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PCR检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7 被引量:12
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作者 金慧英 陶开 +4 位作者 李越希 李法卿 李素芹 谭维国 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期394-395,共2页
目的 研究快速、特异、灵敏的检测肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7的多重PCR方法 ,并比较单一PCR和多重PCR对检测灵敏度的影响。方法 选择O15 7∶H7的O抗原、H鞭毛抗原及SLT1和SLT2毒素基因特异的 4对引物 ,分别或共同进行PCR扩增 ,检测 4 ... 目的 研究快速、特异、灵敏的检测肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7的多重PCR方法 ,并比较单一PCR和多重PCR对检测灵敏度的影响。方法 选择O15 7∶H7的O抗原、H鞭毛抗原及SLT1和SLT2毒素基因特异的 4对引物 ,分别或共同进行PCR扩增 ,检测 4 0株O15 7∶H7和非O15 7∶H7菌株 ,将细菌按 10 1~ 10 6稀释后比较PCR的检测灵敏度。结果 所有O15 7∶H7菌株均在 4 97bp和 6 2 5bp处出现O15 7抗原基因和H7抗原基因产物 ,其产毒株在4 84bp和 (或 ) 2 10bp处出现SLT2和 (或 )SLT1基因产物 ,非O15 7∶H7菌株PCR结果均为阴性 ;单一PCR检测灵敏度为 15 0CFU/PCR反应 ,多重PCR为 >15 0 0CFU/PCR反应。结论 在经过增菌后 ,多重PCR比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便 ,为产毒和非产毒O15 7∶H7的诊断提供了新的手段。 展开更多
关键词 PCR 肠出血 大肠杆菌O157:H7 聚合酶链反应 rfbE基因 fliC基因 毒素基因
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金属硫蛋白在心肌细胞保护中与抗氧化酶的关系 被引量:7
2
作者 金慧英 李法卿 +3 位作者 房德兴 李素芹 谭维国 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期61-63,共3页
目的 :探讨金属硫蛋白 (MT)在心肌细胞缺氧 /复氧损伤 (H/R)和预缺氧 (HPC)保护中与抗氧化酶的关系。方法 :建立培养的乳鼠心肌细胞缺氧 /复氧模型 ,检测HPC、锌诱导、外源MT和MT抗体等处理下 ,心肌细胞MT含量变化及抗氧化酶 (SOD ,CAT ... 目的 :探讨金属硫蛋白 (MT)在心肌细胞缺氧 /复氧损伤 (H/R)和预缺氧 (HPC)保护中与抗氧化酶的关系。方法 :建立培养的乳鼠心肌细胞缺氧 /复氧模型 ,检测HPC、锌诱导、外源MT和MT抗体等处理下 ,心肌细胞MT含量变化及抗氧化酶 (SOD ,CAT ,GSHpx)活力的相应变化。 结果 :HPC和锌诱导组MT含量及抗氧化酶的活力均显著高于H/R组P <0 .0 5、P <0 .0 1) :外源MT处理后SOD活力显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,CAT和GSHpx活力虽然显著低于对照组但显著高于H/R组 (P <0 .0 1) ;使用MT抗体后 ,酶活力最低。结论 :MT参与HPC的心肌细胞保护作用 。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 缺氧/复氧 抗氧化酶 心肌细胞
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镉中毒肝脏过氧化氢(H_2O_2)定位及抗氧化系统的变化 被引量:5
3
作者 金慧英 李法卿 +3 位作者 谭维国 房德兴 李素芹 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期15-16,共2页
为探讨急性镉中毒后自由基产生和损伤的部位及机理,给予大鼠尾静脉注射氯化镉建立急性镉中毒模型,电镜观察自由基过氧化氢(H2O2) 的定位及细胞损伤,并测定抗氧化酶和氧化剂的变化。结果表明:H2O2 - CeCl3 的阳性颗... 为探讨急性镉中毒后自由基产生和损伤的部位及机理,给予大鼠尾静脉注射氯化镉建立急性镉中毒模型,电镜观察自由基过氧化氢(H2O2) 的定位及细胞损伤,并测定抗氧化酶和氧化剂的变化。结果表明:H2O2 - CeCl3 的阳性颗粒沉积在肝细胞膜上,最早出现在中毒后1h,3h 最严重,24h 消失;抗氧化酶活力受抑,以3h 最严重(p< 0-01) ,6h 后渐渐恢复;而GSH 的含量在3h 前均高于正常(p < 0-05),以后逐步减少。提示自由基是急性镉中毒所致肝脏损伤的重要因素。 展开更多
关键词 镉中毒 自由基 抗氧化系统 过氧化氢
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金属硫蛋白对急性镉中毒后抗氧化酶的保护作用 被引量:6
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作者 金慧英 李法卿 +2 位作者 李素芹 谭维国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期631-632,共2页
目的:探讨金属硫蛋白(MT)对抗氧化酶的保护作用机制。方法:向大鼠尾静脉注射氯化镉建立镉中毒模型,分别于注射后不同时间测定肝组织MT的含量和抗氧化酶(SOD,CAT,GSHpx)的活力变化。结果:镉中毒后30min~... 目的:探讨金属硫蛋白(MT)对抗氧化酶的保护作用机制。方法:向大鼠尾静脉注射氯化镉建立镉中毒模型,分别于注射后不同时间测定肝组织MT的含量和抗氧化酶(SOD,CAT,GSHpx)的活力变化。结果:镉中毒后30min~3h,SOD、GSHpx和CAT活力显著降低(P<005),6h酶活力逐步恢复;MT的显著增加出现在3h,6h达最高峰(13195±1515)μg/g肝组织,随着MT的合成增加,抗氧化酶的活力逐步恢复。结论:镉中毒严重抑制抗氧化酶的活力,MT对抗氧化酶的活力恢复可能有良好的促进作用。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 抗氧化酶 镉中毒 过氧化氢酶
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检测霍乱弧菌的基因芯片的制备 被引量:5
5
作者 金慧英 陶开 +3 位作者 李越希 李法卿 张锦海 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期444-445,共2页
目的 研制快速、特异、灵敏的检测霍乱弧菌基因芯片。方法 选择霍乱弧菌特异的编码外膜蛋白的ompW基因和毒素ctxA基因 ,设计引物和探针 ,并制备检测芯片 ,通过 2次PCR扩增 ,制备荧光标记的靶序列 ,并与芯片进行杂交 ,检测霍乱弧菌和... 目的 研制快速、特异、灵敏的检测霍乱弧菌基因芯片。方法 选择霍乱弧菌特异的编码外膜蛋白的ompW基因和毒素ctxA基因 ,设计引物和探针 ,并制备检测芯片 ,通过 2次PCR扩增 ,制备荧光标记的靶序列 ,并与芯片进行杂交 ,检测霍乱弧菌和非霍乱弧菌病原体。结果 所有霍乱弧菌菌株在采用单一和多重PCR2种方法制备的荧光标记靶序列与芯片杂交 ,均在芯片相应探针处出现阳性信号 ,非霍乱弧菌菌株杂交结果均为阴性。结论 霍乱弧菌基因检测芯片的研制 ,为霍乱弧菌感染的诊断提供了准确、快速、灵敏的方法 ,还可选择更多的基因位点设计探针以提高检测的可靠性 ,可以达到高通量、集成化和自动化的要求。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 基因芯片 PCR扩增 霍乱弧菌致病岛(VPI)
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7和霍乱弧菌的多重PCR检测 被引量:5
6
作者 金慧英 +4 位作者 陶开 李越希 李法卿 李素芹 谭维国 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期252-255,共4页
目的 建立同时检测肠出血性大肠杆菌 (O15 7∶H7)和霍乱弧菌的多重PCR方法 ,为霍乱和肠出血性大肠杆菌感染的快速诊断提供实验依据。方法 首先选择O15 7∶H7的O抗原(rfbE)、H鞭毛抗原 (fliC)基因以及霍乱弧菌外膜蛋白 (ompW )和肠毒素... 目的 建立同时检测肠出血性大肠杆菌 (O15 7∶H7)和霍乱弧菌的多重PCR方法 ,为霍乱和肠出血性大肠杆菌感染的快速诊断提供实验依据。方法 首先选择O15 7∶H7的O抗原(rfbE)、H鞭毛抗原 (fliC)基因以及霍乱弧菌外膜蛋白 (ompW )和肠毒素A亚单位 (ctxA)基因特异的 4对引物 ,分别或共同对O15 7∶H7和霍乱弧菌进行PCR扩增 ,并以琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果 所有O15 7∶H7菌株均在 4 97bp和 6 2 5bp处出现O15 7rfbE基因和H7fliC基因扩增产物 ;霍乱菌株均出现 5 6 0bp、30 2bp的ompW和ctxA基因扩增产物 ,O15 7∶H7和霍乱弧菌共同扩增可出现 4条单一条带。结论 选择 4对特异引物的多重PCR方法可简便、特异、快速、灵敏地对O15 7∶H7和霍乱弧菌进行同时检测。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 O157:H7 霍乱弧菌
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金属硫蛋白在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用 被引量:4
7
作者 金慧英 李法卿 +3 位作者 房德兴 李素芹 谭维国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期316-318,共3页
目的:探讨金属硫蛋白(MT)在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用机制。方法:建立培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,检测心肌细胞预缺氧24h后MT及丙二醛(MDA)含量,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶... 目的:探讨金属硫蛋白(MT)在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用机制。方法:建立培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,检测心肌细胞预缺氧24h后MT及丙二醛(MDA)含量,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶活性的变化以及用MT抗体阻断后的相应变化。结果:缺氧预处理组MT含量及Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶活性显著高于对照组及缺氧/复氧组(P<0.05),MDA含量显著低于缺氧/复氧组(P<0.01);使用MT抗体后,酶活性则显著降低,而MDA含量显著高于未加抗体和对照组(P<0.01)。结论:缺氧预处理产生大量 MT,后者可能通过减少 MDA及促进 Na+- K+ ATP酶、Ca2+- Mg2+ ATP酶的活性升高起到保护心肌的作用。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 心肌缺血 缺氧预处理 乳鼠
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分子生物学技术在大肠杆菌O157∶H7检测中的应用 被引量:4
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作者 金慧英 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期87-89,共3页
关键词 分子生物学技术 大肠杆菌 O157:H7 检测 基因探针 PCR技术 基因芯片
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金属硫蛋白在心肌缺血再灌注损伤修复中的抗氧化作用 被引量:4
9
作者 金慧英 李法卿 +3 位作者 房德兴 谭维国 李素芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期543-544,共2页
目的:探讨金属硫蛋白(MT)在心肌梗塞和缺血再灌注心肌损伤修复中与脂质过氧化的关系。方法:采用大鼠心肌梗塞/缺血再灌注模型,测定手术后24h和8周心肌组织的MT及脂质过氧化的中间产物丙二醛(MDA)的含量。结果:心肌... 目的:探讨金属硫蛋白(MT)在心肌梗塞和缺血再灌注心肌损伤修复中与脂质过氧化的关系。方法:采用大鼠心肌梗塞/缺血再灌注模型,测定手术后24h和8周心肌组织的MT及脂质过氧化的中间产物丙二醛(MDA)的含量。结果:心肌梗塞和缺血再灌注24h后MDA含量均显著高于对照组(P<0.01),8周后MDA显著降低(P<0.05);而MT的含量在术后24h即升高,8周MT继续升高,缺血再灌注组MT达(31409±2318)ng/mg蛋白。结论:MT对心肌梗塞和缺血再灌注所产生的脂质过氧化产物可能具有清除作用,从而促进损伤心肌的修复。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 脂质过氧化 心肌缺血 再灌注损伤
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乙型肝炎表面抗原124aa分子在大肠杆菌中的高效表达 被引量:3
10
作者 房德兴 李法卿 +3 位作者 谭维国 金慧英 李素芹 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期180-182,共3页
利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原(HBsAg)羧基末端124个氨基酸的基因片段,并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有1个含6组氨酸肽段的20氨基酸融合部分,分子量16178Da,以包含体... 利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原(HBsAg)羧基末端124个氨基酸的基因片段,并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有1个含6组氨酸肽段的20氨基酸融合部分,分子量16178Da,以包含体形式存在,约占细菌总蛋白的22%。以HiTrap亲和层析纯化,纯度可达95%以上。分别用抗HBsAg多克隆抗体和抗HBsAga单克隆抗体进行ELISA检测表明,该蛋白具有HBsAg反应原性。 展开更多
关键词 乙型肝炎 表面抗原 大肠杆菌 基因表达 HBSAG
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稀土铈对钢中溶质碳偏析影响的热力学研究 被引量:3
11
作者 龙木军 +4 位作者 登福 黄云伟 桂林涛 马有光 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第7期2093-2099,共7页
以Fe-C-Ce合金为对象,建立多元合金溶质分配系数热力学计算模型,并利用FactSage Equilib模块计算不同铈含量下凝固体系中溶质碳的平衡分配系数,以此研究稀土铈对钢中溶质碳偏析的影响。结果表明:稀土铈对体系的凝固相转变影响较大。钸... 以Fe-C-Ce合金为对象,建立多元合金溶质分配系数热力学计算模型,并利用FactSage Equilib模块计算不同铈含量下凝固体系中溶质碳的平衡分配系数,以此研究稀土铈对钢中溶质碳偏析的影响。结果表明:稀土铈对体系的凝固相转变影响较大。钸的添加可促使奥氏体的转变,使L+γ固-液共存区扩大,从而使碳的平均平衡分配系数增大,起到减小钢中碳偏析的作用。改善钢中碳偏析的最适宜铈添加量与碳含量有关,Fe-0.1%C-x%Ce(质量分数,下同)体系最适宜的稀土铈添加量为0.047%~0.057%,Fe-0.25%C-x%Ce体系最适宜的稀土钸添加量为0.03%~0.04%。 展开更多
关键词 碳偏析 平衡分配系数 凝固路径
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重组人α2b型干扰素的纯化与鉴定 被引量:3
12
作者 邓小昭 +2 位作者 李光富 刁振宇 张林元 《药物生物技术》 CAS CSCD 1997年第1期9-12,共4页
采用超声波裂解菌体 ,硫酸铵沉淀 ,酸化处理 ,再经离子交换层析和单克隆抗体亲合层析 ,使表达产物纯化了 10 2 9倍 ,比活性达 2 .14× 10 8IU/ mg蛋白 ,SDS- PAGE呈单一条带 ,HPL C纯度 >95% ,回收率达 59.1%。表达产物 N端 2 5... 采用超声波裂解菌体 ,硫酸铵沉淀 ,酸化处理 ,再经离子交换层析和单克隆抗体亲合层析 ,使表达产物纯化了 10 2 9倍 ,比活性达 2 .14× 10 8IU/ mg蛋白 ,SDS- PAGE呈单一条带 ,HPL C纯度 >95% ,回收率达 59.1%。表达产物 N端 2 5个氨基酸序列分析结果与 IFN- α2 b c DNA推导的序列相符合。 展开更多
关键词 干扰素 蛋白质 纯化 N端序列分析
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基于ZigBee的高校教学楼照明管控系统设计 被引量:3
13
作者 王春玲 王美红 《电子技术(上海)》 2016年第12期88-92,共5页
文章介绍了基于ZigBee的高校教学楼网络化照明管控系统的设计。该系统针对教学楼照明现状,通过以CC2530为核心的无线传感网络和监控PC机的配合,实现了教学楼内教室、办公室及楼道等照明的远程与现场灵活控制,满足了人性化照明和节能需要... 文章介绍了基于ZigBee的高校教学楼网络化照明管控系统的设计。该系统针对教学楼照明现状,通过以CC2530为核心的无线传感网络和监控PC机的配合,实现了教学楼内教室、办公室及楼道等照明的远程与现场灵活控制,满足了人性化照明和节能需要,重点研究了Zigbee网络拓扑和分区照明策略。 展开更多
关键词 ZIGBEE 教学楼 分区照明 人体检测 节点
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金属硫蛋白对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用 被引量:2
14
作者 金慧英 郁兴明 +4 位作者 李法卿 房德兴 李素芹 谭维国 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期173-173,197,共2页
关键词 缺氧 复氧 心肌细胞 心肌保护 金属硫蛋白
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颚式破碎机基础损坏分析及改进 被引量:3
15
作者 《设备管理与维修》 2020年第14期122-123,共2页
分析矿山主要设备颚式破碎机基础损坏原因,对设计及施工不合理的地方进行改进。降低给料高度,减小放矿机和破碎机的水平距离,减小冲击力和翻转扭矩,优化预埋板结构,加强设备管理,改造效果良好。
关键词 颚式破碎机 冲击 基础损坏 给料高度 优化
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DIG核酸探针检测病鸡羽髓MDV的研究 被引量:1
16
作者 李光富 溥言 +4 位作者 蔡宝祥 张林元 邓小昭 刁振宇 《中国畜禽传染病》 CSCD 1995年第5期10-11,共2页
拔取病鸡含羽髓的羽毛,用免疫琼扩试验检测,检出率为80%;将病鸡羽髓经超声波处理、SDS和蛋白酶K裂解、经酚和氯仿抽提后,用乙醇沉淀病毒核酸,用我们研制的以Digoxigenin标记的MDV核酸探针检测,检出率为100%。结果表明,核酸探针是检测... 拔取病鸡含羽髓的羽毛,用免疫琼扩试验检测,检出率为80%;将病鸡羽髓经超声波处理、SDS和蛋白酶K裂解、经酚和氯仿抽提后,用乙醇沉淀病毒核酸,用我们研制的以Digoxigenin标记的MDV核酸探针检测,检出率为100%。结果表明,核酸探针是检测MDV灵敏特异的方法。 展开更多
关键词 鸡病 马立克氏病 病毒 鸡羽髓 核酸探针
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45钢凝固相变过程中溶质平衡分配系数的变化 被引量:1
17
作者 龙木军 +3 位作者 登福 桂林涛 马有光 《钢铁研究学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期637-642,共6页
以45钢为研究对象,建立了多元凝固体系溶质平衡分配系数的热力学计算模型,利用FactSage Equilib模块计算得到了45钢凝固相变过程以及各溶质分配系数的变化。结果表明:45钢凝固路径先后经过L-δ、L-γ固-液两相区,MnS在固相中析出;依据... 以45钢为研究对象,建立了多元凝固体系溶质平衡分配系数的热力学计算模型,利用FactSage Equilib模块计算得到了45钢凝固相变过程以及各溶质分配系数的变化。结果表明:45钢凝固路径先后经过L-δ、L-γ固-液两相区,MnS在固相中析出;依据相区间和温度的变化,回归得到了45钢中溶质C、Si、Mn、P、S平衡分配系数变化公式;溶质C、Si、Mn、P、S平均平衡分配系数分别为0.307、0.737、0.695、0.18、0.021,其中S偏析趋势最强烈,P次之,C偏析趋势较P小,Si和Mn基本相当,偏析较小。 展开更多
关键词 45钢 热力学计算 凝固相变 平衡分配系数
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人神经生长因子的规模纯化 被引量:2
18
作者 李素芹 李法卿 +3 位作者 谭维国 杨楠 金慧英 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1999年第3期123-125,共3页
目的:建立一种简便,快捷的人神经生长因子的规模纯化方法,获得批量的hNGF.方法,以胎盘为原料,根据hNGF的性质,采用匀浆,超滤及一步层析法,规模纯化hNGF,并用SDS-PAGE及等电聚焦分别测定其分子量和等电点... 目的:建立一种简便,快捷的人神经生长因子的规模纯化方法,获得批量的hNGF.方法,以胎盘为原料,根据hNGF的性质,采用匀浆,超滤及一步层析法,规模纯化hNGF,并用SDS-PAGE及等电聚焦分别测定其分子量和等电点,利用鸡胚背根神经节法检测hNGF的生物活性。 展开更多
关键词 胎盘 人神经生长因子 规模纯化 工艺
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2A12铝合金凝固过程析出相的热力学研究 被引量:2
19
作者 罗德维 +2 位作者 孟毅 吴道祥 林林 《铝加工》 CAS 2021年第2期11-15,共5页
基于JMatPro材料设计软件,详细研究了2A12铝合金国标成分范围内Cu和Mg对凝固析出相,特别是S-Al2CuMg此类均热处理难以消除的粗大脆性相的影响。在此基础上,对比研究了国产与进口2A12成分以及析出相的差异。结果表明:粗大脆性相S-Al2CuM... 基于JMatPro材料设计软件,详细研究了2A12铝合金国标成分范围内Cu和Mg对凝固析出相,特别是S-Al2CuMg此类均热处理难以消除的粗大脆性相的影响。在此基础上,对比研究了国产与进口2A12成分以及析出相的差异。结果表明:粗大脆性相S-Al2CuMg的析出量对Mg含量较敏感,1.8%(质量分数,下同)上限Mg含量相较于1.2%下限Mg含量,SAl2CuMg相析出量增加66.54%。国产2A12铝合金中检测到的Mg含量较进口的Mg含量高,粗大脆性相S-Al2CuMg析出量多23.63%。在保证合金性能的前提下,Mg含量取中下限有利于减少合金凝固过程中粗大脆性相S-Al2CuMg的析出。 展开更多
关键词 2A12 成分区间 热力学计算 凝固析出相
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人α_1-干扰素基因真核表达载体的构建及其活性 被引量:1
20
作者 李光富 邓小昭 +3 位作者 张林元 刁振宇 柴建 《药物生物技术》 CAS CSCD 1996年第2期78-81,共4页
选用与HuIFN-α1基因及其信号肽相应的引物,采用PCR技术,从中国人血白细胞染色体中分离带有信号肽IFN-α1基因片段,分别克隆到质粒M13mp19和M13mp18中,通过序列分析进行鉴定,然后克隆到家蚕多角体病... 选用与HuIFN-α1基因及其信号肽相应的引物,采用PCR技术,从中国人血白细胞染色体中分离带有信号肽IFN-α1基因片段,分别克隆到质粒M13mp19和M13mp18中,通过序列分析进行鉴定,然后克隆到家蚕多角体病毒(130mbyxmoriNuclearPolyhedrosisVirus,BmNPV)载体PBF5的EcoRI和XbaI之间,用合成的相应寡核苷酸片段为引物进行双链测序,鉴定为阳性重组转移载体后,将其DNA和BmNPV基因组DNA共转染家蚕细胞,筛选出重组病毒,再将其感染家蚕细胞,测得细胞培养上清中IFN活性为1.0×106IU/ml。 展开更多
关键词 BMNPV 转移载体 基因表达 Α-干扰素
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