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蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡 被引量：28
1
作者 蔡善君 严密 张军军 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期384-387,共4页
目的观察蓝光光照对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的影响。方法用蓝光照射体外培养的人RPE细胞,分为3组,A组不同光照强度;B组同一光照强度,不同光照时间;C组同一光照强度和光照时间,不同细胞培养终止时间。利用末端脱氧核酸... 目的观察蓝光光照对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的影响。方法用蓝光照射体外培养的人RPE细胞,分为3组,A组不同光照强度;B组同一光照强度,不同光照时间;C组同一光照强度和光照时间,不同细胞培养终止时间。利用末端脱氧核酸转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)、荧光素标记的连接素V/碘化吡啶(Annexin V-FITC/PI)双染流式细胞检测、透射电子显微镜等手段观察细胞凋亡。结果TUNEL染色阳性细胞的体积缩小变圆,细胞核浓缩,边聚成新月形或帽状,细胞核碎裂成数个,细胞膜出胞。透射电子显微镜观察发现细胞内线粒体肿胀,线粒体内膜嵴消失;粗面内质网扩张;溶酶体增加,内含代谢产物。A组低于一定阈值[(500±100)lx]的蓝光光照对RPE细胞损伤较轻,细胞凋亡及坏死随光照强度的增强而增加;B组随着光照时间延长,RPE细胞凋亡数量没有增加,而细胞坏死逐渐增加;C组光照后6、12h,损伤以细胞凋亡为主,但随着光照时间延长,凋亡继发坏死细胞和坏死细胞明显增加。结论蓝光照射可引起体外培养的人RPE细胞损伤,损伤形式有凋亡、凋亡继发坏死及坏死;损伤程度呈光照强度和光照时间依赖性。 展开更多
关键词 眼损伤 色素上皮 眼 细胞死亡 光刺激 临床实验室技术
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蓝光致人视网膜色素上皮细胞凋亡与线粒体膜电位和细胞色素C的关系 被引量：31
2
作者 蔡善君 严密 +2 位作者 毛咏秋 周焰 刘关键 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1095-1102,共8页
目的探讨蓝光光照对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡及对线粒体膜通透性转运功能的影响。方法用蓝光光照体外培养的人RPE细胞。实验分为三部分。第一部分:不同光照度,分为3组,第1组光照度(500±100)lx,第2组光照度(2000... 目的探讨蓝光光照对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡及对线粒体膜通透性转运功能的影响。方法用蓝光光照体外培养的人RPE细胞。实验分为三部分。第一部分:不同光照度,分为3组,第1组光照度(500±100)lx,第2组光照度(2000±500)lx,第3组光照度(3000±500)lx;光照RPE细胞时间6h,光照结束后24h终止培养。第二部分:同一光照度、不同光照时间,检测RPE细胞亚型时分为3组,第1组光照时间6h,第2组光照时间12h,第3组光照时间24h,光照度均为(2000±500)lx;检测线粒体膜电位时也分为3组,第1组光照时间3h,第2组光照时间6h,第3组光照时间12h,光照度均为(2000±500)lx。第三部分:同一光照度和光照时间,光照度(2000±500)lx,光照RPE细胞时间6h;不同细胞培养终止时间分为4组,第1组终止细胞培养时间为光照后6h,第2组为光照后12h,第3组为光照后24h,第4组为光照后36h。利用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)染色、荧光素标记的AnnexinV-FITC和PI双染流式细胞检测、透射电镜等手段观察RPE细胞凋亡情况。罗丹明123荧光染料孵育人RPE细胞,流式细胞仪检测线粒体膜电位,酶联免疫法测定细胞色素C活性,比色测定法测定Caspase-3的活性。结果第二部分第1组TUNEL染色阳性细胞的体积缩小变圆,胞核浓缩,边聚成新月形或帽状,细胞核碎裂成数个,细胞膜出胞。透射电镜观察发现细胞内线粒体肿胀,线粒体内膜嵴消失,粗面内质网扩张,溶酶体增加。第一部分(500±100)lx光照未引起明显的RPE细胞损伤,但线粒体膜电位明显下降;随着光照度增加,RPE细胞出现凋亡、凋亡继发性坏死及坏死,同时线粒体膜电位逐渐下降。第二部分光照6和12h,凋亡细胞百分比增加,荧光强度明显下降;光照24h凋亡继发性坏死细胞、坏死细胞百分比增加。第三部分光照后6和12h,RPE细胞凋亡百分比逐渐增加;光照后24、36h� 展开更多
关键词 光 色素上皮 眼 细胞凋亡 线粒体 膜电位 细胞色素C类
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血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞表达肌动蛋白的影响 被引量：15
3
作者 司艳芳 惠延年 +3 位作者 关娟 王君 陈丹 杜红俊 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2003年第4期241-243,共3页
目的　观察血小板源性生长因子 (platelet- derived growth factor,PDGF)对培养的人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium ,RPE)细胞表达α-平滑肌肌动蛋白 (α- smooth muscle actin,α- SMA)的影响。　方法　将体外培养的第 4... 目的　观察血小板源性生长因子 (platelet- derived growth factor,PDGF)对培养的人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium ,RPE)细胞表达α-平滑肌肌动蛋白 (α- smooth muscle actin,α- SMA)的影响。　方法　将体外培养的第 4～ 6代人 RPE细胞分为无血清组 [改良 Eagle培养液 (Delbecco′s modi-fied Eagle′s medium ,DMEM)组 ]和含有 2 0 g/ L小牛血清的 DMEM组 (2 % DMEM组 )。每组均分别加入不同浓度 (0 ,1,5 0 ng/ ml)的 PDGF,采用免疫荧光法定性、定量观察 PDGF对人 RPE细胞表达α- SMA的影响。　结果　 DMEM组中 ,无 PDGF刺激时 ,α- SMA表达阳性细胞数比率约为 4 0 %～ 5 0 % ,荧光强度的平均值为 8.0 8;加入 PDGF(1ng/ ml,5 0 ng/ ml)刺激后 ,α- SMA表达阳性细胞数的比率及荧光强度的平均值分别为 80 %、12 .35和 90 %、17.2 3。 2 % DMEM组无 PDGF刺激时 ,α- SMA表达阳性细胞数比率约为85 % ,荧光强度的平均值为 14 .79;经 1ng/ ml和 5 0 ng/ ml的 PDGF刺激后 ,α- SMA表达阳性细胞数的比率及荧光强度的平均值分别为 95 %、16 .2 8和 10 0 %、2 1.36。 2 % DMEM组经 5 0 mg/ ml PDGF刺激后的荧光强度约为 DMEM组无 PDGF刺激的时 2 .7倍 ,为 2 % DMEM组无 PDGF刺激时的 1.5倍。 展开更多
关键词 血小板源性生长因子 PDGF 视网膜 色素上皮细胞 基因表达 肌动蛋白
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息肉状脉络膜血管病变的随访观察 被引量：12
4
作者 文峰 吴德正 李海涛 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2004年第1期8-11,共4页
目的　观察息肉状脉络膜血管病变 (PCV)的病程变化及视力预后。　方法　对 15例临床确诊的 PCV患者的 2 0只患眼行矫正视力和眼底彩色照相随访观察 ,随访时间 2～ 6 4个月 ,平均随访时间19.1个月 ;其中 10例 14只眼采用荧光素眼底血管造... 目的　观察息肉状脉络膜血管病变 (PCV)的病程变化及视力预后。　方法　对 15例临床确诊的 PCV患者的 2 0只患眼行矫正视力和眼底彩色照相随访观察 ,随访时间 2～ 6 4个月 ,平均随访时间19.1个月 ;其中 10例 14只眼采用荧光素眼底血管造影 (FFA)和吲哚青绿血管造影 (ICGA)作了眼底形态学的随访 ,随访时间 3～ 5 3个月 ,平均随访时间 2 1.0个月。　结果　 2 0只眼中随访视力为 0 .3及其以上者5只眼 ,占 2 5 .0 % ;视力为 0 .1～ 0 .2者 6只眼 ,占 30 .0 % ;视力为 0 .1以下者 9只眼 ,占 4 5 .0 %。随访过程中 2只眼视力增进 ,占 10 .0 % ;10只眼视力稳定 ,占 5 0 .0 % ;8只眼视力下降 ,占 4 0 .0 %。仅 1只眼形成盘状瘢痕 ,占 5 .0 %。 14只眼底血管造影随访的患眼中 ,造影显示息肉状病灶稳定不变者 4只眼 ,占 2 8.6 % ;部分消退者 2只眼 ,占 14 .3% ;有扩展和新生者 6只眼 ,占 4 2 .8% ;消退和新生并存者 2只眼 ,占 14 .3%。　结论　 PCV患眼视力预后差异较大 ;在病程进展过程中息肉状病灶可增多、消退或稳定不变。 展开更多
关键词 息肉状脉络膜血管病变 PCV 视力 吲哚花青绿 色素上皮 血管疾病
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频域相干光断层扫描观察急性浆液性脉络膜视网膜病变的形态学变化特征 被引量：13
5
作者 禹海 夏国英 +2 位作者 高明宏 于静 张艳鹰 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期508-515,共8页
目的研究急性浆液性脉络膜视网膜病变（CSC）的频域相干光断层扫描（OCT）图像特征。方法回顾性病例系列研究。对29例（29只眼）急性CSC患者的临床资料进行回顾性分析。所有患者均应用频域OCT三维切面观察黄斑部视网膜显微结构变化，测... 目的研究急性浆液性脉络膜视网膜病变（CSC）的频域相干光断层扫描（OCT）图像特征。方法回顾性病例系列研究。对29例（29只眼）急性CSC患者的临床资料进行回顾性分析。所有患者均应用频域OCT三维切面观察黄斑部视网膜显微结构变化，测量黄斑中心凹外核层厚度及光感受器细胞层内外节长度，分析其与最佳矫正logMAR视力的关系。CSC患者组与正常对照组间黄斑中心凹外核层厚度比较采用Mann—WhitneyU检验，CSC患者组光感受器细胞层规则和不规则眼与正常对照组间内外节长度比较采用Kruskal．WallisH检验，CSC患者光感受器细胞层内外节是否均匀与最佳矫正logMAR视力间的相关性采用Spearman相关分析法。结果29例（29只眼）患者均有黄斑部视网膜浆液性脱离，黄斑中心凹外核层形态无明显变化，厚度（96．94±23．72）μm，与正常对照组（104．15±11．90）μm比较，差异无统计学意义（U=43．61，P=0．33）。光感受器细胞全层厚度均匀一致者11只眼（31．9％），光感受器细胞全层厚度均匀一致伴内外节缺损者6只眼（20．7％），内外节厚薄不均者4只眼（13．8％），内外节明显凸起增厚者6只眼（20．7％），内节与外节剥离者2只眼（6．9％）；但CSC患者组光感受器细胞层规则和不规则眼与正常对照组间内外节长度差异无统计学意义（X。=5．483，P=0．06），可能与观察样本量较少有关。有86．2％的CSC患眼出现视网膜素色上皮（RPE）异常，包括RPE脱离21只眼（72．4％），RPE不规则凸起10只眼（34．5％），RPE层颗粒状沉积6只眼（20．7％），RPE缺损3只眼（10．3％）。5例同时行荧光素眼底血管造影检查，有3例荧光素渗漏点在RPE凸起部。患者光感受器细胞层内外节是否均匀与最佳矫正logMAR视力显著相关（r=0．382，P=0．026），与病程无显著相关性（r=0．294，P=0．057） 展开更多
关键词 体层摄影术 光学相干 中心性浆液性脉络膜视网膜病变 光感受器 色素上皮 眼
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苏拉明对体外培养视网膜色素上皮细胞增殖的影响 被引量：13
6
作者 康军 惠延年 +1 位作者 崔志利 韩泉洪 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第7期641-643,共3页
目的　研究苏拉明 (suramin)对培养人视网膜色素上皮细胞 (retinal pigm ent epithelium,RPE)增殖的影响 .方法　将不同质量浓度的苏拉明 (1.5 ,15和 15 0 mg· L- 1 )加入RPE细胞培养液 ,采用四甲基偶氮唑盐 (tetrazolium,MTT)比色... 目的　研究苏拉明 (suramin)对培养人视网膜色素上皮细胞 (retinal pigm ent epithelium,RPE)增殖的影响 .方法　将不同质量浓度的苏拉明 (1.5 ,15和 15 0 mg· L- 1 )加入RPE细胞培养液 ,采用四甲基偶氮唑盐 (tetrazolium,MTT)比色法 ,细胞分裂指数计数和核仁组成区嗜银染色(Ag NORs)检测苏拉明对 RPE增殖活力的影响 .结果　含有10 0 m L· L- 1小牛血清的培养液可以显著刺激 RPE的增殖(P<0 .0 1) ,无血清组 A值为 0 .19± 0 .0 1、含血清组 A值为0 .30± 0 .0 1;苏拉明抑制了 10 0 m L· L- 1血清条件下 RPE的增殖 ,呈剂量依赖性 ,最大抑制率达 5 1% ,3种浓度组 A值分别为 0 .2 9± 0 .0 1,0 .2 4± 0 .0 1和 0 .14± 0 .0 1,对细胞的形态无明显影响 .结论　苏拉明对血清刺激 展开更多
关键词 色素上皮 眼 细胞培养 养殖 苏拉明 四甲基偶氮唑盐比色法 细胞分裂指数 AgNORs染色
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碱性成纤维细胞生长因子对可见光诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响 被引量：7
7
作者 周咏东 严密 张军军 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2003年第1期24-28,共5页
目的　观察外源性碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor,b FGF)对可见光诱导培养的人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响。　方法　以 (2 0 0 0±5 0 0 ) lx白色荧光灯照射培养的人... 目的　观察外源性碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor,b FGF)对可见光诱导培养的人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响。　方法　以 (2 0 0 0±5 0 0 ) lx白色荧光灯照射培养的人 RPE细胞 ,利用荧光素标记的连接素 V/碘化丙锭 (annexin V- fluores-cein isothiocyanate/ propidium iodium,Annexin V- FITC/ PI)双染色流式细胞测定、细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应 (reverse transcriptional polymerase chain reaction,RT- PCR)、酶联免疫测定等方法 ,检测加入不同浓度的 b FGF后 ,培养的 RPE细胞的凋亡及细胞内 b FGF、成纤维细胞生长因子受体 1(fibrob-last growth factor receptor1,FGFR1)、B细胞淋巴瘤 /白血病 - 2 (B- cell lymphom a/ leukemia- 2 ,bcl- 2 )基因及半胱天冬酶 - 3(caspase- 3)的变化。　结果　 (1)分别加入外源性 b FGF10、2 0 ng/ ml时 ,RPE细胞凋亡比单纯光照组明显减少 (P<0 .0 5 ) ;(2 )加入 b FGF 10 ng/ ml组的 bcl- 2蛋白表达比单纯光照组明显增加(P<0 .0 1) ,而与无光照组之间差异无显著性意义 (P>0 .0 5 ) ;(3)光照后 bcl- 2 m RNA表达比无光照组下降 ,但随着加入 b FGF浓度的增高 ,bcl- 2 m 展开更多
关键词 视网膜 色素上皮 细胞凋亡 外源性碱性成纤维细胞生长因子 CASPASE类
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舒拉明对碱性成纤维细胞生长因子促进人视网膜色素上皮细胞增殖作用拮抗效应的研究 被引量：7
8
作者 朱晓波 唐仕波 +1 位作者 罗燕 黄祥坤 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期110-113,共4页
目的探讨舒拉明抗增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的作用及机制。方法采用体外培养的人眼视网膜色素上皮(RPE)细胞,总共10组。其中5个对照组的培养基中分别加入终浓度为1、10、100、500ng/ml的bFGF和3125μg/ml的舒拉明。实验组4组,培养基... 目的探讨舒拉明抗增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的作用及机制。方法采用体外培养的人眼视网膜色素上皮(RPE)细胞,总共10组。其中5个对照组的培养基中分别加入终浓度为1、10、100、500ng/ml的bFGF和3125μg/ml的舒拉明。实验组4组,培养基中除加入3125μg/ml的舒拉明外,还分别加入终浓度为1、10、100和500ng/ml的bFGF。另设1组空白组。培养48h后,采用MTT法,酶联免疫检测仪测定各孔吸光度(A)值,计算细胞的增殖率。采用析因分析比较bFGF和舒拉明的交互效应和单独效应。结果各组细胞生长无明显的形态学差异。舒拉明与bFGF存在拮抗性交互效应(F=673,P<001)。对照组比较空白组,全部bFGF组A值都增加,最大A值为bFGF的10ng/ml浓度组;舒拉明组则降低;实验组中,各组A值较bFGF对照组都下降,最大A值左移对应bFGF的100ng/ml浓度组。结论舒拉明能够拮抗bFGF促RPE细胞增殖的作用,其抑制RPE细胞增殖并进一步防治PVR的机制至少包括拮抗了生长因子的生物学效应。 展开更多
关键词 舒拉明 碱性成纤维细胞生长因子 视网膜色素上皮细胞 增殖作用 拮抗效应 增生性玻璃体视网膜病变
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衰老与年龄相关性黄斑变性 被引量：10
9
作者 何世坤 姜岩 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期278-282,共5页
衰老是导致眼部生物学改变的常见原因,特别对视网膜组织的影响更明显。已往的研究发现,年龄相关性黄斑变性(AMD)的病理改变主要表现为视网膜色素上皮的Bruch膜和脉络膜毛细血管复合体的变化,该复合体随着年龄的增加其功能和结构亦发生... 衰老是导致眼部生物学改变的常见原因,特别对视网膜组织的影响更明显。已往的研究发现,年龄相关性黄斑变性(AMD)的病理改变主要表现为视网膜色素上皮的Bruch膜和脉络膜毛细血管复合体的变化,该复合体随着年龄的增加其功能和结构亦发生异常改变。衰老因素在AMD早期阶段的病理改变中起重要作用,但衰老因素并不是导致AMD的直接原因,有多种因素涉及AMD的病理始动过程。为此,该文作者就新近有关衰老因素对AMD发生过程的影响进行了简要综述,旨在探讨衰老与AMD的关系。(中华眼科杂志,2006,42:278-282) 展开更多
关键词 衰老 色素上皮 眼 黄斑变性
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转化生长因子β_2对培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成增殖的影响 被引量：9
10
作者 徐国兴 《眼科》 CAS 2003年第1期44-46,共3页
目的 :研究转化生长因子 β2 (TGF β2 )对培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖的作用。方法 :取眼库眼球游离其视网膜色素上皮细胞 ,用DMEM加 10 %血清及MEM氨基酸和庆大霉素 ,进行细胞传代培养。用溶血磷脂酸(LPA)、转化生长因子... 目的 :研究转化生长因子 β2 (TGF β2 )对培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖的作用。方法 :取眼库眼球游离其视网膜色素上皮细胞 ,用DMEM加 10 %血清及MEM氨基酸和庆大霉素 ,进行细胞传代培养。用溶血磷脂酸(LPA)、转化生长因子 β2 (TGF β2 )及TGF β2 +LPA进行视网膜色素上皮细胞增殖试验 ,用细胞染色法进行细胞计数 ,提取视网膜色素上皮细胞DNA ,用分光光度计进行DNA定量测定。结果 :含有或缺乏 1%小牛血清的两种LPA(10 μM )均明显刺激视网膜色素上皮细胞增殖 ,但这种细胞的增殖被 2nG/ml的转化生长因子 - β2 所阻滞。结论 :转化生长因子 β2 能阻滞体外培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖 ,TGF β2 在增殖性玻璃体视膜病变及RPE细胞中的确切作用 ,仍需进一步研究。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 色素上皮 眼 DNA 增殖性玻璃体视网膜病变
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特发性脉络膜新生血管采用光动力疗法后视网膜色素上皮损伤的研究 被引量：11
11
作者 黎晓新 赵明威 曲进锋 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期206-211,共6页
目的探讨特发性脉络膜新生血管（CNV）采用光动力疗法（PDT）后视网膜色素上皮（RPE）损伤的原因。方法对43例（45只眼）接受PDT治疗的特发性CNV患者资料进行回顾性分析，以25例（27只眼）CNV膜大小接近的病理性近视合并CNV患者作为对... 目的探讨特发性脉络膜新生血管（CNV）采用光动力疗法（PDT）后视网膜色素上皮（RPE）损伤的原因。方法对43例（45只眼）接受PDT治疗的特发性CNV患者资料进行回顾性分析，以25例（27只眼）CNV膜大小接近的病理性近视合并CNV患者作为对照。分析治疗后4周的荧光素眼底血管造影图像，判断病灶周围色素上皮的透见荧光情况，探讨治疗后8-12周CNV患者的复发原因。结果特发性CNV患者经初次治疗后，PDT光照区内有21只眼的RPE发生改变，二次治疗后又增加了1只眼，RPE改变的发生率约为48．9％，而病理性近视组仅2只眼经PDT治疗后RPE发生改变。随访期内4例特发性CNV患者经PDT治疗后CNV明显扩大。两组CNV患者男女比例基本相同，其男女RPE改变的发生率差异也无统计学意义（P〉0．05）。与病理性近视的CNV患者相比，特发性CNV患者的发病年龄较轻，而病理性近视的CNV患者经治疗后出现RPE改变的2例患者中，1例为37岁，1例为15岁。结论特发性CNV患者经PDT治疗后病灶周围出现RPE损伤，提示年轻患者易出现治疗后的过度反应。 展开更多
关键词 脉络膜新生血管化 光化学疗法 色素上皮 眼
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中心性浆液性脉络膜视网膜病变神经上皮脱离区的频域光相干断层扫描观察 被引量：11
12
作者 周才喜 杨荣 +1 位作者 刘志强 李瑞峰 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期169-171,共3页
目的观察中心性浆液性脉络膜视网膜病变（CSC）神经上皮脱离区在频域光相干断层扫描（FD-OCT）的图像特征。方法对采用国际标准视力表、裂隙灯显微镜、直接或间接检眼镜、荧光素眼底血管造影（FFA）和吲哚青绿血管造影（ICGA）检查确诊... 目的观察中心性浆液性脉络膜视网膜病变（CSC）神经上皮脱离区在频域光相干断层扫描（FD-OCT）的图像特征。方法对采用国际标准视力表、裂隙灯显微镜、直接或间接检眼镜、荧光素眼底血管造影（FFA）和吲哚青绿血管造影（ICGA）检查确诊的黄斑部有神经上皮浆液性脱离的CSC患者88例92只眼进行FD-OCT检查。采用二极管反射的红外光对眼底黄斑中心部进行线性水平扫描，扫描深度2mm，扫描面积6mm×6mrn，轴向分别率5μm，横向分辨率18μm，扫描模式512×128。对比分析患者的FFA、ICGA检查资料，重点观察神经上皮脱离区域的FD-OCT图像特征。结果所有患眼均有神经上皮的隆起与视网膜色素上皮（RPE）光带分离及脱离区内RPE光带的异常改变。其中，色素上皮脱离（PED）83只眼，占90．22％；RPE有结节状突起改变68只眼，占73．91％；PED灶有RPE局部缺损5只眼，占5．43％。神经上皮脱离腔内有细小尘状反光点36只眼，占39．14％。其中簇状分布17只眼（17．61％），柱状8只眼（8．69％），环形6只眼（6．52％），团块状5只眼（5．43％）。神经上皮脱离区内有较多颗粒状强反光物质59只眼，占64．14％。结论CSC的FD-OCT特征为RPE的光带分离及脱离区的RPE光带异常。FD-OCT能准确地发现CSC神经上皮脱离区内视网膜组织的各种细微形态学改变。 展开更多
关键词 脉络膜视网膜炎/诊断 体层摄影术 光学相干 荧光素血管造影术 色素上皮 眼 诊断显像
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视网膜色素变性的吲哚青绿血管造影特征 被引量：8
13
作者 赵朝霞 郭希让 李蕴随 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2001年第1期26-29,共4页
目的　研究视网膜色素变性 (retinitis pigmentosa,RP)的脉络膜血液循环特征。　方法　对37例 RP患者行吲哚青绿血管造影 (indocyanine green angiography,ICGA) ,并与正常人眼对照。　结果　1RP组眼底荧光最早出现的平均时间 (14.38... 目的　研究视网膜色素变性 (retinitis pigmentosa,RP)的脉络膜血液循环特征。　方法　对37例 RP患者行吲哚青绿血管造影 (indocyanine green angiography,ICGA) ,并与正常人眼对照。　结果　1RP组眼底荧光最早出现的平均时间 (14.38± 3.95 ) s,脉络膜静脉荧光开始充盈的平均时间 (17.2 7±5 .94) s,与对照组比较差异无显著性的意义 (P >0 .0 5 )。 2 RP组脉络膜血管荧光减弱的平均时间(4 75 .75± 15 3.70 ) s,较对照组明显缩短 (P<0 .0 0 0 1)。 3RP组眼底后部强荧光区的平均面积 (4 1.2 0±19.99) mm2 ,较对照组明显缩小 (P<0 .0 0 0 1)。 4ICGA中后期 RP组纱幕状荧光缺如 6 1只眼 ,占 84.7% ;斑状强荧光 2 1只眼占 2 9.2 % ,4只眼强荧光点渗漏 ,占 5 .6 %。　结论　 1RP脉络膜血管灌注压无改变 ;2RP脉络膜血流量减少 ;3RP脉络膜毛细血管萎缩 ; 展开更多
关键词 眼色素上皮 视网膜色素变性 脉络膜血液循环 吲哚花青绿 血管造影
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短发夹RNA对人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子表达的抑制 被引量：6
14
作者 蔡春梅 孙葆忱 刘旭阳 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期334-337,共4页
目的探讨针对人血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹RNA(shRNA)在体外对视网膜色素上皮(RPE)细胞VEGF表达的影响。方法用酶辅助显微分离法分离人RPE细胞,并用细胞角蛋白和S-100进行免疫组化鉴定。设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,P1,P2),P... 目的探讨针对人血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹RNA(shRNA)在体外对视网膜色素上皮(RPE)细胞VEGF表达的影响。方法用酶辅助显微分离法分离人RPE细胞,并用细胞角蛋白和S-100进行免疫组化鉴定。设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,P1,P2),P3为阴性对照即不含特异性shRNA,P1、P2退火后双链DNA连接到质粒pSilencer4.1-CMV的BamHⅠ和H indⅢ双酶切位点。转化细菌后,提取的质粒用EcoRⅠ和SamⅠ进行酶切鉴定。实验分5组,第1组:RPE细胞中在含有100μmol/L CoC l2,10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中培养30 h;第2组:在常规含有10%FBS的DMEM培养基中培养30 h;第3、4、5组:分别P1、P2、P3转染细胞24 h后在含有100μmol/L CoC l2的10%FBS的DMEM培养基中培养30 h;用免疫印迹法检测各组细胞VEGF表达水平。结果培养的细胞用细胞角蛋白和S-100免疫组化染色阳性。提取的质粒经酶切后片断相对分子质量分别为3300和1600,说明质粒成功地提取和纯化。VEGF表达水平1组明显高于2、3、4组(均P<0.001)。乏氧(2组与1组比)可以明显增加RPE细胞中VEGF的表达。3、4组(P1和P2)对VEGF表达抑制分别为65.9%和52.4%。5组与1组比差异无统计学意义(P=0.147)。各组间β肌动蛋白表达量差异无统计学意义。结论针对人VEGF的特异性shRNA可以明显降低人RPE细胞VEGF的表达,为RNA干扰治疗新生血管性眼病,尤其是脉络膜新生血管奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 血管内皮生长因子A 色素上皮细胞 视网膜
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表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子对人视网膜色素上皮细胞DNA合成的影响 被引量：10
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作者 陈明 吴景天 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期98-100,共3页
目的探索表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对培养的人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅ... 目的探索表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对培养的人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞促进ＤＮＡ合成的最佳刺激浓度，并对两种因子的协同作用进行探讨。方法培养的人ＲＰＥ细胞第６代用于本实验。应用氚标胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ，３Ｈ－ＴｄＲ）掺入试验及放射自显影检测ＥＧＦ、ｂＦＧＦ对ＲＰＥ细胞的促ＤＮＡ合成作用。结果ＥＧＦ、ｂＦＧＦ均可引起剂量依赖的促有丝分裂作用。在含２％血清的培养液中，ＥＧＦ、ｂＦＧＦ作用最佳浓度为１ｎｇ／ｍｌ，明显低于无血清培养液中ＥＧＦ、ｂＦＧＦ作用的最佳浓度（１０ｎｇ／ｍｌ）。联合应用１０ｎｇ／ｍｌＥＧＦ、１０ｎｇ／ｍｌｂＦＧＦ约提高ＲＰＥ细胞合成ＤＮＡ能力２．９６倍。结论ＥＧＦ、ｂＦＧＦ对培养的人ＲＰＥ细胞具有促进ＤＮＡ合成作用，且两者可产生协同效应。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮 表皮生长因子 DNA合成 BFGF
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肝细胞生长因子对培养的视网膜色素上皮细胞移行及增生的作用 被引量：5
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作者 黄玲 惠延年 +1 位作者 韩泉洪 马吉献 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2001年第4期307-310,共4页
目的　研究肝细胞生长因子 (hepatocyte growth factor,HGF)对视网膜色素上皮 (retinalpigment epitheliaum,RPE)细胞的促增生和促移行作用。　方法　在无血清培养液培养的人 RPE细胞中分别加入 1、2、10、5 0、10 0 μg/ L 不同浓度的 ... 目的　研究肝细胞生长因子 (hepatocyte growth factor,HGF)对视网膜色素上皮 (retinalpigment epitheliaum,RPE)细胞的促增生和促移行作用。　方法　在无血清培养液培养的人 RPE细胞中分别加入 1、2、10、5 0、10 0 μg/ L 不同浓度的 HGF,四唑盐比色法 (methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测定促细胞增生情况 ;采用 RPE细胞损伤愈合模型 ,在无血清培养液中分别加入 1、2、10、5 0、10 0μg/ L不同浓度的 HGF,培养 2 0 h后计数进入刮痕区的细胞 ,观察 HGF对 RPE细胞移行的作用。结果　 HGF浓度处于10～ 10 0 μg/ L 时对 RPE细胞具有促增生作用 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,增生率为 18.2 %～ 34 .8% ,其中浓度为 5 0 μg/ L 作用 3d达到最大促增生效果 (P<0 .0 1) ,增生率为 32 .8% ;HGF可明显促进 RPE细胞移行 ,促移行能力分别为 113.0 % (10μg/ L ) ,91.7% (5 0μg/ L )和 5 0 .3% (10 0μg/ L )。浓度自 2μg/ L开始出现促细胞移行作用 (P<0 .0 5 ) ,促移行能力为 9.3%。结论　 HGF可促进 RPE细胞增生和移行 ,是RPE细胞的有丝分裂原和强力的促移行因子。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 视网眼色素上皮 细胞培养 细胞增生 细胞移行
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50岁以上患者视网膜色素上皮脱离的眼底特征分析 被引量：8
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作者 孙祖华 文峰 +5 位作者 陈艳丽 吴德正 黄时洲 罗光伟 关天芹 刘彩娇 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期224-227,共4页
目的探讨50岁以上患者视网膜色素上皮脱离(PED)的眼底改变特征。方法回顾分析2001年10月至2004年8月经荧光素眼底血管造影(FFA)确诊为PED的31例(34只眼)50岁以上连续性病例,眼底改变的特征,患者均进行眼底彩色照相、FFA及吲哚青绿血管造... 目的探讨50岁以上患者视网膜色素上皮脱离(PED)的眼底改变特征。方法回顾分析2001年10月至2004年8月经荧光素眼底血管造影(FFA)确诊为PED的31例(34只眼)50岁以上连续性病例,眼底改变的特征,患者均进行眼底彩色照相、FFA及吲哚青绿血管造影(ICGA)检查。结果31例34只PED患眼中,FFA显示浆液性PED18只眼,占52.9%,血液性PED8只眼,占23.5%,浆液血液性PED8只眼,占23.5%。ICGA结果显示,12只眼(35.3%)伴发脉络膜新生血管(CNV),17只眼(50.0%)伴发息肉状脉络膜血管病变(PCV),1只眼(2.9%)同时伴发CNV及PCV,4只眼(11.8%)不伴有脉络膜血管性病变。结论50岁以上患者PED可发生于CNV、PCV及无脉络膜血管性病变患眼,其中PCV患眼最常见。 展开更多
关键词 视网膜脱离 色素上皮 眼 荧光素血管造影术 吲哚花青绿
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可见光对培养的人视网膜色素上皮细胞内碱性成纤维细胞生长因子、成纤维细胞生长因子受体1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因及caspase-3的影响 被引量：7
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作者 周咏东 严密 张军军 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期655-659,共5页
目的　观察可见光诱导的培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中 ,RPE细胞内碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)、B细胞淋巴瘤 /白血病 2基因(bcl 2 )及caspase 3的表达变化。方法　建立可见光诱导培养的人... 目的　观察可见光诱导的培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中 ,RPE细胞内碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)、B细胞淋巴瘤 /白血病 2基因(bcl 2 )及caspase 3的表达变化。方法　建立可见光诱导培养的人RPE细胞凋亡的模型 ,通过细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、酶联免疫测定等方法 ,对培养的人RPE细胞内bFGF和其受体FGFR1的mRNA表达变化、Bcl 2表达改变以及caspase 3的活性变化进行了检测。 结果(1)光照后 6及 12h ,培养的人RPE细胞胞质内Bcl 2蛋白的表达有一定的下降趋势 ,但与无光照组之间差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。光照后 2 4h ,Bcl 2蛋白表达下降明显 (P <0 0 1)。bcl 2mRNA表达与上述蛋白表达变化相似 ,但早在光照 12h后已能检测到其表达下降。 (2 )光照后 6hbFGF及FGFR1的表达尚无明显改变 (P >0 0 5 ) ,随着时间延长 ,其表达增加的差异具有显著意义(P <0 0 5 )。(3)光照后caspase 3活性随时间延长而明显增加 ,与未光照时比较 ,光照结束后 6、12及2 4h活性差异有显著意义 (P <0 0 5 )。 12和 2 4h间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　可见光照诱导培养的人RPE细胞凋亡时 ,RPE细胞内bcl 2表达下降 ,内源性bFGF及FGFR1上调 ,caspase 3? 展开更多
关键词 可见光 培养人视网膜色素上皮 细胞凋亡 bFGF FGFR1 B细胞淋巴瘤 白血病-2基因 CASPASE-3
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结晶样视网膜色素变性患者血脂浓度的变化 被引量：8
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作者 李孟达 殷晓贝 +2 位作者 何婷 孙晓伟 李根林 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期47-50,共4页
背景 结晶样视网膜色素变性（BCD）为一种先天性遗传性眼病,已有研究认为其与血清中脂肪酸代谢异常有关,但目前鲜见关于BCD与血清中脂质水平变化关系的报道. 目的 分析BCD患者血清脂质浓度的变化情况.方法 采用前瞻性研究设计,本研究经... 背景 结晶样视网膜色素变性（BCD）为一种先天性遗传性眼病,已有研究认为其与血清中脂肪酸代谢异常有关,但目前鲜见关于BCD与血清中脂质水平变化关系的报道. 目的 分析BCD患者血清脂质浓度的变化情况.方法 采用前瞻性研究设计,本研究经过北京同仁医院伦理委员会批准,受检者受检前均签署知情同意书.纳入2011年11月至2013年3月于北京同仁医院眼科就诊的双眼BCD患者50例及同期进行健康体检、年龄和性别匹配的健康体检者50人,采集受检者外周静脉血3 ml,由检验科专业人员检测受检者血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）浓度,结果的判定参照《中国成人血脂异常防治指南》（2007版）中成年人的正常值标准,并将BCD患者组检测结果与正常对照组进行比较.结果 50例BCD患者中血脂水平异常者占58.00％（29/50）,其中高TG血症者占34.48％ （10/29）;高TC血症者占34.48％ （10/29）;混合型高脂血症者占27.59％（8/29）.BCD患者血清TG、TC、LDL-C浓度分别为（1.63±1.19）、（5.10±1.05）、（3.27±0.97） mmol/L,明显高于正常对照组的（0.93±0.33）、（4.33±0.56）、（2.63±0.51） mmol/L,差异均有统计学意义（t=4.036、4.496、4.095,均P=0.000）. 结论 血脂异常可能与BCD发病有关. 展开更多
关键词 脉络膜疾病/遗传性 眼底 人 眼色素上皮 视网膜变性/先天性 血脂 结晶样视网膜色素变性
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联合共培养系统诱导骨髓间充质干细胞分化为视网膜色素上皮样细胞 被引量：7
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作者 郑学栋 徐国兴 +1 位作者 侯泽江 陈金国 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS 2011年第2期88-93,共6页
目的 探讨添加脑源性神经生长因子（BDNF）、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的培养基联合人类视网膜色素上皮细胞（HRPECs）共培养对骨髓间充质干细胞（BMSCs）定向诱导分化的影响.方法 实验研究.实验分三组：HRP... 目的 探讨添加脑源性神经生长因子（BDNF）、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的培养基联合人类视网膜色素上皮细胞（HRPECs）共培养对骨髓间充质干细胞（BMSCs）定向诱导分化的影响.方法 实验研究.实验分三组：HRPECs＋BDNF、EGF、bFGF＋BMSCs共培养组、BDNF、EGF、bFGF＋BMSCs共培养组和对照组（单独BMSCs）.第一组取第3代HRPECs接种在双层培养板的上层,将第3代人BMSCs接种于下层培养板中,在双层六孔板的每孔中加入混合有20 ng/mlbFGF、20 ng/ml EGF、20 ng/ml BDNF及10%胎牛血清（FBS）的DMEM-LG培养液（需做免疫细胞化学染色应同时在下层放入18 mm×18 mm盖玻片进行细胞爬片）.第二组取第3代人BMSCs接种在六孔培养板中,每孔中加入含20 ng/ml bFGF、20 ng/ml EGF、20 ng/ml BDNF及10%FBS的DMEM-LG培养液.第三组将第3代人BMSCs接种于六孔培养板中,加入10%FBS的DMEM-LG培养液.在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化.2周后停止培养,采用免疫细胞化学染色法和RT-PCR检测角蛋白18、RPE65蛋白存诱导细胞中的表达.数据采用Holm-Sidak法进行分析.结果 诱导2周后,第一组BMSCs细胞呈圆形、类圆形、不规则形、短棒状外观,细胞内有色素颗粒形成,其他两组没有类似改变.三组间免疫细胞化学染色法检测RPE65蛋白、角蛋白18,光密度值结果显示第一组和第二组间、第一组和第三组间差异有统计学意义（RPE65：t=37.416、36.236,P＜0.05;角蛋白18：t=38.611、37.532,P＜0.05）.而第二组和第三组间差异没有统计学意义（RPE65：t=1.180,P＞0.05;角蛋白18：t=1.079,P＞0.05）.RT-PCR检测相对mRNA表达量,结果显示第一组和第二组间、第一组和第三组间差异有统计学意义（RPE65/β-actin：t=176.110、174.820,P＜0.05;角蛋白18/β-actin：t=243.230、241.560,P＜0.05）.而第二组和第三组间差异无统计学意义（RPE65/β-actin：t=1.283.P＞0.05;角� 展开更多
关键词 间质干细胞 骨髓 色素上皮 眼 细胞分化 细胞培养技术
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