期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
H7N9亚型禽流感病毒研究进展 被引量：15
1
作者 崔欢 张诚 +11 位作者 张春茂 李佳明 陈冠希 赖锰熙 李志翔 陈立功 郭康康 张博 阴雅洁 武华 董世山 郭振东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1871-1875,共5页
H7N9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)是一种新重组A型流感病毒。2013年首次发现可以感染人类,引起呼吸道综合征,致死率极高,给全球公共卫生安全带来严重威胁。截止目前,中国已经暴发5次H7N9亚型禽流感疫情,2016年10月的第5... H7N9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)是一种新重组A型流感病毒。2013年首次发现可以感染人类,引起呼吸道综合征,致死率极高,给全球公共卫生安全带来严重威胁。截止目前,中国已经暴发5次H7N9亚型禽流感疫情,2016年10月的第5次流行人感染病例数急剧增加,且向西部省份蔓延,引起了国内外的广泛关注。本研究总结H7N9亚型AIV的流行情况、病毒起源与进化、病毒受体结合特性和预防控制等方面的研究进展,以期为H7N9亚型AIV的防控提供理论参考。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7N9亚型 遗传进化 预防控制
原文传递
新型鸭呼肠孤病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：7
2
作者 张博 陈立功 +5 位作者 武华 阴雅洁 孟利佳 郭康康 侯绍华 董世山 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期80-84,共5页
为了快速、准确检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV),本试验采用NDRVσB基因的序列保守区,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了NDRV实时荧光定量RT-PCR检测方法标准曲线,并进行特异性试验、敏感性试验、重复... 为了快速、准确检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV),本试验采用NDRVσB基因的序列保守区,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了NDRV实时荧光定量RT-PCR检测方法标准曲线,并进行特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验。结果表明:所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法标准曲线方程为y=-3.354x+44.818,扩增效率为98.7%,标准曲线的相关系数为0.999;该方法可以特异性检测NDRV,但对MDRV、ARV、TMUV、DHAV均无反应信号;该方法检测质粒标准品最低检测浓度为10拷贝/μL,是普通PCR方法检测敏感性的1000倍;该方法的组内与组间变异系数均小于2%;用该方法检测临床样品,结果显示NDRV阳性率为45%,而常规RT-PCR阳性率为33%,比常规RT-PCR敏感。说明本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法可为NDRV的监测和早期诊断提供可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 σB基因 荧光定量 RT-PCR TAQMAN探针 应用
下载PDF
鸭坦布苏病毒分离鉴定及其囊膜蛋白遗传进化分析 被引量：4
3
作者 阴雅洁 梁瑞英 +8 位作者 崔欢 孟利佳 倪维玲 乔思娜 郭康康 张博 李松励 侯绍华 董世山 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1497-1506,共10页
【目的】了解并掌握鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)流行特点及病毒生物学特性,为DTMUV防治提供理论依据和技术支撑。【方法】通过细胞及鸡胚接毒试验对河北某鸭场10只具有典型临床症状的发病鸭进行病毒分离,用RT-PCR、透射电... 【目的】了解并掌握鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)流行特点及病毒生物学特性,为DTMUV防治提供理论依据和技术支撑。【方法】通过细胞及鸡胚接毒试验对河北某鸭场10只具有典型临床症状的发病鸭进行病毒分离,用RT-PCR、透射电镜观察、Western blotting及间接免疫荧光试验(IFA)等方法鉴定,进行动物回归试验测定病毒毒力并对其进行囊膜蛋白遗传进化分析。【结果】分离到的病毒可在DF-1细胞上稳定增殖产生典型细胞病变效应(CPE)并致死鸡胚;病毒纯化后经电镜观察可见直径30~60 nm的病毒粒子;RT-PCR结果显示,在约270 bp处可见单一条带,与DTMUV预期大小一致;Western blotting结果显示,在60 ku处有特异性条带,与E蛋白大小一致;IFA结果表明,接种病毒的DF-1细胞胞质中可见明亮的特异性荧光,以上结果均表明分离的病毒为DTMUV。将分离到的病毒命名为AX2020株,AX2020株经肌内注射感染北京鸭后感染率高达100%,发病鸭产生神经症状及腹泻等典型临床症状;经序列比对发现AX2020株和GA株(MK907880.1)相似性最高,与SD14毒株(MH748542.1)亲缘关系较远。与商品灭活疫苗毒株HB2010株(MN649262.1)和活疫苗毒株FX2010株(MH414568.1)相比,AX2020株第93、277和487位氨基酸发生了的突变。【结论】成功分离得到1株DTMUV AX2020株,分离毒株对北京鸭具有较强的致病性,AX2020株的囊膜蛋白与国内疫苗毒株相比,已经发生了氨基酸位点的突变,结果为鸭坦布苏病毒病的流行病学及后续疫苗相关研究奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒(DTMUV) 分离鉴定 囊膜蛋白 遗传进化分析
下载PDF
母猪猪瘟病毒抗体与仔猪母源抗体衰减规律的研究 被引量：4
4
作者 郭康康 董世山 +7 位作者 李延明 张博 崔欢 武华 阴雅洁 张诚 陈立功 徐倩倩 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期163-167,共5页
为了研究仔猪猪瘟病毒(CSFV)母源抗体的衰减规律,本研究随机选择36头待产母猪,产后采血,选择每头母猪对应的仔猪连续采血至8周龄,分离血清,通过ELISA方法检测CSFV抗体阻断率,所测结果利用EXCEL拟合指数曲线,计算分析母猪CSFV抗体水平与... 为了研究仔猪猪瘟病毒(CSFV)母源抗体的衰减规律,本研究随机选择36头待产母猪,产后采血,选择每头母猪对应的仔猪连续采血至8周龄,分离血清,通过ELISA方法检测CSFV抗体阻断率,所测结果利用EXCEL拟合指数曲线,计算分析母猪CSFV抗体水平与仔猪母源抗体衰减规律。结果显示,36头母猪中母猪抗体阻断率80%以上6头,母猪抗体阻断率70%~79%的11头,母猪抗体阻断率60%~69%的8头,母猪抗体阻断率50%~59%的5头,母猪抗体阻断率49%以下的6头。3周龄仔猪抗体阻断率整体与母猪抗体阻断率相近且高度相关,相关系数为99%。母猪抗体阻断率在80%以上时,母源抗体对所产仔猪8周龄时仍然具有保护力;母猪抗体阻断率在70%~79%时,母源抗体对所产仔猪7周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率在60%~69%时,母源抗体对所产仔猪5周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率在50%~59%时,母源抗体对所产仔猪4周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率49%以下时,母源抗体对所产仔猪3周龄时不再具有保护力。以上结果表明仔猪母源CSFV抗体随着仔猪周龄的增加逐渐衰减,由试验得出仔猪猪瘟疫苗首免日龄的计算公式:y=1.19x-46.55(x为母猪CSFV抗体阻断率,y为首免日龄)。因此,母猪抗体阻断率在80%以上时,仔猪母源抗体在60日龄不再具有保护力,仔猪猪瘟疫苗首免为56日龄;母猪抗体阻断率在70%~79%时,母源抗体对仔猪的保护持续到50日龄,仔猪猪瘟疫苗首免为42日龄;母猪抗体阻断率在60%~69%时和50%~59%时,母源抗体对仔猪的保护持续至36日龄和29日龄,仔猪猪瘟疫苗首免分别为28日龄和21日龄。本研究中所得母猪CSFV抗体水平计算母源抗体衰减变化,为选择母猪首免日龄,提高仔猪猪瘟疫苗免疫效果提供了科学依据。 展开更多
关键词 仔猪 猪瘟 母源抗体 衰减规律 首免日龄
下载PDF
新型鸭呼肠孤病毒分离鉴定及其σC基因序列分析 被引量：2
5
作者 张薇 武华 +2 位作者 阴雅洁 李松励 侯绍华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第9期3520-3529,共10页
【目的】了解并掌握新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus, NDRV)流行特点及生物学特性,为NDRV的防治提供理论基础和技术支持。【方法】采集河北某鸭场疑似发生鸭呼肠孤病毒感染的组织,无菌处理后接种SPF鸡胚分离病毒,收获第3代尿囊液... 【目的】了解并掌握新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus, NDRV)流行特点及生物学特性,为NDRV的防治提供理论基础和技术支持。【方法】采集河北某鸭场疑似发生鸭呼肠孤病毒感染的组织,无菌处理后接种SPF鸡胚分离病毒,收获第3代尿囊液进行血凝试验,通过PCR、透射电镜观察、间接免疫荧光法(IFA)鉴定病毒,对分离得到的病毒进行体外细胞培养和动物回归试验,并采用Mega 7.0对其σC基因进行遗传进化分析。【结果】分离得到的病毒不能凝集鸡红细胞,可致死鸡胚,死亡鸡胚出血、充血严重;经PCR鉴定,病毒呈NDRV阳性,其他病原(禽呼肠孤病毒、鸭病毒性肝炎、鸭坦布苏病毒、鸭瘟病毒、禽腺病毒血清4型)均呈阴性,将分离得到的病毒命名为BD/CHN/2020株;病毒纯化后,经电镜观察可见直径为60~80 nm、无囊膜的球形病毒粒子,该毒株可在BHK和LMH细胞上稳定增殖并产生细胞融合的细胞病变效应(CPE);IFA结果显示,BD/CHN/2020株接种BHK细胞后在激光共聚焦显微镜下观察可见特异性绿色荧光;BD/CHN/2020株经皮下接种后,发病鸭出现精神沉郁、排白色稀粪等临床症状,剖检可见脾脏出血、肿大、有白色坏死灶等病理变化;序列比对发现,BD/CHN/2020株与NDRV毒株(TH11、091等毒株)在同一分支,与NDRV SY株核苷酸和氨基酸序列相似性最高,均为99.7%,属于NDRV。与灭活疫苗TH11株(KC493571.1)和弱毒疫苗JS01-105P株(V202168)相比,BD/CHN/2020株第93、120、132、158、253、298位氨基酸处发生了位点突变。【结论】成功分离得到1株NDRV BD/CHN/2020株,分离毒株对北京鸭有较强的致病性,与国内疫苗株相比,BD/CHN/2020株的σC蛋白已经发生了氨基酸位点的突变,结果可为新型鸭呼肠孤病毒病的流行病学及疫苗研发奠定基础。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒(NDRV) 分离鉴定 σC基因
下载PDF
经分子佐剂诱导产生的卵黄抗体对NDRV的预防和治疗效力评价 被引量：2
6
作者 武华 孟利佳 +6 位作者 阴雅洁 乔思娜 倪维玲 陈立功 侯绍华 徐倩倩 董世山 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期128-134,共7页
为了预防和应对新型鸭呼肠孤病毒引起的综合疾病,本研究利用分离到的新型鸭呼肠孤病毒,制备了具有良好中和活性的高效价IgY。中和试验结果显示:三免后第14天抗体滴度达到峰值,而后趋于平稳(>26),且添加CpG和IL-2分子佐剂的组别提取的... 为了预防和应对新型鸭呼肠孤病毒引起的综合疾病,本研究利用分离到的新型鸭呼肠孤病毒,制备了具有良好中和活性的高效价IgY。中和试验结果显示:三免后第14天抗体滴度达到峰值,而后趋于平稳(>26),且添加CpG和IL-2分子佐剂的组别提取的IgY比未添加分子佐剂的组别中和滴度提高约3倍;将抗体注入SPF鸡胚进行攻毒保护试验,结果显示中和组的保护率最高,预防组的略高于治疗组的,且CpG组所提取的IgY预防效果(83%)和治疗效果(75%)最佳。本研究提取的高效价IgY能应用到临床防控中,可有效预防及治疗新型鸭呼肠孤病毒病。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 卵黄抗体 IL-2 CPG 中和抗体
原文传递
一株新型鸭呼肠孤病毒的致病性及其σB基因进化情况分析 被引量：2
7
作者 张博 陈立功 +7 位作者 郭康康 孟利佳 崔欢 武华 阴雅洁 张诚 王迎春 董世山 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第9期83-87,165,共6页
为了研究新型鸭呼肠孤病毒(novel Duck reovirus,NDRV)的致病性及其σB基因进化情况,试验采集河北地区病鸭的病变组织,经处理后接种SPF鸡胚进行病毒分离,鉴定该病毒的血凝特性,采用DNAStar等分子生物学软件对NDRVσB基因进行分析,以Reed... 为了研究新型鸭呼肠孤病毒(novel Duck reovirus,NDRV)的致病性及其σB基因进化情况,试验采集河北地区病鸭的病变组织,经处理后接种SPF鸡胚进行病毒分离,鉴定该病毒的血凝特性,采用DNAStar等分子生物学软件对NDRVσB基因进行分析,以Reed-Muench法计算分离病毒的鸡胚半数致死量(ELD50),并研究该病毒对雏鸭的致病性。结果表明:用处理的第3代尿囊液接种9日龄鸡胚,鸡胚在48小时时开始死亡,死亡高峰集中在60小时,鸡胚主要病变表现为全身出血、水肿和肝脏坏死。分离毒株不能凝集SPF鸡红细胞。PCR扩增得到大小约为1162 bp的目的条带,分离病毒与GenBank中16株参考病毒核苷酸序列同源性为66.2%~99.5%,其中与NDRV Duck/N-DRV-XT18/China/2018参考株的核苷酸序列同源性最高为99.5%。分离病毒对鸡胚的半数致死量为1×10^(-5.67) ELD_(50)/0.2 mL,可致健康雏鸭死亡,剖检可见脾脏组织中散在分布大量坏死灶,坏死灶区域淋巴细胞变性、坏死,组织丧失固有结构;肝脏组织中肝细胞脂肪变性,局灶性肝细胞坏死。说明从河北地区病鸭组织中分离的病毒为NDRV,将其命名为CH-HB株,该病毒具有传播迅速、地域性等特征。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 分离 鉴定 σB基因 致病性 分析
原文传递
基于重构NDRV σC 蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立
8
作者 武华 林伟东 +6 位作者 孟利佳 阴雅洁 乔思娜 倪维玲 侯绍华 徐倩倩 董世山 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1557-1563,共7页
旨在建立灵敏快速诊断新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)抗体的间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)方法,为水禽养殖业提供科学有效的检测手段。先前报道σC蛋白为沉淀表达,因此本研究利用大肠杆菌的密码子偏嗜性等规律优化其... 旨在建立灵敏快速诊断新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)抗体的间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)方法,为水禽养殖业提供科学有效的检测手段。先前报道σC蛋白为沉淀表达,因此本研究利用大肠杆菌的密码子偏嗜性等规律优化其基因序列进行原核表达,纯化出高纯度的可溶性σC蛋白。采用方阵滴定法确定σC蛋白包被浓度和样品稀释度,初步建立NDRV的iELISA检测方法。分别对84份阳性和180份阴性质控血清进行分析,构建受试者工作特征曲线(ROC),通过Youden指数选择灵敏性和特异性最佳的P值作为阴阳临界值。使用质控阴、阳血清评价试剂盒的批内和批间重复性。用本研究的和实验室先前建立的全病毒包被的iELISA方法同时对质控血清进行检测,比较其符合率。通过方阵滴定法确定各组分条件为σC蛋白包被质量浓度0.5μg/孔、血清稀释度1∶320。构建的ROC曲线下面积为1.00,最佳阴阳临界值为0.076,在此临界值上的灵敏性和特异性均为100%。全病毒包被板和σC蛋白包被板符合率为100%,但前者检测样品的D_(450)值偏低,σC蛋白包被板则弥补了这一缺点。本研究为NDRV提供特异性和灵敏性良好的iELISA抗体检测方法。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 原核表达 σC蛋白 间接ELISA方法
原文传递
一株鹌鹑源H7N9亚型禽流感病毒两种攻毒方式对小鼠致病性差异研究
9
作者 崔欢 张诚 +8 位作者 张春茂 赵宗正 陈立功 郭康康 张博 阴雅洁 武华 董世山 郭振东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第19期1-5,164,165,共7页
为了评估流感病毒的肺部气溶胶攻毒方式与传统滴鼻攻毒方式对Balb/c小鼠的致病性差异,试验随机选取75只Balb/c小鼠,将小鼠分为肺部气溶胶攻毒组、滴鼻攻毒组、空白对照组,对攻毒组小鼠分别接种50μL(病毒含量为1×105.0 EID50/mL)... 为了评估流感病毒的肺部气溶胶攻毒方式与传统滴鼻攻毒方式对Balb/c小鼠的致病性差异,试验随机选取75只Balb/c小鼠,将小鼠分为肺部气溶胶攻毒组、滴鼻攻毒组、空白对照组,对攻毒组小鼠分别接种50μL(病毒含量为1×105.0 EID50/mL)鹌鹑源H7N9亚型禽流感病毒,其中肺部气溶胶攻毒组采用肺部液体定量雾化器在小鼠肺部发生气溶胶的方式攻毒,滴鼻攻毒组采用传统滴鼻攻毒方式攻毒。连续14 d观察各组小鼠临床症状,并监测其体重和存活率变化。于攻毒后第3,5,7天取各组小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及脑,测定病毒的组织分布,以H.E.染色和免疫组化染色法观察肺脏病理损伤变化。结果表明:与滴鼻攻毒组比较,肺部气溶胶攻毒组小鼠体重显著下降(P<0.05),存活率降低,肺脏病毒含量显著升高(P<0.05),病理损伤明显,病毒主要存在于细支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及巨噬细胞中,小鼠肺脏的阳性表达水平较高。说明肺部气溶胶攻毒方式与传统滴鼻攻毒方式对小鼠的致病性有明显差异,与传统滴鼻攻毒方式比较,试验建立的肺部液体定量气溶胶攻毒方式可精确定量到达小鼠肺部的病毒,准确评价流感病毒对小鼠的致病性。 展开更多
关键词 肺部液体定量雾化攻毒 滴鼻攻毒 H7N9 禽流感病毒 小鼠 致病性
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部