β-榄香烯乳联合照射对DNA-PKcs基因表达及凋亡的影响 被引量：15

1

作者 张卓 邹丽娟 田莹莹 《实用癌症杂志》 2009年第6期555-559,共5页

目的探讨β-榄香烯乳影响肺腺癌A549细胞凋亡及DNA-PKcs基因表达的放射增敏机制。方法实验分为对照组、单纯照射组(4Gy照射)、单纯药物组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳)、药物+照射组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳+4Gy照射)。采用... 目的探讨β-榄香烯乳影响肺腺癌A549细胞凋亡及DNA-PKcs基因表达的放射增敏机制。方法实验分为对照组、单纯照射组(4Gy照射)、单纯药物组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳)、药物+照射组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳+4Gy照射)。采用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测β-榄香烯乳对肺腺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50);克隆形成实验计算细胞存活率;采用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡率;逆转录实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测细胞DNA-PKcs基因mRNA表达量。结果MTT法测得β-榄香烯乳对A549细胞的IC50值为120μg/ml;克隆形成实验证明β-榄香烯乳对A549细胞有放射增敏作用;药物+照射组细胞G2/M期比率及凋亡率明显高于单纯照射组及单纯用药组(P<0.05);药物+照射组DNA-PKcs基因mRNA表达量与单纯照射及单纯用药组相比明显下降(P<0.05)。结论β-榄香烯乳可通过促进A549细胞凋亡及抑制DNA-PKcs基因mRNA表达实现对A549细胞放射增敏作用。 展开更多

关键词 β-榄香烯乳 肺腺癌A549细胞 DNA—PKcs 凋亡 放射增敏

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四嗪二甲酰胺对肺癌细胞株A549的体内外作用 被引量：13

2

作者 周永列 胡惟孝 +5 位作者 吕亚萍 邱莲女 王文松 杨忠愚 刘建栋 饶国武 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期26-34,共9页

为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制,将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法,观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作... 为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制,将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法,观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作用;用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、AnnexinV/PI双标记、Hoechst33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。腹腔注射ZGDHu-1后观察其对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。用RT-PCR和流式细胞术观察A549细胞bcl-2,bax,p53基因和蛋白质的表达改变。结果表明,ZGDHu-1能抑制A549细胞的增殖和活力,呈现作用时间和剂量的依赖关系。A549细胞经ZGDHu-1作用后,大部分细胞阻滞于G2-M期;出现DNA片段化,亚G1峰显著增加,AnnexinV+/PI-表达升高,Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。ZGDHu-1以10,20及40mg.kg-1剂量给裸鼠体内用药14d后,移植瘤生长抑制率分别为43.7%,56.9%和60.0%。A549细胞经ZGDHu-1作用后,bcl-2基因和蛋白有所下调,但主要是上调bax基因和蛋白,导致bax/bcl-2比值明显增高,p53基因和蛋白表达也上调,均呈现剂量依赖性。ZGDHu-1在体内能明显抑制移植瘤的生长,体外通过诱导细胞凋亡抑制A549细胞增殖,其机制可能与上调bax和p53基因的表达有关。 展开更多

关键词 四嗪二甲酰胺 肺癌 细胞株A549 增殖 细胞凋亡 肿瘤移植

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榄香烯乳对肺腺癌A549细胞hnRNPA2/B1的mRNA及蛋白表达的影响 被引量：11

3

作者 周欣 李龙云 郭子建 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2004年第3期229-231,234,共4页

目的 :观察榄香烯乳对人肺腺癌细胞株A5 4 9细胞hnRNPA2 /B1mRNA及蛋白表达的影响。方法 :选用A5 4 9细胞株 ,应用MTT法检测细胞增殖 ,显微镜下观察细胞形态变化 ,逆转录—聚合酶链反应 (RT PCR)检测hnRNPA2 /B1mRNA表达 ,蛋白印迹法检... 目的 :观察榄香烯乳对人肺腺癌细胞株A5 4 9细胞hnRNPA2 /B1mRNA及蛋白表达的影响。方法 :选用A5 4 9细胞株 ,应用MTT法检测细胞增殖 ,显微镜下观察细胞形态变化 ,逆转录—聚合酶链反应 (RT PCR)检测hnRNPA2 /B1mRNA表达 ,蛋白印迹法检测hnRNPA2 /B1蛋白表达。结果 :榄香烯乳对A5 4 9细胞体外增殖有显著抑制作用 ,且呈时间和剂量依赖性 ,其IC50 值为 15 μg/ml,hnRNPA2 /B1mRNA及蛋白表达水平均有下降。 结论 :榄香烯乳可抑制肺腺癌A5 4 9细胞增殖 ,致其hnRNPA2 /B1的mRNA和蛋白表达水平均有下降。 展开更多

关键词 榄香烯乳 肺腺癌 A549细胞 HNRNP A2/B1 mRNA表达 蛋白表达 癌细胞

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重组人血管内皮抑制素注射液与多西紫杉醇不同顺序用药的抗肿瘤效应观察 被引量：13

4

作者 袁静 吴春娃 +2 位作者 刘竹君 魏熙胤 李凯 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期580-585,共6页

目的 观察重组人血管内皮抑制素注射液（商品名：恩度）与多西紫杉醇联合使用时不同给药顺序的抗肿瘤效应.方法 建立肺腺癌A549荷瘤裸鼠模型,随机分为3组,每组8只.（1）同时用药组：每只小鼠恩度400μg/d,第1～35天;多西紫杉醇10 mg/kg,... 目的 观察重组人血管内皮抑制素注射液（商品名：恩度）与多西紫杉醇联合使用时不同给药顺序的抗肿瘤效应.方法 建立肺腺癌A549荷瘤裸鼠模型,随机分为3组,每组8只.（1）同时用药组：每只小鼠恩度400μg/d,第1～35天;多西紫杉醇10 mg/kg,第1～19天,每3 d给药1次.（2）先恩度组：每只小鼠恩度400 μg/d,第1～35天;多西紫杉醇10 mg/kg,第16～34天,每3 d给药1次.（3）模型组：每只小鼠生理盐水100 μl/d,第1～35天;注射用水200 μl/d,第1～35天,每3 d注射1次.同时设立空白对照组（未荷瘤的正常裸鼠,8只）,注射方法同模型组.实验过程中测量各组裸鼠体重、移植瘤体积,并计算抑瘤率.实验结束后,采用流式细胞术检测裸鼠外周血循环内皮细胞（CECs）数,采用免疫组化法检测移植瘤组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9、MMP-2的抑制剂（TIMP-2）、MMP-9的抑制剂（TIMP-1）、细胞外MMP诱导因子（EMMPRIN）、α-平滑肌肌动蛋白（SMA）的表达情况,并计数微血管密度（MVD）.结果 同时用药组肿瘤体积增长为39.94 mm3,先恩度组肿瘤体积增长为（99.57±74.48）mm3,二者均明显小于模型组[（217.67±95.44）mm3,均P＜0.05].同时用药组、先恩度组、模型组和空白对照组裸小鼠外周血中CECs的数量分别为（25.86±11.77）个/104个细胞、（77.25±24.02）个/104个细胞、（14.71±11.07）个/104个细胞和（12.90±11.20）个/104个细胞,同时用药组、模型组和空白对照组均明显低于先恩度组（均P＜0.01）.同时用药组和先恩度组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9的表达均较模型组下调（均P＜0.05）,先恩度组移植瘤组织中TIMP-1和同时用药组TIMP-2的表达均较模型组上调（均P＜0.05）,同时用药组EMMPRIN的表达较模型组下调（P＜0.05）.同时用药组和先恩度组移植瘤组织的MVD及α-SMA的水平均低于模型组（均P＜0.05）.结论 同时用药组的抑瘤效果及小 展开更多

关键词 恩度 多西紫杉醇 给药顺序 循环内皮细胞 肺腺癌细胞系A549 裸鼠

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肺癌A549细胞上皮-间质转化及其对微小RNA表达的影响 被引量：13

5

作者 王海兵 张慧君 +3 位作者 苏晋梅 周文勇 王和勇 陈晓峰 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期590-593,共4页

目的探讨肺癌A549细胞上皮-间质转化（EMT）对微小RNA（miRNA）表达的影响。方法采用不同浓度的转化生长因子B1（TGF-131）诱导肺癌A549细胞发生EMT，应用相差显微镜观察A549细胞形态学变化，采用Westernblot法检测EMT相关标记蛋白表达... 目的探讨肺癌A549细胞上皮-间质转化（EMT）对微小RNA（miRNA）表达的影响。方法采用不同浓度的转化生长因子B1（TGF-131）诱导肺癌A549细胞发生EMT，应用相差显微镜观察A549细胞形态学变化，采用Westernblot法检测EMT相关标记蛋白表达的变化，应用miRNA芯片检测EMT前后miRNA表达的变化，应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCT）验证芯片结果的可靠性。结果肺癌A549细胞发生EMT后，细胞形态拉长，细胞间连接变得疏松。肺癌3．549细胞发生EMT后，上皮标记蛋白E-钙黏附素（E-cadherin）表达降低，而间质标记波形蛋白（Vimentin）和纤维连接蛋白（Fibronectin）表达上调。miRNA芯片获得51个miRNA在诱导前后有统计学意义（P〈0．05），且表达差异在2倍以上。18个表达上调，33个表达下调，其中mir-33a和mir-193a-3p的表达经诱导后分别下调了92．8％和86．5％；荧光定量RT-PCR检测mir-33a和mir-193a-3p的表达经诱导后分别下调了73．1％和56．6％。结论EMT可影响肺癌A549细胞中miRNA的表达变化，miRNA可能通过EMT调节肺癌侵袭转移。 展开更多

关键词 上皮-间质转化 微小RNA 肺癌A549细胞

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华蟾素对非小细胞肺癌细胞株A549细胞增殖及PTEN/AKT/mTOR信号通路表达的影响 被引量：10

6

作者 张生义 张己为 +3 位作者 张旭峰 张逸 许斌斌 左顺庆 《蚌埠医学院学报》 CAS 2020年第9期1159-1162,共4页

目的:观察华蟾素对肺癌细胞A549及PTEN/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的影响。方法:在培养肺癌细胞株NCI-A549中分别加入不同浓度的华蟾素,应用细胞计数试剂盒-8检测24、48、72 h后细胞增殖活力,Ki67及EdU检测72 h细胞增殖活力,免疫印迹法... 目的:观察华蟾素对肺癌细胞A549及PTEN/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的影响。方法:在培养肺癌细胞株NCI-A549中分别加入不同浓度的华蟾素,应用细胞计数试剂盒-8检测24、48、72 h后细胞增殖活力,Ki67及EdU检测72 h细胞增殖活力,免疫印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白以及磷酸化第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白的同源基因(phosphorylated-phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,p-PTEN)蛋白表达。结果:0.2μg/mL华蟾素作用于A549细胞株48 h后显示明显抑制增殖作用(P<0.01),0.8μg/mL华蟾素处理12 h后均具有不同程度抑制增殖作用(P<0.05~P<0.01)。不同浓度华蟾素作用于细胞72 h后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6、p-PTEN表达量均较对照组下降(P<0.05~P<0.01),而PI3K、AKT、mTOR、S6及PTEN表达量与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:华蟾素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白磷酸化,抑制肺癌细胞A549的增殖。 展开更多

关键词 肺肿瘤 华蟾素 肺癌细胞株A549 PTEN/AKT/mTOR信号通路 增殖

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microRNA启动子区甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移、侵袭的影响 被引量：5

7

作者 彭恒 董婧颖 +6 位作者 赵亚楠 吴文兵 杨晓龙 陈丹 胡开锋 陈利弘 刘戟 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期182-187,共6页

目的研究microRNA启动子区甲基化水平的变化对几种microRNAs(miRNA34a、miRNA34b、miRNA148a、miRNA203a)表达的影响,并进一步研究该甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移以及侵袭能力的影响。方法不同浓度的去甲基化药物5-氮杂-2′-... 目的研究microRNA启动子区甲基化水平的变化对几种microRNAs(miRNA34a、miRNA34b、miRNA148a、miRNA203a)表达的影响,并进一步研究该甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移以及侵袭能力的影响。方法不同浓度的去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理人肺癌细胞A549,分别作用24 h、48 h、72 h,采用CCK8法检测细胞增殖情况,计算增殖抑制率。20μmol/L 5-Aza-CdR处理A549细胞72 h,通过甲基化特异性PCR(MSP)检测A549细胞相关miRNAs启动子甲基化水平的变化;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测A549细胞相关miRNAs表达水平的变化。20μmol/L 5-Aza-CdR处理A549细胞0 h、24 h、48 h,采用划痕实验检测细胞迁移能力(计算细胞在24 h和48 h的划痕愈合率);作用48 h,采用Transwell检测细胞侵袭能力。结果 CCK8结果显示,随着5-Aza-CdR的处理浓度升高、时间延长,A549细胞的增殖抑制率逐渐增加。经5-Aza-CdR去甲基化处理后,MSP结果表明,实验组相对于对照组甲基化引物扩增条带减弱,而非甲基化引物扩增条带增强;Real-time PCR结果显示,相关miRNAs表达水平升高(P<0.05)。由划痕实验和Transwell检测结果揭示,经5-Aza-CdR处理后,A549细胞的生长愈合能力降低(P<0.05),并且侵袭到Transwell小室滤膜下表面的细胞数亦减少(P<0.05)。结论人肺癌细胞A549经5-Aza-CdR去甲基化处理后,miRNAs表达水平升高,进一步抑制肺癌细胞的增殖、迁移以及侵袭能力。 展开更多

关键词 肺癌A549细胞株 MICRORNA 甲基化 增殖 迁移 侵袭

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肺岩宁方介导Atg5对肺癌A549细胞自噬调控抗肺癌侵袭转移的实验研究

8

作者 马玥 徐振晔 +3 位作者 王立芳 郑展 邓海滨 张琦君 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第4期1230-1238,共9页

目的探讨肺岩宁方(Feiyan Ning Decoction,FYN)通过介导Atg5(自噬相关靶向基因5,Autophagy-related gene 5)自噬相关基因调控人肺腺癌A549细胞自噬,及其对A549肺癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用的影响。方法肺岩宁方干预培养肺癌A549细胞... 目的探讨肺岩宁方(Feiyan Ning Decoction,FYN)通过介导Atg5(自噬相关靶向基因5,Autophagy-related gene 5)自噬相关基因调控人肺腺癌A549细胞自噬,及其对A549肺癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用的影响。方法肺岩宁方干预培养肺癌A549细胞,通过运用CCK-8(Cell Counting kit-8)细胞增殖实验检测肺岩宁方对细胞增殖抑制率的影响,显微镜下观察肺岩宁方作用后的细胞形态学改变;采用划痕实验检测肺岩宁方及自噬抑制剂氯喹(Chloroquine diphosphate salt,CQ)对肺癌A549细胞迁移能力;运用Transwell细胞侵袭实验检测肺岩宁方及氯喹对肺癌A549细胞侵袭能力;运用Western Blot检测自噬相关蛋白Atg5、LC3表达情况;运用透射电子显微镜观察肺癌A549细胞在肺岩宁方干预下的自噬结构形态改变情况。结果CCK8检测试验结果:肺岩宁方能有效抑制A549细胞增值活力(P<0.01),其优化浓度为200μg mL-1;划痕实验结果:与对照组比,肺岩宁方干预A549细胞迁移能力减弱(P<0.05),A549细胞在FYN联合CQ的作用下迁移能力明显减弱(P<0.01);Transwell实验结果:与对照组比较,肺岩宁方抑制细胞侵袭转移能力(P<0.05),FYN联合CQ细胞侵袭力明显抑制(P<0.05);Western Blot实验结果:肺岩宁方下调自噬相关蛋白Atg5、LC3表达能力(P<0.01);透射电子显微镜观察结果:肺岩宁方抑制自噬结构的出现。结论肺岩宁方介导Atg5自噬相关基因,具有调控人肺腺癌A549细胞自噬能力,可抑制A549细胞增殖活力、迁移能力、侵袭转移水平。 展开更多

关键词 肺岩宁方 肺癌 肺癌A549细胞 细胞自噬 增殖 侵袭转移

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miR23a促进肺癌细胞株A549细胞凋亡蛋白Caspase-3表达的分子机制 被引量：4

9

作者 王俭 韩忠学 +1 位作者 刘静 巩静 《解剖学研究》 CAS 2018年第6期494-497,共4页

目的研究miR23a通过JNK信号通路促进肺癌细胞株A549细胞凋亡蛋白Caspase-3表达的分子机制。方法利用脂质体转染试剂Lipo2000将mi23a转染到肺癌A549细胞,实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法检测阴性对照(NC)组和转染mi23a组细胞中m... 目的研究miR23a通过JNK信号通路促进肺癌细胞株A549细胞凋亡蛋白Caspase-3表达的分子机制。方法利用脂质体转染试剂Lipo2000将mi23a转染到肺癌A549细胞,实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法检测阴性对照(NC)组和转染mi23a组细胞中miR23a的表达;划痕实验检测肺癌细胞株A549的迁移能力;Western blotting法检测JNK通路中p-JNK水平的变化;RT-PCR法和Western blotting检测肺癌细胞株A549转染miR23a后细胞凋亡蛋白Caspase-3的mRNA和蛋白质水平的表达。结果 Real-time PCR结果显示,转染miR23a组其miR23a表达水平显著高于阴性对照(NC)组(P<0.05),A549细胞转染miR23a后,细胞增殖和扩散能力均显著降低(P<0.05);Western blotting结果显示,转染miR23a组中p-JNK和Caspase-3的水平均有明显升高(P<0.05)。结论 miR23a可通过活化JNK信号通路,进而促进肺癌A549细胞中细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达,从而抑制其肿瘤细胞的增殖和扩散能力。 展开更多

关键词 肺癌细胞株A549 miR23a JNK通路 细胞凋亡 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶

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亚麻木酚素对肺癌A549细胞的抑制作用及其机制 被引量：4

10

作者 李先伟 唐丽娟 杨解人 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期550-554,共5页

目的观察亚麻木酚素(SDG)对肺癌A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的SDG(5、10、20、40μmol/L),MTT观察细胞增殖情况;Transwell小室评价细胞侵袭能力;Hochest染色观察细胞凋亡情况... 目的观察亚麻木酚素(SDG)对肺癌A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的SDG(5、10、20、40μmol/L),MTT观察细胞增殖情况;Transwell小室评价细胞侵袭能力;Hochest染色观察细胞凋亡情况;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性;Real Time PCR、Western Blotting检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA和蛋白表达。结果 SDG呈时间-浓度依赖性抑制A549细胞的增殖(P<0.05)。细胞侵袭能力明显下降、凋亡比率和Caspase-3活性明显升高、MMP-2 mRNA和蛋白的表达显著下降(P<0.05)。结论 SDG呈时间和剂量依赖性抑制A549细胞的增殖和侵袭,其机制可能与其促凋亡、抑制MMP-2的表达有关。 展开更多

关键词 亚麻木酚素 肺癌A549细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 基质金属蛋白酶-2 侵袭能力

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肺岩宁方联合顺铂对肺癌A549细胞生物学行为的影响 被引量：2

11

作者 马玥 王立芳 +2 位作者 郑展 邓海滨 徐振晔 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期3452-3456,共5页

目的:探讨肺岩宁方及顺铂对肺癌A549细胞增殖、迁移、凋亡等细胞生物学行为的影响。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞,运用CCK-8细胞增殖实验筛选肺岩宁方和顺铂的优化给药浓度及时间,检测药物对A549细胞增殖抑制作用;运用划痕实验检测药... 目的:探讨肺岩宁方及顺铂对肺癌A549细胞增殖、迁移、凋亡等细胞生物学行为的影响。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞,运用CCK-8细胞增殖实验筛选肺岩宁方和顺铂的优化给药浓度及时间,检测药物对A549细胞增殖抑制作用;运用划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响;利用流式细胞术测定药物对细胞凋亡的影响;运用Hoechst染核,扫描激光共聚焦显微系统观察细胞凋亡形态学的改变。结果:与空白对照组比较,肺岩宁方组和顺铂组均能抑制A549细胞增殖活力(P<0.01),联合用药组对肺癌细胞增殖的抑制强于肺岩宁方组(P<0.01)。与空白对照组比较,各药物组干预肺癌细胞后迁移能力显著降低(P<0.05,P<0.01),联合用药较肺岩宁方更为显著(P<0.01)。联合用药组肺癌细胞凋亡率显著高于肺岩宁方组(P<0.01)。与空白对照组比较,各药物组肺癌细胞凋亡被促进,联合用药促进凋亡的效果更明显。结论:肺岩宁方具有调控A549细胞生物学行为的作用,肺岩宁方显著抑制肺癌A549细胞的增殖活力及迁移能力,促进肺癌细胞凋亡,与顺铂联合应用具有协同增效作用。 展开更多

关键词 肺岩宁方 顺铂 肺癌 肺癌A549细胞 生物学行为 协同增效

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A549/DDP耐药肺癌细胞系的建立及其与SP细胞的关系 被引量：3

12

作者 潘泓 谢彤 +2 位作者 茅乃权 张纬 唐步坚 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第14期2477-2479,共3页

目的:建立耐顺铂(DDP)人肺癌耐药细胞系A549/DDP,初步探讨耐药细胞与肿瘤SP(sidepopulationcell)细胞的关系。方法:以DDP为诱导剂,采用高浓度反复间歇诱导法诱导建立人肺癌耐药细胞系A549/DDP,用MTT法测定药物敏感性,最后将耐药细胞和... 目的:建立耐顺铂(DDP)人肺癌耐药细胞系A549/DDP,初步探讨耐药细胞与肿瘤SP(sidepopulationcell)细胞的关系。方法:以DDP为诱导剂,采用高浓度反复间歇诱导法诱导建立人肺癌耐药细胞系A549/DDP,用MTT法测定药物敏感性,最后将耐药细胞和亲本细胞分别行Hoechst33342染色,用流式细胞仪检测SP细胞含量。结果:成功建立DDP耐药细胞系A549/DDP,对DDP的耐药指数为5.957;耐药谱分析表明其是一个多药耐药细胞系;Hoechst33342染色分析显示:A549和A549/DDP中SP细胞含量分别为1.09%和0.31%。结论:建立了稳定的人肺癌多药耐药耐药细胞系A549/DDP,耐药细胞中SP细胞含量无明显变化。 展开更多

关键词 抗药性 肿瘤 肺癌细胞系A549 多药耐药 SP细胞

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干扰CD44v3的表达对肺腺癌A549细胞侵袭行为的影响 被引量：3

13

作者 马丹 张珍祥 徐永健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期609-612,共4页

目的研究肺腺癌细胞A549的侵袭能力和黏附分子CD44v3的关系。方法用pRNAT-H1.1/Neo(6.1 kb)质粒构建一个能够稳定转录短发卡RNA(shRNA)并干扰CD44v3分子表达的表达载体,将其转染A549细胞,用荧光免疫细胞化学法和Western blot检测A549细... 目的研究肺腺癌细胞A549的侵袭能力和黏附分子CD44v3的关系。方法用pRNAT-H1.1/Neo(6.1 kb)质粒构建一个能够稳定转录短发卡RNA(shRNA)并干扰CD44v3分子表达的表达载体,将其转染A549细胞,用荧光免疫细胞化学法和Western blot检测A549细胞CD44v3表达的变化。用Boyden室和人工基底膜构建癌细胞的体外侵袭模型,计数并比较各实验组穿过人工基底膜的细胞数。结果肺腺癌细胞A549表达CD44v3分子,分子量为130 kD(1 kD=0.992 1 ku)。转染干扰质粒表达载体能够使A549细胞的CD44v3表达降低46%。癌细胞的离体侵袭模型中发现干扰组癌细胞侵袭能力为(4.00±1.22),空载对照组为(13.20±4.92),前者的癌细胞侵袭能力较后者下降70%(P<0.01)。抗CD44v3单克隆抗体(阳性对照组)也可降低A549细胞的侵袭能力,干扰组和阳性对照组比较,两者差异无显著性意义(P>0.05)。结论肺腺癌细胞A549表达CD44v3分子,用RNAi技术可降低其表达。CD44v3表达降低的A549细胞侵袭能力受到抑制。 展开更多

关键词 CD44v3蛋白 肺癌 A549细胞 肿瘤侵袭

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CD_(44)v_3的表达对肺腺癌A549细胞侵袭行为的影响 被引量：1

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作者 马丹 张珍祥 徐永健 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期3388-3392,共5页

目的研究肺腺癌细胞A549的侵袭能力和黏附分子CD_(44)v_3的关系。方法用pRNAT-H1.1/Neo(6.1kb)质粒构建一个能够稳定转录短发卡RNA(shRNA)并干扰CD_(44)v_3分子表达的表达载体,将其转染A549细胞,用荧光免疫组织细胞化学法和免疫印渍(Wes... 目的研究肺腺癌细胞A549的侵袭能力和黏附分子CD_(44)v_3的关系。方法用pRNAT-H1.1/Neo(6.1kb)质粒构建一个能够稳定转录短发卡RNA(shRNA)并干扰CD_(44)v_3分子表达的表达载体,将其转染A549细胞,用荧光免疫组织细胞化学法和免疫印渍(WesternBlot)检测A549细胞表达CD_(44)v_3的变化。用Boyden室和人工基底膜构建癌细胞的离体侵袭模型,计数并比较各实验组穿过人工基底膜的细胞的细胞数。结果实验中发现肺腺癌细胞A549表达CD_(44)v_3分子,分子量为130kd。质粒表达载体能够有效的干扰A549细胞表达CD_(44)v_3,在转染率为34%时,蛋白表达下降46%。癌细胞的离体侵袭模型中发现干扰组癌细胞侵袭能力为(4.0±1.22),空载对照组为(13.20±4.92),前者的癌细胞侵袭能力较后者下降70%,两者比较差异有显著性,P<0.01。抗CD44v3单克隆抗体(阳性对照组)也可降低A549细胞的侵袭能力,干扰组和阳性对照组比较,两者差异无显著性,P>0.05。结论肺腺癌细胞A549表达CD44v3分子,用RNAi技术可降低其表达。CD44v3表达降低的A549细胞侵袭能力受到抑制。 展开更多

关键词 CD44V3 RNAI 肺癌 A549细胞 侵袭

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miRNA-210对肺癌细胞株A549增殖及凋亡的作用 被引量：2

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作者 黄鑫 王波 《解剖学研究》 CAS 2020年第3期228-232,共5页

目的探讨miRNA-210是否通过调控STAT3表达来影响肺癌细胞株A549增殖及凋亡。方法选用肺癌细胞株A549,通过干扰慢病毒敲低miRNA-210表达水平,RT-PCR检测miRNA-210、STAT3基因表达水平,Western blot检测STAT3蛋白水平,CCK-8检测A549细胞... 目的探讨miRNA-210是否通过调控STAT3表达来影响肺癌细胞株A549增殖及凋亡。方法选用肺癌细胞株A549,通过干扰慢病毒敲低miRNA-210表达水平,RT-PCR检测miRNA-210、STAT3基因表达水平,Western blot检测STAT3蛋白水平,CCK-8检测A549细胞增殖水平。结果肺癌A549细胞中miRNA-210、STAT3表达上调(P<0.01);敲低miRNA-210后,STAT3表达水平明显降低(P<0.01),Bax与Bcl-2比值明显升高(P<0.01),而A549细胞增殖被显著抑制(P<0.01)。结论 miRNA-210可能通过调控STAT3表达从而影响肺癌细胞A549增殖和凋亡。 展开更多

关键词 肺癌 MicroRNA-210 信号转导和转录激活因子3 增殖 凋亡 A549细胞株

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亚麻木酚素联合硼替佐米诱导肺腺癌A549细胞凋亡的机制研究 被引量：2

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作者 李先伟 杨解人 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期248-253,共6页

目的:探讨亚麻木酚素(SDG)联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib,Bor)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制。方法:MTT法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞法和Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡;比色法检测半胱氨酸天冬... 目的:探讨亚麻木酚素(SDG)联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib,Bor)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制。方法:MTT法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞法和Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性;Real Time PCR检测Caspase-3、BCL-2、BAXmRNA的表达;Western Blot检测BCL-2、Bax及p-JNK的蛋白表达。结果:SDG联合Bor能明显抑制细胞生长,上调Caspase-3活性,促进p-JNK、BAX mRNA和蛋白的表达,抑制BCL-2 mRNA和蛋白的表达,诱导细胞凋亡。结论:SDG联合Bor可显著诱导肺腺癌A549细胞的凋亡,其机制可能与其激活JNK信号通路有关。 展开更多

关键词 亚麻木酚素 硼替佐米 肺腺癌A549细胞 细胞凋亡

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川楝素对顺铂抗肺癌活性的影响及其机制研究 被引量：2

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作者 叶海南 《浙江中西医结合杂志》 2018年第4期278-281,共4页

目的观察川楝素对顺铂抗肺癌活性的协同效应并研究其机制。方法人肺癌细胞系A549分为对照组、川楝素组、顺铂组、川楝素+顺铂组及川楝素+顺铂+X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)质粒组。MTT实验检测各组A549细胞活力抑制率;流式细胞实验检测各组A... 目的观察川楝素对顺铂抗肺癌活性的协同效应并研究其机制。方法人肺癌细胞系A549分为对照组、川楝素组、顺铂组、川楝素+顺铂组及川楝素+顺铂+X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)质粒组。MTT实验检测各组A549细胞活力抑制率;流式细胞实验检测各组A549细胞凋亡;免疫共沉淀及Western blot实验检测各组A549细胞XIAP表达水平及其与半胱天冬酶-9(Caspase-9)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)的相互作用;Western blot实验检测各组A549细胞Caspase-9和Caspase-3的活化。结果川楝素+顺铂组A549细胞活力抑制率[(66.8±5.9)%]显著高于顺铂单治疗组[(15.2±1.2)%,P<0.05]和川楝素+顺铂+XIAP质粒组[(20.4±1.8)%,P<0.05];川楝素+顺铂组A549细胞凋亡率[(34.5±2.6)%]显著高于顺铂单治疗组[(9.7±0.8)%,P<0.05]和川楝素+顺铂+XIAP质粒组[(13.3±1.2)%,P<0.05];免疫共沉淀及Western blot实验显示川楝素能显著抑制A549细胞XIAP的表达及其与Caspase-9和Caspase-3的相互作用,川楝素促进顺铂对Caspase-9和Caspase-3的活化。结论川楝素通过下调XIAP表达增强顺铂抗肺癌活性。 展开更多

关键词 人肺癌细胞系A549 川楝素 XIAP 顺铂

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CD137L分子在人肺癌细胞系A549上的表达及其生物学功能的研究 被引量：1

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作者 张锦英 居颂文 《中国血液流变学杂志》 CAS 2007年第3期370-371,385,共3页

目的研究共刺激分子CD137L分子在人肺癌细胞系A549上的表达及其生物学功能。方法流式细胞术(FACS)和RT-PCR方法检测CD137L分子在A549上的表达。采用CD137-Fc融合蛋白刺激A549上的CD137L分子,ELISA实验分析细胞因子的分泌。结果FACS实验... 目的研究共刺激分子CD137L分子在人肺癌细胞系A549上的表达及其生物学功能。方法流式细胞术(FACS)和RT-PCR方法检测CD137L分子在A549上的表达。采用CD137-Fc融合蛋白刺激A549上的CD137L分子,ELISA实验分析细胞因子的分泌。结果FACS实验结果显示CD137L分子表达在A549上,RT-PCR实验结果进一步证实了上述发现。ELISA实验结果显示,CD137-Fc可刺激A549 IL-8的分泌。结论A549表面CD137L分子在蛋白分子水平和mRNA水平均有表达;并可发挥调节IL-8分泌的功能。 展开更多

关键词 CD137L 人肺癌细胞株 A549

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水飞蓟宾联合顺铂诱导人肺腺癌细胞A549凋亡及机制 被引量：1

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作者 毛晓敏 《浙江中西医结合杂志》 2015年第3期242-245,共4页

目的探讨水飞蓟宾联合顺铂对人肺癌细胞A549的杀伤效应及机制。方法将人肺癌细胞A549分别用水飞蓟宾、顺铂及两者联合干预后,采用MTT法检测不同干预方案对A549细胞的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞Bcl-2与... 目的探讨水飞蓟宾联合顺铂对人肺癌细胞A549的杀伤效应及机制。方法将人肺癌细胞A549分别用水飞蓟宾、顺铂及两者联合干预后,采用MTT法检测不同干预方案对A549细胞的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞Bcl-2与Bax的表达;利用小RNA抑制Bax的表达后,观察水飞蓟宾联合顺铂对A549细胞凋亡的诱导作用。结果水飞蓟宾联合顺铂对A549细胞增殖的抑制率(69.9±6.8)%,凋亡率(53.5±4.2)%;水飞蓟宾对A549细胞增殖的抑制率(6.9±0.7)%,凋亡率(7.9±1.5)%;顺铂分别为(13.3±2.9)%和(16.8±2.2)%。水飞蓟宾联合顺铂治疗A549细胞的增殖抑制率和凋亡率均优于单用水飞蓟宾和顺铂治疗组(P<0.05)。水飞蓟宾联合顺铂诱导A549细胞凋亡依赖于细胞内Bcl-2/Bax的比值,当转染Bax si RNA后,水飞蓟宾联合顺铂对A549的凋亡诱导率为(27.6±3.0)%,未转染Bax si RNA则两者联合治疗A549凋亡诱导率为(50.6±4.7)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论水飞蓟宾联合顺铂通过降低Bcl-2/Bax比例诱导人肺癌细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 人肺癌细胞A549 水飞蓟宾 顺铂 凋亡 BCL-2/BAX

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RON基因反义核酸真核表达载体的构建及其对A549的体外作用

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作者 潘铁成 徐利军 +3 位作者 李军 赵金平 陈涛 魏翔 《中华老年多器官疾病杂志》 2004年第4期283-288,共6页

目的　肺癌的发生是多因素作用的结果 ,RON基因参与其中 ,但它在肺癌的基因治疗中意义尚不明确。本研究旨在探讨RON能否作为肺癌的基因治疗靶点及针对该基因跨膜区段 (RONm)反义核酸对肺癌细胞的生物学功能的影响。方法　从人肺鳞癌细... 目的　肺癌的发生是多因素作用的结果 ,RON基因参与其中 ,但它在肺癌的基因治疗中意义尚不明确。本研究旨在探讨RON能否作为肺癌的基因治疗靶点及针对该基因跨膜区段 (RONm)反义核酸对肺癌细胞的生物学功能的影响。方法　从人肺鳞癌细胞提取总RNA进行RT PCR、T载体克隆和测序 ,获得RON基因的跨膜区段 ,并将其反向插入真核表达载体中 ,转染肺癌细胞 ,利用ELISA检测细胞模型RON基因表达后的蛋白水平 ,同时利用MTT和细胞记数方法监测细胞的生物学活性的变化。结果　用RT PCR亚克隆RONm ,测序结果与GenBank(X70 0 4 0 )一致。构建的RONm反义真核表达载体 ,转染后的肺癌细胞株A5 4 9RON基因表达量和细胞活性明显降低。结论　成功构建RONm反义核酸真核表达载体 ,RON能作为肺癌的基因治疗靶点 ;RONm反义核酸可有效抑制RON基因的表达阳性肺癌细胞的生长 ,为进一步研究将RONm反义核酸作为一种的肺癌基因治疗方法打下了分子生物学基础。 展开更多

关键词 RON 反义核酸 真核表达载体 肺癌细胞 基因治疗 体外作用 靶点 转染 RT-PCR 基因表达

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