产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌（Athelia roffsii）菌株CBS191．62，发酵培养5日，发酵液离心去菌体，上清经硫酸铵沉淀，琼脂糖凝胶（DEAE Sepharose Fast Flow）层析、羟基磷灰石（Hydroxylapatite）层析和冷冻干燥等步骤，β-甘露聚...产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌（Athelia roffsii）菌株CBS191．62，发酵培养5日，发酵液离心去菌体，上清经硫酸铵沉淀，琼脂糖凝胶（DEAE Sepharose Fast Flow）层析、羟基磷灰石（Hydroxylapatite）层析和冷冻干燥等步骤，β-甘露聚糖酶的比活提高了15．1倍，获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAGE测定β-甘露聚糖酶分子量为42kDa，证明该酶为单聚体；用等电聚焦电泳测得其等电点为2．95；该酶的最适反应温度为30℃，在不超过50℃时酶活较稳定；酶反应的最适pH为5．0，pH稳定范围为5．5～7．0。重金属离子Zn^2＋、Fe^3＋、Co^2＋、Hg^2＋能强烈抑制该酶活性，而Mg^2＋、Al^3＋对该酶有部分的抑制作用，低浓度的Li＋、Mn^2＋、Ca^2＋对该酶基本没有影响。展开更多
以筛选与鉴定尉犁县黑湖产淀粉酶细菌,并对筛选出的细菌进行产酶条件优化为研究目的,从43株细菌中筛选出淀粉酶高产菌株HM-22,并对其进行了菌株形态学鉴定、16S r DNA分子鉴定以及产酶条件优化。从尉犁县黑湖采样的30个水、土和泥样样...以筛选与鉴定尉犁县黑湖产淀粉酶细菌,并对筛选出的细菌进行产酶条件优化为研究目的,从43株细菌中筛选出淀粉酶高产菌株HM-22,并对其进行了菌株形态学鉴定、16S r DNA分子鉴定以及产酶条件优化。从尉犁县黑湖采样的30个水、土和泥样样品中分离筛选43株细菌,从中筛选出14株产淀粉酶的菌株,采用Yoo改良法对产透明圈较大的菌株进行酶活力测定,从中筛选出了一株产酶活性较高的菌株HM-22。经革兰氏染色、菌落形态观察、生理生化检测和16S r DNA序列比对鉴定该菌与Bacillus tequilensis的相似性为99.8%,属于芽孢杆菌属。对菌株HM-22产酶条件进行初步优化确定其产酶的最佳条件是:该菌产淀粉酶最适温度为40℃,最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为牛肉膏,最适反应pH为6.0,最适产酶培养时间为24 h。优化后菌株HM-22的酶活力从最初的的酶活力122.45 U/m L达到147.53 U/m L,酶活力提高了17%。该研究为从新疆盐湖细菌中筛选淀粉酶活力较高的菌种资源及应用提供了理论依据和参考。展开更多
【目的】从新疆尉犁县黑湖中筛选分离获得嗜盐嗜碱微生物,并对筛选获得的微生物进行种属鉴定。【方法】采用传统分离鉴定技术,进行形态和生理生化特性研究和基于16S r RNA基因的序列分析。【结果】从样品中分离获得可培养嗜盐嗜碱菌25株...【目的】从新疆尉犁县黑湖中筛选分离获得嗜盐嗜碱微生物,并对筛选获得的微生物进行种属鉴定。【方法】采用传统分离鉴定技术,进行形态和生理生化特性研究和基于16S r RNA基因的序列分析。【结果】从样品中分离获得可培养嗜盐嗜碱菌25株,对其进行鉴定。根据生理生化特征、16S r RNA基因序列测定和系统发育分析表明,25株菌分布在古菌Halorubrum、Haloarcula、Natrialba、Halohasta和Halopiger等5个属。其中优势菌群为Halorubrum,次优势菌群为Natrialba。其中DH-66(KU663028)属于Halopiger属,16S r RNA基因序列同源性与该属的模式菌株Halopiger aswanensis 56T同源性最高,为95.75%,预示为潜在的新种(新种鉴定将另行报道)。25株嗜盐嗜碱菌生长条件实验表明,这些菌适应Na Cl的浓度范围为15%-30%、最适浓度为20%-25%,生长的p H范围为7.0-13.0、最适p H为9.0-10.0。各种水解酶类的分析表明,在分离的25株菌中产淀粉酶的菌有5株占20%、产蛋白酶的菌有4株占16%、产酯酶可水解吐温20的菌有15株占60%、可水解吐温40的有7株占28%、可水解吐温80的有4株占16%、产过氧化氢酶的菌有14株占56%。9株菌同时能产4种酶,2株菌同时能产3种酶。表明了嗜盐嗜碱菌产酶的多样性。19株菌硝酸盐还原为阳性。【结论】揭示了新疆尉犁县黑湖嗜盐嗜碱菌生理生化特性的多样性和系统发育多样性,而且蕴藏着较丰富的新的微生物类群,亟待系统研究和进一步开发利用。展开更多
文摘产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌（Athelia roffsii）菌株CBS191．62，发酵培养5日，发酵液离心去菌体，上清经硫酸铵沉淀，琼脂糖凝胶（DEAE Sepharose Fast Flow）层析、羟基磷灰石（Hydroxylapatite）层析和冷冻干燥等步骤，β-甘露聚糖酶的比活提高了15．1倍，获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAGE测定β-甘露聚糖酶分子量为42kDa，证明该酶为单聚体；用等电聚焦电泳测得其等电点为2．95；该酶的最适反应温度为30℃，在不超过50℃时酶活较稳定；酶反应的最适pH为5．0，pH稳定范围为5．5～7．0。重金属离子Zn^2＋、Fe^3＋、Co^2＋、Hg^2＋能强烈抑制该酶活性，而Mg^2＋、Al^3＋对该酶有部分的抑制作用，低浓度的Li＋、Mn^2＋、Ca^2＋对该酶基本没有影响。
文摘【目的】从新疆尉犁县黑湖中筛选分离获得嗜盐嗜碱微生物,并对筛选获得的微生物进行种属鉴定。【方法】采用传统分离鉴定技术,进行形态和生理生化特性研究和基于16S r RNA基因的序列分析。【结果】从样品中分离获得可培养嗜盐嗜碱菌25株,对其进行鉴定。根据生理生化特征、16S r RNA基因序列测定和系统发育分析表明,25株菌分布在古菌Halorubrum、Haloarcula、Natrialba、Halohasta和Halopiger等5个属。其中优势菌群为Halorubrum,次优势菌群为Natrialba。其中DH-66(KU663028)属于Halopiger属,16S r RNA基因序列同源性与该属的模式菌株Halopiger aswanensis 56T同源性最高,为95.75%,预示为潜在的新种(新种鉴定将另行报道)。25株嗜盐嗜碱菌生长条件实验表明,这些菌适应Na Cl的浓度范围为15%-30%、最适浓度为20%-25%,生长的p H范围为7.0-13.0、最适p H为9.0-10.0。各种水解酶类的分析表明,在分离的25株菌中产淀粉酶的菌有5株占20%、产蛋白酶的菌有4株占16%、产酯酶可水解吐温20的菌有15株占60%、可水解吐温40的有7株占28%、可水解吐温80的有4株占16%、产过氧化氢酶的菌有14株占56%。9株菌同时能产4种酶,2株菌同时能产3种酶。表明了嗜盐嗜碱菌产酶的多样性。19株菌硝酸盐还原为阳性。【结论】揭示了新疆尉犁县黑湖嗜盐嗜碱菌生理生化特性的多样性和系统发育多样性,而且蕴藏着较丰富的新的微生物类群,亟待系统研究和进一步开发利用。
