知母-黄柏药对抗炎药效部位筛选及作用机制研究 被引量：21

1

作者 王瑞成 谢培 +1 位作者 雷莉妍 侯青 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第2期409-413,共5页

目的:筛选知母-黄柏药对的抗炎药效部位,并初步对其抗炎机制进行探讨。方法:制备知母-黄柏药对水煎液,通过D101树脂进行分离,分别用水、30%、60%、95%乙醇-水进行洗脱,制备不同极性部位。采用LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型,用不同浓度的... 目的:筛选知母-黄柏药对的抗炎药效部位,并初步对其抗炎机制进行探讨。方法:制备知母-黄柏药对水煎液,通过D101树脂进行分离,分别用水、30%、60%、95%乙醇-水进行洗脱,制备不同极性部位。采用LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型,用不同浓度的药对或各极性部位预处理细胞,MTT法检测细胞凋亡,Griess法检测NO分泌,筛选抗炎活性部位。ELISA法检测炎症因子分泌,Western blot检测炎症相关蛋白COX-2、iNOS蛋白水平及细胞核、细胞质中NF-κB p65含量。结果:知母-黄柏药对及30%醇洗部位能降低LPS诱导RAW264.7细胞分泌NO,其中30%醇洗部位作用更为明显,其他部位无显著作用。30%醇洗部位能显著降低LPS诱导的IL-1β、IL-6、TNF-α分泌及iNOS、COX-2蛋白表达,并促进p65由细胞质进入细胞核。结论:知母-黄柏药对抗炎药效部位为30%醇洗部位,该药效部位可能通过抑制NF-κB信号通路,抑制iNOS、COX-2表达及相关炎症因子的分泌,保护LPS诱导的RAW264.7细胞损伤。 展开更多

关键词 知母-黄柏药对 抗炎 药效部位 作用机制

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益气养阴法治疗消渴病源流 被引量：9

2

作者 屈杰 温娜 +3 位作者 杨景锋 雷莉妍 李小会 杨军 《中医学报》 CAS 2021年第7期1378-1381,共4页

益气养阴法治疗消渴病经历了漫长的历史过程。从秦汉时期应用单味药物,产生方药的萌芽;到宋元时期从“火热”到“阴虚”的转折;到明清时期诸多医家从脏腑生理、病理总结思考;再到近现代医家汇通中西,应用益气养阴法治疗糖尿病及其并发症... 益气养阴法治疗消渴病经历了漫长的历史过程。从秦汉时期应用单味药物,产生方药的萌芽;到宋元时期从“火热”到“阴虚”的转折;到明清时期诸多医家从脏腑生理、病理总结思考;再到近现代医家汇通中西,应用益气养阴法治疗糖尿病及其并发症,衍生了益气养阴化瘀、益气养阴化痰、益气养阴解毒等治法,产生了白虎加人参汤、人参白术散、黄芪汤、六味地黄汤、钱氏白术散、麦门冬饮子、地黄饮子、玉泉丸、琼玉膏、生津甘露饮、七味白术散、人参生脉散、玉液汤等治疗消渴病的经典方剂。 展开更多

关键词 益气养阴法 消渴病 糖尿病 火热 阴虚

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Box-Behnken响应面法优化野菊花多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究 被引量：10

3

作者 梁艳妮 李欢欢 +3 位作者 唐志书 张东博 雷莉妍 王征 《中国现代中药》 CAS 2019年第12期1675-1681,共7页

目的:野菊花多糖的提取工艺优化及其抗氧化活性评价。方法:在单因素试验的基础上,以料液比、提取时间、提取温度为自变量,以野菊花多糖的提取率为指标,采用Box-Behnken响应面法优选野菊花多糖的提取条件;并通过对DPPH·和·OH... 目的:野菊花多糖的提取工艺优化及其抗氧化活性评价。方法:在单因素试验的基础上,以料液比、提取时间、提取温度为自变量,以野菊花多糖的提取率为指标,采用Box-Behnken响应面法优选野菊花多糖的提取条件;并通过对DPPH·和·OH的清除效果来评价其体外抗氧化活性。结果:野菊花多糖最佳提取工艺为料液比:1∶25 g·mL-1,提取时间:2.5 h,提取温度:92.3℃,在此条件下多糖提取率为3.25%;Sevage法脱蛋白脱除率为23.58%;过氧化氢法脱色率为61.18%;纯化后的野菊花多糖主要在0.8μm陶瓷膜渗透液中。野菊花多糖对DPPH·和·OH具有较好的清除能力。结论:该优化工艺实现了野菊花多糖的高效提取,微滤膜可以实现对野菊花多糖的分离纯化。 展开更多

关键词 野菊花 多糖 响应面法 膜分离 抗氧化

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玉女煎HPLC指纹图谱研究 被引量：6

4

作者 雷莉妍 唐志书 +2 位作者 刘妍如 宋忠兴 王洁 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期113-116,共4页

目的:建立玉女煎的HPLC指纹图谱,为其药效物质基础的研究提供依据。方法:采用C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);柱温为30℃;流动相为0.2%磷酸溶液-甲醇,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为254nm。结果:建立了玉女煎的HPLC指纹图谱... 目的:建立玉女煎的HPLC指纹图谱,为其药效物质基础的研究提供依据。方法:采用C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);柱温为30℃;流动相为0.2%磷酸溶液-甲醇,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为254nm。结果:建立了玉女煎的HPLC指纹图谱,确定17个特征峰,其中峰5为5-羟甲基糠醛,峰11为芒果苷,峰12为毛蕊花糖苷,峰13为蜕皮甾酮,峰17为甲基麦冬二氢高异黄酮A。结论:该方法建立的玉女煎HPLC指纹图谱为其下一步有效成分的研究提供了依据。 展开更多

关键词 玉女煎 HPLC指纹图谱

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芒果苷对高糖诱导β细胞凋亡的影响及机制研究 被引量：9

5

作者 雷莉妍 王瑞成 +2 位作者 唐志书 朱虹丽 宋忠兴 《中药材》 CAS 北大核心 2018年第10期2423-2426,共4页

目的:研究芒果苷对胰岛β细胞的保护作用及并探讨其可能的作用机制。方法:建立高糖诱导INS-1细胞凋亡模型,用不同浓度的芒果苷预处理细胞,MTT法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达,荧光探针法检测细胞内ROS水平,... 目的:研究芒果苷对胰岛β细胞的保护作用及并探讨其可能的作用机制。方法:建立高糖诱导INS-1细胞凋亡模型,用不同浓度的芒果苷预处理细胞,MTT法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达,荧光探针法检测细胞内ROS水平,丙二醛(MDA)检测试剂盒检测细胞内MDA水平。结果:33 mmol/L葡萄糖能显著诱导INS-1细胞凋亡,芒果苷能以浓度依赖性保护INS-1细胞,降低细胞凋亡率,同时能恢复高糖引起的Bcl-2蛋白表达降低,降低Bax蛋白表达;33 mmol/L葡萄糖能诱导INS-1细胞产生ROS及MDA,芒果苷处理细胞能显著降低ROS及MDA水平。结论:芒果苷可能通过降低细胞内氧化压力抑制高糖诱导的INS-1细胞凋亡。 展开更多

关键词 芒果苷 高糖 胰岛Β细胞 凋亡 氧化压力

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基于NF-κB通路的芒果苷干预脂多糖诱导的细胞炎症作用机制研究 被引量：9

6

作者 雷莉妍 王瑞成 +3 位作者 周瑞 唐志书 宋忠兴 李蕊萍 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期597-602,共6页

目的研究芒果苷对小鼠巨噬细胞RAW 264.7的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞炎症模型。实验分四步:(1)细胞存活率实验分5组,即:空白组、LPS组、LPS+不同浓度(50、100、150μg/mL)芒果苷组。MTT... 目的研究芒果苷对小鼠巨噬细胞RAW 264.7的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞炎症模型。实验分四步:(1)细胞存活率实验分5组,即:空白组、LPS组、LPS+不同浓度(50、100、150μg/mL)芒果苷组。MTT法检测细胞存活率。(2)一氧化氮(NO)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素6(IL-6)分泌实验分6组,即:空白组、LPS组、LPS和不同浓度芒果苷(50、100、150μg/mL)组、LPS+BAY 11-7082[核因子κB(NF-κB)抑制剂]组。Griess法检测NO分泌量,ELISA法检测IL-1β、TNF-α及IL-6分泌量。(3)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与环氧化酶-2(COX-2)mRNA及蛋白表达实验分组同细胞存活率实验。实时荧光定量PCR检测iNOS及COX-2 mRNA水平变化,Western blot检测iNOS及COX-2蛋白表达水平。(4)细胞质、细胞核中NF-κB表达实验分3组,即:空白组、LPS组、LPS+150μg/mL(终末浓度)芒果苷共处理组, Western blot检测细胞质、细胞核中NF-κB p65蛋白表达量。结果 (1)与空白组比较,LPS组显著降低RAW264.7细胞存活率(P<0.05);与LPS组比较,50～150μg/mL芒果苷预处理对RAW264.7细胞增殖无显著影响(P>0.05)。(2)与空白组比较,LPS组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量显著升高(P<0.05);与LPS组比较,除50μg/mL芒果苷预处理组NO、TNF-α分泌量无显著变化外(P>0.05),其余各组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量均显著降低(P<0.05)。(3)与空白组比较,LPS组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与LPS组比较,50～150μg/mL芒果苷预处理组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05)。(4)与空白组比较,LPS组细胞质中NF-κB p65蛋白量减少,细胞核中则增多(P<0.05);与LPS组比较,150μg/mL芒果苷预处理组细胞质中NF-κB p65蛋白量升高,细胞核中蛋白量减少(P<0.05)。结论芒果苷可能通过抑制NF-κB信号通路,而抑制iNOS、COX-2表达及相关炎症因子的分泌,干预LPS诱导的RAW264.7细胞� 展开更多

关键词 芒果苷 脂多糖 炎症 核因子κB通路

原文传递

基于网络药理学、分子对接及实验验证研究知母-黄柏药对抗炎的物质基础 被引量：6

7

作者 苏萌 谭福雄 +1 位作者 吕洁 雷莉妍 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2022年第4期687-698,共12页

本研究通过检索知母、黄柏化学成分作用靶点及炎症相关靶点,并对其进行功能及通路预测、分析,采用分子对接方法验证靶点。利用液质联用技术对分子对接中打分最高的脱水淫羊藿素进行含量测定,并通过细胞实验对知母-黄柏及脱水淫羊藿素的... 本研究通过检索知母、黄柏化学成分作用靶点及炎症相关靶点,并对其进行功能及通路预测、分析,采用分子对接方法验证靶点。利用液质联用技术对分子对接中打分最高的脱水淫羊藿素进行含量测定,并通过细胞实验对知母-黄柏及脱水淫羊藿素的作用进行验证,以探究知母-黄柏药对抗炎的物质基础及作用机制。通过检索得到知母-黄柏药对的52个化合物及619个作用靶点、疾病靶点538个,交集靶点包括PRSS1、PTGS1、PPARG、NR3C1、RELA、VEGFA、CASP3、CASP8等。筛选得到核心化学成分槲皮素、脱水淫羊藿素、β-谷甾醇。KEGG结果表明知母-黄柏药对抗炎的主要通路包括TNF信号通路、AGE-RAGE信号通路、疱疹病毒感染等。分子对接结果表明核心化学成分脱水淫羊藿素与核心靶点PPARG有较高的结合活性,含量测定结果表明脱水淫羊藿素在知母-黄柏中含量为18.04%,细胞实验结果表明知母-黄柏、脱水淫羊藿素能显著抑制NO、TNF-α、IL-6的产生。因此,知母-黄柏治疗炎症的物质基础是以脱水淫羊藿素为主的化学成分,脱水淫羊藿素可能是通过TNF通路发挥抗炎作用。 展开更多

关键词 知母-黄柏药对 抗炎 网络药理学 分子对接

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熊果酸对肝癌SMMC-7721细胞焦亡作用及机制研究 被引量：6

8

作者 杨晨 黄峰 +1 位作者 晁旭 雷莉妍 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期101-107,共7页

目的:基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/天冬氨酸蛋白水解酶-1(NLRP3/Caspase-1)信号通路探讨熊果酸促进肝癌SMMC-7721细胞焦亡作用机制。方法:培养肝癌SMMC-7721细胞,以熊果酸0、30、40、50μmol/L干预,电镜观察细胞焦亡时的形... 目的:基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/天冬氨酸蛋白水解酶-1(NLRP3/Caspase-1)信号通路探讨熊果酸促进肝癌SMMC-7721细胞焦亡作用机制。方法:培养肝癌SMMC-7721细胞,以熊果酸0、30、40、50μmol/L干预,电镜观察细胞焦亡时的形态变化;噻唑蓝比色(MTT)法测定细胞24 h体外增殖的影响;Hoechst 33242染色法荧光显微镜下观察细胞焦亡情况;集落形成实验(Clonogenicity assay)观察熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞集落形成能力的影响;流式细胞术分析熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞周期的影响;免疫印迹(Western-Blot)法检测Caspase-1、NLRP3和GSDMD-N蛋白表达。结果:不同浓度熊果酸作用肝癌SMMC-7721细胞24 h后,显示熊果酸可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,且随着药物浓度的增加,抑制作用显著增强(P<0.01);随着熊果酸浓度的不断增加,细胞焦亡数量显著增加(P<0.01);随着熊果酸浓度的不断增加,细胞集落形成能力明显下降(P<0.05);30μmol/L的熊果酸作用于肝癌SMMC-7721细胞,细胞出现不同程度的肿胀,细胞膜破裂且有孔洞形成等典型的焦亡形态学特征;不同浓度熊果酸干预肝癌SMMC-7721细胞24 h,可上调NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达(P<0.05)。结论:熊果酸能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖、集落形成,促进肝癌细胞焦亡;熊果酸诱导肝癌SMMC-7721细胞焦亡可能与其上调Caspase-1和NLRP3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 熊果酸 肝癌 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/天冬氨酸蛋白水解酶-1 细胞焦亡

原文传递

败酱草提取物的化学成分与抗氧化活性相关性的研究 被引量：8

9

作者 孙晓春 雷莉妍 +3 位作者 黄文静 史鑫波 宋忠兴 唐志书 《中国药师》 CAS 2018年第12期2111-2113,2132,共4页

目的:对白花败酱和黄花败酱提取物中咖啡酸、绿原酸、总黄酮和体外抗氧化活性的相关性进行研究。方法:采用HPLC法检测咖啡酸和绿原酸含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法检测总黄酮含量,4种体外抗氧化体系(·OH、DPPH·、O_2^-·清... 目的:对白花败酱和黄花败酱提取物中咖啡酸、绿原酸、总黄酮和体外抗氧化活性的相关性进行研究。方法:采用HPLC法检测咖啡酸和绿原酸含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法检测总黄酮含量,4种体外抗氧化体系(·OH、DPPH·、O_2^-·清除能力和总抗氧化能力)评价提取物的体外抗氧化性。结果:黄花败酱水提物中绿原酸的含量最高,为(117. 29±0. 85) mg·g^(-1),白花败酱醇提物中咖啡酸的含量最高,为(21. 19±1. 24) mg·g^(-1),总黄酮在黄花败酱水提物中含量最高,为(383. 00±3. 61) mg·g^(-1)。水提液对·OH和DPPH·的清除作用均高于醇提液,随着提取物浓度增大,对·OH和DPPH·的清除率也逐渐增大,具有浓度依赖性。提取液对O_2^-·清除作用和总抗氧化能力结果为:黄花败酱水提液>白花败酱水提液>黄花败酱醇提液>白花败酱醇提液。结论:提取物中绿原酸和总黄酮的含量与自由基清除能力呈正相关。 展开更多

关键词 黄花败酱 白花败酱 绿原酸 抗氧化

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文冠果叶多糖超声辅助提取工艺及其药效学初步研究 被引量：5

10

作者 张严磊 施欢贤 +2 位作者 雷莉妍 宋忠兴 唐志书 《中国现代中药》 CAS 2016年第12期1636-1640,共5页

目的:以文冠果叶为原料,研究超声辅助法对文冠果叶多糖提取得率的影响。在此基础上,对文冠果叶多糖抗癌、抗氧化活性进行初步研究。方法:单因素试验基础上采用正交试验法研究温度、料液比、超声功率对文冠果叶多糖得率的影响,进一步优... 目的:以文冠果叶为原料,研究超声辅助法对文冠果叶多糖提取得率的影响。在此基础上,对文冠果叶多糖抗癌、抗氧化活性进行初步研究。方法:单因素试验基础上采用正交试验法研究温度、料液比、超声功率对文冠果叶多糖得率的影响,进一步优化超声提取的工艺;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)研究文冠果叶多糖对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用;抗氧化活性通过DPPH·清除实验检测。结果:文冠果叶多糖的最佳提取工艺为提取温度90℃,料液比为1∶20,超声功率90 W,超声时间30 min,在该条件下文冠果叶多糖的提取率可达17.90%;活性研究显示,在浓度2.5 mg·m L^(-1)时,文冠果叶多糖对人肝癌细胞Hep G2增殖抑制率为20.21%;浓度为0.2 mg·m L^(-1)时,对DPPH·自由基清除率高达90.78%。结论:超声辅助提取文冠果叶多糖与传统的水热提取法相比,提取时间短、收率高;文冠果叶多糖具有一定的抗肝癌活性及良好的抗氧化活性,具有开发为药品及化妆品等相关产品的潜能。 展开更多

关键词 超声辅助 文冠果叶多糖 药效学 初步研究

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可降解聚合物包覆次血红素六肽微球的制备及生物活性 被引量：5

11

作者 赵天倚 赵继鹏 +4 位作者 雷莉妍 陈晓光 王立成 陈学思 王丽萍 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期236-241,共6页

采用水包油包水(W1/O/W2)复乳溶剂挥发法制备了包覆次血红素六肽(DhHP-6)的2种聚酯微球.通过扫描电子显微镜、体外缓释行为、高效液相(HPLC)检测、酶活力测定和初步的动物实验等表征,综合评价了载药微球的体外释放及体内生物活性.实验... 采用水包油包水(W1/O/W2)复乳溶剂挥发法制备了包覆次血红素六肽(DhHP-6)的2种聚酯微球.通过扫描电子显微镜、体外缓释行为、高效液相(HPLC)检测、酶活力测定和初步的动物实验等表征,综合评价了载药微球的体外释放及体内生物活性.实验结果表明,载药微球球体圆整,粒径分布均匀,载药量高,能够实现体外缓释,并对细胞过氧化损伤和小鼠脑缺血损伤均有一定的保护作用. 展开更多

关键词 载药微球 次血红素六肽 聚乙交酯-丙交酯 聚丙交酯-乙交酯 聚乙二醇 缓释

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玉女煎对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及机制研究 被引量：5

12

作者 雷莉妍 王瑞成 +3 位作者 谢培 张丹丹 唐志书 宋忠兴 《中国现代中药》 CAS 2017年第2期196-199,213,共5页

目的:观察玉女煎对大鼠佐剂性关节炎的干预作用及可能的作用机制。方法:在整体动物水平,采用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,大鼠随机分为正常组、关节炎模型组、雷公藤多苷阳性对照组、YNJ高剂量组(6.1 g生药·kg^(-1))、YNJ中剂... 目的:观察玉女煎对大鼠佐剂性关节炎的干预作用及可能的作用机制。方法:在整体动物水平,采用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,大鼠随机分为正常组、关节炎模型组、雷公藤多苷阳性对照组、YNJ高剂量组(6.1 g生药·kg^(-1))、YNJ中剂量组(3 g生药·kg^(-1))、YNJ低剂量组(1.5 g生药·kg^(-1)),分别测定大鼠的体质量、足肿胀度,并通过ELISA法检测血清中的IL-1、IL-6、TNF-α及PGE2水平。在细胞水平,采用IL-1诱导人成纤维样滑膜细胞HFLS炎症模型,ELISA法检测细胞上清中IL-6及TNF-α生成量。结果:玉女煎能有效地恢复炎症诱导的体质量降低,改善足肿胀程度,在动物和细胞水平均能显著抑制相关炎症因子的表达。结论:玉女煎具有显著的抗大鼠佐剂性关节炎活性,可能通过抑制炎症因子的表达发挥作用。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎 佐剂性关节炎 玉女煎 抗炎 炎症因子

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文冠果叶抑制人肝癌细胞HepG2增殖和抗氧化活性部位的筛选 被引量：4

13

作者 张严磊 施欢贤 +2 位作者 雷莉妍 宋忠兴 唐志书 《中国现代中药》 CAS 2016年第11期1451-1453,1469,共4页

目的:研究文冠果叶不同萃取物的抗氧化及抗肝癌活性。方法:分别用水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液及95%乙醇水溶液萃取文冠果叶,得到5个不同的提取部位A、B、C、D、E,采用MTT法筛选对人肝癌细胞HhepG2增殖抑制作用的... 目的:研究文冠果叶不同萃取物的抗氧化及抗肝癌活性。方法:分别用水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液及95%乙醇水溶液萃取文冠果叶,得到5个不同的提取部位A、B、C、D、E,采用MTT法筛选对人肝癌细胞HhepG2增殖抑制作用的活性部位;抗氧化活性部位通过DPPH·清除试验筛选。结果:A、B、C、D、E 5个部位皆有一定的抗肿瘤活性和抗氧化活性,其中抗肝癌活性最强的是部位D,样品质量浓度为2.5 mg·mL^(-1)时,部位D又对人肝癌细胞HepG2增殖抑制率为74.27%;抗氧化活性最强的是部位E,当质量浓度为0.2 mg·mL^(-1)时,其对自由基DPPH清除率高达85.78%。结论:文冠果叶具有对人体有益的功效,适合开发为保健茶、化妆品等。 展开更多

关键词 文冠果叶 抗氧化 抗肝癌活性

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HPLC指纹图谱结合多指标含量测定的抵当芪桂汤质量评价研究

14

作者 郭怡佳 程都 +4 位作者 张潇 雷莉妍 梁艳妮 王征 杨景锋 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第3期132-137,共6页

目的 建立抵当芪桂汤HPLC指纹图谱并结合化学模式识别技术对其进行分析与评价,测定抵当芪桂汤中5种有效化学成分的含量,为其质量控制提供依据。方法 采用Agilent 5 TC-C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相进行... 目的 建立抵当芪桂汤HPLC指纹图谱并结合化学模式识别技术对其进行分析与评价,测定抵当芪桂汤中5种有效化学成分的含量,为其质量控制提供依据。方法 采用Agilent 5 TC-C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长260 nm。采用SPSS26.0和SIMCA14.1软件对10批抵当芪桂汤进行聚类分析和主成分分析,并通过正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)筛选批间差异的标志性成分。结果 10批抵当芪桂汤的HPLC指纹图谱相似度为0.828~0.989,共标定18个共有特征峰,经对照品比对,指认芍药苷、毛蕊异黄酮苷、橙皮苷、桂皮醛、芦荟大黄素5个指标性成分,并对其进行定量分析,线性范围分别为10.000 0~320.000 0μg/mL、2.500 0~80.000 0μg/mL,10.000 0~320.000 0μg/mL、10.000 0~320.000 0μg/mL、0.078 1~5.000 0μg/mL,平均加样回收率为100.30%~104.09%。聚类分析和主成分分析将10批抵挡芪桂汤样品分为2类,通过OPLS-DA筛选出毛蕊异黄酮苷、芍药苷、橙皮苷为质量差异的标志性成分。结论 本研究建立的抵当芪桂汤质量评价方法简便、灵敏、准确、重复性好,可为抵当芪桂汤的质量评价提供依据。 展开更多

关键词 抵当芪桂汤 高效液相色谱法 指纹图谱 质量评价

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玉女煎体外抗炎最佳活性部位筛选及其物质基础研究

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作者 吕洁 王岩松 +1 位作者 杨娟 雷莉妍 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期64-73,共10页

目的筛选玉女煎复方体外抗炎的最佳活性部位,并对其成分进行分析,探讨其物质基础。方法玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30%乙醇-水洗脱、60%乙醇-水洗脱及95%乙醇-水洗脱4个洗脱部位。采用脂多... 目的筛选玉女煎复方体外抗炎的最佳活性部位,并对其成分进行分析,探讨其物质基础。方法玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30%乙醇-水洗脱、60%乙醇-水洗脱及95%乙醇-水洗脱4个洗脱部位。采用脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症模型评价玉女煎水提液及各洗脱部位的抗炎活性,使用MTT法和Griess法检测细胞活力和一氧化氮生成量。随后对筛选出的最佳活性部位的抗炎活性进行验证。采用ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6水平,用显微暗场成像法观察细胞形态,用免疫荧光实验检测细胞内NF-κB p65表达。最后通过中压色谱分离凝胶柱分离结合活性追踪的方法对最佳活性部位成分进行分离,用核磁共振仪进行鉴定。结果玉女煎水提液、水洗脱部位、30%乙醇-水洗脱部位及60%乙醇-水洗脱部位均有抗炎活性,其中水洗脱部位和30%乙醇-水洗部位抗炎活性弱于水提液,60%乙醇-水洗脱部位抗炎活性最强,95%乙醇-水洗脱部位无抗炎活性。60%乙醇-水洗脱部位对脂多糖诱导的细胞形态改变、NF-κB p65表达及入核增加的抑制作用最强,从该部位分离出了sonnerphenolic B、(+)-nyasol、broussonin A、2,4-二甲基苯甲酸和2,4-二羟基苯甲酸5个化合物,其中3个归属知母。结论60%乙醇-水洗脱部位为玉女煎抗炎的最佳活性部位,知母可能是其抗炎活性的主要贡献者。 展开更多

关键词 玉女煎 抗炎作用 最佳活性部位 物质基础 成分分析

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《金匮要略》治疗消渴病之角药分析 被引量：3

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作者 刘乾 杨景锋 +4 位作者 程锴 雷莉妍 李小会 谭颖颖 陈丽名 《中医学报》 CAS 2022年第9期1814-1818,共5页

提炼《金匮要略》消渴方剂中的角药,并对其证型核心、配伍特点、临床应用进行总结归纳。3个独立成方的角药:阳明热结消渴生,调胃承气力专攻--大黄、芒硝、甘草;消渴日久热瘀结,滑石白鱼祛浊邪--滑石、乱发、白鱼;中虚下湿成消渴,茯苓戎... 提炼《金匮要略》消渴方剂中的角药,并对其证型核心、配伍特点、临床应用进行总结归纳。3个独立成方的角药:阳明热结消渴生,调胃承气力专攻--大黄、芒硝、甘草;消渴日久热瘀结,滑石白鱼祛浊邪--滑石、乱发、白鱼;中虚下湿成消渴,茯苓戎盐利水行--茯苓、白术、戎盐。5个作为方剂核心的角药:肺胃热盛消渴起,白虎加参烦渴宜--石膏、知母、人参;外邪客脬气不利,五苓蒸液上渴愈,水热久结阴更伤,猪苓育阴小便畅--猪苓、茯苓、泽泻;肾元衰惫消渴烦,金匮肾气斗水还--地黄、附子、桂枝;上燥下寒苦渴急,瓜蒌瞿麦脾肾虞--瓜蒌、瞿麦、附子;风火相煽烁阴津,厥阴乌梅消渴擒--乌梅、川椒、黄连。气虚络瘀顽血阻,抵当芪桂奇配伍--黄芪、桂枝、白芍,为杨景锋教授经验方抵当芪桂汤的核心角药。 展开更多

关键词 消渴病 角药 《金匮要略》 配伍

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基于肠道菌群和代谢组学探讨抵当芪桂汤改善大鼠2型糖尿病作用机制

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作者 程都 郭怡佳 +4 位作者 张潇 雷莉妍 梁艳妮 王征 杨景锋 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第5期76-84,共9页

目的基于肠道菌群和代谢组学探讨抵当芪桂汤治疗2型糖尿病(T2DM)的可能作用机制。方法采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素诱导T2DM大鼠模型,将大鼠分为空白对照组、模型组、二甲双胍组和中药低、中、高剂量组,每组10只,给药组分别... 目的基于肠道菌群和代谢组学探讨抵当芪桂汤治疗2型糖尿病(T2DM)的可能作用机制。方法采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素诱导T2DM大鼠模型,将大鼠分为空白对照组、模型组、二甲双胍组和中药低、中、高剂量组,每组10只,给药组分别予相应药液灌胃6周。测定大鼠空腹血糖(FBG)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶酶(ALT)含量,HE染色观察大鼠胰腺组织、结肠组织形态,16SrRNA测定肠道微生物群落组成及相对丰度,非靶向代谢组学对血清代谢物进行分析,采用正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)筛选潜在差异代谢物,MetaboAnalyst5.0平台分析代谢物的代谢通路,对肠道菌群及血清代谢结果进行联合分析。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低,FBG显著升高,血清TG、TC、LDL-C、ALT、AST含量显著升高(P<0.01);胰岛结构严重萎缩变形、边界模糊不清,胰岛细胞排列紊乱,部分出现空泡变性,核碎裂或溶解消失;结肠结构破坏明显,上皮细胞脱落,炎性细胞浸润。与模型组比较,中药低、中、高剂量组大鼠FBG显著降低,血清TG、TC、LDL-C、AST、ALT含量显著降低(P<0.01),胰岛形态不同程度改善,结肠组织炎性细胞浸润减轻。16SrRNA测序结果显示,抵当芪桂汤可调节T2DM大鼠肠道菌群结构,提高Chao1、observed_species、PD-whole-tree、Simpson谱系多样性指数,上调厚壁菌门、放线菌门等相对丰度,下调拟杆菌门相对丰度,增加乳杆菌属、双歧杆菌属、Lachnoclostridium属等益生菌相对丰度。血清代谢组学分析共筛选出1-十四酰-2-羟基卵磷脂、N-甲基烟酰胺、乳清酸、丙氨酸、D-甘露糖等12个潜在差异代谢物,涉及D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、苯丙氨酸代谢、甘油磷脂代谢、嘧啶代谢4条代谢通路。相� 展开更多

关键词 2型糖尿病 抵当芪桂汤 肠道菌群 代谢组学 大鼠

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玉女煎对棕榈酸诱导的L细胞损伤的影响

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作者 王岩松 苏萌 +1 位作者 吕洁 雷莉妍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期706-712,共7页

目的:研究玉女煎对棕榈酸(PA)诱导的肠L细胞损伤的影响。方法:(1)将不同浓度(1.5、3和6 g/L)玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)溶液(100 mg/L)混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH... 目的:研究玉女煎对棕榈酸(PA)诱导的肠L细胞损伤的影响。方法:(1)将不同浓度(1.5、3和6 g/L)玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)溶液(100 mg/L)混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH·的清除作用。(2)将小鼠肠内分泌细胞系GLUTag分为空白对照组、PA(400μmol/L)组、PA+玉女煎(1.5 g/L)组、PA+玉女煎(3 g/L)组和PA+玉女煎(6 g/L)组,通过Hoechst 33342细胞核染色实验和MTT实验评价玉女煎对PA诱导的细胞凋亡的影响。(3)将GLUTag细胞分为空白对照组、PA组和PA+玉女煎(6 g/L)组,采用免疫荧光染色检测细胞内胰高血糖素样肽1(GLP-1)表达水平,通过2´,7´-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,通过Western blot实验检测超氧化物歧化酶1(SOD1)表达水平。结果:(1)玉女煎在体外可显著清除DPPH·(P<0.01)。(2)与PA组比较,玉女煎能以浓度依赖性方式抑制PA诱导的GLUTag细胞活力降低,在6 g/L时效果最明显(P<0.01)。(3)与PA组比较,6 g/L玉女煎能显著恢复GLUTag细胞的GLP-1(P<0.05)和SOD1表达水平(P<0.01),降低ROS水平(P<0.01)。结论:玉女煎可能通过降低细胞内氧化应激水平抑制PA诱导的GLUTag细胞损伤。 展开更多

关键词 玉女煎 棕榈酸 肠L细胞 氧化应激

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补肾更年方对去除卵巢大鼠血清E_2水平及下丘脑ERα蛋白表达的影响 被引量：1

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作者 张兰 邰迎春 +2 位作者 王渊 侯淑红 雷莉妍 《现代中医药》 CAS 2018年第5期112-115,120,共5页

目的治疗补肾更年方对去除卵巢大鼠血清E_2水平和下丘脑ERα蛋白表达的影响,探讨其效应机制。方法将40只大鼠用手术去除卵巢后随机分为补肾更年方大剂量组、中剂量组、小剂量组和己烯雌酚组,并与10只模型组和10只空白组做对照,补肾更年... 目的治疗补肾更年方对去除卵巢大鼠血清E_2水平和下丘脑ERα蛋白表达的影响,探讨其效应机制。方法将40只大鼠用手术去除卵巢后随机分为补肾更年方大剂量组、中剂量组、小剂量组和己烯雌酚组,并与10只模型组和10只空白组做对照,补肾更年方大、中、小剂量组以不同剂量灌胃,模型组和空白组以生理盐水灌胃,己烯雌酚组以己烯雌酚按1mL/100g的剂量灌胃,连续45 d,结束后,取血,放免法检测血清E_2,Western blot法检测大鼠下丘脑ERα蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠血清E_2水平显著降低、下丘脑ERα蛋白表达显著减少(P <0. 01);与模型组比较,补肾更年方大、中剂量组和己烯雌酚组能够显著升高大鼠血清E_2水平并增加下丘脑ERα蛋白表达(P <0. 05),补肾更年方小剂量组对其无明显影响(P> 0. 05)。结论补肾更年方在改善去除卵巢大鼠血清E_2水平同时,可能通过影响ERα蛋白的表达,提高ER的生物效应,从而发挥对更年期综合征的治疗效应。 展开更多

关键词 去除卵巢大鼠 补肾更年方 E2 ERΑ

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丁香酚诱导癌细胞PC-12凋亡的研究 被引量：3

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作者 苏萌 吕洁 +1 位作者 张兰 雷莉妍 《今日药学》 CAS 2022年第6期434-436,443,共4页

目的研究丁香酚诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC-12的凋亡作用机制。方法用不同浓度的丁香酚处理PC-12细胞,MTT法检测细胞相对存活率,荧光染色观察细胞凋亡情况;比色法检测Caspase-3酶活性;real-time PCR检测Bax和Bcl-2 mRNA水平的变化,Western b... 目的研究丁香酚诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC-12的凋亡作用机制。方法用不同浓度的丁香酚处理PC-12细胞,MTT法检测细胞相对存活率,荧光染色观察细胞凋亡情况;比色法检测Caspase-3酶活性;real-time PCR检测Bax和Bcl-2 mRNA水平的变化,Western blot检测蛋白水平的变化。结果丁香酚能显著降低PC-12细胞存活率,促进Bax mRNA及蛋白表达,抑制Bcl-2 mRNA及蛋白表达,进而提高Caspase-3酶活性。结论丁香酚可能通过上调Bax、下调Bcl-2表达,激活Caspase-3酶活性,诱导PC-12细胞凋亡。 展开更多

关键词 丁香酚 PC-12细胞 凋亡

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