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不同细胞裂解液对肝细胞蛋白提取影响的研究 被引量:1
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作者 刘友平 丁慧荣 +2 位作者 肖斌 罗文炽 李洪 《山西医药杂志》 CAS 2005年第1期7-8,共2页
目的 寻找一种更适合肝细胞蛋白质提取的细胞裂解液配方。方法 配制不同组成和不同浓度的细胞裂解液 ,分别对相同条件下培养的肝细胞进行裂解并进行蛋白定量及十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)佐证。结果 不同组成及不... 目的 寻找一种更适合肝细胞蛋白质提取的细胞裂解液配方。方法 配制不同组成和不同浓度的细胞裂解液 ,分别对相同条件下培养的肝细胞进行裂解并进行蛋白定量及十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)佐证。结果 不同组成及不同浓度的细胞裂解液对肝细胞裂解作用存在显著差异。结论 去污剂用 4 % 3 [(3 胆酰胺丙基 ) 二乙胺 ] 丙磺酸 (CHAPS)的细胞裂解液对肝细胞裂解效果最好。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞裂解液 蛋白质提取 影响 效果 聚丙烯酰胺凝胶电泳 定量 去污剂 SDS-PAGE 十二烷基磺酸钠
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裂解液对变异链球菌蛋白质提取效果的影响
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作者 温艳丽 沈末伦 《中国医药科学》 2011年第5期22-24,共3页
目的探讨裂解液对变异链球菌蛋白质提取效果的影响。方法通过革兰染色、SDS-PAGE和蛋白质浓度测定,对4种裂解液提取变异链球菌蛋白质的效果进行评价。结果裂解液Ⅲ、Ⅳ中的细菌破碎程度高于裂解液Ⅰ、Ⅱ。裂解液Ⅱ提取的蛋白质条带丰度... 目的探讨裂解液对变异链球菌蛋白质提取效果的影响。方法通过革兰染色、SDS-PAGE和蛋白质浓度测定,对4种裂解液提取变异链球菌蛋白质的效果进行评价。结果裂解液Ⅲ、Ⅳ中的细菌破碎程度高于裂解液Ⅰ、Ⅱ。裂解液Ⅱ提取的蛋白质条带丰度低于其他3种裂解液。裂解液Ⅲ、Ⅳ提取的蛋白浓度高于裂解液Ⅰ、Ⅱ(P<0.05)。结论含还原剂、去垢剂、离液剂和蛋白酶抑制剂的裂解液提取变异链球菌蛋白质的效果优于只含还原剂和去垢剂的裂解液。 展开更多
关键词 变异链球菌 蛋白质提取 裂解液
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利用流式监控高质量小鼠脾细胞的制备
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作者 李敏惠 刘阳 +6 位作者 杨平 郑静 杨淑霞 阳泰 张露 邹强 李华 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第2期136-137,140,共3页
目的流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞。方法以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力。结果结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋... 目的流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞。方法以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力。结果结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋巴细胞相对存活率大于或等于90%的前提下,ACK处理0.5~1min即可去除90%以上的红细胞,Tris-NH4Cl处理10min也可去除82%的红细胞,获得的淋巴细胞的融合效率为85%~90%。结论流式细胞术能够实时监控ACK和Tris-NH4Cl的裂解过程,获得高质量的脾淋巴细胞以适用于杂交瘤细胞的制备。 展开更多
关键词 流式细胞术 细胞融合 红细胞裂解液
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体液中尿酸溶解度的研究
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作者 董鲜祥 胡欣瑜 +5 位作者 范楠 陈欢 李律宇 王蕾 段为钢 云宇 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2021年第2期210-213,共4页
目的观察尿酸在大鼠体液中的溶解度,并研究其机理。方法将大鼠麻醉,收集血液,制备血清、血浆、红细胞裂解液,并用30、10、3 k Da纤维滤器制备其去大分子和小分子组分。在液体中加入足量的尿酸粉,平衡离心,收集上清液并检测上清液中的尿... 目的观察尿酸在大鼠体液中的溶解度,并研究其机理。方法将大鼠麻醉,收集血液,制备血清、血浆、红细胞裂解液,并用30、10、3 k Da纤维滤器制备其去大分子和小分子组分。在液体中加入足量的尿酸粉,平衡离心,收集上清液并检测上清液中的尿酸;制备梯度碳酸盐和磷酸盐,检测尿酸在不同盐溶液中的溶解度。结果体液原液中尿酸的溶解度较高,去蛋白后,溶解度较低;10~30 mmol·L^(-1)碳酸盐和磷酸盐溶液也能较好地溶解尿酸。结论体液对尿酸有较好的溶解作用,与碱性小分子碳酸盐和磷酸盐有关。体液中的蛋白质对尿酸有弱增溶作用,与其p H缓冲作用有关。 展开更多
关键词 血清 血浆 红细胞裂解液 尿酸粉末 磷钨酸法 碳酸盐 磷酸盐 尿酸溶解度
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不同Tris-Cl及SDS质量浓度对小鼠DNA提取的影响 被引量:3
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作者 任时好 张天星 +4 位作者 李春丽 武刚 宋根娣 赵卫东 郑振宇 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期192-195,共4页
为寻找一种合适的提取小鼠尾部基因组DNA的缓冲裂解液,参照分子克隆实验指南提供的裂解液配比,在5个等体积中分别加入1,2,3,4,5 mL的相同质量浓度Tris-Cl和SDS溶液,分析其对小鼠尾部组织提取DNA数量和质量的差异.结果表明,动物组织DNA... 为寻找一种合适的提取小鼠尾部基因组DNA的缓冲裂解液,参照分子克隆实验指南提供的裂解液配比,在5个等体积中分别加入1,2,3,4,5 mL的相同质量浓度Tris-Cl和SDS溶液,分析其对小鼠尾部组织提取DNA数量和质量的差异.结果表明,动物组织DNA的提取与组织消化有很大的关系,低质量浓度的Tris-C1只能基本满足实验要求,而若想获得大量的DNA,并且在实验材料较少的情况下,高质量浓度体系将更加优越.而SDS是用于沉淀蛋白质及RNA分子等不稳定的大分子,低质量浓度的SDS基本满足实验要求,质量浓度过大会影响获得高质量浓度的DNA. 展开更多
关键词 小鼠 Tris-Cl SDS 裂解液 DNA
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