目的探讨0.6 m T 50 Hz脉冲电磁场和1.8 m T 50 Hz正弦交变电磁场对大鼠颅骨成骨细胞增殖与成熟矿化的影响。方法采用酶消化法分离大鼠乳鼠颅骨成骨细胞,接种培养于10%胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基中,成骨细胞融合到80%~90%,传代培养...目的探讨0.6 m T 50 Hz脉冲电磁场和1.8 m T 50 Hz正弦交变电磁场对大鼠颅骨成骨细胞增殖与成熟矿化的影响。方法采用酶消化法分离大鼠乳鼠颅骨成骨细胞,接种培养于10%胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基中,成骨细胞融合到80%~90%,传代培养,随机分成3组,分别为对照组、脉冲电磁场组和正弦交变电磁场组,分别测定细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性,并进行碱性磷酸酶染色和茜素红钙化结节染色。结果脉冲电磁场组OD值明显高于正弦交变电磁场组和对照组(P〈0.01),正弦交变电磁场组明显低于对照组(P〈0.01);第6天脉冲电磁场组ALP活性明显高于正弦交变电磁场组和对照组(P〈0.01),第9天脉冲电磁场组和正弦交变电磁场组ALP活性均明显高于对照组(P〈0.01)。脉冲电磁场组和正弦交变电磁场组ALP染色、茜素红面积和克隆数均显著高于对照组(P〈0.01)。结论脉冲电磁场和正弦交变电磁场都能最终促进成骨细胞的成熟矿化,使其形成新骨,但其作用机理不同。展开更多
目的研究信号分子丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是否参与50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程。方法取出生48 h内的SPF级Wistar大鼠6只,采用酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨...目的研究信号分子丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是否参与50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程。方法取出生48 h内的SPF级Wistar大鼠6只,采用酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞。取原代颅骨成骨细胞,经50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场处理0、5、10、20、40、60、120 min后,采用Western blot检测MAPKs的磷酸化水平。将成骨细胞随机分为对照组(A组)、低频脉冲电磁场处理组(B组)、p-p38抑制剂SB202190组(C组)、SB202190+低频脉冲电磁场处理组(D组),经相应处理1、4、7 d后检测其ALP活性。将90%以上融合的成骨细胞经成骨诱导处理后同上法分组,处理9 d时行ALP组织化学染色,12 d时行茜素红染色观察。结果 Western blot检测示,处理各时间点磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2蛋白表达量无显著变化(P>0.05);而p-p38蛋白表达量则在处理5 min后开始升高,至40 min时达峰值,之后开始逐步下降,但各时间点均显著高于0 min时(P<0.05)。B组ALP活性、ALP阳性克隆数、ALP阳性克隆面积、钙结节数及钙结节面积均显著多于A、C、D组(P<0.05)。结论在50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程中,信号分子p38参与其中。展开更多
文摘目的探讨0.6 m T 50 Hz脉冲电磁场和1.8 m T 50 Hz正弦交变电磁场对大鼠颅骨成骨细胞增殖与成熟矿化的影响。方法采用酶消化法分离大鼠乳鼠颅骨成骨细胞,接种培养于10%胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基中,成骨细胞融合到80%~90%,传代培养,随机分成3组,分别为对照组、脉冲电磁场组和正弦交变电磁场组,分别测定细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性,并进行碱性磷酸酶染色和茜素红钙化结节染色。结果脉冲电磁场组OD值明显高于正弦交变电磁场组和对照组(P〈0.01),正弦交变电磁场组明显低于对照组(P〈0.01);第6天脉冲电磁场组ALP活性明显高于正弦交变电磁场组和对照组(P〈0.01),第9天脉冲电磁场组和正弦交变电磁场组ALP活性均明显高于对照组(P〈0.01)。脉冲电磁场组和正弦交变电磁场组ALP染色、茜素红面积和克隆数均显著高于对照组(P〈0.01)。结论脉冲电磁场和正弦交变电磁场都能最终促进成骨细胞的成熟矿化,使其形成新骨,但其作用机理不同。
文摘目的研究信号分子丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是否参与50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程。方法取出生48 h内的SPF级Wistar大鼠6只,采用酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞。取原代颅骨成骨细胞,经50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场处理0、5、10、20、40、60、120 min后,采用Western blot检测MAPKs的磷酸化水平。将成骨细胞随机分为对照组(A组)、低频脉冲电磁场处理组(B组)、p-p38抑制剂SB202190组(C组)、SB202190+低频脉冲电磁场处理组(D组),经相应处理1、4、7 d后检测其ALP活性。将90%以上融合的成骨细胞经成骨诱导处理后同上法分组,处理9 d时行ALP组织化学染色,12 d时行茜素红染色观察。结果 Western blot检测示,处理各时间点磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2蛋白表达量无显著变化(P>0.05);而p-p38蛋白表达量则在处理5 min后开始升高,至40 min时达峰值,之后开始逐步下降,但各时间点均显著高于0 min时(P<0.05)。B组ALP活性、ALP阳性克隆数、ALP阳性克隆面积、钙结节数及钙结节面积均显著多于A、C、D组(P<0.05)。结论在50 Hz、0.6 m T低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程中,信号分子p38参与其中。