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家养鲤科鱼暴发性传染病的病原研究 被引量：129
1
作者 陈怀青 陆承平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期87-91,共5页
从不同地区、不同鱼种的濒死病鱼的实质性脏器中分离到一种革兰氏阴性、有运动力的短杆菌,具有如下特点:氧化酶和V-P反应均呈阳性,发酵葡萄糖产酸、产气,发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖,不发酵肌醇,鸟氨酸脱羧酶阴性,对新生霉素不敏感。... 从不同地区、不同鱼种的濒死病鱼的实质性脏器中分离到一种革兰氏阴性、有运动力的短杆菌,具有如下特点:氧化酶和V-P反应均呈阳性,发酵葡萄糖产酸、产气,发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖,不发酵肌醇,鸟氨酸脱羧酶阴性,对新生霉素不敏感。用API-20E系统试剂盒检测,证实其为嗜水气单胞菌。用该菌人工感染健康鱼,可引致与自然发病鱼类似的病症,其半数致死量(LD_(50))为5×10~3个菌。在该菌的培养上清中存在着一种具有溶血活性的毒素。研究证明,家养鲤科鱼暴发性传染病的病原为产毒素的嗜水气单胞菌,该病的准确名称应为嗜水气单胞菌败血症。 展开更多
关键词 鲁鱼 传染病 病原 单胞菌
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嗜水气单胞菌胞外蛋白酶ECPase54的纯化及特性分析 被引量：54
2
作者 李焕荣 陈怀青 陆承平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期88-94,共7页
嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株的液体培养物上清在５６℃或与乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）或丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）作用，其胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓｅ）的活力有不同程度的下降。将酪蛋白掺入丙烯酰胺聚合后，加Ａｈ... 嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株的液体培养物上清在５６℃或与乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）或丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）作用，其胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓｅ）的活力有不同程度的下降。将酪蛋白掺入丙烯酰胺聚合后，加ＡｈＪ－１上清作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，３７℃原位消化，染色，显示上清中存在至少５种分子量不同的蛋白酶。ＡｈＪ－１株的培养上清经硫酸铵沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００分子筛层析，获得一种纯化的蛋白酶。不经２－巯基乙醇处理后，分子量约为５４０００，而经２－巯基乙醇处理的样品，分子量为３５０００，且酶活性丧失。该酶对热稳定，ＥＤＴＡ可抑制其活性，ＰＭＳＦ对其无影响。此酶属于热稳定金属蛋白酶（ＴＳＭＰ），建议命名为ＥＣＰａｓｅ５４。它的最适ｐＨ为７．５，米氏常数（Ｋｍ）为１．７７ｍｇ／ｍｌ，对Ｖｅｒｏ细胞有毒性，腹腔注射能致死小白鼠。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 胞外 蛋白酶 纯化 特性分析
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嗜水气单胞菌:黄鳝出血性败血症的病原 被引量：61
3
作者 陈怀青 陆承平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第4期21-23,共3页
本文报告1989年夏季对江苏某特种水产养殖场暴发的黄鳝出血性败血症所进行的病原学研究结果。从濒死黄鳝实质性脏器分离到一种细菌,经腹腔注射和浸泡两种方法人工感染正常无病黄鳝,均出现与自然病例相同的症状并死亡,从死亡黄鳝中亦再... 本文报告1989年夏季对江苏某特种水产养殖场暴发的黄鳝出血性败血症所进行的病原学研究结果。从濒死黄鳝实质性脏器分离到一种细菌,经腹腔注射和浸泡两种方法人工感染正常无病黄鳝,均出现与自然病例相同的症状并死亡,从死亡黄鳝中亦再次获得同样细菌。该菌为革兰氏阴性短杆菌,以极生单鞭毛运动,细胞色素氧化酶阳性,V-P试验阳性,发酵葡萄糖产酸产气,发酵甘露醇,水杨苷和阿拉伯糖,不发酵肌醇,鸟氨酸脱羧酶阴性,对新生霉素不敏感,与嗜水气单胞菌参考菌株的交叉凝集试验为阳性。经鉴定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hy-drophila)。 展开更多
关键词 败血症 嗜水气单胞菌 黄鳝
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用点酶法检测鱼类致病性嗜水气单胞菌HEC毒素 被引量：40
4
作者 陈怀青 陆承平 +1 位作者 陈琼 涂小林 《动物检疫》 1993年第4期7-9,共3页
本试验建立的检测嗜水气单胞菌HEC毒素的点酶法,可在嗜水气单胞菌培养上清和临床病料中检出HEC毒素,可检出的最低水平为95ng/ml。用该法检测大肠杆菌、沙门氏菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、温和气单胞菌等的培养上清及患草鱼出血病的病鱼病... 本试验建立的检测嗜水气单胞菌HEC毒素的点酶法,可在嗜水气单胞菌培养上清和临床病料中检出HEC毒素,可检出的最低水平为95ng/ml。用该法检测大肠杆菌、沙门氏菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、温和气单胞菌等的培养上清及患草鱼出血病的病鱼病料,均为阴性反应,仅与豚鼠气单胞菌、杀鲑气单胞菌新亚种及吕克氏耶尔森氏菌有轻度的交叉反应。对72株病鱼分离菌及33份病鱼组织的检测结果表明,点酶法与溶血试验的符合率分别为80.7%和90.9%。以上试验重复3次,结果完全一致。综上可见,用点酶法检测嗜水气单胞菌HEC毒素,无须作复杂的细菌鉴定,并能直接用于病料,是一个快速、敏感、特异、有效的方法,显示出广阔的应用前景。 展开更多
关键词 点酶法 嗜水气单胞菌 毒素 鱼类
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致病性嗜水气单胞菌保护性抗原的研究 被引量：27
5
作者 孙建和 严亚贤 +1 位作者 陈怀青 陆承平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第3期20-23,共4页
本试验采用SDS－PAGE对10株嗜水气单胞菌（Ah）的外膜蛋白（OMP）和脂多糖（LPS）进行分析，结果显示大多数菌株具有相似的OMP图谱，而LPS则有较大的差异，用鲫鱼抗AhJ-1株全菌血清进行免疫转印，发现S蛋白（S－layerProtein）是70％Ah... 本试验采用SDS－PAGE对10株嗜水气单胞菌（Ah）的外膜蛋白（OMP）和脂多糖（LPS）进行分析，结果显示大多数菌株具有相似的OMP图谱，而LPS则有较大的差异，用鲫鱼抗AhJ-1株全菌血清进行免疫转印，发现S蛋白（S－layerProtein）是70％Ah菌株的共同抗原，而LPS则有明显的抗原多样性，AhJ－1株抗血清仅能与同源菌株起反应。用AhJ－1株HEC毒素（Hemolvticactivity，Enterotoxicity，Cytotoxicity，HEC）的单克隆抗体检测此10株Ah，8株细菌可产生抗原性相同的HEC毒素。用纯化的AhJ－1株的S蛋白、LPS及HEC毒素（预先天活）分别免疫小鼠，强化免疫后，对同源菌株的攻击均能完全保护；S蛋白免疫组和HEC毒素免疫组对异源菌株TPS－30的攻击均能保护，而LPS免疫组则不能完全保护。上述结果表明，S蛋白和HEC毒素是Ah的主要共同保护抗原。AhJ-1株有望成为预防嗜水气单胞菌败血症的疫苗生产菌株。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 共同保护抗原 S蛋白
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嗜水气单胞菌亚单位疫苗的研制 被引量：30
6
作者 孙建和 严亚贤 +1 位作者 陈怀青 陆承平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第1期11-15,共5页
首先提纯嗜水气单胞菌Ｊ－１株的外毒素一ＨＥＣ毒素和脂多糖，进而将脂多糖脱去类脂Ａ，再用ＥＤＣ法将ＨＥＣ毒素与多糖偶联。偶联物经双抗体夹心ＥＬＩＳＡ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００层析鉴定确认，ＨＥＣ毒素与多糖的偶联比为１... 首先提纯嗜水气单胞菌Ｊ－１株的外毒素一ＨＥＣ毒素和脂多糖，进而将脂多糖脱去类脂Ａ，再用ＥＤＣ法将ＨＥＣ毒素与多糖偶联。偶联物经双抗体夹心ＥＬＩＳＡ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００层析鉴定确认，ＨＥＣ毒素与多糖的偶联比为１：１．３。偶联物作为亚单位苗，对小鼠和鲫鱼均无毒性，能诱导免疫小鼠和鲫鱼产生坚强的保护，对同源菌株的攻击保护率，小鼠１００％，鲫鱼８３％。与嗜水气单胞菌的全菌苗和毒素苗相比，亚单位苗诱导的抗体出现早，滴度高，持续时间长。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 多糖 亚单位苗 疫苗
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嗜水气单胞菌S蛋白的提纯及特性分析 被引量：28
7
作者 严亚贤 陈怀青 陆承平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期144-150,共7页
电镜观察表明,嗜水气单胞菌J-1株具有S层结构,在菌体外层呈晶格样规则排列。菌体经酸性甘氨酸缓冲液处理,S层从菌体上脱落,离心上清液即为粗提S蛋白。进一步经Sephadex G200凝胶层析和DEAE-纤维素离子交换层析纯化,获得的S蛋白呈单一多... 电镜观察表明,嗜水气单胞菌J-1株具有S层结构,在菌体外层呈晶格样规则排列。菌体经酸性甘氨酸缓冲液处理,S层从菌体上脱落,离心上清液即为粗提S蛋白。进一步经Sephadex G200凝胶层析和DEAE-纤维素离子交换层析纯化,获得的S蛋白呈单一多肽,分子量为51500。氨基酸组分分析结果表明,S蛋白含有天门冬氨酸等15种氨基酸,其中丙氨酸等疏水性氨基酸占36.8％。生物学活性显示,S蛋白对Vero细胞有轻微的细胞毒性,但没有溶血性,对鲫鱼和小鼠也无致死作用。用自制的嗜水气单胞菌J-1株S蛋白抗血清PM及PR和国外提供的嗜水气单胞菌TF7株S蛋白抗血清PF1分别作免疫转印和间接ELISA,检测来源于不同地区和不同动物种类的20株嗜水气单胞菌的S蛋白。结果表明,S蛋白的抗原性存在着菌株间的差异。另外,某些菌株不具有S层。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 S蛋白 生物学活性 提纯
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鲍氏不动杆菌──鳜鱼暴发性死亡的新病原 被引量：33
8
作者 顾天钊 陆承平 陈怀青 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期104-106,83,共4页
1995年广东某地人工养殖的鳜鱼（Sinipercachuatsi）暴发传染病，大量病鱼急性死亡，引致严重经济损失。本试验从已接种嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）和柱状噬纤维菌（Cytophagacolumnaris）疫苗的病鱼脏器中分离到一种细菌，经... 1995年广东某地人工养殖的鳜鱼（Sinipercachuatsi）暴发传染病，大量病鱼急性死亡，引致严重经济损失。本试验从已接种嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）和柱状噬纤维菌（Cytophagacolumnaris）疫苗的病鱼脏器中分离到一种细菌，经腹腔注射和鳃部接种人工感染健康鳜鱼及罗非鱼（Oreochomisspp．），均复制出与自然发病相似的病例，主要特点为肝脏严重变性。从上述人工感染的病鱼体内再次分离到与自然发病相同的细菌。该菌为革兰氏阴性短杆菌，无鞭毛，不具运动性，氧化酶阴性，接触酶阳性，有自发荧光。结合生化试验表明。该菌是鲍氏不动杆菌（Acinetobacterbaumannii），是一种未曾报道过的致鳜鱼死亡的新病原菌。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 鳜鱼 暴发性传染病
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6株嗜水气单胞菌的毒力因子及其对小鼠的致死性 被引量：25
9
作者 凌红丽 陆承平 +1 位作者 陈怀青 马向东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期255-257,共3页
根据嗜水气单胞菌毒素、蛋白酶及Ｓ蛋白３种毒力因子的检测结果，从６６株嗜水气单胞菌中选出３种毒力因子分布情况各异的有代表性的６个菌株。分别用含菌量均为１０８ＣＦＵ／ｍＬ的６株嗜水气单胞菌肉汤培养物注射小鼠，结果，毒素、... 根据嗜水气单胞菌毒素、蛋白酶及Ｓ蛋白３种毒力因子的检测结果，从６６株嗜水气单胞菌中选出３种毒力因子分布情况各异的有代表性的６个菌株。分别用含菌量均为１０８ＣＦＵ／ｍＬ的６株嗜水气单胞菌肉汤培养物注射小鼠，结果，毒素、蛋白酶及Ｓ蛋白均有的菌株以及具有前两者而无Ｓ蛋白的菌株对小鼠的致死率均达１００％；仅有蛋白酶的菌株对小鼠致死率达６０％；而只有Ｓ蛋白的，或既有毒素又有Ｓ蛋白的，或３种毒力因子均无的菌株对小鼠无致死性。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 毒力因子 小鼠 致死性
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嗜水气单胞菌疫苗的研制 被引量：29
10
作者 孙建和 陈怀青 陆承平 《畜牧与兽医》 北大核心 1995年第5期202-205,共4页
取致病性嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株接种改良肉汤，摇床培养１８０ｒｐｍ２８℃２４ｈ，用福尔马林灭活制得全菌苗。另将上述培养物离心，取上清经福尔马林灭活制得毒素苗。用全菌苗和毒素苗分别免疫小鼠，２周后强化免疫，而后用Ｊ... 取致病性嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株接种改良肉汤，摇床培养１８０ｒｐｍ２８℃２４ｈ，用福尔马林灭活制得全菌苗。另将上述培养物离心，取上清经福尔马林灭活制得毒素苗。用全菌苗和毒素苗分别免疫小鼠，２周后强化免疫，而后用Ｊ－１株５０ＬＤ＿（５０）腹腔注射攻击，免疫组均保护，对照组全部死亡。在鲫鱼的免疫保护试验中，分别采用全菌苗及毒素亩作腹腔注射或浸泡免疫，４周后强化免疫。用ＡｈＪ－１株５０ＬＤ＿（５０）腹腔注射攻击。结果全菌苗注射组保护８７％（１３／１５）；毒素苗注射组保护４０％（８、２０）；全菌苗浸泡组保护４０％（６／１５）；毒素苗浸泡组保护６７％（１０／１５）；对照组全部死亡。免疫持续期试验表明，在两次免疫６个月后攻击，全菌苗或毒素苗均仍显示一定的保护力。在平均水温２７℃±２℃下，鲫鱼的抗体动态为：全菌苗注射免疫组在强化免疫后１周全菌凝集抗体达２￣６，此时可检测到鲫鱼体表粘液中有低滴度凝集抗体存在，较高滴度的血清凝集抗体至少可维持６个月。全菌苗浸泡组在强化免疫后约１０天血清中才出现凝集抗体，滴度较低。毒素苗注射免疫用的毒素溶血抑制抗体在初次免疫第２８天达２￣７，强化免疫后高滴度抗体可维持１７天；毒素苗浸泡组的? 展开更多
关键词 疫苗 嗜水气单胞菌 全菌苗 注射免疫 抗体动态
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用PCR检测嗜水气单胞菌毒素基因 被引量：19
11
作者 陆承平 陈怀青 《中国动物检疫》 CAS 1995年第5期5-7,共3页
选取气单胞菌毒素基因中保守区的同源寡核苷酸序列为引物，用PCR技术检测临床分离的嗜水气单胞菌的毒素基因。扩增产物中均含有明显的预定条带；用AluI和AvaI酶切进一步鉴定，其酶切片段的数量和大小均与设计相吻合，证实样本中带有毒... 选取气单胞菌毒素基因中保守区的同源寡核苷酸序列为引物，用PCR技术检测临床分离的嗜水气单胞菌的毒素基因。扩增产物中均含有明显的预定条带；用AluI和AvaI酶切进一步鉴定，其酶切片段的数量和大小均与设计相吻合，证实样本中带有毒素基因。细菌在鲜血平板上呈现党大的β－溶血圈，用相应的单克隆抗体检测培养上清中的毒素，亦获阳性结果，进一步证实PCR技术检测气单胞菌毒素准确可靠。 展开更多
关键词 动物 嗜水气单胞菌 毒素 基因 PCR 聚合酶链检测
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嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的检测 被引量：22
12
作者 李焕荣 陈怀青 +1 位作者 陆承平 夏德全 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期97-100,共4页
关键词 嗜水气单胞菌 胞外蛋白酶 检测
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迟缓爱德华氏菌对HEp-2细胞的侵袭特性 被引量：26
13
作者 马勋 欧阳志明 +2 位作者 陈怀青 陆承平 夏晓勤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期336-340,共5页
用细胞裂解计数法及超薄切片电镜观察法分析了迟缓爱德华氏菌侵袭HEp—2细胞的基本特性。在15株来源各异的迟缓爱德华氏菌中，有6株细菌具有对HEp—2细胞的侵袭能力。细菌侵入细胞后，主要位于空泡内。侵入细胞内的迟缓爱德华氏菌不仅... 用细胞裂解计数法及超薄切片电镜观察法分析了迟缓爱德华氏菌侵袭HEp—2细胞的基本特性。在15株来源各异的迟缓爱德华氏菌中，有6株细菌具有对HEp—2细胞的侵袭能力。细菌侵入细胞后，主要位于空泡内。侵入细胞内的迟缓爱德华氏菌不仅可在细胞内增殖，而且可从细胞内释放出来。用细胞松弛素破坏微丝后可抑制其侵袭作用，而且表现出剂量依赖关系，而用秋水仙素破坏微管后不影响其侵袭力。这表明在迟缓爱德华氏菌对HEp—2细胞的侵袭过程中，细胞骨架中有微丝的参与，未发现微管的参与。 展开更多
关键词 迟缓爱德华氏菌 侵袭 增殖 细胞骨架 HEP-2细胞
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犬瘟热的微生物学诊断研究 被引量：20
14
作者 房红莹 陆承平 +1 位作者 马勋 陈怀青 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期148-151,共4页
对临床诊断为犬瘟热的１４例病犬，取其脑组织，运用细胞培养、合胞体检查、包涵体检查、免疫荧光试验、电镜观察等５种检测方法，就犬瘟热的微生物学诊断进行了系统的研究。结果表明，犬脑组织块与猫胚（ＦＥ）细胞或非洲绿猴肾（Ｖｅ... 对临床诊断为犬瘟热的１４例病犬，取其脑组织，运用细胞培养、合胞体检查、包涵体检查、免疫荧光试验、电镜观察等５种检测方法，就犬瘟热的微生物学诊断进行了系统的研究。结果表明，犬脑组织块与猫胚（ＦＥ）细胞或非洲绿猴肾（Ｖｅｒｏ）细胞共同培养，盲传的培养物出现不稳定的细胞病变，通过对不同代次的培养物检查包涵体，并作超薄切片或负染，电镜观察犬瘟热病毒（ＣＤＶ）粒子，证实分离到ＣＤＶ野毒。病犬脑组织切片经ＨＥ染色检查包涵体及用ＣＤＶ荧光抗体直接法检测脑抹片及接种犬脑的细胞培养物，均获得一定的阳性结果。建立的改良离子捕获电镜法，用于检测犬脑匀浆和犬脑接种细胞培养物，与离子捕获电镜法、免疫电镜法及直接电镜法相比，效果更为理想。１４例临床诊断为犬瘟热的病犬，综合运用上述微生物学手段检测，结果为１２例阳性，２例疑似。 展开更多
关键词 犬 犬瘟热 微生物学诊断
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嗜水气单胞菌检验程序的研究 被引量：20
15
作者 凌红丽 陆承平 +1 位作者 陈怀青 马向东 《中国动物检疫》 CAS 1998年第3期1-3,共3页
本试验系统研究了嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ，Ａｈ）的细菌学及毒力因子检测。对不同来源菌株的细菌作分离及生化鉴定，确定了Ａｈ的六项生化鉴定指标，同时比较确定了ＡＨＭ和ＲＳ作为Ａｈ的选择培养基。... 本试验系统研究了嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ，Ａｈ）的细菌学及毒力因子检测。对不同来源菌株的细菌作分离及生化鉴定，确定了Ａｈ的六项生化鉴定指标，同时比较确定了ＡＨＭ和ＲＳ作为Ａｈ的选择培养基。检验中氧化酶阳性反应是Ａｈ重要的鉴别指标。比较Ａｈ毒素、蛋白酶及Ｓ蛋白三种毒力因子的常规检测及免疫学检测，根据检测结果选出毒力因子分布各异的Ａｈ菌株作动物致死性试验，最终在Ａｈ三项毒力因子指标中选择蛋白酶一项作为检测指标，具有代表性，同时简化了检验程序，使Ａｈ的检测实际可行。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 检验程序 毒力因子 检测
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从比较免疫学看鱼类的免疫特性 被引量：18
16
作者 陈怀青 陆承平 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期56-60,共5页
从比较免疫学看鱼类的免疫特性陈怀青，陆承平（南京农业大学兽医系南京２１００９５）关键词比较免疫学，鱼，体液免疫，细胞免疫在过去几十年里，免疫学取得了惊人的成就，但这些都是以哺乳类和鸟类为对象进行研究所获得的，而鱼类的... 从比较免疫学看鱼类的免疫特性陈怀青，陆承平（南京农业大学兽医系南京２１００９５）关键词比较免疫学，鱼，体液免疫，细胞免疫在过去几十年里，免疫学取得了惊人的成就，但这些都是以哺乳类和鸟类为对象进行研究所获得的，而鱼类的免疫学研究则不多。近年来，随着养鱼... 展开更多
关键词 比较免疫学 鱼纲 免疫学
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迟缓爱德华氏菌胞外产物的细胞毒性和动物致病性 被引量：22
17
作者 葛艳 陈怀青 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期34-37,共4页
分析了２８株迟缓受德华氏菌（Ｅdwardwiella tarda,Ｅt）胞外产物（extracellular puodrcts,ＥＣＰ）的致病性。将Ｅt用覆有玻璃纸的ＴＳＡ培养，１８株（６９．２３％）的 ＥＣＰ使ＨＥp－２细胞产生病认，认圆，脱落。这种细胞毒作... 分析了２８株迟缓受德华氏菌（Ｅdwardwiella tarda,Ｅt）胞外产物（extracellular puodrcts,ＥＣＰ）的致病性。将Ｅt用覆有玻璃纸的ＴＳＡ培养，１８株（６９．２３％）的 ＥＣＰ使ＨＥp－２细胞产生病认，认圆，脱落。这种细胞毒作用能被ＡＴＣＣ１５９４７株的ＥＣＰ抗体作为探 针进行免疫转印分析，结果显示，不同来源的９株Ｅt的ＥＣＰ在 转印膜上出现３条共同蛋白条带，相对分子质量分别约１４４００、３２、３００、７９、 展开更多
关键词 迟缓爱德华氏菌 胞外产物 细胞毒性 致病性
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一株无致病力的嗜水气单胞菌的分离与特性分析 被引量：14
18
作者 严亚贤 孙建和 +1 位作者 陈怀青 陆承平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期75-78,共4页
从南京某无病鱼塘水体中分离到一株革兰氏阴性、有运动力的短杆菌，定名为Ｗ－１株。其生化特性为氧化酶阳性，发酵葡萄糖产酸产气，发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖，不发酵肌醇。从该菌株培养物的上清中提取的外毒素，具有细胞毒性与溶... 从南京某无病鱼塘水体中分离到一株革兰氏阴性、有运动力的短杆菌，定名为Ｗ－１株。其生化特性为氧化酶阳性，发酵葡萄糖产酸产气，发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖，不发酵肌醇。从该菌株培养物的上清中提取的外毒素，具有细胞毒性与溶血性；用嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素的单抗进行检测，乳胶凝集试验及ＤｏｔＥＬＩＳＡ均呈阳性结果。电镜观察未发现该菌株有晶格样排列的Ｓ层和菌毛，与Ｊ－１株Ｓ蛋白抗血清及Ｒ菌毛抗血清作免疫转印亦为阴性结果，表明该菌株无菌毛及Ｓ层。细胞粘附试验表明，该菌株不能粘附于ＨＥｐ－２细胞。毒力试验显示，除去上清的Ｗ－１菌株对小鼠和鲫鱼的ＬＤ５０均大于１０１０，可确认其无致病力。以上结果提示：嗜水气单胞菌的致病力取决于自身的结构和对细胞的粘附性． 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 致病性 结构 分离
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ELISA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒 被引量：17
19
作者 张伯强 陆承平 陈怀青 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期437-439,共3页
用ＦＥ细胞增殖犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株，分别免疫家兔和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＣＣＶ多抗和单抗，建立了夹心ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断方法。在检测的８４例犬腹泻粪样中，多抗、单抗夹心法显示ＣＣＶ阳性１６例，Ｄｏｔ... 用ＦＥ细胞增殖犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株，分别免疫家兔和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＣＣＶ多抗和单抗，建立了夹心ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断方法。在检测的８４例犬腹泻粪样中，多抗、单抗夹心法显示ＣＣＶ阳性１６例，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性１３例，后１３例包括在前１６例中。从８４例腹泻犬粪样中随机取３８例作ＣＣＶ、犬细小病毒（ＣＰＶ）双项检测，ＣＣＶ阳性１６例，ＣＰＶ阳性６例，ＣＣＶ、ＣＰＶ混合感染４例。结果显示，在南京地区流行的犬腹泻中，ＣＣＶ感染比例有超过ＣＰＶ的趋势。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 夹心ELISA DOT-ELISA
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温度对嗜水气单胞菌外膜蛋白表达的影响 被引量：11
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作者 孙建和 严亚贤 +1 位作者 陈怀青 陆承平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期555-558,共4页
提取嗜水气单胞菌J-1、Y-1、F-155 株的外膜蛋白(OMP)作SDS-PAGE,结果显示,它们的电泳图谱属于同一模式,均含有22 000、31 000、38 000、43 000 和50 000 等5 条主要OMP带。温度影响嗜水气单胞菌OMP的表达,28℃培养时表达的OMP以43 000... 提取嗜水气单胞菌J-1、Y-1、F-155 株的外膜蛋白(OMP)作SDS-PAGE,结果显示,它们的电泳图谱属于同一模式,均含有22 000、31 000、38 000、43 000 和50 000 等5 条主要OMP带。温度影响嗜水气单胞菌OMP的表达,28℃培养时表达的OMP以43 000 者为最多;而37℃培养时表达最多的是38 000 的条带。J-1株37℃培养时对鲫鱼和小鼠的LD50分别为3.4×106、2.5×106 CFU;28℃时则为8.7×105、1.8×105 CFU,表明28℃培养时J-1 株毒力较强。随着OMP在载样缓冲液中煮沸时间的增加,主要蛋白带的浓度降低,相对分子质量小的蛋白带增多。免疫转印显示,这些蛋白带均能与J-1 株OMP多抗呈显色反应。抗原性分析表明,J-1 株OMP与HEC毒素之间无抗原性交叉。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 外膜蛋白 温度 SDS-PAGE LD50
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