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西黄丸含药血清对人结直肠癌细胞SW480凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响 被引量:18
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作者 葛鑫宇 +3 位作者 刘彬 鄢文 靳文 李纪强 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期507-509,共3页
目的:研究西黄丸对人结直肠癌细胞SW480凋亡的影响及其作用机制的初步探讨。方法:以人结直肠癌细胞SW480为研究对象,MTT法检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞活性的影响,并用流式细胞术检测西黄丸含药血清引起的细胞凋亡率改变;用We... 目的:研究西黄丸对人结直肠癌细胞SW480凋亡的影响及其作用机制的初步探讨。方法:以人结直肠癌细胞SW480为研究对象,MTT法检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞活性的影响,并用流式细胞术检测西黄丸含药血清引起的细胞凋亡率改变;用Western blot的方法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,初步探讨其凋亡机制。结果:西黄丸含药血清可浓度依赖性降低SW480的细胞活力并增加细胞凋亡率,Western blot结果显示西黄丸含药血清增加了Bax蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞活力、诱导细胞凋亡并减小Bcl-2、Bax蛋白表达比例,其机制可能与以线粒体为核心的凋亡途径有关。 展开更多
关键词 西黄丸 含药血清 人结直肠癌 细胞凋亡
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多重实时荧光定量PCR快速检测婴幼儿奶粉中沙门氏菌、克罗诺杆菌和金黄色葡萄球菌 被引量:19
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作者 林碧莲 柯振华 +1 位作者 许任伟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第11期4375-4381,共7页
目的建立多重实时荧光定量PCR(multiplex quantitative real-time PCR,multiplex qPCR)快速检测奶粉中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和克罗诺杆菌3种常见致病菌的方法。方法筛选目标菌株的特异性引物与探针,优化反应体系,建立稳定的多重q PC... 目的建立多重实时荧光定量PCR(multiplex quantitative real-time PCR,multiplex qPCR)快速检测奶粉中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和克罗诺杆菌3种常见致病菌的方法。方法筛选目标菌株的特异性引物与探针,优化反应体系,建立稳定的多重q PCR反应体系。通过阳性菌株加标的方式验证体系的特异性,并确定人工污染奶粉的检出限。结果各对引物探针对目标菌株均能扩增,多重实时荧光PCR未发现交叉反应,对17株非目标菌进行检测均未检出,人工污染奶粉中克罗诺杆菌和沙门氏菌的检出限均为10~3 CFU/mL,金黄色葡萄球菌的检出限为10~4 CFU/mL。结论本研究方法可实现婴幼儿奶粉样品中3种致病菌qPCR高效率检测。 展开更多
关键词 多重实时荧光PCR 奶粉 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 克罗诺杆菌
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西黄丸含药血清对SW480人结肠癌细胞迁移及侵袭的影响 被引量:15
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作者 葛鑫宇 +3 位作者 刘彬 鄢文 靳文 李纪强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期136-141,共6页
目的:研究西黄丸对人结肠癌细胞SW480迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以人结肠癌细胞SW480为研究对象,细胞划痕试验检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞迁移的影响,并Transwell侵袭实验检测西黄丸含药血清对细胞侵袭... 目的:研究西黄丸对人结肠癌细胞SW480迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以人结肠癌细胞SW480为研究对象,细胞划痕试验检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞迁移的影响,并Transwell侵袭实验检测西黄丸含药血清对细胞侵袭能力的改变;用Western blot的方法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白表达水平,RTq PCR法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)、波形蛋白(Vimentin)和转录因子Snail的mRNA水平。结果:与空白组比较,西黄丸含药血清可降低SW480细胞迁移及侵袭的能力,增加E-cadhenrin mRNA表达水平,并抑制PARP-1,Vimentin和Snail mRNA表达水平,明显降低ERK蛋白的磷酸化水平,均具有统计学意义(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞的体外侵袭及迁移,并影响上皮-间皮转化(EMT)相关基因E-cadherin,PARP-1,Vimentin和Snail的mRNA表达,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关,本研究为西黄丸抑制结肠癌转移提供了科学证据。 展开更多
关键词 西黄丸 含药血清 结肠癌 肿瘤转移 上皮-间皮转化
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肿瘤诱导细胞自噬致营养不良与脾主肌肉四肢的相关性探讨 被引量:12
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作者 靖林林 孙学刚 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期4365-4367,共3页
癌性营养不良(CAM)是肿瘤患者的常见死因,其本质以脾气虚为主,晚期则见脾肾两虚。肿瘤诱导产生以慢性炎性反应和免疫抑制为主要特征的肿瘤免疫微环境,肿瘤细胞释放炎性因子、活性氧簇等至微环境,诱导骨骼肌、脂肪和间质细胞自噬,自噬释... 癌性营养不良(CAM)是肿瘤患者的常见死因,其本质以脾气虚为主,晚期则见脾肾两虚。肿瘤诱导产生以慢性炎性反应和免疫抑制为主要特征的肿瘤免疫微环境,肿瘤细胞释放炎性因子、活性氧簇等至微环境,诱导骨骼肌、脂肪和间质细胞自噬,自噬释放的谷氨酰胺、酮体和乳酸则促进肿瘤细胞的线粒体氧化磷酸化功能。这种肿瘤组织主导的、肿瘤与肌肉等正常组织间的能量代谢重编程是脾虚CAM的内在本质,肌肉、脂肪等组织消耗则是其外在表现。肿瘤与正常组织通过自噬而形成的代谢偶联是CAM脾(肾)虚的重要病机,也是脾主肌肉四肢理论和健脾法内涵研究的新内容。 展开更多
关键词 脾主肌肉四肢 自噬 能量代谢 骨骼肌 营养不良
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羊乳制品中动植物源性成分多重RT-PCR方法研究 被引量:9
5
作者 柯振华 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第15期156-162,共7页
羊乳制品因其营养丰富的特点受到消费者的青睐,但也容易成为乳制品掺假的主要目标。通过合成羊源性、牛源性、植物源性成分特异性的引物和探针,建立羊-牛-植物3种源性成分的双重和三重实时荧光PCR检测体系,并设计相应的特异性试验保证... 羊乳制品因其营养丰富的特点受到消费者的青睐,但也容易成为乳制品掺假的主要目标。通过合成羊源性、牛源性、植物源性成分特异性的引物和探针,建立羊-牛-植物3种源性成分的双重和三重实时荧光PCR检测体系,并设计相应的特异性试验保证检测体系的准确性。本检测体系对羊源性、牛源性、植物源性成分的检测灵敏度可达0.1 ng/μL;羊乳中掺入牛乳的检测限可达到0.1%(体积分数);羊乳中掺入纯豆奶的检测限可达到0.5%(体积分数)。本研究建立的多重实时荧光PCR检测方法可实现准确快速、高特异性、高灵敏度检测羊乳制品中掺假掺杂的动植物源性成分。 展开更多
关键词 羊乳制品 检测技术 掺假掺杂 多重实时荧光PCR
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基层检察机关推进轻罪治理现代化的基本思路
6
作者 李才利 向奎 +2 位作者 曹敏红 《人民检察》 2024年第14期68-69,共2页
党的二十大报告强调,要完善社会治理体系,提升社会治理法治化水平。构建轻罪治理体系是顺应社会治理需要,推进国家治理体系和治理能力现代化的重要环节。近年来,刑事犯罪案件、严重暴力犯罪案件总体呈持续下降态势,轻微犯罪案件数量持... 党的二十大报告强调,要完善社会治理体系,提升社会治理法治化水平。构建轻罪治理体系是顺应社会治理需要,推进国家治理体系和治理能力现代化的重要环节。近年来,刑事犯罪案件、严重暴力犯罪案件总体呈持续下降态势,轻微犯罪案件数量持续增加。随着犯罪结构出现重大变化,犯罪分层的理论意义与实践价值更加凸显。 展开更多
关键词 治理现代化 基层检察机关 轻微犯罪 刑事犯罪案件 社会治理法治化 犯罪分层 社会治理体系 轻罪
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皮革肉面纤维束与人造革底基纤维的扫描电镜观察和X射线能谱分析 被引量:5
7
作者 柯振华 +4 位作者 郭新东 孙世彧 蔡玮红 侯向昶 罗海英 《皮革科学与工程》 CAS 北大核心 2012年第5期69-72,共4页
对多种天然皮革肉面纤维束及人造革底基纤维的形态结构进行了扫描电镜(SEM)观察,并且利用X射线能谱仪(EDS)对上述多种纤维进行了元素分析。结果表明,皮革肉面纤维束与人造革底基纤维在元素组成与形态结构等方面存在着显著性差异。本研... 对多种天然皮革肉面纤维束及人造革底基纤维的形态结构进行了扫描电镜(SEM)观察,并且利用X射线能谱仪(EDS)对上述多种纤维进行了元素分析。结果表明,皮革肉面纤维束与人造革底基纤维在元素组成与形态结构等方面存在着显著性差异。本研究方法与理论可为皮革的鉴别与分类等提供参考依据。 展开更多
关键词 皮革 人造革 肉面纤维束 底基纤维 扫描电镜 X射线能谱分析
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多重RT-PCR法检测燕窝及其制品掺伪成分 被引量:6
8
作者 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第11期3493-3500,共8页
目的建立一种食用燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR检测方法。方法本研究通过合成金丝燕成分、银耳成分、红藻成分特异性的引物和探针,建立燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR检测体系,并设计相应的特异性实... 目的建立一种食用燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR检测方法。方法本研究通过合成金丝燕成分、银耳成分、红藻成分特异性的引物和探针,建立燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR检测体系,并设计相应的特异性实验保证检测体系的准确性,最后使用所建立的方法对市售样品进行检测并收集数据,验证多重实时荧光PCR检测方法的适用性。结果本方法可在1 d内完成样品的检测,建立的体系对金丝燕成分、银耳成分的检测灵敏度为0.1 ng/μL,红藻成分的检测灵敏度为0.5 ng/μL;燕窝中掺入银耳的检测限可达到0.1%;燕窝中掺入石花菜的检测限可达到0.5%。结论本研究建立的多重实时荧光PCR检测方法具有准确、灵敏度高、特异性好的优点,可用于燕窝及其制品中掺假物成分的准确定性检测。 展开更多
关键词 燕窝及制品 掺伪成分 多重实时荧光 PCR
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抗人stathmin单克隆抗体与紫杉醇联用对人肝癌细胞增殖的抑制作用 被引量:4
9
作者 原少斐 杜红延 +2 位作者 汪森明 李明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期165-169,共5页
目的:探讨抗人stathmin单克隆抗体和紫杉醇单用或联用对肝癌细胞系HepG2增殖的抑制作用。方法:以不同浓度的抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别组成单药组和联合用药组,另设不加药的空白对照组,分别作用于HepG2细胞24、48、72和96h,观... 目的:探讨抗人stathmin单克隆抗体和紫杉醇单用或联用对肝癌细胞系HepG2增殖的抑制作用。方法:以不同浓度的抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别组成单药组和联合用药组,另设不加药的空白对照组,分别作用于HepG2细胞24、48、72和96h,观察细胞数量和形态的变化,MTT法检测各用药组对HepG2细胞增殖的抑制作用,AnnexinV/PI双染法检测各组细胞凋亡率的改变。结果:不同浓度的各组药物作用后细胞数量明显减少,形态不规则,部分细胞变圆、细胞核固缩和胞质减少,而对照组细胞生长状态良好。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单药与联用均能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,联用组细胞增殖抑制率较单药组明显增高(P<0.05),两药联用有交互效应(P<0.05)。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能诱导HepG2细胞凋亡,联合组作用更为明显(P<0.05)。结论:抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单药与联用均能抑制HepG2细胞增殖和诱导其凋亡,两药联合使用具有协同作用。 展开更多
关键词 STATHMIN 单克隆抗体 紫杉醇 肝肿瘤 增殖 凋亡
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轻罪前科消灭制度的构建
10
作者 李才利 向奎 +2 位作者 曹敏红 《人民检察》 2023年第S02期40-41,共2页
近年来,轻罪类型和数量呈现出不断增长的趋势,给社会治理带来挑战。在积极刑法观的推动下,刑法修正案将边缘化的轻度危害行为纳入刑法处罚的范围,以提高违法成本和处罚力度。然而,将常见、多发的轻度危害行为“犯罪化”后,大量人群被贴... 近年来,轻罪类型和数量呈现出不断增长的趋势,给社会治理带来挑战。在积极刑法观的推动下,刑法修正案将边缘化的轻度危害行为纳入刑法处罚的范围,以提高违法成本和处罚力度。然而,将常见、多发的轻度危害行为“犯罪化”后,大量人群被贴上犯罪的标签,面临着各种刑罚附随后果。这种做法虽然发挥了犯罪预防功能,但也增加了社会负担,实践中存在较大争议。在此背景下,构建轻罪案件前科消灭制度,对于推动轻罪治理体系建设、具有重要意义。 展开更多
关键词 违法成本 刑法修正案 前科消灭制度 犯罪预防 刑法处罚 轻度危害 犯罪化 轻罪
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肝肠钙粘连蛋白单克隆抗体的制备及其对HepG2的生长抑制作用 被引量:2
11
作者 杜红延 +2 位作者 原少斐 汪森明 李明 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期880-883,共4页
目的制备及鉴定肝肠钙粘连蛋白(CDH17)的单克隆抗体,研究其对肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用。方法利用重组CDH17蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限... 目的制备及鉴定肝肠钙粘连蛋白(CDH17)的单克隆抗体,研究其对肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用。方法利用重组CDH17蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗CDH17的单克隆抗体杂交瘤细胞株,通过ELISA和Western blotting分别对其效价和特异性进行鉴定,以不同浓度的单抗分别作用于HepG2细胞24、48、72和96h,观察细胞数量和形态的变化,MTT法检测其对HepG2细胞的增值抑制作用。结果成功建立了2株稳定分泌抗CDH17的单克隆抗体杂交瘤细胞株。两株单抗通过Western blotting实验都能特异性地结合真核细胞内源性的CDH17蛋白。不同浓度的单抗作用后细胞数量明显减少、形态不规则。不同浓度的单抗均能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,药物浓度和用药时间之间有交互效应(P<0.05)。结论成功建立了两株效价高、特异性好的抗CDH17蛋白的单克隆抗体,其能抑制HepG2细胞增殖,并呈剂量-时间依赖效应。 展开更多
关键词 肝肠钙粘连蛋白 单克隆抗体 杂交瘤 肿瘤 增值
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肝肠钙粘连蛋白与肿瘤的研究进展 被引量:3
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作者 杜红延 +1 位作者 汪森明 李明 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期297-299,共3页
关键词 肝肠钙粘连蛋白 Ca^2+依赖 肿瘤 细胞信号转导 家族成员 细胞粘附 多基因家族 生物学功能
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抗人微管不稳定蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:3
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作者 原少斐 +2 位作者 汪森明 杜红延 李明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期466-469,共4页
目的制备人微管不稳定蛋白(Stathmin)的单克隆抗体,检测Stathmin蛋白在真核细胞中的表达,为探讨Stathmin生物学功能奠定基础。方法利用重组Stathmin蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常... 目的制备人微管不稳定蛋白(Stathmin)的单克隆抗体,检测Stathmin蛋白在真核细胞中的表达,为探讨Stathmin生物学功能奠定基础。方法利用重组Stathmin蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗Stathmin单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA,Westernblot和免疫组织化学实验等方法分别对其效价和特异性进行鉴定。结果成功地建立了2株稳定分泌抗Stath-min的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为F001和F002。两株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。两株单克隆抗体通过免疫组织化学实验和Westernblot实验都能特异性地结合真核细胞内源性的Stathmin蛋白。结论成功建立了两株效价高、特异性好的抗Stathmin蛋白的单克隆抗体,为进一步研究Stathmin的生物学功能及其与肿瘤的关系创造了条件。 展开更多
关键词 STATHMIN蛋白 单克隆抗体 杂交瘤 肿瘤
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CCNG2在神经胶质瘤组织中的表达及其临床意义 被引量:2
14
作者 祥龙 何克菲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期237-241,共5页
目的:探讨神经胶质瘤组织中CCNG2的表达,其表达状况与临床病理参数的相关性及意义。方法:收集2007年1月至2012年8月在本院手术切除的神经胶质瘤组织标本129例。采用QRT-PCR及免疫组织化学染色方法,在基因及蛋白水平检测其中临床资料完整... 目的:探讨神经胶质瘤组织中CCNG2的表达,其表达状况与临床病理参数的相关性及意义。方法:收集2007年1月至2012年8月在本院手术切除的神经胶质瘤组织标本129例。采用QRT-PCR及免疫组织化学染色方法,在基因及蛋白水平检测其中临床资料完整的109例神经胶质瘤标本中CCNG2的表达。结果:在109例神经胶质瘤组织标本中,CCNG2在高级别的神经胶质瘤组织中的表达较低级别的明显降低,其表达与肿瘤的分级呈负相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。CCNG2的表达与患者性别、年龄无关(均P>0.05);而与肿瘤的分级、对放化疗的敏感性及总生存时间相关(均P<0.001)。结论:检测CCNG2的表达有助于阐释神经胶质瘤发生发展的机制,并可作为评估神经胶质瘤恶性生物学行为及预后的参考指标。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 CCNG2 免疫组织化学 临床病理参数
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大学生数字教材购买行为分析架构 被引量:2
15
作者 万荣水 《出版科学》 CSSCI 2008年第3期69-74,共6页
提出探讨不同人口统计变量与学习生活型态之大学生,其数字教材购买行为之实证分析架构。拟透过对数字教材发展趋势和大学生购买行为分析架构的陈述,为相关学术研究提供一个思考方向。这项架构假定大学生对于数字教材的购买行为,将因不... 提出探讨不同人口统计变量与学习生活型态之大学生,其数字教材购买行为之实证分析架构。拟透过对数字教材发展趋势和大学生购买行为分析架构的陈述,为相关学术研究提供一个思考方向。这项架构假定大学生对于数字教材的购买行为,将因不同人口统计变量与学习生活型态之差异而有所不同。 展开更多
关键词 数字教材 购买行为 大学生 学习生活型态
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食品接触材料中3种致病菌的多重荧光PCR检测 被引量:3
16
作者 柯振华 张雅薇 +4 位作者 林碧莲 孟鹏 高宇 戴明 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第23期134-141,共8页
建立并优化食品接触材料中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和副溶血性弧菌3种致病菌的多重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并模拟阳性样品进行检测。结果显示,该方法特异性良好,... 建立并优化食品接触材料中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和副溶血性弧菌3种致病菌的多重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并模拟阳性样品进行检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到10~3 CFU/mL,为食品接触材料的微生物检测提供技术保障。 展开更多
关键词 多重实时荧光聚合酶链式反应(PCR) 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 副溶血性弧菌 食品接触材料
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食品接触材料表面细菌生物被膜形成能力的研究进展 被引量:3
17
作者 张雅薇 柯振华 +2 位作者 林碧莲 孟鹏 《福建轻纺》 2018年第9期16-19,共4页
食品接触材料的安全性是食品安全领域的重要问题,材料表面的粗糙度、电荷、亲水性能都可影响食源性致病菌的粘附,而细菌粘附往往是生物被膜形成的第1个阶段。文章主要从玻璃、不锈钢、纸质材料等常用食品接触材料表面细菌生物被膜形成... 食品接触材料的安全性是食品安全领域的重要问题,材料表面的粗糙度、电荷、亲水性能都可影响食源性致病菌的粘附,而细菌粘附往往是生物被膜形成的第1个阶段。文章主要从玻璃、不锈钢、纸质材料等常用食品接触材料表面细菌生物被膜形成能力方面进行了综述,为进一步预防控制食源性疾病提供理论依据。 展开更多
关键词 食品接触材料 生物被膜 食品安全
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葛浩文英译莫言《生死疲劳》被动意义句式研究——生态翻译学视角 被引量:1
18
作者 吴涛 《汉字文化》 2022年第20期152-154,共3页
生态翻译学为复杂的汉语被动意义句式提供了“适应”与“选择”的翻译指导,呈现了语言维、文化维、交际维三维转换的新视角,提供了最优译法。就被动意义句式的英译问题,本文从莫言《生死疲劳》及葛浩文译本出发,整理中文原文被动意义句... 生态翻译学为复杂的汉语被动意义句式提供了“适应”与“选择”的翻译指导,呈现了语言维、文化维、交际维三维转换的新视角,提供了最优译法。就被动意义句式的英译问题,本文从莫言《生死疲劳》及葛浩文译本出发,整理中文原文被动意义句式,从提及施事和未提及施事两个方面讨论葛浩文对此类句式的英译,从生态翻译学语言、文化、交际三个维度的转换做出评析,总结葛浩文英译时使用的翻译方法,旨在启示被动意义句式这种汉语中常见的文化负载句式的翻译,从而助推中国文学作品更好地“走出去”。 展开更多
关键词 《生死疲劳》 被动意义句式英译 生态翻译学
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牛皮革PCR鉴别方法研究 被引量:20
19
作者 柯振华 罗海英 +4 位作者 宗良 郭新东 吴玉銮 覃芳芳 《皮革科学与工程》 CAS 北大核心 2013年第1期32-36,42,共6页
本研究比较了不同的DNA提取方法,最终运用苯酚-氯仿抽提法成功地从牛皮革样品中提取获得质量较高的DNA,建立了牛皮革DNA的提取方法。该方法充分考虑了皮革材料的特殊性,利用裂解缓冲液释放皮革中的核酸,采用高浓度盐溶液除去溶液中的蛋... 本研究比较了不同的DNA提取方法,最终运用苯酚-氯仿抽提法成功地从牛皮革样品中提取获得质量较高的DNA,建立了牛皮革DNA的提取方法。该方法充分考虑了皮革材料的特殊性,利用裂解缓冲液释放皮革中的核酸,采用高浓度盐溶液除去溶液中的蛋白质,用苯酚、氯仿混合溶液进一步除去蛋白,最终获得纯化的皮革DNA。根据牛线粒体基因序列设计特异性的扩增引物,成功地从皮革样品DNA中扩增出271 bp的牛内源基因片段。本方法通过分析皮革样品中的遗传学信息来鉴定皮革种类,特异性强、灵敏度高,可广泛应用于皮革的鉴别与分类中。 展开更多
关键词 牛皮革 皮革鉴别 脱氧核糖核酸 聚合酶链式反应
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蛋制品中沙门氏菌的PCR及实时荧光PCR检测方法
20
作者 《福建轻纺》 2015年第7期25-29,共5页
研究针对蛋制品中沙门氏菌的检测开发了一种快速灵敏的PCR检测方法。研究方法采用煮沸法提取样品DNA,运用PCR方法筛查样品中的沙门氏菌基因成分。根据沙门氏菌基因组中的保守序列设计特异性引物与探针,PCR扩增结果表明,阳性样品扩增获... 研究针对蛋制品中沙门氏菌的检测开发了一种快速灵敏的PCR检测方法。研究方法采用煮沸法提取样品DNA,运用PCR方法筛查样品中的沙门氏菌基因成分。根据沙门氏菌基因组中的保守序列设计特异性引物与探针,PCR扩增结果表明,阳性样品扩增获得的序列与Genebank中沙门氏菌的基因序列完全匹配。采用实时PCR检测方法可检出浓度低至1.57×10-5μg.μL-1的沙门氏菌DNA,检测时间少于24 h,对比常规的微生物培养方法,该方法显著地提高了检测速度。研究方法具有特异性强、灵敏度高等优点,可以广泛应用于蛋制品及相关食品中沙门氏菌的高通量筛查检测。 展开更多
关键词 蛋制品 沙门氏菌 食品 PCR 实时PCR
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