数据库预测miR-491-5p与BAIAP2-AS1、MGMT的互补位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证其靶向调控关系。结果与NHA细胞比较,A172、LN229、U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低(P均<0.05)。以U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低,故以U251细胞进行后续实验。与空白组、NC shRNA组比较,BAIAP2-AS1 shRNA组细胞活性、细胞迁移率、BAIAP2-AS1、MGMT表达显著降低(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著升高(P均<0.05);与BAIAP2-AS1 shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+inhibitor NC组比较,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组细胞活性、细胞迁移率、MGMT表达显著增加(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著降低(P均<0.05)。经StarBase在线数据库预测 展开更多

关键词 胶质瘤 长链非编码rna BAIAP2反义rna 1 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 微小rna-491-5p O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶

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lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义

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作者 王锋 董昌正 +2 位作者 唐思锋 赵伟 张启文 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第4期683-689,共7页

目的:探究胃癌(GC)组织中长链非编码RNA HOXC反义RNA1(lncRNA HOXC-AS1)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)mRNA表达水平与患者临床病理特征及术后5年内生存的关系。方法:选取我院2015年5月至2018年4月收治的GC患者139例,手术... 目的:探究胃癌(GC)组织中长链非编码RNA HOXC反义RNA1(lncRNA HOXC-AS1)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)mRNA表达水平与患者临床病理特征及术后5年内生存的关系。方法:选取我院2015年5月至2018年4月收治的GC患者139例,手术收集GC组织及癌旁组织。荧光定量PCR法检测lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达。对GC患者进行术后随访5年,记录GC患者生存情况,分为生存组88例,死亡组51例。比较GC组织和癌旁组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平、不同临床病理特征患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况、生存组和死亡组临床病理特征和GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平。分析GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平的相关性、GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况与术后5年生存的关系、影响GC患者术后5年内生存的危险因素。结果:与癌旁组织相比,GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平呈正相关(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度相关(P<0.05);lncRNA HOXC-AS1高表达组、IGF2BP2 mRNA高表达组患者术后5年总生存率分别显著低于lncRNA HOXC-AS1低表达组、IGF2BP2 mRNA低表达组(P<0.05);生存组和死亡组淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度比较差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平显著高于生存组(P<0.05);TNM分期为III期、肿瘤低分化、lncRNA HOXC-AS1高表达、IGF2BP2 mRNA高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素(P<0.05)。结论:GC患者癌组织中lncRNA HOXC-AS1及IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高,且术后5年内死亡的GC患者较存活患者更高,二者与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度密切相关,二者高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危 展开更多

关键词 胃癌 长链非编码rna HOXC反义rna1 胰岛素样生长因子2 mrna结合蛋白2 术后5年内生存

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LncRNA GNAS-AS1通过调节miR-449a/Notch1轴参与胃癌细胞的增殖和迁移

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作者 徐俐 胡珊珊 赵海明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期483-489,共7页

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随机分为对照组(Control组)、si-NC组、si-GNAS-AS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组、si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组。实时荧光定量PCR检测GNAS-AS1、miR-449a和Notch1 mRNA的表达;MTT实验、平板克隆形成实验检测增殖;wound healing实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。Western Blot检测Notch1、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449a和GNAS-AS1、Notch1的关系。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中GNAS-AS1、Notch1 mRNA表达升高,miR-449a表达降低(P<0.05)。与Control组、si-NC组相比,si-GNAS-AS1组AGS细胞GNAS-AS1表达、OD_(490)值、克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin蛋白表达表达降低,miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与si-GNASAS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组相比,si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组OD_(490)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin表达升高(P<0.05),miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。GNAS-AS1靶向负调控miR-449a表达,miR-449a靶向负调控Notch1表达。结论沉默GNAS-AS1可能通过上调miR-449a来抑制Notch1蛋白的表达,从而抑制GC细胞增殖、迁移、侵袭过程。 展开更多

关键词 长链非编码rna GNAS反义rna1 miR-449a 缺刻基因1 胃癌 迁移 增殖

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