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hPDGF-A/hBD_2双基因共表达腺病毒载体的构建及表达 被引量:5
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作者 郝磊 邹仲敏 +8 位作者 王军平 董世武 邓均 闫国和 王连友 宁宇 刘登群 罗成基 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期859-862,共4页
目的制备人血小板源性生长因子-A(human platelet-derived growth factor A,hPDGF-A)和人β防御素2(human beta defensins,hBD2)双基因共表达腺病毒载体并观察其在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMS... 目的制备人血小板源性生长因子-A(human platelet-derived growth factor A,hPDGF-A)和人β防御素2(human beta defensins,hBD2)双基因共表达腺病毒载体并观察其在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达。方法将hPDGF-A和hBD2通过内部核糖体插入位点(internal ribosome entry site,IRES)连接后,以同源重组的形式插入腺病毒表达载体,由人胚肾293细胞包装,获得有感染能力的重组腺病毒颗粒。重组病毒感染BMSCs后,用RT-PCR检测重组腺病毒的表达。结果①成功构建穿梭质粒pAdTrack-hPDGF-A-IRES2-hBD2。②成功构建重组腺病毒质粒pAdeasy-hPDGF-A-IRES2-hBD2。③293细胞包装获得有感染能力的重组腺病毒。④转染的BMSCs高表达hPDGF-A和hBD。结论构建了hPDGF-A/hBD双基因共表达腺病毒载体,证实其转染BMSC后的表达。 展开更多
关键词 腺病毒 血小板源性生长因子 防御素 骨髓间充质干细胞
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重组hTGF-β1腺病毒转染BMSCs及对其增殖的影响 被引量:3
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作者 夏万尧 丁文龙 +4 位作者 刘伟 钟梅芳 周广东 崔磊 曹谊林 《解剖科学进展》 CAS 2009年第1期1-5,共5页
目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)表达及对其增殖的影响。方法重组adeno-hTGF-β1转染猪BMSCs,转染72h后以酶联免疫吸附分析(ELISA)方法定量检测重组腺病毒转染后hTGF-... 目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)表达及对其增殖的影响。方法重组adeno-hTGF-β1转染猪BMSCs,转染72h后以酶联免疫吸附分析(ELISA)方法定量检测重组腺病毒转染后hTGF-β1蛋白的表达,MTT法测定水貂肺上皮细胞(MV-1-Lu)的生长抑制率,验证转染后所表达的hTGF-β1蛋白的生物学活性,及MTT法检测转染后对BMSCs增殖的影响。结果转染72h,BMSCs表达hTGF-β1蛋白量是转染Adeno-lacZ的BMSCs2.65倍(P<0.05);MV-1-Lu细胞生长抑制率测定显示BMSCs分泌的hTGF-β1蛋白有生物学活性,MTT法检测结果提示adeno-hTGF-β1转染BMSCs的增殖能力较对照组弱。结论转染重组adeno-hTGF-β1的BMSCs表达有生物学活性的hTGF-β1蛋白,hTGF-β1蛋白对BMSCs的增殖有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 增殖 腺病毒 转化生长因子Β1
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对骨髓细胞学检查的体会 被引量:10
3
作者 卢兴国 马顺高 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期170-171,共2页
关键词 骨髓检查 形态学 细胞免疫化学染色 非红系分类 Ⅱ型原始细胞 I型原始细胞
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B_3HM细胞内活性物质对小鼠造血的作用
4
作者 姜学英 张丽艳 +2 位作者 李侠 蔡辉国 宋增璇 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期17-19,共3页
目的 观察B3HM细胞条件培养液 (B3HM CM )和细胞匀浆组分对小鼠造血细胞的作用。寻找其中可能存在的诱导造血细胞发生恶性转化的活性物质。方法 将B3HM CM加到小鼠骨髓长期培养体系中 ,定期计数细胞生长情况 ;用B3HM CM或经差速离心... 目的 观察B3HM细胞条件培养液 (B3HM CM )和细胞匀浆组分对小鼠造血细胞的作用。寻找其中可能存在的诱导造血细胞发生恶性转化的活性物质。方法 将B3HM CM加到小鼠骨髓长期培养体系中 ,定期计数细胞生长情况 ;用B3HM CM或经差速离心法分离的B3HM细胞匀浆组分注射经照射处理的小鼠 ,观察小鼠存活情况和造血细胞的变化。结果 B3HM CM在骨髓培养体系中促巨核细胞增殖 ,在小鼠体内促造血细胞增多。B3HM细胞匀浆第 3组分可诱发小鼠白血病。 展开更多
关键词 B3HM细胞 条件培养液 骨髓细胞 造血细胞 动物实验 细胞活性物质 细胞增殖刺激因子
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清脑灵诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化成神经元样细胞
5
作者 王金良 包斯琴 +4 位作者 彭致远 王岩 张莉莉 孙占山 戴志杰 《中医临床研究》 2016年第35期14-16,共3页
目的:观察清脑灵煎剂是否能诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化成神经元样细胞。方法:将21只四周SD大鼠依照随机性原则分成三组,即空白对照组、β-巯基乙醇组以及清脑灵组,各组均为7只。通过贴壁法分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,体外... 目的:观察清脑灵煎剂是否能诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化成神经元样细胞。方法:将21只四周SD大鼠依照随机性原则分成三组,即空白对照组、β-巯基乙醇组以及清脑灵组,各组均为7只。通过贴壁法分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养,用流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达。清脑灵组用浓度为1mg/m L的清脑灵煎剂诱导MSCs,而β-巯基乙醇组则使用β-巯基乙醇诱导MSCs,空白对照组不进行任何处理,分别于5h、12h、1d、3d、7d在倒置显微镜下观察细胞形态变化,用免疫细胞化学方法观察被诱导细胞巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:流式细胞仪检测显示MSCs不表达CD11b、CD45,诱导后细胞的免疫细胞化学示Nestin阳性细胞、NSE阳性细胞和GFAP阴性细胞。结论:清脑灵能诱导MSCs分化成神经元样细胞。 展开更多
关键词 清脑灵 骨髓间充质干细胞 神经元样细胞
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SPIO标记大鼠骨髓基质干细胞及体外磁共振成像研究 被引量:3
6
作者 杨华 张小明 +2 位作者 邵阳 蒋红 翟昭华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第17期1626-1629,共4页
目的探讨以多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)为转染介质介导超顺磁性氧化铁微粒(superparamgnetic iron oxides,SPIO)标记大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的合适条件,通过标记细胞的体外磁共振成像(magnetic reson... 目的探讨以多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)为转染介质介导超顺磁性氧化铁微粒(superparamgnetic iron oxides,SPIO)标记大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的合适条件,通过标记细胞的体外磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)获取最佳的磁共振扫描序列。方法分离、纯化、培养大鼠BMSCs,SPIO和PLL以1∶0.0012混合配制氧化铁-多聚赖氨酸(F-PLL)混合液,用铁浓度分别为0、4.2、8.4、21、42、84μg/ml的FE-PLL复合物标记BMSCs。计算细胞标记阳性率,测量并绘制未标记细胞和不同浓度铁标记细胞的MTT生长曲线;对不同浓度铁标记的细胞进行磁共振成像。分别用浓度为0、0.05、0.25、0.5、1.0、5.0μg/ml的PLL同BMSCs共同培养,了解各种浓度PLL对细胞的生存是否有影响。结果细胞的标记率分别为0%、(44.40±11.33)%、(71.97±8.01)%、(88.86±9.10)%、(98.24±2.94)%、100%,随着SPIO浓度的增加而增加。MTT显示在铁浓度<42μg/ml时FE-PLL复合物对细胞的生长活性无明显影响,而铁浓度为84μg/ml时,细胞的生长活性受到抑制。PLL在浓度≤1.0μg/ml时对细胞的活力无明显影响;当PLL浓度为5.0μg/ml时,细胞生长明显受抑。MRI信号随FE-PLL复合物浓度的增加而增加(P<0.05),标记细胞的信号在T1WI的改变不及在T2WI及T2*WI明显,而以T2*WI信号改变最明显(P<0.05)。结论以PLL为转染介质,SPIO能够高效的标记BMSCs,并且在合适的浓度范围内不会影响干细胞的生长活性。 展开更多
关键词 超顺磁性氧化铁 多聚赖氨酸 骨髓基质干细胞 磁共振成像
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中国整形美容协会抗衰老分会《细胞活性物质抗衰老技术规范化指南》 被引量:8
7
作者 汪淼 丁寅佳 赵启明 《中华保健医学杂志》 2017年第5期456-457,共2页
包括各类细胞因子在内的细胞活性物质,因为其具有组织修复再生的特性,而被广泛应用于医疗领域,成为抗衰老医学的一个热点。但是目前也出现了许多问题,尤其是乱用、滥用细胞活性物质的现象时有发生,严重损害了求美者的权益。为规范细胞... 包括各类细胞因子在内的细胞活性物质,因为其具有组织修复再生的特性,而被广泛应用于医疗领域,成为抗衰老医学的一个热点。但是目前也出现了许多问题,尤其是乱用、滥用细胞活性物质的现象时有发生,严重损害了求美者的权益。为规范细胞活性物质抗衰老技术的临床应用,保证医疗质量和医疗安全,维护广大求美者的权益,依照我国相关医疗法律法规,特制定本规范化指南。 展开更多
关键词 活性物质 抗衰老 细胞生长 求美者 技术规范化 类细胞因子 整形美容 医疗安全 医疗法律法规 医疗质量
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骨髓细胞动员增强趋化因子活性对静脉血栓溶解吸收的影响
8
作者 孙浩 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期110-113,共4页
目的:探讨骨髓细胞动员对巨噬细胞聚集静脉血栓趋化作用的影响。方法:SD成年大鼠随机分为正常组、假手术组、血栓组和rhG-CSF组。术前0.5h、术后7d和14d采集外周血,用ELISA法检测外周血MCP-3水平。术后7d、14d取血栓组和rhG-CSF组下腔... 目的:探讨骨髓细胞动员对巨噬细胞聚集静脉血栓趋化作用的影响。方法:SD成年大鼠随机分为正常组、假手术组、血栓组和rhG-CSF组。术前0.5h、术后7d和14d采集外周血,用ELISA法检测外周血MCP-3水平。术后7d、14d取血栓组和rhG-CSF组下腔静脉标本,用RT-PCR法检测血栓中MCP-3mRNA的表达情况。结果:术后14drhG-CSF组外周血MCP-3水平明显高于术前,且高于假手术组和血栓组术后14d外周血MCP-3水平,分别与术前、假手术组和血栓组比较P<0.05,差异有统计学意义。术后7d和14d,rhG-CSF组MCP-3mRNA表达较血栓组显著升高,两组间比较有显著差异P<0.01。结论:骨髓细胞动员增强了MCP-3对巨噬细胞的趋化作用。 展开更多
关键词 骨髓细胞动员 单核细胞趋化因子-3 巨噬细胞
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小鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养
9
作者 许琴 朱依纯 +1 位作者 肖雁冰 田虹 《遵义医学院学报》 2002年第2期109-111,共3页
目的 建立成年小鼠骨髓间充质干细胞 (MSC)的分离和培养方法。方法 应用体外细胞培养技术将成年小鼠骨髓间充质干细胞自股骨、胫骨中分离、纯化和培养 ,用形态学鉴定培养的MSC ,用台盼蓝染色法及在光镜下观察分离培养的细胞和摄像纪... 目的 建立成年小鼠骨髓间充质干细胞 (MSC)的分离和培养方法。方法 应用体外细胞培养技术将成年小鼠骨髓间充质干细胞自股骨、胫骨中分离、纯化和培养 ,用形态学鉴定培养的MSC ,用台盼蓝染色法及在光镜下观察分离培养的细胞和摄像纪录。结果 经培养存活的骨髓间充质干细胞呈长梭形 ,似成纤维样细胞 ,长宽比约为 2~ 3:1。 展开更多
关键词 小鼠 骨髓 间充质干细胞 分离 培养
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人骨髓间质干细胞体外培养及诱导成骨的鉴定 被引量:2
10
作者 张利 查振刚 +6 位作者 姚平 吴昊 张嘉晴 刘宁 黄春华 林宏生 王国普 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期199-201,共3页
目的优化人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchym alstem cells,hBMSCs)体外分离培养方法,对hBMSCs体外培养及诱导成骨能力进行鉴定。方法密度梯度离心法分离hBMSCs,流式细胞分析法(FACS)对细胞表面抗原、细胞活力、细胞周期进... 目的优化人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchym alstem cells,hBMSCs)体外分离培养方法,对hBMSCs体外培养及诱导成骨能力进行鉴定。方法密度梯度离心法分离hBMSCs,流式细胞分析法(FACS)对细胞表面抗原、细胞活力、细胞周期进行检测。以含地塞米松(1×10-7mmol/L)、β-甘油磷酸钠(10 mmol/L)、抗坏血酸(35.22 mg/L)的DMEM培养液对hBMSCs进行诱导分化,相差显微镜和透视电镜观察细胞形态,Gomori钙钴法进行碱性磷酸酶染色(ALP),免疫组化检测Ι型胶原,茜素红法进行钙结节染色。结果hBMSCs可在体外分离扩增,表达CD44、CD105和CD106,不表达CD34和CD45,细胞活力为92.3%,G0-G1细胞占94.2%。经成骨培养液诱导后细胞形态由长梭形向多边形转变,ALP染色、Ι型胶原染色及钙结节染色均为强阳性。结论hBMSCs可在体外长期、稳定培养,具有向成骨细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 细胞培养 诱导成骨
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年过半百要养髓
11
作者 丁志英 《家庭医药(快乐养生)》 2014年第2期37-37,共1页
年过半百的中老年人注意养髓,这样可减少各种老年性疾病的发生。中医所说的“髓”,包括人体骨骼中起造血作用的骨髓、脊椎管内的脊髓、颅腔中的脑髓,还泛指滋养人体的精髓。
关键词 骨髓 老年性疾病 中老年人 造血作用 人体骨骼 椎管内
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Bone marrow-derived mesenchymal stem cells are capable of mediating hepatitis B virus infection in injured tissues 被引量:5
12
作者 Rong, Q. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1141-1141,共1页
关键词 骨髓 间叶细胞 肝炎 治疗方法 临床分析
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骨髓基质中脂肪细胞的作用 被引量:2
13
作者 栾晨光 《国外医学(创伤与外科基本问题分册)》 1997年第2期103-105,共3页
本文回顾了近年来在骨髓脂肪细胞方面的研究进展。
关键词 脂肪细胞 骨髓基质 生成 造血 脂肪形成
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多种细胞因子激活骨髓免疫细胞及细胞毒作用 被引量:2
14
作者 黄文荣 高春记 +2 位作者 张伯龙 靳海杰 达万明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期48-51,共4页
探讨不同细胞因子组合激活骨髓中免疫细胞数量、提高细胞毒作用和保留造血祖细胞的情况。将骨髓细胞分为 4组进行培养 :①对照组 :不加任何细胞因子 ;②IL 2组 :用IL 2激活骨髓细胞 ;③CD3 AK组 :用IL 2和CD3 McAb激活骨髓细胞 ;④CIK... 探讨不同细胞因子组合激活骨髓中免疫细胞数量、提高细胞毒作用和保留造血祖细胞的情况。将骨髓细胞分为 4组进行培养 :①对照组 :不加任何细胞因子 ;②IL 2组 :用IL 2激活骨髓细胞 ;③CD3 AK组 :用IL 2和CD3 McAb激活骨髓细胞 ;④CIK组 :加入IFN γ ,IL 1,IL 2和CD3 McAb激活骨髓细胞。培养前后各组取单个核细胞进行CFU GM和CD3表型检测 ;培养过程中观察各组细胞数量变化 ;用MTT法检测各组培养后的细胞毒作用。结果发现 ,CD3 AK和CIK组培养后CD3+细胞比例明显增加 ,且两组的细胞总数增加和杀瘤活性明显高于对照组和IL 2组 (P <0 .0 5 ) ;各组培养后CFU GM均有所减少 ,但各组间无显著差别。本试验表明 ,IL 2和CD3 McAb组合既能刺激骨髓免疫细胞增殖并提高细胞毒作用 ,又能在培养后保留足够的造血干 祖细胞 。 展开更多
关键词 细胞因子 骨髓 细胞毒作用 免疫细胞
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骨髓间质干细胞的临床应用 被引量:1
15
作者 吴荣强 许文荣 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2005年第3期268-270,273,共4页
关键词 骨髓间质干细胞 治疗 诱导
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不同浓度的骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响 被引量:35
16
作者 舒晓春 刘君静 +1 位作者 朱丹华 庞天骄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1261-1264,共4页
目的:通过在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)实施干预诱导,探寻骨碎补总黄酮对BMSCs的成骨诱导分化能力及不同浓度下可能存在的剂量效应关系。方法:应用全骨髓贴壁培养法对BMSCs进行分离、纯化,并通过流式细胞术对BMSCs进行鉴... 目的:通过在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)实施干预诱导,探寻骨碎补总黄酮对BMSCs的成骨诱导分化能力及不同浓度下可能存在的剂量效应关系。方法:应用全骨髓贴壁培养法对BMSCs进行分离、纯化,并通过流式细胞术对BMSCs进行鉴定,再通过设立含不同浓度骨碎补总黄酮条件培养基,分组对BMSCs进行干预,观察各组7d和14d碱性磷酸酶(ALP)的表达,同时通过ALP染色和矿化结节染色进行定性分析。结果:用全骨髓贴壁法成功分离获得了均一稳定的BMSCs,各浓度骨碎补总黄酮作用BMSCs7d和14d后,诱导不同程度的ALP表达,经10-5g/L骨碎补总黄酮诱导,ALP染色及矿化结节染色均阳性。结论:低浓度骨碎补总黄酮能促进BMSCs向成骨细胞分化,其ALP生成量随着骨碎补总黄酮浓度的降低大致呈增加趋势。 展开更多
关键词 骨碎补总黄酮 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 细胞分化
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骨髓造血细胞粘附的分子机制及意义
17
作者 夏长青 储榆林 《国外医学(输血及血液学分册)》 北大核心 1995年第6期328-331,共4页
骨髓内粘附分子在正常造血细胞的粘附、定位、分化、成熟以及在某些造血系统疾病的发生、发展和转归等方面起着重要的作用。本文就骨髓内粘附分子的种类、结构以及生物学作用方面的研究进展进行了综述。
关键词 骨髓 造血细胞 粘附分子 综述
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无细胞胎肝液对大剂量化疗后小鼠骨髓造血细胞的影响
18
作者 刘志跃 朱怀杰 +2 位作者 倪秀雄 石曼君 刘桂亭 《内蒙古医学院学报》 1993年第2期79-82,共4页
采用小鼠体内液体扩散盒及脾结节法观察了胎鼠和成年小鼠肝脏无细胞液对大剂量环磷酰胺化疗后小鼠骨髓造血细胞增殖与分化的影响。发现无细胞胎肝液能明显促进受抑制骨髓中多能造血干细胞(CFU—S)的集落形成率,但对扩散盒内粒系祖细胞(... 采用小鼠体内液体扩散盒及脾结节法观察了胎鼠和成年小鼠肝脏无细胞液对大剂量环磷酰胺化疗后小鼠骨髓造血细胞增殖与分化的影响。发现无细胞胎肝液能明显促进受抑制骨髓中多能造血干细胞(CFU—S)的集落形成率,但对扩散盒内粒系祖细胞(CFU—D)的增殖分化无促进作用。成年鼠肝无细胞液则对造血细胞的增殖无刺激活性,不能促进化疗后小鼠骨髓中造血干细胞恢复。认为无细胞胎肝液中存在的造血刺激因子能有效缓解细胞毒剂对骨髓多能造血干细胞的抑制。 展开更多
关键词 小鼠 胎肝 造血生长因子 环磷酰胺
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骨髓间充质干细胞多向分化的研究 被引量:3
19
作者 洪波 朱晓玲 《长春中医药大学学报》 2008年第5期537-538,共2页
干细胞是体内存在的一类特殊细胞,既能自我更新又能多向分化。骨髓间充质干细胞作为干细胞中的一种,可分化成多种具有特定功能的细胞,并且证实其可分化为多种组织细胞参与组织损伤的再生和修复。
关键词 骨髓细胞 间质干细胞 细胞分化
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NGF基因在人骨髓巨核细胞表达的意义探讨 被引量:1
20
作者 顾静 吴芳颐 陈秀芳 《南通医学院学报》 1999年第2期141-143,共3页
应用原位分子杂交技术,检测神经生长因子(NGF)在人骨髓巨核细胞分化发育过程中的基因表达情况,以探讨NGF对骨髓造血组织的功能意义。实验结果表明,βNGFcDNA探针与其互补的mRNA杂交反应信号存在于原巨核细胞、幼... 应用原位分子杂交技术,检测神经生长因子(NGF)在人骨髓巨核细胞分化发育过程中的基因表达情况,以探讨NGF对骨髓造血组织的功能意义。实验结果表明,βNGFcDNA探针与其互补的mRNA杂交反应信号存在于原巨核细胞、幼巨核细胞、颗粒型巨核细胞、成熟型巨核细胞等各级不同发育阶段的巨核细胞胞浆中。实验结果提示。 展开更多
关键词 神经生长因子 巨核细胞 基因表达 骨髓
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