杉木实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择 被引量：14

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作者 张颖 陈婉婷 +2 位作者 陈冉红 帅鹏 李明 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2019年第2期65-72,共8页

[目的]筛选适用于杉木不同组织荧光定量PCR分析的稳定内参基因,提高杉木实时荧光定量PCR试验准确性,为杉木体内各个基因表达分析提供合适内参基因。[方法]通过实时荧光定量PCR获取GAPDH、EF1α、18S rRNA、28S rRNA、UBQ、UBC与Actin 7... [目的]筛选适用于杉木不同组织荧光定量PCR分析的稳定内参基因,提高杉木实时荧光定量PCR试验准确性,为杉木体内各个基因表达分析提供合适内参基因。[方法]通过实时荧光定量PCR获取GAPDH、EF1α、18S rRNA、28S rRNA、UBQ、UBC与Actin 7个候选内参基因在杉木无性系的根、茎和叶中的溶解曲线与Ct值;利用软件geNorm、Normfinder和BestKeeper对候选内参基因的表达稳定性进行评价;通过分析2个纤维素合酶基因ClCesA1和ClCesA2在杉木不同组织部位的相对表达情况,对候选内参基因的稳定性进行验证。[结果]geNorm、Normfinder和BestKeeper分析结果均表明:在杉木根和茎中最稳定的内参基因是EF1α和Actin; geNorm、Normfinder结果显示杉木叶中稳定的内参基因是UBQ和EF1α, BestKeeper显示杉木叶中最稳定合适内参基因是EF1α和Actin。以Actin与EF1α作为内参基因,荧光定量PCR分析表明,ClCesA1和ClCesA2基因的相对表达量在杉木不同组织中均有所不同,ClCesA2的相对表达量在各个组织中均高于ClCesA1。以不同内参基因作为试验内参基因分析ClCesA1和ClCesA2的表达情况得到,ClCesA1和ClCesA2在各个组织中的相对表达量排序主要为茎>叶>根。[结论]7个候选内参基因中,杉木不同组织中稳定表达的为Actin与EF1α,适合作为表达分析的内参基因;28S rRNA的表达稳定性低,不适合作为杉木定量PCR分析的理想内参基因。 展开更多

关键词 杉木 荧光定量 内参基因 BestKeeper

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鲑鱼降钙素致腹部绞痛与心律失常2例 被引量：7

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作者 刘英 陈冉红 《药物不良反应杂志》 2007年第4期282-283,共2页

2名老年女性患者给予鲑鱼降钙素注射液治疗时出现腹部绞痛、腹泻、心律失常等不良反应。第1例为67岁女性,因腰椎间盘退行性病变、骨质疏松入院,给予葡萄糖酸钙1g,2次/d口服,并在皮肤试验呈阴性后给予肌内注射鲑鱼降钙素50IU,1次/d。注射... 2名老年女性患者给予鲑鱼降钙素注射液治疗时出现腹部绞痛、腹泻、心律失常等不良反应。第1例为67岁女性,因腰椎间盘退行性病变、骨质疏松入院,给予葡萄糖酸钙1g,2次/d口服,并在皮肤试验呈阴性后给予肌内注射鲑鱼降钙素50IU,1次/d。注射后30min出现腹部绞痛,排黄色糊状便1次;2h出现心悸,心电图检查示:心律不齐、阵发性室性心动过速、偶发房性期前收缩,持续约1h后症状消失。连续注射3d,症状加重并出现双眼睑水肿,遂改为每周注射1次,注射2周后仍有上述症状,即停药,5d后症状缓解,再行心电图检查正常。第2例为65岁女性,以"腰椎间盘脱出、双膝关节退行性变"入院。实验室检查:血钙2.02mmol/L。于皮试阴性后,给予肌内注射鲑鱼降钙素50IU。注射后2h出现腹部绞痛、尿频、尿急、腹泻。心电图示:窦性心动过速。6h后症状自行缓解,未进行第2次注射。 展开更多

关键词 鲑鱼降钙素 腹部绞痛 心律失常

原文传递

互花米草NHX2基因的克隆与功能鉴定 被引量：7

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作者 周梦岩 王涛涛 +3 位作者 陈冉红 金松松 李明 马留银 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2093-2099,共7页

NHX2属于CPA1基因家族,编码Na^+/H^+逆向转运蛋白,控制液泡膜中活性K^+的摄取,同时调节气孔的关闭。该研究以耐盐植物互花米草为材料,采用PCR技术克隆NHX2基因,并将其转入拟南芥进行相关功能鉴定。结果显示:(1)成功克隆获得互花米草NHX... NHX2属于CPA1基因家族,编码Na^+/H^+逆向转运蛋白,控制液泡膜中活性K^+的摄取,同时调节气孔的关闭。该研究以耐盐植物互花米草为材料,采用PCR技术克隆NHX2基因,并将其转入拟南芥进行相关功能鉴定。结果显示:(1)成功克隆获得互花米草NHX2基因CDS序列(1 602 bp),命名为SaNHX2,该基因编码533个氨基酸,SaNHX2蛋白的分子量约为58.65 kD,定位于细胞核和细胞膜,表明SaNHX2基因可能发挥转录调控的功能。(2) qRT-PCR结果显示,在ABA、NaCl和干旱胁迫处理下,互花米草叶和根中SaNHX2基因的表达量均上调。(3)为进一步鉴定其功能,成功构建植物表达载体,将SaNHX2基因转入拟南芥;经RT-PCR检测结果显示,SaNHX2基因在转基因植株中过表达;高盐胁迫处理后,转SaNHX2基因拟南芥的主根长度、叶绿素总量和相关胁迫应答基因表达量均高于转空载拟南芥,表明转SaNHX2基因拟南芥的耐盐能力显著增强。研究表明,SaNHX2基因可能在盐胁迫调节机制中发挥调控作用,可作为改良农作物耐盐的重要候选基因。 展开更多

关键词 互花米草 NHX2 过表达 拟南芥 盐胁迫

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遥感技术在树木营养学课程教学改革中应用 被引量：4

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作者 陈冉红 陈婉婷 +1 位作者 张颖 李明 《安徽农学通报》 2018年第6期97-99,共3页

该文通过对遥感技术在树木营养学课程改革中应用的分析,在教学和实践过程中将林业遥感技术融入该课程体系中,从教育教学、科研以及社会实践三者有机结合的教学模式来提高树木营养学的教学质量,为现代化林业发展提供高素质、专业化人才。

关键词 遥感 树木营养学 课程教学改革

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杉木木糖合成酶基因ClUAXS2的全长克隆与分析 被引量：2

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作者 张颖 苏烁烁 +3 位作者 陈婉婷 陈冉红 李明 马祥庆 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期82-90,143,共10页

木糖合成酶UAXS基因是植物体内调控细胞壁中UDP-D-葡萄糖醛酸脱羧反应生成UDP-D-木糖/芹菜糖的关键性核苷糖合成酶,对植物细胞壁多糖物质的稳定合成和转换有重要意义。从杉木转录组中挑选获得木糖合成酶基因UAXS的中间序列,使用全长克... 木糖合成酶UAXS基因是植物体内调控细胞壁中UDP-D-葡萄糖醛酸脱羧反应生成UDP-D-木糖/芹菜糖的关键性核苷糖合成酶,对植物细胞壁多糖物质的稳定合成和转换有重要意义。从杉木转录组中挑选获得木糖合成酶基因UAXS的中间序列,使用全长克隆技术和PCR技术克隆得到1个杉木木糖合成酶基因ClUAXS2。结果表明,ClUAXS2基因全长为1 753bp,包含的1 158bp的开放阅读框,可编码长度为386个氨基酸残基的蛋白质,其蛋白质分子式为C1936H3026N524O578S19,分子质量为43.90ku,等电位点为5.60。ClUAXS2基因为亲水性蛋白,没有信号肽结构域,编码1个疑似跨膜区域。蛋白质二级结构分析表明其蛋白主要骨架为Loop环和α-螺旋,预测亚细胞定位于细胞质中。通过对比分析发现ClUAXS2基因属于UAXS家族基因,编码1个UDP-D-Apiose/UDP-D-Xylose synthase 2(UAXS2)木糖酶蛋白。进化树分析结果显示,杉木ClUAXS2基因与无油樟(AtUAXS2)和可可树(TcUAXS2)的氨基酸序列相似度达到85%、86%,与拟南芥(AtAXS2),葡萄(VvUAXS)、毛果杨(PtAXS1)的氨基酸序列相似度为84%。实时荧光定量PCR结果表明,ClUAXS2基因在杉木的根、茎、叶中均有表达,但在1年生杉木幼苗茎中的表达量最高;ClUAXS2基因在不同杉木无性系茎中的表达量差异不显著,在根和叶中的表达量存在差异。 展开更多

关键词 杉木 ClUAXS2 木糖合成酶 基因克隆 表达分析

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蔗糖添加对杉木低磷胁迫响应和蔗糖代谢的影响 被引量：2

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作者 陈冉红 周梦岩 +4 位作者 李娇阳 钟伟民 吴鹏飞 马祥庆 李明 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第16期6588-6599,共12页

为了揭示低磷胁迫下蔗糖对杉木低磷胁迫响应和蔗糖代谢的影响,选用两种不同磷效率杉木家系M32和M28进行低磷胁迫下的蔗糖添加试验,分析蔗糖添加对低磷胁迫下杉木形态特征、生理特性和低磷诱导相关基因表达的影响。结果表明:蔗糖添加促... 为了揭示低磷胁迫下蔗糖对杉木低磷胁迫响应和蔗糖代谢的影响,选用两种不同磷效率杉木家系M32和M28进行低磷胁迫下的蔗糖添加试验,分析蔗糖添加对低磷胁迫下杉木形态特征、生理特性和低磷诱导相关基因表达的影响。结果表明:蔗糖添加促进了低磷胁迫下杉木苗高、根长、根表面积、根平均直径、根体积、根叶组织蔗糖含量和根叶组织无机磷含量的增加,但仍明显低于正常供磷处理下添加蔗糖处理的杉木增量。低磷促进杉木叶中花青素的积累,而正常供磷和低磷胁迫下的蔗糖添加处理都显著促进了叶片花青素含量的增加。随着胁迫时间的延长,M28与M32在根、叶组织的蔗糖含量存在显著差异,且M28根叶组织中的蔗糖合成酶活性和蔗糖磷酸合成酶活性都高于M32。蔗糖合成酶ClSuSy在M28和M32根系中受低磷胁迫诱导下调表达,但蔗糖添加处理明显诱导ClSuSy表达量升高,M28在正常供磷并添加蔗糖处理下的ClSuSy表达量显著高于其它处理。蔗糖转运蛋白SUT4、磷转运蛋白ClPht1;4、紫色酸性磷酸酶PAP1和PAP11在M28和M32根系中总体上受低磷胁迫诱导上调表达,且受蔗糖添加处理诱导下调表达。低磷胁迫下,添加或不添加蔗糖处理的M32根系SUT4的表达量均在15d时显著升高,并在45d时回落到正常水平。ClPht1;4和PAP1在低磷胁迫15d的表达量显著高于45d时的表达量,且ClPht1;4在M32根系中的表达量远高于M28。本研究表明,蔗糖对杉木低磷胁迫响应和糖代谢有重要的影响作用,低磷胁迫下添加蔗糖处理能够在一定程度上缓解杉木低磷胁迫响应。 展开更多

关键词 杉木 低磷胁迫 蔗糖 根系形态 基因表达

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杉木磷转运蛋白ClPht1;2基因克隆与表达特性分析 被引量：1

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作者 陈婉婷 陈冉红 +4 位作者 李娇阳 何冬梅 帅鹏 李明 马祥庆 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期1-8,共8页

磷酸转运蛋白PHT1家族是介导植物磷素吸收与转运分配的重要基因家族。从第3代杉木优良无性系洋061中克隆获得1个杉木磷转运蛋白ClPht1;2,并对不同程度磷胁迫下ClPht1;2的时空表达进行分析,为了解杉木磷转运蛋白基因结构和功能表达奠定... 磷酸转运蛋白PHT1家族是介导植物磷素吸收与转运分配的重要基因家族。从第3代杉木优良无性系洋061中克隆获得1个杉木磷转运蛋白ClPht1;2,并对不同程度磷胁迫下ClPht1;2的时空表达进行分析,为了解杉木磷转运蛋白基因结构和功能表达奠定基础。以转录组测序获得的ClPht1;2核心序列为基础,以杉木洋061无性系根系cDNA克隆为模板,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆目的基因的全长,采用实时荧光定量PCR技术,检测了杉木洋061无性系在不同组织中ClPht1;2的表达,以及磷饥饿诱导3、10、25 d下ClPht1;2在根中的表达量变化。克隆得到1个杉木PHT1家族基因ClPht1;2(GeneBank登录号:MK450598)。ClPht1;2编码氨基酸序列与日本柳杉磷转运蛋白家族基因编码氨基酸序列相似性为93%,与马尾松、油茶、毛果杨等植物磷转运蛋白家族基因的编码氨基酸序列比对,结果相似性均>72%。ClPht1;2基因序列编码区长1565 bp,编码511个氨基酸,蛋白理论分子量60.024 ku,为疏水蛋白,不具有信号肽,潜在磷酸化位点42个。ClPht1;2所编码蛋白质由12个跨膜结构组成,其中11个为确定跨膜域,多肽链中α螺旋占42.65%,无规则卷曲占42.11%,延伸链占15.25%。ClPht1;2在杉木洋061无性系的根、茎、叶中均有表达,在叶片中的表达量最高,在根中的表达量最低。与正常磷供应相比,根系ClPht1;2的表达水平在低磷胁迫10 d时显著增加,到25 d时下降至正常磷供应时的表达水平;ClPht1;2在无磷胁迫处理3 d时表达量降低,在10 d时表达量显著提高,在25 d时表达量又低于正常供磷水平。ClPht1;2基因具有PHT1基因家族特征结构,在杉木不同组织中均有表达,在杉木根中的表达受低磷胁迫诱导,在叶中的表达量受低磷胁迫诱导不明显,可能为杉木体内低亲和的磷转运蛋白,参与杉木地上部和根中磷的运输和分配。 展开更多

关键词 杉木 磷转运蛋白基因 ClPht1 2 RACE

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老年白血病1例化疗期间的护理

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作者 陈冉红 《世界今日医学杂志》 2002年第6期543-544,共2页

关键词 白血病 化疗期间 护理 老年人

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树木营养学课程教学改革研究

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作者 曹鸿露 胡霞 +1 位作者 陈冉红 李明 《安徽农学通报》 2019年第10期126-127,共2页

为探索适于树木营养学课程的教学途径,培养特色鲜明、竞争力强的高素质专业人才,针对树木营养学教学中存在的教材与林业联系不紧密、实践基地教学薄弱、学科交叉性课程实践教学设计不足等问题,从提高师生互动式理论教学改革、创新型树... 为探索适于树木营养学课程的教学途径,培养特色鲜明、竞争力强的高素质专业人才,针对树木营养学教学中存在的教材与林业联系不紧密、实践基地教学薄弱、学科交叉性课程实践教学设计不足等问题,从提高师生互动式理论教学改革、创新型树木营养试验设计、参与式林业生产实践和优化实践教学考核体系等4个方面,提出了提升教学质量,优化教学体系的改革建议。 展开更多

关键词 树木营养学 实践教学 教学改革

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临床加药小经验

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作者 陈冉红 《中国误诊学杂志》 CAS 2011年第2期504-504,共1页

关键词 药物疗法

原文传递

巧处理一次性集痰器连接末端

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作者 陈冉红 程晓丽 《中国误诊学杂志》 CAS 2009年第29期7064-7064,共1页

关键词 痰 一次性设备

原文传递

使用一次性输液器进行膀胱冲洗的改进

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作者 程晓莉 陈冉红 《现代护理》 2008年第5期646-646,共1页

在护理工作中，膀胱冲洗法是留置导尿病人常用的一项护理操作。临床上我科也采用一次性输液器穿刺集尿袋上引流管接口处的方法进行膀胱冲洗，既减轻了护士的工作量又避免了因反复打开导尿管与集尿袋引流管的衔接处而引发的逆行感染。但... 在护理工作中，膀胱冲洗法是留置导尿病人常用的一项护理操作。临床上我科也采用一次性输液器穿刺集尿袋上引流管接口处的方法进行膀胱冲洗，既减轻了护士的工作量又避免了因反复打开导尿管与集尿袋引流管的衔接处而引发的逆行感染。但在工作中时有针头刺破引流软管的现象发生，如果病人翻身或移动时容易刺伤造成不必要的伤害。为了避免事故的发生，我们改进了操作方法。 展开更多

关键词 一次性输液器 膀胱冲洗法 护理操作 引流管 护理工作 导尿病人 逆行感染 病人翻身

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