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γH2AX:DNA双链断裂的标志 被引量：15
1
作者 余艳柯 陆源 +1 位作者 余应年 杨军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期237-240,共4页
γH2AX是目前国内外研究细胞DNA损伤应激反应的热点之一。细胞在电离辐射或其他因素作用下直接诱导或是通过复制压力诱导形成的双链断裂(DSBs) ,以及细胞自身调控的程序性DSBs和逆转录病毒转染细胞过程中产生的DSBs均可诱导H2AX的磷酸化... γH2AX是目前国内外研究细胞DNA损伤应激反应的热点之一。细胞在电离辐射或其他因素作用下直接诱导或是通过复制压力诱导形成的双链断裂(DSBs) ,以及细胞自身调控的程序性DSBs和逆转录病毒转染细胞过程中产生的DSBs均可诱导H2AX的磷酸化(γH2AX)和簇集。本文对H2AX及其组蛋白家族,以及γH2AX与DSBs之间的关系及可能作为一个探测DNA损伤的新分子探针来利用作一简要综述。 展开更多
关键词 γh12ax DNA损伤 诱变剂
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γH2AX检测在DNA双链断裂研究中应用 被引量：15
2
作者 刘敏 赵苒 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期742-746,共5页
DNA双链断裂(DSBs)是真核细胞DNA损伤最严重的形式,DNA损伤反应的激活可以导致基因组的不稳定,从而引发肿瘤;H2AX磷酸化产生的γH2AX作为一种生物标志物可以清楚地反映DNA损伤程度和修复情况,被国内外广泛应用于细胞凋亡研究中,是细胞... DNA双链断裂(DSBs)是真核细胞DNA损伤最严重的形式,DNA损伤反应的激活可以导致基因组的不稳定,从而引发肿瘤;H2AX磷酸化产生的γH2AX作为一种生物标志物可以清楚地反映DNA损伤程度和修复情况,被国内外广泛应用于细胞凋亡研究中,是细胞损伤应激反应的研究热点之一;本文对γH2AX用作DSBs检测的研究进展做一综述,对其在化合物的遗传毒性评估与临床肿瘤的早期筛查及治疗效果评价进行展望。 展开更多
关键词 γh2ax DNA损伤修复 遗传毒性生物标志物
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UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT的DNA损伤及其机制 被引量：9
3
作者 李辰 齐雪松 +3 位作者 李宁 苟巧 刘建香 田梅 《中国工业医学杂志》 CAS 2015年第6期403-405,424,F0003,共5页
目的研究不同剂量UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT DNA损伤的影响及机制。方法采用紫外辐照装置照射人角质形成细胞Ha Ca T建立急性紫外辐射细胞模型;MTT法检测不同剂量紫外辐射对细胞存活的影响;免疫荧光和流式细胞术分别检测细胞核内磷... 目的研究不同剂量UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT DNA损伤的影响及机制。方法采用紫外辐照装置照射人角质形成细胞Ha Ca T建立急性紫外辐射细胞模型;MTT法检测不同剂量紫外辐射对细胞存活的影响;免疫荧光和流式细胞术分别检测细胞核内磷酸化γH2AX焦点形成及蛋白表达水平;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测不同剂量不同时间照射后早期细胞凋亡百分数;免疫印迹法分别检测Caspase-3活化水平。结果 UVB辐射可抑制HaCaT细胞的存活,有一定的量效关系;相对较大剂量的UVB辐射可观察到明显的焦点形成;UVB照射后各剂量点磷酸化γH2AX的表达均明显高于未照射的对照组;UVB辐射可通过Caspase-3活化诱导细胞发生早期凋亡,照射后20 h,早期凋亡细胞百分数明显增加,特别是在UVB相对较大剂量范围内更明显,并有随照射剂量增高而增加的趋势。结论 UVB辐射可通过诱导DNA双链断裂抑制人HaCaT细胞存活,并通过激活Caspase-3而诱导细胞凋亡,细胞凋亡延迟,可能导致细胞更易于发生突变进而形成皮肤肿瘤。 展开更多
关键词 UVB辐射 DNA损伤 γh2ax 人角质形成细胞haCaT 皮肤癌
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2-乙酰氨基芴诱导γH2AX焦点的形成 被引量：7
4
作者 刁汇玲 周春仙 +1 位作者 余艳柯 杨军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期131-137,共7页
目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度... 目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度。结果0.1,1,5和20mg·L-1的2-AAF都可使细胞核内γH2AX焦点数量及有γH2AX焦点生成的细胞数量增加,但只有20mg·L-12-AAF处理的细胞才出现明显的彗尾增长及有彗尾的细胞数量增加。另外,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族抑制物渥曼青霉素可抑制2-AAF诱导的γH2AX焦点形成。结论2-AAF可通过激活PI3K家族成员使H2AX磷酸化,进而诱导γH2AX焦点的形成。γH2AX检测DNA损伤的敏感性优于彗星实验,因此,γH2AX有可能成为衡量DNA损伤程度的良好指标。 展开更多
关键词 γh2ax 2-乙酰氨基芴 DNA损伤
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与细胞周期G_2/M期进程相关的H2AX磷酸化 被引量：7
5
作者 涂文志 尚增甫 +5 位作者 李兵 刘晓丹 王豫 徐勤枝 让蔚清 周平坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期339-345,共7页
γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞... γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞周期、Western印迹和免疫荧光法,观察γH2AX表达和γH2AX焦点的形成.结果显示,细胞进入G2/M期和有丝分裂过程中,γH2AX水平显著增加;在无DNA DSB发生的情况下,部分M期细胞中也存在大量的γH2AX焦点.随着细胞完成有丝分裂从M期退出再进入G1期,γH2AX的表达水平逐渐降低.这种γH2AX表达变化特征与G2/M期密切关联的PLK1和Cyclin B1的表达规律相类似.在4 Gy大剂量照射下,HeLa细胞于照后8到12 h出现明显的G2/M期阻滞.γH2AX焦点数在照后1 h达高峰,随后降低,照后8 h又上升,出现了第2个峰值.与之不同的是,在1 Gy低剂量照射下,细胞的G2/M期阻滞微弱,γH2AX焦点数在照后0.5 h最高,随后下降,且无反弹,符合DNA DSB的修复动力学特征.因此,将γH2AX当做DNA DSB分子标志物时,还需要考虑细胞周期变化的影响.γH2AX适合作为1 Gy以下照射的DNA双链断裂损伤的分子标志. 展开更多
关键词 γh2ax 细胞周期 G2/M阻滞 DNA双链断裂 分子标志物
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γH2AX、53BP1及RAD51焦点用于分析DNA双链断裂损伤 被引量：7
6
作者 王依朝 樊丽 +6 位作者 王红霞 杨思路 崔雅妮 段奕鋆 段静静 任来峰 苏文 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期16-19,共4页
γH2AX、53BP1及RAD51焦点(foci)是DNA双链断裂(DSBs)损伤修复的评价指标。其中,γH2AX分析应用最为广泛,但最新有研究发现其并不完全与DSBs损伤一致。系统分析了DNA损伤时γH2AX、53BP1及RAD51 foci的动力性变化及其在DSBs损伤评估中... γH2AX、53BP1及RAD51焦点(foci)是DNA双链断裂(DSBs)损伤修复的评价指标。其中,γH2AX分析应用最为广泛,但最新有研究发现其并不完全与DSBs损伤一致。系统分析了DNA损伤时γH2AX、53BP1及RAD51 foci的动力性变化及其在DSBs损伤评估中的合理应用。结果表明,在电离辐射处理时,γH2AX和53BP1 foci具有高度一致性,均可反映DSBs损伤及修复的动力性变化,而RAD51 foci仅出现在部分损伤细胞中,与其主要参与同源重组修复一致。在喜树碱(CPT)处理时,γH2AX呈现两种染色类型(亮而离散的foci和泛核磷酸化),53BP1 foci仅出现在亮而离散的γH2AX foci阳性细胞且与其高度一致。结果提示,单独γH2AX染色阳性并不能准确代表DSBs损伤,而应结合53BP1等染色来综合分析DSBs损伤程度;RAD51 foci分析仅能反映部分细胞的DSBs损伤修复(主要是同源重组)情况。 展开更多
关键词 DNA双链断裂 DNA修复 电离辐射 磷酸化的组蛋白h2ax
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X射线辐照诱导人神经胶质瘤细胞DNA双链损伤研究 被引量：6
7
作者 裴淑艳 赵晋 +4 位作者 马影 张丹 聂聪 王丽丽 郭忠 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2017年第4期21-28,共8页
采用免疫荧光染色法检测X射线诱导M059K细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)和磷酸化的毛细血管扩张性共济失调症突变基因(pATM)焦点的形成;流式细胞仪分析M059K细胞γH2AX和pATM表达的周期依赖性。免疫荧光染色检测结果显示,γH2AX和pATM焦... 采用免疫荧光染色法检测X射线诱导M059K细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)和磷酸化的毛细血管扩张性共济失调症突变基因(pATM)焦点的形成;流式细胞仪分析M059K细胞γH2AX和pATM表达的周期依赖性。免疫荧光染色检测结果显示,γH2AX和pATM焦点阳性细胞分别以照射后0.5、4 h表达最高,照射后24h,高剂量组焦点阳性细胞达100%。流式细胞仪分析结果显示,γH2AX和pATM的表达具有细胞周期依赖性。照射后0.5、4 h,γH2AX和pATM在细胞各期的表达均明显增加,并以G0/G1期为著;照射后24 h,γH2AX和pATM在G0/G1和S期表达降低,而G2/M期细胞表达明显增加。细胞呈现明显的G2/M期阻滞。结果提示,γH2AX和ATM信号通路参与X射线诱导的M059K细胞DNA双链断裂。 展开更多
关键词 X射线辐照 M059K细胞 DNA双链损伤 γh2ax pATM
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活性氧类物质对精子DNA的损伤及其检测 被引量：6
8
作者 王娜 《中国医药导报》 CAS 2009年第12期5-6,共2页
活性氧类物质(ROS)产生过多会破坏精子核内DNA的完整性,促进了一系列男性生殖功能的病理学改变。DNA损伤发生DNA断裂(DSBs)均可诱导H2AX的磷酸化(γH2AX)和簇集。近年来γH2AX识别抗体免疫荧光法是检测DNA双链断裂的热点之一。
关键词 活性氧类物质 精子 γh2ax DNA损伤
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γH2AX的检测方法简介 被引量：5
9
作者 余艳柯 朱心强 杨军 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期408-410,共3页
关键词 γh2ax 免疫荧光 流式细胞技术 免疫印迹
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H2AX活化与DNA双链断裂及辐射剂量的关系 被引量：5
10
作者 闵锐 倪瑾 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期427-429,共3页
H2AX是组蛋白H2A的一种亚型。过去对组蛋白的关注仅局限在维持染色质结构的认识方面,近来发现构成染色质核小体的组蛋白同时具有许多其他重要生物学功能,在DNA双链断裂修复中的作用就是最重要的发现之一。H2AX蛋白发挥其功能需要活化,... H2AX是组蛋白H2A的一种亚型。过去对组蛋白的关注仅局限在维持染色质结构的认识方面,近来发现构成染色质核小体的组蛋白同时具有许多其他重要生物学功能,在DNA双链断裂修复中的作用就是最重要的发现之一。H2AX蛋白发挥其功能需要活化,活化后的H2AX称为γH2AX。检测γH2AX可以确定DNA双链断裂的存在,γH2AX的检测量与辐射剂量也存在良好的量效关系。 展开更多
关键词 电离辐射 γh2ax DNA双链断裂 辐射剂量
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毛蕊花糖苷对中波紫外线所致小鼠皮肤损伤的保护作用研究 被引量：2
11
作者 张迪 张娟利 马忠英 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期57-63,共7页
目的 研究毛蕊花糖苷对中波紫外线(UVB)照射所致小鼠皮肤损伤的保护作用。方法 将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、UVB模型组、基质+UVB组、1%毛蕊花糖苷+UVB组、5%毛蕊花糖苷+UVB组、5%维生素E+UVB组,每组10只。除正常对照组外,其余4组... 目的 研究毛蕊花糖苷对中波紫外线(UVB)照射所致小鼠皮肤损伤的保护作用。方法 将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、UVB模型组、基质+UVB组、1%毛蕊花糖苷+UVB组、5%毛蕊花糖苷+UVB组、5%维生素E+UVB组,每组10只。除正常对照组外,其余4组小鼠采用UVB照射建立皮肤损伤模型,单次照射强度为0.326 mW·cm^(-2),每次照射10 min,隔日照射1次,共照射10次,累积照射剂量为1 956 mJ·cm^(-2)。基质组和各给药组小鼠分别于每次照射前30 min将不含药物的空白基质、1%毛蕊花糖苷乳膏、5%毛蕊花糖苷乳膏、5%的维生素E乳膏涂于小鼠背部脱毛处。末次照射24 h后,处死小鼠,取背部皮肤进行相关指标的检测:皮肤称质量及皮肤厚度测量检测皮肤水肿;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠皮肤组织形态学特征;免疫组织化学法检测小鼠皮肤组织磷酸化的H2AX组蛋白(Phosphorylated histone H2AX,γH2AX)的表达;酶联免疫吸附法测定皮肤组织中环丁烷嘧啶二聚体(cyclobutyl pyrimidine dimers,CPDs)、6-4光产物(6-4photoproducts, 6-4PPs)和8-羟基-2-脱氧鸟嘌呤核苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine, 8-OHdG)的水平。结果 与正常对照组比较,UVB模型组小鼠皮肤出现水肿、粗糙、红肿、溃烂、表皮增厚等;γH2AX表达量明显升高(P<0.01);CPDs、6-4PPs、8-OHdG的含量均明显增加(P<0.01)。与UVB模型组比较,毛蕊花糖苷给药组小鼠皮肤组织的水肿、粗糙、红肿、溃烂、表皮增厚等症状明显改善;组织中γH2AX的表达明显降低(P<0.01);CPDs、6-4PPs、8-OHdG的含量明显减少(P<0.01)。结论 毛蕊花糖苷能改善UVB照射引起的小鼠皮肤损伤,且这种作用的发挥可能与其降低CPDs、6-4PPs和8-OHdG等因子的表达,改善DNA损伤有关。 展开更多
关键词 毛蕊花糖苷 UVB照射 皮肤损伤 DNA损伤 磷酸化的h2ax组蛋白 环丁烷嘧啶二聚体 6-4光产物 8-羟基-2-脱氧鸟嘌呤核苷 小鼠
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黄芪多糖上调γH2AX的表达提高宫颈癌细胞放疗敏感性的分析
12
作者 刘雅雯 章玲玲 +1 位作者 涂海燕 李凌 《实用癌症杂志》 2024年第6期871-873,877,共4页
目的研究黄芪多糖(APS)对宫颈癌Siha细胞增殖能力的影响,观察放疗后磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达情况。方法体外培养Siha细胞,将其分为两组即放疗组和APS联合放疗组。应用CCK8法检测不同浓度APS对Siha细胞增殖活性的影响;Western blo... 目的研究黄芪多糖(APS)对宫颈癌Siha细胞增殖能力的影响,观察放疗后磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达情况。方法体外培养Siha细胞,将其分为两组即放疗组和APS联合放疗组。应用CCK8法检测不同浓度APS对Siha细胞增殖活性的影响;Western blotting检测放疗4 h后两组γH2AX蛋白的表达水平。结果APS浓度越高,细胞的增殖活力越弱;APS作用时间越长,细胞增殖能力越弱(P<0.01);放疗后,APS联合放疗组γH2AX表达水平高于放疗组(P=0.031)。结论APS可以抑制Siha细胞增殖,促进γH2AX表达,从而提高放疗的敏感性。 展开更多
关键词 黄芪多糖 SIhA细胞 DNA损伤 γh2ax 放疗敏感性
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低剂量辐射诱导小鼠骨髓单个核细胞γH2AX形成的时间剂量效应 被引量：6
13
作者 许芸 邬蒙 《实用癌症杂志》 2009年第4期333-336,354,共5页
目的探讨正常造血组织在全身低剂量照射后的放射生物学效应。方法将96只雌性昆明小鼠随机分为8组,暴露于0～800mGyγ射线下。分别于照射后24、48、72h处死,制备单个核细胞悬液。加γH2AX抗体染色后应用流式细胞仪检测其荧光强度。结果... 目的探讨正常造血组织在全身低剂量照射后的放射生物学效应。方法将96只雌性昆明小鼠随机分为8组,暴露于0～800mGyγ射线下。分别于照射后24、48、72h处死,制备单个核细胞悬液。加γH2AX抗体染色后应用流式细胞仪检测其荧光强度。结果单染及双染法结果均显示γH2AX表达呈J型曲线,所有时间剂量组中,100mGyγ射线在48h时诱发的DSB数量最少。结论γH2AX的表达水平可以反映DNA双链断裂及修复情况。造血组织低剂量照射后可以产生兴奋效应。 展开更多
关键词 低剂量照射 磷酸化h2ax 造血组织 兴奋
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黄芪甲苷对肝细胞放射损伤预防作用的机制研究 被引量：5
14
作者 胡雅梦 龙颖 +3 位作者 陈科良 刘奔波 何淑雅 黄波 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期309-316,共8页
本文研究了黄芪甲苷(Astragaloside IV,ASIV)对肝细胞放射损伤防护的机制。以γ射线照射L-02细胞建立辐射损伤模型,分为对照组、黄芪甲苷组(80μg/mL)、照射组(4 Gy)、黄芪甲苷+照射组(80μg/mL+4Gy),于照射前12 h更换含有黄芪甲苷浓度... 本文研究了黄芪甲苷(Astragaloside IV,ASIV)对肝细胞放射损伤防护的机制。以γ射线照射L-02细胞建立辐射损伤模型,分为对照组、黄芪甲苷组(80μg/mL)、照射组(4 Gy)、黄芪甲苷+照射组(80μg/mL+4Gy),于照射前12 h更换含有黄芪甲苷浓度为80μg/mL的培养基。采用流式细胞术检测黄芪甲苷对照后L-02细胞早期凋亡率及细胞周期的影响;以罗丹明123荧光探针检测黄芪甲苷对照后L-02细胞线粒体膜电位改变的影响;免疫荧光法观察γH2AX焦点数;通过Western Blot检测细胞中Nrf2、HO-1、NQO1的蛋白表达变化。结果显示:照后细胞凋亡率随着药物浓度的增加而降低,黄芪甲苷能有效的缓解电离辐射引起的细胞G2期阻滞;黄芪甲苷+照射组细胞线粒体膜电位均高于照射组;黄芪甲苷+照射组γH2AX焦点数明显少于照射组;照射组细胞内Nrf2、HO-1及NQO1表达升高,黄芪甲苷+照射组Nrf2、HO-1及NQO1表达则是随着药物浓度增加而降低。综上可知,黄芪甲苷对L-02细胞具有辐射损伤预防作用,其机制可能是通过Nrf2途径来减轻电离辐射所致的损伤。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 凋亡 细胞周期 γh2ax NRF2
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γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义 被引量：4
15
作者 林涛 张云艳 +6 位作者 初明 李锦媛 王燕 商庆龙 谷鸿喜 魏兰兰 张凤民 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期134-139,共6页
目的探讨γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法对74例宫颈鳞癌组织通过DNA提取，PCR检测，分析HPV的感染情况并筛选HPV16阳性宫颈癌组织；进而对HPV16阳性的宫颈癌石蜡组织连续切片HE染色明确组织型别，进行HPV16DNA原位... 目的探讨γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法对74例宫颈鳞癌组织通过DNA提取，PCR检测，分析HPV的感染情况并筛选HPV16阳性宫颈癌组织；进而对HPV16阳性的宫颈癌石蜡组织连续切片HE染色明确组织型别，进行HPV16DNA原位杂交检测HPV定位、免疫组化检测γH2AX和p16蛋白的表达；最后选取30例典型的包括从正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变到宫颈原位癌渐变的组织切片，对比HPVDNA定位与吖H2AX和p16蛋白的表达，分析γH2AX作为HPV感染导致宫颈癌发生过程中生物标记物的可行性。结果经PER扩增证明HPV感染率为98．65％，HPV16是最常见的型别占74．32％；原位杂交结果显示正常宫颈组织和CINI检测不到HPV16DNA的存在，CINII中HPV主要为游离型存在，随着宫颈病变的加重，HPV16DNA逐渐出现整合形式；p16和γH2AX的表达均随着宫颈上皮病变级别的增加其阳性表达率增高，HPVDNA和γH2AX的表达均以颗粒细胞层和棘细胞层为主，定位具有一致性，HPVDNA和p16的表达定位不具有一致性。结论γH2AX作为DNA损伤激活的重要蛋白，可作为HPV16感染致宫颈癌发生过程中的生物标记物。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 hPV16 P16 γh2ax 生物标记物
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醋酸铅染毒致人外周血淋巴细胞遗传损伤的研究 被引量：4
16
作者 刘祥铨 吴京颖 +3 位作者 王晓娜 施文华 吴小南 刘合焜 《职业与健康》 CAS 2018年第19期2655-2658,共4页
目的研究醋酸铅染毒致人外周血淋巴细胞遗传损伤情况。方法不同浓度醋酸铅染毒人外周血淋巴细胞,CCK-8试验检测细胞活力;染色体畸变试验检测醋酸铅染毒对人外周血淋巴细胞染色体损伤作用;免疫荧光染色检测DNA双链断裂损伤生物标志物组蛋... 目的研究醋酸铅染毒致人外周血淋巴细胞遗传损伤情况。方法不同浓度醋酸铅染毒人外周血淋巴细胞,CCK-8试验检测细胞活力;染色体畸变试验检测醋酸铅染毒对人外周血淋巴细胞染色体损伤作用;免疫荧光染色检测DNA双链断裂损伤生物标志物组蛋白H2AX的磷酸化(γ-H2AX)表达情况。结果醋酸铅染毒抑制人外周血淋巴细胞活力,其24 h的IC50值为168.5μmol/L;醋酸铅染毒后,人外周血淋巴细胞染色体损伤程度和γ-H2AX焦点表达水平随醋酸铅浓度的增加和染毒时间的延长而升高,呈现明显的剂量效应和时间效应。结论醋酸铅对人外周血淋巴细胞有潜在的细胞毒性和遗传毒性。 展开更多
关键词 醋酸铅 人外周血淋巴细胞 染色体 γh2ax 遗传毒性
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DNA损伤和修复中的H2AX磷酸化及其在生殖相关细胞中的作用
17
作者 陈红 徐沛欣 +2 位作者 王惠增 刘秉春 袁建龙 《生命的化学》 CAS 2023年第12期1896-1906,共11页
H2AX是组蛋白H2A家族常见的变体之一,H2AX磷酸化是指哺乳动物细胞中的组蛋白H2AX在其C端第139位丝氨酸上发生磷酸化修饰形成磷酸化组蛋白H2AX(histone H2AX phosphorylation,γH2AX)的过程。目前,γH2AX的检测方法主要有免疫荧光法、流... H2AX是组蛋白H2A家族常见的变体之一,H2AX磷酸化是指哺乳动物细胞中的组蛋白H2AX在其C端第139位丝氨酸上发生磷酸化修饰形成磷酸化组蛋白H2AX(histone H2AX phosphorylation,γH2AX)的过程。目前,γH2AX的检测方法主要有免疫荧光法、流式细胞术、免疫印迹法。γH2AX是DNA损伤尤其是DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSB)或DNA修复的标志物,已经被应用到医学相关领域,如放射性DNA损伤的检测、癌症的辅助诊断以及预后监测。此外,γH2AX在检测生殖细胞中的DNA损伤及修复和维持胚胎干细胞的自我更新中有重要意义。检测γH2AX水平已成为评价生殖细胞和干细胞质量的重要方法。本文将从H2AX及其家族的生物学特征、γH2AX的检测方法、DNA损伤与修复中的H2AX磷酸化及其在生殖相关细胞中的应用等角度对γH2AX研究进展进行总结和探讨。 展开更多
关键词 γh2ax 检测方法 DNA损伤 DNA修复 精子 卵母细胞 胚胎干细胞
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阿魏酸对人脐静脉血管内皮细胞辐射损伤的保护作用及其机制 被引量：4
18
作者 邵帅 田梅 +3 位作者 刘建香 苟巧 齐雪松 苏旭 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2017年第5期325-328,共4页
目的:研究阿魏酸对电离辐射所致人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用,及其对辐射敏感蛋白Thbd和60γH2AX的影响,探讨阿魏酸的抗辐射作用与机制。方法:以4~16 Gy的Coγ射线照射HUVEC细胞,照后48 h以MTS法检测细胞活力,探索适宜照... 目的:研究阿魏酸对电离辐射所致人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用,及其对辐射敏感蛋白Thbd和60γH2AX的影响,探讨阿魏酸的抗辐射作用与机制。方法:以4~16 Gy的Coγ射线照射HUVEC细胞,照后48 h以MTS法检测细胞活力,探索适宜照射剂量。以10 Gyγ射线照射HUVEC细胞,分别于照射后1、3、6、12、24和48 h提取细胞总蛋白,蛋白质印迹法检测蛋白Thbd和γH2AX的表达水平。并于照射前2 h,预防性给予细胞0.001~1μmol/L的阿魏酸,照后48 h检测细胞活力、Thbd和γH2AX蛋白表达水平的改变。结果:与未照射组(0 Gy)比较,HUVEC受到10 Gyγ射线照射后48 h,细胞活力约降低30%(P<0.05)。以此剂量照射,照后1 h Thbd约降至正常水平的0.6(P<0.05),照射后48 hγH2AX约升高至正常水平的5倍(P<0.05)。与照射对照组比较,0.1和1μmol/L的阿魏酸作用后,受照HUVEC的细胞活力提高(P<0.05),Thbd蛋白表达升高(P<0.05),γH2AX蛋白表达降低(P<0.05)。结论:0.1~1μmol/L的阿魏酸可调节10 Gyγ射线照射后HUVEC的Thbd和γH2AX蛋白的表达水平,从而促进HUVEC增殖,提高其细胞活力,发挥抗辐射作用。 展开更多
关键词 阿魏酸 抗辐射 血栓调节素 γh2ax 血管内皮细胞
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热应激对猪睾丸Spo11表达与定位及其诱导DNA双链断裂的影响
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作者 李东晓 李佳容 +4 位作者 赵子惠 常倩雯 白涛 范小瑞 贺俊平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1200-1206,共7页
为探究热应激对猪睾丸Spo11、DNA双链断裂分子标记γH2AX和DNA重组修复分子标记Rad51表达和定位的影响,笔者构建了环境热应激(37℃环境温度,每日加热3 h,连续7 d)和睾丸局部热应激(42℃,局部阴囊加热1 h)的猪动物模型,未处理组猪睾丸作... 为探究热应激对猪睾丸Spo11、DNA双链断裂分子标记γH2AX和DNA重组修复分子标记Rad51表达和定位的影响,笔者构建了环境热应激(37℃环境温度,每日加热3 h,连续7 d)和睾丸局部热应激(42℃,局部阴囊加热1 h)的猪动物模型,未处理组猪睾丸作为对照。通过免疫组织化学染色、Western-blot和qRT-PCR等方法检测Spo11、Rad51和γH2AX在猪睾丸中的表达和定位。免疫组化结果显示,对照组生精小管内可见各级生精细胞,Spo11和Rad51主要定位于初级精母细胞的细胞核,γH2AX免疫阳性染色见于初级精母细胞的细胞核。与对照组相比,环境热应激组初级精母细胞的细胞核Spo11和γH2AX免疫阳性着色无明显差异,Rad51免疫阳性着色较弱;局部热应激组初级精母细胞的细胞核Spo11、Rad51和γH2AX免疫阳性着色较强,细胞定位未发生变化。Western-blot和qRT-PCR结果显示,与对照组相比,环境热应激组Spo11蛋白、m RNA和γH2AX蛋白水平均无显著差异,Rad51蛋白和m RNA表达水平均显著降低(P<0.01);局部热应激组Spo11蛋白和m RNA表达水平均显著增加(P<0.05),Rad51蛋白、m RNA和γH2AX蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结果表明,环境热应激对睾丸Spo11和γH2AX蛋白表达水平无显著影响,下调Rad51表达水平,提示DNA双链断裂后修复受损;局部热应激上调初级精母细胞Spo11、Rad51和γH2AX表达水平,提示DNA双链断裂增加。 展开更多
关键词 Spo11 DNA双链断裂 RAD51 γh2ax 热应激 猪
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^60Coγ射线诱导EJ细胞DNA损伤及γH2AX表达的研究 被引量：3
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作者 潘艳 田梅 +2 位作者 刘建香 阮健磊 苏旭 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期586-589,共4页
目的探讨不同剂量^60Coγ射线对EJ细胞DNA损伤的情况，不同剂量^60Coγ射线照射EJ细胞后诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成，以及与γH2AX表达量的关系。方法单细胞凝胶电泳检测DNA链断裂损伤情况。免疫荧光法检测不同剂量γ射线照射后立即... 目的探讨不同剂量^60Coγ射线对EJ细胞DNA损伤的情况，不同剂量^60Coγ射线照射EJ细胞后诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成，以及与γH2AX表达量的关系。方法单细胞凝胶电泳检测DNA链断裂损伤情况。免疫荧光法检测不同剂量γ射线照射后立即、以及2Gyγ射线照射后不同时间的EJ细胞中γH2AX焦点的数量。流式细胞分析法检测不同剂量γ射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达量的变化。结果单细胞凝胶电泳结果显示，γ射线照射后DNA损伤情况明显加重，随照射剂量的增加，细胞尾矩不断加大，0 Gy组尾矩为0．24，4Gy照射组尾矩为5．26；免疫荧光结果显示，随着照射剂量的增加，γH2AX焦点数目及大小均明显增加，照射的剂量范围从0．1～4Gy均可检测，且照射剂量和焦点形成数目之间存在剂量-效应关系，0．1Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达12．37个，4Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达46个；2Gy7射线照射后24h仍可检测到γH2AX焦点，随时间延长焦点数目减少、强度减弱，具有时间依赖性。流式细胞检测结果表明，γ射线照射后γH2AX蛋白表达量明显增加，呈现明显量效关系，0．1和4Gy照射组γH2AX阳性细胞表达率分别为7．4％和29．2％。结论免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目比其他实验方法更能敏感、直观的反映DNA损伤及修复情况，有望成为检测辐射损伤的理想生物指标。 展开更多
关键词 ^60Coγ射线 照射 γh2ax DNA损伤
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