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植物样品包埋脱水法超低温保存的研究进展 被引量:30
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作者 王君晖 黄纯农 《植物学通报》 CSCD 1999年第5期582-586,共5页
包埋脱水法是植物材料超低温保存的新技术, 从1990 年至今, 已有30 多篇文献报道。本文介绍了包埋脱水法的研究历史。
关键词 植物种质 超低温保存 包埋脱水法
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中国江、浙地区栽培大麦遗传资源的RAPD研究 被引量:26
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作者 施永泰 +3 位作者 韩凝 潘建伟 童微星 朱睦元 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期258-265,共8页
采用随机扩增多态性 (RAPD)标记 ,探讨了我国部分栽培大麦品种的遗传背景。结果表明 :2 0 0个随机引物中 ,有 30个引物扩增出的产物具有多态性 ,30个引物共扩增出 2 2 3条谱带 ,其中 130条谱带具有多态性 ,每个引物可扩增出2~ 9条多态... 采用随机扩增多态性 (RAPD)标记 ,探讨了我国部分栽培大麦品种的遗传背景。结果表明 :2 0 0个随机引物中 ,有 30个引物扩增出的产物具有多态性 ,30个引物共扩增出 2 2 3条谱带 ,其中 130条谱带具有多态性 ,每个引物可扩增出2~ 9条多态性谱带 ,平均 4 .19条。 6 7个大麦品种平均表型多样性值 0 .36 9,裸麦的表型多样性高于皮麦的表型多样性 ,二棱皮麦表型多样性最低 ,六棱裸麦表型多样性最高。聚类分析表明 ,在遗传距离D值 0 .6水平上 6 7个大麦品种可聚成四簇 ,其中二棱皮麦单独聚成一簇 ,六棱裸麦单独聚成一亚簇 ,六棱皮麦、四棱皮麦、四棱裸麦混杂分布于其余各簇中 ,发现大麦品种根据其主要品种特性 ,表现出一定的聚集趋势 ,而抗逆性 (抗黄花叶病和耐湿性 )却表现出一定的分散性。 展开更多
关键词 江苏 浙江 大麦 栽培品种种 遗传多样性 RAPD
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竹子悬浮细胞系的建立和组织培养试管苗移栽观察 被引量:22
3
作者 吴益民 +1 位作者 王君晖 黄纯农 《竹子研究汇刊》 北大核心 2000年第1期52-56,共5页
本实验用 (1) 2 ,4 - D,(2 ) NAA/ BA和 (3) 2 ,4 - D/ KT3种生长调节剂组合对孝顺竹顶芽和节侧芽外植体进行愈伤组织的诱导。 2 ,4 - D诱导顶芽和节侧芽外植体几乎全部生出水质、粗糙的淡黄色愈伤组织 ;2 ,4 - D/ KT诱导节侧芽外植体... 本实验用 (1) 2 ,4 - D,(2 ) NAA/ BA和 (3) 2 ,4 - D/ KT3种生长调节剂组合对孝顺竹顶芽和节侧芽外植体进行愈伤组织的诱导。 2 ,4 - D诱导顶芽和节侧芽外植体几乎全部生出水质、粗糙的淡黄色愈伤组织 ;2 ,4 - D/ KT诱导节侧芽外植体半数生出颗粒状、光滑的白或淡黄色愈伤组织 ,不能诱导顶芽外植形成愈伤组织。由 2 ,4 - D诱导的孝顺竹愈伤组织在摇床上暗培养 ,建立了悬浮细胞系 ,可为竹子基因转化提供受体材料。对白绿竹和乌脚绿竹组织培养试管苗进行了移栽和生长观察 。 展开更多
关键词 竹子 悬浮细胞系 组织培养苗 育种
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miRNA^*生物合成及其功能研究的新发现 被引量:23
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作者 马圣运 白玉 +4 位作者 韩凝 王君晖 翁晓燕 朱睦元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期383-388,共6页
miRNA*是在miRNA加工成熟过程中与其互补的大约22个核苷酸的RNA序列。传统观点认为miRNA*是miRNA生物合成中形成的没有功能的副产品。然而最近的研究发现miRNA*s与miRNA一样,主要介导转录后的基因调控网络;但不同的是,miRNA与Argonaute... miRNA*是在miRNA加工成熟过程中与其互补的大约22个核苷酸的RNA序列。传统观点认为miRNA*是miRNA生物合成中形成的没有功能的副产品。然而最近的研究发现miRNA*s与miRNA一样,主要介导转录后的基因调控网络;但不同的是,miRNA与Argonaute1蛋白(AGO1)结合形成RNA诱导的沉默复合体(RISC),而miRNA*却在AGO2的帮助下形成RISC复合体进行RNA干涉,这点与siRNA的作用方式类似。文章从miRNA*的生物合成、生物学特性和功能等方面综述了miRNA*最新研究进展。 展开更多
关键词 miRNA* MIRNA RNA干涉 AGO miR/miR*复合体
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铁皮石斛类原球茎空气干燥法超低温保存中的脱水蛋白分析 被引量:13
5
作者 林伟强 +1 位作者 王君晖 朱睦元 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期64-68,共5页
用空气干燥法将铁皮石斛类原球茎脱水至不同含水量 ,进行超低温保存和热稳定蛋白的SDS PAGE分析 ,并进行脱水蛋白的Western blot检测。结果表明 :在本试验条件下 ,含水量以g/gDM表示时 ,铁皮石斛类原球茎脱水时间 (x)对含水量 (y)的回... 用空气干燥法将铁皮石斛类原球茎脱水至不同含水量 ,进行超低温保存和热稳定蛋白的SDS PAGE分析 ,并进行脱水蛋白的Western blot检测。结果表明 :在本试验条件下 ,含水量以g/gDM表示时 ,铁皮石斛类原球茎脱水时间 (x)对含水量 (y)的回归方程式为y =- 0 12 0 8x +9 96 36。含水量下降为 0 1~ 0 5g/gDM时 ,冻后存活率达到最大值。当含水量达 1 0g/gDM时 ,热稳定蛋白的含量明显增加 ,经免疫检测其中分子量分别为 2 8 7和 34 3kD的两个热稳定蛋白为脱水蛋白。认为含水量是铁皮石斛超低温保存成功的关键因素 ,也是引起脱水蛋白大量积累的重要条件。 展开更多
关键词 铁皮石斛 类原球茎 空气干燥法 超低温保存 脱水蛋白 含水量 中药材 种质资源保存
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草莓愈伤组织再生能力与活性氧代谢水平相关性研究 被引量:11
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作者 田敏 韩凝 +1 位作者 朱睦元 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期372-374,共3页
草莓外植体在不同组合培养基上诱导产生 3类愈伤组织 ,Ⅰ型愈伤组织的再生能力较低 ,Ⅱ和Ⅲ型愈伤组织具有较高的再生能力。Ⅱ和Ⅲ型初生愈伤组织H2 O2 的含量分别是Ⅰ型的 5倍和 9倍 ,O·2的释放速率是其 3倍和 4倍 ,并且具有较高... 草莓外植体在不同组合培养基上诱导产生 3类愈伤组织 ,Ⅰ型愈伤组织的再生能力较低 ,Ⅱ和Ⅲ型愈伤组织具有较高的再生能力。Ⅱ和Ⅲ型初生愈伤组织H2 O2 的含量分别是Ⅰ型的 5倍和 9倍 ,O·2的释放速率是其 3倍和 4倍 ,并且具有较高的抗氧化酶活性。在继代培养过程中 ,愈伤组织的形态发生能力下降 ,Ⅰ型愈伤组织逐渐失去再生能力 ,同时所有类型愈伤组织中H2 O2 含量缓慢上升 ,O·2 释放速率较快增长 。 展开更多
关键词 草莓 活性氧 抗氧化酶 再生能力 愈伤组织
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植物转基因沉默研究进展 被引量:11
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作者 程海鹏 朱睦元 +1 位作者 金伟 《生物工程进展》 CSCD 2001年第6期47-49,42,共4页
随着转基因技术在植物中的广泛应用 ,转基因沉默受到越来越多的重视。转基因沉默可发生在转录和转录后两种水平 ,其基本特征就是依赖于同源的重复序列。转基因的重复拷贝间 ,转基因与同源的内源基因间及RNA病毒与同源转基因间都会发生... 随着转基因技术在植物中的广泛应用 ,转基因沉默受到越来越多的重视。转基因沉默可发生在转录和转录后两种水平 ,其基本特征就是依赖于同源的重复序列。转基因的重复拷贝间 ,转基因与同源的内源基因间及RNA病毒与同源转基因间都会发生基因沉默。可能有不同的机制导致转基因沉默 。 展开更多
关键词 植物 转基因沉默 RMD VIGS
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气孔发育及其调控因素的研究进展 被引量:17
8
作者 陆雯芸 房克 +1 位作者 朱睦元 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期782-788,共7页
气孔作为植物与外界气体交换的重要通道,直接影响植物的蒸腾作用和光合作用。近年来,随着气孔发育模式及其分子机制的研究日益明晰,更多调控因素的作用机理逐渐成为新的研究热点。最近研究发现,植物激素生长素是参与调控气孔发育并影响... 气孔作为植物与外界气体交换的重要通道,直接影响植物的蒸腾作用和光合作用。近年来,随着气孔发育模式及其分子机制的研究日益明晰,更多调控因素的作用机理逐渐成为新的研究热点。最近研究发现,植物激素生长素是参与调控气孔发育并影响气孔分化与分布的重要调控因子。本文主要总结了植物气孔发育机制的最新研究进展,以及激素和环境因子对气孔发育的影响,并提出了今后有待阐明的问题和研究方向。 展开更多
关键词 气孔发育 激素 CO_2
原文传递
用改良TAIL-PCR技术分析转基因烟草cbf1基因插入区的侧翼序列 被引量:8
9
作者 宋达峰 韩凝 +1 位作者 朱睦元 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1377-1379,共3页
关键词 TAIL-PCR 侧翼序列 转基因烟草 基因插入 技术分析 非特异性 改良 简并引物 随机引物
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基于CRISPR-Cas系统的基因组定点修饰新技术 被引量:13
10
作者 王梦瑶 杨亦农 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期426-433,共8页
CRISPR(clustered regulatory interspersed short palindromic repeat)序列源于原核生物的一种获得性免疫系统,协同Cas(CRISPR-associated)蛋白家族参与抵抗噬菌体或其它病毒的二次感染,广泛存在于细菌(60%)和古菌(90%)中.病菌和宿主... CRISPR(clustered regulatory interspersed short palindromic repeat)序列源于原核生物的一种获得性免疫系统,协同Cas(CRISPR-associated)蛋白家族参与抵抗噬菌体或其它病毒的二次感染,广泛存在于细菌(60%)和古菌(90%)中.病菌和宿主的共同进化导致了CRISPR-Cas系统具有多样性,可分为3大类(Ⅰ-Ⅲ),又分为10亚类.在Ⅱ型CRISPR-Cas系统基础上建立了RNA介导的CRISPR-Cas系统来修饰(删除、添加、激活、抑制)靶细胞中特定的基因序列,现已在人类细胞、小鼠、斑马鱼、酵母、细菌、果蝇、线虫、拟南芥中得以应用.本文主要介绍了Ⅱ型CRISPR-Cas系统的结构特点、作用机理及作为新型基因组定点修饰技术的研究进展,分析该技术优势,并展望CRISPRCas系统的应用前景. 展开更多
关键词 CRISPR-Cas系统 获得性免疫 基因组编辑
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抗冻蛋白应用于水稻悬浮细胞超低温保存的研究 被引量:8
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作者 王君晖 +1 位作者 黄纯农 葛霁光 《实验生物学报》 CSCD 1999年第3期271-276,共6页
本文将鱼类抗冻蛋白应用于植物细胞的超低温保存。结果表明,在水稻悬浮细胞的两步法保存中,浓度为0.01mg/ml的抗冻蛋白具有特别的负作用,相对高浓度的抗冻蛋白则能减小细胞存活率的波动性。在玻璃化法保存中,浓度为0.2mg/ml的抗冻蛋白... 本文将鱼类抗冻蛋白应用于植物细胞的超低温保存。结果表明,在水稻悬浮细胞的两步法保存中,浓度为0.01mg/ml的抗冻蛋白具有特别的负作用,相对高浓度的抗冻蛋白则能减小细胞存活率的波动性。在玻璃化法保存中,浓度为0.2mg/ml的抗冻蛋白能改善保存效果,更高浓度的抗冻蛋白(>5mg/ml)反而会降低保存效果。环境冰晶量、抗冻蛋白浓度、低温保护剂浓度和细胞膜组成等是影响抗冻蛋白使用效果的几大因素。作者在机理分析中认为,一方面,抗冻蛋白能和冰晶作用,抑制重冰晶,防止去玻璃化;另一方面,抗冻蛋白也能和细胞膜作用,诱发膜表面冰晶形成。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 超低温保存 水稻 悬浮细胞
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不同基因型大麦品种大麦油及其母育酚含量的变异规律 被引量:12
12
作者 张玉 巴桑玉珍 +4 位作者 寿建昕 韩凝 强小林 朱睦元 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期721-724,共4页
为了探讨不同基因型大麦品种大麦油及其母育酚含量的变异规律,采用超临界萃取法及HPLC法提取并测定了30个大麦品种的大麦油及其母育酚含量和成分。结果表明,大麦油含量存在显著的基因型和环境效应(P<0.05),裸大麦的大麦油含量(平均为... 为了探讨不同基因型大麦品种大麦油及其母育酚含量的变异规律,采用超临界萃取法及HPLC法提取并测定了30个大麦品种的大麦油及其母育酚含量和成分。结果表明,大麦油含量存在显著的基因型和环境效应(P<0.05),裸大麦的大麦油含量(平均为4.16%)高于皮大麦(平均为2.96%),蜡质裸麦品种(Sumire mochi)含量最高(6.15%)。与去皮籽粒相比,全麦的大麦油含量较高;与麦芽相比,制啤后的大麦原料仍有较高的母育酚含量。大麦油的母育酚组成成分主要为α-生育酚(占总生育酚的65.4%)和α-生育三烯酚(占总生育三烯酚的70.7%)。试验表明,大麦油及其母育酚含量既受基因型的控制,又受生长环境条件的影响;大麦种皮部分可能是大麦油的主要储存组织之一,制啤后的大麦原料有可能作为母育酚提取的资源加以利用,从而提高大麦的附加值。 展开更多
关键词 大麦 大麦油 母育酚 生育酚 生育三烯酚 遗传变异
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大麦β-葡聚糖的提取及功能研究进展 被引量:12
13
作者 那成龙 陈建澍 +7 位作者 张玉 曾章慧 蒋博文 张仲博 王明强 韩凝 朱睦元 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期579-584,共6页
大麦是世界上第四大禾谷类作物,其籽粒中的β-葡聚糖是重要的功效成分之一。本文综述了大麦籽粒β-葡聚糖的特性、含量变化和结构特征、提取方法和工艺,以及在大麦饲料、啤酒麦芽、饮料食品、保健医药中的功能研究进展。
关键词 大麦β-葡聚糖 理化性质 提取方法 功能作用
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蛋白质相互作用实验技术的最新进展 被引量:7
14
作者 王明强 金霞 +3 位作者 张玉 韩凝 朱睦元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1274-1282,共9页
蛋白质相互作用的研究,是揭示生物体正常生长发育及其应对各种生物或(和)非生物胁迫的分子机制及其调控网络的重要途径。文章综述了近年来发展起来的研究蛋白质相互作用的常用实验性方法,如酵母双杂交系统、串联亲和纯化、免疫共沉淀、G... 蛋白质相互作用的研究,是揭示生物体正常生长发育及其应对各种生物或(和)非生物胁迫的分子机制及其调控网络的重要途径。文章综述了近年来发展起来的研究蛋白质相互作用的常用实验性方法,如酵母双杂交系统、串联亲和纯化、免疫共沉淀、GST Pull-down、双分子荧光互补、荧光共振能量转移、表面等离子共振分析,介绍了其原理、发展进程,并分析了其优缺点。 展开更多
关键词 蛋白质相互作用 酵母双杂交系统 串联亲和纯化 免疫共沉淀 GST Pull—down 双分子荧光互补 荧光共振能量转移 表面等离子共振分析
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抗冻蛋白在超低温保存中作用机制的新模型 被引量:6
15
作者 钱卓蕾 王君晖 +1 位作者 韩凝 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期224-226,共3页
在超低温保存(cryopreservation,-80℃--196℃)中,抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFPs)对细胞存活率和热力学特性的影响十分复杂[1].在一些实验条件下,抗冻蛋白表现出保护活性;在另一些实验条件下,它却表现出毒害性.换句话说,它既能阻... 在超低温保存(cryopreservation,-80℃--196℃)中,抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFPs)对细胞存活率和热力学特性的影响十分复杂[1].在一些实验条件下,抗冻蛋白表现出保护活性;在另一些实验条件下,它却表现出毒害性.换句话说,它既能阻遏冰晶生长,又能促使成冰核效应(ice nucle-ation effect)发生. 展开更多
关键词 抗冻蛋白 超低温保存 作用机制 模型
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植物自噬的调控因子和受体蛋白研究进展 被引量:6
16
作者 曾笑威 刘翠翠 +2 位作者 韩凝 朱睦元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期644-650,共7页
自噬是真核生物细胞内一种进化保守的分解代谢过程,能帮助有机体抵抗各种环境胁迫。通常情况下,自噬的发生过程主要涉及自噬相关同源蛋白的参与,同时需要一系列胞质中蛋白和代谢小分子调控其发生水平。除此之外,某些受体蛋白还可以帮助... 自噬是真核生物细胞内一种进化保守的分解代谢过程,能帮助有机体抵抗各种环境胁迫。通常情况下,自噬的发生过程主要涉及自噬相关同源蛋白的参与,同时需要一系列胞质中蛋白和代谢小分子调控其发生水平。除此之外,某些受体蛋白还可以帮助自噬相关蛋白识别特定的降解底物包括某些受损的细胞器和蛋白质,以此来介导选择性自噬的发生。本文以模式植物拟南芥为代表,综述了近年来植物自噬的调控因子活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、TOR(Target of rapamycin)和受体蛋白NBR1(Neighbor of BRCA1 gene protein)、RPN10(Regulatory particle non-ATPase 10)等的研究进展以及它们的相关作用机制。 展开更多
关键词 植物自噬 活性氧 TOR NBR1 RPN10
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miR126功能的多效性与先天性免疫 被引量:4
17
作者 白玉 陆雯芸 +2 位作者 韩凝 朱睦元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期631-636,共6页
MicroRNAs(miRNAs)是一种重要的转录后水平进行调控的非编码小分子RNA。目前已发现许多miRNAs参与细胞增殖、分化、发育及凋亡等复杂的生物进程,其中miR126是一种来源于Egfl7第7个内含子的保守型内含子miRNA,主要在哺乳动物的内皮细胞(E... MicroRNAs(miRNAs)是一种重要的转录后水平进行调控的非编码小分子RNA。目前已发现许多miRNAs参与细胞增殖、分化、发育及凋亡等复杂的生物进程,其中miR126是一种来源于Egfl7第7个内含子的保守型内含子miRNA,主要在哺乳动物的内皮细胞(Endothelial cells,ECs)及浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cells,pDCs)内表达,参与血管的新生及癌细胞的增殖与迁移。最新的研究表明,miR126是迄今唯一参与先天性免疫平稳期病毒应答反应的miRNA,预示着miR126有可能成为治疗癌症及免疫缺陷病的靶标分子。文章综述了miR126在血管新生和癌症中的功能,并着重介绍了miR126与先天性免疫的关系。 展开更多
关键词 miR126 血管新生 癌症 先天性免疫
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小分子RNA在植物激素信号通路中的调控功能 被引量:4
18
作者 许佳 侯宁 +2 位作者 韩凝 朱睦元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期418-426,共9页
植物激素是调控植物生长发育的信号分子。近年来的研究发现,小分子RNA作为基因表达调控网络的组分,参与植物激素信号途径,在植物生长发育和胁迫反应方面发挥重要作用。本文综述了mi RNA和次级si RNA(Short interfering RNAs)介导的基因... 植物激素是调控植物生长发育的信号分子。近年来的研究发现,小分子RNA作为基因表达调控网络的组分,参与植物激素信号途径,在植物生长发育和胁迫反应方面发挥重要作用。本文综述了mi RNA和次级si RNA(Short interfering RNAs)介导的基因调控与植物激素信号通路相互作用的研究进展,主要包括生长素、赤霉素、油菜素内酯和脱落酸途径涉及的mi RNA及其功能,并对不同发育过程中mi RNA参与的不同激素信号通路的交叉和互作进行了讨论。 展开更多
关键词 小分子RNA 植物激素 植物发育
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植物转基因中同源共抑制的机制及其解决措施 被引量:4
19
作者 孔莹莹 蒋丽 +3 位作者 韩凝 朱睦元 王君晖 《生命科学》 CSCD 2012年第5期399-403,共5页
外源基因在不同的植物转基因株系间会呈现很大的表达差异,甚至出现同源共抑制现象,即转基因在其自身不表达的同时也造成与其同源的内源基因的沉默。转基因沉默和同源共抑制主要包括转录水平沉默(transcriptional gene silencing,TGS)和... 外源基因在不同的植物转基因株系间会呈现很大的表达差异,甚至出现同源共抑制现象,即转基因在其自身不表达的同时也造成与其同源的内源基因的沉默。转基因沉默和同源共抑制主要包括转录水平沉默(transcriptional gene silencing,TGS)和转录后水平沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)。高度转录的外源基因所产生的紊乱RNA触发了RNA干涉的机器,是造成转基因沉默和同源共抑制的主要原因。目前,介绍同源共抑制机理的综述很多,但是介绍其克服方法的综述却很少。为了减少转基因株系差异,得到稳定表达的转基因株系,研究者提出了一系列消除转基因沉默和同源共抑制的措施,包括筛选单拷贝株系、利用PTGS突变体材料、利用病毒的RNA干涉抑制因子、利用植物的紊乱RNA清除蛋白以及构建新型的转基因载体等。对上述方法进行综述,并比较其优劣。 展开更多
关键词 同源共抑制 转录水平基因沉默 转录后水平基因沉默 RNA干涉抑制
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大麦籽粒生育酚和生育三烯酚的合成与分布特性 被引量:3
20
作者 张玉 陈建澍 +5 位作者 曾章慧 柴玉琼 柏彬 韩凝 朱睦元 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期573-577,共5页
大麦生育酚(tocopherols, T)和生育三烯酚(tocotrienols, T3)是重要的抗氧化功效成分,对人体健康具有潜在的应用价值。本研究分析了大麦籽粒发育过程中生育酚和生育三烯酚及其异构体成分的含量和分布特性。结果表明:在大麦籽粒发... 大麦生育酚(tocopherols, T)和生育三烯酚(tocotrienols, T3)是重要的抗氧化功效成分,对人体健康具有潜在的应用价值。本研究分析了大麦籽粒发育过程中生育酚和生育三烯酚及其异构体成分的含量和分布特性。结果表明:在大麦籽粒发育过程中,籽粒总生育酚和总生育三烯酚含量随籽粒发育进程不断升高,抽穗后发育第30~35天合成积累速率最快,占总含量50%左右;颖壳中的生育酚和生育三烯酚及其异构体含量显著低于去颖壳后籽粒中的含量;在籽粒发育不同阶段异构体α-T和α-T3含量较高且变化大,其他6种异构体(β-T、γ-T、δ-T、β-T3、γ-T3和δ-T3)含量低且基本恒定。说明大麦籽粒生育酚和生育三烯酚及其异构体成分的积累速率和分布存在显著差异。 展开更多
关键词 大麦 功效成分 生育酚 生育三烯酚 异构体
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