人轮状病毒疫苗的研究进展 被引量：13

1

作者 张改梅 魏文进 付作申 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期583-588,共6页

轮状病毒(RV)是引起全球5岁以下婴幼儿腹泻最重要的病原之一,普遍流行于发达国家和发展中国家,然而在发展中国家该病的病死率较高。由于目前RV腹泻尚无有效治疗药物,并且改善卫生条件对预防RV感染并无明显的效果。因此,疫苗是目前证实... 轮状病毒(RV)是引起全球5岁以下婴幼儿腹泻最重要的病原之一,普遍流行于发达国家和发展中国家,然而在发展中国家该病的病死率较高。由于目前RV腹泻尚无有效治疗药物,并且改善卫生条件对预防RV感染并无明显的效果。因此,疫苗是目前证实能预防和控制RV腹泻唯一有效的手段。尽管RV疫苗研制已取得很大的进展,由于轮状病毒毒株的多样化和流行分布很广,故而继续研制一种新的适合的安全、有效的RV疫苗显得尤为重要。本文针对人RV疫苗的研究进展、质量控制、保护效力及安全性评价作一综述,以期促进后期相关研究。 展开更多

关键词 人轮状病毒 疫苗进展 质量控制 保护效力 安全性

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PCR检测鸡减蛋综合征病毒 被引量：5

2

作者 魏文进 章金钢 +4 位作者 李金中 叶志远 胡敬东 安连波 李茂祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第4期338-340,共3页

根据已报道的鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＤＮＡ序列，设计合成了１对引物，建立了ＥＤＳ－７６病毒的双温式聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法。该方法对ＥＤＳ－７６病毒长春株、河南株和广东株扩增结果均为阳性；而对致死鸡胚孤... 根据已报道的鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＤＮＡ序列，设计合成了１对引物，建立了ＥＤＳ－７６病毒的双温式聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法。该方法对ＥＤＳ－７６病毒长春株、河南株和广东株扩增结果均为阳性；而对致死鸡胚孤儿病毒（ＣＥＬＯＶ）、鸡病毒性关节炎病毒（ＶＡＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）和鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）的扩增结果均为阴性。可检测ＥＤＳ－７６病毒ＤＮＡ为０．３×１０－４ｐｇ。结果表明该方法特异且敏感。此外，将常规的三温式ＰＣＲ的操作规程改为双温式，反应体积由常规５０～１００μＬ改为２０μＬ，使其更加快速、简便。 展开更多

关键词 PCR 鸡病 减蛋综合症 病毒

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23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗的研制 被引量：5

3

作者 韩菲 曹欣 +9 位作者 胡鹏 张明华 郝倩 张美香 任涛 唐秀丽 何佳琦 王婷婷 郑海发 魏文进 《国际生物制品学杂志》 CAS 2010年第3期134-138,共5页

目的 研制23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.方法 大罐培养1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、和33F型肺炎链球菌并进行各型荚膜多糖的纯化,制备23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.结... 目的 研制23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.方法 大罐培养1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、和33F型肺炎链球菌并进行各型荚膜多糖的纯化,制备23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.结果 经检定各型精制多糖主要质量指标均符合〈欧洲药典〉（2005年版）要求.结论 已建立起成熟的细菌培养和多糖纯化工艺. 展开更多

关键词 链球菌 肺炎 多糖类 细菌 疫苗 研制

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Q热疫苗研究进展 被引量：5

4

作者 魏文进 温博海 《微生物学免疫学进展》 2004年第3期64-68,共5页

本文对Q热疫苗的研究进行了回顾、总结。灭活疫苗能刺激机体产生较强的抗Q热特异性体液免疫和细胞免疫 ,免疫保护效果好且持续时间长。但是 ,灭活疫苗有较强的副反应 ,可引起局部脓肿等副反应。减毒疫苗虽然免疫保护效果好 ,但可能有毒... 本文对Q热疫苗的研究进行了回顾、总结。灭活疫苗能刺激机体产生较强的抗Q热特异性体液免疫和细胞免疫 ,免疫保护效果好且持续时间长。但是 ,灭活疫苗有较强的副反应 ,可引起局部脓肿等副反应。减毒疫苗虽然免疫保护效果好 ,但可能有毒力恢复的危险。亚单位疫苗主要有CMR、TCAE和LPS ,其中CMR和TCAE具有与灭活疫苗相近的保护效果 ,副反应很小 ,已进入临床研究。目前研究较多的保护性抗原蛋白有 2 7kD、30kD、34kD、热休克蛋白等主要表面抗原 ,它们有可能发展成为重组亚单位疫苗。多价亚单位疫苗、DNA疫苗以及以活菌为载体的重组菌苗将是有前途的新型Q热疫苗。 展开更多

关键词 Q热 疫苗 贝氏柯克斯体

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PRV特异性糖蛋白gp50基因片段的克隆探针制备 被引量：5

5

作者 魏伟 王正党 +5 位作者 冉多亮 黄嘉驷 孟颖 秋阳 叶志远 魏文进 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期457-459,共3页

在ＢＨＫ２１细胞中增殖伪狂犬病病毒（ＰＲＶ），提纯ＰＲＶＤＮＡ，选编码特异性糖蛋白ｇｐ５０基因中的２６２ｂｐ片段进行ＰＣＲ扩增。扩增产物经ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ双酶切后，将２２２ｂｐ片段与质粒ｐＵＣ１９连接构成重组子ｐＵ... 在ＢＨＫ２１细胞中增殖伪狂犬病病毒（ＰＲＶ），提纯ＰＲＶＤＮＡ，选编码特异性糖蛋白ｇｐ５０基因中的２６２ｂｐ片段进行ＰＣＲ扩增。扩增产物经ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ双酶切后，将２２２ｂｐ片段与质粒ｐＵＣ１９连接构成重组子ｐＵＰ。通过转化大肠杆菌ＪＭ８３、Ａｍｐｒ和α互补效应筛选后，扩增、提纯重组子ｐＵＰ，用ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ酶切，电泳回收克隆的２２２ｂｐ片段。用光敏生物素标记２２２ｂｐ片段和重组子ｐＵＰ制备的探针，分别检出４６．８ｐｇ和９３．６ｐｇ的ＰＲＶＤＮＡ，且ｐＵＰ探针只与ＰＲＶ呈杂交阳性反应，与ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２及ＣＭＶ呈阴性反应。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 gp50基因 无性系 光敏生物素 探针

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感染小鼠组织中Q热立克次体的分子病理学检测 被引量：4

6

作者 李金凤 吴小红 +6 位作者 李豫川 甘永华 曹军田 魏文进 温博海 陈梅玲 王翠娥 《生物技术通讯》 CAS 2003年第6期549-550,共2页

腹腔注射Q热立克次体悬液感染BALB/c小鼠,发病后解剖,取主要组织脏器,应用免疫组化和原位杂交检测感染小鼠体内Q热立克次体的抗原分布和DNA在靶细胞中的表达,探讨Q热病变规律及致病机理。结果显示阳性信号多位于单核-巨噬细胞系统细胞... 腹腔注射Q热立克次体悬液感染BALB/c小鼠,发病后解剖,取主要组织脏器,应用免疫组化和原位杂交检测感染小鼠体内Q热立克次体的抗原分布和DNA在靶细胞中的表达,探讨Q热病变规律及致病机理。结果显示阳性信号多位于单核-巨噬细胞系统细胞胞浆内。结果提示免疫组化和原位杂交技术可以作为Q热特异性的诊断方法,并为致病机理的研究提供线索。 展开更多

关键词 感染 小鼠 组织 Q热立克次体 分子病理学 贝氏柯克斯体

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不同人群感染单纯疱疹病毒2型的流行病学特点 被引量：3

7

作者 陈平 马良 +4 位作者 李娜 刘二战 孙东杰 魏文进 郑海发 《国际生物制品学杂志》 CAS 2015年第4期189-192,共4页

此文概述了单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus 2，HSV‐2）感染的传播方式和机制，着重介绍了HSV‐2感染的流行病学特点。作者利用已经发表的国内外流行病学资料，从性别比例、年龄分布、文化程度等方面，对HSV‐2感染的人群进行... 此文概述了单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus 2，HSV‐2）感染的传播方式和机制，着重介绍了HSV‐2感染的流行病学特点。作者利用已经发表的国内外流行病学资料，从性别比例、年龄分布、文化程度等方面，对HSV‐2感染的人群进行分析。结果表明，全球范围内 HSV‐2的感染率逐渐增加，女性的感染率和发病率高于男性。在中国，从年龄分布上来看，以21～40岁年龄段感染人数最多；从文化程度上来看，初中学历者感染率最高。 展开更多

关键词 疱疹病毒2型 人 疾病传播 流行病学研究

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肠道病毒71型类病毒颗粒在汉逊酵母中的表达及其免疫原性 被引量：3

8

作者 李国顺 郭林 +7 位作者 方玉松 陈磊 张盼 徐颖之 王凤伟 顾美荣 魏文进 郑海发 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第9期906-911,共6页

目的于汉逊酵母中表达肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)类病毒颗粒(virus-like particle,VLP),并分析其免疫原性。方法将鉴定正确的重组质粒p MV-P1-3CD转化汉逊酵母AU0501,经筛选获得稳定整合P1和3CD基因的重组菌株p MV-P1-3CD/AU。3... 目的于汉逊酵母中表达肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)类病毒颗粒(virus-like particle,VLP),并分析其免疫原性。方法将鉴定正确的重组质粒p MV-P1-3CD转化汉逊酵母AU0501,经筛选获得稳定整合P1和3CD基因的重组菌株p MV-P1-3CD/AU。30 L发酵罐培养重组菌株,发酵产物纯化后进行SDS-PAGE、Western blot、HPLC检测、电镜分析及动态光散射分析检测。采用不同方法制备EV71疫苗,分别免疫小鼠和家兔,检测动物血清中和抗体几何平均滴度(GMT),评价其免疫原性及不同佐剂对疫苗免疫原性的影响。结果重组菌株p MV-P1-3CD/AU表达产物及疫苗原液的SDS-PAGE分析显示,于相对分子质量26 000、33 000和35 000处均可见VP3、VP1和VP0蛋白条带,且相对分子质量33 000的蛋白可与EV71-VP1单克隆抗体发生特异性结合;疫苗原液的纯度达99%以上;电镜观察可见30 nm的VLP,颗粒均一度较好;小鼠血清GMT最高可达1 536,家兔血清GMT最高可达586,磷酸铝佐剂及氢氧化铝佐剂均可明显提高小鼠血清GMT。结论于汉逊酵母中成功实现EV71的P1和3CD基因的共表达,可形成EV71 VLP,且具有良好的免疫原性,为今后EV71 VLP疫苗的研制提供了实验依据。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 类病毒颗粒 汉逊酵母 免疫原性

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恙虫病东方体Karp株47kDa蛋白成熟肽的克隆与表达 被引量：3

9

作者 余跃飞 温博海 +4 位作者 牛东升 温博贵 魏文进 邱玲 高宁 《汕头大学医学院学报》 2003年第3期132-134,共3页

目的 :克隆表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot)Karp株 4 7kDa表面蛋白的成熟肽 ,探索其作为疫苗及诊断抗原的可能性。方法 :采用PCR方法 ,从 OtKarp株菌种基因组DNA中扩增出 4 7kDa成熟蛋白基因片段 ,将该片段克隆于原核表达... 目的 :克隆表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot)Karp株 4 7kDa表面蛋白的成熟肽 ,探索其作为疫苗及诊断抗原的可能性。方法 :采用PCR方法 ,从 OtKarp株菌种基因组DNA中扩增出 4 7kDa成熟蛋白基因片段 ,将该片段克隆于原核表达载体pQE30 ,构建成重组质粒pQE30 4 7,转化大肠杆菌 (E coli) ,经IPTG诱导表达 ,SDS_PAGE和Western_blotting检测目的蛋白的表达。结果 :①获得长约 12 72bp的OtKarp株 4 7kDa外膜蛋白基因 ;②SDS_PAGE和免疫印迹显示该重组质粒转化的E coli有一相对分子量约为 4 3× 10 4 的独特蛋白带 ;③重组表达质粒序列分析结果显示pQE30 4 7中插入的基因片段的序列与已报告的OtKarp株 4 7kDa外膜蛋白基因序列基本一致 ,并与已知序列相同。结论 :获得了OtKarp 4 7kDa蛋白基因 ,并在E coli中实现了表达 。 展开更多

关键词 恙虫病 东方体Karp株 47kDa蛋白 克隆 Ot 克隆 基因表达 免疫原性

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普氏立克次体120kDa表面抗原N段基因的克隆与表达 被引量：3

10

作者 高宁 温博海 +4 位作者 魏文进 牛东升 邱玲 余跃飞 陈梅玲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期211-213,共3页

目的　克隆和表达普氏立克次体 (Rickettsiaprowazekii) 12 0kDa外膜蛋白N段基因。 方法　采用PCR方法 ,从普氏立克次体基因组中扩增其 12 0kDa表面抗原N段基因片段 ,将其与原核表达载体 pQE30连接 ,构建重组质粒 pQE30 /2 6kDa,将重组... 目的　克隆和表达普氏立克次体 (Rickettsiaprowazekii) 12 0kDa外膜蛋白N段基因。 方法　采用PCR方法 ,从普氏立克次体基因组中扩增其 12 0kDa表面抗原N段基因片段 ,将其与原核表达载体 pQE30连接 ,构建重组质粒 pQE30 /2 6kDa,将重组质粒转入大肠杆菌 ,用IPTG诱导大肠杆菌内的目的基因表达。结果　获得长为 717bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知普氏立克次体 12 0kDa表面抗原基因一致 ;SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 2 6 .3kDa处有一表达带 ;免疫印迹分析证明它能与普氏立克次体免疫兔血清反应 ;经双波长薄层扫描分析 ,目的蛋白占全菌体蛋白的 2 0 % ;提取表达菌体包涵体检查 ,证明目的蛋白主要存在于包涵体中。结论　普氏立克次体 12 0kDa表面抗原N段基因在大肠杆菌中获得了高效表达 ,该重组蛋白具有良好的免疫反应性。 展开更多

关键词 普氏立克次体 120kDa表面抗原 N段基因 克隆 表达

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恒河猴感染SARS病毒致病模型的建立 被引量：1

11

作者 侯炜 杨占秋 +9 位作者 朱润庆 魏文进 周俊 钟琼 王薇 唐志佼 汤宏斌 鲜巧阳 王勇 文利 《中国病毒学》 CSCD 2004年第6期545-548,i009,共5页

为建立恒河猴严重急性呼吸道综合征(SARS)的模型并对其致病特点进行观察,采用病毒分离、免疫荧光、光镜及 RT-PCR 方法对病毒感染组和非感染组恒河猴不同时间、不同组织或分泌物进行检测。结果显示从恒河猴不同组织中分离到病毒,而且在... 为建立恒河猴严重急性呼吸道综合征(SARS)的模型并对其致病特点进行观察,采用病毒分离、免疫荧光、光镜及 RT-PCR 方法对病毒感染组和非感染组恒河猴不同时间、不同组织或分泌物进行检测。结果显示从恒河猴不同组织中分离到病毒,而且在病毒感染后第 2d 和第 5d 的血液、第 7、9d 的鼻咽分泌物、第 3d 的粪、第 5d 的粪尿中均检测到 SARS-CoV RNA。光镜观察到病毒感染组肺组织肺泡间隔增宽,有大量淋巴细胞、单核细胞浸润,肺泡腔有渗出,甚至形成透明膜样物;多个肺泡形成机化性肺炎的表现。感染组肝组织可见较大的坏死灶,并伴有大量炎性细胞浸润。结论认为已成功建立了恒河猴 SARS 模型,可用于评价抗 SARS 药物和疫苗的研究。 展开更多

关键词 严重急性呼吸道综合征(SARS) 致病性 模型

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贝氏柯克斯体27kDa外膜蛋白基因的克隆与表达 被引量：2

12

作者 魏文进 崔红 +4 位作者 陈唯军 牛东升 张雪颖 陈梅玲 温博海 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期23-25,共3页

目的　克隆和表达贝氏柯克斯体 (Coxiellaburnetii) 2 7kDa外膜蛋白基因 (com1 )。方法　采用PCR方法 ,从质粒pGEM -T/com1扩增出Com1基因片段 ,经鉴定后 ,将其克隆于原核表达载体 pQE30 ,构建成重组质粒 pQE30 /com1 ,IPTG诱导表达。... 目的　克隆和表达贝氏柯克斯体 (Coxiellaburnetii) 2 7kDa外膜蛋白基因 (com1 )。方法　采用PCR方法 ,从质粒pGEM -T/com1扩增出Com1基因片段 ,经鉴定后 ,将其克隆于原核表达载体 pQE30 ,构建成重组质粒 pQE30 /com1 ,IPTG诱导表达。结果　 (1 )获得长约 760bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知com1序列相同。 (2 )SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 2 7kDa处有表达条带。经薄层扫描分析 ,目的蛋白条带占全菌体蛋白的 1 7 2 %。 (3)经分析 ,有较好的抗原性。 (4)表达菌体超声破碎后 ,目的蛋白主要存在于包涵体中。结论　贝氏柯克斯体com1基因在大肠杆菌中获得了高效表达 。 展开更多

关键词 贝氏柯克斯体 27kDa外膜蛋白基因 克隆 表达 测序

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白喉毒素突变体CRM197原核表达载体构建及其蛋白表达 被引量：2

13

作者 肖钾钙镁 王素英 +2 位作者 魏文进 张静飞 林福玉 《天津师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第3期78-80,共3页

将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pBAD-DEST49中,转化到大肠杆菌菌株(ATCCMC1061).经阿拉伯糖诱导,CRM197获得高效表达.目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换后获得高于95%纯度的CRM197样品.用该样品做Weste... 将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pBAD-DEST49中,转化到大肠杆菌菌株(ATCCMC1061).经阿拉伯糖诱导,CRM197获得高效表达.目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换后获得高于95%纯度的CRM197样品.用该样品做Western blotting鉴定后,能得到单一的特异性条带.本实验的表达策略,为CRM197进一步生产及应用奠定基础. 展开更多

关键词 CRM197 白喉毒素 大肠杆菌

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13价肺炎链球菌多糖结合疫苗的制备及免疫原性研究 被引量：2

14

作者 张明华 石继春 +10 位作者 曹欣 任涛 唐秀丽 韩菲 王婷婷 胡鹏 张美香 郝倩 何佳琦 魏文进 郑海发 《国际生物制品学杂志》 CAS 2013年第3期118-122,共5页

目的制备13价肺炎链球菌多糖结合疫苗，并初步研究其免疫原性。方法将通过偶联方法制成的13种单价肺炎链球菌多糖结合疫苗，配制成含或不含铝佐剂的13价肺炎链球菌多糖结合疫苗。用制备的2种疫苗分别免疫猕猴和家兔，以ELISA法检测免疫... 目的制备13价肺炎链球菌多糖结合疫苗，并初步研究其免疫原性。方法将通过偶联方法制成的13种单价肺炎链球菌多糖结合疫苗，配制成含或不含铝佐剂的13价肺炎链球菌多糖结合疫苗。用制备的2种疫苗分别免疫猕猴和家兔，以ELISA法检测免疫动物的血清抗多糖抗体水平。结果制备的2种疫苗的各项指标均达到质控标准。末次免疫后，含或不含铝佐剂疫苗免疫猕猴的平均血清抗各型多糖抗体阳转率分别为98．08％和94．23％；含或不含铝佐剂疫苗免疫家兔的平均血清抗各型多糖抗体阳转率分别为95．38％和96．92％。结论成功研制了13价肺炎链球菌多糖结合疫苗，含或不含铝佐剂疫苗在猕猴和家兔中均具有免疫原性。 展开更多

关键词 链球菌 肺炎 疫苗 结合 免疫原性

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恙虫病东方体47kDa蛋白基因部分片段的克隆与表达 被引量：2

15

作者 牛东升 陈香蕊 +5 位作者 张雪颖 陈唯军 陈梅玲 崔红 魏文进 温博海 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期13-15,共3页

目的　表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot) 4 7kDa保护性抗原蛋白。 方法　采用PCR方法 ,从OtKarp株基因组DNA中扩增出 4 7kDa蛋白基因片段 ,鉴定后将该片段克隆于原核表达载体 pBV2 2 0 ,构建成重组质粒pBV -4 7。用该重组... 目的　表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot) 4 7kDa保护性抗原蛋白。 方法　采用PCR方法 ,从OtKarp株基因组DNA中扩增出 4 7kDa蛋白基因片段 ,鉴定后将该片段克隆于原核表达载体 pBV2 2 0 ,构建成重组质粒pBV -4 7。用该重组质粒转化E coli,转化子在 4 2℃诱导表达并对其鉴定。结果　 (1)获得长约 14 30bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知 4 7kDa基因序列相同 ;(2 )SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 4 0× 10 3 处有表达带 ;(3)经薄层扫描分析 ,目的蛋白占全菌蛋白的 19% ;(4)免疫印迹实验证明其具有免疫反应性。结论　获得了 4 7kDa基因片段 ,并在大肠杆菌中实现了表达 ,表达产物具有免疫反应性。 展开更多

关键词 恙虫病东方体 47kDa基因 克隆 表达

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口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗的制备及检定 被引量：1

16

作者 张静飞 陈磊 +10 位作者 董思国 曹天成 何金娜 曹欣 胡鹏 郝倩 魏文进 贾丽君 陈翠萍 郑海发 曾明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期1-6,共6页

目的制备口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗,并进行全面检定。方法制备O1、O139群霍乱弧菌灭活菌体原液及重组霍乱毒素B亚单位(recombinant cholera toxin B subunit,r CTB)原液,按比例混合制成口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗,为保护r CT... 目的制备口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗,并进行全面检定。方法制备O1、O139群霍乱弧菌灭活菌体原液及重组霍乱毒素B亚单位(recombinant cholera toxin B subunit,r CTB)原液,按比例混合制成口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗,为保护r CTB免受胃酸的破坏,制备了碳酸氢钠抗酸泡腾颗粒,并按照制定的新制品原液及成品的质控标准,对原液及成品进行全面检定。结果制备的口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗工艺稳定,各项指标均达到质控标准。结论口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗安全、有效,且制备工艺可行,符合规模化生产的要求。 展开更多

关键词 口服重组B亚单位-O1/O139霍乱疫苗 安全性 免疫原性

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贝氏柯克斯体30kD外膜蛋白基因表达及免疫保护性的研究 被引量：1

17

作者 魏文进 温博海 +3 位作者 牛东升 陈梅玲 邱玲 高宁 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期381-382,共2页

关键词 贝氏柯克斯体 30kD外膜蛋白 基因表达 免疫保护性 菌株

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I—ELISA特异诊断棘球蚴（包虫）病的研究 被引量：1

18

作者 王永辉 翟春生 +3 位作者 周宗安 叶志远 魏文进 尚太成 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1994年第4期387-390,共4页

采用亲和层析技术纯化的兔抗棘球蚴抗体，建立了酶联免疫吸附抑制试验（Ｉ—ＥＬＩＳＡ）。取代反应和阻断反应均无非特异反应；检测健康对照血清１２６份（人３６，猪９０），均为阴性；与猪囊尾蚴病血清１３６份（人４６，猪９０）、... 采用亲和层析技术纯化的兔抗棘球蚴抗体，建立了酶联免疫吸附抑制试验（Ｉ—ＥＬＩＳＡ）。取代反应和阻断反应均无非特异反应；检测健康对照血清１２６份（人３６，猪９０），均为阴性；与猪囊尾蚴病血清１３６份（人４６，猪９０）、细颈囊尾蚴病血清３８份（羊２２、猪１６）无交叉反应；对棘球蚴病血清１８３份（人６１、羊７１、猪５１）进行检测，其阳性符合率分别为８８．５％（５４／６１）、９８．６％（７０／７１）、９６．１％（４９／５１）。 展开更多

关键词 棘球蚴病 包虫病 I-ELISA 人畜共患病

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肠道病毒71型病毒样颗粒在汉逊酵母中的表达 被引量：1

19

作者 顾美荣 宋琳琳 +5 位作者 许珊珊 付作申 林福玉 张现臣 魏文进 贾士儒 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期604-609,共6页

目的应用汉逊酵母表达系统进行肠道病毒71型（EV71）病毒样颗粒（VLP）的表达。方法将经过汉逊酵母密码子优化的人EV71的P1和3CD基因片段克隆到汉逊酵母表达载体PMV上，获得重组表达质粒PMV．P1-3CD，转化汉逊酵母宿主菌AU0501，PCR方... 目的应用汉逊酵母表达系统进行肠道病毒71型（EV71）病毒样颗粒（VLP）的表达。方法将经过汉逊酵母密码子优化的人EV71的P1和3CD基因片段克隆到汉逊酵母表达载体PMV上，获得重组表达质粒PMV．P1-3CD，转化汉逊酵母宿主菌AU0501，PCR方法及稳定传代培养筛选整合P1和3CD基因的重组菌株。重组菌种接种在含有1％甲醇的培养基中进行诱导表达，对表达产物进行SDS．PAGE、Western blot检测。挑选优胜表达菌株进行30L发酵罐发酵培养，发酵产物经过粗略纯化后进行电镜分析。结果筛选获得EV71重组表达菌株；SDS-PAGE检测结果显示在相对分子质量（M，）为26×10^3、33×10^3、35×10^3处有明显的VP3、VP1、VP0蛋白条带，M大小与预期的目的蛋白大小一致；Western blot检测结果显示表达产物与EV71-VP1单克隆抗体在犯为33×10^3处有较为明显的VPl反应条带，表达产物具有良好的免疫反应性；表达菌株发酵表达量可达200mg／L，电镜分析可见24～30nin的VLP，且颗粒结构完好。结论应用汉逊酵母表达系统成功表达了EV71VLP，为今后研制EV71VLP疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 汉逊酵母 病毒样颗粒 表达

原文传递

ACYWl35群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研制 被引量：1

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作者 张明华 任涛 +9 位作者 曹欣 唐秀丽 韩菲 王婷婷 胡鹏 张美香 郝倩 何佳琦 郑海发 魏文进 《国际生物制品学杂志》 CAS 2013年第2期61-65,共5页

目的制备安全有效的四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法用溴化氰分别将A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖活化，以己二酸二酰肼作为连接剂，碳化二亚胺作为偶联剂，先制备单价A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素（diphtheriatoxoid... 目的制备安全有效的四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法用溴化氰分别将A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖活化，以己二酸二酰肼作为连接剂，碳化二亚胺作为偶联剂，先制备单价A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素（diphtheriatoxoid，DT）结合疫苗，再配比制成ACYWl35群脑膜炎球菌多糖结合疫苗（groups ACYWl35 meningococcal polysaccharide—DT conjugatevaccine，ACYWl35一DT）。以ACYWl35-DT免疫小鼠，用间接ELISA检测小鼠血清抗各多糖抗体，采用f检验对检测结果进行统计学分析。结果制备的ACYWl35-DT的各项指标均达到质控标准，而且ACYWl35-DT具有良好的安全性和免疫原性，ACYWl35-DT免疫小鼠的抗A群多糖-IgG（f=24．487，P〈0．01）、抗C群多糖-IgG（f=17．056，P〈0．01）、抗Y群多糖-IgG（t=26．213，P〈0．01）和抗W135群多糖-IgG（t=17．392，P〈0．01）水平明显高于四价脑膜炎球菌多糖疫苗免疫小鼠。结论采用此项技术可成功制备ACYWl35-DT。 展开更多

关键词 奈瑟球菌 脑膜炎 疫苗 结合 多糖类 细菌 白喉类毒素

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