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中药质量控制与评价创新方法研究进展及应用 被引量:53
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作者 李天娇 包永睿 +5 位作者 王帅 杨欣欣 肖雪 王义明 孟宪生 罗国安 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期6319-6327,共9页
中药质量是保证中药功效稳定性及应用安全性的基础,其规范化、标准化、现代化,是推动中药走向国际化的重要前提。近年来,围绕中药质量控制和评价体系建设及模式创新取得了突破,中药整合质量观、中药质量标志物等新思路、新模式的提出,... 中药质量是保证中药功效稳定性及应用安全性的基础,其规范化、标准化、现代化,是推动中药走向国际化的重要前提。近年来,围绕中药质量控制和评价体系建设及模式创新取得了突破,中药整合质量观、中药质量标志物等新思路、新模式的提出,引领了中药质控发展的新方向,涌现出了一系列中药质量评价创新技术与创新方法。拟从化学基准、化学基准与药理效应基准相结合、化学基准与生物效应基准相结合3个角度,从中药评价方面梳理近年来中药质控方法方面最新研究,系统阐述中药质量评价创新方法及其应用现状,探讨其未来发展趋势,以期为建立符合中药特色理论的质量控制体系提供拓展思路。 展开更多
关键词 中药 质量控制与评价 中药整合质量观 中药质量标志物 创新方法 应用现状
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复方中药质量标志物的发现与量效色卡可视化技术 被引量:20
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作者 孟宪生 包永睿 +2 位作者 王帅 李天娇 罗国安 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期222-227,共6页
针对复方中药化学成分复杂、治疗病症宽泛、质量控制指标不能准确反映其功能属性的现状,笔者以气滞胃痛颗粒复方的质量标志物研究过程为例,创新研究思路与技术方法,构建了"基于功能,明确主治"、"组效相关,多组多效"... 针对复方中药化学成分复杂、治疗病症宽泛、质量控制指标不能准确反映其功能属性的现状,笔者以气滞胃痛颗粒复方的质量标志物研究过程为例,创新研究思路与技术方法,构建了"基于功能,明确主治"、"组效相关,多组多效"、"组分解析,系统整合"、"谱效相关,见谱见效"、"量效色卡,质量可视"逐层递进的五步复方中药质量控制与评价新模式。建立了基于多重功效的组效对应、多组多效药理药效综合评价体系,完善发展了全时段等基线多波长覆盖融合指纹图谱技术,首次研制开发"谱-效色卡"软件,实现中药药效的"可视化"。旨在为复方中药整体性质量控制提供探索性解决方案。 展开更多
关键词 中药复方 质量标志物 谱效关系 量效色卡
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中药质量评价研究现状及“质-量”双标评价方法探讨 被引量:10
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作者 孟宪生 罗曦 +3 位作者 贾梦楠 包永睿 王帅 李天娇 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第22期7281-7286,共6页
中药品种来源宽泛、化学成分复杂,导致中药质量良莠不齐。完善中药质量评价标准,一直被认为是制约我国传统中医药现代化发展的重点、难点问题。针对我国目前中药质量评价研究现状,总结了中药质量评价的关键科学问题,并提出了中药“质-... 中药品种来源宽泛、化学成分复杂,导致中药质量良莠不齐。完善中药质量评价标准,一直被认为是制约我国传统中医药现代化发展的重点、难点问题。针对我国目前中药质量评价研究现状,总结了中药质量评价的关键科学问题,并提出了中药“质-量”双标评价方法。以对照药材为基准物质建立特征图谱,开展基于对照药材的定性研究;以保留时间稳定且价格低廉、易获得的内标物质作为定量评价指标,开展基于内标物质的药效成分相对定量研究。该方法旨在科学、明晰地辨别中药的真伪优劣,降低企业生产的经济负担和广大民众的用药成本,切实保障中药质量。 展开更多
关键词 中药 “质-量”双标 对照药材 质量评价 特征图谱 药效成分
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基于代谢组学木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤作用机制研究 被引量:9
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作者 李楠楠 孟宪生 +2 位作者 包永睿 王帅 李天娇 《中南药学》 CAS 2019年第12期2034-2039,共6页
目的初步阐释木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤的作用机制,为木蝴蝶总黄酮作为抗肝癌药物的开发和临床应用提供实验依据。方法采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌模型,随机分为空白组,模型组,阳性对照组,木蝴蝶总黄酮高、中、低剂量组,从造模第6周... 目的初步阐释木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤的作用机制,为木蝴蝶总黄酮作为抗肝癌药物的开发和临床应用提供实验依据。方法采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌模型,随机分为空白组,模型组,阳性对照组,木蝴蝶总黄酮高、中、低剂量组,从造模第6周开始给药,每日1次,连续10周。第17周眼球取血,分离各组血浆。采用HPLC-QTOF-MS联用技术分析木蝴蝶总黄酮干预后各组大鼠血浆中代谢物的变化,利用Agilent Mass Profiler Professional 12.6软件结合相关数据库进行主成分分析(PCA)、差异代谢物分析及代谢通路分析。结果与模型组比较,木蝴蝶总黄酮干预后共有285种代谢物发生变化,其中上调的有41种,下调的有244种。主要与色氨酸代谢、丝氨酸代谢、胆汁酸合成、花生四烯酸代谢、亚油酸代谢等途径有关。结论木蝴蝶总黄酮发挥抗肝肿瘤作用可能与调节氨基酸代谢、脂肪酸代谢、胆汁酸合成等代谢途径有关。 展开更多
关键词 木蝴蝶总黄酮 肝肿瘤 代谢组学 作用机制
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孟氏膏药外敷法治疗腰椎间盘突出致腰腿痛的临床疗效分析 被引量:3
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作者 孟照明 孟兆亮 +3 位作者 孟宪昌 孟献圣 孟宪长 李学朋 《系统医学》 2021年第3期10-12,共3页
目的探讨孟氏膏药外敷法治疗腰椎间盘突出致腰腿痛的临床疗效分析。方法选取2017年6月—2019年6月来该院脊柱外科进行治疗的180例腰椎间盘突出致腰腿痛患者作为研究对象,将其分为治疗组和对照组,两组各包含90例患者。其中,治疗组实施孟... 目的探讨孟氏膏药外敷法治疗腰椎间盘突出致腰腿痛的临床疗效分析。方法选取2017年6月—2019年6月来该院脊柱外科进行治疗的180例腰椎间盘突出致腰腿痛患者作为研究对象,将其分为治疗组和对照组,两组各包含90例患者。其中,治疗组实施孟氏膏药外敷法治疗,而对照组实施常规治疗措施,分析两种措施的效果。结果治疗组治疗第14天、第28天的中医证候积分(8.36±2.68)分、(5.09±2.41)分以及JOA评分(15.46±1.03)分、(5.12±0.65)分均低于对照组(12.43±2.79)分、(8.77±2.60)分,(18.72±1.21)分、(8.45±0.88)分,差异有统计学意义(t=9.981、9.848、19.463、28.876,P<0.05);治疗组总有效率96.7%高于对照组60.0%,满意度评分(98.1±2.12)分高于对照组(92.7±2.34)分,差异有统计学意义(χ^(2)=35.646,t=16.220,P<0.05)。结论腰椎间盘突出致腰腿痛的患者应用孟氏膏药外敷法治疗中起着重要的作用,通过治疗配合,提高患者的治疗依从性,提高效果和康复效果是治疗的必要条件,可明显改善患者的病情,在临床上具有推广意义。 展开更多
关键词 孟氏膏药 外敷法 腰椎间盘突出 腰腿痛 疗效
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基于3D微流控芯片分析鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa的药理作用 被引量:6
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作者 王妮佳 王嘉仡 +3 位作者 孟宪生 包永睿 王帅 李天骄 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期103-108,共6页
目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa... 目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa,通过3维(3D)微流控芯片筛选合适的给药浓度及时间。运用流式细胞仪测定鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa周期与凋亡的影响,分别应用Flow Jo v10. 0. 7及ModFit LT 3. 2软件进行分析。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)与半胱天冬酶-3(Caspase-3)因子的含量变化。结果:鉴定并推断了鸡血藤总鞣质中15种成分。最终确定鸡血藤总鞣质低、中、高给药质量浓度分别为0. 5,1. 0,2. 0 g·L^-1,36 h为最佳给药时间。经鸡血藤总鞣质作用后宫颈癌细胞HeLa早凋与晚凋比例明显增加,宫颈癌细胞HeLa DNA合成前期(G0/G1期)明显增加,DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2/M期)减小。经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中VEGF-A因子显著降低,Caspase-3因子显著增加。结论:鸡血藤中含有丰富的鞣质类成分,此类成分对宫颈癌细胞HeLa有明显的抑制其增殖并促进其凋亡的作用,为该有效部位的后续研究与开发提供了实验依据。 展开更多
关键词 鸡血藤 总鞣质 3D微流控芯片 宫颈癌细胞HELA 细胞凋亡 细胞周期 酶联免疫吸附测定法
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基于灰色关联度的旋覆花黄酮类有机成分与无机成分分析 被引量:4
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作者 王焱 李天娇 +2 位作者 孟宪生 包永睿 王帅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期69-74,共6页
目的:在建立不同产地旋覆花黄酮类有机成分指纹谱和无机成分轮廓谱的基础上,探讨有机成分与无机成分的相关性,为全面控制旋覆花药材的质量提供前期基础。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立有机成分指纹谱,采用电感耦合等离子体... 目的:在建立不同产地旋覆花黄酮类有机成分指纹谱和无机成分轮廓谱的基础上,探讨有机成分与无机成分的相关性,为全面控制旋覆花药材的质量提供前期基础。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立有机成分指纹谱,采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)建立无机元素轮廓谱,并通过灰色关联度法探讨两者的相关性。结果:从有机成分指纹图谱中获得18个共有指纹峰;从无机元素轮廓谱中获得13种共有特征元素;灰色相关分析结果显示1号色谱峰与K,Ca相关性最强,2号,17号色谱峰与Na,Mg,Mn相关性最强,4号,13号色谱峰与Zn相关性最强,5号色谱峰与Fe相关性最强,9号,1l号色谱峰与Al相关性最强,相关系数均〉0.9690。结论:该研究在控制旋覆花黄酮类有机成分和无机元素含量基础上进行关联分析,二者存在较强相关性,说明控制有机成分含量的同时也可以部分反应无机元素含量高低,为建立一种全面的质量控制方法及系统评价旋覆花药材质量提供实验参考。 展开更多
关键词 旋覆花黄酮 灰色关联 有机成分 无机元素
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败酱总黄酮提取纯化工艺优化及纯化前后体外抗肝肿瘤药效对比研究 被引量:4
8
作者 赵琳 赵焕君 +4 位作者 包永睿 王帅 李天娇 孟宪生 项铮 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期546-550,共5页
目的优选败酱总黄酮的提取纯化工艺,并结合体外药效实验,考察纯化前后的活性,为败酱合理开发和利用提供依据。方法采用正交试验设计法,以总黄酮提取量为指标,优选提取工艺;采用大孔吸附树脂法,以总黄酮含量为考察指标,优选纯化工艺;采用... 目的优选败酱总黄酮的提取纯化工艺,并结合体外药效实验,考察纯化前后的活性,为败酱合理开发和利用提供依据。方法采用正交试验设计法,以总黄酮提取量为指标,优选提取工艺;采用大孔吸附树脂法,以总黄酮含量为考察指标,优选纯化工艺;采用MTT法比较总黄酮纯化前后体外肝癌细胞抑制作用。结果败酱总黄酮最佳提取工艺为15倍量60%乙醇回流提取,提取3次,每次1h。最佳纯化工艺为HPD-300树脂,上样浓度0.1 g饮片/mL,0.9 g/mL(饮片/湿树脂)比例、6倍水除杂,4倍70%乙醇洗脱,收集洗脱液水浴蒸干,即得败酱总黄酮富集物;纯化后总黄酮体外抗肝肿瘤IC_(50)值比纯化前降低81.16%。结论该工艺方法先进合理,适合工业生产,具有简便、快速、准确等优点,为败酱的进一步研究及开发奠定基础。 展开更多
关键词 败酱 黄花败酱 总黄酮 提取工艺 纯化工艺
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孟氏膏药联合活血化瘀通络胶囊治疗腰椎间盘突出症的临床疗效
9
作者 孟照明 孟兆亮 +3 位作者 孟宪昌 孟献圣 孟宪长 李学朋 《系统医学》 2021年第1期1-3,28,共4页
目的探讨孟氏膏药联合活血化瘀通络胶囊治疗腰椎间盘突出证的临床疗效。方法选取2017年6月—2019年6月来该院骨外科进行治疗的60例腰椎间盘突出症患者作为研究对象,将其分为治疗组和参考组,两组各包含30例患者。其中,治疗组实施孟氏膏... 目的探讨孟氏膏药联合活血化瘀通络胶囊治疗腰椎间盘突出证的临床疗效。方法选取2017年6月—2019年6月来该院骨外科进行治疗的60例腰椎间盘突出症患者作为研究对象,将其分为治疗组和参考组,两组各包含30例患者。其中,治疗组实施孟氏膏药联合活血化瘀通络胶囊治疗,而参考组实施常规治疗措施,分析两种措施的效果。结果治疗组治疗总有效率93.3%优于参考组50.0%,差异有统计学意义(χ^(2)=13.871,P<0.05);治疗组满意度评分98.9分高于对照组93.7分,差异有统计学意义(t=8.010,P<0.05);治疗组患者的生理功能(94.3±1.5)分、精神健康(95.1±1.7)分、社会功能(93.2±1.9)分、情感(95.1±1.6)分,优于参考组(74.1±1.8)分、(72.5±1.1)分、(74.5±1.5)分、(72.2±1.6)分,差异有统计学意义(t=47.220、61.133、42.311、55.432,P<0.05)。结论腰椎间盘突出症的患者应用孟氏膏药联合活血化瘀通络胶囊治疗中起着重要的作用,通过治疗配合,提高患者的治疗依从性,提高效果和康复效果是治疗的必要条件,可明显改善患者的病情,在临床上具有推广意义。 展开更多
关键词 孟氏膏药 孟氏活血化瘀通络胶囊 腰椎间盘突出症
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基于微流控芯片的复方木鸡颗粒抗肝肿瘤的“谱-物-效”关系 被引量:2
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作者 秦妍 包永睿 +4 位作者 王帅 李天娇 张秀君 孟宪生 潘海鸥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期185-192,共8页
目的探讨复方木鸡颗粒抗肝肿瘤作用的物质基础。方法采用微流控芯片技术对复方木鸡颗粒进行体外抗肝肿瘤药效学研究;采用HPLC法建立复方木鸡颗粒指纹图谱;采用灰色关联度分析、偏最小二乘回归以及网络药理学方法,对复方木鸡颗粒进行“谱... 目的探讨复方木鸡颗粒抗肝肿瘤作用的物质基础。方法采用微流控芯片技术对复方木鸡颗粒进行体外抗肝肿瘤药效学研究;采用HPLC法建立复方木鸡颗粒指纹图谱;采用灰色关联度分析、偏最小二乘回归以及网络药理学方法,对复方木鸡颗粒进行“谱-物-效”分析;采用UPLC-Q-TOF-MS技术对药效成分进行解析;结果成功建立7批不同提取方式的复方木鸡颗粒指纹图谱,灰色关联分析结果显示复方木鸡颗粒与药效关联系数>0.80的14个成分中有7个呈正相关;对抗肝肿瘤具有促进作用的贡献依次为峰号48(木犀草素)>6(没食子酸)>19(绿原酸)>59(槲皮素)>67(山柰酚)>65(柚皮素)>38(鞣花酸)。结论本实验通过建立“谱-物-效”研究方法,明确以上7种活性单体很可能为复方木鸡颗粒的抗肝肿瘤物质基础。 展开更多
关键词 复方木鸡颗粒 肝肿瘤 指纹图谱 微流控芯片 谱效分析 物质基础
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苎麻根石油醚部位体外抗肿瘤生物活性及其GC-MS分析 被引量:2
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作者 张亚楠 包永睿 +2 位作者 孟宪生 王帅 李天骄 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-205,共5页
目的:明确苎麻根石油醚部位体外抗胃癌活性并揭示其发挥药效的物质基础,为苎麻根的开发利用奠定基础。方法:采用噻唑蓝(MTT)法考察不同给药剂量,不同给药时间下苎麻根石油醚部位对人胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用及其与时间、剂量的关系... 目的:明确苎麻根石油醚部位体外抗胃癌活性并揭示其发挥药效的物质基础,为苎麻根的开发利用奠定基础。方法:采用噻唑蓝(MTT)法考察不同给药剂量,不同给药时间下苎麻根石油醚部位对人胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用及其与时间、剂量的关系;采用流式细胞仪检测苎麻根石油醚部位作用于人胃癌HGC-27细胞后细胞凋亡率和细胞周期的变化;通过GC-MS对发挥药效的苎麻根石油醚部位进行成分解析。结果:不同质量浓度的苎麻根石油醚部位作用于人胃癌HGC-27细胞24,48,72 h后,均呈现出较好的细胞增殖抑制作用,并呈现一定的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P <0. 05);苎麻根石油醚部位作用人胃癌HGC-27细胞后可诱导细胞凋亡,影响细胞周期的正常变化,G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增多;通过GC-MS鉴定出苎麻根石油醚部位中26种化学成分,主要包括谷甾醇、豆甾醇等。结论:苎麻根石油醚部位为其抗胃癌活性部位,其发挥药效的主要成分为甾醇类化合物,为苎麻根在临床上的合理应用及其在抗肿瘤方面的进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 苎麻根 人胃癌HGC-27细胞株 细胞周期 细胞凋亡 色相色谱-质谱
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基于微流控芯片技术的瘀血痹胶囊治疗类风湿关节炎处方分析
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作者 唐颖 包永睿 +3 位作者 王帅 李天娇 孟宪生 于睿 《中南药学》 CAS 2023年第3期618-624,共7页
目的基于微流控芯片技术,进行瘀血痹胶囊治疗类风湿关节炎处方分析,为瘀血痹胶囊的物质基础研究提供实验依据。方法以瘀血痹胶囊11味中药为研究对象,基于微流控芯片技术设计并制作治疗类风湿关节炎的药效筛选芯片,按均匀设计方法所得22... 目的基于微流控芯片技术,进行瘀血痹胶囊治疗类风湿关节炎处方分析,为瘀血痹胶囊的物质基础研究提供实验依据。方法以瘀血痹胶囊11味中药为研究对象,基于微流控芯片技术设计并制作治疗类风湿关节炎的药效筛选芯片,按均匀设计方法所得22个不同配伍组进行给药干预,以细胞凋亡率为评价指标,建立回归方程得到瘀血痹胶囊药效最佳的药物组合及其最优配比,并与原方进行药效差异性分析。结果与空白对照组比较,瘀血痹胶囊各配伍组均能诱导RA-FLSs细胞凋亡(P<0.01)。根据逐步回归分析结果,乳香、没药、姜黄、丹参药物组合诱导RA-FLSs细胞凋亡效果最佳,最佳配比为乳香(X_(1))∶没药(X _(2))∶姜黄(X_(10))∶丹参(X_(11))=2.628∶2.946∶4.208∶6.852。将筛选出的复方与瘀血痹胶囊进行药效差异性对比,在相同剂量时,4味中药按最优配比得到的复方(简称最优配伍方),与按原方比例仅含4味中药配伍的复方(简称筛选方)诱导细胞凋亡作用相当,且筛选方能够达到瘀血痹胶囊作用的77%左右。结论本研究基于微流控芯片技术,得到乳香、没药、姜黄、丹参的药物组合是瘀血痹胶囊处方中发挥治疗类风湿关节炎作用的主要组成。 展开更多
关键词 瘀血痹胶囊 均匀设计 类风湿关节炎 微流控芯片
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中药质量评价关键问题与分析方法探讨 被引量:34
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作者 王帅 包永睿 +2 位作者 李天娇 杨欣欣 孟宪生 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期132-138,共7页
该文针对我国目前中药质量评价体系现状,总结了中药质量评价的关键科学问题,并围绕“发现”与“控制”有效成分的中药质量评价方法进行探讨。笔者结合多年中药质量分析研究工作经验,分析了中药“谱-效”关系研究、全时段等基线多波长融... 该文针对我国目前中药质量评价体系现状,总结了中药质量评价的关键科学问题,并围绕“发现”与“控制”有效成分的中药质量评价方法进行探讨。笔者结合多年中药质量分析研究工作经验,分析了中药“谱-效”关系研究、全时段等基线多波长融合指纹图谱、生物活性测定法3种质量评价与检测方法的研究内容、手段、适用范围等,为丰富、完善中药质量控制方法和中药质量标准体系的提升提供了借鉴。 展开更多
关键词 中药质量评价 “谱-效”关系研究 全时段等基线多波长覆盖融合指纹图谱 生物活性测定法
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基于NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路介导的巨噬细胞焦亡探究葛根芩连汤对动脉粥样硬化易损斑块的干预机制 被引量:22
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作者 郑一 郭鹤 +9 位作者 包永睿 王帅 李天娇 罗曦 张欢 倪菲 段盈竹 张颖 于睿 孟宪生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期70-78,共9页
目的:探究葛根芩连汤(GQL)通过调控核转录因子(NF)-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶(Caspase)-1通路介导的巨噬细胞焦亡对动脉粥样硬化(AS)易损斑块的作用。方法:12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的载脂蛋白E基因敲除... 目的:探究葛根芩连汤(GQL)通过调控核转录因子(NF)-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶(Caspase)-1通路介导的巨噬细胞焦亡对动脉粥样硬化(AS)易损斑块的作用。方法:12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠随机分为5组,即模型组、葛根芩连汤低、中、高剂量组(GQL-D、Z、G组)、立普妥组,以高脂饲料喂养造模。空白组、模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃;GQL-D、Z、G、立普妥组分别予对应浓度的药物灌胃8周。苏木素-伊红(HE)染色观测主动脉区域斑块情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平,ELISA检测巨噬细胞甘露糖受体(MMR/CD206)/凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、CD206/NLRP3蛋白表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠gasdermin D蛋白C端(C-terminal GSDMD)、gasdermin D蛋白N端(N-terminal GSDMD)、NLRP3、含胱天蛋白酶-1前体(pro-Caspase-1)和NF-κB p65蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型小鼠AS病变程度严重,血清IL-1β、IL-18、组织ASC、NLRP3、C-terminal GSDMD、N-terminal GSDMD、pro-Caspase-1和NF-κB p65表达水平明显升高(P<0.05),CD206水平明显下降(P<0.05);与模型组比较,给药各组小鼠主动脉壁AS病变程度有所减轻,血清IL-1β、IL-18、组织ASC、NLRP3、C-terminal GSDMD、N-terminal GSDMD、pro-Caspase-1和NF-κB p65表达水平有不同程度下降,CD206水平不同程度上升,部分组结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GQL对AS易损斑块的干预作用可能是通过调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路,减轻其介导的巨噬细胞焦亡来实现的。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 动脉粥样硬化 巨噬细胞 焦亡 机制
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UPLC-Q-TOF-MS/MS快速鉴定补肺健脾方的化学成分 被引量:21
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作者 崔琳琳 包永睿 +2 位作者 王帅 李天娇 孟宪生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期184-193,共10页
目的:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对补肺健脾方中的化学成分进行检测和分析。方法:采用Agilent Poroshell SB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm),正、负离子模式下的流动相系统分别选择0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~10 min,3%... 目的:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对补肺健脾方中的化学成分进行检测和分析。方法:采用Agilent Poroshell SB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm),正、负离子模式下的流动相系统分别选择0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~10 min,3%B;10~100 min,3%~50%B;100~120 min,50%~100%B)和水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~5 min,3%B;5~60 min,3%~100%B),流速0.6 mL·min^-1,柱温30℃。采用电喷雾离子源(ESI),干燥气流速13 L·min^-1,干燥气温度350℃,毛细管电压3.5 kV,雾化器压力310.28 kPa,碎裂电压125 V,二级质谱碰撞电压40 eV,在正、负离子扫描采集数据,采集范围均为m/z 50~1000,通过Agilent MassHunter Qualitative Analysis数据分析定性软件进行色谱峰的提取和匹配。结果:通过质谱信息并结合对照品、相关文献、数据库检索,共鉴别出了95个化合物,包括黄酮类41个,生物碱类23个、木脂素类12个,有机酸类9个和其他类化合物10个。结论:补肺健脾方化学成分复杂,不同成分裂解规律各异,黄酮类类化合物在裂解过程中容易发生脱糖基、脱水、环的逆狄尔斯-阿尔德反应(RDA)裂解,以及CO,CO2,CHO等一些中性分子丢失;木脂素类成分苯环上常有羟基、羰基、甲氧基等取代基,易得到丢失H2O或CO的碎片离子;有机酸类化合物的基本结构为酚羟基取代的芳香环、丙烯酸、脂肪酸,该类化合物在负离子模式下易丢失H2O和COOH,且易在羰基处断裂形成碎片离子。该方法快速、灵敏、准确,可快速鉴别补肺健脾方的化学成分,为阐释该复方的功效物质基础提供了依据。 展开更多
关键词 补肺健脾方 化学成分 黄酮类 生物碱类 木脂素类 有机酸类 慢性阻塞性肺疾病
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基于人肝癌细胞HepG2的仙鹤草挥发性成分体外抗肝肿瘤活性评价研究 被引量:21
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作者 田露露 包永睿 +2 位作者 王帅 李天骄 孟宪生 《中南药学》 CAS 2019年第1期15-19,共5页
目的研究仙鹤草挥发性成分物质组成及其体外抗肝肿瘤活性,为其作为天然抗肝肿瘤药物的开发利用奠定实验基础。方法采用GC-MS法对仙鹤草挥发性成分进行化学成分分析,采用MTT比色法对仙鹤草挥发性成分及其主要单体成分棕榈酸、反式角鲨烯... 目的研究仙鹤草挥发性成分物质组成及其体外抗肝肿瘤活性,为其作为天然抗肝肿瘤药物的开发利用奠定实验基础。方法采用GC-MS法对仙鹤草挥发性成分进行化学成分分析,采用MTT比色法对仙鹤草挥发性成分及其主要单体成分棕榈酸、反式角鲨烯、α-亚麻酸作用于人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制率进行研究;采用AnnexinV-FITC/PI双染法对仙鹤草挥发性成分作用HepG2细胞后凋亡率的变化进行研究。结果仙鹤草挥发性成分中共鉴定出23种化合物,其中主要包括醇类成分(26.54%)、脂肪酸类成分(15.70%)、甾醇类成分(13.96%)、烃类成分(7.49%)和酯类成分(13.82%);仙鹤草挥发性成分能显著抑制HepG2细胞的增殖、促进HepG2细胞凋亡,其主要单体成分棕榈酸、反式角鲨烯、α-亚麻酸均表现出显著体外抗HepG2细胞增殖活性。结论仙鹤草挥发性成分通过抑制癌细胞增殖、促进其凋亡发挥抗肝肿瘤作用,其发挥药效的单体成分有棕榈酸、反式角鲨烯、α-亚麻酸,该研究为仙鹤草挥发性成分作为天然抗肝肿瘤药物的开发利用及进一步的抗肿瘤单体研究等提供理论依据。 展开更多
关键词 仙鹤草 挥发性成分 GC-MS 抗肿瘤 人肝癌HepG2细胞株
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基于PI3K/PTEN/VEGF的菟丝子总黄酮抗肝癌作用机制研究 被引量:18
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作者 郑义博 杨欣欣 +3 位作者 包永睿 王帅 李天娇 孟宪生 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2018年第14期1462-1465,共4页
目的:基于PI3K/PTEN/VEGF通路探讨菟丝子总黄酮(TF)体外抗肿瘤作用机制,考察合适的给药浓度,为菟丝子药材的临床合理应用提供参考。方法:以人肝癌细胞HepG2为实验对象,CCK-8法检测TF给药后的细胞活性,计算其IC50值;Annexin V-FITC/PI双... 目的:基于PI3K/PTEN/VEGF通路探讨菟丝子总黄酮(TF)体外抗肿瘤作用机制,考察合适的给药浓度,为菟丝子药材的临床合理应用提供参考。方法:以人肝癌细胞HepG2为实验对象,CCK-8法检测TF给药后的细胞活性,计算其IC50值;Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞凋亡坏死比例;实时荧光定量PCR(qPCR)法检测胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、人类第十号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的相对表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子受体2、3(VEGFR-2、VEGFR-3)表达变化趋势。结果:相对阴性对照组,给药组细胞抑制率和凋亡率均具有良好的量-效正相关;qPCR结果显示TF给药可以显著的上调PTEN mRNA,下调PI3K、VEGF mRNA;ELISA结果显示HIF-1α、VEGFR-2、VEGFR-3蛋白的表达在给药后均有下降(P<0.01)。结论:菟丝子总黄酮有较好的体外抗肝癌药效,其作用可能与上调PTEN的表达对PI3K-Akt通路进行负调控诱导细胞发生凋亡、下调HIF-1α以及VEGF相关基因和受体蛋白的表达等作用机制共同发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 菟丝子总黄酮 HepG2细胞 PI3K-AKT 血管内皮细胞生长因子(VEGF) qPCR 酶联免疫吸附法(ELISA)
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新媒体视域下高校意识形态教育路径探析 被引量:16
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作者 王大伟 孟宪生 《东北师大学报(哲学社会科学版)》 CSSCI 北大核心 2020年第3期165-171,共7页
近年来,新媒体的广泛应用给信息传播带来革命性变革,构建了意识形态工作的全新场域,给高校意识形态教育带来深刻影响。利用新媒体创新高校意识形态教育是时代发展的必然要求,高校可以通过完善领导体制、强化监管机制、创新话语体系、促... 近年来,新媒体的广泛应用给信息传播带来革命性变革,构建了意识形态工作的全新场域,给高校意识形态教育带来深刻影响。利用新媒体创新高校意识形态教育是时代发展的必然要求,高校可以通过完善领导体制、强化监管机制、创新话语体系、促进媒介融合、提升媒介素养等措施构建高校意识形态教育有效路径。 展开更多
关键词 新媒体 高校 意识形态教育
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基于代谢组学的经典名方槐花散治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究 被引量:14
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作者 韩丽颖 于浩 +3 位作者 李天娇 王帅 包永睿 孟宪生 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1300-1309,共10页
该研究基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight tandem mass spectrometry,UHPLC-Q-TOF-MS)技术研究槐花散对溃疡性结肠炎小鼠的干预及血清代谢物的影响... 该研究基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight tandem mass spectrometry,UHPLC-Q-TOF-MS)技术研究槐花散对溃疡性结肠炎小鼠的干预及血清代谢物的影响,探究槐花散治疗溃疡性结肠炎的作用机制。采用致炎剂葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)建立溃疡性结肠炎小鼠模型,通过检测疾病活动指数(disease activity index,DAI),结肠表观评价,结肠组织形态和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等炎症因子的含量,初步评价槐花散对溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果。利用UHPLC-Q-TOF-MS技术检测空白组、模型组以及槐花散低、中、高剂量组小鼠血清样本内源性代谢轮廓谱,以主成分分析(principal components analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares discrimination analysis,PLS-DA)及正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discrimination analysis,OPLS-DA)等多元统计分析进行模式识别,以Mass Profiler Professional(MPP)B.14.00软件中fold change≥2且P<0.05为条件筛选潜在生物标志物,并借助MetaboAnalyst 5.0数据库富集代谢通路。结果表明,槐花散可以显著改善溃疡性结肠炎小鼠一般状态,降低DAI评分,改善结肠组织形态,并降低小鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量。代谢组学结果显示,与槐花散调控相关的潜在生物标志物共38个,主要涉及甘油磷脂代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,葡萄糖醛酸的相互转化和谷胱甘肽代谢等代谢通路。该研究利用代谢组学分析槐花散治疗溃疡性结肠炎的作用机制,为进一步深入研究奠定基础。 展开更多
关键词 槐花散 溃疡性结肠炎 潜在生物标志物 代谢通路
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基于灰色关联分析的茜草醇提物抗氧化、抗肝癌谱效关系研究 被引量:11
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作者 李慧 包永睿 +2 位作者 王帅 李天娇 孟宪生 《中南药学》 CAS 2019年第6期815-819,共5页
目的研究茜草特征图谱与其抗氧化、抗肝癌的相关性,探讨茜草抗氧化及抗肝癌活性的物质基础。方法采用高效液相色谱法建立不同批次茜草的指纹图谱;采用ABTS法评价茜草提取物的抗氧化活性,MTT法检测茜草提取物对肝肿瘤细胞的影响;采用灰... 目的研究茜草特征图谱与其抗氧化、抗肝癌的相关性,探讨茜草抗氧化及抗肝癌活性的物质基础。方法采用高效液相色谱法建立不同批次茜草的指纹图谱;采用ABTS法评价茜草提取物的抗氧化活性,MTT法检测茜草提取物对肝肿瘤细胞的影响;采用灰色关联度分析方法进行“谱-效”关联分析。结果建立茜草特征指纹图谱,标定了26个色谱峰;药效实验结果表明不同茜草样品抗氧化及抑制肝肿瘤细胞(HepG2)增殖活性存在差异;灰色关联分析结果表明7个色谱峰与抗氧化活性密切相关(γ>0.90),分别是1、5、6、9、23、24、26号色谱峰;9个色谱峰与抗肿瘤细胞活性密切相关(γ> 0.90),分别是1、3、6、14、15、18、19、23、24。通过与对照品比对,14、18、19、26号峰为新橙皮苷、山柰酚、茜草素及大叶茜草素。结论茜草抗氧化、抗肿瘤的药效是多种成分共同作用的结果,明确了茜草抗氧化活性与抗肝癌活性的物质基础,为开展以药效为导向的茜草药材质量评价研究提供科学依据。 展开更多
关键词 茜草 指纹图谱 ABTS法 HEPG2细胞 抗氧化 抗肝癌 灰色关联度分析 谱效关系
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