二倍体型及三倍体型卫氏并殖吸虫的DNA重复顺序的比较研究 被引量：11

1

作者 王恩荣 郑韧坚 Cain GD 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期46-49,共4页

从东北地区获得两类型卫氏并殖吸虫,提取其基因组DNA。用5种限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳后,观察两类型成虫基因组DNA的酶切片段。又用Southern印渍技术对两类型7种酶消化物的结果做了比较。显示两类型Bam HI、Hind Ⅲ及Eco RI的酶... 从东北地区获得两类型卫氏并殖吸虫,提取其基因组DNA。用5种限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳后,观察两类型成虫基因组DNA的酶切片段。又用Southern印渍技术对两类型7种酶消化物的结果做了比较。显示两类型Bam HI、Hind Ⅲ及Eco RI的酶切结果基本相同,但Pst Ⅰ、DdeⅠ、HaeⅢ及HpaⅡ的结果却显示两类型的DNA重复顺序有明显差别。此结果在单个虫体DNA的杂交技术检测中也得到证实。 展开更多

关键词 并殖吸虫 基因组 DNA 染色体

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两型卫氏并殖吸虫蛋白质及其抗原性的比较研究 被引量：6

2

作者 郑韧坚 王恩荣 George Cain 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第3期17-19,共3页

应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电泳转移酶标免疫印斑技术(Western-blot)对卫氏并殖吸虫二倍体型和三倍体型成虫的蛋白质及其抗原性进行了比较研究。SDS-PAGE结果表明,两型虫株的结构蛋白质均具有基本相同的分子量。Westernblo... 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电泳转移酶标免疫印斑技术(Western-blot)对卫氏并殖吸虫二倍体型和三倍体型成虫的蛋白质及其抗原性进行了比较研究。SDS-PAGE结果表明,两型虫株的结构蛋白质均具有基本相同的分子量。Westernblot的分析结果显示,两型虫株的主要抗原22.5KD蛋白质区带均能分别与狗、犬鼠和兔抗两型虫株血清反应;两型虫株的27/28/兆9KD蛋白质区带分别与狗抗两型虫株血清发生反应。本研究结果表明,卫氏并殖吸虫的二倍体型和三倍体型虫株的蛋白质及其抗原性之间存在着高度的同源性。 展开更多

关键词 卫氏并殖吸虫 蛋白质区带 同源性

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伊氏锥虫同工酶、蛋白质和抗原组分的比较研究 被引量：5

3

作者 王云飞 沈杰 郑韧坚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期463-468,共6页

本文采用生化技术对八个中国伊氏锥虫株及一个布氏锥虫株的同工酶、蛋白质和抗原组分进行比较研究。根据同工酶电泳结果,可将伊氏锥虫和与其形态上不能区分的布氏锥虫区别开来,亦可将伊氏锥虫分为两个酶株群(Z1、Z2)。根据SDS-聚丙烯酰... 本文采用生化技术对八个中国伊氏锥虫株及一个布氏锥虫株的同工酶、蛋白质和抗原组分进行比较研究。根据同工酶电泳结果,可将伊氏锥虫和与其形态上不能区分的布氏锥虫区别开来,亦可将伊氏锥虫分为两个酶株群(Z1、Z2)。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和免疫印迹试验的结果,可将酶株群Z1分成五个不同多肽群(株)。本研究结果表明,中国伊氏锥虫遗传变异程度较低,是一个相对稳定的种群。 展开更多

关键词 同功酶 伊氏锥虫 蛋白 抗原

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ABC-ELISA诊断耕牛日本血吸虫病 被引量：6

4

作者 林矫矫 吴文涓 +3 位作者 刘训暹 叶萍 郑韧坚 王云方 《中国兽医科技》 CSCD 1991年第1期42-43,共2页

生物素—亲和素系统是前几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,不少实验室已把它应用于寄生虫病的免疫诊断,并得到了较为满意的结果。本文对ABC-ELISA法在耕牛日本血吸虫病免疫诊断上的应用价值做了初步探讨。(一)材料与方法1.材料:

关键词 牛 耕牛 血吸虫病 ABC-ELISA 诊断

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4种抗锥虫药对5个伊氏锥虫地理株的杀虫效果比较 被引量：5

5

作者 沈杰 邱巧平 +1 位作者 王爱华 郑韧坚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1991年第12期20-21,共2页

目前,在我国使用或即将使用的抗锥虫商品药,据试验或应用报道效果较好的有4种:纳嘎诺尔、锥嘧啶(Trypamidium)、安锥赛、贝尼尔,前两种系进口药物,后两种系国产药物,我国技术人员应用后效果评价不一,经我们初步观察,我国伊氏锥虫不同地... 目前,在我国使用或即将使用的抗锥虫商品药,据试验或应用报道效果较好的有4种:纳嘎诺尔、锥嘧啶(Trypamidium)、安锥赛、贝尼尔,前两种系进口药物,后两种系国产药物,我国技术人员应用后效果评价不一,经我们初步观察,我国伊氏锥虫不同地理株对药的抗性大小不同。 展开更多

关键词 伊氏锥虫病 地理株 杀虫效果 药物

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浙、滇、皖伊氏锥虫株蛋白质及其抗原性的比较研究 被引量：5

6

作者 郑韧坚 沈杰 +1 位作者 邱巧平 王爱华 《中国兽医科技》 CSCD 1990年第2期7-9,共3页

应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Westernb-lot)对伊氏锥虫浙江株、云南株和安徽株的蛋白质及其抗原性进行了比较分析。研究结果显示三个锥虫株在蛋白质分子量、抗原性方面存在着较明显的差异。提示长期的地理隔离... 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Westernb-lot)对伊氏锥虫浙江株、云南株和安徽株的蛋白质及其抗原性进行了比较分析。研究结果显示三个锥虫株在蛋白质分子量、抗原性方面存在着较明显的差异。提示长期的地理隔离已使伊氏锥虫蛋白质抗原发生不同程度的变化。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 蛋白 抗压性 比较研究

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伊氏锥虫TR酶的初步研究 被引量：5

7

作者 钟淑梅 郑韧坚 +2 位作者 沈杰 周勇志 王云飞 《中国兽医寄生虫病》 CAS 1997年第2期9-11,共3页

国外研究者已报道在布氏锥虫、枯氏锥虫、刚果锥虫中发现了存在TR酶，此酶是锥虫代谢的重要酶之一。伊氏锥虫TR酶研究尚属空白。本研究目的是为了确定伊氏锥虫中是否存在TR酶。我们利用分光光度法测出了伊氏锥虫中有TR酶活性，但无GR酶... 国外研究者已报道在布氏锥虫、枯氏锥虫、刚果锥虫中发现了存在TR酶，此酶是锥虫代谢的重要酶之一。伊氏锥虫TR酶研究尚属空白。本研究目的是为了确定伊氏锥虫中是否存在TR酶。我们利用分光光度法测出了伊氏锥虫中有TR酶活性，但无GR酶活性；测出了TR酶的Km值和Vm值；发现了治疗锥虫药物安锥赛和盐酸锥双净对TR酶有抑制作用，抑制率分别达28％和31％；比较了七林中国伊氏锥虫和布氏锥虫每毫克蛋白中TR酶活力，其中安徽株活力最强。所以中国伊氏锥虫中存在着TR酶。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 TR酶 家畜 防治

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应用质粒PTK探针鉴定锥虫的初步研究 被引量：3

8

作者 郑韧坚 王云飞 +2 位作者 沈杰 王爱华 周勇志 《中国兽医寄生虫病》 1993年第1期1-4,共4页

用^(32)P标记质粒探针PTK_1、PTK_(1.1)和PTK_(1·2),对12株中国伊氏锥虫的斑点杂交试验显示,3个探针均能与8株具有正常动基体的伊氏锥虫杂交,而不与其余4株异常动基体伊氏锥虫杂交,对正常动基体株的敏感度为10~2虫体。探针PTK_1亦... 用^(32)P标记质粒探针PTK_1、PTK_(1.1)和PTK_(1·2),对12株中国伊氏锥虫的斑点杂交试验显示,3个探针均能与8株具有正常动基体的伊氏锥虫杂交,而不与其余4株异常动基体伊氏锥虫杂交,对正常动基体株的敏感度为10~2虫体。探针PTK_1亦能与马媾疫锥虫杂交,敏感度为10~2个虫体。但PTK_1与布氏锥虫仅发生微弱的杂交反应,敏感度为10~5个虫体。试验表明伊氏锥虫株之间的kDNA微环是同源的,伊氏锥虫与马媾疫锥虫和布氏锥虫的kDNA微环存在着共同序列。 展开更多

关键词 质粒探针 鉴定 伊氏锥虫 马媾疫锥虫 布氏锥虫 斑点杂交法

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锥—46抑制[~3H]次黄嘌呤掺入伊氏锥虫核酸的研究 被引量：3

9

作者 张仓 沈杰 +3 位作者 郑韧坚 方明宝 周伟澄 张秀平 《中国兽医寄生虫病》 1993年第1期10-12,共3页

用液体闪烁计数法对锥—46的抗锥虫作用的机理做了初步研究。发现T-46与Berenil很相似,均可显著抑制[~3H]次黄嘌呤掺入伊氏锥虫,抑制作用与浓度及时间呈正相关。T-46和Berenil对DNA合成的IC_(60)分别为1.33和1.73μg·ml^(-1)。本... 用液体闪烁计数法对锥—46的抗锥虫作用的机理做了初步研究。发现T-46与Berenil很相似,均可显著抑制[~3H]次黄嘌呤掺入伊氏锥虫,抑制作用与浓度及时间呈正相关。T-46和Berenil对DNA合成的IC_(60)分别为1.33和1.73μg·ml^(-1)。本实验还提示T-46抗锥虫作用可能与损伤DNA模板有关。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 锥-46 次黄嘌呤 DNA 作用机理 液体闪烁计数法

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锥虫不同分离株克隆及其等电聚焦分析 被引量：3

10

作者 王云飞 郑韧坚 +1 位作者 周勇志 沈杰 《中国兽医科技》 CSCD 1993年第10期43-44,共2页

将两个伊氏锥虫及一个马媾疫锥虫的不同分离株分别接种用环磷 酰胺处理的小鼠,获得五个克隆,用等电聚焦比较其蛋白质差异。结果表 明,三个分离株之间有明显区别;马媾疫锥虫显著不同于伊氏锥虫;分离株 不同克隆间区别较小,其中广东水牛... 将两个伊氏锥虫及一个马媾疫锥虫的不同分离株分别接种用环磷 酰胺处理的小鼠,获得五个克隆,用等电聚焦比较其蛋白质差异。结果表 明,三个分离株之间有明显区别;马媾疫锥虫显著不同于伊氏锥虫;分离株 不同克隆间区别较小,其中广东水牛株两克隆间带型相同,安徽水牛株两克隆间带型略有区别。证明伊氏锥虫克隆间变异较小,锥虫不同分离株间变异较大,马媾疫锥虫与伊氏锥虫之间变异最大。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 马媾疫锥虫 等电聚焦分析

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伊氏锥虫和布氏锥虫动基体DNA酶切电泳比较 被引量：3

11

作者 郑韧坚 王云飞 +2 位作者 沈杰 周勇志 钟淑梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1995年第7期9-10,共2页

限制性内切酶ＭｂｏＩ、ＤｄｅＩ、ＨｉｎｆＩ和ＴａｑＩ对市氏锥虫ＫＤＮＡ进行酶切后，电泳中均显示出多条ＤＮＡ区带，其总Ｋｂ数约等于２０ｋｂ，内各限制酶对伊氏锥虫ＫＤＮＡ消化后均显示出１至２条区带，总和约１ｋｂ，明显区别... 限制性内切酶ＭｂｏＩ、ＤｄｅＩ、ＨｉｎｆＩ和ＴａｑＩ对市氏锥虫ＫＤＮＡ进行酶切后，电泳中均显示出多条ＤＮＡ区带，其总Ｋｂ数约等于２０ｋｂ，内各限制酶对伊氏锥虫ＫＤＮＡ消化后均显示出１至２条区带，总和约１ｋｂ，明显区别于布氏锥虫。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 布氏锥虫 限制性内切酶 动基体

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伊氏锥虫动基体DNA微环的克隆 被引量：2

12

作者 郑韧坚 沈杰 +2 位作者 王云飞 王爱华 周勇志 《中国兽医科技》 CSCD 1992年第9期5-7,共3页

把伊氏锥虫云南株动基体DNA微环重组于puc19质粒载体,转化入大肠杆菌JM103菌株,获得KDNA全微环克隆。用α-^(32)P-dATP经缺口翻译标记的重组质粒(PTK)能与伊氏锥虫及其KDNA杂交,而不与核DNA杂交。该质粒探针具有高度的敏感性,能检测出1... 把伊氏锥虫云南株动基体DNA微环重组于puc19质粒载体,转化入大肠杆菌JM103菌株,获得KDNA全微环克隆。用α-^(32)P-dATP经缺口翻译标记的重组质粒(PTK)能与伊氏锥虫及其KDNA杂交,而不与核DNA杂交。该质粒探针具有高度的敏感性,能检测出10pg的KDNA和100个锥虫体,是快速鉴定伊氏锥虫的理想工具。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 动基体DNA 重组质粒

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抗锥虫新药—锥-46亚急性毒性试验 被引量：2

13

作者 沈杰 郑韧坚 +4 位作者 王爱华 周勇志 邱巧平 周伟澄 张秀平 《中国兽医寄生虫病》 CAS 1993年第2期25-29,共5页

锥-46以每次4mg/kg剂量对大鼠肌肉注射,连续给药14天,总量达56mg/kg,未出现明显的临床、组织学和生化指标的变化;以每天8mg/kg剂量肌肉注射,连续14天,总量达112mg/kg,试验鼠仍无死亡。两种剂量各自总和已分别超过锥-46的LD_(50)和LD_(10... 锥-46以每次4mg/kg剂量对大鼠肌肉注射,连续给药14天,总量达56mg/kg,未出现明显的临床、组织学和生化指标的变化;以每天8mg/kg剂量肌肉注射,连续14天,总量达112mg/kg,试验鼠仍无死亡。两种剂量各自总和已分别超过锥-46的LD_(50)和LD_(100)(大鼠LD_(50)为44.6±2.8mg/kg,LD_(100)为70mg/kg),提示锥-46无明显蓄积毒作用。高剂量(每天10mg/kg)肌注给药连续14天,才可使大鼠的肝、脾、肾发生严重病变,出现血红蛋白和红细胞减少以及摄食量、增重率下降等征候,提示锥-46对动物作用的靶器官、靶组织是肝、脾、肾及红细胞。 展开更多

关键词 锥虫 锥-46 亚急性毒性试验 驱虫药 蓄积毒性

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抗锥虫新药一锥—46药理毒理的初步研究 被引量：2

14

作者 沈杰 王爱华 +1 位作者 邱巧平 郑韧坚 《中国兽医寄生虫病》 1993年第3期4-5,共2页

抗锥虫新药-锥-46,小鼠腹腔注射LD_(50)为9.8±0.7 mg/kg,ED_(50)为0.28±0.03mg/kg,治疗指数为35。大鼠肌肉注射LD_(50)为40±5mg/kg,大鼠肌肉注射适宜剂量为2mg/kg。对大、小鼠治疗剂量均无临床毒副反应出现。初步表明该... 抗锥虫新药-锥-46,小鼠腹腔注射LD_(50)为9.8±0.7 mg/kg,ED_(50)为0.28±0.03mg/kg,治疗指数为35。大鼠肌肉注射LD_(50)为40±5mg/kg,大鼠肌肉注射适宜剂量为2mg/kg。对大、小鼠治疗剂量均无临床毒副反应出现。初步表明该药对伊氏锥虫病鼠疗效好,毒性小。 展开更多

关键词 抗锥虫药 锥-46 药理学 毒理 剂量 治疗指数 伊氏锥虫

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伊氏锥虫动基体DNA微环的研究 被引量：2

15

作者 郑韧坚 王云飞 +2 位作者 沈杰 王爱华 周勇志 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1995年第1期88-95,共8页

采用限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳及分子杂交技术对８株中国伊氏锥虫动基体ＤＮＡ（ｋＤＮＡ）微环进行了比较研究。结果显示，我国伊氏锥虫株之间的ｋＤＮＡ微环序列具有较高的同源性，仅限制酶 ＡｌｕＩ，ＨｉｎｆＩ及 ＭｂｏＩ... 采用限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳及分子杂交技术对８株中国伊氏锥虫动基体ＤＮＡ（ｋＤＮＡ）微环进行了比较研究。结果显示，我国伊氏锥虫株之间的ｋＤＮＡ微环序列具有较高的同源性，仅限制酶 ＡｌｕＩ，ＨｉｎｆＩ及 ＭｂｏＩ的酶解结果显示少数虫株的 ｋＤＮＡ微环存在异源序列。这种异源性可以作为伊氏锥虫种内分类的遗传学标志。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 动基体DNA 限制性内切酶

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伊氏锥虫同工酶和蛋白质鉴定研究 被引量：2

16

作者 王云飞 沈杰 +4 位作者 郑韧坚 王爱华 周勇志 邱巧平 钟淑梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第6期30-32,F003,共4页

本文用簿层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦同工酶及蛋白质电泳分析技术比较了5株从我国不同地区,不同宿主分离的伊氏锥虫及两株国外伊氏锥虫的遗传多样性。5株中国伊氏锥虫同属于一个酶株群Z1,根据蛋白质等电聚焦分析可将五株中国伊氏锥虫进一... 本文用簿层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦同工酶及蛋白质电泳分析技术比较了5株从我国不同地区,不同宿主分离的伊氏锥虫及两株国外伊氏锥虫的遗传多样性。5株中国伊氏锥虫同属于一个酶株群Z1,根据蛋白质等电聚焦分析可将五株中国伊氏锥虫进一步分为三个多肽群(株)。我国伊氏锥虫同世界各地伊氏锥虫同工酶主群相似,与伊氏锥虫同工酶次群有区别。本研究结果表明,我国伊氏锥虫变异程度较低,与世界其它各地典型伊氏锥虫同源。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 同功酶 酶株群 多太群

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简易的Dot-ELISA法诊断耕牛和家兔日本血吸虫病 被引量：2

17

作者 林矫矫 吴文涓 +3 位作者 刘训进 叶萍 郑韧坚 王云方 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第2期66-68,共3页

本实验用硝酸纤维膜为载体,水溶性日本血吸虫虫卵抗原为抗原,先后检测了18份实验感染黄、水牛血清、66份自然感染牛血清、84份阴性牛血清、40份实验感染兔血清和18份阴性兔血清,结果表明实验感染牛血清和兔血清都呈阳性反应,检出率达10... 本实验用硝酸纤维膜为载体,水溶性日本血吸虫虫卵抗原为抗原,先后检测了18份实验感染黄、水牛血清、66份自然感染牛血清、84份阴性牛血清、40份实验感染兔血清和18份阴性兔血清,结果表明实验感染牛血清和兔血清都呈阳性反应,检出率达100％。自然感染牛血清的阳性检出率为93.9％(62/66),阴性牛血清的检出符合率为95.24％(80/84)。阴性兔血清都呈阴性反应。检测了4份肝片吸虫阳性兔血清和31份锥虫阳性牛血清,都不出现交叉反应。 展开更多

关键词 DOT-ELISA 耕牛 日本血吸虫病

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抗寄生虫药物的作用机制 被引量：1

18

作者 钟淑梅 郑韧坚 沈杰 《中国兽医寄生虫病》 CAS 1993年第4期56-59,共4页

从1891年Ehrlich应用染料甲烯蓝供抗疟疾治疗开始，迄今出现了各种各样用于化学冶疗的抗寄生虫药物，但药物的抗寄生虫作用机理还不完全清楚。据目前所知，药物可作用于寄生虫体膜和代谢过程中的酶类，以及药物在作用过程中生成对寄生... 从1891年Ehrlich应用染料甲烯蓝供抗疟疾治疗开始，迄今出现了各种各样用于化学冶疗的抗寄生虫药物，但药物的抗寄生虫作用机理还不完全清楚。据目前所知，药物可作用于寄生虫体膜和代谢过程中的酶类，以及药物在作用过程中生成对寄生虫有害的自由基，可干扰虫体的生理过程。 展开更多

关键词 抗寄生虫药物 作用机制 膜功能 能量代谢 蛋白质代谢 核酸代谢 自由基

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锥－46对伊氏锥虫酶系统的影响 被引量：1

19

作者 钟淑梅 沈杰 +4 位作者 郑韧坚 王云飞 周勇志 周伟澄 张秀平 《中国兽医寄生虫病》 1994年第1期55-57,共3页

锥－４６对伊氏锥虫酶系统的影响钟淑梅，沈杰，郑韧坚，王云飞，周勇志（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所）周伟澄，张秀平（国家医药管理局上海医药工业研究院）锥一４６（Ｔ－４６）是我们研制成的一种抗锥虫新药，经药理、毒... 锥－４６对伊氏锥虫酶系统的影响钟淑梅，沈杰，郑韧坚，王云飞，周勇志（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所）周伟澄，张秀平（国家医药管理局上海医药工业研究院）锥一４６（Ｔ－４６）是我们研制成的一种抗锥虫新药，经药理、毒理、药效试验表明，其抗伊氏锥虫效果... 展开更多

关键词 锥-46 伊氏锥虫 代谢酶系统 抗锥虫新药 作用机制

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上海市实验小鼠寄生蠕虫调查 被引量：1

20

作者 沈杰 郑韧坚 +7 位作者 邱巧平 王爱华 童亚男 徐梅倩 常正山 任燕芳 王君芗 张永军 《实验动物与比较医学》 CAS 1989年第4期233-234,共2页

实验小鼠受寄生虫侵袭时,其生理、生化内环境可发生多种多样的变化,往往会影响多种实验研究的进程和结果。例如,找们在作旋毛虫人工感染研究时,发现寄生短膜壳练虫的小鼠,对旋毛虫的感染率比无虫鼠低的现象。为了作好实验小鼠寄生虫监... 实验小鼠受寄生虫侵袭时,其生理、生化内环境可发生多种多样的变化,往往会影响多种实验研究的进程和结果。例如,找们在作旋毛虫人工感染研究时,发现寄生短膜壳练虫的小鼠,对旋毛虫的感染率比无虫鼠低的现象。为了作好实验小鼠寄生虫监测及培养无虫小鼠,必须首先了解小鼠寄生虫状况。为此,我们对上海市5个主要实验动物中心或动物房小鼠作了寄生虫调查。 展开更多

关键词 实验小鼠 实验动物 短膜壳绦虫 人工感染 内环境 寄生蠕虫 膜壳 雌鼠 台氏液 感染强度

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