摘要
利用特异性引物从圆环病毒2型(PCV2)毒株克隆出Rep基因,并将其插入到原核表达载体pET28 a和杆状病毒转移载体pFastbacHT(B)上,利用大肠杆菌BL21(DE3)株原核系统以及Bac-to-Bac杆状病毒系统表达Rep蛋白.Western-blotting表明,原核和真核表达系统均能表达出圆环病毒2型Rep蛋白,电泳分析表明,不同系统表达得到的Rep蛋白有不同的电泳特性,揭示Rep蛋白存在翻译后修饰.
Rep gene of PCV type 2 was amplified,and further inserted into the prokaryotic expression vector（pET28a） and the eukaryotic transfer vector（pFastbacHT（B））.Rep protein was expressed by both Escherichia coli BL21（DE3） and by baculovirus infected Sf9 cell line.Western-blotting indicated that prokaryotic and eukaryotic Rep proteins were successfully expressed with different electrophoretic characteristics,which revealed that there may be post-translational effects on Rep protein.
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期118-120,共3页
Journal of South China Agricultural University
基金
“863”计划(2006AA10A205)
教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-06-0752)
国家自然科学青年基金(30800826)
广东省博士启动基金(8451064201001131)
农业微生物学重点实验室开发课题(20090010)
华南农业大学校长基金(5500-K08240)
关键词
圆环病毒2型
REP蛋白
原核表达
真核表达
杆状病毒表达系统
porcine circovirus type 2
Rep protein
prokaryotic expression
eukaryotic expression
baculovirus expression system
