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利用SUMO系统高效表达可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白 被引量:11
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作者 春丽 郭宇飞 +4 位作者 叶昱 王强 廖明 樊惠英 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期393-397,共5页
利用pCold-SUMO可溶性原核表达载体,构建表达猪圆环病毒2型缺失核定位信号肽的Cap基因的重组表达载体pCold-SUMO-dCap,并将其转入Arctic-Express表达菌株中15℃低温诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明SUMO-dCap融合蛋白获得了高... 利用pCold-SUMO可溶性原核表达载体,构建表达猪圆环病毒2型缺失核定位信号肽的Cap基因的重组表达载体pCold-SUMO-dCap,并将其转入Arctic-Express表达菌株中15℃低温诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明SUMO-dCap融合蛋白获得了高效表达,可溶性SUMO-dCap融合蛋白约占总融合蛋白的50%;用NI-NTA树脂纯化可溶性的融合蛋白,然后利用SUMO蛋白酶特异性去除SUMO标签,从而得到不含任何标签的dCap蛋白,进一步的Western-blot分析表明,表达的dCap蛋白具有良好的反应原性. 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 CAP蛋白 原核表达
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表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白的重组假型杆状病毒对SPF鸡的免疫原性分析 被引量:3
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作者 樊惠英 罗琼 +3 位作者 叶昱 辛朝安 廖明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期256-261,共6页
本研究旨在对本实验室所构建的表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白的重组假型杆状病毒(Ac-V-S1)的免疫保护效果进行探讨。以2×109 pfu剂量的重组假型杆状病毒(Ac-V-S1)腿部肌肉注射7日龄SPF雏鸡,21日龄加强免疫1次。血清抗体检... 本研究旨在对本实验室所构建的表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白的重组假型杆状病毒(Ac-V-S1)的免疫保护效果进行探讨。以2×109 pfu剂量的重组假型杆状病毒(Ac-V-S1)腿部肌肉注射7日龄SPF雏鸡,21日龄加强免疫1次。血清抗体检测表明,灭活疫苗组诱导的IBV特异性ELISA抗体水平最高,极显著高于其它试验组(P<0.01),其次是Prime-boost组(先免疫Ac-V-S1后免疫poly156S1亚单位疫苗)和Ac-V-S1组;但在细胞免疫水平方面,Ac-V-S1免疫组表现出较强的优势,免疫应答反应极显著的高于其它免疫组(P<0.01),然后是Prime-boost组和杆状病毒野毒对照组。二免后2周用IBV M41强毒进行攻毒保护试验。结果表明,Ac-V-S1、Ac-V-EGFP、poly156S1亚单位疫苗组的保护率分别为55%(6/11)、27%(3/11)、37%(4/11),而采用Prime-boost免疫组的保护率为64%(7/11),略低于免疫保护率为73%的常规灭活疫苗(8/11)。结果显示:重组杆状病毒Ac-V-S1具有较好的免疫效果,而且在细胞免疫方面具有较强优势,可以弥补重组杆状病毒在体液免疫水平的不足,而Prime-boost免疫策略能更进一步提高重组杆状病毒免疫效果,为将重组杆状病毒发展为经济有效的IBV基因工程疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 重组杆状病毒 S1基因 免疫保护
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关于进一步加强进口危险化学品检验监管的公告解读
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作者 夏俊杰 曙毅 +5 位作者 钟楚怡 郑宇 莫志鹏 罗广明 黄埔海关 《中国海关》 2023年第5期40-41,共2页
2023年4月10日,海关总署发布2023年第29号公告(关于进一步加强进口危险化学品检验监管的公告)(以下简称“29号公告”),自4月13日起施行。本文将针对有关条款内容进行解读。29号公告的发布背景为深入贯彻落实习近平总书记关于安全生产的... 2023年4月10日,海关总署发布2023年第29号公告(关于进一步加强进口危险化学品检验监管的公告)(以下简称“29号公告”),自4月13日起施行。本文将针对有关条款内容进行解读。29号公告的发布背景为深入贯彻落实习近平总书记关于安全生产的重要指示批示精神,有效化解危险品口岸聚集性风险,有力惩治危险品“伪报瞒报”不法行为,海关总署先后在上海海关、广州海关、黄埔海关开展了进口危险化学品检验模式改革试点工作。为进一步加强进口危险化学品检验监管,海关总署发布29号公告调整进口危险化学品检验模式。 展开更多
关键词 上海海关 广州海关 检验模式 黄埔海关 不法行为 检验监管 危险品 条款内容
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基于建设海南国际旅游岛的环境会计研究 被引量:2
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作者 秦浩 《特区经济》 北大核心 2011年第7期139-141,共3页
建设海南国际旅游岛上升为国家战略,其经济发展与环境保护的矛盾日益凸现。海南应充分利用中央赋予国际旅游岛的优惠政策,借鉴国外环境会计的成功经验,在推行环境会计过程中"先行先试",以政府为主导、以协会为引导、以企业为... 建设海南国际旅游岛上升为国家战略,其经济发展与环境保护的矛盾日益凸现。海南应充分利用中央赋予国际旅游岛的优惠政策,借鉴国外环境会计的成功经验,在推行环境会计过程中"先行先试",以政府为主导、以协会为引导、以企业为主体、以公众为基础,创新环境会计体制,推动海南环境会计建设走在全国前列。 展开更多
关键词 海南 国际旅游岛 环境会计 措施
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基于贪污案件的司法会计鉴定与反思——以海南A制药公司负责人涉嫌贪污案为例 被引量:1
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作者 秦浩 蒙远鹰 《会计之友》 北大核心 2012年第3期35-37,共3页
近年,贪污涉案人的作案手段不断翻新,更具有隐蔽性,这给司法会计鉴定带来一定的挑战。文章结合鉴定一宗国有企业负责人涉嫌贪污案的实践,深入反思,总结贪污案的惯用手法、检验技巧和鉴定方法等方面的经验,供同行借鉴。
关键词 贪污案件 司法会计鉴定 反思
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对不同表达系统的猪圆环病毒2型Rep蛋白的电泳特性分析
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作者 张停婷 程晓亮 +4 位作者 林文耀 张桂红 廖明 樊惠英 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期118-120,共3页
利用特异性引物从圆环病毒2型(PCV2)毒株克隆出Rep基因,并将其插入到原核表达载体pET28 a和杆状病毒转移载体pFastbacHT(B)上,利用大肠杆菌BL21(DE3)株原核系统以及Bac-to-Bac杆状病毒系统表达Rep蛋白.Western-blotting表明,原核和真核... 利用特异性引物从圆环病毒2型(PCV2)毒株克隆出Rep基因,并将其插入到原核表达载体pET28 a和杆状病毒转移载体pFastbacHT(B)上,利用大肠杆菌BL21(DE3)株原核系统以及Bac-to-Bac杆状病毒系统表达Rep蛋白.Western-blotting表明,原核和真核表达系统均能表达出圆环病毒2型Rep蛋白,电泳分析表明,不同系统表达得到的Rep蛋白有不同的电泳特性,揭示Rep蛋白存在翻译后修饰. 展开更多
关键词 圆环病毒2型 REP蛋白 原核表达 真核表达 杆状病毒表达系统
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数码钢琴授课在高校钢琴教学中的运用 被引量:1
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作者 《昌吉学院学报》 2008年第3期80-82,共3页
数码钢琴授课是一种全新的高校钢琴教学方式,便于音乐知识的融会贯通,迅速规范的提高弹奏技术和实用键盘能力,优势明显,是传统钢琴教学方式的有益补充。数码钢琴授课是基于传统钢琴教学上发展起来的,吸取了传统钢琴教育中正确有效的教... 数码钢琴授课是一种全新的高校钢琴教学方式,便于音乐知识的融会贯通,迅速规范的提高弹奏技术和实用键盘能力,优势明显,是传统钢琴教学方式的有益补充。数码钢琴授课是基于传统钢琴教学上发展起来的,吸取了传统钢琴教育中正确有效的教育思想、教学原则和教学方法、教学手段,并结合运用科学技术成果而进行的新型教育活动。 展开更多
关键词 数码钢琴 教学特点 课程设置
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论新疆塔城地区俄罗斯族音乐的美学价值 被引量:1
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作者 《艺术评鉴》 2016年第18期46-47,45,共3页
新疆塔城地区是中国俄罗斯族人口分布较为稠密的地区之一,该地区的俄罗斯族音乐文化既保留了本民族悠久的历史传统又与新疆其他各少数民族的音乐文化相互交融碰撞,形成了与俄罗斯境内有着鲜明差别的音乐特征,展现了独特的哲理美、即兴... 新疆塔城地区是中国俄罗斯族人口分布较为稠密的地区之一,该地区的俄罗斯族音乐文化既保留了本民族悠久的历史传统又与新疆其他各少数民族的音乐文化相互交融碰撞,形成了与俄罗斯境内有着鲜明差别的音乐特征,展现了独特的哲理美、即兴美与交融美。 展开更多
关键词 塔城地区 俄罗斯族 音乐文化 美感
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表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建
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作者 樊惠英 +4 位作者 林文耀 程晓亮 叶昱 春丽 廖明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期398-402,共5页
以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp6... 以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒,以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白. 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 M41 表面展示 S1蛋白 重组杆状病毒
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双表达H9N2禽流感病毒HA基因的假型重组杆状病毒系统的构建
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作者 林文耀 樊惠英 +3 位作者 程晓亮 叶煜 廖明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期80-84,92,共6页
以含有H9N2禽流感病毒HA基因的重组质粒pMD18-H9HA为模板,扩增HA基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将含有H9HA及gp64的基因片段克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA-H9-HA.然后将含有CMV启动子、H9HA及gp64... 以含有H9N2禽流感病毒HA基因的重组质粒pMD18-H9HA为模板,扩增HA基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将含有H9HA及gp64的基因片段克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA-H9-HA.然后将含有CMV启动子、H9HA及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-G,得到重组质粒pFastBac-G-H9-HA.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,得到重组穿梭载体Bacm id-G-H9-HA.利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-Dual-H9-HA.间接免疫荧光实验表明,该重组杆状病毒可以转导哺乳动物细胞并表达HA蛋白.免疫电镜观察结果表明,HA蛋白可以在该重组杆状病毒表面展示. 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 双表达 HA基因 重组假型杆状病毒
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浅谈鹅病的综合防治
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作者 曹宗喜 潘全会 +1 位作者 张桂红 《兽医导刊》 2007年第10期27-28,共2页
目前制约养鹅业发展的主要病害有小鹅瘟和鹅的鸭瘟等。这些疫病严重影响了鹅的健康和养鹅业的生产效益,对规模化饲养鹅的影响尤为严重。由于养鹅户所在的环境各不相同,养殖的规模大小不一,加上鹅只还存在着个体体质和免疫能力上的差... 目前制约养鹅业发展的主要病害有小鹅瘟和鹅的鸭瘟等。这些疫病严重影响了鹅的健康和养鹅业的生产效益,对规模化饲养鹅的影响尤为严重。由于养鹅户所在的环境各不相同,养殖的规模大小不一,加上鹅只还存在着个体体质和免疫能力上的差异,有时单靠其中的一种或几种方法很难达到理想的防治效果。因此,要预防各类疾病的发生,就必须坚持“预防为主、 展开更多
关键词 鹅病 综合防治 养鹅业 生产效益 免疫能力 防治效果 小鹅瘟 规模化
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区县级环境监察信息系统的设计——以上海市闵行区为例
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作者 《河南科技》 2009年第6期60-61,共2页
国家环保总局污控司司长陆新元指出:污染源的基础数据十分重要,而要获得大量的基础数据,单靠原始的人工统计的方法显然是不现实的,要依靠先进的信息技术,同时,一支拥有先进科技手段的执法队伍是履行环境监察职能的关键。上海是特大城市... 国家环保总局污控司司长陆新元指出:污染源的基础数据十分重要,而要获得大量的基础数据,单靠原始的人工统计的方法显然是不现实的,要依靠先进的信息技术,同时,一支拥有先进科技手段的执法队伍是履行环境监察职能的关键。上海是特大城市,各类工业企业、餐饮娱乐服务业众多,排污类型各异,数据量庞大,因此,有必要建立区县级的环境监察信息系统,缓解市级系统的压力。 展开更多
关键词 上海市闵行区 信息系统 环境监察 区县级 餐饮娱乐服务业 设计 国家环保总局 基础数据
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从一份移交清册谈企业内控建设
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作者 《中国集体经济》 2018年第20期154-155,共2页
文章通过一起司法会计鉴定案件得到了几点启示,一是财会人员离职须按照相关规定履行离职手续;二是加强财务监督,严格审核批准程序;三是须杜绝让财会人员以个人名义开立账户;四是不仅要加强事中控制和事后控制,还要做到任何工作"留... 文章通过一起司法会计鉴定案件得到了几点启示,一是财会人员离职须按照相关规定履行离职手续;二是加强财务监督,严格审核批准程序;三是须杜绝让财会人员以个人名义开立账户;四是不仅要加强事中控制和事后控制,还要做到任何工作"留痕"可追溯。 展开更多
关键词 司法鉴定 规范操作 内部控制
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表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建
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作者 程晓亮 林文耀 +4 位作者 叶煜 严常燕 廖明 樊惠英 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期96-100,共5页
利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子... 利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子,gp64及dCap的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-V,得到重组质粒pFastBac-dCap-V.然后将此转化DH10Bac感受态细胞,获得的重组穿梭质粒Bacmid-dCap-V,经脂质体转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-dCap-V.该重组病毒感染Sf9细胞后可以产生典型的细胞病变,转导哺乳动物细胞后经间接免疫荧光试验证明,该重组杆状病毒成功转导哺乳动物细胞并表达dCap蛋白. 展开更多
关键词 杆状病毒表面展示系统 猪圆环病毒2型 dCap基因
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出海检疫“惊心动魄”
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作者 戴霖 丁迎 《中国检验检疫》 2015年第9期16-17,共2页
在闻名世界的黄埔港和珠江口,活跃着这样一支年轻而充满活力的队伍,他们平均年龄在30岁出头,成年累月“5+2”、“白加黑”,练就了一身本领,与海风抗争,同海浪拼搏,守卫着祖国南大门,
关键词 检疫 平均年龄 珠江口 黄埔港
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新疆塔城俄罗斯族音乐文化现状
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作者 《黄河之声》 2016年第17期96-96,共1页
本文要讲述的是我国一支人口最少的少数民族——俄罗斯族,与他们的音乐文化。主要从历史渊源、音乐文化现状、文化保护与传承几方面概括介绍新疆塔城俄罗斯族音乐文化。
关键词 新疆塔城 俄罗斯族 音乐文化
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