利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度检测...利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度检测和细胞凋亡程度检测,并利用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bcl-xL/Bcl-2asociated death promoter,BAD)的表达水平。结果显示,与模型组比较,葛根异黄酮保护组能够抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,降低LDH释放、抑制细胞内Ca^(2+)累积,并且Bcl-2表达水平升高,BAD表达水平降低,Bcl-2与BAD蛋白表达量比值上调。表明葛根异黄酮能减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)造成的PC12细胞损伤,提升细胞存活率,葛根异黄酮可能具有一定的抗缺血性脑卒中活性。其作用机制可能与抑制神经细胞的凋亡,减少神经元丢失相关。展开更多
文摘利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度检测和细胞凋亡程度检测,并利用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bcl-xL/Bcl-2asociated death promoter,BAD)的表达水平。结果显示,与模型组比较,葛根异黄酮保护组能够抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,降低LDH释放、抑制细胞内Ca^(2+)累积,并且Bcl-2表达水平升高,BAD表达水平降低,Bcl-2与BAD蛋白表达量比值上调。表明葛根异黄酮能减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)造成的PC12细胞损伤,提升细胞存活率,葛根异黄酮可能具有一定的抗缺血性脑卒中活性。其作用机制可能与抑制神经细胞的凋亡,减少神经元丢失相关。
文摘对提取蒜台中总黄酮的工艺条件进行响应面优化,旨在获得更高的提取率。在单因素试验的基础上,进行超声波辅助提取蒜台中总黄酮工艺的响应面优化,以乙醇浓度(%)、料液比(m L·g^(-1))、超声温度(℃)和超声时间(min)四个参数为自变量,以总黄酮的提取率为响应值,采用Box-Behnken试验设计方法,研究各自变量及其相互作用对总黄酮提取率的影响。超声波辅助提取蒜台中总黄酮的响应面优化得到最佳提取工艺条件为:81%的乙醇浓度、51 m L·g^(-1)的料液比、61℃的超声温度、105 min的超声时间,此条件下蒜苔总黄酮提取率为0.6799%,影响提取的因素为:乙醇浓度>超声时间>料液比>超声温度。响应面方法建立的模型有效,超声波辅助提高了提取率,为蒜台中总黄酮的提取提供参考。